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二术解毒汤对DEN联合2-AAF诱导的大鼠肝细胞癌的作用及其对β-catenin/YAP/c-Myc通路的影响
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作者 万成怡 石杰文 +2 位作者 陈建杰 张华 成扬 《中药新药与临床药理》 北大核心 2025年第10期1691-1699,共9页
目的探究二术解毒汤(苍术、白术、丹参、半枝莲、白花蛇舌草、鳖甲)对二乙基亚硝胺(DEN)联合二乙酰氨基芴(2-AAF)诱导大鼠肝细胞癌的作用及其对β-连环蛋白(β-catenin)/Yes相关蛋白(YAP)/细胞髓细胞瘤病病毒癌基因(c-Myc)信号通路的影... 目的探究二术解毒汤(苍术、白术、丹参、半枝莲、白花蛇舌草、鳖甲)对二乙基亚硝胺(DEN)联合二乙酰氨基芴(2-AAF)诱导大鼠肝细胞癌的作用及其对β-连环蛋白(β-catenin)/Yes相关蛋白(YAP)/细胞髓细胞瘤病病毒癌基因(c-Myc)信号通路的影响。方法采用DEN腹腔注射联合2-AAF灌胃的方式诱导大鼠肝细胞癌模型。将Wistar大鼠随机分为正常组8只,模型组、二术解毒汤低剂量组、二术解毒汤高剂量组、阳性药对照即5-氟尿嘧啶(5-FU)组各12只。实验开始,48只造模大鼠腹腔注射DEN 200 mg·kg^(-1)1次,14 d后灌胃2-AAF(0.02%W·W-1),每日1次,共14 d。造模完成后休息14 d,而后存活大鼠给药:二术解毒汤低剂量组(10只),灌胃0.525 g·kg^(-1)二术解毒汤颗粒;二术解毒汤高剂量组(11只),灌胃2.1 g·kg^(-1)二术解毒汤颗粒;5-FU组(9只),灌胃17.5 mg·kg^(-1)5-FU,每日1次,共77 d。采用HE染色观察大鼠肝脏病理改变。全自动血清分析生化仪检测大鼠血清谷氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、谷氨酰转移酶(GGT)、甲胎蛋白(AFP)。免疫组化检测大鼠肝组织AFP、核抗原Ki-67(Ki-67)表达。碱水解法测定羟脯氨酸(Hyp)含量,实时荧光定量PCR(qPCR)法检测大鼠肝组织β-catenin、YAP、c-Myc的mRNA表达,免疫蛋白印迹法(Western Blot)检测大鼠肝组织β-catenin、YAP、c-Myc蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组大鼠血清ALT、AST、GGT、AFP水平明显升高(P<0.01);HE染色可见明显的肝细胞癌病理表现,肝索结构消失,肝细胞空泡状变,癌细胞成团块状,出现坏死组织、炎性病变以及不规则增生的肝细胞;肝组织AFP、Ki-67阳性表达明显增强(P<0.01);Hyp含量明显升高(P<0.01);肝组织中β-catenin、YAP、c-Myc的mRNA及蛋白表达均明显升高(P<0.01)。与模型组比较,二术解毒汤低剂量组大鼠血清AST、GGT水平下降(P<0.05);肝脏HE染色可见弥漫性癌结节,坏死组织和核分裂;肝组织AFP、Ki-67均降低(P<0.05、P<0.01);Hyp含量均明显降低(P<0.01);肝组织的β-catenin、YAP的mRNA表达降低(P<0.05),蛋白表达降低(P<0.01)。与模型组比较,二术解毒汤高剂量组大鼠血清ALT水平降低(P<0.05),AST、GGT、AFP水平明显降低(P<0.01);肝脏HE染色可见癌结节,且较低剂量组减少;肝组织AFP、Ki-67阳性表达均明显下降(P<0.01);肝组织的β-catenin、YAP、c-Myc的mRNA和蛋白表达均明显降低(P<0.01)。结论二术解毒汤可降低DEN联合2-AAF诱导的肝细胞癌大鼠血清肝功能指标,减轻肝细胞坏死及炎症,改善肝癌大鼠的AFP并抑制其肿瘤细胞增殖,其机制可能与抑制β-catenin/YAP/c-Myc信号通路有关。 展开更多
关键词 二术解毒汤 肝细胞癌 二乙基亚硝胺 二乙酰氨基芴 β-catenin/YAP/Myc通路 大鼠
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地五养肝胶囊对2-AAF/PH大鼠模型肝癌前病变的抑制作用 被引量:9
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作者 赵宾宾 高翔 +1 位作者 叶之华 李瀚旻 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期1039-1042,共4页
目的观察地五养肝胶囊(DWYG)对2-AAF/PH大鼠模型肝癌前病变的抑制作用。方法建立2-AAF/PH大鼠肝癌前病变模型,采用SPF级Wistar大鼠384只,随机分为空白组、假手术组、模型组、DWYG组。取肝切除后第8、10、14、17、19、22天实验大鼠肝组... 目的观察地五养肝胶囊(DWYG)对2-AAF/PH大鼠模型肝癌前病变的抑制作用。方法建立2-AAF/PH大鼠肝癌前病变模型,采用SPF级Wistar大鼠384只,随机分为空白组、假手术组、模型组、DWYG组。取肝切除后第8、10、14、17、19、22天实验大鼠肝组织进行病理组织学观察,采用IPP6.0软件进行图像处理。计数各实验点肝脏表面直径>1mm的小结节、细胞核数目、细胞核面积总量、细胞核平均直径和细胞核IOD值。结果肝组织结节数:术后第8、22天,DWYG组低于模型组。细胞核数目:术后第10、14、17、22天,DWYG组高于空白组。细胞核面积总量:术后第17天,DWYG组高于空白组;术后第19天,DWYG组低于模型组。细胞核平均直径:术后第17天,DWYG组高于空白组,术后第19天,DWYG组低于模型组。以上实验数据经统计学处理,差异显著,P<0.01或P<0.05。结论地五养肝胶囊具有抑制2-AAF/PH模型大鼠肝癌前病变的作用。 展开更多
关键词 2-aaf/PH模型 地五养肝胶囊 肝癌前
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Diwu Yanggan Modulates the Wnt/β-catenin Pathway and Inhibits Liver Carcinogenesis Signaling in 2-AAF/PH Model Rats 被引量:4
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作者 Bin-bin ZHAO Zhi-hua YE +1 位作者 Xiang GAO Han-min LI 《Current Medical Science》 SCIE CAS 2019年第6期913-919,共7页
The activation of the Wnt/β-catenin signaling pathway in oval cells after liver injury is implicated in hepatocarcinogenesis.Diwu Yanggan capsule is a Chinese herbal medicine that has been used for treating liver dis... The activation of the Wnt/β-catenin signaling pathway in oval cells after liver injury is implicated in hepatocarcinogenesis.Diwu Yanggan capsule is a Chinese herbal medicine that has been used for treating liver disorder.The present study aimed to examine the mechanism by which Diwu Yanggan inhibits liver carcinogenesis,and the involvement of the Wnt/β-catenin signaling pathway.Diwu Yanggan capsule was administered to 2-acetaminofluorene/partial hepatectomy(2-AAF/PH)rats,a murine model of liver injury.The biomarkers of oval cells and key proteins in the Wnt/p-catenin signaling pathway were assessed on postoperative day 8,10,14,17,19 and 22.The results showed that treatment with Diwu Yanggan was associated with reduced expression of oval cell and stem cell biomarkers in the 2-AAF/PH animals.The expression pattern of key proteins in the Wnt/β-catenin pathway was altered in Diwu Yanggan-treated animals,indicating that the Diwu Yanggan treatment accelerated the activation of the Wnt/β-catenin pathway in the initial stage and contributed to its deactivation in the later stage.Histological findings indicated that hepatocyte proliferation was suppressed in Diwu Yanggan-treated animals,compared with untreated 2-AAF/PH animals.Taken together,Diwu Yanggan capsule may reduce the risk of hepatocarcinogenesis by modulating the Wnt/β-catenin signaling pathway. 展开更多
关键词 Diwu Yanggan 2-acetam inofluorene/partial hepatectomy(2-aaf/PH) liver regeneration HEPATOCARCINOGENESIS Wnt/β-catenin pathway
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叶下珠复方Ⅱ号对2-AAF诱导的大鼠肝癌癌前病变形成的影响
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作者 叶慧敏 陈力文 +1 位作者 徐玉洁 李常青 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2023年第11期2610-2614,共5页
目的观察叶下珠复方Ⅱ号干预治疗对2-AAF诱导的大鼠肝癌癌前病变形成的影响,并探讨其作用机制。方法将采用含0.05%的2-AAF饲料,喂养大鼠15周,建立大鼠肝癌癌前病变模型,并随机分为模型组、叶下珠复方Ⅱ号组(29.17g/kg)。另设正常组。观... 目的观察叶下珠复方Ⅱ号干预治疗对2-AAF诱导的大鼠肝癌癌前病变形成的影响,并探讨其作用机制。方法将采用含0.05%的2-AAF饲料,喂养大鼠15周,建立大鼠肝癌癌前病变模型,并随机分为模型组、叶下珠复方Ⅱ号组(29.17g/kg)。另设正常组。观察叶下珠复方Ⅱ号干预治疗对2-AAF诱导的大鼠肝癌癌前病变形成的影响,观察大鼠肝脏表面情况并检测血生化,采用HE染色法观察肝脏组织病理学情况,RT-qPCR法检测各组大鼠肝脏组织miR-122与IGF-1R mRNA表达,Western blot法检测各组大鼠肝脏组织IGF-1R蛋白的表达。结果叶下珠复方Ⅱ号的干预治疗,在一定程度上可改善2-AAF的毒性损伤,从而抑制肝癌癌前病变形成;与模型组雌性大鼠比较,模型组雄性大鼠血清AST、ALT、ALP和GGT水平显著升高(P<0.05)、ALB水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,叶下珠复方Ⅱ号治疗组肝细胞坏死变性程度较轻,且未发现明显的异型增生和结节形成;叶下珠复方Ⅱ号治疗组血清ALB水平显著升高,与模型组比较差异具有统计学意义(P<0.05);叶下珠复方Ⅱ号治疗组肝组织miR-122水平显著上调(P<0.05),IGF-1R mRNA与蛋白表达显著下调(P<0.05),与模型组比较,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论雄性SD大鼠更适合作为2-AAF诱导肝癌模型的造模动物,其肝癌癌前病变组织呈现明显的miR-122表达抑制和IGF-1R的表达增加。叶下珠复方Ⅱ号具有抑制2-AAF诱导的大鼠肝癌癌前病变的形成作用,作用机制与重建miR-122的表达和抑制IGF-1R表达有关。 展开更多
关键词 叶下珠复方Ⅱ号 2-aaf 肝癌 MIR-122 IGF-1R
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应用大鼠中期肝癌试验研究DEN和2-AFF的促癌作用 被引量:3
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作者 顾性初 钱蓓丽 +4 位作者 张慧娟 蒋建强 叶慧英 朱玉珍 王吉成 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期289-292,共4页
目的 应用大鼠中期肝癌试验研究二乙基亚硝胺(DEN)和 2 乙酰氨基芴 (2 AAF)的促癌作用。方法 ♂SD大鼠单次ip 2 0 0mg·kg-1DEN启动 ,2wk后每天在饮水中加入 10、33、10 0 ppmDEN ,或以 2 2、6 6、 2 2mg·kg-12 AAF灌... 目的 应用大鼠中期肝癌试验研究二乙基亚硝胺(DEN)和 2 乙酰氨基芴 (2 AAF)的促癌作用。方法 ♂SD大鼠单次ip 2 0 0mg·kg-1DEN启动 ,2wk后每天在饮水中加入 10、33、10 0 ppmDEN ,或以 2 2、6 6、 2 2mg·kg-12 AAF灌胃 ,连续 6wk。第 3周全部大鼠切除 2 /3肝 (partialhepatectomy) ,第 8周末处死 ,以免疫组化方法检测肝脏胎盘型谷胱甘肽S 转移酶 (GST P) ,以GST P阳性灶数量 /面积相对于仅DEN启动的对照组的增加 ,评价化合物的致癌性。结果 DEN和 2 AAF均引起肝GST P阳性灶数量和面积增加 ,并且显示剂量效应关系。结论 DEN和 2 AAF均具有促癌作用 ,大鼠中期肝癌试验是研究受试物促癌作用的简便、经济、有效的方法。 展开更多
关键词 肝癌 二乙基亚硝胺 2-乙酰所这基芴 促癌作用
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苦参素对实验性肝癌PCNA、cyclinD1、CDK4表达的影响 被引量:35
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作者 朱玉娟 周爱玲 +2 位作者 茅家慧 胡亚娥 朱燕 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2005年第1期52-56,共5页
目的 :研究苦参素对 2 乙酰氨基芴 (2 AAF)诱发大鼠实验性肝癌的防治作用 ,并探讨其抑制肝癌细胞增殖的机制。方法 :以 2 AAF喂饲SD大鼠制备肝癌模型。给予不同剂量的苦参素腹腔注射 ,观察肿瘤生成状况 ;免疫组化方法检测增殖细胞核... 目的 :研究苦参素对 2 乙酰氨基芴 (2 AAF)诱发大鼠实验性肝癌的防治作用 ,并探讨其抑制肝癌细胞增殖的机制。方法 :以 2 AAF喂饲SD大鼠制备肝癌模型。给予不同剂量的苦参素腹腔注射 ,观察肿瘤生成状况 ;免疫组化方法检测增殖细胞核抗原 (PCNA)蛋白的表达 ;RT PCR检测细胞周期素D1(cyclinD1)、细胞周期蛋白依赖激酶 4 (CDK4 )mR NA的表达。结果 :苦参素各防治组大鼠肝表面癌结节数明显低于模型组 ,预防组肝表面结节数最少。苦参素各预防治疗组PCNA和cyclinD1、CDK4的表达显著低于模型组 (P <0 .0 1)。结论 :苦参素有预防或延缓 2 AAF诱发大鼠肝癌发生的作用 ,其机制可能通过抑制cyclinD1、CDK4mRNA和PCNA蛋白的表达 ,从而诱导细胞周期阻滞 ,抑制肝癌细胞过度增殖。 展开更多
关键词 苦参素 2-aaf 肝癌 PCNA CYCLIN D1 CDK4
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骨髓间充质干细胞移植后在肝损伤大鼠体内的分布及其治疗作用 被引量:2
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作者 王帅 周一鸣 +3 位作者 范公忍 韩聚强 闻炜 胡大荣 《中国体视学与图像分析》 2014年第2期187-195,共9页
目的探讨同种异体骨髓间充质干细胞(MSCs)移植后在大鼠体内的分布及其对肝损伤的治疗作用。方法应用2-乙酰氨基芴(2-AAF)建立大鼠急性肝损伤模型,经门静脉注射进行同种异体骨髓MSCs移植后不同时间,通过4,6-二醚基-2-苯基吲哚盐酸化合物(... 目的探讨同种异体骨髓间充质干细胞(MSCs)移植后在大鼠体内的分布及其对肝损伤的治疗作用。方法应用2-乙酰氨基芴(2-AAF)建立大鼠急性肝损伤模型,经门静脉注射进行同种异体骨髓MSCs移植后不同时间,通过4,6-二醚基-2-苯基吲哚盐酸化合物(DAPI)标记、免疫组化Y染色体性别决定区(SRY)检测等方法观察移植细胞分布,并通过肝组织病理改变和丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和血清白蛋白(ALB)的变化观察MSC移植对肝损伤的治疗作用。结果 2-AAF可导致大鼠肝组织弥漫性损伤,移植后1 w和3 w肝组织病变减轻。移植后1 w受体鼠肝、肺及脾脏中均可见DAPI阳性细胞,移植后3 w仅在肝损伤大鼠肝内发现DAPI阳性细胞组成的细胞簇,形态与肝实质细胞相近;SRY蛋白检测结果与之一致。干细胞移植后1 w,移植组大鼠血清ALT较移植前显著降低,但仍高于对照组;血清AST较移植前显著降低,且与对照组无显著差异;血清ALB较移植前增高,但仍显著低于对照组。干细胞移植后3 w,ALT、AST以及ALB均与对照组无显著差异。结论 2-AAF可造成大鼠肝组织弥漫性损伤,肝损伤环境有助于经门静脉移植的骨髓MSCs的定植,MSCs移植对大鼠肝损伤具有治疗作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 移植 肝损伤 2-乙酰氨基芴 大鼠
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富半胱氨酸蛋白61在肝卵圆细胞增殖和分化中的作用及意义
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作者 丁伟 谭洪波 +4 位作者 李雪梅 姜昌丽 蔡第心 张悦 潘兴华 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第13期2109-2112,共4页
目的分析肝卵圆细胞(HOCs)在2-乙酰氨基芴+2/3肝切除(2-AAF/PHx)大鼠肝损伤模型中的增殖、分化情况,并且对富半胱氨酸蛋白61(Cyr61)在HOCs增殖、分化中的作用及机制进行初步研究。方法构建2-AAF/PHx大鼠肝损伤模型,采用免疫组织化学染色... 目的分析肝卵圆细胞(HOCs)在2-乙酰氨基芴+2/3肝切除(2-AAF/PHx)大鼠肝损伤模型中的增殖、分化情况,并且对富半胱氨酸蛋白61(Cyr61)在HOCs增殖、分化中的作用及机制进行初步研究。方法构建2-AAF/PHx大鼠肝损伤模型,采用免疫组织化学染色、Western blot检测等方法对大鼠肝脏组织中HOCs增殖、分化情况和Cyr61的表达水平进行检测分析;并且,采用Western blot检测等方法研究分析HOCs株WB-F344被诱导分化的过程中,Cyr61和β-连环蛋白(β-catenin)表达水平的变化。结果2-AAF/PHx大鼠模型肝脏组织中Cyr61的表达在HOCs活化增殖的过程中明显升高,HOCs分化为正常肝细胞或胆管细胞后又恢复正常水平;体外实验中,Cyr61和β-catenin蛋白表达水平在WB-F344细胞向肝细胞分化过程中明显增高。结论 Cyr61可以促进HOCs的增殖和分化,并且可能和β-catenin信号通路的激活密切相关。 展开更多
关键词 富半胱氨酸蛋白61 Β-连环蛋白 肝卵圆细胞 2-乙酰氨基芴
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小鼠原发性肝癌短期诱导模型的建立和评价 被引量:4
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作者 刘勇 赛岩 +4 位作者 刘冬梅 刘杨 文川 范礼斌 崔春萍 《军事医学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期175-179,192,共6页
目的用一个月的时间建立小鼠原发性肝癌模型。方法用二乙基亚硝胺(DEN)通过腹腔注射的方式对C57BL/6小鼠进行肝脏物理损伤和毒性诱导,再经过30%部分肝切除(PH)刺激肝再生,同时辅以二乙酰基芴(2-AAF)抑制肝实质细胞分裂,使DEN的毒性诱导... 目的用一个月的时间建立小鼠原发性肝癌模型。方法用二乙基亚硝胺(DEN)通过腹腔注射的方式对C57BL/6小鼠进行肝脏物理损伤和毒性诱导,再经过30%部分肝切除(PH)刺激肝再生,同时辅以二乙酰基芴(2-AAF)抑制肝实质细胞分裂,使DEN的毒性诱导作用直接作用于肝脏卵圆细胞(OVC),诱导突变。结果 模型组存活8只(8/12),将存活的各组小鼠通过放射免疫分析(R IA)、免疫组化(IHC)和免疫印迹(WB)方法鉴定短期诱导小鼠原发性肝癌建模是否成功,结果发现原发性肝癌的绝大多数指标明显改变。结论鉴定结果表明采用化学损伤结合部分肝切除方法,经过一个月时间成功诱导并建立了C57BL/6小鼠的原发性肝癌模型。 展开更多
关键词 肝细胞癌 二乙基亚硝胺 肝切除术 肝再生 突变 二乙酰基芴 卵圆细胞 免疫组织化学
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