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基于CRISPR/Cas9基因编辑系统建立WIP 1基因g.37536832 C>A位点突变的ST细胞系
1
作者 王楠 杜伟伟 +7 位作者 王婉洁 王悦 袁茂莎 聂雨欣 孙亚茹 刘志国 吴添文 牟玉莲 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第5期1966-1976,共11页
【目的】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得野生型p53诱导磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase 1,WIP1)基因与精子活力显著相关的位点g.37536832 C>A突变的猪睾丸(swine testis,ST)细胞系,为在细胞层面上进一步探讨WIP 1基因... 【目的】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得野生型p53诱导磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase 1,WIP1)基因与精子活力显著相关的位点g.37536832 C>A突变的猪睾丸(swine testis,ST)细胞系,为在细胞层面上进一步探讨WIP 1基因与公猪精液品质性状之间的关系奠定基础。【方法】利用CRISPOR在线网站在猪WIP 1基因g.37536832 C>A位点附近区域设计3条向导RNA(single guide RNA,sgRNA),并将其连接至pX458-GFP载体;通过T7E1酶切试验检测3条sgRNA活性,选择效率较高的sgRNA。构建Donor载体,并将其与sgRNA载体共同转染至ST细胞,采用流式细胞术将表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的阳性细胞进行富集和单克隆细胞筛选,并对筛选出的单克隆细胞进行基因型鉴定。【结果】质粒测序结果表明,成功将3条sgRNA连接至pX458-GFP载体上;T7E1酶切结果显示,转染pX458-GFP-sgRNA1和pX458-GFP-sgRNA2质粒组产生了切割,效率分别为24%和27%,而转染pX458-GFP-sgRNA3质粒组未检测到切割,因此选择pX458-GFP-sgRNA2质粒进行试验。成功构建Donor载体,并将pX458-GFP-sgRNA2和Donor载体共转染至ST细胞。基因型鉴定结果显示,获得的269株单克隆中有205株细胞发生了基因编辑,基因编辑效率为76%,其中9株为WIP 1基因g.37536832 C>A位点纯合突变的ST细胞,精确突变效率为3%。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功获得了WIP 1基因g.37536832 C>A位点突变的ST细胞系,为深入研究WIP 1基因对公猪精液品质的影响提供了良好的细胞模型。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 WIP 1基因 ST细胞系
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Wip1磷酸酶对小鼠脾脏造血功能的调控作用
2
作者 任小萍 常志林 +2 位作者 王依 朱慧敏 贺文艳 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第5期1491-1498,共8页
目的:研究Wip1磷酸酶对小鼠脾脏造血功能的调控作用。方法:繁育Wip1基因敲除小鼠,采用流式细胞术检测Wip1基因缺失对小鼠脾脏造血干、祖细胞和各系成熟造血细胞比例和数目的影响;采用Proteome Prof ilerTM固相抗体芯片分析Wip1基因缺失... 目的:研究Wip1磷酸酶对小鼠脾脏造血功能的调控作用。方法:繁育Wip1基因敲除小鼠,采用流式细胞术检测Wip1基因缺失对小鼠脾脏造血干、祖细胞和各系成熟造血细胞比例和数目的影响;采用Proteome Prof ilerTM固相抗体芯片分析Wip1基因缺失对小鼠脾脏CD45^(high)CD11b^(+)髓系细胞炎性细胞因子表达的作用。结果:Wip1基因敲除小鼠脾脏大体形态变小,细胞数减少;各级造血干、祖细胞绝对数减少;T、B淋巴细胞绝对数目减少;红系祖细胞及各阶段红系细胞比例显著增加,成熟红细胞数显著减少;中性粒细胞、单核细胞、CD45^(high)CD11b^(+)和CD45lowCD11b^(+)髓系细胞亚群均显著减少;脾脏中CD45^(high)CD11b^(+)髓系细胞呈促炎表型。结论:Wip1基因缺失损害成体脾脏的正常造血功能,导致脾脏各系成熟血细胞显著减少,脾脏CD45^(high)CD11b^(+)髓系细胞呈促炎表型。 展开更多
关键词 Wip1磷酸酶 脾脏 造血 炎性细胞因子
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基于Atmega128的μC/OS-II操作系统移植及其网络协议栈的实现 被引量：2
3
作者 毕远国 赵海 +1 位作者 罗玎玎 林恺 《仪表技术与传感器》 CSCD 北大核心 2007年第7期35-37,52,共4页
介绍了嵌入式领域非常流行的实时操作系统μC/OS-II,分析轻型TCP/IP协议栈lwIP,详细论述在8位处理器Atmega128上μC/OS-II的移植以及网络协议栈的实现过程,指出移植过程中应该解决的重点和难点问题,并给出了相应的解决方法。最后,对该... 介绍了嵌入式领域非常流行的实时操作系统μC/OS-II,分析轻型TCP/IP协议栈lwIP,详细论述在8位处理器Atmega128上μC/OS-II的移植以及网络协议栈的实现过程,指出移植过程中应该解决的重点和难点问题,并给出了相应的解决方法。最后,对该移植过程进行了充分的测试,并对测试数据进行了简要的分析,结果表明μC/OS-II以及lwIP的移植正确,运行稳定,具有较高的网络传输速率和较低的丢包率。 展开更多
关键词 实时操作系统 1wip 因特网访问服务器 μC/OS—Ⅱ 网络分析仪
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基于ARM的全数字可逆直流调速系统 被引量：1
4
作者 贺洪江 王国杰 《工矿自动化》 北大核心 2007年第1期94-96,共3页
文章介绍了一种基于ARM-44B0X处理器的直流调速系统。该系统充分利用高性能的ARM微控制器在uc/os-II和uc/gui平台上的多任务程序运行、实时处理及友好的人机交互特点,并结合逻辑无环流可逆原理,给出了直流电动机控制方案。文章进一步探... 文章介绍了一种基于ARM-44B0X处理器的直流调速系统。该系统充分利用高性能的ARM微控制器在uc/os-II和uc/gui平台上的多任务程序运行、实时处理及友好的人机交互特点,并结合逻辑无环流可逆原理,给出了直流电动机控制方案。文章进一步探讨和尝试了在电动机控制方面利用lwIP协议与PC机实现数据通信、从而实现PC机远程控制的方法。测试结果表明该系统具有线路简单、控制方便、动态转速波形显示、网络控制等优点。 展开更多
关键词 直流电动机 全数字直流调速系统 逻辑无环流可逆控制 数据通信 ARM uc/os—Ⅱ UC/GUI 1wip
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Mobile IP功能在嵌入式环境下的实现
5
作者 谢楠琳 邵时 《计算机工程》 EI CAS CSCD 北大核心 2005年第11期130-132,共3页
介绍了MobileIP机制在嵌入式环境中的实现方法,在lwip协议栈的基础上实现了MobileIP的客户端。首先介绍实现的软硬件基础;其次分析对协议栈的修改,包括设计多级网络接口和分层路由策略的方法;最后对MobileIP协议栈的测试过程进行了分析... 介绍了MobileIP机制在嵌入式环境中的实现方法,在lwip协议栈的基础上实现了MobileIP的客户端。首先介绍实现的软硬件基础;其次分析对协议栈的修改,包括设计多级网络接口和分层路由策略的方法;最后对MobileIP协议栈的测试过程进行了分析和描述。 展开更多
关键词 MOBILE IP IP隧道 IPIP 路由机制 1wip
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基于TMS320VC5409的嵌入式WEB数据服务器的实现 被引量：1
6
作者 高翔 李凌 刘广存 《电子技术应用》 北大核心 2007年第7期72-74,共3页
设计开发了一种适用于对数据传输率有一定要求的WEB数据服务器系统。系统以TMS320VC5409 DSP为主处理器,通过与RTL8019AS芯片连接实现了以太网接口。完成了lwIP TCP/IP协议栈在TMS320VC5409的移植,并在应用层实现了一个嵌入式WEB数据服... 设计开发了一种适用于对数据传输率有一定要求的WEB数据服务器系统。系统以TMS320VC5409 DSP为主处理器,通过与RTL8019AS芯片连接实现了以太网接口。完成了lwIP TCP/IP协议栈在TMS320VC5409的移植,并在应用层实现了一个嵌入式WEB数据服务器。 展开更多
关键词 嵌入式 WEB数据服务器 数据采集 TMS320VC5409 1wip RTL8019AS
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Wip1在非小细胞肺癌组织及细胞中的表达 被引量：5
7
作者 赵吉星 张伟 +2 位作者 孙磊 罗红鹤 顾勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1731-1735,共5页
目的:检测肺癌组织和3种肺癌细胞中Wip1的表达水平,探讨肺癌中Wip1的表达水平与其各种临床病理特征之间的关系。方法:利用实时荧光定量PCR检测44例肺癌及相应正常肺组织中Wip1 mRNA的表达,分析Wip1 mRNA表达与各临床病理参数之间的关系... 目的:检测肺癌组织和3种肺癌细胞中Wip1的表达水平,探讨肺癌中Wip1的表达水平与其各种临床病理特征之间的关系。方法:利用实时荧光定量PCR检测44例肺癌及相应正常肺组织中Wip1 mRNA的表达,分析Wip1 mRNA表达与各临床病理参数之间的关系;利用实时荧光定量PCR的方法检测人肺腺癌细胞A549、人鳞癌细胞NCI-1299、人大细胞肺癌细胞NCI-H460和人正常支气管上皮细胞HBE中Wip1 mRNA的表达量,进行相对定量分析。结果:44例非小细胞肺癌及相应正常肺组织均有Wip1 mRNA的表达,其中17例肺癌中Wip1mRNA高表达,占38.6%,两者表达差异显著(ratio=2.1644±1.3940,P<0.05);分化程度低的肿瘤细胞Wip1 mR-NA表达量显著高于分化程度高者(P<0.05)。3种肺癌细胞中的Wip1 mRNA表达量显著高于正常支气管上皮细胞,差异显著(均P<0.05)。结论:Wip1mRNA在非小细胞肺癌中过表达,可能与肿瘤发生有关,有望成为非小细胞肺癌基因治疗的新靶点。Wip1 mRNA在非小细胞肺癌中的表达与肿瘤细胞分化程度有关,可能成为确定肿瘤恶性程度的分子生物学参考指标。 展开更多
关键词 癌 非小细胞肺 基因 WIP1
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靶向沉默Wip1基因协同替莫唑胺抑制脑胶质瘤细胞增殖的作用 被引量：5
8
作者 王鹏 侯崇显 +4 位作者 詹升全 李炎稳 郭文龙 毛承亮 周东 《临床神经外科杂志》 CAS 2015年第1期1-4,共4页
目的研究靶向沉默Wip1基因对增敏替莫唑胺(TMZ)抑制脑胶质瘤细胞增殖作用的影响。方法体外培养人胶质瘤细胞株U-87MG,将携带Wip1基因RNA干扰载体的慢病毒感染U87-MG细胞。使用TMZ干预胶质瘤细胞,MTT法检测细胞的增殖,流式细胞术Annexin-... 目的研究靶向沉默Wip1基因对增敏替莫唑胺(TMZ)抑制脑胶质瘤细胞增殖作用的影响。方法体外培养人胶质瘤细胞株U-87MG,将携带Wip1基因RNA干扰载体的慢病毒感染U87-MG细胞。使用TMZ干预胶质瘤细胞,MTT法检测细胞的增殖,流式细胞术Annexin-V(APC染色)检测细胞的凋亡情况,流式细胞术PI染色法检测细胞周期。实验数据采用SPSS 16.0软件进行统计学分析。结果 Wip1基因沉默的胶质瘤细胞与空载体慢病毒对照组细胞对TMZ的作用对比,3d后细胞增殖率较对照组下降57.7%;Wip1基因沉默组TMZ处理5d后细胞凋亡率为15.3%,空载体对照组为5.65%;Wip1基因沉默组细胞凋亡率明显要高(P<0.05);细胞周期结果显示Wip1基因沉默组G2细胞为63.0%,而空载体对照组为23.8%,Wip1基因沉默组表现为G2/M期细胞明显增多(P<0.05)。结论靶向沉默Wip1基因可以显著增加TMZ对胶质瘤细胞增殖的抑制作用。 展开更多
关键词 WIP1 P53 胶质瘤细胞 替莫唑胺
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原癌基因Wip1在室管膜瘤中表达增加并与P53相关 被引量：4
9
作者 梁朝辉 焦保华 +1 位作者 郭二坤 卢圣奎 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第4期430-434,共5页
目的探讨野生型P53-诱导的蛋白磷酸酶1(Wip1)在室管膜瘤中的表达及其与P53相关性。方法用免疫组织化学、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测31例室管膜瘤及10例正常脑组织中Wip1mRNA、蛋白表达。并用免疫组化检测P53。同... 目的探讨野生型P53-诱导的蛋白磷酸酶1(Wip1)在室管膜瘤中的表达及其与P53相关性。方法用免疫组织化学、反转录聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot方法检测31例室管膜瘤及10例正常脑组织中Wip1mRNA、蛋白表达。并用免疫组化检测P53。同时,回顾性分析临床病理因素与Wip1表达之间的相关性。结果室管膜瘤中Wip1阳性表达率为19/31(60%),显著高于正常脑组织中的1/10(10%)(P<0.05)。31例室管膜瘤组织中P53阳性2例。Wip1 mRNA在室管膜瘤中表达相对量为0.34±0.07,显著高于正常脑组织的0.05±0.01(P<0.05)。室管膜瘤中Wip1蛋白表达相对量为0.83±0.16,显著高于正常脑组织的0.14±0.03(P<0.05)。Wip1表达与肿瘤大小、年龄、性别无关。结论 Wip1在室管膜瘤高表达,对P53表达可能起负反馈抑制作用,Wip1有望成为室管膜瘤预后及治疗的新靶点。 展开更多
关键词 室管膜瘤 WIP1 P53
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Wip1在肺癌细胞中的作用机制初探 被引量：2
10
作者 赵吉星 鲁建军 +2 位作者 孙磊 罗红鹤 顾勇 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第8期1619-1622,共4页
目的:检测Wip1及相关蛋白在肺癌细胞中的表达情况,探讨Wip1在肺癌发生中的作用机制。方法:Western blotting检测各种细胞(肺腺癌细胞A549、肺鳞癌细胞NCI-1299、大细胞肺癌细胞NCI-H460和正常支气管上皮细胞HBE)中Wip1、p53、p-p53、p38... 目的:检测Wip1及相关蛋白在肺癌细胞中的表达情况,探讨Wip1在肺癌发生中的作用机制。方法:Western blotting检测各种细胞(肺腺癌细胞A549、肺鳞癌细胞NCI-1299、大细胞肺癌细胞NCI-H460和正常支气管上皮细胞HBE)中Wip1、p53、p-p53、p38 MAPK和p-p38 MAPK蛋白的表达。结果:A549、NCI-1299和H460细胞中Wip1蛋白的表达均高于HBE细胞(P<0.05);各种肺癌细胞间Wip1蛋白的表达无明显差异(P>0.05);p-p53和p-p38 MAPK蛋白在肺癌细胞中的表达低于HBE细胞(P<0.05);肺癌细胞中Wip1表达增加,p-p38MAPK和p-p53表达降低,存在着Wip1-p38 MAPK-p53信号通路的失衡。结论:肺癌细胞(A549、NCI-1299、H460)中存在Wip1-p38 MAPK-p53信号通路的失衡。这可能是Wip1在肺癌中的致癌机制之一。 展开更多
关键词 肺癌细胞 WIP1 Wip1-p38MAPK-p53通路
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血清OPN、Wip1、HSP90α与晚期非小细胞肺癌患者一线化疗敏感性和预后的关系 被引量：4
11
作者 朱淑敏 马进 +4 位作者 耿玉兰 代丽丽 赵小洁 魏从真 刘金锋 《现代生物医学进展》 CAS 2023年第24期4740-4745,共6页
目的:探讨血清骨桥蛋白(OPN)、野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)、热休克蛋白90α(HSP90α)与晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者一线化疗敏感性和预后的关系。方法:选取2018年1月~2020年1月在河北医科大学附属第一医院接受一线化疗方案治疗的晚... 目的:探讨血清骨桥蛋白(OPN)、野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)、热休克蛋白90α(HSP90α)与晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者一线化疗敏感性和预后的关系。方法:选取2018年1月~2020年1月在河北医科大学附属第一医院接受一线化疗方案治疗的晚期NSCLC患者137例,根据化疗疗效分为化疗不敏感组(38例)和化疗敏感组(99例)。采用酶联免疫吸附法检测血清OPN、HSP90α水平,实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清Wip1 mRNA水平。多因素Logistic回归分析影响晚期NSCLC患者一线化疗敏感性的因素。随访3年,Kaplan-Meier法分析高/低血清OPN、Wip1 mRNA、HSP90α水平晚期NSCLC患者一线化疗后的预后情况。结果:与化疗敏感组比较,化疗不敏感组血清OPN、Wip1 mRNA、HSP90α水平升高(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示,低分化、TNM分期Ⅳ期和血清OPN、Wip1 mRNA、HSP90α水平升高为影响晚期NSCLC患者一线化疗敏感性的独立危险因素(P<0.05)。随访3年,137例晚期NSCLC患者总生存率为15.33%(21/137)。Kaplan-Meier生存曲线显示,血清OPN、Wip1 mRNA、HSP90α高水平组3年总生存率低于血清OPN、Wip1 mRNA、HSP90α低水平组(P<0.05)。结论:血清OPN、Wip1、HSP90α水平升高与晚期NSCLC患者一线化疗敏感性下降和预后不良有关。 展开更多
关键词 晚期非小细胞肺癌 OPN WIP1 HSP90Α 化疗敏感性 预后
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siRNA沉默Wip1基因对人肺腺癌细胞的影响 被引量：3
12
作者 汪旭东 孙磊 +2 位作者 鲁建军 罗红鹤 顾勇 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第21期3212-3214,共3页
目的向肺腺癌A549细胞中导入靶向Wip1的siRNA,研究其对肺腺癌细胞生物学活性的影响。方法设计并合成Wip1基因特异性的siRNA,通过脂质体介导将siRNA瞬时转染肺腺癌A549细胞,用荧光定量PCR检测转染后细胞内Wip1基因的表达水平,流式细胞学... 目的向肺腺癌A549细胞中导入靶向Wip1的siRNA,研究其对肺腺癌细胞生物学活性的影响。方法设计并合成Wip1基因特异性的siRNA,通过脂质体介导将siRNA瞬时转染肺腺癌A549细胞,用荧光定量PCR检测转染后细胞内Wip1基因的表达水平,流式细胞学检测A549细胞凋亡、增殖以及用划痕实验和Transwell实验检测细胞迁徙的情况。结果特异转染组中Wip1 mRNA表达明显降低,并且处于G1期细胞比例增加,S期细胞比例降低,侵袭细胞数及迁移率均明显低于非特异转染组,细胞凋亡未见差异性改变。结论靶向Wip1基因的siRNA能有效降低目的基因mRNA的表达水平,抑制A549细胞的生长并引起细胞侵袭力及迁移力下降。 展开更多
关键词 肺腺癌 WIP1 RNA干扰 细胞生物学特性
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玉米受伤诱导基因Wip1的启动子克隆及表达分析 被引量：4
13
作者 练云 刘允军 王国英 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第14期2889-2896,共8页
【目的】植物蛋白酶抑制剂是抵抗动物摄食和病原侵染的重要防御蛋白。玉米Wip1(wound-induced protein)基因属于Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)家族,了解Wip1(wound-induced protein)的启动子活性和Wip1组织表达特性、受胁迫诱导表达情... 【目的】植物蛋白酶抑制剂是抵抗动物摄食和病原侵染的重要防御蛋白。玉米Wip1(wound-induced protein)基因属于Bowman-Birk蛋白酶抑制剂(BBI)家族,了解Wip1(wound-induced protein)的启动子活性和Wip1组织表达特性、受胁迫诱导表达情况和在不同受伤时间下的表达模式,为抗虫基因在植物中应用提供新信息。【方法】以玉米叶片组织的cDNA为模板,采用克隆测序技术获得Wip1启动子序列和该基因的cDNA序列。将所得启动子与植物表达载体p1300连接,构建重组表达载体p1300-Wip1-GUS,并采用冻融法将其转入农杆菌LBA4404中。利用农杆菌介导的瞬时表达体系在玉米愈伤组织中对Wip1启动子的表达活性进行分析。利用热酚法提取玉米相应组织的总RNA,纯化后于含甲醛的变性胶中电泳分离,并将RNA转移到尼龙膜上,用[α-32P]dCTP标记探针的Northern blot技术对Wip1在玉米不同组织、不同胁迫条件、不同受伤时间下的表达模式进行分析。【结果】获得的启动子序列全长1 737 bp,cDNA全长512 bp。将含有重组质粒p1300-Wip1-GUS的农杆菌侵染玉米愈伤组织,3 d后,GUS染色显示侵染部位变蓝,说明所克隆的启动子在玉米愈伤中能启动GUS正常表达。基于Northern blot技术的植物组织表达结果显示,正常情况下,Wip1仅在胚芽鞘中有一定的表达,在受伤后的胚芽鞘、根、茎、叶、雌穗、雄穗、花丝及苞叶中均大量表达;在所设置的胁迫处理时间(2 h)内,Wip1不受缺氧、低温、脱水、PEG、ABA、NaCL和IAA胁迫诱导,仅受伤害胁迫诱导表达;Wip1在玉米叶片受伤胁迫下,玉米叶片受伤2 h时,检测到了Wip1表达,4—24 h时表达量迅速提高且处于持续增加趋势。【结论】玉米Wip1特异地受机械伤害诱导表达;Wip1启动子是一种有效的伤害诱导特异性启动子。 展开更多
关键词 玉米 受伤诱导 WIP1 丝氨酸蛋白酶抑制剂 Bowman-Birk
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Wip1基因在人脑胶质瘤组织中的表达及其与p53基因突变的相关性研究 被引量：2
14
作者 王鹏 饶竞 +3 位作者 杨海峰 姚东晓 赵洪洋 杨林 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第7期481-485,共5页
背景与目的:野生型p53诱导的磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase1,Wip1)是一种新发现的癌基因,其在多种肿瘤中存在过表达。本研究旨在探讨Wip1基因在脑胶质瘤组织中的表达及其与p53基因突变的相关性。方法:收集52例原发胶质瘤及... 背景与目的:野生型p53诱导的磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase1,Wip1)是一种新发现的癌基因,其在多种肿瘤中存在过表达。本研究旨在探讨Wip1基因在脑胶质瘤组织中的表达及其与p53基因突变的相关性。方法:收集52例原发胶质瘤及8例脑外伤或脑出血后行内减压术的正常脑组织标本,采用实时荧光定量PCR(real-time fluorogentic quantitative,RFQ-PCR)法检测脑胶质瘤组织中Wip1mRNA的表达,Western blot法检测Wip1蛋白的表达,DNA直接测序法检测脑胶质瘤组织中p53基因的突变情况。统计学分析不同脑胶质瘤病理分级及p53的突变状态间Wip1的表达水平的差异。结果:52例脑胶质瘤中22例(42.3%)发生p53基因突变。Wip1 mRNA在高级别胶质瘤(Ⅲ～Ⅳ级)中的表达水平较低级别胶质瘤(Ⅰ～Ⅱ级)及正常脑组织中的表达要略高,但差异无统计学意义(P<0.05)。Wip1基因在无p53基因突变的胶质瘤组织中的表达水平较p53基因突变组要高,差异有统计学意义(P=0.009)。Wip1在野生型p53的胶质瘤中存在选择性的过表达,Wip1在胶质瘤中的过表达与病理分级无明显相关,而与p53的突变状态有关。结论:Wip1基因在脑胶质瘤中存在选择性地过表达,其过表达与p53基因野生型状态相关,可能是胶质瘤恶性进展中除p53基因突变外的另一关键作用因素。 展开更多
关键词 胶质瘤 Wip1基因 P53 基因突变
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原癌基因Wip1在卵巢癌中的表达及临床意义 被引量：2
15
作者 顾笑梅 康晓芳 +1 位作者 高淑凤 李娟 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第24期3478-3480,共3页
目的观察原癌基因Wip1在卵巢癌患者中的表达及临床意义。方法选取该院2002年1月至2012年1月收治的120例卵巢癌患者为观察对象,所有患者均经病理检查确诊。另选取同期活检正常卵巢组织120例作为对照,采用免疫组化法检测Wip1蛋白并进行比... 目的观察原癌基因Wip1在卵巢癌患者中的表达及临床意义。方法选取该院2002年1月至2012年1月收治的120例卵巢癌患者为观察对象,所有患者均经病理检查确诊。另选取同期活检正常卵巢组织120例作为对照,采用免疫组化法检测Wip1蛋白并进行比较分析。结果正常卵巢组织细胞中,Wip1免疫组化染色阴性或微弱。卵巢癌组织中Wip1染色呈浅黄色至黄褐色不等。采用蛋白质免疫印迹检测的Wip1蛋白在卵巢癌组织的阳性表达率为73.5%(88/120),高于正常卵巢组织20.8%(25/120),差异具有统计学意义(P<0.05),与P53表达水平存在关联(P<0.05)。结论 Wip1在卵巢癌中表达量高于正常卵巢组织,且其水平与年龄、雌孕激素状态、HER2、淋巴结状态、TNM分期均无关,与P53表达水平存在关联。 展开更多
关键词 WIP1 卵巢癌 基因表达
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WIP1基因对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响及其在小鼠不同生长阶段的表达 被引量：2
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作者 王楠 冯保亮 +7 位作者 郑云曦 黄雷 王悦 徐松松 张秀玲 刘志国 李奎 牟玉莲 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2022年第8期2869-2879,共11页
【目的】探究野生型p53诱导磷酸酶1(WIP1)基因与脂肪细胞增殖和分化的关系,以期为猪优质性状育种提供新基因素材。【方法】利用脂质体转染方法将合成的WIP1基因的3对siRNAs(WIP1-790、WIP1-893和WIP1-1845)和阴性对照NC-siRNA分别转染3T... 【目的】探究野生型p53诱导磷酸酶1(WIP1)基因与脂肪细胞增殖和分化的关系,以期为猪优质性状育种提供新基因素材。【方法】利用脂质体转染方法将合成的WIP1基因的3对siRNAs(WIP1-790、WIP1-893和WIP1-1845)和阴性对照NC-siRNA分别转染3T3-L1前脂肪细胞,通过实时荧光定量PCR检测WIP1基因的表达水平,比较不同siRNA的干扰效率。然后利用筛选到的干扰效率最高的siRNA敲减WIP1基因在3T3-L1前脂肪细胞中的表达,通过CCK-8检测siRNA敲减细胞和NC-siRNA细胞不同生长时期(0、12、24、48、72、96和120 h)的增殖情况,并通过实时荧光定量PCR检测上述2种细胞24和48 h的细胞周期蛋白B1(Cyclin B1)和Cyclin D1的表达水平。对干扰效率最高的siRNA和NC-siRNA组3T3-L1前脂肪细胞进行成脂诱导分化,通过油红O染色和甘油三酯定量法评估成脂分化效率,利用实时荧光定量PCR检测过氧化物酶体增殖物活化受体γ(PPARγ)、CCAAT/增强子结合蛋白α(C/EBPα)、脂肪酸结合蛋白4(FABP4)、硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD1)的表达水平,Western blotting法检测PPARγ蛋白的表达水平;通过实时荧光定量PCR检测WIP1基因在21日龄、8周龄和6月龄小鼠腹股沟皮下脂肪组织和性腺脂肪组织的时空表达情况。【结果】基因干扰试验结果显示,3对siRNAs对WIP1基因的表达均具有极显著的干扰作用(P<0.01),其中WIP1-790的干扰效率最高,达到了70%以上。CCK-8检测结果显示,与NC-siRNA组相比,WIP1-790干扰组细胞的增殖速率在各生长时期均极显著降低(P<0.01),且细胞周期基因Cyclin B1和Cyclin D1的表达量在24和48 h均极显著下调(P<0.01)。成脂诱导分化结果显示,与NC-siRNA组相比,WIP1-790干扰组细胞在成脂分化第8天油红O染色阳性细胞明显减少,脂滴含量极显著降低(P<0.01),甘油三酯含量显著降低(P<0.05);PPARγ、C/EBPα、FABP4、SCD1等标记基因mRNA表达水平均极显著降低(P<0.01),PPARγ蛋白表达水平极显著降低(P<0.01)。WIP1基因在8周龄和6月龄小鼠的腹股沟皮下脂肪组织中的表达量分别显著或极显著高于21日龄小鼠(P<0.05;P<0.01),且在6月龄小鼠的性腺脂肪组织中,WIP1基因的表达量极显著高于21日龄和8周龄的小鼠(P<0.01)。【结论】WIP1基因通过调控Cyclin B1、Cyclin D1和PPARγ等细胞周期和成脂分化相关基因的表达影响3T3-L1细胞的增殖和分化,且参与小鼠脂肪沉积过程,结果可为深入解析WIP1基因调控脂肪发生的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 WIP1基因 细胞增殖 成脂分化 脂肪沉积
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p53抑癌基因在腺样囊性癌中的作用 被引量：8
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作者 彭彩霞 王晓峰 王聪 《现代肿瘤医学》 CAS 2016年第6期1014-1016,共3页
腺样囊性癌是头颈部较常见的恶性肿瘤之一,其特点为嗜神经性及远处转移,手术和放化疗效果及预后较差,为了提高患者的远期生存率,迫切需要寻找新的治疗方法,而p53基因是一种重要的抑癌基因,近年来在恶性肿瘤中的作用日益受到重视,因此可... 腺样囊性癌是头颈部较常见的恶性肿瘤之一,其特点为嗜神经性及远处转移,手术和放化疗效果及预后较差,为了提高患者的远期生存率,迫切需要寻找新的治疗方法,而p53基因是一种重要的抑癌基因,近年来在恶性肿瘤中的作用日益受到重视,因此可作腺样囊性癌治疗的重要途径来探讨。 展开更多
关键词 腺样囊性癌 上皮间充质转变 P53 BECLIN1 WIP1 P-GP klf17
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野生型p53诱导的磷酸酶1与肿瘤发生发展及耐药关系的研究进展 被引量：2
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作者 杨臻 田晓琳 +1 位作者 王建英 许亚梅 《中国全科医学》 CAS CSCD 北大核心 2016年第5期605-610,共6页
野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,是PP2C家族成员。Wip1基因是一种原癌基因,可协同其他癌基因及致癌信号通路促进肿瘤形成,在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。本文从抑制DNA损伤应答、抑制INK4a/ARF信号通路及... 野生型p53诱导的磷酸酶1(Wip1)属于丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶,是PP2C家族成员。Wip1基因是一种原癌基因,可协同其他癌基因及致癌信号通路促进肿瘤形成,在肿瘤的发生发展中发挥重要作用。本文从抑制DNA损伤应答、抑制INK4a/ARF信号通路及调控肿瘤细胞侵袭、转移和凋亡相关蛋白表达等方面阐述Wip1基因促进肿瘤发生发展的机制,指出Wip1基因促进肿瘤发生发展过程涉及的相关信号转导分子,分析Wip1基因在肿瘤细胞化疗耐药、放疗抵抗中的作用。 展开更多
关键词 Wip1基因 肿瘤形成过程 基因 p53 DNA损伤 基因调控网络 抗药性 肿瘤
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原癌基因Wip1在子宫内膜癌组织中表达水平的研究 被引量：1
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作者 顾笑梅 李娟 +2 位作者 高淑凤 郑玮 张浩 《国际检验医学杂志》 CAS 2017年第16期2210-2212,2215,共4页
目的观察子宫内膜癌患者临床分期、预后与Wip1表达量的关系。方法收集唐山市妇幼保健院2002年1月至2012年1月手术的120例子宫内膜癌患者,经手术切除子宫内膜癌蜡块标本作为实验组,标本均被病理证实,同期活检正常的子宫内膜标本120例作... 目的观察子宫内膜癌患者临床分期、预后与Wip1表达量的关系。方法收集唐山市妇幼保健院2002年1月至2012年1月手术的120例子宫内膜癌患者,经手术切除子宫内膜癌蜡块标本作为实验组,标本均被病理证实,同期活检正常的子宫内膜标本120例作为对照组。检测Wip1在2组中的表达水平。结果 (1)Wip1免疫组化染色结果:正常子宫内膜组织细胞中,Wip1免疫组化染色阴性或微弱。子宫内膜癌组织中Wip1染色呈浅黄色至黄褐色不等。Wip1蛋白在子宫内膜癌组织中的阳性表达率为77.5%(93/120),高于正常内膜组织22.5%(27/120),差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)Wip1蛋白在子宫内膜癌组织、正常内膜组织Western blot结果:Wip1蛋白在子宫内膜癌组织的相对含量为0.635±0.023。高于正常内膜组织的0.325±0.018,两组之间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。(3)各样品实时荧光定量PCR结果:Wip1mRNA表达在子宫内膜癌组织高于正常内膜组织,基因表达值分别为0.628±0.053、0.191±0.009,两组之间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。(4)Wip1的表达水平与年龄、雌孕激素状态、HER2、淋巴结状态、TNM分期均无关(P>0.05),与P53表达水平存在关联(P<0.05)。结论 (1)子宫内膜癌中Wip1表达量高,而正常内膜组织表达量低。(2)Wip1的表达水平与年龄、雌孕激素状态、HER2、淋巴结状态、TNM分期均无关,与P53表达水平存在关联。 展开更多
关键词 WIP1 子宫内膜癌 基因沉默
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Wip1基因在人脑胶质瘤细胞恶性增殖中的作用及其机制 被引量：1
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作者 王鹏 詹升全 +4 位作者 林晓风 周德祥 李炎稳 侯崇显 周东 《中国微侵袭神经外科杂志》 CAS 2015年第10期462-465,共4页
目的研究Wip1基因在人脑胶质瘤细胞增殖的作用及机制。方法构建人Wip1基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默胶质瘤细胞U251及U87-MG细胞的Wip1基因表达,检测细胞增殖能力。流式细胞术PI单染法检测Wip1基因沉默后细胞周期分布。实时定量... 目的研究Wip1基因在人脑胶质瘤细胞增殖的作用及机制。方法构建人Wip1基因RNA干扰(RNAi)慢病毒载体,有效沉默胶质瘤细胞U251及U87-MG细胞的Wip1基因表达,检测细胞增殖能力。流式细胞术PI单染法检测Wip1基因沉默后细胞周期分布。实时定量PCR法及Western blotting分别检测差异性基因m RNA及蛋白表达。结果胶质瘤细胞Wip1基因表达被有效沉默。Wip1基因沉默的胶质瘤细胞增殖变慢,在U87-MG细胞更加明显。细胞周期分析显示:Wip1基因沉默对U251细胞周期无明显影响,而U87-MG细胞则在10 d时出现明显S期增多和G1、G2期细胞减少。Wip1基因沉默后,U251细胞中CDKN2A和p14ARF基因表达下调,而在U87-MG细胞中表达均上调。Western blotting结果显示:在U251与U87-MG胶质瘤细胞中p38MAPK表达均上调。在U87-MG细胞中p53及p-p53(Ser 15)表达均上调,但在U251细胞中无明显变化。结论 Wip1对胶质瘤细胞增殖具有重要作用。在U87-MG细胞增殖作用主要与其调节p53功能有关。 展开更多
关键词 神经胶质瘤 WIP1 P53 增殖 基因
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