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STUDIES ON THE WITTIG REACTION(XIII): KINETICS OF THE PTC-WITTIG REACTIONS OF 2-BUTENYL METHYL-DIPHENYLPHOSPHONIUM SALT WITH SUBSTITUTED BEN2ALDEHYDES 被引量:1
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作者 Wen Fang HUANG Ming Wu DING +1 位作者 Wen Jing XIAO Tian Jie WU Institute of Organic Sgnthesis, Central China Normal University, Wuhan 430O70 Center of Analysis and Testing, Central China Normal University, Wuhan 430070 《Chinese Chemical Letters》 SCIE CAS CSCD 1992年第6期411-414,共4页
The kinetics of PTC-Wittig reaction between substituted aromatic aldehydes and 2-butenyl methyldiphenylphosphonium salt has been studied. The low reaction constant (ρ=0. 30) implies that these PTC-Wittig reactions ta... The kinetics of PTC-Wittig reaction between substituted aromatic aldehydes and 2-butenyl methyldiphenylphosphonium salt has been studied. The low reaction constant (ρ=0. 30) implies that these PTC-Wittig reactions take place through low polar intermediate. 展开更多
关键词 PTC XIII KINETICS OF THE PTC-WITTIG REACTIONS OF 2-butenyl METHYL-DIPHENYLPHOSPHONIUM SALT WITH SUBSTITUTED BEN2ALDEHYDES STUDIES ON THE WITTIG REACTION
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Synthesis and Crystal Structure of Tert-butyl 4-[(E)-4-(1,3-Dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)-1-butenyl] Benzoate
2
作者 张新歌 张慧杰 +1 位作者 王瑱 李朝兴 《Chinese Journal of Structural Chemistry》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第3期300-304,共5页
The title compound tert-butyl 4-[(E)-4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)- 1-butenyl] benzoate has been synthesized and characterized by X-ray crystallography. It crystallizes in monoclinic, space group C2/c... The title compound tert-butyl 4-[(E)-4-(1,3-dioxo-1,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)- 1-butenyl] benzoate has been synthesized and characterized by X-ray crystallography. It crystallizes in monoclinic, space group C2/c with a = 14.875(3), b = 8.9796(13), c = 34.736(6) A°, β = 95.981(4)°, V= 4614.4(14)A°^3, Z= 8, Dc = 1.213 g/cm^3, F(000) = 1792,μ(MoKα) = 0.084 mm^-1, R = 0.0602 and wR = 0.1445 for 4613 unique reflections with 2272 observed ones (I〉 2σ(I)). The results of crystal structure determination show that the title compound has a layer structure, and the two benzene rings in molecule are parallel to each other. 展开更多
关键词 tert-butyl 4-[(E)-4-(1 3-dioxo-1 3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)-1-butenyl]benzoate synthesis crystal structure
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铁皮石斛1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶基因的克隆与表达分析 被引量:9
3
作者 吴秋菊 武梅娟 +3 位作者 王翔 林毅 蔡永萍 樊洪泓 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期405-411,共7页
目的从铁皮石斛Dendrobium officinale中克隆1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶[1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphatereductase,HDR]基因,并分析其在铁皮石斛不同组织中的表达差异以及不同信号分子诱导下的表达模... 目的从铁皮石斛Dendrobium officinale中克隆1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶[1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl-4-diphosphatereductase,HDR]基因,并分析其在铁皮石斛不同组织中的表达差异以及不同信号分子诱导下的表达模式。方法采用RT-PCR和RACE等方法获得铁皮石斛HDR基因(Do HDR)全长,利用DNAMAN和MEGA6.0对其他物种的HDR基因编码的氨基酸序列进行同源性分析和进化关系分析,使用实时荧光定量分析HDR基因的表达模式。结果成功获得Do HDR基因,Gen Bank登录号为KC344827,全长1 658 bp,编码460个氨基酸,与其他科属植物的同源性达到80%以上。Do HDR基因在铁皮石斛叶片中表达量最高,从高到低依次是根、茎、原球茎;且受到脱落酸(abscisic acid,ABA)、水杨酸(salicylic acid,SA)信号分子的诱导。结论从铁皮石斛中获得Do HDR基因,为进一步阐明铁皮石斛萜类化合物合成途径中该基因的重要作用奠定了理论基础。 展开更多
关键词 铁皮石斛 1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶 基因克隆 表达分析 萜类
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6-(3-甲基-4-对甲苯磺酰基-2-丁烯基)-2,3,4,5-四甲氧基甲苯的合成 被引量:6
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作者 黎其万 王继良 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2003年第11期668-670,共3页
对甲酚(Ⅰ)在铁粉催化下与溴反应得到2,3,6 三溴 4 甲基苯酚(Ⅱ)(收率78%);Ⅱ在碘化亚铜催化下与甲醇钠反应后再与硫酸二甲酯反应得到2,3,4,5 四甲氧基甲苯(Ⅲ)(收率92 5%);Ⅲ与溴反应得到6 溴 2,3,4,5 四甲氧基甲苯(Ⅳ)(收率85%);Ⅳ与... 对甲酚(Ⅰ)在铁粉催化下与溴反应得到2,3,6 三溴 4 甲基苯酚(Ⅱ)(收率78%);Ⅱ在碘化亚铜催化下与甲醇钠反应后再与硫酸二甲酯反应得到2,3,4,5 四甲氧基甲苯(Ⅲ)(收率92 5%);Ⅲ与溴反应得到6 溴 2,3,4,5 四甲氧基甲苯(Ⅳ)(收率85%);Ⅳ与镁反应得到格氏试剂后,在碘化亚铜催化下与(E) 4 氯 2 甲基 1 对甲苯磺酰基 2 丁烯(Ⅴ)偶联反应合成了辅酶Q10中间体6 (3 甲基 4 对甲苯磺酰基 2 丁烯基) 2,3,4,5 四甲氧基甲苯(Ⅵ)(收率81%)。四步反应总收率49 6%,产物经1HNMR确证其双键为E 异构体。 展开更多
关键词 6-(3-甲基-4-对甲苯磺酰基-2-丁烯基)-2 3 4 5-四甲氧基甲苯 辅酶Q10中间体 2 3 4 5-四甲氧基甲苯
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HPLC法测定燕子掌中3-甲基-2-丁烯基异胍的含量 被引量:1
5
作者 魏志奇 王福东 +3 位作者 陈幸 汪汉卿 万尧德 董小萍 《药物分析杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期955-957,共3页
目的:建立 HPLC 法测定燕子掌全草中3-甲基-2-丁烯基异胍的含量。方法:色谱柱为 Hypersil NH_2柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液(40:60),检测波长为220 nm,流速1.0 mL·min^(-1),进样量5 μL,柱温27℃。结... 目的:建立 HPLC 法测定燕子掌全草中3-甲基-2-丁烯基异胍的含量。方法:色谱柱为 Hypersil NH_2柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),流动相为乙腈-0.2%磷酸水溶液(40:60),检测波长为220 nm,流速1.0 mL·min^(-1),进样量5 μL,柱温27℃。结果:3-甲基-2-丁烯基异胍进样量在0.042~0 380 μg范围内具有良好的线性关系(r=0.9998),回收率为98.9%~102.7%.RSD 为1.7%~2.2%(n=3)。结论:该法可靠性高,准确性和重复性好,适用于3-甲基2-丁烯基异胍的含量测定。 展开更多
关键词 高效液相色谱法 3-甲基-2-丁烯基异胍 燕子掌
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超声波促进3-(4-苯磺酰基-3-甲基-2-丁烯基)-4,5,6-三甲氧基-2-甲基苯基苄基醚的合成
6
作者 王威燕 杨运泉 +3 位作者 童刚生 周恩深 刘文英 匡志敏 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第12期1220-1224,共5页
以3,4,5-三甲氧基甲苯(Ⅰ)为原料,经过Vilsmeier-Haack反应合成了6-甲基-2,3,4-三甲氧基苯甲醛(Ⅱ),收率94.1,Ⅱ经过Dakin反应得到2,3,4-三甲氧基-6-甲基苯酚(Ⅲ),收率96.2,用溴化苄对Ⅲ进行酚羟基保护得到2,3,4-三甲氧基-6-甲基苯基苄... 以3,4,5-三甲氧基甲苯(Ⅰ)为原料,经过Vilsmeier-Haack反应合成了6-甲基-2,3,4-三甲氧基苯甲醛(Ⅱ),收率94.1,Ⅱ经过Dakin反应得到2,3,4-三甲氧基-6-甲基苯酚(Ⅲ),收率96.2,用溴化苄对Ⅲ进行酚羟基保护得到2,3,4-三甲氧基-6-甲基苯基苄基醚(Ⅳ),收率95.0,Ⅳ在有机碱作用下发生溴代反应,得到6-甲基-5-溴-2,3,4-三甲氧基苯基苄基醚(Ⅴ),收率92.2,Ⅴ在超声波作用下制成格氏试剂(Ⅵ),再与4-溴-2-甲基-1-苯磺酰基-2-丁烯发生格氏偶联反应得到辅酶Q10的关键中间体3-(4-苯磺酰基-3-甲基-2-丁烯基)-4,5,6-三甲氧基-2-甲基苯基苄基醚(Ⅶ),收率72.0,五步反应总收率为57.1,产物经FTIR和1H NMR确定结构。 展开更多
关键词 辅酶Q10 格氏反应 3-(4-苯磺酰基-3-甲基-2-丁烯基)-4 5 6-三甲氧基-2-甲基苯基苄基醚 超声波 医药 原料
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Z-2-碘-2-丁烯甲烷酸酯的新合成方法
7
作者 吴爱群 申利群 +1 位作者 刘旭辉 赵承强 《化学试剂》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期387-388,共2页
设计了一种合成标题化合物的新方法,以Z-2-碘-2-丁烯醛为起始原料,通过碘代、还原和酯化合成出了目标产物,总收率81.1%。产品的结构经1HNMR、高分辨质谱确证。
关键词 Z-2-丁烯醛 Z-2-碘-2-丁烯甲烷酸酯 合成
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乙酸-3-甲基-2-丁烯酯的合成工艺
8
作者 陈坤 范文玉 《农药》 CAS 北大核心 2005年第5期212-214,共3页
研究了n(C5H9Cl)/n(CH3COONa)、起始反应温度(FRT)及不同链长的季胺盐催化剂对酯化反应的影响,筛选出新的酯化催化剂:N,N-二(3-甲基-2-丁烯基)-N-甲基苄基氯化铵与N,N-二甲基甲酰胺的混合物。确定了最佳的物质的量比:n(C5H9Cl):n(CH3COO... 研究了n(C5H9Cl)/n(CH3COONa)、起始反应温度(FRT)及不同链长的季胺盐催化剂对酯化反应的影响,筛选出新的酯化催化剂:N,N-二(3-甲基-2-丁烯基)-N-甲基苄基氯化铵与N,N-二甲基甲酰胺的混合物。确定了最佳的物质的量比:n(C5H9Cl):n(CH3COONa)=1.0:1.4。收率依赖于FRT,当47℃≤FRT≤52℃时,平均收率98.1%;55℃≤FRT≤60℃时,收率97.4%;96℃≤FRT≤98℃时,收率92.8%。较低的初始反应温度有利于转位、能提高收率,较高的初始反应温度有利于提高产物纯度、但降低收率。 展开更多
关键词 1-氯-3-甲基-2-丁烯 乙酸异戊烯酯 酯化反应
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6-(4-苯磺酰基-3-甲基-2-丁烯)-基-2,3-二甲氧基-5-甲基氢醌双苄醚的合成
9
作者 陈田 杨运泉 +2 位作者 刘文英 王威燕 周国平 《化工进展》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第5期745-748,752,共5页
以异戊二烯为原料,经与苯磺酰氯加成、水解乙酰化、皂化3步反应,制得末端羟基取代的异戊二烯短侧链——(E)-1-苯磺酰基-2-甲基-4-羟基-2-丁烯(简称产物A),并用乙酸乙酯-乙醚混合溶剂对产物A进行提纯精制。以还原型辅酶Q0(氢醌)为母环,... 以异戊二烯为原料,经与苯磺酰氯加成、水解乙酰化、皂化3步反应,制得末端羟基取代的异戊二烯短侧链——(E)-1-苯磺酰基-2-甲基-4-羟基-2-丁烯(简称产物A),并用乙酸乙酯-乙醚混合溶剂对产物A进行提纯精制。以还原型辅酶Q0(氢醌)为母环,杂多酸为催化剂,与产物A进行偶联反应,然后采用溴化苄对母环羟基进行保护,用乙醚-异丙醚的混合溶剂进行提纯精制,选择性结晶得到了侧链延长法合成辅酶Q10的关键中间体辅酶Q1前体,即6-(4-苯磺酰基-3-甲基-2-丁烯)-基-2,3-二甲氧基-5-甲基氢醌双苄醚(简称产物B)。探讨了各主要影响因素对合成反应过程及结果的影响,目标产物B收率达75%(以产物A为基准)。产物A与目标产物B经测熔点、1H NMR分析和FTIR分析鉴定,确证其为(E)-异构体。 展开更多
关键词 6-(4-苯磺酰基-3-甲基-2-丁烯)-基-2 3-二甲氧基-5-甲基氢醌双苄醚 (E)-1-苯磺酰基-2-甲基-4-羟基-2-丁烯
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3,3-二甲基-4-戊烯酸-3'-甲基-2'-丁烯酯的回收与利用
10
作者 陈坤 《农药》 CAS 北大核心 2006年第7期463-465,共3页
针对目前工业上回收3,3-二甲基-4-戊烯酸-3'-甲基-2'-丁烯酯(MBDP)工艺复杂、异戊烯大量分解问题,研究了MBDP直接返回循环使用工艺,MBDP与甲醇、原乙酸三甲酯或与甲醇原乙酸三甲酯混合溶液进行酯交换反应的回收新工艺,比较了四... 针对目前工业上回收3,3-二甲基-4-戊烯酸-3'-甲基-2'-丁烯酯(MBDP)工艺复杂、异戊烯大量分解问题,研究了MBDP直接返回循环使用工艺,MBDP与甲醇、原乙酸三甲酯或与甲醇原乙酸三甲酯混合溶液进行酯交换反应的回收新工艺,比较了四异丙基钛酸酯、甲醇钠、氢氧化钾用作酯交换催化剂的效果,筛选出回收MBDP“一锅煮”最佳工艺:按照n(MBDP)∶n(原乙酸三甲酯)∶n(甲醇)∶n(甲醇钠)=1.0∶9.8∶9.2∶0.05物质的量比投料,74℃~78℃反应21h,MBDP转化为贲亭酸甲酯和异戊烯醇,单程转化率87.7%,用85%的磷酸中和甲醇钠,蒸出甲醇,直接用于合成贲亭酸甲酯。 展开更多
关键词 贲亭酸甲酯 3 3-二甲基-4-戊烯酸-3′-甲基-2′-丁烯酯 回收
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1(2)-(1,1-二烷基-3-丁烯基)-1,3-环戊二烯的合成和~1HNMR谱分析
11
作者 李吉海 焦纶基 +1 位作者 林玉斌 徐利斌 《山东大学学报(理学版)》 CAS CSCD 1991年第2期222-227,共6页
6,6-二烷基富烯同烯丙基格氏试剂发生环外双键加成,继而水解,得到一系列1(2)-(1,1-二烷基-3-丁烯基)-1,3-环戊二烯,并对合成的10种新化合物的结构进行了分析。
关键词 6 6-二烷基富烯 烯丙基氯化镁 1(2)-(1 1-二烷基-3-丁烯基)-1 3-环戊二烯
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Trans-3-甲基-4-溴-2-丁烯基苄基醚的合成研究
12
作者 黄建平 张招贵 陈芬儿 《江西化工》 2006年第2期10-11,共2页
目的:合成Trans-3—甲基—4—溴—2—丁烯基苄基醚。方法:以3-甲基-2-丁烯基-1-醇为起始原料,经三步反应制得目标化合物。结果与结论:各步中间体结构经核磁共振谱、质谱确证,总收率为61.6%,探索出一条新的合成路线。
关键词 3-甲基-2-丁烯基苄基醚反式4-溴-3-甲基-2-丁烯基苄基醚氧 化合成
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10-O-己二酸-[2′-甲氧基-4-′(3″-酮-1″-丁烯基)-苯酯]-双氢青蒿素酯的制备
13
作者 余康乐 马玉卓 《广东药学院学报》 CAS 2009年第3期275-277,共3页
目的合成10-O-己二酸基-[2′-甲氧基-4-′(3″-酮-1″-丁烯基)-苯酯]-双氢青蒿素酯。方法以香草醛为起始原料,在碱性条件下,与丙酮缩合生成脱氢姜酮,再与己二酸在N,N′-二环己基-碳二亚胺(DCC)、对二甲氨基吡啶(DMAP)作用下,进行酯化反... 目的合成10-O-己二酸基-[2′-甲氧基-4-′(3″-酮-1″-丁烯基)-苯酯]-双氢青蒿素酯。方法以香草醛为起始原料,在碱性条件下,与丙酮缩合生成脱氢姜酮,再与己二酸在N,N′-二环己基-碳二亚胺(DCC)、对二甲氨基吡啶(DMAP)作用下,进行酯化反应,再与双氢青蒿素通过DCC法缩合制得最终产物。结果与结论合成产物总产率为26.9%,熔点为57℃,其结构经1H-NMR、MS确证。 展开更多
关键词 双氢青蒿素 10-O-己二酸基-[2′-甲氧基-4-′(3″-酮-1″-丁烯基)-苯酯]-双氢青蒿素酯 去氢姜酮
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祁白芷根中新的天然产物 被引量:21
14
作者 赵爱红 杨秀伟 +3 位作者 杨鑫宝 刘建勋 王秋玲 王文全 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第16期2400-2407,共8页
目的:研究祁白芷根脂溶性化学成分。方法:应用溶剂法和色谱法分离纯化化合物,利用谱学技术鉴定化合物结构。结果:分离得到27个化合物,分别鉴定为异欧前胡素(1)、别异欧前胡素(2)、水合氧化前胡素(3)、比克白芷素(4)、别欧前胡素(5)、β... 目的:研究祁白芷根脂溶性化学成分。方法:应用溶剂法和色谱法分离纯化化合物,利用谱学技术鉴定化合物结构。结果:分离得到27个化合物,分别鉴定为异欧前胡素(1)、别异欧前胡素(2)、水合氧化前胡素(3)、比克白芷素(4)、别欧前胡素(5)、β-谷甾醇(6)、邻苯二甲酸二丁酯(7)、7-羟基-6-(3-甲基-2-丁烯氧基)-香豆素(8)、花椒毒酚(9)、5-羟基-8-甲氧基补骨脂素(10)、奥氏芹二醇(11)、伞形花内酯(12)、香柑内酯(13)、欧前胡素(14)、珊瑚菜内酯(15)、异茴芹素(16)、6-乙酰基-7-甲氧基-香豆素(17)、补骨脂素(18)、异东莨菪内酯(19)、滨蒿内酯(20)、花椒毒素(21)、当归醇A(22)、氧化前胡素乙醇醚(23)、去氢柳叶白姜花内酯(24)、尤劳帕替醇(25)、独活属醇(26)、栓翅芹烯醇(27)。结论:化合物8为新的天然产物;除化合物1,3,14外,其余化合物均为首次从祁白芷根中分离得到。 展开更多
关键词 祁白芷 化学成分 7-羟基-6-(3-甲基-2-丁烯氧基)-香豆素
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藏药薰倒牛的活性物质研究 被引量:19
15
作者 张晓峰 胡伯林 周炳南 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第3期211-214,共4页
从植物藏药薰倒牛(BiebersteiniaheterostemonMaxim.)中首次分离得7个化合物,经化学方法和光谱解析鉴定为:β-谷甾醇(Ⅰ)、胡萝卜甙(Ⅱ)、伞形花内酯(Ⅲ)、5,7,3′-三羟基-8,4′... 从植物藏药薰倒牛(BiebersteiniaheterostemonMaxim.)中首次分离得7个化合物,经化学方法和光谱解析鉴定为:β-谷甾醇(Ⅰ)、胡萝卜甙(Ⅱ)、伞形花内酯(Ⅲ)、5,7,3′-三羟基-8,4′,5′-三甲氧基黄酮(Ⅳ)、木犀草素-7-葡萄糖甙(Ⅴ)、槲皮素-7-葡萄糖甙(Ⅵ)和N-3-甲基-2-丁烯基脲(Ⅶ)。其中Ⅳ和Ⅶ是二个新的天然产物。药理实验表明化合物Ⅶ有镇痛、降压等活性。 展开更多
关键词 薰倒牛 黄酮甙 藏药 活性物质 药物鉴定
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生技霉素小组分的研究 Ⅲ.新螺旋霉素类抗生素生技霉素B_0的分离和结构鉴定 被引量:1
16
作者 姜威 孙承航 金文藻 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第7期385-387,415,共4页
生技霉素是一个多组分的基因工程杂合抗生素 ,含有主要成分 4” O 异戊酰螺旋霉素Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ(生技霉素A1、B1、E1)和其它 4” O 酰化螺旋霉素及少量杂质。采用逆流分配层析、碱性硅胶柱层析和中压柱层析等分离方法 ,从生技霉素混合物中... 生技霉素是一个多组分的基因工程杂合抗生素 ,含有主要成分 4” O 异戊酰螺旋霉素Ⅲ、Ⅱ、Ⅰ(生技霉素A1、B1、E1)和其它 4” O 酰化螺旋霉素及少量杂质。采用逆流分配层析、碱性硅胶柱层析和中压柱层析等分离方法 ,从生技霉素混合物中又分离得到一个新的小组分———生技霉素B0 。经UV、IR、FAB MS、1H NMR、13 C NMR和1H 1HCOSY等光谱分析表明 ,生技霉素B0 的结构为 4” O ( 3 甲基 2 丁烯酰 )螺旋霉素Ⅱ ,是一个新的 4” O 酰化螺旋霉素类抗生素。 展开更多
关键词 生技霉素 4”-O-(3-甲基-2-丁烯酰)螺旋霉素Ⅱ 结构鉴定 分离方法
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思茅松HDR基因全长cDNA克隆与序列分析 被引量:6
17
作者 王毅 周旭 +3 位作者 毕玮 杨宇明 李江 王娟 《广西植物》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期721-727,共7页
1-羟基-2-甲基-2-E-丁烯基-4-焦磷酸还原酶(HDR)是甲基-D-赤藓醇-4-磷酸(MEP)途径中的最后一个酶,在植物萜类生物合成中起主控作用。该研究根据思茅松(Pinus kesiya var.langbianensis)树皮转录组数据分析结果,首先获得了思茅松HDR基因... 1-羟基-2-甲基-2-E-丁烯基-4-焦磷酸还原酶(HDR)是甲基-D-赤藓醇-4-磷酸(MEP)途径中的最后一个酶,在植物萜类生物合成中起主控作用。该研究根据思茅松(Pinus kesiya var.langbianensis)树皮转录组数据分析结果,首先获得了思茅松HDR基因片段,然后根据所获得的基因片段设计特异引物,提取受伤后的思茅松树皮的RNA,并运用RT-PCR和RACE技术从思茅松树皮中克隆得到完整的HDR基因(Pk HDR)。生物信息学分析表明:克隆获得的Pk HDR1基因c DNA全长序列为1 876 bp,含有1个1 464 bp的开放阅读框(ORF),编码487个氨基酸。同源性分析结果表明:思茅松HDR蛋白与赤松(Pinus densiflora)HDR蛋白的相似性高达99%。亚细胞定位及结构域分析结果表明:思茅松Pk HDR氨基酸序列中包含转运肽序列(A1-A61)及植物HDR蛋白多个保守的功能位点(A143,A234,A288,A371)。系统进化分析结果表明:Pk HDR蛋白与赤松HDR蛋白的亲缘关系最为接近。半定量PCR检测结果表明:树皮的创伤促进思茅松HDR基因的表达。该研究成功克隆获得HDR基因,并确定其与松脂代谢密切相关,为阐明思茅松松脂生物合成机制和分子育种提供了参考。 展开更多
关键词 思茅松 CDNA 克隆 基因功能分析
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黄花蒿羟甲基丁烯基-4-磷酸还原酶基因克隆与功能研究 被引量:3
18
作者 曹芳 夏菁 +6 位作者 陈俞裴 张曼 向礼恩 曾俊岚 陈敏 兰小中 廖志华 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1791-1798,共8页
青蒿素是治疗疟疾的首选药物,定位于质体的MEP途径可为青蒿素在内的萜类物质的合成提供基本前体。羟甲基丁烯基-4-磷酸还原酶[hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl 4-diphosphate reductase,HDR]是MEP途径最后一个酶,催化HMBPP生成IPP和IPP... 青蒿素是治疗疟疾的首选药物,定位于质体的MEP途径可为青蒿素在内的萜类物质的合成提供基本前体。羟甲基丁烯基-4-磷酸还原酶[hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl 4-diphosphate reductase,HDR]是MEP途径最后一个酶,催化HMBPP生成IPP和IPP的同分异构体DMAPP。本文克隆了黄花蒿HDR基因(Aa HDR2)并进行了相关功能研究。通过对Aa HDR2基因(Gen Bank:KX058541)和已报道的Aa HDR1基因(Gen Bank:ADC84348.1)表达分析结果表明:Aa HDR1和Aa HDR2在黄花蒿腺体中表达量均远高于在根、茎、叶和花中的表达量,而且Aa HDR2在花中的表达量要明显高于叶中;Me JA和ABA能够大幅度上调Aa HDR1和Aa HDR2的表达,而GA3仅能大幅度上调Aa HDR2的表达。据Aa HDR1和Aa HDR2的表达分析表明,Aa HDR2对青蒿素在内的萜类物质的生物合成贡献更大,因此用Aa HDR2进行后续的实验研究。生物信息学分析表明,Aa HDR2属于HDR家族,进一步采用功能互补在E.coli突变体MG1655ara<>HDR中证明Aa HDR2编码蛋白质的确具有HDR的功能。Aa HDR2亚细胞定位结果显示:Aa HDR2融合GFP蛋白特异性定位于叶绿体中,符合MEP途径定位于质体的事实。采用转基因技术在拟南芥中过表达Aa HDR2能显著性提高叶绿素a、叶绿素b和类胡萝卜素含量。因此,本文所克隆的Aa HDR2是利用代谢工程技术提高萜类物质生物合成能力的一个候选基因。 展开更多
关键词 黄花蒿 羟甲基丁烯基-4-磷酸还原酶 功能互补 基因表达 亚细胞定位 过表达
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龙骨马尾杉PcHDR1基因克隆及序列分析 被引量:2
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作者 张志利 吕海舟 +4 位作者 郭溆 何柳 宋经元 孙超 罗红梅 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第22期4169-4174,共6页
该研究采用RT-PCR方法对龙骨马尾杉Phlegmarirus carinatus(Desv.)Ching 1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶[1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl 4-diphosphate reductase,HDR]基因Pc HDR1的编码区进行克隆并利用生物信息学方... 该研究采用RT-PCR方法对龙骨马尾杉Phlegmarirus carinatus(Desv.)Ching 1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶[1-hydroxy-2-methyl-2-(E)-butenyl 4-diphosphate reductase,HDR]基因Pc HDR1的编码区进行克隆并利用生物信息学方法进行序列分析。根据实验室已获得的龙骨马尾杉转录组数据,从中获得1条编码HDR的转录本,采用RT-PCR方法获得该基因的全长c DNA序列,所克隆的Pc HDR1基因编码区长为1 437 bp,编码478个氨基酸残基,Gen Bank登录号为JQ957845。Pc HDR1与银杏Ginkgo biloba的HDR序列同源性最高,达78%。生物信息学预测Pc HDR1蛋白没有跨膜区,具有Lyt B保守结构域,不含信号肽。该研究克隆并获得了龙骨马尾杉Pc HDR1基因的编码区序列,并对其编码的蛋白进行了序列分析及结构域预测,为进一步研究HDR的功能奠定基础。 展开更多
关键词 1-羟基-2-甲基-2-(E)-丁烯基-4-焦磷酸还原酶 龙骨马尾杉 萜类生物合成
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nNOS抑制剂亚胺基烯丁基-L-鸟氨酸对心肌缺血再灌注损伤的影响及机制 被引量:1
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作者 周露 李冰艳 +1 位作者 顾霞飞 唐广胜 《药物评价研究》 CAS 2023年第10期2159-2164,共6页
目的探讨nNOS选择性抑制剂亚胺基烯丁基-L-鸟氨酸(L-VNIO)对心肌缺血再灌注(I/R)损伤的影响及机制。方法构建SD大鼠离体心脏I/R模型和H9c2细胞缺氧/复氧(H/R)模型;nNOS抑制剂L-VNIO(10μmol·L^(−1))持续给药整个再灌注或复氧过程。... 目的探讨nNOS选择性抑制剂亚胺基烯丁基-L-鸟氨酸(L-VNIO)对心肌缺血再灌注(I/R)损伤的影响及机制。方法构建SD大鼠离体心脏I/R模型和H9c2细胞缺氧/复氧(H/R)模型;nNOS抑制剂L-VNIO(10μmol·L^(−1))持续给药整个再灌注或复氧过程。TTC染色测定心肌梗死面积;流式细胞术检测H9c2细胞凋亡率;Fluo-3/AM Ca^(2+)荧光探针通过流式细胞仪检测H9c2细胞内Ca^(2+)浓度;试剂盒法测定离体心脏灌流液乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)水平以及H9c2细胞MDA水平和超氧化物歧化酶(SOD)活性;离体心脏提取肌浆网,试剂盒法检测肌浆网Ca^(2+)-ATP酶(SERCA)活性,Western blotting检测肌浆网SERCA蛋白表达;Western blotting检测离体心脏中受磷蛋白(PLB)和兰尼碱受体2(RyR2)蛋白表达水平和磷酸化水平。结果与I/R或H/R模型组相比,L-VNIO显著降低细胞凋亡率,减少心肌梗死面积,降低LDH、MDA水平,提高SOD活性,差异均有统计学意义(P<0.05);此外,与I/R或H/R模型组相比,L-VNIO组明显降低细胞内Ca^(2+)超载,增高PLB磷酸化水平,降低RyR2磷酸化水平,增强SERCA活性(P<0.05)。结论nNOS抑制剂L-VNIO可以减轻I/R损伤,机制与调节Ca^(2+)转运相关蛋白而降低I/R引起的Ca^(2+)超载相关。 展开更多
关键词 心肌缺血再灌注损伤 nNOS抑制剂 亚胺基烯丁基-L-鸟氨酸 Ca^(2+)超载 肌浆网Ca^(2+)-ATP酶(SERCA) 受磷蛋白(PLB) 兰尼碱受体
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