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miR-200a-3p对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤的作用和机制
1
作者 任华 郝强 +2 位作者 郭丽 郑素华 卫雷 《医学分子生物学杂志》 2025年第4期339-345,共7页
目的探讨微小RNA-200a-3p(miR-200a-3p)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic ischemic brain damage,HIBD)的影响。方法将60只新生SD大鼠分为假手术组、HIBD组、miR-200a-3p antagomir组及NC-antagomir组,每组各15只,采用经典造模法构... 目的探讨微小RNA-200a-3p(miR-200a-3p)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxic ischemic brain damage,HIBD)的影响。方法将60只新生SD大鼠分为假手术组、HIBD组、miR-200a-3p antagomir组及NC-antagomir组,每组各15只,采用经典造模法构建新生大鼠HIBD模型。定量PCR检测海马组织中miR-200a-3p表达,评估神经功能、脑含水量,HE染色、TUNEL染色观察海马组织病理和细胞凋亡,ELISA法、蛋白质印迹法分别检测氧化应激、炎性因子、凋亡蛋白表达。结果与假手术组比较,HIBD组大鼠海马组织miR-200a-3p表达水平和神经功能评分、脑含水量、脑细胞凋亡率、MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α、Cleaved-Caspase-3水平升高(P<0.05),SOD、CAT、Bcl-2/Bax、BDNF、TrkB表达降低(P<0.05);与NC-antagomir组比较,miR-200a-3p antagomir组大鼠海马组织miR-200a-3p表达水平和神经功能评分、脑含水量、脑细胞凋亡率、MDA、IL-6、IL-1β、TNF-α、Caspase-3水平降低(P<0.05),SOD、CAT、Bcl-2/Bax、BDNF、TrkB表达升高(P<0.05)。结论抑制miR-200a-3p表达可以减少新生大鼠HIBD的神经损伤,可能与抑制凋亡、氧化应激和调节BDNF/TrkB通路表达有关。 展开更多
关键词 缺氧缺血性脑损伤 新生大鼠 微小RNA-200a-3p
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微小RNA200a/141-信号转导和转录激活因子4轴在口腔鳞状细胞癌进展中的作用研究
2
作者 姚曼曼 仇永乐 +4 位作者 刘铁军 路月亭 路华林 尚宏悦 董博 《国际口腔医学杂志》 北大核心 2025年第4期473-483,共11页
目的 基于公共数据库探索微小RNA (miRNA) 200a/141、信号转导和转录激活因子4 (STAT4)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及临床意义并构建预后模型,探讨其作为潜在治疗靶点的可行性。通过体外实验验证仿生明胶外泌体颗粒递送miRNA200a/14... 目的 基于公共数据库探索微小RNA (miRNA) 200a/141、信号转导和转录激活因子4 (STAT4)在口腔鳞状细胞癌(OSCC)中的表达及临床意义并构建预后模型,探讨其作为潜在治疗靶点的可行性。通过体外实验验证仿生明胶外泌体颗粒递送miRNA200a/141进而调节STAT4,评估在OSCC的细胞和分子水平上的核酸保护能力及抗癌作用。方法 通过癌症基因组图谱数据库下载OSCC相关miRNA及信使RNA表达测序数据,使用R语言进行数据分析,评估miRNA200a/141与STAT4的表达水平和临床相关性。制备负载miRNA200a/141的仿生明胶外泌体纳米颗粒(GNP-EXO-miRNA200a/141),进行Transwell迁移、细胞划痕和四甲基偶氮唑蓝实验,评估纳米颗粒对SCC25细胞的作用,并通过定量聚合酶链式反应和蛋白质免疫印迹法检测其对SCC25细胞中STAT4表达的影响。结果 miRNA200a/141在OSCC组织中的表达水平显著降低,而其靶标STAT4的表达水平升高,两者呈负相关。制备的GNP-EXO-miRNA200a/141纳米颗粒具有良好的粒径分布和稳定性。在细胞实验中,GNPEXO-miRNA200a/141显著抑制了SCC25细胞的增殖和迁移,并显著下调了STAT4的表达。结论 miRNA200a/141通过调节STAT4在OSCC中发挥重要作用,其有望成为OSCC的诊断、治疗和预后的潜在的分子标志物和治疗靶点。 展开更多
关键词 口腔鳞状细胞癌 微小RNA 200a/141 信号转导和转录激活因子4 外泌体 明胶
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microRNA-200a/b/c/-429家族在卵巢癌中的研究进展
3
作者 陈虹 匡洪影 +3 位作者 周颖 林文华 林超 陈琼华 《中华全科医学》 2025年第10期1757-1760,1794,共5页
本文系统性探讨miR-200家族在肿瘤中的作用机制,特别聚焦于miR-200a/b/c/-429家族的功能及其在肿瘤发生与发展中的重要作用。作为一组关键的调控分子,miR-200家族在肿瘤生物学领域中具有重要地位。这些家族成员通过调节肿瘤细胞的生物... 本文系统性探讨miR-200家族在肿瘤中的作用机制,特别聚焦于miR-200a/b/c/-429家族的功能及其在肿瘤发生与发展中的重要作用。作为一组关键的调控分子,miR-200家族在肿瘤生物学领域中具有重要地位。这些家族成员通过调节肿瘤细胞的生物学行为,有效影响肿瘤细胞的增殖、转移、侵袭以及化疗耐药等过程,进而参与肿瘤发生和进展等多个环节,特别是miR-200家族在上皮细胞向间质细胞转化中发挥重要作用,此外,该家族还通过调节细胞增殖与凋亡通路,进一步影响肿瘤细胞的生存与死亡,从而促进肿瘤细胞的扩散。miR-200家族不仅在肿瘤细胞侵袭和转移中发挥着重要作用,还可能作为卵巢癌的潜在诊断和预后判断标志物。未来研究应着重于阐明miR-200家族的具体分子机制和作用网络,探索其在其他肿瘤类型中的功能,并探讨如何将这些发现转化为临床应用,以期为肿瘤的早期诊断和靶向治疗提供新的思路和策略。深入研究miR-200家族在肿瘤中的作用机制,有助于理解肿瘤生物学特性,并促进创新治疗策略的发展,从而提高患者生存率,具有重要的科学与临床价值。 展开更多
关键词 卵巢癌 miR-200a/b/c/-429家族 生物标志物 化疗耐药 治疗策略
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微小RNA-200a&c在改善广州管圆线虫诱导的Balb/c小鼠脱髓鞘性视神经炎中的作用
4
作者 马芷璇 牛珍 +3 位作者 杨亮 吴小杰 吴忠道 冯英 《中山大学学报(医学科学版)》 北大核心 2025年第4期619-627,共9页
【目的】探讨过表达miRNA-200a&c后对广州管圆线虫诱导的Balb/c小鼠脱髓鞘性视神经炎的保护作用。【方法】选取2~3周SPF级Balb/c小鼠分成4组,即正常组,广州管圆线虫感染7 d、14 d、21 d组。分别记录不同时间分组小鼠的体质量及其生... 【目的】探讨过表达miRNA-200a&c后对广州管圆线虫诱导的Balb/c小鼠脱髓鞘性视神经炎的保护作用。【方法】选取2~3周SPF级Balb/c小鼠分成4组,即正常组,广州管圆线虫感染7 d、14 d、21 d组。分别记录不同时间分组小鼠的体质量及其生存情况,并对小鼠进行神经行为学评分及视觉评分。视觉诱发电位(VEP)检测不同时间分组小鼠视觉损伤情况。透射电镜观察不同时间分组小鼠眼球组织结构变化。广州管圆线虫感染第7天时通过立体定位注射向小鼠侧脑室注射miRNA-200a&c外源性类似物,同时将小鼠分为正常组,广州管圆线虫感染21 d组、广州管圆线虫感染+阴性对照(NC)组、广州管圆线虫感染+过表达miRNA-200a&c类似物组。VEP检测以上分组小鼠视觉损伤情况。透射电镜观察以上分组小鼠眼球组织结构变化。免疫荧光检测以上分组小鼠眼部视网膜神经节细胞(RGCs)及视神经少突胶质细胞(OLs)的数量变化。【结果】广州管圆线虫感染第21天,部分Balb/c小鼠眼睑完全闭合(32.52±4.67)%或出现眼球萎缩(15.79±3.23)%等现象,同时出现小鼠体质量下降(21 dpi:P<0.05)和神志不清等表现,感染21 d组小鼠神经行为学评分明显降低,转棒实验时长缩短68%(21 dpi:P<0.01),部分小鼠出现偏瘫而无法正常行走,甚至部分出现行动迟缓、共济失调、定向障碍;另外有部分小鼠出现刺激感觉反应迟钝,单侧视力缺失,视动反应阈值下降83%,视觉功能明显下降(21 dpi:P<0.05)。VEP结果显示广州管圆线虫感染21 d时Balb/c小鼠潜伏期与正常组相比轻度延长(21 dpi:P<0.05),且多为单侧眼部发病。过表达miRNA-200a&c后,与感染21 d组相比,VEP检测结果显示,P1波潜伏期明显缩短(P<0.05);透射电镜结显示视网膜神经节细胞胞质肿胀情况较感染21 d组对比有所减轻,视神经髓鞘结构较感染21 d组对比相对紧密,厚度也较均匀(P<0.05);免疫荧光结果显示RGCs和OLs数量较感染21 d组相比细胞数量明显升高且细胞排列紊乱的现象也有所改善(P<0.05)。【结论】广州管圆线虫感染Balb/c小鼠后引起脱髓鞘性视神经炎,过表达miRNA-200a&c可减轻脱髓鞘性视神经炎造成的损伤,改善小鼠眼部损伤。 展开更多
关键词 miRNA-200a miRNA-200c 脱髓鞘性视神经炎 视网膜神经节细胞 少突胶质细胞
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miR-200a抑制初级纤毛的发生并促进X线辐射诱导的大鼠心脏成纤维细胞凋亡
5
作者 马丽 马小妮 +1 位作者 傅松波 马承旭 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第10期1920-1925,共6页
目的:探讨微小RNA-200a(miR-200a)对X线辐射的心脏成纤维细胞初级纤毛发生和凋亡的影响。方法:分离Wistar大鼠乳鼠心脏,胰酶消化心脏组织,差速贴壁法分离心脏成纤维细胞。1 Gy剂量的X线照射建立纤维化细胞模型,分别转染miR-200a-3p mimi... 目的:探讨微小RNA-200a(miR-200a)对X线辐射的心脏成纤维细胞初级纤毛发生和凋亡的影响。方法:分离Wistar大鼠乳鼠心脏,胰酶消化心脏组织,差速贴壁法分离心脏成纤维细胞。1 Gy剂量的X线照射建立纤维化细胞模型,分别转染miR-200a-3p mimic和si-IFT88。免疫荧光染色检测初级纤毛;ELISA法检测培养液中转化生长因子β1(TGF-β1)的含量;双萤光素酶报告基因实验检测miR-200a-3p与IFT88的靶向调节关系;CCK-8法检测心脏成纤维细胞的活力;RT-qPCR检测心脏成纤维细胞中肿瘤坏死因子α(TNF-α)和caspase-3的mRNA表达;Western blot检测TNF-α、caspase-3、I型胶原α1链(Col1α1)和TGF-β1的蛋白表达。结果:与对照组相比,X线照射诱导心脏成纤维细胞中miR-200a-3p表达显著下调,初级纤毛的发生率和长度增加,细胞活力增加,凋亡率降低,Col1α1和TGF-β1的表达增加。干扰初级纤毛关键基因IFT88后,与X线组相比,心脏成纤维细胞凋亡率显著升高。过表达miR-200a-3p后,与X线组相比,心脏成纤维细胞初级纤毛的发生率降低,凋亡率显著升高,Col1α和TGF-β1的表达减少。结论:X线诱导大鼠心脏成纤维细胞miR-200a-3p下调,驱动初级纤毛的发生,导致细胞凋亡率降低。 展开更多
关键词 微小RNA-200a-3p 心脏成纤维细胞 X线 细胞凋亡 初极纤毛
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miR-182-3p miR-195-5p miR-200a-3p在妊娠期高血压疾病患者血清中的表达及对早产的预测价值
6
作者 甄斐斐 闫翠云 魏涛 《河北医学》 2025年第11期1849-1855,共7页
目的:探讨微小RNA(miR)-182-3p、miR-195-5p、miR-200a-3p在妊娠期高血压疾病(HDP)患者血清中的表达及对早产的预测价值。方法:选取2022年6月至2024年6月在本院妇产科诊治的391例HDP患者为研究组,根据疾病严重程度分为单纯妊娠期高血压... 目的:探讨微小RNA(miR)-182-3p、miR-195-5p、miR-200a-3p在妊娠期高血压疾病(HDP)患者血清中的表达及对早产的预测价值。方法:选取2022年6月至2024年6月在本院妇产科诊治的391例HDP患者为研究组,根据疾病严重程度分为单纯妊娠期高血压165例,轻度子痫前期134例,重度子痫前期92例;根据患者早产发生情况分为早产组107例(28周≤妊娠时间<37周),非早产组284例(37周≤妊娠时间<42周),同期选取316例正常足月生产的健康孕妇作为对照组。实时荧光定量PCR法检测血清miR-182-3p、miR-195-5p、miR-200a-3p水平;多因素Logistic回归分析影响HDP患者发生早产的因素;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清miR-182-3p、miR-195-5p、miR-200a-3p对HDP患者早产的预测价值。结果:与对照组相比,研究组血清miR-182-3p、miR-200a-3p水平升高,miR-195-5p水平降低(P<0.05);重度子痫前期HDP患者血清miR-182-3pp、miR-200a-3p水平显著高于轻度子痫前期和单纯妊娠期高血压(P<0.05),miR-195-5水平显著低于轻度子痫前期和单纯妊娠期高血压(P<0.05);早产组收缩压、舒张压、重度子痫前期占比、24h UPQ、Scr以及血清miR-182-3p、miR-200a-3p水平均显著高于非早产组(P<0.05),血清miR-195-5p水平显著低于非早产组(P<0.05);疾病严重程度、24h UPQ以及血清miR-182-3p、miR-195-5p、miR-200a-3p是影响HDP患者发生早产的因素(P<0.05);血清miR-182-3p、miR-195-5p、miR-200a-3p三者联合预测HDP患者早产的AUC为0.903,三者联合优于各自单独预测,P<0.05)。结论:HDP患者血清miR-182-3p、miR-200a-3p水平升高,miR-195-5p水平降低,三者联合对预测HDP患者合并早产具有一定的临床应用价值。 展开更多
关键词 微小RNA-182-3p 微小RNA-195-5p 微小RNA-200a-3p 妊娠期高血压 早产
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miR-200a-3p靶向SIRT1/NF-κB/NLRP3通路参与大鼠先天性肛门直肠畸形发生的作用机制
7
作者 常栋喆 耿宪杰 陈力 《东南大学学报(医学版)》 2025年第5期739-746,共8页
目的:探讨miR-200a-3p靶向沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB(NF-κB)/含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)通路参与大鼠先天性肛门直肠畸形(ARM)发生的作用机制。方法:6只Wistar孕鼠在妊娠10 d时灌胃125 mg·kg^(-1)1%乙烯硫脲,另外6只... 目的:探讨miR-200a-3p靶向沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子κB(NF-κB)/含NLR家族Pyrin域蛋白3(NLRP3)通路参与大鼠先天性肛门直肠畸形(ARM)发生的作用机制。方法:6只Wistar孕鼠在妊娠10 d时灌胃125 mg·kg^(-1)1%乙烯硫脲,另外6只Wistar孕鼠接受等体积的生理盐水作为对照。采用妊娠14~16 d剖宫产术,共获得乙烯硫脲诱导的ARM胎鼠72例(ARM组),生理盐水处理的正常胎鼠84例(对照组)。取ARM组、对照组胎鼠各72例用于指标检测。qRT-PCR检测妊娠14、15、16 d胎鼠后肠组织miR-200a-3p表达;荧光原位杂交(FISH)检测miR-200a-3p在妊娠14、15、16 d胎鼠后肠组织中的表达;验证miR-200a-3p与SIRT1靶向关系;Western blotting检测妊娠14、15、16 d胎鼠后肠组织SIRT1蛋白表达;免疫组化染色检测SIRT1蛋白在妊娠14、15、16 d胎鼠后肠组织中的表达。对IEC-6细胞进行过表达miR-200a-3p、沉默SIRT1或同时上调miR-200a-3p和SIRT1表达处理,qRT-PCR检测细胞miR-200a-3p表达;Western blotting检测细胞SIRT1、p-NF-κB p65、NLRP3蛋白;CCK-8检测细胞增殖;ELISA检测细胞上清中白细胞介素(IL)-18、IL-1β水平。结果:与对照组相比,ARM组妊娠14、15、16 d胎鼠后肠组织中miR-200a-3p表达升高(P<0.05);对照组胎鼠后肠组织中的尿道、肠道处有较强的miR-200a-3p荧光信号,而ARM组胎鼠后肠组织中的尿道、肠道、直肠尿道瘘、尿道直肠隔、泄殖腔膜处均有较强的miR-200a-3p荧光信号;miR-200a-3p靶向调控SIRT1;与对照组相比,ARM组妊娠14、15、16 d胎鼠后肠组织中SIRT1蛋白表达降低(P<0.05);在对照组胎鼠后肠组织中的直肠、尿道、直肠尿道瘘、尿道直肠隔、泄殖腔膜处有大量SIRT1阳性细胞,而ARM组胎鼠后肠组织中的直肠、尿道有少量SIRT1阳性细胞。过表达miR-200a-3p或沉默SIRT1均可抑制IEC-6细胞增殖,促进炎症,而过表达SIRT1可减弱上调miR-200a-3p对IEC-6细胞增殖的抑制以及对炎症的促进作用。结论:miR-200a-3p和SIRT1可能通过影响NF-κB/NLRP3通路参与ARM的发生。 展开更多
关键词 先天性肛门直肠畸形 miR-200a-3p 沉默信息调节因子1 增殖 炎症 Wistar孕鼠
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RM200A2吸烟机抽吸参数对烟气一氧化碳检测结果影响分析
8
作者 廖成全 向羽 +1 位作者 刘洪波 孙福艳 《实验室检测》 2025年第10期183-185,共3页
目的探究RM200A2吸烟机抽吸参数对烟气中一氧化碳检测结果的影响。方法选用典型卷烟样品,设定不同流量(17.5~35 mL/s)、频率(1~3口/min)及抽吸时间(1.0~3.0 s)进行对比试验。结果流量与频率对CO含量影响显著,最大差异达32.4%;抽吸时间在... 目的探究RM200A2吸烟机抽吸参数对烟气中一氧化碳检测结果的影响。方法选用典型卷烟样品,设定不同流量(17.5~35 mL/s)、频率(1~3口/min)及抽吸时间(1.0~3.0 s)进行对比试验。结果流量与频率对CO含量影响显著,最大差异达32.4%;抽吸时间在1.0~3.0 s范围内变化对检测结果影响小于6%。结果表明,流量与频率对一氧化碳检测值影响显著,最大差异分别为0.23%和0.68%;抽吸时间变化带来的差异不超过0.36%。结论实验总结了各参数对检测值的影响规律,为规范检测流程和提升一氧化碳测定准确性提供参考。 展开更多
关键词 RM200a2吸烟机 抽吸参数 烟气检测 一氧化碳 试验分析
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血清微小RNA-200a和N末端B型脑钠肽前体对妊娠期高血压疾病孕妇及围生儿预后的预测价值
9
作者 施珍珍 张红 +1 位作者 王霓 薛惠 《中国妇幼保健》 2025年第7期1301-1304,共4页
目的 探讨血清微小RNA(miR)-200a和N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)对妊娠期高血压疾病(HDCP)孕妇及围生儿预后的预测价值。方法 选择2021年11月—2023年11月浙江大学医学院附属第二医院临平院区收治的HDCP孕妇90例作为研究对象,依据不... 目的 探讨血清微小RNA(miR)-200a和N末端B型脑钠肽前体(NT-proBNP)对妊娠期高血压疾病(HDCP)孕妇及围生儿预后的预测价值。方法 选择2021年11月—2023年11月浙江大学医学院附属第二医院临平院区收治的HDCP孕妇90例作为研究对象,依据不同病情将HDCP患者分为妊娠期高血压组27例、子痫前期组46例及重度子痫组17例,依据围生儿预后情况分为预后良好组72例和预后不良组18例。另选择同期在该院健康体检的孕妇73例作为对照组。采用实时荧光定量PCR法(qRT-PCR)测定miR-200a表达,采用酶联免疫吸附法测定NT-proBNP水平;比较两组患者血清miR-200a表达和NT-proBNP水平变化,比较不同病情患者血清miR-200a表达和NT-proBNP水平变化,比较不同围生儿预后患者血清miR-200a表达和NT-proBNP水平变化;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析miR-200a和NT-proBNP对HDCP的预测价值,采用ROC曲线分析miR-200a和NT-proBNP对围生儿预后的预测价值。结果 HDCP组血清miR-200a相对表达量为(2.35±0.41)、NT-proBNP水平为(378.96±54.37)pg/ml,均高于对照组的(1.01±0.02)和(73.24±15.23)pg/ml,差异均有统计学意义(t=27.881、46.559,均P<0.05)。重度子痫组血清miR-200a相对表达量为(2.89±0.54)、NT-proBNP水平为(498.16±65.25)pg/ml,均高于妊娠期高血压组[(1.58±0.29)和(179.95±43.56)pg/ml],子痫前期组[(2.32±0.43)和(382.54±56.41)pg/ml],且子痫前期组高于妊娠期高血压组,差异均有统计学意义(F=45.382、161.835,均P<0.05)。预后不良组血清miR-200a相对表达量为(4.27±0.76)、NT-proBNP水平为(764.72±73.24)pg/ml,均高于预后良好组的(1.87±0.43)和(282.52±37.76)pg/ml,差异均有统计学意义(t=17.835、39.131,均P<0.05)。经ROC曲线分析,miR-200a和NT-proBNP对HDCP预测的灵敏度和特异度良好(均P<0.05);经ROC曲线分析,miR-200a和NT-proBNP对围生儿预后预测的灵敏度和特异度良好(均P<0.05)。结论 HDCP孕妇血清miR-200a表达和NT-proBNP水平升高,且与围生儿预后密切相关,血清miR-200a表达和NT-proBNP水平对HDCP孕妇和围生儿预后的预测价值良好。 展开更多
关键词 微小RNA-200a N末端B型脑钠肽前体 妊娠期高血压疾病 围生儿预后
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健脾消癌方对结肠癌TGF-β/lncRNA-ATB/miR-200a信号通路的影响 被引量：16
10
作者 罗吉 罗燕 +4 位作者 李勇敏 谭小宁 吕元 马荣丽 蒋益兰 《中国实验方剂学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期161-166,共6页
目的：观察健脾消癌方对结肠癌SW620细胞中转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）/长链非编码RNA-ATB（long noncoding RNA ATB,lncRNA-ATB）/微小RNA 200a（microRNA 200a,miR-200a）信号通路的影响,探讨健脾消癌... 目的：观察健脾消癌方对结肠癌SW620细胞中转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）/长链非编码RNA-ATB（long noncoding RNA ATB,lncRNA-ATB）/微小RNA 200a（microRNA 200a,miR-200a）信号通路的影响,探讨健脾消癌方抑制结直肠癌转移的可能作用机制。方法：10%,15%,20%健脾消癌方含药血清处理TGF-β诱导后SW620细胞,实时定量荧光聚合酶链式反应（Real-time polymerase chain reaction,Real-time PCR）检测lncRNA-ATB,miR-200a,E盒结合锌指蛋白（Zinc finger E-box-binding homeobox 1,ZEB1）mRNA的表达水平,蛋白质免疫印迹法（Western blot）检测ZEB1蛋白表达水平。结果：与空白组比较,TGF-β诱导组lncRNA-ATB,ZEB1 mRNA相对表达量升高,miR-200a mRNA相对表达量下降（P〈0.01）;与TGF-β诱导组比较,健脾消癌方低剂量组lncRNA-ATB,ZEB1 mRNA相对表达量降低,miR-200a相对表达量升高（P〈0.05）;与TGF-β诱导组比较,健脾消癌方中、高剂量组lncRNA-ATB,ZEB1 mRNA相对表达量显著降低,miR-200a相对表达量升高（P〈0.01）。与空白组比较,TGF-β诱导组的ZEB1蛋白相对表达量升高（P〈0.05）;与TGF-β诱导组比较,健脾消癌方低剂量组ZEB1蛋白相对表达量稍降低,差异无统计学意义,健脾消癌方中、高剂量组ZEB1蛋白相对表达量显著降低（P〈0.01）。结论：健脾消癌方可能通过抑制SW620细胞TGF-β诱导的lncRNA-ATB的表达,增加miR-200a的表达,降低ZEB1表达来抑制结肠癌的转移。 展开更多
关键词 健脾消癌方 SW620细胞 转化生长因子-Β 长链非编码RNA-ATB 微小RNA 200a
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片仔癀上调miR-200a抑制大肠癌耐药细胞转移的作用机制 被引量：8
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作者 沈阿灵 刘丽雅 +5 位作者 齐飞 陈宏伟 魏丽慧 林久茂 蔡巧燕 彭军 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期3682-3686,共5页
目的:研究片仔癀对大肠癌耐药细胞转移的影响和对mi R-200a及其靶基因E盒结合锌指蛋白ZEB1/2和下游转移相关基因表达的调控作用。方法:MTT法检测不同浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)对HCT-8/5-FU细胞和HCT-8细胞活力的影响;采用黏附实验和Transwel... 目的:研究片仔癀对大肠癌耐药细胞转移的影响和对mi R-200a及其靶基因E盒结合锌指蛋白ZEB1/2和下游转移相关基因表达的调控作用。方法:MTT法检测不同浓度5-氟尿嘧啶(5-FU)对HCT-8/5-FU细胞和HCT-8细胞活力的影响;采用黏附实验和Transwell法检测细胞黏附、迁移和侵袭能力的改变;通过Q-PCR检测片仔癀对HCT-8/5-FU细胞mi R-200a的表达;采用免疫荧光检测mi R-200a靶基因ZEB1和ZEB2及其下游E-cadherin、N-cadherin的表达。结果:MTT检测结果显示不同浓度的5-FU干预可显著降低HCT-8细胞活力,对HCT-8/5-FU细胞活力影响较小;片仔癀干预显著降低HCT-8/5-FU细胞黏附、迁移和侵袭能力;可显著上调mi R-200a的表达和E-cadherin的表达,下调ZEB1、ZEB2和N-cadherin的表达。结论:片仔癀干预显著抑制大肠癌耐药细胞的转移,且通过调控mi R-200a/ZEB1/2通路及其下游E-cadherin、N-cadhrin的表达可能是其抑制大肠癌转移的重要内在机制。 展开更多
关键词 大肠癌 片仔癀 转移 耐药 MI RNA MI R-200a
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miR-200a对奶山羊乳腺上皮细胞乳脂合成相关基因mRNA表达的影响 被引量：10
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作者 林先滋 罗军 +3 位作者 张犁苹 朱江江 石恒波 苟德明 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第7期1028-1036,共9页
旨在构建pAd-pri-miR-200a重组腺病毒,使其在奶山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,研究miR-200a对乳脂合成相关基因mRNA表达的影响。以西农萨能羊DNA为模板扩增pri-miR-200a。采用Ad-Easy系统构建重组腺病毒载体pAd-pri-miR-200a,并于... 旨在构建pAd-pri-miR-200a重组腺病毒,使其在奶山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,研究miR-200a对乳脂合成相关基因mRNA表达的影响。以西农萨能羊DNA为模板扩增pri-miR-200a。采用Ad-Easy系统构建重组腺病毒载体pAd-pri-miR-200a,并于HEK 293细胞株中进行病毒的包装、扩繁。TCI50法测定病毒滴度。qRT-PCR检测miR-200a及16个乳脂合成相关基因mRNA表达水平。序列分析结果显示,pri-miR-200a包括pre-miR-200a86bp和侧翼序列共297bp。酶切结果证实pAd-pri-miR-200a构建成功。Ad-pri-miR-200a滴度达8×109 PFU.mL-1。实时定量结果表明,Ad-pri-miR-200a(MOI为200)感染奶山羊乳腺上皮细胞72h,miR-200a的表达量较对照高出2.4倍。同时miR-200a的过表达引起10个基因mRNA表达量下调,6个基因mRNA表达量上调。其中脂肪酸从头合成相关基因FASN、脂滴生成相关基因TIP47及脂肪酸运输相关基因FABP4降幅较大,分别下降了0.47、0.89及0.65倍。而TAG生成相关基因DGAT1和脂解相关基因HSL较对照分别增加了0.52和1.49倍。本研究获得的重组腺病毒Ad-pri-miR-200a能在山羊乳腺上皮细胞中稳定表达miR-200a,同时miR-200a过表达影响乳脂合成相关基因mRNA表达水平。 展开更多
关键词 pri-miR-200a 重组腺病毒 乳腺上皮细胞 西农萨能羊
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miR-200a抑制YAP1基因表达对肺癌细胞增殖的影响 被引量：11
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作者 许璐 方玉松 +2 位作者 王丹云 王宗明 许鹏 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2017年第7期311-315,共5页
目的:研究微小RNA-200a(miR-200a)对肺癌细胞增殖的影响,并探讨其分子机制。方法:采用Real-time PCR检测15例非小细胞肺癌组织和对应癌旁组织、人肺癌细胞株(A549、NCI-H520、SK-MES-1)及人正常肺支气管上皮细胞株16HBE中miR-200a的表... 目的:研究微小RNA-200a(miR-200a)对肺癌细胞增殖的影响,并探讨其分子机制。方法:采用Real-time PCR检测15例非小细胞肺癌组织和对应癌旁组织、人肺癌细胞株(A549、NCI-H520、SK-MES-1)及人正常肺支气管上皮细胞株16HBE中miR-200a的表达水平。用CCK-8法检测miR-200a对A549肺癌细胞增殖活性的影响。通过生物信息学方法预测miR-200a可能的靶基因,双荧光素酶报告基因实验结合Real-time PCR和Western blot验证miR-200a对靶基因YAP1的调控作用。CCK-8法检测下调靶基因YAP1对A549肺癌细胞株增殖活性的影响。结果:miR-200a在非小细胞肺癌组织和肺癌细胞系中表达明显降低(P<0.01)。上调miR-200a表达后明显抑制A549肺癌细胞的增殖活力(P<0.01)。双荧光素酶报告基因显示miR-200a可以直接作用于靶基因YAP1的3'-UTR区域抑制荧光素酶活性(P<0.01),Real-time PCR和Western blot检测显示上调miR-200a的表达能够明显下调A549肺癌细胞YAP1 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01)。CCK-8法显示下调YAP1的表达能够明显抑制A549肺癌细胞的增殖活性(P<0.01)。结论:miR-200a通过靶向作用于YAP1基因来抑制肺癌细胞的增殖,从而在肺癌中发挥抑癌基因的功能。 展开更多
关键词 miR-200a 肺癌 YAP1 增殖
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miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路抑制胃癌细胞系生长侵袭能力的体外研究 被引量：9
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作者 苏娟 张庆瑜 +3 位作者 康春生 张安玲 王涛 张洁 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期65-69,共5页
目的:研究miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路对SGC7901胃癌细胞增殖活性及侵袭迁移能力的影响。方法:化学合成miR-200a mimics,采用脂质体Lipofectamine 2000转染胃腺癌细胞SGC7901,qRT-PCR检测转染效果,细胞免疫荧光、Western blo... 目的:研究miR-200a通过β-catenin/TCF-4信号通路对SGC7901胃癌细胞增殖活性及侵袭迁移能力的影响。方法:化学合成miR-200a mimics,采用脂质体Lipofectamine 2000转染胃腺癌细胞SGC7901,qRT-PCR检测转染效果,细胞免疫荧光、Western blot检测转染后目的蛋白的表达,TOP/FOP荧光素酶检测β-catenin/TCF-4活性,Transwell、划痕实验检测细胞迁移侵袭能力、MTT法检测细胞的增殖活性,流式细胞术检测细胞周期分布的改变。结果:脂质体介导的miR-200amimics转染SGC7901后,β-catenin/TCF-4蛋白的表达均降低,β-catenin的表达出现了细胞核向胞浆的转移。TOP荧光素酶活性下降2.27倍,而FOP荧光素酶活性基本不变。转染miR-200amimics组细胞的增殖活性、迁移、侵袭能力比空白组和阴性对照组明显下降,细胞周期出现G_0/G_1期阻滞。结论:提高miR-200a表达可以降低β-catenin/TCF-4信号通路的活性,抑制SGC7901的生长侵袭迁移能力。 展开更多
关键词 miRNA-200a β-catenin/TCF-4 胃癌 侵袭
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胃癌组织中miR-200a、miR-200b和miR-429的表达及临床意义 被引量：7
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作者 常靓 霍炳杰 +3 位作者 冯莉 单玉洁 韩晶 刘巍 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2013年第11期1098-1100,共3页
0 引言 胃癌是消化系统常见恶性肿瘤之一，2006年中国肿瘤发病和死亡资料分析显示，无论城市还是农村，胃癌的发病率和死亡率均居恶性肿瘤第二位，已成为我国今后恶性肿瘤防控的重点[1]。目前，胃癌的病因尚不明确，加之滞后的临床表现... 0 引言 胃癌是消化系统常见恶性肿瘤之一，2006年中国肿瘤发病和死亡资料分析显示，无论城市还是农村，胃癌的发病率和死亡率均居恶性肿瘤第二位，已成为我国今后恶性肿瘤防控的重点[1]。目前，胃癌的病因尚不明确，加之滞后的临床表现和诊断，以手术为主、放化疗为辅的综合治疗手段亦未能显著提高患者的5年生存率[2]。所以，探寻胃癌新特异性的分子标志物，为其早期诊断开辟新途径具有重要意义。 展开更多
关键词 miR-200a miR-200b miR-429 胃癌 临床病例特征
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血清人附睾蛋白4联合外泌体miRNA-200a/200b/200c用于糖链抗原125阴性卵巢上皮癌早期诊断的价值 被引量：6
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作者 姜祥兵 王李菲 +3 位作者 吴春林 李凤 王冬花 高雪梅 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2023年第19期2541-2545,共5页
目的研究血清人附睾蛋白4(human epididymal protein,HE4)联合外泌体中的微小RNA(miRNA)-200a/200b/200c用于糖链抗原125(sugar chain antigen,CA125)阴性卵巢上皮癌(epithelial ovarian carcinoma,EOC)早期诊断的价值。方法选取CA125阴... 目的研究血清人附睾蛋白4(human epididymal protein,HE4)联合外泌体中的微小RNA(miRNA)-200a/200b/200c用于糖链抗原125(sugar chain antigen,CA125)阴性卵巢上皮癌(epithelial ovarian carcinoma,EOC)早期诊断的价值。方法选取CA125阴性EOC患者120例作为研究对象,设为研究组;另选取同期收治的115例卵巢上皮良性肿瘤患者作为良性组,107例于武汉市第一医院体检的健康女性作为对照组。比较3组HE4、CA125、miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c水平,通过受试者工作特征(ROC)曲线分析各项血清指标鉴别CA125阴性EOC及卵巢上皮良性肿瘤的价值。结果研究组HE4及miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c水平显著高于良性组、对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。经ROC分析证实,血清HE4及miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c能够用于CA125阴性EOC的诊断,且HE4+miRNA-200a/b/c联合诊断相对于单独及两两诊断可获得更高的曲线下面积,均有P<0.05。经logistic逐步回归分析证实,HE4≥163.110 pmol/L、miRNA-200a≥2.7002^(-△△CT)、miRNA-200b≥1.6652^(-△△CT)、miRNA-200c≥1.3952^(-△△CT)为CA125阴性EOC发生的危险因素(P<0.05)。结论血清HE4及miRNA-200a、miRNA-200b、miRNA-200c可用于CA125阴性EOC的早期诊断中,且四项指标联合诊断具有更高的敏感度与特异性,值得临床医师关注。 展开更多
关键词 卵巢上皮癌 糖链抗原125 人附睾蛋白4 微小RNA miRNA-200a miRNA-200b miRNA-200c
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miRNA-200a靶向BRD4对非小细胞肺癌上皮间质转化的影响 被引量：7
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作者 田晓静 周伊兰 薛宏峰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第7期832-836,共5页
目的:探讨miRNA-200a靶向BRD4对非小细胞肺癌(NSCLC)上皮间质转化(EMT)的影响及其可能的作用途径。方法:收集2017年1月至2018年12月我院手术切除的NSCLC组织和癌旁组织标本65例,采用RT-PCR检测miRNA-200a在NSCLC组织和癌旁组织中的表达... 目的:探讨miRNA-200a靶向BRD4对非小细胞肺癌(NSCLC)上皮间质转化(EMT)的影响及其可能的作用途径。方法:收集2017年1月至2018年12月我院手术切除的NSCLC组织和癌旁组织标本65例,采用RT-PCR检测miRNA-200a在NSCLC组织和癌旁组织中的表达水平;构建miRNA-NC和miRNA-200a稳定细胞系,采用生物信息学和荧光素酶报告基因分析miRNA-200a和BRD4的靶向关系;pcDNA空载和pcDNA-BRD4过表达载体分别转染miRNA-NC和miRNA-200a细胞,采用Western blot检测miRNA-200a靶向BRD4对E-cadherin和Vimentin蛋白表达的影响;采用Transwell分析miRNA-200a靶向BRD4对NSCLC细胞侵袭能力的影响。结果:miRNA-200a在NSCLC组织中的相对表达水平显著低于癌旁组织,差异有统计学意义(P<0.05)。生物信息学分析表明BRD4可能是miRNA-200a的一个作用靶点;双荧光素酶报告基因结果显示,在过表达BRD4-WT的细胞中,miRNA-200a组细胞的相对荧光素酶活性显著低于miRNA-NC组细胞(P<0.05);而在过表达BRD4-MUT的细胞中,miRNA-200a组和miRNA-NC组细胞的相对荧光素酶活性无显著性差异(P>0.05)。Western blot结果显示,与miRNA-NC组比较,miRNA-200a组细胞BRD4和Vimentin的蛋白表达水平显著下降,E-cadherin的蛋白表达显著增加(P<0.05);与miRNA-200a+pcDNA组比较,miRNA-200a+BRD4组细胞中Vimentin的蛋白表达水平明显回升,E-cadherin的蛋白表达显著回落,差异有统计学意义(P<0.05)。Transwell实验显示,与miRNA-NC组比较,miRNA-200a组细胞的侵袭个数显著下降[(83.66±9.25)个比(32.73±6.02)个,P<0.05];与miRNA-200a+pcDNA组比较,miRNA-200a+BRD4组个细胞的侵袭个数明显回升,差异有统计学意义[(35.06±5.84)个比(62.02±7.28)个,P<0.05]。结论:miRNA-200a在NSCLC组织中高表达,过表达miRNA-200a可靶向下调BRD4的表达,从而抑制NSCLC中BRD4诱导的EMT和侵袭迁移。 展开更多
关键词 miRNA-200a BRD4 非小细胞肺癌 上皮间质转化 侵袭
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miR-200a靶向雌孕激素受体抑制子宫内膜癌细胞生长的作用研究 被引量：8
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作者 张广平 龚时鹏 +4 位作者 邓婉文 陈咏宁 廖亚男 孙丽丽 张雅迪 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2018年第12期886-890,895,共6页
目的:探讨miR-200a对子宫内膜癌细胞雌孕激素受体的靶向作用及生长的影响。方法:选取两种人子宫内膜癌细胞株KLE和Ishikawa,q PCR法检测miR-200a、ESR1和PGR含量,Western blot法检测ER和PR表达。分别在Ishikawa、KLE细胞株中敲除、过表... 目的:探讨miR-200a对子宫内膜癌细胞雌孕激素受体的靶向作用及生长的影响。方法:选取两种人子宫内膜癌细胞株KLE和Ishikawa,q PCR法检测miR-200a、ESR1和PGR含量,Western blot法检测ER和PR表达。分别在Ishikawa、KLE细胞株中敲除、过表达miR-200a,检测miR-200a对Ishikawa细胞中ESR1和PGR mRNA含量,以及ER和PR表达水平的影响。采用MTT、流式细胞仪、细胞划痕实验和Transwell实验检测miR-200a对细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响。结果:Ishikawa细胞中miR-200a、ESR1和PGR含量及ER和PR表达水平均高于KLE细胞(P<0.01)。敲除miR-200a后,可降低Ishikawa细胞中ESR1和PGR含量及ER和PR表达水平(P<0.01)。敲除miR-200a后,细胞的增殖、迁移和侵袭能力增强,细胞凋亡水平下降,过表达miR-200a则呈相反效应(P<0.01)。给予他莫昔芬和RU-486后,上述效应均被一定程度逆转(P<0.01)。结论:miR-200a可靶向作用于子宫内膜癌细胞雌孕激素受体,进而抑制细胞的增殖、迁移和侵袭,有效促进细胞的凋亡。 展开更多
关键词 miR-200a 子宫内膜癌 雌激素受体 孕激素受体
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转化生长因子β调控miR-200b-200a-429启动子活性 被引量：3
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作者 韩敬明 白久旭 +3 位作者 张晓玲 崔汉民 李旭 曹宁 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期616-620,共5页
目的探讨转化生长因子β(TGF-β)对miR-200b-200a-429簇表达的影响,对其调控机制作初步研究。方法使用RT-PCR方法检测TGF-β对人肾小管上皮细胞HK-2miR-200a、miR-200b和miR-429表达的影响。PCR方法扩增出miR-200b-200a-429簇启动子序列... 目的探讨转化生长因子β(TGF-β)对miR-200b-200a-429簇表达的影响,对其调控机制作初步研究。方法使用RT-PCR方法检测TGF-β对人肾小管上皮细胞HK-2miR-200a、miR-200b和miR-429表达的影响。PCR方法扩增出miR-200b-200a-429簇启动子序列,构建miR-200b-200a-429启动子荧光素酶报告基因表达载体,转染至HK-2细胞,检测其荧光素酶活性。观察TGF-β对miR-200b-200a-429转录的表达调控。结果实时定量PCR检测结果显示TGF-β作用细胞24h后下调了miR-200a、miR-200b和miR-429的表达。成功构建miR-200b-200a-429启动子荧光素酶表达载体,测序正确,然后利用双荧光素酶报告基因系统证实构建的报告基因载体启动子具有活性,发现TGF-β可以抑制miR-200b-200a-429启动子活性(P<0.05)。结论 TGF-β可以调控miR-200b-200a-429启动子的活性。 展开更多
关键词 miR-200b-200a-429 转化生长因子G 转录调控 启动子
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MicroRNA-200a/TFAM通路调控紫杉醇对乳腺癌细胞的化疗敏感性 被引量：4
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作者 姚佳 周恩相 +3 位作者 徐峰 易文君 张丹华 邹琼燕 《肿瘤药学》 CAS 2017年第5期528-533,544,共7页
目的探讨MicroRNA-200a/TFAM在MCF-7细胞对紫杉醇化疗敏感性中的作用。方法分别采用实时荧光定量PCR、蛋白印迹法检测不同浓度紫杉醇处理MCF-7细胞后mi R-200a、TFAM蛋白的表达差异;转染mi R-200a(或antimi R-200a)联合紫杉醇处理MCF-7... 目的探讨MicroRNA-200a/TFAM在MCF-7细胞对紫杉醇化疗敏感性中的作用。方法分别采用实时荧光定量PCR、蛋白印迹法检测不同浓度紫杉醇处理MCF-7细胞后mi R-200a、TFAM蛋白的表达差异;转染mi R-200a(或antimi R-200a)联合紫杉醇处理MCF-7细胞后,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法和5-溴脱氧尿嘧啶核苷(Brd U)观察细胞增殖活力的变化;转染pc DNA3.1-TFAM质粒联合紫杉醇处理MCF-7细胞后,MTT和Brd U法检测细胞增殖活力的变化。结果在MCF-7细胞中,mi R-200a的表达量随紫杉醇浓度增加逐渐升高,而TFAM的表达量随紫杉醇浓度升高逐渐下降。紫杉醇与mi R-200a共同作用于MCF-7细胞,可增强紫杉醇对细胞增殖的抑制作用;紫杉醇与anti-mi R-200a共同作用于MCF-7细胞时,可减弱紫杉醇对细胞增殖的抑制作用;而紫杉醇与TFAM共同孵育MCF-7细胞时,可减弱紫杉醇对细胞增殖的抑制作用。结论 mi R-200a及TFAM参与调控紫杉醇对MCF-7细胞的化疗敏感性。 展开更多
关键词 乳腺癌 microRNA-200a 线粒体转录因子A 紫杉醇
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