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miR-205-5p靶向调控RUNX2表达影响瘢痕疙瘩生长的研究
1
作者 李关芳 卫艳萍 《中国美容医学》 2026年第3期54-57,共4页
目的:探讨miR-205-5p靶向调控RUNX2表达影响瘢痕疙瘩生长的机制。方法:选取2021年9月-2022年10月来源于焦作市人民医院就诊患者的瘢痕疙瘩组织和正常皮肤组织标本,各20个,定量逆转录PCR(RT-PCR)检测组织标本中miR-205-5p、RUNX2(Runt-re... 目的:探讨miR-205-5p靶向调控RUNX2表达影响瘢痕疙瘩生长的机制。方法:选取2021年9月-2022年10月来源于焦作市人民医院就诊患者的瘢痕疙瘩组织和正常皮肤组织标本,各20个,定量逆转录PCR(RT-PCR)检测组织标本中miR-205-5p、RUNX2(Runt-related Transcription Factor 2)的mRNA表达水平。瘢痕疙瘩成纤维细胞(Keloid Fibroblasts,KFBs)中转染miR-205-5p mimic或si-RUNX2分别调控miR-205-5p或RUNX2的表达水平,RT-PCR和CCK-8实验检测miR-205-5p、RUNX2 mRNA表达和细胞增殖水平。双荧光素酶报告实验检测miR-205-5p与RUNX2的结合情况。拯救实验检测过表达RUNX2对上调miR-205-5p的KFBs增殖效应的影响。结果:与正常皮肤组织相比,瘢痕疙瘩组织中miR-205-5p表达显著降低(P<0.01),而RUNX2表达显著升高(P<0.01)。过表达miR-205-5p和敲低RUNX2在24、48、72 h时细胞OD值显著高于对照组(P<0.01)。RUNX2 3'UTR野生型和miR-205-5p共转染细胞组荧光素酶活性显著低于对照组(P<0.01)。miR-205-5p+OE-RUNX2组在24、48、72 h时细胞OD值显著高于miR-205-5p组(P<0.01)。结论:在瘢痕疙瘩组织中miR-205-5p表达下调,而RUNX2上调;过表达miR-205-5p可通过靶向负调控RUNX2水平影响瘢痕疙瘩的生长,miR-205-5p可能是治疗瘢痕疙瘩的潜在靶点。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 miR-205-5p RUNX2 细胞增殖 靶位
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振动压力下高强度ZL205A铝合金壳体铸件的制备与性能分析
2
作者 王蕴弢 《铸造》 2026年第2期195-201,共7页
为提升ZL205A铝合金壳体铸件的致密度和力学性能,确定最佳工艺参数以降低其缩松缺陷,提出振动压力下高强度ZL205A铝合金壳体铸件的制备并分析性能。采用熔炼-浇注-振动压力凝固一体化工艺制备铸件,设计包含压力梯度和振动频率梯度的共2... 为提升ZL205A铝合金壳体铸件的致密度和力学性能,确定最佳工艺参数以降低其缩松缺陷,提出振动压力下高强度ZL205A铝合金壳体铸件的制备并分析性能。采用熔炼-浇注-振动压力凝固一体化工艺制备铸件,设计包含压力梯度和振动频率梯度的共28组参数组合。分别对每组铸件密度、硬度、力学性能以及缩松面积分数展开测试。结果显示,在同一振动频率下,铸件密度、布氏硬度、抗拉强度、屈服强度及断面收缩率均随压力增加而上升,缩松面积分数则持续降低;同一压力下,在0~50 Hz区间性能逐步提升,50 Hz后随频率继续升高性能有所回落。当压力为0.6 MPa、振动频率为50 Hz时,铸件密度和硬度保持最佳状态,抗拉强度可达490 MPa以上,屈服强度也保持较高水平,同时缩松面积分数保持在4.5%以下。 展开更多
关键词 振动压力 ZL205A铝合金 壳体铸件 力学性能 断面收缩率 缩松面积分数
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ZL205A合金热处理参数优化及其组织性能演变 被引量：2
3
作者 郭廷彪 钱丹晨 +3 位作者 王炳 王楠 丁万武 金玉花 《材料科学与工程学报》 北大核心 2025年第1期23-30,共8页
ZL205A合金是航空航天领域重要的铸造铝合金,热处理制度是提升ZL205A合金综合力学性能的关键。本研究通过530℃×2 h+540℃×13 h固溶+165℃×6 h时效,研究了固溶及时效参数对ZL205A合金组织和力学性能的影响。采用激光共... ZL205A合金是航空航天领域重要的铸造铝合金,热处理制度是提升ZL205A合金综合力学性能的关键。本研究通过530℃×2 h+540℃×13 h固溶+165℃×6 h时效,研究了固溶及时效参数对ZL205A合金组织和力学性能的影响。采用激光共聚焦显微镜(CLSM)、X射线衍射仪(XRD)、扫描电子显微镜(SEM)、场发射透射电子显微镜(FTEM)等表征技术检测了不同热处理制度下材料的微观组织并测试其力学性能;分析了材料组织机制与力学性能的关联效应。研究结果表明,530℃×2 h+540℃×13 h为较好的双级固溶制度。固溶处理后,铸态合金中的网状共晶组织溶解,合金的组织均匀性提高且微观组织得到改善。低温时效过程中θ′纳米级析出相在晶界上不连续分布,温度升高会促使θ′相发生粗化且数量增加;稳定的θ′相可有效阻碍位错运动,提升合金的力学性能。 展开更多
关键词 ZL205A合金 微观组织 力学性能 固溶 纳米析出相
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LINC00894调节miR-205-5p/GPNMB轴对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响 被引量：1
4
作者 李超 王世卉 +2 位作者 林洁 王凡珂 张蕊 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第9期912-919,共8页
目的:探究长链非编码RNA00894(LINC00894)调节微小RNA-205-5p(miR-205-5p)/糖蛋白非转移性黑色素瘤蛋白B(GPNMB)轴对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:收集2022年11月至2023年9月在河北医科大学第一医院手术切除的25例胃癌组织及相... 目的:探究长链非编码RNA00894(LINC00894)调节微小RNA-205-5p(miR-205-5p)/糖蛋白非转移性黑色素瘤蛋白B(GPNMB)轴对胃癌细胞恶性生物学行为的影响。方法:收集2022年11月至2023年9月在河北医科大学第一医院手术切除的25例胃癌组织及相应癌旁组织,常规培养BGC823细胞,随机将其分为对照组、sh-NC组、sh-LINC00894组、sh-LINC00894+anti-NC组、sh-LINC00894+anti-miR-205-5p组,用转染试剂将相应质粒转染至各组细胞中。qPCR法检测各组BGC823细胞和癌组织中LINC00894、miR-205-5p和GPNMB mRNA表达,双萤光素酶报告基因实验和AGO2-RNA免疫共沉淀验证LINC00894与miR-205-5P和miR-205-5p与GPNMB间的靶向结合关系。克隆形成实验、EdU染色、划痕愈合实验和Transwell实验分别检测各组细胞的增殖、迁移和侵袭能力。WB法检测各组细胞中CDK1、MMP-2和MMP-9蛋白的表达。裸鼠移植瘤实验检测敲减LINC00894对移植瘤生长的影响,免疫组化法检测移植瘤组织中GPNMB蛋白的表达。结果:胃癌组织和细胞中LINC00894、GPNMB呈高表达,miR-205-5p呈低表达(均P<0.05)。LINC00894与miR-205-5p和miR-205-5p与GPNMB之间存在靶向结合负向调控关系(均P<0.05)。敲减LINC00894可促进BGC823细胞中miR-205-5p表达并抑制GPNMB表达(均P<0.05),敲减LINC00894可抑制BGC823细胞的增殖、迁移和侵袭能力,以及抑制CDK1、MMP-2和MMP-9蛋白的表达(均P<0.05),抑制miR-205-5p则可逆转此作用(均P<0.05)。敲减LINC00894可抑制BGC823细胞移植瘤的生长、促进miR-205-5p表达、抑制GPNMB蛋白表达(均P<0.05)。结论:在胃癌组织及细胞中LINC00894呈高表达,miR-205-5p呈低表达,敲减LINC00894表达可调控BGC823细胞中miR-205-5p/GPNMB通路蛋白表达并抑制其恶性生物学行为。 展开更多
关键词 胃癌 长链非编码RNA00894(LINC00894) 微小RNA-205-5p(miR-205-5p) 糖蛋白非转移性黑色素瘤蛋白B(GPNMB) 增殖 迁移 侵袭
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管线管GS EP PLR 205标准解读
5
作者 程向龙 韩福龙 +2 位作者 昝启飞 杨宝齐 左国锋 《钢管》 2025年第3期73-78,共6页
详细解读道达尔GS EP PLR 205标准的主要内容。分析认为,与API Spec 5L标准相比,GS EP PLR205标准对化学成分要求更严,提出了偏析控制的要求;对性能如纵横向拉伸、冲击、硬度、氢致开裂和硫化物应力腐蚀开裂和应变时效等要求做了规定;... 详细解读道达尔GS EP PLR 205标准的主要内容。分析认为,与API Spec 5L标准相比,GS EP PLR205标准对化学成分要求更严,提出了偏析控制的要求;对性能如纵横向拉伸、冲击、硬度、氢致开裂和硫化物应力腐蚀开裂和应变时效等要求做了规定;尺寸偏差特别是对管端内径、内径不圆度要求更严;对探伤检验的人员资质、校样要求和探伤方式进行了详细规定。解读GS EP PLR 205标准有利于制造商对标一线要求,寻找差距,改进工艺和控制能力,为进入国际高端市场做准备。 展开更多
关键词 管线管 标准 GS EP PLR 205
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冷铁组织演变对ZL205A合金铸件线性偏析的影响
6
作者 刘建辉 杨琴 +1 位作者 闻福林 郑登智 《铸造》 2025年第10期1344-1351,共8页
ZL205A合金密度小、塑性好且承受静载荷高,工程应用中常采用冷铁抑制其铸件中缩松、裂纹等缺陷的产生,但冷铁在重复浇注过程中组织的演变及其对铸件质量的影响少见报道。采用金相显微镜、扫描电镜、硬度计以及激光导热仪等设备,通过对... ZL205A合金密度小、塑性好且承受静载荷高,工程应用中常采用冷铁抑制其铸件中缩松、裂纹等缺陷的产生,但冷铁在重复浇注过程中组织的演变及其对铸件质量的影响少见报道。采用金相显微镜、扫描电镜、硬度计以及激光导热仪等设备,通过对比使用次数不同的45号钢冷铁微观组织及性能,发现45号钢经过升温缓冷后,内部组织主要由铁素体和珠光体组成,铁素体含量和晶粒尺寸经过多次热循环后均显著增大,导致基体内位错密度显著下降从而提升了冷铁的热扩散系数。热扩散系数增大导致冷铁的激冷作用增强、ZL205A合金铸件凝固时收缩加剧,冷铁缝隙对应铸件位置作为热节在增强的拉应力作用下产生热裂,金属液填充热裂区域产生富Cu区形成线性偏析。 展开更多
关键词 ZL205A合金 冷铁 热扩散系数 线性偏析
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miR-205-5p介导四君子汤对胃癌细胞迁移、侵袭及上皮间质转化的作用机制研究 被引量：1
7
作者 王纪鸾 赵琳琳 +4 位作者 李乡南 边月 马天驰 周晶 郭隽馥 《中药新药与临床药理》 北大核心 2025年第3期317-327,共11页
目的探讨四君子汤能否通过上调miR-205-5p表达进而抑制胃癌细胞的迁移力、侵袭力以及上皮间质转化(EMT)进程,并筛查可能参与上述过程的miR-205-5p下游靶基因。方法四君子汤含药血清制备:SD大鼠以四君子汤(6.9 g·kg^(-1))灌胃,每日1... 目的探讨四君子汤能否通过上调miR-205-5p表达进而抑制胃癌细胞的迁移力、侵袭力以及上皮间质转化(EMT)进程,并筛查可能参与上述过程的miR-205-5p下游靶基因。方法四君子汤含药血清制备:SD大鼠以四君子汤(6.9 g·kg^(-1))灌胃,每日1次,共7 d。(1)将胃癌细胞MGC-803、AGS作为研究对象,分组及干预:生理盐水组(10%空白血清),四君子汤组(10%四君子汤含药血清),四君子汤+inhibitor NC组(10%四君子汤含药血清+转染抑制剂阴性对照),四君子汤+miR-205-5p inhibitor组(10%四君子汤含药血清+转染miR-205-5p抑制剂),各组血清处理均为24 h。采用qPCR或Western Blot法检测各组细胞中miR-205-5p表达水平,Snail、MMP9、TIMP1 mRNA及蛋白表达水平;划痕实验检测细胞迁移能力;Transwell实验检测细胞侵袭能力。(2)以人胃癌MGC-803细胞为研究对象,分组及干预:阴性对照组(转染阴性对照小干扰RNA),miR-205-5p模拟物组(转染miR-205-5p模拟物)。通过转录组测序分析miR-205-5p模拟物组vs阴性对照组的差异表达基因;采用qPCR技术对miR-205-5p过表达后下调的3个基因(ENC1、FGF7、CSF1)的表达水平进行验证;对差异表达基因进行GO功能及KEGG通路富集分析。结果(1)与生理盐水组比较,四君子汤组MGC-803、AGS细胞的miR-205-5p表达水平均显著升高(P<0.01)。与四君子汤+inhibitor NC组比较,四君子汤+miR-205-5p inhibitor组MGC-803、AGS细胞的miR-205-5p表达均显著下调(P<0.01)。(2)与生理盐水组比较,四君子汤组MGC-803、AGS细胞的愈合率明显降低(P<0.05),穿过基质胶的细胞数目显著减少(P<0.01),细胞MMP9、Snail mRNA及蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01),TIMP1 mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01)。与四君子汤+inhibitor NC组比较,四君子汤+miR-205-5p inhibitor组MGC-803、AGS细胞的划痕愈合率均明显升高(P<0.05,P<0.01),穿过基质胶的细胞数目显著增多(P<0.01),细胞MMP9、Snail mRNA及蛋白表达显著上调(P<0.05,P<0.01),TIMP1 mRNA及蛋白表达显著下调(P<0.05,P<0.01)(3)与阴性对照组比较,miR-205-5p模拟物组MGC-803细胞中miR-205-5p表达显著上调(P<0.01)。转录组高通量测序结果:与阴性对照组比较,miR-205-5p模拟物组在过表达miR-205-5p的MGC-803细胞中共鉴定出401个发生显著变化的差异表达基因,其中195个基因表达上调,206个基因表达下调。与阴性对照组比较,miR-205-5p模拟物组MGC-803细胞在过表达miR-205-5p后,ENC1、FGF7、CSF1 mRNA表达均显著下调(P<0.01),与测序得到的差异基因表达结果一致。差异表达基因主要富集在细胞黏附和细胞迁移等生物学过程,以及癌症的转录失调、PI3K-Akt信号通路、Rap1信号通路等方面。结论miR-205-5p能够介导四君子汤对胃癌细胞迁移、侵袭和EMT进程的抑制作用,其机制可能与miR-205-5p抑制其下游FGF7、ENC1、CSF1等基因表达有关。 展开更多
关键词 胃癌 四君子汤含药血清 miR-205-5p MGC-803细胞 AGS细胞 迁移 侵袭 上皮间质转化 大鼠血清
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稀土La和脉冲磁场对ZL205A铝合金铸态组织和力学性能的影响 被引量：1
8
作者 郝天 王军 +3 位作者 刘永珍 邢淑清 陈重毅 麻永林 《稀有金属与硬质合金》 北大核心 2025年第3期70-76,共7页
基于铝合金在实际生产大规模铸件时会出现质量不稳定、晶粒粗化、力学性能较差等问题,为提高铝合金的适用性,通过OM、XRD、SEM-EDS、硬度计以及万能试验机研究了稀土La和脉冲磁场对ZL205A铝合金铸态组织和力学性能的影响。结果表明,添... 基于铝合金在实际生产大规模铸件时会出现质量不稳定、晶粒粗化、力学性能较差等问题,为提高铝合金的适用性,通过OM、XRD、SEM-EDS、硬度计以及万能试验机研究了稀土La和脉冲磁场对ZL205A铝合金铸态组织和力学性能的影响。结果表明,添加稀土La并施加脉冲磁场后,ZL205A铝合金中会生成新的稀土金属间化合物β-LaAlCu,且初生α-Al枝晶、θ(Al_(2)Cu)相骨骼状结构均得以细化,其分布也更加均匀。随着施加脉冲磁场的时间增加,合金的晶粒尺寸也更小。添加0.1%稀土La并施加脉冲磁场90 s时,ZL205A铝合金的屈服强度、抗拉强度、断后伸长率和硬度分别为138 MPa、214 MPa、9.5%和74 HV,比原始ZL205A铝合金分别提高了22.1%、26.6%、6.0%和13.8%。 展开更多
关键词 稀土La 脉冲磁场 ZL205A铝合金 晶粒细化 铸态组织 力学性能
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弧形薄壁件ZL205A铣削加工变形规律研究 被引量：2
9
作者 刘建翔 辛志杰 +3 位作者 鲁辉虎 沈兴全 李国栋 翟鹏远 《精密成形工程》 北大核心 2025年第2期11-18,共8页
目的针对弧形薄壁件加工变形的技术难题,以保证加工表面质量为出发点,确定合适的铣削参数,进而有效地控制变形。方法进行了以主轴转速、进给速度、铣削深度和铣削宽度为变量的四因素三水平正交铣削实验研究。运用综合平衡法,阐明了切削... 目的针对弧形薄壁件加工变形的技术难题,以保证加工表面质量为出发点,确定合适的铣削参数,进而有效地控制变形。方法进行了以主轴转速、进给速度、铣削深度和铣削宽度为变量的四因素三水平正交铣削实验研究。运用综合平衡法,阐明了切削参数对ZL205A板材加工变形、表面粗糙度和半径的影响规律,并通过极差分析法研究了铣削变量对工件变形和表面粗糙度影响的显著性。结果在进行铣削加工时,针对铝合金薄壁件的翘曲变形、半径和表面粗糙度3个测量指标进行实验研究,发现进给速度对3个测量指标的影响最显著,当进给速度为480 mm/min时,翘曲变形最小、半径变化最小,综合考虑3项测量指标后,认为480 mm/min的进给速度为理想进给速度;当主轴转速为1500 r/min时,在控制表面粗糙度和工件半径方面表现最佳,虽然主轴转速在对翘曲变形影响方面并非主导因素,但是综合考虑1500 r/min为最优的主轴转速;当铣削宽度为5 mm时,可以有效减少翘曲变形、局部变形,并优化表面粗糙度,是最佳的铣削宽度选择。相对于其他参数,铣削深度对变形和表面粗糙度的影响较小。从减少变形的目的出发,选择0.7 mm作为铣削深度,此时在变形控制方面达到最优效果。结论在主轴转速为1500 r/min、进给速度为480 mm/min、铣削深度为0.7 mm、铣削宽度为5 mm的铣削参数组合下,薄壁件的翘曲变形和表面粗糙度值最低。优化后的参数组合为薄壁件的铣削加工提供了一定的参考。 展开更多
关键词 ZL205A 弧形薄壁件 表面质量 加工变形 铣削参数
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脉冲磁场时效处理ZL205A铝合金的显微组织和力学性能 被引量：1
10
作者 张颖 麻永林 +1 位作者 刘永珍 邢淑清 《金属热处理》 北大核心 2025年第1期97-102,共6页
利用扫描电镜、X射线衍射仪、万能试验机研究了脉冲磁场时效处理对ZL205A铝合金显微组织和力学性能的影响。结果表明,脉冲磁场在ZL205A铝合金时效过程中,增加了空位形成能ΔS_(V),原子扩散更容易,使得时效后,基体中出现均匀细小的析出... 利用扫描电镜、X射线衍射仪、万能试验机研究了脉冲磁场时效处理对ZL205A铝合金显微组织和力学性能的影响。结果表明,脉冲磁场在ZL205A铝合金时效过程中,增加了空位形成能ΔS_(V),原子扩散更容易,使得时效后,基体中出现均匀细小的析出相。经脉冲磁场时效处理(195℃×4 h)后,抗拉强度和伸长率分别为408 MPa和11%,与某工厂常规时效工艺(155℃×9 h)相比,抗拉强度基本持平,伸长率提高了64%,时效时间缩短了55%。 展开更多
关键词 ZL205A铝合金 脉冲磁场 时效处理 扩散
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miR-205对结肠癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化的调控作用研究 被引量：1
11
作者 买尔旦·赛力木 金钟 +1 位作者 阿里旦·艾尔肯 柯于必 《局解手术学杂志》 2025年第8期663-668,共6页
目的探讨microRNA-205(miR-205)在结肠癌中的表达及其对结肠癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化(EMT)的调控作用。方法用qRT-PCR检测结肠癌组织、癌旁组织及结肠癌细胞HT-29中miR-205的表达水平。将HT-29细胞分为3组,转染miR-205模拟物的... 目的探讨microRNA-205(miR-205)在结肠癌中的表达及其对结肠癌细胞增殖、迁移和上皮间质转化(EMT)的调控作用。方法用qRT-PCR检测结肠癌组织、癌旁组织及结肠癌细胞HT-29中miR-205的表达水平。将HT-29细胞分为3组,转染miR-205模拟物的细胞为miR-205模拟物组,转染miR-205抑制物的细胞为miR-205抑制物组,仅用Lipo2000转染试剂处理的细胞作为Buffer组。采用CCK-8实验和EDU实验检测各组细胞的增殖活力;Transwell实验检测细胞的迁移能力;Western blot检测各组细胞EMT相关蛋白N-cadherin、Vimentin和E-cadherin的表达。结果与癌旁组织相比,结肠癌组织中miR-205的相对表达水平显著下调(P<0.05)。与Buffer组相比,miR-205模拟物组细胞中miR-205的相对表达水平上调,miR-205抑制物组细胞中miR-205的相对表达水平下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。过表达miR-205显著抑制结肠癌细胞的增殖活力及迁移能力(P<0.05),而抑制miR-205则促进结肠癌细胞的增殖活力及迁移能力(P<0.05)。与Buffer组相比,miR-205模拟物组细胞中N-cadherin、Vimentin下调,E-cadherin上调,而miR-205抑制物组细胞中N-cadherin、Vimentin上调,E-cadherin下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论miR-205在结肠癌组织中的表达显著降低,并通过下调结肠癌细胞的增殖、迁移和EMT来发挥其抑癌作用。 展开更多
关键词 miR-205 结肠癌 细胞增殖 细胞迁移 上皮间质转化
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保护地鲜食番茄新品种天潍205的选育 被引量：1
12
作者 李光聚 吕金浮 +2 位作者 刘钊 宋正峰 杨园园 《中国瓜菜》 北大核心 2025年第5期207-211,共5页
天潍205是以自交系GX5169为母本、自交系BGM6170为父本配制而成的早中熟杂交1代保护地鲜食番茄新品种。该品种无限生长,果实扁圆形,果实深粉色,色泽鲜艳,皮薄有韧性,果肉软绵无渣,汁多,酸甜适度,有香味,品质优,平均单果质量200g,可溶性... 天潍205是以自交系GX5169为母本、自交系BGM6170为父本配制而成的早中熟杂交1代保护地鲜食番茄新品种。该品种无限生长,果实扁圆形,果实深粉色,色泽鲜艳,皮薄有韧性,果肉软绵无渣,汁多,酸甜适度,有香味,品质优,平均单果质量200g,可溶性固形物含量(w,后同)7.4%,可溶性糖含量4.02%,总酸含量6.74g·kg^(-1),维生素C含量221.0 mg·kg^(-1),番茄红素含量65.9 mg·kg^(-1)。综合抗性强,对TYLCV、叶霉病、枯萎病、根结线虫病均具有较好的抗性,丰产稳产性好,平均667m^(2)总产量14003.8kg,耐低温弱光,适应性强,货架期长,耐贮运。适合山东及河南大部分地区早春、秋延迟和越冬保护地种植。2022年通过农业农村部非主要农作物品种登记。 展开更多
关键词 鲜食番茄 新品种 天潍205 杂交1代
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表达DEC-205结合肽重组乳杆菌的构建及其对树突状细胞成熟的影响
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作者 郭双霖 马孙婷 +13 位作者 谭飞 张磊 秦浩然 陈蓉 欧阳伟 徐彬 张纹纹 杨蕾蕾 袁厅 朱枰潞 冯志新 熊祺琰 郝飞 谢星 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第12期5923-5932,共10页
【目的】构建表达免疫原融合鸡DEC-205结合肽的重组神话猪联合乳杆菌(LigiLactobacillus saerimneri,L.sae),探究其对鸡外周血树突状细胞(PB-MoDC)的影响。【方法】构建含组成型启动子HCE、增强子T7 g10、信号肽ssUSP及细胞壁锚定蛋白LP... 【目的】构建表达免疫原融合鸡DEC-205结合肽的重组神话猪联合乳杆菌(LigiLactobacillus saerimneri,L.sae),探究其对鸡外周血树突状细胞(PB-MoDC)的影响。【方法】构建含组成型启动子HCE、增强子T7 g10、信号肽ssUSP及细胞壁锚定蛋白LPXTDG的乳酸菌表达质粒p612。插入Flag标签、鸡DEC-205短肽(DL(结合肽)/PS(对照肽))融合鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP 2基因序列,构建重组质粒p612-VP2-PS、p612-VP2-DL。重组质粒经双酶切鉴定后,电转入神话猪联合乳杆菌M11,构建重组乳杆菌p612-VP2-PS/M11、p612-VP2-DL/M11。利用Western blotting及免疫电镜鉴定蛋白表达和分布情况;通过荧光显微镜观察未成熟PB-MoDC细胞对重组乳杆菌的吞噬效果;重组菌作用PB-MoDC细胞4 h后,利用实时荧光定量PCR检测细胞表面标志物(MHC-Ⅱ、CD40、CD80、CD83、DEC-205)及炎性因子(IFN-γ、IL-1β、IL-12、IL-6、TNF-α、CXCLi1)的转录水平。【结果】试验成功获得了携带空载体p612、重组质粒p612-VP2-DL(表达VP2和结合肽)和p612-VP2-PS(表达VP2和对照肽)的神话猪联合乳杆菌M11。Western blotting结果显示,重组乳杆菌p612-VP2-PS/M11、p612-VP2-DL/M11菌体沉淀中均可检测到目的蛋白表达;免疫电镜观察显示,重组蛋白主要分布在胞质及细胞壁内壁;重组菌可被未成熟的PB-MoDC细胞吞噬。与p612-VP2-PS/M11组相比,p612-VP2-DL/M11组PB-MoDC细胞中的MHC-Ⅱ、CD 80、CD 40、CD 83、IL-1β、IL-12、IFN-γ、CXCLi 1基因转录水平显著或极显著上调(P<0.05;P<0.01);两组间PB-MoDC细胞中DEC-205、IL-6、TNF-α基因转录水平无显著差异(P>0.05)。【结论】本研究成功构建了表面表达免疫原融合鸡DEC-205结合肽的重组鸡肠道乳杆菌,其能有效刺激PB-MoDC细胞成熟。试验结果为研发畜禽疫苗的新型靶向递送策略提供了理论依据。 展开更多
关键词 DEC-205结合肽 神话猪联合乳杆菌 鸡外周血树突状细胞 表面标志物 炎性因子
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调脾安肠方调控miR-34a与miR-205表达对裸鼠结肠癌肝转移的抑制作用
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作者 王玉坤 孙适然 +4 位作者 邵文博 周琼 王佳聪 刘猛 程志强 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第9期4583-4588,共6页
目的:探讨中药复方调脾安肠方调控循环血和肝转移灶组织中miR-34a与miR-205表达对裸鼠结肠癌肝转移(CLM)的作用。方法:30只Balb-c裸鼠随机分为空白组、模型组、中药组,每组10只。采用脾脏原位注射HCT-116结肠癌细胞(细胞数约为1×10... 目的:探讨中药复方调脾安肠方调控循环血和肝转移灶组织中miR-34a与miR-205表达对裸鼠结肠癌肝转移(CLM)的作用。方法:30只Balb-c裸鼠随机分为空白组、模型组、中药组,每组10只。采用脾脏原位注射HCT-116结肠癌细胞(细胞数约为1×10^(7)/mL)法制备CLM模型。中药组在CLM造模完成2周后予调脾安肠方(2 g/mL,每日0.2 mL)灌胃2周。小动物活体成像观察裸鼠肝转移灶增殖情况;HE染色观察肝脏病理组织形态;RT-PCR检测循环血及肝转移灶中miR-34a及miR-205表达水平。结果:与模型组比较,中药组裸鼠肝转移灶总区域和高密度区域面积显著缩小(P<0.01);镜下病理转移灶面积减小或形成中心坏死区域,核分裂象减少。与空白组比较,模型组裸鼠循环血和肝转移灶中除循环血miR-205-3p外,其余miR-34a、miR-205表达水平降低(P<0.05,P<0.01);与模型组比较,中药组裸鼠miR-205-5p显著上调(P<0.05)。miR-34a与miR-205在CLM裸鼠循环血中表达水平呈显著正性相关(r^(2)=0.792,P=0.0078)。结论:中药调脾安肠方可能通过靶向调控上皮间质转化相关miRNA(miR-34a、miR-205)表达发挥抑制裸鼠结肠癌肝转移灶形成的作用。 展开更多
关键词 结肠癌肝转移 调脾安肠方 微小RNA MIR-34A miR-205
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非洲猪瘟病毒pK205R蛋白间接ELISA抗体检测方法的建立
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作者 王燕 邹艳丽 +11 位作者 何佳依 刘珊 苗雨润 任炜杰 王振忠 白昀 陈欢 钱莺娟 贾红 吴晓东 冯志新 郑龙三 《畜牧与兽医》 北大核心 2025年第2期105-111,共7页
旨在建立可以检测非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pK205R抗体的血清学检测方法。基于杆状病毒表达系统构建重组杆粒BacmidpK205R,以纯化的pK205R蛋白为包被抗原,优化各项反应条件,建立间接ELISA抗体检测方法,验证方法的特异性、灵敏性、... 旨在建立可以检测非洲猪瘟病毒(ASFV)非结构蛋白pK205R抗体的血清学检测方法。基于杆状病毒表达系统构建重组杆粒BacmidpK205R,以纯化的pK205R蛋白为包被抗原,优化各项反应条件,建立间接ELISA抗体检测方法,验证方法的特异性、灵敏性、重复性,并对临床血清样品进行检测。结果显示:pK205R蛋白可以与ASFV阳性血清发生发应,ELISA方法的抗原包被浓度为50 ng/孔,4℃过夜包被,封闭液为2%牛血清白蛋白(BSA),37℃封闭1 h,待检血清以5%脱脂乳进行1∶200稀释,37℃孵育0.5 h;二抗工作浓度为1∶5000,37℃孵育0.5 h,37℃下显色10 min;该方法的阳性临界值为0.186(≥0.186为阳性,<0.186为阴性),且具有良好的特异性、灵敏性、可重复性,与商品化试剂盒符合率为79.92%。本研究成功建立pK205R非洲猪瘟间接ELISA抗体检测方法,为进一步优化和研制非洲猪瘟抗体的快速检测试剂盒提供了参考。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 pK205R蛋白 间接ELISA 杆状病毒表达
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非洲猪瘟病毒pD205R对JAK-STAT信号通路激活的调控作用
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作者 邵汉城 林志钊 +7 位作者 范俊豪 马雨禾 訾蒙辉 潘筱雅 张雨杭 万博 张改平 何文瑞 《中国兽医科学》 北大核心 2025年第12期1563-1573,共11页
本研究旨在探索非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV) D205R蛋白(pD205R)在调控宿主抗干扰素β(IFN-β)诱导的JAK-STAT信号通路中的作用,为非洲猪瘟(African swine fever,ASF)新型疫苗和治疗方法的开发提供理论依据。首先通过... 本研究旨在探索非洲猪瘟病毒(African swine fever virus,ASFV) D205R蛋白(pD205R)在调控宿主抗干扰素β(IFN-β)诱导的JAK-STAT信号通路中的作用,为非洲猪瘟(African swine fever,ASF)新型疫苗和治疗方法的开发提供理论依据。首先通过序列比对和亚细胞定位观察,明确pD205R的基本生物学特性;随后构建pD205R稳定表达细胞系,利用报告基因试验、RT-qPCR和Western-blot等技术探究pD205R对IFN-β诱导的JAK-STAT信号通路激活的调控作用;通过免疫共沉淀试验和共聚焦显微镜试验寻找并鉴定pD205R与IFNAR1的相互作用;最后构建pD205R截短体,确定其发挥功能的关键结构域。结果显示,pD205R是一种高度保守的ASFV晚期表达蛋白,主要分布于细胞质。pD205R以剂量依赖的方式特异性抑制IFN-β诱导的STAT1/2启动子激活和抗病毒基因转录,但对TNF-α诱导的NF-κB信号通路无影响。p D205R靶向IFNAR1,并与其胞内域(460~560 aa)相互作用;同时pD205R的N端片段(1~76 aa)是抑制IFN-β诱导的JAK-STAT信号通路激活的关键结构域。结果表明,pD205R通过与IFNAR1的胞内域相互作用,拮抗IFN-β诱导的JAK-STAT信号通路激活,从而发挥免疫抑制作用。这些发现为阐明pD205R在ASFV免疫逃逸中的作用机制奠定了研究基础,并为非洲猪瘟疫苗和抗病毒制剂的开发提供了潜在靶点。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 JAK-STAT信号通路 IFN-Β pD205R蛋白 IFNAR1
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非洲猪瘟病毒D205R蛋白单克隆抗体的制备和抗原表位鉴定
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作者 林志钊 赵燕燕 +6 位作者 任豪杰 史赛燕 韩世充 何文瑞 万博 张雨杭 张改平 《河南农业科学》 北大核心 2025年第2期124-130,共7页
非洲猪瘟(ASF)是一种致命的传染病,迄今为止,还没有开发出有效的疫苗或药物用于预防或控制ASF。为提供诊断非洲猪瘟病毒(ASFV)的重要材料,利用大肠杆菌系统表达ASFV重组D205R蛋白,制备D205R蛋白的单克隆抗体(mAb),鉴定mAb识别的抗原表... 非洲猪瘟(ASF)是一种致命的传染病,迄今为止,还没有开发出有效的疫苗或药物用于预防或控制ASF。为提供诊断非洲猪瘟病毒(ASFV)的重要材料,利用大肠杆菌系统表达ASFV重组D205R蛋白,制备D205R蛋白的单克隆抗体(mAb),鉴定mAb识别的抗原表位。结果显示,成功构建pET32a-D205R表达质粒,并纯化大小约为44 ku的重组D205R蛋白。蛋白质免疫印迹(Western blot)检测结果表明,重组D205R蛋白与ASFV阳性血清发生特异性反应,有良好的免疫原性。利用杂交瘤细胞融合、筛选的方法,得到mAb 19A5。Western blot和间接免疫荧光试验(IFA)检测结果表明,mAb 19A5能特异性识别真核表达的重组D205R蛋白,并能检测到野生型D205R蛋白。用丙氨酸扫描法鉴定出167-SDPPVVWLGGRPGD-180是mAb 19A5的抗原表位,S167、W173、L174、G175、P178和D180是与mAb19A5结合的关键氨基酸。保守性和结构分析表明,抗原表位高度保守,且位于蛋白质表面,是线性表位。综上,成功制备mAb 19A5,并鉴定了mAb 19A5识别的抗原表位。 展开更多
关键词 非洲猪瘟病毒 D205R蛋白 单克隆抗体 抗原表位
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激光熔丝增材205B铝合金组织、气孔及力学性能研究
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作者 吴尚育 吴集思 +5 位作者 侯俊峰 王文华 叶钫 王艺达 夏春 杨成刚 《中国激光》 北大核心 2025年第24期166-175,共10页
选用直径为1.2 mm的205B铝合金焊丝为原材料,采用激光熔丝增材技术在1060纯铝板表面进行激光功率和送丝速率不同的激光增材制造。采用金相显微镜、扫描电子显微镜对205B铝合金激光增材件进行了显微组织、断口形貌观察,并对增材件的气孔... 选用直径为1.2 mm的205B铝合金焊丝为原材料,采用激光熔丝增材技术在1060纯铝板表面进行激光功率和送丝速率不同的激光增材制造。采用金相显微镜、扫描电子显微镜对205B铝合金激光增材件进行了显微组织、断口形貌观察,并对增材件的气孔率、显微硬度、拉伸性能进行分析。结果表明:205B铝合金增材件组织呈现出底部为柱状晶、中部为大尺寸等轴晶及细小等轴晶、顶部为细小等轴晶和等轴枝晶的演变规律;随着激光功率和送丝速率增加,增材件的气孔率整体呈现增加的趋势;当激光功率为3.0 kW、送丝速率为4.5 m/min时,205B铝合金增材件的气孔率最低(为1.46%),横向/纵向拉伸性能以及断口形貌表现出良好的各向同性。此外,205B铝合金增材件中的气孔分布具有一定的规律性,即:大部分气孔聚集于距基板0~2 mm的区域内,少部分气孔分布于距基板2~6 mm的区域内,极少有气孔出现在距基板>6 mm的区域内。 展开更多
关键词 激光熔丝增材制造 205B铝合金 显微组织 气孔率 各向同性
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电脉冲对ZL205A合金凝固行为及性能影响机理的研究
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作者 郭廷彪 辛婵 +3 位作者 丁唯桐 王欢 郑双双 张国庆 《热加工工艺》 北大核心 2025年第24期71-78,83,共9页
由于成分复杂,凝固间隔较大(凝固间隔约100 K),倾向糊状凝固,ZL205A合金易产生粗大的凝固组织,因此改善合金凝固组织及力学性能具有重要意义。通过在ZL205A合金的凝固过程中施加电脉冲,系统研究了电脉冲对合金凝固组织及性能的影响。结... 由于成分复杂,凝固间隔较大(凝固间隔约100 K),倾向糊状凝固,ZL205A合金易产生粗大的凝固组织,因此改善合金凝固组织及力学性能具有重要意义。通过在ZL205A合金的凝固过程中施加电脉冲,系统研究了电脉冲对合金凝固组织及性能的影响。结果表明:通过施加电脉冲,Ti、Mn等溶质元素均匀分布,合金凝固组织细化效果及长效性得到显著增强,晶粒尺寸最小可细化至95.6μm;优先析出相Al_(3)Ti含量减少甚至消失,析出相Al_(6)Mn与Al_(2)Cu形成新的组合物存在于晶界上;合金内缩孔等缺陷消失,抗拉强度、伸长率、硬度经过电脉冲处理后最高达到292.2 MPa、14.3%、102.8 HV。 展开更多
关键词 ZL205A合金 糊状凝固 电脉冲处理 微观组织 力学性能
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脓毒症患者血清miR-205、miR-23b、miR-25水平及其与预后的相关性 被引量：1
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作者 张敏 张雯予 +2 位作者 田晶晶 郭美琪 常海荣 《中国医科大学学报》 北大核心 2025年第8期714-719,共6页
目的分析不同程度脓毒症患者血清miR-205、miR-23b和miR-25水平变化及其与预后的相关性。方法回顾性分析2021年9月至2023年9月衡水市人民医院收治的86例脓毒症患者的临床资料,根据病情将患者分为轻度组(52例)和重度组(34例)。选取同期... 目的分析不同程度脓毒症患者血清miR-205、miR-23b和miR-25水平变化及其与预后的相关性。方法回顾性分析2021年9月至2023年9月衡水市人民医院收治的86例脓毒症患者的临床资料,根据病情将患者分为轻度组(52例)和重度组(34例)。选取同期健康体检者80例作为对照组。随访28 d,根据预后将患者分为生存组(68例)和死亡组(18例)。采用实时PCR检测患者血清miR-205、miR-23b、miR-25的表达水平,并分析其与预后的相关性。采用多因素Cox回归分析影响患者预后的危险因素。采用受试者操作特征(ROC)曲线分析血清miR-205、miR-23b、miR-25水平对评估脓毒症病情的诊断价值及其对预后的预测价值。结果与对照组相比,2组脓毒症患者血清miR-205、miR-23b、miR-25表达水平均明显降低(P<0.05)。生存组血清miR-205、miR-23b、miR-25表达水平明显高于死亡组(P<0.05),三者的表达水平与预后呈负相关。心率、APACHEⅡ评分是脓毒症患者预后的危险因素,血清miR-205、miR-23b、miR-25高表达是预后的保护因素(P<0.05)。血清miR-205、miR-23b、miR-25水平单独检测及联合检测评估病情的AUC分别为0.794、0.786、0.768和0.926,预测患者预后不良的AUC分别为0.776、0.762、0.797和0.918。结论脓毒症患者血清miR-205、miR-23b、miR-25表达水平降低,且与患者的预后密切相关,可能成为评估病情和预测预后的血清学生物标志物。 展开更多
关键词 脓毒症 miR-205 miR-23b miR-25 预后
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