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2',4'-二甲氧基查尔酮抑制c-Myc介导的葡萄糖摄取和糖酵解抗胃癌作用研究 被引量：1
1
作者 李昱彤 李文标 +7 位作者 张玉杰 潘巧岭 杜婷婷 吴辉 黄菲 费晓燕 吴晓俊 石海莲 《药学学报》 北大核心 2025年第5期1421-1431,共11页
2',4'-二甲氧基查尔酮(DMC)是卡瓦胡椒素B的结构修饰物,本课题以胃癌细胞MGC-803和HGC-27为研究对象,探讨DMC对胃癌细胞的体内外抗肿瘤作用及机制。采用CCK-8法、EdU染色法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测胃癌细胞活力... 2',4'-二甲氧基查尔酮(DMC)是卡瓦胡椒素B的结构修饰物,本课题以胃癌细胞MGC-803和HGC-27为研究对象,探讨DMC对胃癌细胞的体内外抗肿瘤作用及机制。采用CCK-8法、EdU染色法和Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测胃癌细胞活力、增殖率和凋亡率,发现DMC抑制胃癌细胞活力和增殖,促进胃癌细胞凋亡;构建裸鼠胃癌细胞皮下移植瘤模型观察DMC对胃癌移植瘤生长的影响,发现DMC抑制裸鼠胃癌皮下移植瘤的生长,动物实验获得上海中医药大学动物伦理委员会的批准,伦理编号为PZSHUTCM2310110002。转录组学研究DMC对MGC-803细胞RNA表达的影响,发现生物功能富集于糖酵解;采用2-NBDG探针标记及流式细胞术和乳酸测试盒检测胃癌细胞葡萄糖摄取能力和乳酸生成与外排能力,发现DMC抑制胃癌细胞的葡萄糖摄取能力和乳酸生成与外排;通过蛋白印迹实验检测胃癌细胞增殖、凋亡及糖酵解相关蛋白的表达,发现DMC能上调胃癌细胞促凋亡蛋白cleaved caspase-9、cleaved caspase-3、cleaved PARP的表达,下调胃癌细胞增殖标志物Ki-67的蛋白表达,并抑制胃癌细胞糖酵解相关蛋白c-Myc、LDHA、GLUT3、PDHK1和MCT1的表达;通过Seahorse能量代谢分析仪检测实时糖酵解速率,发现DMC能下调胃癌细胞基础糖酵解速率和代偿糖酵解;通过c-Myc过表达稳转株MGC-803细胞的翻转实验明确DMC通过抑制c-Myc介导的葡萄糖摄取和糖酵解发挥胃癌抑制作用。综上所述,DMC可能通过调控胃癌细胞c-Myc及其靶基因糖酵解相关蛋白的表达,抑制胃癌细胞c-Myc介导的葡萄糖摄取功能和糖酵解,从而抑制胃癌细胞增殖,促进胃癌细胞凋亡,最终在体内外抑制胃癌的生长。 展开更多
关键词 2' 4'-二甲氧基查尔酮 胃癌 增殖 凋亡 糖酵解
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基于单细胞测序技术揭示2'-5'-寡腺苷酸合成酶2在胰腺导管腺癌肿瘤相关巨噬细胞中的作用 被引量：2
2
作者 汪子欣 杨玉洁 +1 位作者 王越 赵云鹏 《海军军医大学学报》 北大核心 2025年第5期567-576,共10页
目的 基于早期和晚期胰腺导管腺癌(PDAC)患者肿瘤组织巨噬细胞相关的差异基因,探索PDAC肿瘤免疫微环境的特征,为PDAC提供早诊早治新靶点。方法 收集3例早期与4例晚期PDAC患者肿瘤组织样本,利用单细胞测序技术分析组织转录组数据,结合癌... 目的 基于早期和晚期胰腺导管腺癌(PDAC)患者肿瘤组织巨噬细胞相关的差异基因,探索PDAC肿瘤免疫微环境的特征,为PDAC提供早诊早治新靶点。方法 收集3例早期与4例晚期PDAC患者肿瘤组织样本,利用单细胞测序技术分析组织转录组数据,结合癌症基因组图谱(TCGA)数据库,获取与预后有关的早期与晚期PDAC差异表达的巨噬细胞相关基因,采用最小绝对收缩和选择算子(LASSO)-Cox回归方法构建预后风险评分模型。利用基因表达谱交互分析2(GEPIA2)在线生存分析工具筛选出与PDAC预后相关的风险基因,使用通过估计RNA转录本相对子集进行细胞类型鉴定(CIBERSORT)方法对其免疫浸润情况进行分析,通过t-分布随机近邻嵌入(tSNE)聚类降维和Monocle包对其在不同时期不同亚群巨噬细胞中的表达情况进行解析,并进一步借助STRING数据库及人类蛋白质图谱(HPA)数据库对其蛋白质-蛋白质相互作用和免疫组织化学染色图片进行分析。结果 共发现48个早期与晚期PDAC差异表达的巨噬细胞相关基因与预后有关。筛选出11个差异表达的巨噬细胞基因作为PDAC预后基因,并利用这11个基因构建PDAC预后风险评分模型。筛选出2个不良预后基因,其中2'-5'-寡腺苷酸合成酶2(OAS2)基因主要在分泌型磷蛋白1(SPP1)阳性巨噬细胞中表达,人类异常纺锤体样小头畸形相关蛋白(ASPM)基因主要在增殖标志物Ki-67(MKI67)阳性巨噬细胞中表达,并且OAS2在不同时期PDAC巨噬细胞中的表达具有明显差异。免疫浸润研究表明OAS2和ASPM在调节性T细胞、M2型巨噬细胞中高表达(均P<0.05)。蛋白质-蛋白质相互作用网络显示了OAS2和ASPM间的表达关系以及更多其他共表达的蛋白。免疫组织化学分析表明OAS2在肿瘤组织中的表达水平高于正常组织。结论 OAS2和ASPM均为不良预后基因,分别在SPP1阳性巨噬细胞和MKI67阳性巨噬细胞中特异性表达并发挥负性免疫调节作用,进而促进PDAC的进展并导致不良预后,这有望为PDAC的防治提供新的靶点。 展开更多
关键词 胰腺导管腺癌 巨噬细胞 预后 肿瘤微环境 单细胞测序 拟时序分析 2'-5'-寡腺苷酸合成酶2
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2',4'-二羟基查尔酮通过调控miR-7-5p诱导自噬抑制结直肠癌细胞增殖和迁移
3
作者 苏朝霞 王南苗 +7 位作者 陈丹 韩有艳 毕遥 王彤 安仁波 朴英实 任香善 李文静 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第7期698-705,共8页
目的:探讨2',4'-二羟基查尔酮(D2)通过调控miR-7-5p诱导自噬,抑制结直肠癌细胞增殖、迁移及上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法:选取结直肠癌细胞系HCT-15、SW620为研究对象,分别用不同浓度(0、12.5、25、50μmol/L)的D2处理细... 目的:探讨2',4'-二羟基查尔酮(D2)通过调控miR-7-5p诱导自噬,抑制结直肠癌细胞增殖、迁移及上皮间质转化(EMT)的分子机制。方法:选取结直肠癌细胞系HCT-15、SW620为研究对象,分别用不同浓度(0、12.5、25、50μmol/L)的D2处理细胞,采用MTT法和平板克隆实验检测细胞增殖活力及克隆形成能力,划痕愈合实验及Transwell实验评估细胞迁移能力,WB法检测EMT相关蛋白、自噬相关蛋白及PI3K/AKT/mTOR信号通路蛋白的表达情况,免疫荧光染色法观察自噬小体的形成。基于TCGA数据库分析miR-7-5p在结直肠癌中的表达水平,并借助KEGG富集分析探究miR-7-5p与结直肠癌的关联。运用RT-qPCR检测miR-7-5p的表达量,同时采用慢病毒转染技术构建miR-7-5p稳定敲低或过表达的细胞系。结果:D2抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移及EMT进程(P<0.05或P<0.01)。TCGA数据库分析及KEGG富集分析显示,miR-7-5p在结直肠癌中呈低表达,且与结直肠癌的发生有密切关联。12.5、25、50μmol/L D2处理均可上调HCT-15、SW620细胞miR-7-5p的表达水平(均P<0.01)。25μmol/L D2处理组HCT-15、SW620细胞中LC3、p-ULK1等自噬相关蛋白表达增加,而PI3K/AKT/mTOR信号通路受到抑制(均P<0.05),细胞内自噬小体数量增加(均P<0.01);与D2单独处理组相比,经D2处理的miR-7-5p敲减细胞中LC3、p-ULK表达量有所下降(P<0.05或P<0.01)。结论:D2通过调控miR-7-5p诱导自噬,抑制结直肠癌细胞的增殖、迁移及EMT进程,其机制可能与抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路有关。 展开更多
关键词 结直肠癌 2' 4'-二羟基查尔酮 自噬 细胞增殖 上皮间质转化
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分散固相萃取-高效液相色谱法测定子宫内膜癌患者尿中8-羟基-2'-脱氧鸟苷含量
4
作者 左璐洁 常秋圣 +3 位作者 刘德玄 赵焕焕 刘彦 齐晓丹 《分析试验室》 北大核心 2025年第7期1090-1095,共6页
建立了一种基于壳聚糖-碳纳米管-三氧化二铝(CS-CNTs-Al_(2)O_(3))复合材料的新型分散固相萃取(DSPE)与高效液相色谱(HPLC)联用测定子宫内膜癌患者尿中8-羟基-2'-脱氧鸟苷(8-OHdG)含量的方法。利用戊二醛交联法制备了萃取材料CS-CNT... 建立了一种基于壳聚糖-碳纳米管-三氧化二铝(CS-CNTs-Al_(2)O_(3))复合材料的新型分散固相萃取(DSPE)与高效液相色谱(HPLC)联用测定子宫内膜癌患者尿中8-羟基-2'-脱氧鸟苷(8-OHdG)含量的方法。利用戊二醛交联法制备了萃取材料CS-CNTs-Al_(2)O_(3),通过红外光谱、扫描电镜和能谱对CS-CNTs-Al_(2)O_(3)的结构进行了表征。优化了萃取材料种类、质量、萃取时间及洗脱条件等DSPE萃取条件。在优化的样品前处理条件下,采用HPLC测定尿样中的8-OHdG。结果表明:8-OHdG在0.10~200.00μg/mL浓度范围内线性关系良好,检测限和定量限分别为0.03μg/mL和0.08μg/mL,加样回收率在80.2%~116.0%之间。对各10份健康志愿者及子宫内膜癌患者尿样中的8-OHdG含量进行测定,子宫内膜癌组的测定结果显著高于健康对照组(P<0.05),表明8-OHdG可作为子宫内膜癌无创诊断的潜在生物标志物。 展开更多
关键词 壳聚糖-碳纳米管-三氧化二铝(CS-CNTs-Al2O3) 分散固相萃取 8-羟基-2'-脱氧鸟苷(8-OHdG) 子宫内膜癌
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2'-岩藻糖基乳糖缓解小鼠免疫检查点抑制剂相关结肠炎的机制研究
5
作者 莫锦灵 张洪涛 +4 位作者 胡楠 周栋 朱傲霜 蒋敬庭 张雯婷 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第12期1228-1235,共8页
目的:探究2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)对小鼠免疫检查点抑制剂(ICI)相关结肠炎(ICIC)的作用及其机制。方法:用随机数字表法将BALB/c小鼠随机分为对照组、葡聚糖硫酸钠(DSS)组、ICIC组、ICIC+2'-FL组。DSS组连续7 d自由摄取含3.5... 目的:探究2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)对小鼠免疫检查点抑制剂(ICI)相关结肠炎(ICIC)的作用及其机制。方法:用随机数字表法将BALB/c小鼠随机分为对照组、葡聚糖硫酸钠(DSS)组、ICIC组、ICIC+2'-FL组。DSS组连续7 d自由摄取含3.5%DSS的饮用水诱导结肠炎;ICIC组在摄取含3.5%DSS的饮用水的同时在实验第0天和第4天通过腹腔注射细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4抗体(CTLA-4抗体,剂量为150µg/只)构建ICIC模型;ICIC+2'-FL组在ICIC造模同时从实验开始每日灌胃给予2'-FL[150 mg/(kg·d)]。统计分析小鼠体质量和疾病活动性评分(DAI)变化。第7天处死小鼠,测量结肠长度,用H-E染色法观察各组结肠组织学形态变化,用免疫组织化学(IHC)法检测CD3+T细胞和CD19+B细胞在结肠组织中的浸润情况,用转录组学方法对结肠组织进行RNA测序,统计分析各组结肠组织中的差异表达基因(DEG)并进行基因本体论(GO)功能注释和京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析。结果:与对照组和DSS组比较,ICIC组小鼠体质量明显下降、DAI评分上升、结肠长度更短(均P<0.05),结肠黏膜完整性受损,呈现典型的溃疡性病变;与ICIC组比较,ICIC+2'-FL组小鼠体质量下降显著缓解、DAI评分降低,结肠长度恢复(均P<0.05)。转录组学检测结果显示,与ICIC组相比,2'-FL处理组有51个DEG,GO功能注释和KEGG富集分析提示,2'-FL缓解ICIC样症状与B细胞受体、B细胞增殖调控、炎症反应和修复相关通路的上调有关。结论:人乳寡糖2'-FL可显著缓解ICIC的病理进程,其可能通过B细胞受体相关信号通路及与炎症反应和修复相关通路减轻ICIC小鼠结肠组织的损伤。 展开更多
关键词 免疫检查点抑制剂相关结肠炎 2'-岩藻糖基乳糖 转录组测序 人乳寡糖 结肠炎
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过表达SdC2'H基因对防风毛状根香豆素含量的影响
6
作者 苏文慧 齐迎春 +6 位作者 张利超 崔祎 杜瑞云 崔晶晶 王云贺 杨利民 韩忠明 《华南农业大学学报》 北大核心 2025年第5期759-766,共8页
【目的】建立过表达对香豆酰辅酶A 2'-羟化酶(p-Coumaroyl CoA 2'-hydroxylase,C2'H)基因的防风Saposhnikovia divaricata (Turcz.) Schischk.毛状根培养体系,解析SdC2'H基因对香豆素生物合成的调控作用。【方法】克隆S... 【目的】建立过表达对香豆酰辅酶A 2'-羟化酶(p-Coumaroyl CoA 2'-hydroxylase,C2'H)基因的防风Saposhnikovia divaricata (Turcz.) Schischk.毛状根培养体系,解析SdC2'H基因对香豆素生物合成的调控作用。【方法】克隆SdC2'H基因;采用基因融合法构建过表达SdC2'H基因的植物双元表达载体;通过发根农杆菌K599转化法诱导防风毛状根;利用RT-qPCR分析SdC2'H基因的表达水平;采用HPLC测定防风毛状根系中的香豆素含量。【结果】防风SdC2'H基因(GenBank登录号:PV169361)的开放阅读框长度为813 bp,编码蛋白含270个氨基酸。SdC2'H蛋白具有亲水性,属于不稳定蛋白,无信号肽,且跨膜位于膜外。系统进化树显示SdC2'H蛋白与伞形科植物紫花前胡Angelica decursiva亲缘关系最近。过表达SdC2'H基因的防风毛状根系中,SdC2'H基因的表达水平显著高于空白对照(P<0.000 1),香豆素含量显著高于空白对照(P<0.001)和空载体阴性对照(P<0.01),表明过表达SdC2'H基因可以提高防风毛状根中香豆素的含量。【结论】本研究证实了SdC2'H基因对防风中香豆素生物合成的促进作用,为解析SdC2'H基因在防风香豆素类化合物代谢过程中的作用提供了理论依据,也为探究香豆素生物合成的分子调控网络奠定了研究基础。 展开更多
关键词 防风 对香豆酰辅酶A 2'-羟化酶基因 基因过表达 毛状根 香豆素
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2'-岩藻糖基乳糖联合双歧杆菌通过微生物-宿主互作机制改善重度抑郁临床研究
7
作者 刘修燕 唐苏宁 +2 位作者 闻春松 李晶晶 乔金平 《中国微生态学杂志》 北大核心 2025年第12期1430-1438,共9页
目的研究微生态干预通过调节“肠道菌群-炎症-氧化应激-神经递质”通路缓解重度抑郁障碍(MDD)症状的机制。方法纳入116例符合精神障碍诊断与统计手册-Ⅴ(DSM-Ⅴ)诊断标准的MDD患者,随机分为对照组(n=53)和观察组(n=63)。对照组患者服用... 目的研究微生态干预通过调节“肠道菌群-炎症-氧化应激-神经递质”通路缓解重度抑郁障碍(MDD)症状的机制。方法纳入116例符合精神障碍诊断与统计手册-Ⅴ(DSM-Ⅴ)诊断标准的MDD患者,随机分为对照组(n=53)和观察组(n=63)。对照组患者服用安慰剂(纯度≥99%的麦芽糊精,外观、剂量等与观察组完全匹配),观察组接受2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL,纯度≥98%,2.0 g/d)与双歧杆菌(活菌数≥1.5×1010CFU/g,2.0 g/d)联合微生态制剂治疗,两组干预周期为4周。治疗后采集患者外周血样,分离血清检测炎症因子、氧化应激及神经递质指标,同时收集粪便样本,采用16S rDNA测序分析肠道菌群结构差异。结果与对照组比较,观察组患者血清中白细胞介素-1β(t=4.594,P=0.010)、白细胞介素-6(t=3.423,P=0.027)、白细胞介素-18(t=2.884,P=0.045)和肿瘤坏死因子-α(t=3.185,P=0.033)水平均显著下降。氧化应激指标方面,超氧化物歧化酶(t=3.781,P=0.019)和过氧化氢酶(t=5.355,P=0.006)活性显著提高(P<0.05),丙二醛(t=2.852,P=0.046)、一氧化氮(t=3.794,P=0.019)和过氧化氢(t=3.550,P=0.024)水平均显著降低,表明干预有助于改善氧化还原状态、减轻神经损伤。肠道菌群分析发现,干预显著提升alpha多样性(P<0.05),重塑菌群结构,增加了瘤胃球菌属、普拉梭菌属和罗氏菌属等产短链脂肪酸的有益菌属,抑制了普雷沃菌属、埃希菌-志贺菌属等炎症相关菌属(均P<0.05)。神经递质方面,干预显著提高5-羟色胺(t=6.277,P=0.003)、25羟维生素D(t=3.889,P=0.018)、催产素(t=3.898,P=0.018)及脑源性神经营养因子(t=3.969,P=0.017)水平。随访数据表明,观察组在3个月随访时表现出较低的复发率及汉密尔顿抑郁量表评分回升比例。Spearman相关性分析显示,普雷沃菌属、埃希菌-志贺菌属和副萨特菌属与炎症因子和氧化应激指标呈正相关,并与神经递质水平呈负相关(均P<0.05);而瘤胃球菌属、普拉梭菌属、罗氏菌属和双歧杆菌属则与炎症反应和氧化应激指标呈负相关,与神经递质水平呈正相关(均P<0.05)。结论2'-FL与双歧杆菌联合干预能够通过调节肠道菌群、降低炎症反应和氧化应激水平,促进相关神经递质及神经营养因子的上调,从而有效缓解重度抑郁障碍患者的临床症状。研究结果提示肠道菌群在“微生态-免疫-神经”通路中可能起着关键作用。 展开更多
关键词 重度抑郁症 2'-岩藻糖基乳糖 双歧杆菌 肠道菌群 炎症因子 氧化应激 神经递质
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母乳源益生菌联合2'-岩藻糖基乳糖缓解小鼠肥胖的作用
8
作者 赵香香 谢科 +5 位作者 董冰 徐梦贤 李嘉鑫 姜钊颖 陶雪莹 魏华 《南昌大学学报(理科版)》 2025年第5期459-469,共11页
为探究母乳源副干酪乳酪杆菌ELPA01和发酵粘液乳杆菌ELFE07以及其与2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)联合对小鼠肥胖的干预效果,通过构建高脂饮食(HFD)诱导的肥胖小鼠模型,设置正常对照组(NC)、高脂饮食模型组(HFD)和4个干预组(HFD+ELPA0... 为探究母乳源副干酪乳酪杆菌ELPA01和发酵粘液乳杆菌ELFE07以及其与2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)联合对小鼠肥胖的干预效果,通过构建高脂饮食(HFD)诱导的肥胖小鼠模型,设置正常对照组(NC)、高脂饮食模型组(HFD)和4个干预组(HFD+ELPA01、HFD+ELPA01+2'-FL、HFD+ELFE07、HFD+ELFE07+2'-FL),系统分析两株菌单独以及与2'-FL联合使用对小鼠体重、胰岛素抵抗、糖脂代谢及肠道菌群的影响。结果显示,ELPA01和ELFE07及其与2'-FL联合干预有效缓解了高脂饮食小鼠的体重增加和脂肪堆积;ELPA01单独或联合2'-FL、ELFE07联合2'-FL可显著改善胰岛素抵抗;ELPA01和ELFE07均显著降低了血清和肝脏TC、TG水平,ELPA01单独或联合2'-FL显著降低了LDL-C和TG水平;ELPA01和ELFE07干预减轻了肝脏脂肪变性和附睾脂肪细胞肥大,其与2'-FL联合干预效果更为显著;ELPA01通过上调脂肪酸氧化基因Cpt1a和Pparα促进脂质分解;ELFE07通过激活Glut4促进葡萄糖转运,并抑制Gsk3β/Foxo1通路减少糖异生,而联合2'-FL可增强其对糖代谢的调控作用。此外,ELPA01和ELFE07均可增加小鼠肠道双歧杆菌属(Bifidobacterium)丰度。 展开更多
关键词 副干酪乳酪杆菌 发酵粘液乳杆菌 2'-岩藻糖基乳糖 肥胖 肠道菌群
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GCLC启动子甲基化在微囊藻毒素-LR诱导肝细胞恶性转化中的作用及5-氮杂-2'-脱氧胞苷的干预影响
9
作者 聂李云 农清清 +3 位作者 李江恒 关斌 黄语莹 陈俞云 《中国癌症防治杂志》 2025年第3期297-304,共8页
目的探讨谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(glutamate-cysteine ligase catalytic subunit,GCLC)启动子甲基化在微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MCLR)诱导肝细胞恶性转化中的作用,并评估DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'... 目的探讨谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(glutamate-cysteine ligase catalytic subunit,GCLC)启动子甲基化在微囊藻毒素-LR(microcystin-LR,MCLR)诱导肝细胞恶性转化中的作用,并评估DNA甲基化抑制剂5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-aza-2'-deoxycytidine,5-aza)进行干预的效果。方法将WRL68细胞长期暴露于10 nmol/L MCLR,培养至第25代,建立细胞恶性转化模型。实验分为4组:对照组、MCLR染毒组、5-aza处理组和MCLR+5-aza干预组。使用Agena MassArray核酸质谱技术评估GCLC启动子甲基化状态;Western blot检测GCLC、DNA甲基转移酶(DNA methyltransferases,DNMTs)蛋白水平;分别通过集落形成、软琼脂克隆和Transwell实验检测细胞增殖、侵袭和迁移能力。此外,采用相应试剂盒检测细胞的谷氨酰半胱氨酸连接酶(glutamate-cysteine ligase,GCL)活性、谷胱甘肽(glutathione,GSH)含量及8-羟基脱氧鸟苷(8-hydroxy-2'-deoxyguanosine,8-OHdG)水平。结果在MCLR诱导WRL68细胞恶性转化过程中,GCLC的启动子甲基化水平逐渐升高,同时GCLC mRNA和蛋白表达水平逐渐下降(均P<0.05)。第25代MCLR染毒组DNMT-1、DNMT-3a、DNMT-3b蛋白均呈高表达,而GCL活性、GSH含量明显下降,8-OHdG水平明显升高(均P<0.05)。5-aza干预可降低第25代MCLR染毒组GCLC启动子甲基化水平,明显上调GCLC的mRNA和蛋白表达,增加GCL活性和GSH含量,降低8-OHdG水平(均P<0.05)。此外,5-aza干预还可减弱MCLR染毒组细胞迁移、侵袭、细胞集落形成能力(均P<0.05)。结论GCLC启动子甲基化促进MCLR诱导的WRL68细胞恶性转化。5-aza可能通过下调DNMTs的表达,抑制GCLC启动子的高甲基化,重新激活沉默的GCLC基因表达,恢复其肿瘤抑制功能,从而抑制恶性转化。 展开更多
关键词 谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基 DNA甲基化 5-氮杂-2'-脱氧胞苷 微囊藻毒素-LR 肝细胞恶性转化
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大肠杆菌利用甘露糖生产2'-岩藻糖基乳糖的途径构建及优化
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作者 李莎 胡雅雯 +3 位作者 李俊众 孙雪 李玉 李庆刚 《天津科技大学学报》 2025年第6期29-36,75,共9页
2'-岩藻糖基乳糖(2'-fucosyllactose,2'-FL)是一种岩藻糖基修饰的人乳寡糖,在婴幼儿的生长发育中起着重要作用。利用微生物合成2'-FL是实现其大规模生产的可行方法,但是在其合成过程中碳源的利用效率较低,限制了2'... 2'-岩藻糖基乳糖(2'-fucosyllactose,2'-FL)是一种岩藻糖基修饰的人乳寡糖,在婴幼儿的生长发育中起着重要作用。利用微生物合成2'-FL是实现其大规模生产的可行方法,但是在其合成过程中碳源的利用效率较低,限制了2'-FL生产水平的进一步提高。本研究构建一种可以使菌株利用甘油进行自身生长,利用甘露糖进行2'-FL生产的细胞生长与生产互不干扰的新策略,在大肠杆菌(Escherichia coli)中敲除了磷酸甘露糖异构酶基因manA,获得了可以利用甘油进行菌株生长、利用甘露糖进行2'-FL生产的工程菌株,2'-FL的转化率由原有的10.77%提高至53.80%;通过敲除前体物GDP-岩藻糖的分支途径、优化关键酶α-1,2-岩藻糖基转移酶和甘露糖-1-磷酸鸟苷酰转移酶的表达水平,提高2'-FL的产量,通过测定菌株生长情况及甘露糖的转化率对这一策略进行了理论验证,后续会将这种方法应用到实验室已有的2'-FL高产菌株中,进一步提高甘露糖到2'-FL的转化率,为构建高效合成2'-FL的工业菌株提供参考。 展开更多
关键词 2'-岩藻糖基乳糖 人乳寡糖 甘露糖 大肠杆菌 微生物合成
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欧洲蕨中8-2'连接的木脂素类成分研究
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作者 李圆圆 卢炜仁 +3 位作者 黄慧莲 刘建群 彭财英 舒积成 《中草药》 北大核心 2025年第21期7675-7679,共5页
目的研究蕨菜Pteridium aquilinum的化学成分。方法采用大孔树脂、正相硅胶、Sephadex LH-20凝胶和半制备HPLC等柱色谱分离纯化,根据理化性质,应用MS、NMR等波谱手段并结合文献,鉴定化合物结构。通过抑制一氧化氮(NO)生成实验,评价单体... 目的研究蕨菜Pteridium aquilinum的化学成分。方法采用大孔树脂、正相硅胶、Sephadex LH-20凝胶和半制备HPLC等柱色谱分离纯化,根据理化性质,应用MS、NMR等波谱手段并结合文献,鉴定化合物结构。通过抑制一氧化氮(NO)生成实验,评价单体化合物的抗炎活性。结果从蕨菜中分离得到7个具8-2'连接的新木脂素类化合物,分别为蕨菜酸A(1)、乌毛蕨酸(2)、7-epiblechnic acid(3)、7-epiblechnic acid 9-methy ester(4)、tournefolic acid B(5)、tournefolic acid A(6)和丹酚酸F(7)。结论化合物1为新降木脂素类化合物,化合物4为新天然产物,化合物2、3、5~7均为首次从蕨菜中分离得到。另外,首次报道了丹酚酸F(7)的碳谱数据。化合物1~7均显示一定的抗炎活性,其中化合物7活性最强,其半数抑制浓度(median inhibition concentration,IC_(50))值15.8μmol/L。 展开更多
关键词 蕨菜 新木脂素 8-2′连接 蕨菜酚A 乌毛蕨酸 丹酚酸F 抗炎
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2-[1-(1'-溴)-乙基]-2-(6'-甲氧基-2'-萘基)-1,3-二氧戊环的合成
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作者 刘元声 陈天云 《安徽化工》 CAS 2008年第6期25-27,共3页
以2-溴-1-(6'-甲氧基-2'-萘基)丙-1-酮为原料,乙二醇为缩酮化反应试剂,通过对溶剂和催化剂以及合成工艺参数等研究,得到了合成2-[1-(1'-溴)-乙基]-2-(6'-甲氧基-2'-萘基)-1,3-二氧戊环的优化工艺条件。研究结果表明... 以2-溴-1-(6'-甲氧基-2'-萘基)丙-1-酮为原料,乙二醇为缩酮化反应试剂,通过对溶剂和催化剂以及合成工艺参数等研究,得到了合成2-[1-(1'-溴)-乙基]-2-(6'-甲氧基-2'-萘基)-1,3-二氧戊环的优化工艺条件。研究结果表明,在优化的工艺条件下,产物的收率达到了85%。 展开更多
关键词 2-[1-(1'-溴)-乙基]-2-(6'-甲氧基-2'-萘基)-1 3-二氧戊环 2-溴-1-(6'-甲氧基-2'-萘基)丙-1-酮 乙二醇 催化
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2'-岩藻糖基乳糖的生物制造研究进展
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作者 李娜 宋文娇 +4 位作者 徐铮 徐虹 牛堃 李古月 夏洪志 《生物加工过程》 2025年第3期329-337,354,共10页
2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)是母乳中含量最多的一种寡糖,其有助于增强婴幼儿的免疫力,预防胃肠道疾病发生,还可以促进智力发育。近年来,随着母乳喂养概念的逐步深化,对2'-FL的市场需求与日俱增,也对2'-FL的工业化生产水平... 2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)是母乳中含量最多的一种寡糖,其有助于增强婴幼儿的免疫力,预防胃肠道疾病发生,还可以促进智力发育。近年来,随着母乳喂养概念的逐步深化,对2'-FL的市场需求与日俱增,也对2'-FL的工业化生产水平提出了越来越高的要求。笔者综述了目前利用合成生物学技术在不同微生物细胞工厂中合成2'-FL的代表性成果,包括不同的底盘微生物、α-1,2-岩藻糖基转移酶的挖掘和改造以及染色体整合方式合成2'-FL的研究工作,并对未来发展趋势进行了展望。 展开更多
关键词 2’岩藻糖基乳糖 母乳寡糖 生物制造 细胞工厂 合成生物学
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2',3'-二脱氧-2',3'-二去氢鸟嘌呤核苷构象稳定性的理论研究 被引量：2
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作者 何冰 薛英 +1 位作者 郭勇 鄢国森 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第6期481-488,共8页
采用密度泛函方法在B3LYP/6-31+G**水平上研究了2',3'-二脱氧-2',3'-二去氢鸟嘌呤核苷分子(D4G)的构象.分别研究在气相中的孤立分子和一水合物异构体的相对稳定性和异构体之间的相互转变过程,分析了水分子的参与对D4G... 采用密度泛函方法在B3LYP/6-31+G**水平上研究了2',3'-二脱氧-2',3'-二去氢鸟嘌呤核苷分子(D4G)的构象.分别研究在气相中的孤立分子和一水合物异构体的相对稳定性和异构体之间的相互转变过程,分析了水分子的参与对D4G异构体的相对稳定性和几何结构参数以及自然电荷的影响.结果表明,孤立的D4G分子在气相中存在8种稳定构象,其中构象d4g-2是所有构象中最稳定的,气相中D4G主要以d4g-2存在.气相中各构象的相对稳定性为:d4g-2>d4g-1>d4g-5>d4g-3>d4g-6>d4g-4>d4g-8>d4g-7.计算得到的各构象键长和键角数据与实验值接近.一个水分子的加入对D4G分子的构型参数有所影响,基本不改变D4G分子各构象的稳定性顺序,但构象转变的能垒有所提高.氢键在分子构象中发挥了重要作用. 展开更多
关键词 2' 3'-二脱氧-2' 3'-二去氢鸟嘌呤核苷(D4G) 构象稳定性 密度泛函理论 溶剂效应
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微波辐射合成2-苯基-1H,1'H-2',5-双苯并咪唑 被引量：3
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作者 马柏林 高娟丽 +1 位作者 闫宣凯 杨鹏飞 《西北林学院学报》 CSCD 北大核心 2012年第5期135-138,共4页
采用微波辅助,以3,4-二氨基苯甲酸和苯甲醛为原料,合成了2-苯基-1H,1'H-2',5-双苯并咪唑。探讨了物料比、微波输出功率、微波辐射时间和催化剂PPA与HCl比例对反应产率的影响。结果表明,第1步较佳反应条件为3,4-二氨基苯甲酸︰... 采用微波辅助,以3,4-二氨基苯甲酸和苯甲醛为原料,合成了2-苯基-1H,1'H-2',5-双苯并咪唑。探讨了物料比、微波输出功率、微波辐射时间和催化剂PPA与HCl比例对反应产率的影响。结果表明,第1步较佳反应条件为3,4-二氨基苯甲酸︰苯甲醛=1.0︰1.2,微波输出功率320W,间歇辐射30min;第2步较佳反应条件为5-(2-苯基-1H-苯并咪唑)甲酸︰邻苯二胺=1.0︰1.1,PPA/HCl=1︰1,微波输出功率500W,间歇辐射15min。该方法具有原料消耗少、操作简单、反应条件温和、易纯化、对环境无污染、产率高的优点。 展开更多
关键词 2-苯基-1H 1'H-2' 5-双苯并咪唑 微波 合成
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5-氮-2'脱氧胞苷对Reh细胞增殖及RUNX3基因启动子区甲基化状态的影响 被引量：4
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作者 吴明彩 蒋明 +1 位作者 李大彩 毕富勇 《皖南医学院学报》 CAS 2011年第6期436-439,共4页
目的:探讨5-氮-2'脱氧胞苷对Reh细胞增殖及其抑癌基因RUNX3启动子区甲基化状态的影响。方法:应用MTT法观察5-氮-2'脱氧胞苷对Reh细胞增殖的抑制能力;采用甲基化特异性PCR(MSP)检测5-氮-2'脱氧胞苷干预前后RUNX3基因启动子... 目的:探讨5-氮-2'脱氧胞苷对Reh细胞增殖及其抑癌基因RUNX3启动子区甲基化状态的影响。方法:应用MTT法观察5-氮-2'脱氧胞苷对Reh细胞增殖的抑制能力;采用甲基化特异性PCR(MSP)检测5-氮-2'脱氧胞苷干预前后RUNX3基因启动子区的甲基化状况;应用RT-PCR检测干预前后RUNX3基因的mRNA表达水平的变化。结果:经5-氮-2'脱氧胞苷处理后,RUNX3基因启动子高甲基化的区域发生部分去甲基化,5-氮-2'脱氧胞苷处理前启动子高甲基化的RUNX3 mRNA未见表达,而在其处理后该基因可见重新表达,经5-氮-2'脱氧胞苷处理后,Reh细胞生长缓慢。结论:5-氮-2'脱氧胞苷能使Reh细胞RUNX3基因启动子区发生部分去甲基化,从而调控RUNX3基因表达并能抑制其细胞生长。启动子区异常甲基化是白血病Reh细胞RUNX3基因失活的主要原因之一。 展开更多
关键词 5-氮-2'脱氧胞苷 RUNX3基因 甲基化
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刚性配体2,2'-联吡啶诱导的2,2'-双咪唑金属配合物的合成与晶体结构 被引量：5
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作者 金琼花 徐立军 +1 位作者 孙静静 代永成 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2009年第19期2193-2198,共6页
合成了3种新的超分子配合物[Cd(H2biim)(2,2'-bipy)(NO3)2](1),[Cu(H2biim)(2,2'-bipy)(H2O)](NO3)2(2)和[Zn(H2biim)(2,2'-bipy)(H2O)](NO3)2(3)(H2biim=双咪唑;2,2'-bipy=2,2'-联吡啶),并通过X射线单晶衍射测定... 合成了3种新的超分子配合物[Cd(H2biim)(2,2'-bipy)(NO3)2](1),[Cu(H2biim)(2,2'-bipy)(H2O)](NO3)2(2)和[Zn(H2biim)(2,2'-bipy)(H2O)](NO3)2(3)(H2biim=双咪唑;2,2'-bipy=2,2'-联吡啶),并通过X射线单晶衍射测定了其结构.配合物1～3均为单斜晶系,属于P2(1)/c空间群,在1中,Cd(II)为六配位,它与双咪唑的2个氮原子,联吡啶的2个氮原子和2个硝酸根的2个氧原子配位.在2和3中,Cu(II)和Zn(II)均为五配位的,它们与双咪唑的2个氮原子、2,2'-联吡啶的两个氮原子和一个水分子配位.1～3的对称单元均通过双咪唑、硝酸根和水之间形成的氢键R21(7),R21(4)和R44(18)构筑了1D链状超分子. 展开更多
关键词 双咪唑 2 2'-联吡啶 镉配合物 铜配合物 锌配合物 晶体结构
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妊娠糖尿病对子代大鼠空腹血糖的影响及2'-岩藻糖基乳糖的干预效果研究
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作者 叶湾韵 史涵旭 +3 位作者 周雅琳 文彰 彭译乐 许雅君 《中国生育健康杂志》 2025年第3期201-207,共7页
目的研究妊娠糖尿病对大鼠子代空腹血糖的影响,探索2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)改善妊娠糖尿病子代空腹血糖受损的能力及适宜剂量。方法将健康SD大鼠随机分为空白对照组及妊娠糖尿病(GDM)造模组。以高脂饮食配合小剂量链脲佐菌素腹... 目的研究妊娠糖尿病对大鼠子代空腹血糖的影响,探索2'-岩藻糖基乳糖(2'-FL)改善妊娠糖尿病子代空腹血糖受损的能力及适宜剂量。方法将健康SD大鼠随机分为空白对照组及妊娠糖尿病(GDM)造模组。以高脂饮食配合小剂量链脲佐菌素腹腔注射建立GDM模型,GDM造模组产后随机分为对照组(GDM组)、GDM+2'-FL低剂量干预组(GLF组)、GDM+2'-FL中剂量干预组(GMF组)、GDM+2'-FL高剂量干预组(GHF组),每组8只孕鼠。于产后第3~21天对仔鼠进行灌胃,空白对照组与GDM组灌胃蒸馏水,GLF组、GMF组和GHF组分别给予0.2 g/kg、0.6 g/kg和1.8 g/kg的2'-FL灌胃。观察记录母鼠孕期、哺乳期空腹血糖和体重,无菌采集产后第3、11、21天乳汁分析2'-FL含量。记录仔鼠哺乳期体重,于产后第21天检测空腹血糖,产后第7、21天每窝处死雌雄各一只仔鼠,称取主要脏器重量并计算脏器系数。结果GDM组母鼠产后第3、21天乳汁中2'-FL含量显著低于空白对照组(P<0.05),两组乳汁中2'-FL含量在哺乳期均随时间推移降低。GDM组雌、雄仔鼠产后第21天空腹血糖均较空白对照组显著升高(P<0.05),GLF组的雌、雄仔鼠空腹血糖较GDM组显著降低(P<0.05),GMF组和GHF组与GDM组比较,仅雄性仔鼠空腹血糖显著降低(P<0.05)。产后第7天雌、雄仔鼠肝脏系数较空白对照组显著降低(P<0.05),GHF组雌鼠肝脏系数较GDM组显著升高(P<0.05)。产后第21天GDM组雄性仔鼠肝脏系数和雌性仔鼠肾脏系数较空白对照组显著升高(P<0.05),GHF组雌性仔鼠肾脏系数较GDM组显著降低(P<0.05)。结论受妊娠糖尿病影响的仔鼠空腹血糖受损,2'-FL干预可在一定程度上改善仔鼠空腹血糖受损。 展开更多
关键词 妊娠糖尿病 2′-岩藻糖基乳糖 干预作用 空腹血糖受损
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(2-(2'-吡啶)苯并咪唑)(L-丙氨酸根)铜(Ⅱ)配合物结构、抗菌活性及DNA断裂作用 被引量：12
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作者 卢艳梅 区志镔 +1 位作者 胡伟 乐学义 《化学学报》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2012年第8期973-979,共7页
设计合成了新的(2-(2'-吡啶)苯并咪唑)(L-丙氨酸根)铜(II)配合物:[Cu(HPB)(L-Ala)(ClO4)(H2O)]2 H2O[HPB=2-(2'-吡啶)苯并咪唑,L-Ala=L-丙氨酸根].应用元素分析、红外光谱、紫外可见光谱、摩尔电导率、电喷雾质谱及X射线单晶衍... 设计合成了新的(2-(2'-吡啶)苯并咪唑)(L-丙氨酸根)铜(II)配合物:[Cu(HPB)(L-Ala)(ClO4)(H2O)]2 H2O[HPB=2-(2'-吡啶)苯并咪唑,L-Ala=L-丙氨酸根].应用元素分析、红外光谱、紫外可见光谱、摩尔电导率、电喷雾质谱及X射线单晶衍射等方法对配合物的组成及结构进行了表征.该配合物晶体属单斜晶系,P21空间群,晶胞参数:a=1.1900(2)nm,b=0.80500(16)nm,c=1.9700(4)nm,β=94.78(3)°,Z=2,Dc=1.672 g cm-3,F(000)=968,残差因子R1=0.0427,wR2=0.1106[I>2σ(I)],S=0.999.在配合物分子中,2-(2'-吡啶)苯并咪唑和L-丙氨酸根以双齿配位方式在分子平面上与中心铜(II)离子配位,而水分子及高氯酸根单齿弱配位于分子轴向上,构成了一拉长的八面体结构.利用二倍试管稀释法测定了配合物的抗菌活性,并且研究了配合物对pBR 322 DNA的断裂作用.结果表明,该配合物对枯草杆菌(B.subtilis,G+),金黄色葡萄球菌(S.aureus,G+),大肠杆菌(E.coil,G-)和沙门氏杆菌(Salmonella,G-)具有良好的抑制活性,最小抑菌浓度为50～80μg mL-1,在维生素C存在下能够通过羟基自由基OH氧化断裂pBR 322 DNA双螺旋结构. 展开更多
关键词 2-(2'-吡啶)苯并咪唑 L-丙氨酸 铜(II)配合物 晶体结构 抗菌活性 pBR322DNA
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5-杂氮-2'脱氧胞苷对肝癌细胞SMMC-7721 miR-1247-5p基因表达及其启动子区甲基化的影响 被引量：2
20
作者 郭文伟 徐广贤 +4 位作者 段相国 赵瑾 杨丽 张议心 魏军 《基础医学与临床》 CSCD 2016年第3期307-310,共4页
目的观察正常人肝细胞系LO_2和肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p的表达,研究去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p表达及其基因启动子区Cp G岛甲基化水平的影响。方法用不同浓度(0、5和10... 目的观察正常人肝细胞系LO_2和肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p的表达,研究去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p表达及其基因启动子区Cp G岛甲基化水平的影响。方法用不同浓度(0、5和10μmol/L)去甲基化药物5-杂氮-2'脱氧胞苷处理SMMC-7721细胞,用甲基化特异性PCR法检测miR-1247-5p基因启动子区甲基化水平;用SYBR Green qReal Time PCR法检测miR-1247-5p的表达。结果与正常人肝细胞系LO_2相比,肝癌细胞系SMMC-7721中miR-1247-5p表达降低(P<0.05)且其基因启动子区Cp G岛甲基化水平高;经去甲基化药物干预后miR-1247-5p的表达较对照组有明显上调(P<0.01),且其基因启动子区Cp G岛甲基化水平降低。结论 miR-1247-5p基因甲基化调控可能参与了肝癌的发生。 展开更多
关键词 肝癌细胞 miR- 1247- 5p 甲基化 5-杂氮-2'脱氧胞苷
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