目的:通过对C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞的培养、诱导分化及鉴定,深入探讨棕色脂肪细胞的生物学特性,为人类棕色脂肪细胞的相关研究提供实验参考与理论依据。方法:C3H10T1/2细胞经细胞接种、培养及诱导分化处理,利用光学显微...目的:通过对C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞的培养、诱导分化及鉴定,深入探讨棕色脂肪细胞的生物学特性,为人类棕色脂肪细胞的相关研究提供实验参考与理论依据。方法:C3H10T1/2细胞经细胞接种、培养及诱导分化处理,利用光学显微镜观察细胞形态变化,并通过油红O染色、免疫荧光法、线粒体探针法以及线粒体电镜技术对分化细胞进行鉴定分析。结果:未分化的C3H10T1/2细胞形态多样,具有突触伸展特征;分化后的细胞逐渐变为圆形或椭圆形,形成环形脂滴;未分化组细胞形态无明显变化。油红O染色显示,未分化组细胞基本无染色,而分化组中约90%的细胞红染,脂滴分布于细胞核周围,吸光度值显著升高(P<0.05)。分化组解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)、过氧化物酶体增殖激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)辅激活因子1α(PPARγco-activator-1α,PGC-1α)、PPARγ和转录因子PRDM16的相对荧光强度和蛋白表达量显著高于未分化组(P<0.05),且线粒体活性增强。结论:本研究成功诱导C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞,结合细胞形态观察、关键蛋白表达检测及线粒体功能分析进行综合评估,证实了细胞的有效分化及成熟棕色脂肪细胞的功能特性。展开更多
本文旨在探究富含天冬氨酸尾1的单通道膜蛋白(Single-pass Membrane Protein With Aspartate Rich Tail1,Smdt1)对C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化的调控效应。本研究将Smdt1基因的过表达和干扰载体转染至C3H10T1/2细胞模型,采用qPCR方法...本文旨在探究富含天冬氨酸尾1的单通道膜蛋白(Single-pass Membrane Protein With Aspartate Rich Tail1,Smdt1)对C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化的调控效应。本研究将Smdt1基因的过表达和干扰载体转染至C3H10T1/2细胞模型,采用qPCR方法量化了增殖和成脂分化关键基因的表达水平变化,利用EdU染色检测细胞增殖活力,油红O染色方法鉴定脂滴积累的状态;进一步通过String database、Bio GRID、Int Act、GeneMANIA、DAVID和Genecard数据库构建Smdt1蛋白互作网络图。结果显示,在C3H10T1/2细胞中过表达Smdt1,极显著提升了增殖标志基因Pcna、Ki67、Cdk1及Cdk4的表达,EdU阳性细胞比例反映了细胞增殖速率加快;Smdt1极显著促进成脂分化关键基因Pparγ、Fabp4、-Adipoq的表达量,显著促进了Cebpα、Cebpβ的表达量,脂滴数量变多。在C3H10T1/2细胞体系中,干扰Smdt1,与增殖紧密相关的标志基因,包括Ki67、Pcna及Cdk1,其表达水平极显著降低,Cdk4的表达也呈现显著降低的趋势,反映在EdU增殖检测中,阳性细胞数量明显减少,细胞增殖活性受到抑制。进一步干扰Smdt1后,成脂分化途径的关键调控基因Cebpα、Pparγ、Cebpβ、Fabp4、Adipoq的表达均极显著降低,细胞内脂滴的数量也显著减少,细胞成脂分化能力削弱。蛋白功能预测发现,Smdt1能够与Mcu相互作用,参与线粒体钙离子转运、摄取和稳态。本研究发现Smdt1可以促进C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化,为脂肪沉积的研究提供了新的方向。展开更多
目的:探讨小豆蔻明抑制C3H10T1/2细胞成脂分化的作用机制。方法:观察C3H10T1/2细胞成脂过程形态学变化,采用MTS法、油红O染色法、GAP-PAP酶法检测小豆蔻明对C3H10T1/2细胞增殖、成脂分化以及胞内甘油三酯含量的影响,采用RT-PCR与Western...目的:探讨小豆蔻明抑制C3H10T1/2细胞成脂分化的作用机制。方法:观察C3H10T1/2细胞成脂过程形态学变化,采用MTS法、油红O染色法、GAP-PAP酶法检测小豆蔻明对C3H10T1/2细胞增殖、成脂分化以及胞内甘油三酯含量的影响,采用RT-PCR与Western Blot技术检测小豆蔻明对C3H10T1/2细胞PPARγ、C/EBPα和FABP4 m RNA以及蛋白表达的影响。结果:60、80、100μmol/L小豆蔻明能够显著抑制C3H10T1/2细胞存活率(P<0.01);5、10、30μmol/L小豆蔻明能够抑制C3H10T1/2细胞脂滴的形成,从而抑制成脂分化;5、10、30μmol/L小豆蔻明能够显著降低细胞中甘油三酯的含量(P<0.05,P<0.01);10、30μmol/L小豆蔻明能够显著下调PPARγ、C/EBPα和FABP4 m RNA的表达(P<0.05,P<0.01);5、10、30μmol/L小豆蔻明能够显著降低成脂关键转录因子PPARγ、C/EBPα和成脂分化标志因子FABP4蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:小豆蔻明通过下调PPARγ、C/EBPα、FABP4 m RNA以及蛋白表达抑制细胞成脂分化并降低胞内甘油三酯含量。展开更多
As one of the 2D transition metal sulfides,1T phase MoS_(2) nanosheets(NSs)have been studied because of their distinguished conductivity and suitable electronic structure.Nevertheless,the active sites are limited to a...As one of the 2D transition metal sulfides,1T phase MoS_(2) nanosheets(NSs)have been studied because of their distinguished conductivity and suitable electronic structure.Nevertheless,the active sites are limited to a small number of edge sites only,while the basal plane is catalytically inert.Herein,we report that boron(B)doped 1T phase MoS_(2) NSs can replace precious metals as a co-catalyst to assist in photocatalytic H_(2) production of 2D layered g-C_(3)N_(4) nanosheets(g-C_(3)N_(4) NSs).The H_(2) evolution rate of prepared B-MoS_(2)@g-C_(3)N_(4) composites with 15 wt%B-MoS_(2)(B-MoS_(2)@g-C_(3)N_(4)–15,1612.75μmol h^(−1) g^(−1))is 52.33 times of pure g-C_(3)N_(4) NSs(30.82μmol h^(−1) g^(−1)).Furthermore,the apparent quantum efficiency(AQE)of B-MoS_(2)@g-C_(3)N_(4)–15 composites under the light atλ=370 nm is calculated and reaches 5.54%.The excellent photocatalytic performance of B-MoS_(2)@g-C_(3)N_(4)–15 composites is attributed to the B ions doping inducing the distortion of 1T phase MoS_(2) crystal,which can activate more base planes to offer more active sites for H_(2) evolution reaction(HER).This work of B-MoS_(2)@g-C_(3)N_(4) composites offers experience in the progress of effective and low-price photocatalysts for HER.展开更多
该文研究了在诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2细胞成骨分化过程中miR-155的作用及其是否是通过调控BMP9/Smad(bonemorphogenetic protein 9/drosophila mothers against de-capentaplegic)信号通路发挥作用。在诱导C3H10T1/2细胞成骨分...该文研究了在诱导小鼠间充质干细胞C3H10T1/2细胞成骨分化过程中miR-155的作用及其是否是通过调控BMP9/Smad(bonemorphogenetic protein 9/drosophila mothers against de-capentaplegic)信号通路发挥作用。在诱导C3H10T1/2细胞成骨分化过程中,采用实时定量PCR(Real-time quantitative PCR,q RT-PCR)检测miR-155水平的变化。转染miR-155模拟剂(miR-155)至C3H10T1/2细胞后,miR-155水平显著增高(P<0.001),而转染其抑制剂(anti-miR-155)至C3H10T1/2细胞后,miR-155水平显著降低(P<0.001)。转染后成骨诱导培养基诱导成骨7 d,碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)活性及染色结果显示,miR-155能显著降低C3H10T1/2细胞成骨分化过程中的ALP活性(P<0.01)、减弱ALP染色,而anti-miR-155则能逆转其作用。成骨诱导14 d茜素红S染色结果显示,miR-155组钙盐结节较对照组少,下调miR-155的水平后,钙盐沉积结节增多。q RT-RCR检测结果显示,miR-155显著降低BMP9 m RNA水平(P<0.001),且miR-155组成骨基因Runx2和ALP表达均显著低于对照NC组(P<0.05、P<0.01)。Western blot检测BMP9、Runx2和p-Smad1/5/8蛋白质水平,结果显示,miR-155组蛋白质水平均显著降低(P<0.01、P<0.05、P<0.001)。该研究结果提示,miR-155对C3H10T1/2细胞成骨分化的抑制作用可能是通过抑制BMP9/Smad信号通路发挥作用的。展开更多
文摘目的:通过对C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞的培养、诱导分化及鉴定,深入探讨棕色脂肪细胞的生物学特性,为人类棕色脂肪细胞的相关研究提供实验参考与理论依据。方法:C3H10T1/2细胞经细胞接种、培养及诱导分化处理,利用光学显微镜观察细胞形态变化,并通过油红O染色、免疫荧光法、线粒体探针法以及线粒体电镜技术对分化细胞进行鉴定分析。结果:未分化的C3H10T1/2细胞形态多样,具有突触伸展特征;分化后的细胞逐渐变为圆形或椭圆形,形成环形脂滴;未分化组细胞形态无明显变化。油红O染色显示,未分化组细胞基本无染色,而分化组中约90%的细胞红染,脂滴分布于细胞核周围,吸光度值显著升高(P<0.05)。分化组解偶联蛋白1(uncoupling protein 1,UCP1)、过氧化物酶体增殖激活受体γ(peroxisome proliferator-activated receptorγ,PPARγ)辅激活因子1α(PPARγco-activator-1α,PGC-1α)、PPARγ和转录因子PRDM16的相对荧光强度和蛋白表达量显著高于未分化组(P<0.05),且线粒体活性增强。结论:本研究成功诱导C3H10T1/2细胞分化为成熟棕色脂肪细胞,结合细胞形态观察、关键蛋白表达检测及线粒体功能分析进行综合评估,证实了细胞的有效分化及成熟棕色脂肪细胞的功能特性。
文摘本文旨在探究富含天冬氨酸尾1的单通道膜蛋白(Single-pass Membrane Protein With Aspartate Rich Tail1,Smdt1)对C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化的调控效应。本研究将Smdt1基因的过表达和干扰载体转染至C3H10T1/2细胞模型,采用qPCR方法量化了增殖和成脂分化关键基因的表达水平变化,利用EdU染色检测细胞增殖活力,油红O染色方法鉴定脂滴积累的状态;进一步通过String database、Bio GRID、Int Act、GeneMANIA、DAVID和Genecard数据库构建Smdt1蛋白互作网络图。结果显示,在C3H10T1/2细胞中过表达Smdt1,极显著提升了增殖标志基因Pcna、Ki67、Cdk1及Cdk4的表达,EdU阳性细胞比例反映了细胞增殖速率加快;Smdt1极显著促进成脂分化关键基因Pparγ、Fabp4、-Adipoq的表达量,显著促进了Cebpα、Cebpβ的表达量,脂滴数量变多。在C3H10T1/2细胞体系中,干扰Smdt1,与增殖紧密相关的标志基因,包括Ki67、Pcna及Cdk1,其表达水平极显著降低,Cdk4的表达也呈现显著降低的趋势,反映在EdU增殖检测中,阳性细胞数量明显减少,细胞增殖活性受到抑制。进一步干扰Smdt1后,成脂分化途径的关键调控基因Cebpα、Pparγ、Cebpβ、Fabp4、Adipoq的表达均极显著降低,细胞内脂滴的数量也显著减少,细胞成脂分化能力削弱。蛋白功能预测发现,Smdt1能够与Mcu相互作用,参与线粒体钙离子转运、摄取和稳态。本研究发现Smdt1可以促进C3H10T1/2细胞增殖和成脂分化,为脂肪沉积的研究提供了新的方向。
文摘目的:探讨小豆蔻明抑制C3H10T1/2细胞成脂分化的作用机制。方法:观察C3H10T1/2细胞成脂过程形态学变化,采用MTS法、油红O染色法、GAP-PAP酶法检测小豆蔻明对C3H10T1/2细胞增殖、成脂分化以及胞内甘油三酯含量的影响,采用RT-PCR与Western Blot技术检测小豆蔻明对C3H10T1/2细胞PPARγ、C/EBPα和FABP4 m RNA以及蛋白表达的影响。结果:60、80、100μmol/L小豆蔻明能够显著抑制C3H10T1/2细胞存活率(P<0.01);5、10、30μmol/L小豆蔻明能够抑制C3H10T1/2细胞脂滴的形成,从而抑制成脂分化;5、10、30μmol/L小豆蔻明能够显著降低细胞中甘油三酯的含量(P<0.05,P<0.01);10、30μmol/L小豆蔻明能够显著下调PPARγ、C/EBPα和FABP4 m RNA的表达(P<0.05,P<0.01);5、10、30μmol/L小豆蔻明能够显著降低成脂关键转录因子PPARγ、C/EBPα和成脂分化标志因子FABP4蛋白的表达(P<0.05,P<0.01)。结论:小豆蔻明通过下调PPARγ、C/EBPα、FABP4 m RNA以及蛋白表达抑制细胞成脂分化并降低胞内甘油三酯含量。
基金fundings from the National Natural Science Foundation of China(No.51872173)Taishan Scholars Program of Shandong Province(No.tsqn201812068)+1 种基金Natural Science Foundation of Shandong Province(No.ZR2022JQ21)Higher School Youth Innovation Team of Shandong Province(No.2019KJA013).
文摘As one of the 2D transition metal sulfides,1T phase MoS_(2) nanosheets(NSs)have been studied because of their distinguished conductivity and suitable electronic structure.Nevertheless,the active sites are limited to a small number of edge sites only,while the basal plane is catalytically inert.Herein,we report that boron(B)doped 1T phase MoS_(2) NSs can replace precious metals as a co-catalyst to assist in photocatalytic H_(2) production of 2D layered g-C_(3)N_(4) nanosheets(g-C_(3)N_(4) NSs).The H_(2) evolution rate of prepared B-MoS_(2)@g-C_(3)N_(4) composites with 15 wt%B-MoS_(2)(B-MoS_(2)@g-C_(3)N_(4)–15,1612.75μmol h^(−1) g^(−1))is 52.33 times of pure g-C_(3)N_(4) NSs(30.82μmol h^(−1) g^(−1)).Furthermore,the apparent quantum efficiency(AQE)of B-MoS_(2)@g-C_(3)N_(4)–15 composites under the light atλ=370 nm is calculated and reaches 5.54%.The excellent photocatalytic performance of B-MoS_(2)@g-C_(3)N_(4)–15 composites is attributed to the B ions doping inducing the distortion of 1T phase MoS_(2) crystal,which can activate more base planes to offer more active sites for H_(2) evolution reaction(HER).This work of B-MoS_(2)@g-C_(3)N_(4) composites offers experience in the progress of effective and low-price photocatalysts for HER.
