目的:探讨缺氧诱导的基因结构域家族成员1A(hypoxia-induced gene domain family member 1A,HIGD1A)在多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导的大鼠H9c2心肌细胞焦亡中的作用及机制。方法:以大鼠H9c2心肌细胞为研究对象,实验分为以下7组:对照组...目的:探讨缺氧诱导的基因结构域家族成员1A(hypoxia-induced gene domain family member 1A,HIGD1A)在多柔比星(doxorubicin,DOX)诱导的大鼠H9c2心肌细胞焦亡中的作用及机制。方法:以大鼠H9c2心肌细胞为研究对象,实验分为以下7组:对照组、DOX组、沉默对照(siNC)组、沉默Higd1a(siHigd1a)组、siNC+DOX组、siHigd1a+DOX组和siHigd1a+DOX+MCC950[核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)抑制剂]组。DOX(5μmol/L)处理24 h构建大鼠H9c2心肌细胞损伤模型,利用siRNA沉默Higd1a基因。采用DHE染色检测各组细胞中活性氧(reactive oxygen species,ROS)含量;TMRE染色法评估线粒体功能;Western blot法检测各组细胞焦亡相关蛋白的表达量;利用乳酸脱氢酶试剂盒检测心肌细胞的损伤情况。结果:与对照组相比,DOX处理使H9c2心肌细胞活力显著下降(P<0.01),HIGD1A的mRNA和蛋白表达量均显著降低(P<0.05)。与siNC+DOX组相比,沉默Higd1a后加重DOX诱导的ROS生成与线粒体膜电位下降(P<0.01),并且增加NLRP3、焦孔蛋白D剪切片段(gasdermin D cleaved fragment,GSDMD CL)、cleaved caspase-1、白细胞介素18(interleukin-18,IL-18)表达量(P<0.01),促进心肌细胞损伤标志物乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放(P<0.01)。进一步加入NLRP3抑制剂MCC950可部分逆转沉默Higd1a导致的心肌细胞焦亡增加(P<0.05)。结论:DOX处理可下调大鼠H9c2心肌细胞HIGD1A表达,沉默Higd1a基因通过促进线粒体功能障碍及心肌细胞焦亡参与DOX导致的心肌细胞损伤,其机制与抑制ROS/NLRP3信号途径介导的心肌细胞焦亡有关。展开更多
基金supported by the Shanxi Province Overseas Returnees Research Funding Project(No.2023-102)Shanxi Province Postgraduate Research Innovation Program(No.2023KY385,2023KY360,2022Y396)。
文摘目的探讨宫颈癌(cervical cancer,CC)组织中组蛋白赖氨酸特异性去甲基化酶1A[lysine(K)-specific demethylase,KDM1A]、应激诱导磷蛋白1(stress-induced phosphoprotein 1,STIP1)、叉头框蛋白O3A(forkhead box O3A,FOXO3A)表达及其与临床病理特征及预后的关系。方法招募2020年1月~2022年2月于洛阳市妇幼保健院行手术治疗的CC患者147例。采用免疫组化法检测组织KDM1A、STIP1、FOXO3A蛋白表达,采用Kaplan-Meier生存曲线分析生存情况,采用COX回归分析预后影响因素。结果CC组织中KDM1A、STIP1蛋白阳性表达率显著高于癌旁正常组织,FOXO3A蛋白阳性表达率显著低于癌旁正常组织(P<0.05)。三者异常表达与国际妇产科联盟(federation international of gynecology and obstetrics,FIGO)分期、淋巴结转移有关(P<0.05)。预后不良组KDM1A、STIP1蛋白阳性表达显著高于预后良好组,FOXO3A蛋白阳性表达显著低于预后良好组(P<0.05)。KDM1A、STIP1阳性表达者3年无进展生存率(59.79%、54.65%)低于阴性表达者(76.00%、80.33%)(Log-Rankχ^(2)分别为5.664、12.870,P<0.05);FOXO3A阳性表达者3年无进展生存率(89.09%)高于FOXO3A阴性表达者(51.09%)(Log-Rankχ^(2)=23.150,P<0.001)。FIGO分期、淋巴结转移及癌组织KDM1A、STIP1、FOXO3A蛋白表达是CC患者预后的影响因素(P<0.05)。结论KDM1A、STIP1蛋白阳性表达及FOXO3A蛋白阴性表达可能与CC进展相关,是潜在的预后标志物。
