对大眼双锯鱼(Amphiprion ephippium)热休克蛋白A家族1B(heat shock protein family a member 1B,HSPA1B)的分子特征及其在运输状态下的表达模式进行了探讨。以大眼双锯鱼为实验材料,取其肝脏组织样品,提取RNA逆转录后进行HSPA1B基因克...对大眼双锯鱼(Amphiprion ephippium)热休克蛋白A家族1B(heat shock protein family a member 1B,HSPA1B)的分子特征及其在运输状态下的表达模式进行了探讨。以大眼双锯鱼为实验材料,取其肝脏组织样品,提取RNA逆转录后进行HSPA1B基因克隆,然后使用实时荧光定量PCR的方法检测HSPA1B基因在各个组织中的表达情况。同时构建在运输状态下的应激模型,通过实时荧光定量PCR技术分析不同组织中HSPA1B基因在不同运输阶段的表达变化。结果显示,HSPA1B基因ORF全长1734 bp,编码577个氨基酸残基,预测其分子质量大小约为63.94×10^(3)u,理论等电点pI为5.42。构建系统进化发育树显示,大眼双锯鱼HSPA1B蛋白与眼斑双锯鱼(Amphiprion ocellaris)HSPA1B聚为一支,相似度高达99.13%。HSPA1B基因广泛分布于大眼双锯鱼(A.ephippium)各组织中,相比于肠道组织,在肌肉中表达量最高,其次是脑组织和皮肤组织,其他所测组织中表达量较低。除肝脏外,大眼双锯鱼(A.ephippium)HSPA1B基因在运输胁迫前期(6 h)即出现显著响应,表达上调,在运输中期(12 h,24 h)达到峰值,运输后期表达量下调,并维持一定量的高表达。HSPA1B基因参与大眼双锯鱼免疫组织应激性免疫应答,由此可将HSPA1B基因作为大眼双锯鱼是否处于应激状态的重要指标。展开更多
文摘对大眼双锯鱼(Amphiprion ephippium)热休克蛋白A家族1B(heat shock protein family a member 1B,HSPA1B)的分子特征及其在运输状态下的表达模式进行了探讨。以大眼双锯鱼为实验材料,取其肝脏组织样品,提取RNA逆转录后进行HSPA1B基因克隆,然后使用实时荧光定量PCR的方法检测HSPA1B基因在各个组织中的表达情况。同时构建在运输状态下的应激模型,通过实时荧光定量PCR技术分析不同组织中HSPA1B基因在不同运输阶段的表达变化。结果显示,HSPA1B基因ORF全长1734 bp,编码577个氨基酸残基,预测其分子质量大小约为63.94×10^(3)u,理论等电点pI为5.42。构建系统进化发育树显示,大眼双锯鱼HSPA1B蛋白与眼斑双锯鱼(Amphiprion ocellaris)HSPA1B聚为一支,相似度高达99.13%。HSPA1B基因广泛分布于大眼双锯鱼(A.ephippium)各组织中,相比于肠道组织,在肌肉中表达量最高,其次是脑组织和皮肤组织,其他所测组织中表达量较低。除肝脏外,大眼双锯鱼(A.ephippium)HSPA1B基因在运输胁迫前期(6 h)即出现显著响应,表达上调,在运输中期(12 h,24 h)达到峰值,运输后期表达量下调,并维持一定量的高表达。HSPA1B基因参与大眼双锯鱼免疫组织应激性免疫应答,由此可将HSPA1B基因作为大眼双锯鱼是否处于应激状态的重要指标。
