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塞络通调控miR-199a-5p/Cav1信号轴改善缺血性脑卒中的作用机制
1
作者 范晓迪 张业昊 +2 位作者 王光蕊 李澎 刘建勋 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第4期1655-1660,共6页
目的:探讨塞络通(SLT)在缺血性脑卒中发展过程中的作用机制。方法:脑立体定位注射腺相关病毒AAV-miR-199a-5p-inhibition试剂21 d后,构建线栓阻断大脑中动脉大鼠脑缺血模型,分为假手术组、模型组、miR-199a-5p敲低组和SLT组。通过神经... 目的:探讨塞络通(SLT)在缺血性脑卒中发展过程中的作用机制。方法:脑立体定位注射腺相关病毒AAV-miR-199a-5p-inhibition试剂21 d后,构建线栓阻断大脑中动脉大鼠脑缺血模型,分为假手术组、模型组、miR-199a-5p敲低组和SLT组。通过神经功能评分、小动物核磁共振及苏木精-伊红(HE)染色法观察SLT对大鼠脑组织病理结构、脑梗死面积及表观扩散系数(ADC)值的影响;采用荧光定量PCR检测及免疫组织化学实验测定miR-199a-5p、Cav1、MMP9 mRNA和蛋白的表达水平;QBPlex流式高通量多因子检测TNF-α、IL-17A、MIP-1α的含量。采用双荧光素酶报告基因系统验证miR-199a-5p和Cav1的靶向调控关系。结果:与模型组比较,miR-199a-5p敲低组和SLT组脑组织病理改变减轻,脑梗死面积减少,ADC值增加,miR-199a-5p表达降低,Cav1表达升高,MMP9及炎症因子显著减少(P<0.01,P<0.05)。双荧光素酶报告结果显示,miR-199a-5p与野生型Cav1 3’-UTR具有靶向调控关系。结论:SLT通过调控miR-199a-5p/Cav1表达,降低脑梗死大鼠MMP9及炎症因子的水平,改善神经功能。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 塞络通 微小RNA199a-5p 小窝蛋白1 基质金属蛋白酶9 神经炎症因子
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LINC00319通过靶向miR-199a-5p促进瘢痕疙瘩发生发展
2
作者 陆海涛 赵运华 +2 位作者 师绍敏 冀雅聪 刘亚玲 《河北医科大学学报》 2025年第7期826-832,共7页
目的探讨长链非编码RNA LINC00319在瘢痕疙瘩发生发展中的作用及其潜在分子机制。方法纳入2024年2月—2025年2月承德医学院附属医院收治的经临床明确诊断的瘢痕疙瘩患者18例,分别采集瘢痕疙瘩组织及相邻正常皮肤组织,分离原代成纤维细胞... 目的探讨长链非编码RNA LINC00319在瘢痕疙瘩发生发展中的作用及其潜在分子机制。方法纳入2024年2月—2025年2月承德医学院附属医院收治的经临床明确诊断的瘢痕疙瘩患者18例,分别采集瘢痕疙瘩组织及相邻正常皮肤组织,分离原代成纤维细胞,获得瘢痕疙瘩成纤维细胞(keloid fibroblasts,KFs)与正常皮肤成纤维细胞(normal dermal fibroblasts,NFs)。采用实时荧光定量聚合酶链式反应(quantitative real-time polymerase chain reaction,qRT-PCR)检测组织和细胞中LINC00319与miR-199a-5p的相对表达水平。通过小干扰RNA技术沉默KFs中LINC00319的表达,并通过qRT-PCR验证沉默效率。应用CCK-8实验评估LINC00319沉默对KFs增殖能力的影响,流式细胞术测定细胞凋亡情况。通过双荧光素酶报告基因检测明确LINC00319与miR-199a-5p之间的靶向结合关系,进一步通过qRT-PCR检测LINC00319敲降对miR-199a-5p表达的调控作用。将si-LINC00319与miR-199a-5p inhibitor联合转染KFs,以评估其对细胞增殖能力的影响。结果与正常皮肤组织(0.76±0.31)及NFs(0.84±0.14)比较,LINC00319在瘢痕疙瘩组织(6.29±4.07)及KFs(4.90±0.37)中表达水平显著升高(P<0.001)。LINC00319表达水平与温哥华瘢痕评定量表评分呈正相关(r=0.794,P<0.001)。敲降LINC00319后,KFs在24 h、48 h、72 h的光密度值(0.34±0.01、0.50±0.01、0.59±0.01)显著低于对照组(0.49±0.01、0.68±0.01、0.80±0.01),组间、时点间、组间·时点间交互作用差异有统计学意义(P<0.05)。si-LINC00319组的凋亡率(30.58±2.48)%显著高于对照组(9.69±1.22)%(P<0.001)。双荧光素酶报告实验结果表明,LINC00319可与miR-199a-5p直接结合。在KFs中,miR-199a-5p的表达水平(0.68±0.02)显著低于对照组(1.09±0.07)(P<0.001),而沉默LINC00319后,其表达水平(1.81±0.05)显著高于对照组(0.94±0.06,P<0.001)。功能回复实验显示,si-LINC00319处理显著抑制KFs的增殖能力,然而在同时转染miR-199a-5pinhibitor的条件下,KFs于24 h、48 h、72 h的光密度值(0.43±0.01、0.68±0.02、0.79±0.02)较si-LINC00319组(0.34±0.01、0.49±0.01、0.59±0.01)显著升高,组间、时点间、组间·时点间交互作用差异有统计学意义(P<0.05)。结论LINC00319通过负向调控miR-199a-5p的表达,促进瘢痕疙瘩的发生与发展。 展开更多
关键词 瘢痕疙瘩 LINC00319 miR-199a-5p
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血清Krüppel样转录因子9、微小RNA-199a-5p水平对糖尿病肾脏疾病的诊断价值
3
作者 王文平 苑浩彬 +1 位作者 唐迎超 王锦 《临床肾脏病杂志》 2025年第12期1040-1046,共7页
目的探究血清Krüppel样转录因子9(Krüppel like factor 9,KLF9)和微小RNA(mi⁃croRNA,miR)-199a-5p水平对糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)的诊断价值。方法选取2023年1月1日至2024年3月31日于广安门医院保定医院... 目的探究血清Krüppel样转录因子9(Krüppel like factor 9,KLF9)和微小RNA(mi⁃croRNA,miR)-199a-5p水平对糖尿病肾脏疾病(diabetic kidney disease,DKD)的诊断价值。方法选取2023年1月1日至2024年3月31日于广安门医院保定医院(保定市第一中医院)治疗的DKD患者136例作为研究组,根据eGFR[mL·min^(-1)·(1.73 m^(2))^(-1)]分为轻度组(≥60)、中度组(≥30~<60)、重度组(<30)。选择同期糖尿病(diabetes mellitus,DM)患者79例作为对照组。使用实时荧光定量多重聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)法测定血清miR-199a-5p水平和KLF9相对水平,收集所有研究对象的临床资料,Pearson相关性分析血清KLF9和miR-199a-5p以及二者与DM病程以及肾功能相关指标的关系,Logistic回归分析影响DM患者发生DKD的因素,受试者工作特征曲线评估血清KLF9和miR-199a-5p对DM患者DKD发生的诊断效能。结果研究组患者的KLF9[(1.39±0.33)比(1.02±0.21)]水平显著高于对照组,miR-199a-5p[(0.75±0.18)比(1.01±0.24)]水平显著低于对照组(P<0.05);中度组和重度组的血清KLF9水平[(1.73±0.35)、(1.37±0.32)比(1.23±0.30)]显著高于轻度组,miR-199a-5p水平[(0.86±0.15)、(0.73±0.15)比(0.62±0.13)]显著低于轻度组(P<0.05);重度组的血清KLF9水平显著高于中度组,miR-199a-5p水平显著低于中度组(P<0.05)。Pearson分析显示,研究组患者血清KLF9水平和miR-199a-5p水平呈负相关(r=-0.485,P<0.05);研究组患者血清KLF9水平与DM病程、肌酐(serum creatinine,Scr)、尿白蛋白/肌酐(urinary albumin/creatinine,UACR)呈正相关,与估算肾小球滤过率(estimated glomerular filtration rate,eGFR)呈负相关(r=0.408、0.479、0.535、-0.494,P<0.05),miR-199a-5p水平与DM病程、Scr、UACR呈负相关,与eGFR呈正相关(r=-0.437、-0.471、-0.452、0.528,P<0.05);Logistic分析表明,UACR、eGFR、KLF9和miR-199a-5p是DM患者发生DKD的影响因素(P<0.05);血清KLF9和miR-199a-5p水平诊断DM患者DKD发生的曲线下面积(area under the curve,AUC)为0.786和0.762,截断值为1.25和0.83,二者联合诊断的AUC为0.873,高于KLF9(Z=2.301,P=0.021)和miR-199a-5p(Z=2.704,P=0.007)单独使用诊断的AUC。结论DKD患者的血清KLF9水平显著上调,miR-199a-5p水平显著下调,二者呈负相关,联合检测二者水平对DKD的诊断具有一定价值。 展开更多
关键词 糖尿病肾脏疾病 Krüppel样转录因子9 微小RNa-199a-5p
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miR-199a-5p靶向Akt/eNOS信号通路促进应激性心肌病大鼠心脏功能障碍
4
作者 孙阳 范小勇 陈红伟 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第6期828-834,共7页
目的 探讨miR-199a-5p在应激性心肌病(stress-induced cardiomyopathy, SIC)中的作用及其通过Akt/eNOS信号通路调控心肌损伤的分子机制。方法 采用异丙肾上腺素腹腔注射建立SIC大鼠模型,随机分为对照组、SIC模型组、miR-199a-5p抑制剂... 目的 探讨miR-199a-5p在应激性心肌病(stress-induced cardiomyopathy, SIC)中的作用及其通过Akt/eNOS信号通路调控心肌损伤的分子机制。方法 采用异丙肾上腺素腹腔注射建立SIC大鼠模型,随机分为对照组、SIC模型组、miR-199a-5p抑制剂组和模拟物组。心脏超声评估心功能。qRT-PCR检测miR-199a-5p表达,Western blot分析Akt/eNOS通路蛋白水平,双荧光素酶报告基因实验验证miR-199a-5p与Akt的靶向关系,并检测氧化应激(MDA、SOD、GSH-Px)和细胞凋亡指标。结果 SIC组心肌miR-199a-5p表达显著上调。miR-199a-5p直接靶向抑制Akt,导致Akt和eNOS表达下降。抑制miR-199a-5p可改善心功能、减轻纤维化和凋亡,并降低氧化应激,而miR-199a-5p模拟物则加重损伤(均P<0.05)。结论 miR-199a-5p通过靶向抑制Akt/eNOS信号通路加重SIC心肌损伤,其抑制剂可通过激活该通路改善心功能,提示miR-199a-5p可能作为SIC治疗的潜在靶点。 展开更多
关键词 应激性心肌病 miR-199a-5p Akt/eNOS信号通路
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miR-199a-5p对胶质瘤U251细胞小窝蛋白1表达及细胞迁移和凋亡的影响 被引量：1
5
作者 刘东慧 次云哲 +1 位作者 王春艳 麻雯熠 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期663-671,共9页
目的:探讨胶质母细胞瘤U251细胞过表达微小RNA (miR)-199a-5p后对细胞迁移和凋亡的影响,并阐明miR-199a-5p与小窝蛋白1 (CAV-1)的靶向调控关系。方法:体外培养胶质母细胞瘤U251细胞和少突胶质细胞瘤Hs683细胞,采用Western blotting法检... 目的:探讨胶质母细胞瘤U251细胞过表达微小RNA (miR)-199a-5p后对细胞迁移和凋亡的影响,并阐明miR-199a-5p与小窝蛋白1 (CAV-1)的靶向调控关系。方法:体外培养胶质母细胞瘤U251细胞和少突胶质细胞瘤Hs683细胞,采用Western blotting法检测2种细胞中CAV-1蛋白表达水平,实时荧光定量PCR (RT-qPCR)法检测2种细胞中miR-199a-5p表达水平。U251细胞分为空白组(不进行转染)、mimics NC组(转染空载质粒)和miR-199a-5p mimics组(转染miR-199a-5p模拟物),Hs683细胞分为空白组(不进行转染)、 inhibitor NC组(转染空载质粒)和miR-199a-5p inhibitor组(转染miR-199a-5p抑制物),采用RT-qPCR法检测各组细胞转染效率,Western blotting法检测各组细胞中CAV-1蛋白表达水平。TargetScan数据库预测miR-199a-5p与CAV-1在3'非翻译区(3'UTR)的结合位点,将psiCHECKTM-2-CAV-1-WT和psiCHECKTM-2-CAV-1-Mut分别与miR-199a-5p mimics和mimics NC共转染至U251细胞中,即psiCHECKTM-2-CAV-1-WT+mimics NC组、psiCHECKTM-2-CAV-1-WT+miR-199a-5p mimics组、 psiCHECKTM-2-CAV-1-Mut+mimics NC组和psiCHECKTM-2-CAV1-Mut+miR-199a-5p mimics组,双荧光素酶报告基因实验验证miR-199a-5p与CAV-1的靶向关系,细胞划痕实验检测各组U251细胞划痕愈合率,流式细胞术检测各组U251细胞凋亡率。结果:Western blotting法和RT-qPCR法检测,与Hs683细胞比较,U251细胞中CAV-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与U251细胞比较,Hs683细胞中miR-199a-5p表达水平明显升高(P<0.01)。与空白组和mimics NC组比较,miR-199a-5p mimics组U251细胞中miR-199a-5p表达水平明显升高(P<0.01),CAV-1蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。与空白组比较,inhibitor NC组和miR-199a-5p inhibitor组Hs683细胞中miR-199a-5p表达水平均明显降低(P<0.01)。各组Hs683细胞中CAV-1蛋白表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。双荧光素酶报告基因实验验证,成功构建psiCHECKTM-2-CAV-1-野生型(WT)和psiCHECKTM-2-CAV-1-突变型(Mut)表达载体;与psiCHECKTM-2-CAV-1-WT-mimicsNC组比较,psiCHECKTM-2-CAV-1-WT-miR-199a-5pmimics组U251细胞WT CAV-1相对荧光素酶活性明显降低(P<0.01)。细胞划痕实验,转染12、24和48 h时,与空白组比较,miR-199a-5p mimics组U251细胞划痕愈合率明显降低(P<0.05或P<0.01);转染48和72 h时,与mimics NC组比较,miR-199a-5p mimics组U251细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01)。流式细胞术,与空白组和mimics NC组比较,miR-199a-5p mimics组U251细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。结论:通过向胶质母细胞瘤U251细胞转染miR-199a-5p成熟模拟物,可降低CAV-1蛋白表达水平,并抑制胶质瘤细胞的迁移,促进其凋亡,抑制肿瘤发生发展。miR-199a-5p与CAV-1之间的靶向关系可能为胶质瘤发生发展的潜在机制,并可能成为胶质瘤潜在的诊断和治疗靶点。 展开更多
关键词 脑胶质瘤细胞 微小RNa-199a-5p 小窝蛋白1 细胞迁移 细胞凋亡
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达格列净通过调节miR-199a-5p和ARHGAP21表达及抑制RhoA/ROCK通路减轻肺纤维化的机制
6
作者 张炳丽 许文亚 +2 位作者 刘运婵 郑亚妹 谢甜 《热带医学杂志》 2025年第9期1157-1163,1194,F0004,共9页
目的研究达格列净通过调节miR-199a-5p和Rho GTP酶激活蛋白21(ARHGAP21)的表达及抑制RhoA/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路对肺纤维化(PF)的潜在治疗作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为正常组(未处理)、模型组、5 mg/kg达格列净组... 目的研究达格列净通过调节miR-199a-5p和Rho GTP酶激活蛋白21(ARHGAP21)的表达及抑制RhoA/Rho相关卷曲螺旋蛋白激酶(ROCK)信号通路对肺纤维化(PF)的潜在治疗作用。方法将C57BL/6小鼠随机分为正常组(未处理)、模型组、5 mg/kg达格列净组、20 mg/kg达格列净组,每组6只,模型组、5 mg/kg达格列净组、20 mg/kg达格列净组通过气管内注射博莱霉素建立PF模型,5、20 mg/kg达格列净组分别给予5、20 mg/kg达格列净;苏木素-伊红(HE)和马松(Masson)染色评估小鼠肺组织病理变化。将肺癌细胞A549分为miR-199a-5p模拟物(miR-199a-5p mimic)组和阴性对照(NC-mimic)组,分别转染miR-199a-5p mimic、NC-mimic慢病毒载体,RT-PCR和Western blot检测各组miR-199a-5p和ARHGAP21表达,双荧光素酶报告基因实验验证miR-199a-5p对ARHGAP21的靶向抑制作用,最后通过GLISA分析评估RhoA和ROCK的活性。结果HE染色显示,正常组小鼠肺组织肺泡结构完整,气道和肺泡壁清晰且无增厚;模型组肺泡结构破坏,肺泡壁增厚,并有明显的炎性细胞浸润;与模型组比较,5、20 mg/kg达格列净组小鼠肺组织肺泡结构较为完整,炎性细胞浸润减少,其中20 mg/kg达格列净组肺泡结构接近正常。Masson染色显示,正常组小鼠肺组织仅见少量胶原纤维沉积,模型组中蓝色胶原纤维沉积明显增多,差异有统计学意义(q=14.62,P<0.001),提示肺组织纤维化较重;与模型组比较,5、20 mg/kg达格列净组小鼠胶原纤维沉积明显减少,差异均有统计学意义(q=7.92、10.26,P均<0.001),其中20 mg/kg达格列净组纤维化改善更为显著。RT-PCR检测结果显示,与正常组比较,模型组肺组织中ARHGAP21表达水平显著降低,miR-199a-5p mRNA表达水平显著升高,差异均有统计学意义(q=8.59、33.44,P均<0.001);与模型组比较,5、20 mg/kg达格列净组ARHGAP21表达水平显著升高,miR-199a-5p mRNA表达水平显著降低,差异均有统计学意义(q=11.69、42.97,35.82、51.85,P均<0.001)。肺组织免疫组化检测结果进一步证实,正常组小鼠肺组织中ARHGAP21表达较高,呈现为广泛的棕色染色;模型组ARHGAP21表达显著减少,仅见少量染色;5、20 mg/kg达格列净组小鼠肺组织中ARHGAP21表达较模型组有所增加,其中20 mg/kg达格列净组表达接近正常组水平。细胞实验结果显示,miR-199a-5p mimic组中ARHGAP21 mRNA、蛋白相对表达表达水平显著低于NC-mimic组,差异均有统计学意义(t=11.76、10.50,P均<0.001)。Targetscan数据库分析结果显示,miR-199a-5p与ARHGAP21的3′UTR存在结合位点,并设计对应突变位点;双荧光素酶实验结果显示,ARHGAP21-WT-miR-199a-5p组相对荧光素酶活性显著低于ARHGAP21-WT-NC组,差异有统计学意义(q=26.16,P<0.001)。GLISA分析结果显示,模型组相对RhoA、ROCK活性显著高于正常组,差异均有统计学意义(q=52.50、40.30,P均<0.001);与模型组比较,5、20 mg/kg达格列净组相对RhoA、ROCK活性显著降低,差异均有统计学意义(q=17.44、15.41,38.51、35.75,P均<0.001)。结论达格列净可能通过下调miR-199a-5p、上调ARHGAP21以及抑制RhoA/ROCK信号通路,减轻PF的病理变化,具有潜在的治疗作用。 展开更多
关键词 肺纤维化 达格列净 miR-199a-5p ARHGAp21 RhoA/ROCK信号通路
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miR-199a-5p调控PKM2对瘢痕疙瘩成纤维细胞糖酵解及胶原合成的影响
7
作者 刘玉兰 公利鑫 +1 位作者 余道江 陈仕高 《河北医学》 2025年第8期1297-1302,共6页
目的:探讨微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)调控M2型丙酮酸激酶(PKM2)对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)糖酵解及胶原合成的影响。方法:双荧光素酶报告基因实验检验miR-199a-5p与PKM2之间的相互作用;将KFB分为Control组、NC-mimics组、miR-199a-5p... 目的:探讨微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)调控M2型丙酮酸激酶(PKM2)对瘢痕疙瘩成纤维细胞(KFB)糖酵解及胶原合成的影响。方法:双荧光素酶报告基因实验检验miR-199a-5p与PKM2之间的相互作用;将KFB分为Control组、NC-mimics组、miR-199a-5p-mimics组、miR-199a-5p-mimic+OE-NC组、miR-199a-5p-mimics+OE-PKM2组。qRT-PCR法检测各组KFB中miR-199a-5p、PKM2 mRNA的表达;CCK8检测KFB增殖;试剂盒检测葡萄糖消耗和乳酸产生;流式细胞仪检测KFB的凋亡;Western blot检测KFB中Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)、Ⅲ型胶原蛋白(Col-Ⅲ)、PKM2蛋白的表达。结果:miR-199a-5p可以靶向负调控PKM2(t=14.394,P<0.001)。miR-199a-5p-mimics组凋亡率、miR-199a-5p高于Control组、NC-mimics组,A450值、葡萄糖消耗、乳酸生成、PKM2 mRNA和蛋白、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ低于Control组、NC-mimics组(P<0.05);miR-199a-5p-mimics+OE-PKM2组A450值、葡萄糖消耗、乳酸生成、PKM2 mRNA和蛋白、Col-Ⅰ、Col-Ⅲ高于miR-199a-5p-mimics组、miR-199a-5p-mimics+OE-NC组,凋亡率低于miR-199a-5p-mimics组、miR-199a-5p-mimics+OE-NC组(P<0.05)。结论:miR-199a-5p可能调控PKM2抑制KFB的糖酵解及胶原合成。 展开更多
关键词 胶原合成 微小RNa-199a-5p M2型丙酮酸激酶 瘢痕疙瘩成纤维细胞 糖酵解
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LncRNA NNT-AS1靶向miR-199a-5p对口腔鳞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
8
作者 绳兰兰 欧孝飞 《天津医药》 2025年第11期1131-1137,共7页
目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)NNT-AS1调节微小RNA(miR)-199a-5p对口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法将CAL-27细胞分为对照组、sh-NC组、sh-NNT-AS1组、sh-NNT-AS1+miR-In-NC组、sh-NNT-AS1+miR-199a-5p-In组。分别采用5... 目的探讨长链非编码RNA(LncRNA)NNT-AS1调节微小RNA(miR)-199a-5p对口腔鳞癌(OSCC)细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法将CAL-27细胞分为对照组、sh-NC组、sh-NNT-AS1组、sh-NNT-AS1+miR-In-NC组、sh-NNT-AS1+miR-199a-5p-In组。分别采用5-乙炔基-2′-脱氧尿苷(EdU)法、克隆形成、划痕愈合、Transwell实验检测CAL-27细胞增殖、集落形成、迁移和侵袭能力。采用qRT-PCR实验检测人角质形成细胞系HaCaT、人OSCC细胞系CAL-27及各组细胞中LncRNA NNT-AS1和miR-199a-5p的表达;Western blot实验检测细胞中上皮间充质转化(EMT)相关蛋白[E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)和表皮生长因子受体(EGFR)]的表达;双萤光素酶报告基因实验验证LncRNA NNT-AS1与miR-199a-5p的靶向关系。结果与HaCaT细胞相比,CAL-27细胞中LncRNA NNT-AS1水平升高,miR-199a-5p水平降低(P<0.05);与对照组、sh-NC组相比,sh-NNT-AS1组EdU阳性率、集落形成率、划痕愈合率、细胞侵袭数、LncRNA NNT-AS1、N-cadherin、Vimentin和EGFR蛋白表达水平降低,miR-199a-5p和E-cadherin蛋白表达水平升高(P<0.05);与sh-NNT-AS1组、sh-NNTAS1+miR-In-NC组相比,sh-NNT-AS1+miR-199a-5p-In组EdU阳性率、集落形成率、划痕愈合率、细胞侵袭数、Ncadherin、Vimentin和EGFR蛋白表达水平升高,miR-199a-5p和E-cadherin蛋白表达水平降低(P<0.05);与miR-NC组比较,miR-199a-5p mimic组转染NNT-AS1-WT细胞的相对萤光素酶活性降低(P<0.05)。结论LncRNA NNT-AS1在OSCC中高表达,通过负向调控miR-199a-5p可促进OSCC细胞增殖、迁移、侵袭及EMT进程。 展开更多
关键词 头颈鳞癌 口腔肿瘤 RNA 长链非编码 长链非编码RNA NNT-AS1 微小RNa-199a-5p
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COPD患者血清miR-181a、miR-21、miR-199a-5p水平与病情程度及预后的关系探究
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作者 郭华 赵静 李倩 《医药论坛杂志》 2025年第12期1335-1339,F0003,共6页
目的 探究慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者血清微小RNA-181a(miR-181a)、miR-21、miR-199a-5p水平与病情程度及预后的关系。方法 选取2020年3月—2023年3月洛阳市第三人民医院收治的86例COPD患者作... 目的 探究慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者血清微小RNA-181a(miR-181a)、miR-21、miR-199a-5p水平与病情程度及预后的关系。方法 选取2020年3月—2023年3月洛阳市第三人民医院收治的86例COPD患者作为研究对象,根据病情分为稳定期COPD组与急性加重期CDOP(AECOPD)组,对两组患者血清miR-181a、miR-21、miR-199a-5p水平进行检测,miR-181a、miR-21、miR-199a-5p指标与COPD患者病情程度的关系采用Spearman相关性分析。追踪AECOPD患者随访1年内的预后情况,并将其分为预后良好组与预后不良组,比较两组临床资料及血清miR-181a、miR-21、miR-199a-5p水平,采用多因素logistics回归分析COPD患者预后的影响因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析miR-181a、miR-21、miR-199a-5p对于COPD患者预后的预测效能。结果 稳定期COPD患者血清miR-181a、miR-21、miR-199a-5p水平显著低于AECOPD组(P<0.05);Spearman相关性分析结果显示:COPD患者血清miR-181a、miR-21、miR-199a-5p水平与病情程度均呈正相关(P<0.05);45例AECOPD患者中存活32例,其余13例患者死亡;不同预后的AECOPD患者血清miR-181a、miR-21、miR-199a-5p水平比较具有显著差异(P<0.05);预后不良组血清miR-181a、miR-21、miR-199a-5p水平高于预后良好组(P<0.05);预后不良组FEV_(1)/FVC低于预后良好组,APACHE评分高于预后良好组(P<0.05);ROC曲线分析结果显示:miR-181a、miR-21、miR-199a-5p对AECOPD患者预后进行预测,以miR-199a-5p的曲线下面积(AUC)值最高,为0.916,敏感度、特异度分别为92.31%、78.12%,以miR-21的AUC值最低,为0.739.敏感度、特异度分别为92.31%、56.25%,三种指标对于AECOPD预后的预测效能比较未见显著差异(P>0.05)。结论 COPD患者血清miR-181a、miR-21、miR-199a-5p水平与病情程度呈正相关,miR-199a-5p为AECOPD患者预后的影响因素,三者对于AECOPD患者预后的预测均具有较高的效能。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 微小RNa-181a 微小RNa-21 微小RNa-199a-5p
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抵抗素通过miR-199a-5p调控AMPK/NF-κB信号通路诱导心肌肥厚的作用研究
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作者 刘鹏 曹露 +2 位作者 徐一君 陈志强 温文 《中国医药科学》 2025年第11期8-12,79,共6页
目的探究抵抗素是否通过微小RNA(miR)-199a-5p调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核因子-κB(NF-κB)信号通路诱导心肌肥厚。方法60只大鼠随机选取10只大鼠作为对照(Control)组常规饲养,将剩余50只大鼠采用随机数表法分为5组(n=10)进行抵抗... 目的探究抵抗素是否通过微小RNA(miR)-199a-5p调控腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)/核因子-κB(NF-κB)信号通路诱导心肌肥厚。方法60只大鼠随机选取10只大鼠作为对照(Control)组常规饲养,将剩余50只大鼠采用随机数表法分为5组(n=10)进行抵抗素大鼠造模,分别为抵抗素-L组、抵抗素-H组、抵抗素-H+Agomir组、抵抗素-H+Antagomir组、抵抗素-H+AICAR组。观察各组大鼠心肌病理改变,比较各组大鼠心肌组织中miR-199a-5p以及AMPK/NF-κB通路mRNA和蛋白表达情况。结果与Control组比较,其余各组大鼠NF-κB P65、p-NF-κB P65蛋白质表达水平均显著升高,AMPKα、p-AMPKα蛋白质表达水平均显著降低(P<0.05);随着抵抗素浓度的增加和miR-199a-5p Agomir的使用,大鼠心肌细胞NF-κB P65、p-NF-κB P65蛋白质以及miR-199a-5p、NF-κB mRNA表达水平显著升高,AMPKα、p-AMPKα蛋白质和AMPKαmRNA表达水平均显著降低(P<0.05);并随着Antagomir和AICAR的使用呈现显著差异(P<0.05)。结论抵抗素可导致大鼠心肌细胞出现肥大,其作用机制可能与通过调控miR-199a-5p,抑制AMPK表达,促进NF-κB表达有关。 展开更多
关键词 抵抗素 miR-199a-5p AMpK/NF-κB信号通路 心肌肥厚
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LncRNA LUCAT1通过靶向miR-199a-5p调控宫颈癌细胞活性、侵袭迁移及其分子机制 被引量：11
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作者 胡春艳 朱根海 +1 位作者 邢艾文 崔开颖 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第13期3257-3261,共5页
目的研究长链非编码RNA肺癌相关转录产物(LUCAT)1对宫颈癌细胞的活性、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法运用qRT-PCR法检测宫颈癌细胞Hela、正常宫颈细胞Ect1/E6E7中LUCAT1、miR-199a-5p的表达;将si-con组(转染si-con)、si-LUCAT1组... 目的研究长链非编码RNA肺癌相关转录产物(LUCAT)1对宫颈癌细胞的活性、迁移和侵袭的影响,并探讨其机制。方法运用qRT-PCR法检测宫颈癌细胞Hela、正常宫颈细胞Ect1/E6E7中LUCAT1、miR-199a-5p的表达;将si-con组(转染si-con)、si-LUCAT1组(转染si-LUCAT1)、miR-199a-5p组(转染miR-199a-5p模拟物)、miR-NC组(转染miR-NC)、si-con+anti-miR-199a-5p组(共转染si-con和anti-miR-199a-5p)、si-LUCAT1+anti-miR-199a-5p组(共转染si-LUCAT1和anti-miR-199a-5p),均用脂质体法转染至Hela细胞;噻唑蓝(MTT)法检测各组细胞的活性;Transwell法检测各组细胞的迁移和侵袭;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性。结果与正常宫颈细胞Ect1/E6E7相比,宫颈癌细胞Hela中LUCAT1表达显著升高,miR-199a-5p表达显著降低;敲减LUCAT1、过表达miR-199a-5p均可明显抑制Hela细胞的活性、迁移和侵袭;miR-199a-5p可抑制野生型LUCAT1细胞的荧光活性,且LUCAT1可负向调控miR-199a-5p的表达;抑制miR-199a-5p可逆转敲减LUCAT1对Hela细胞的活性、迁移、侵袭的抑制作用。结论LUCAT1可促进宫颈癌细胞的活性、迁移、侵袭,其机制可能与靶向miR-199a-5p有关,将可为宫颈癌的治疗提供靶点。 展开更多
关键词 LUCAT1 miR-199a-5p 宫颈癌 迁移 侵袭
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MiR-199a-5p通过靶向DRAM1调控急性髓系白血病对阿柔比星的敏感性 被引量：6
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作者 李旸 孙颖 +3 位作者 苗苗 石雪 杨威 刘卓刚 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期1096-1104,共9页
目的:比较miR-199a-5p在急性髓系白血病(AML)耐药细胞株K562/ADM以及敏感细胞株K562中的表达,研究其对AML耐药的调控效应并探索其机制。方法:采用MTT法检测阿柔比星(ADM)对K562/ADM和K562细胞的生长抑制率并计算IC50。采用实时荧光定量R... 目的:比较miR-199a-5p在急性髓系白血病(AML)耐药细胞株K562/ADM以及敏感细胞株K562中的表达,研究其对AML耐药的调控效应并探索其机制。方法:采用MTT法检测阿柔比星(ADM)对K562/ADM和K562细胞的生长抑制率并计算IC50。采用实时荧光定量RT-PCR的方法检测2种细胞株(K562/ADM和K562)以及患者骨髓标本(复发难治AML患者和化疗后完全缓解AML患者)中miR-199a-5p的表达。通过细胞转染的方法在K562/ADM细胞中转入miR-199a-5p mimic使其表达上调,在K562细胞中转入miR-199a-5p inhibitor使其表达下调,采用CCK-8法检测ADM对2种细胞的增殖抑制率,实时荧光定量PCR和Western blot法分别检测转染后2种细胞中DRAM1基因和蛋白的表达。双荧光素酶报告基因实验检测miR-199a-5p与DRAM13′UTR是否存在直接结合位点。采用siRNA的方法下调K562/ADM细胞中DRAM1表达,CCK-8法检测ADM对细胞增殖抑制率的变化。结果:ADM对K562/ADM和K562细胞的IC50分别为146.14±0.079和3.08±0.056μg/ml。miR-199a-5p在复发难治AML患者骨髓中的表达明显低于完全缓解患者,在K562/ADM细胞中的表达明显低于K562细胞(P<0.05)。当K562/ADM细胞中miR-199a-5p表达上调时,ADM对细胞的增殖抑制率升高,DRAM1基因和蛋白表达明显下降。当K562细胞中miR-199a-5p表达下调时,ADM对细胞的增殖抑制率明显下降,DRAM1基因和蛋白表达明显升高(P<0.05)。双荧光素酶报告基因实验显示,miR-199a-5p与DRAM1的3′UTR区存在直接结合位点。K562/ADM细胞中DRAM1在基因和蛋白水平表达均明显高于K562细胞(P<0.05)。当K562/ADM细胞中DRAM1基因表达下调后,细胞对ADM的敏感性显著升高(P<0.05)。结论:miR-199a-5p在耐药白血病细胞中呈低表达。miR-199a-5p表达能够调控AML细胞对ADM的敏感性。DRAM1是miR-199a-5p调控AML耐药的功能性靶基因。 展开更多
关键词 miR-199a-5p DRAM1 化疗耐药 急性髓系白血病
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七氟烷预处理上调miR-199a-5p对脊髓缺血/再灌注损伤的保护作用 被引量：9
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作者 鲍宁 马虹 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第9期1230-1234,共5页
目的研究miR-199a-5p在七氟烷预处理大鼠脊髓缺血/再灌注损伤(SCIRI)中的作用。方法将24只SD大鼠随机分为:假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、七氟烷+模型组(SEVO+I/R组)。Sham组给予同样的手术,但不吸入七氟烷或夹闭主动脉弓;I/R组无... 目的研究miR-199a-5p在七氟烷预处理大鼠脊髓缺血/再灌注损伤(SCIRI)中的作用。方法将24只SD大鼠随机分为:假手术组(Sham组)、模型组(I/R组)、七氟烷+模型组(SEVO+I/R组)。Sham组给予同样的手术,但不吸入七氟烷或夹闭主动脉弓;I/R组无创动脉夹夹闭主动脉弓14 min后再灌注,以建立SCIRI模型;SEVO+I/R组,建立SCIRI模型前吸入2.4%的七氟烷3 h。Basso Beattie Bresnahan评分法评价神经运动功能;TUNEL染色观察细胞凋亡情况;伊文思蓝(EB)测定血-脊髓屏障(BSCB)通透性;realtime qPCR检测miR-199a-5p含量;Western blot测定脊髓组织中caspase-9和Bcl-2水平。结果与假手术组比较,I/R组神经运动功能评分降低,细胞凋亡率增加,BSCB通透性增加,miR-199a-5p表达降低,caspase-9表达增加,Bcl-2表达减少;与I/R组比较,SEVO+I/R组神经运动功能评分增加,细胞凋亡率减少,BSCB通透性减少,miR-199a-5p表达增加,caspase-9表达减少,Bcl-2表达增加。结论七氟烷预处理可能通过增加miR-199a-5p,减少BSCB通透性及细胞凋亡,保护大鼠SCIRI。 展开更多
关键词 七氟烷预处理 缺血/再灌注损伤 脊髓 miR-199a-5p 凋亡 血脊屏障
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miRNA-199a-5p通过SP1调节ERK5抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭的机制 被引量：10
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作者 翟丽敏 杨硕 李文通 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第9期981-985,共5页
目的探讨miR-199a-5p对乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭影响及其作用机制。方法转染miR-199a-5p mimic至MDA-MB-231细胞,Transwell侵袭实验检测miR-199a-5p对MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响。采用细胞免疫荧光、Western blot法检测上皮细胞-... 目的探讨miR-199a-5p对乳腺癌MDA-MB-231细胞的侵袭影响及其作用机制。方法转染miR-199a-5p mimic至MDA-MB-231细胞,Transwell侵袭实验检测miR-199a-5p对MDA-MB-231细胞侵袭能力的影响。采用细胞免疫荧光、Western blot法检测上皮细胞-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)分子标志物E-cadherin、vimentin的表达。应用Western blot法检测miR-199a-5p mimic及其LNA-siRNA对ERK5、p ERK5、EGF、SP1表达的影响。染色体免疫共沉淀(chromatin immunoprecipitation,CHIP)技术检测SP1是否与ERK5启动子区结合。结果 miR-199a-5p能抑制MDA-MB-231细胞的侵袭,降低vimentin的表达,增强E-cadherin的表达。同时,miR-199a-5p降低ERK5表达并抑制其磷酸化;EGF、SP1的表达也相应减少。相反,应用LNA-siRNA抑制miR-199a-5p后,ERK5、p ERK5、EGF、SP1的表达上调。CHIP结果显示SP1能与ERK5启动子区结合。结论 miR-199a-5p通过调节EGF、SP1下调ERK5的表达并抑制其磷酸化,进而发挥对乳腺癌MDA-MB-231细胞侵袭的抑制作用。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 miR-199a-5p ERK5 Sp1 侵袭
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MicroRNA-199a-5p和HIF-1α在慢性阻塞性肺疾病上皮细胞中的表达及相关性 被引量：6
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作者 李新 努尔阿米娜·铁力瓦尔迪 +1 位作者 穆清爽 古力鲜·马合木提 《国际检验医学杂志》 CAS 2020年第7期821-825,共5页
目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者经肺泡灌洗获得上皮细胞中MicroRNA-199a-5p和缺氧诱导因子(HIF)-1α的表达水平,探讨其与疾病分期和严重程度的相关性及两者间的表达关系,为疾病的发生机制提供参考。方法选择2018年5月至2019年5月... 目的研究慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者经肺泡灌洗获得上皮细胞中MicroRNA-199a-5p和缺氧诱导因子(HIF)-1α的表达水平,探讨其与疾病分期和严重程度的相关性及两者间的表达关系,为疾病的发生机制提供参考。方法选择2018年5月至2019年5月入该院诊断COPD患者共120例,其中稳定期80例,急性发作期40例,根据肺功能检测分为轻度30例,中度60例,重度30例;经肺泡灌洗获得上皮细胞,并鉴定细胞形态,然后采用实时荧光定量PCR法检测细胞MicroRNA-199a-5p和HIF-1αmRNAs表达水平,分析不同疾病分期和严重程度患者间MicroRNA-199a-5p和HIF-1αmRNAs表达的差异性,以及两者间的相关性。结果急性期患者上皮细胞MicroRNA-199a-5p和HIF-1αmRNAs表达水平显著高于稳定期,重度患者高于中度,中度患者高于轻度,差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关分析发现,MicroRNA-199a-5p和HIF-1αmRNAs表达水平呈显著正相关(r=0.856,P=0.003)。结论COPD患者上皮细胞MicroRNA-199a-5p和HIF-1α表达上调与疾病分期和严重程度密切相关,两者可能发挥协同作用关系。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 肺泡灌洗 上皮细胞 MicroRNa-199a-5p 缺氧诱导因子
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MicroRNA-122-5p与MicroRNA-199a-5p在EMS患者血清的表达及临床意义 被引量：7
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作者 袁琳 张建洁 +3 位作者 陈雪 郑艳 姚燕 李平 《中国现代医学杂志》 CAS 2019年第7期48-52,共5页
目的探讨micro RNA-122-5p(mi R-122-5p)与micro RNA-199a-5p(mi R-199a-5p)在子宫内膜异位症(EMS)患者血清的表达及临床意义。方法前瞻性设计,随机选取2016年1月—2017年12月华北石油管理局总医院诊治的EMS患者90例(EMS组)及同期不孕... 目的探讨micro RNA-122-5p(mi R-122-5p)与micro RNA-199a-5p(mi R-199a-5p)在子宫内膜异位症(EMS)患者血清的表达及临床意义。方法前瞻性设计,随机选取2016年1月—2017年12月华北石油管理局总医院诊治的EMS患者90例(EMS组)及同期不孕症检查的患者70例(对照组)为研究对象。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)及酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组人群血清的mi R-122-5p和mi R-199a-5p的表达及白细胞介素-6(IL-6)的表达,并分析其与临床特征的相关性。构建受试者操作特征(ROC)曲线。结果 EMS组患者的血清及腹腔液中IL-6、miR-122-5p、miR-199a-5p的表达与对照组比较,差异有统计学意义(P <0.05),EMS组均增高。miR-122-5p的表达与IL-6水平(r=0.578,P <0.05)、miR-199a-5p表达(r=0.721,P <0.05)呈正相关。miR-199a-5p的表达与IL-6水平(r=0.562,P<0.05)呈正相关。miR-122-5p和miR-199a-5p检测EMS的敏感性分别为94.7%和92.1%,特异性分别为90.5%和88.6%。结论血清miR-122-5p和miR-199a-5p在EMS患者中的表达增加,miR-122-5p与miR-199a-5p有成为诊断子宫内膜异位症的生物标志物的潜力。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 miR-122-5p/microRNAs miR-199a-5p/microRNAs
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用双萤光素酶报告基因技术验证小鼠lncRNA-H19与miR-199a-5p的靶向关系 被引量：5
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作者 侯婧瑛 周长青 +7 位作者 郑韶欣 郭天柱 龙会宝 伍权华 钟婷婷 吴浩 汪蕾 王彤 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第12期2256-2260,共5页
目的:构建长链非编码RNA-H19(lncRNA-H19)萤光素酶报告质粒,利用双萤光素酶报告基因技术验证小鼠lncRNA-H19与微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)的靶向关系。方法:通过生物信息学网站RegRNA2.0预测获取小鼠lncRNA-H19与miR-199a-5p潜在的互... 目的:构建长链非编码RNA-H19(lncRNA-H19)萤光素酶报告质粒,利用双萤光素酶报告基因技术验证小鼠lncRNA-H19与微小RNA-199a-5p(miR-199a-5p)的靶向关系。方法:通过生物信息学网站RegRNA2.0预测获取小鼠lncRNA-H19与miR-199a-5p潜在的互补结合位点。将H19及其突变体克隆到萤光素酶载体psi CHECK-2中,构建H19野生型和突变型质粒,并采用酶切和测序方法鉴定psi CHECK-2-H19载体是否构建成功。将H19野生型和突变型质粒分别与miR-199a-5p模拟物、miR-199a-5p抑制剂、miR-199a-5p模拟物阴性对照或miR-199a-5p抑制剂阴性对照在293T细胞中共转染。收集细胞后通过双萤光素酶报告系统检测不同组别的萤光素酶活性,从而对lncRNA-H19与miR-199a-5p的靶向调节关系进行验证。结果:构建的重组萤光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确,双萤光素酶报告基因检测显示,与miR-199a-5p模拟物阴性对照组相比,miR-199a-5p模拟物组H19野生型报告基因的萤光素酶活性显著降低,下降约49%左右(P<0.01),而miR-199a-5p抑制剂组H19野生型报告基因的萤光素酶活性较miR-199a-5p模拟物组明显增高(P<0.01)。miR-199a-5p模拟物、miR-199a-5p抑制剂、miR-199a-5p模拟物阴性对照以及miR-199a-5p抑制剂阴性对照对H19突变型的萤光素酶活性均无明显影响。结论:lncRNA-H19能够靶向结合miR-199a-5p,并在转录后水平对其有直接抑制作用。 展开更多
关键词 长链非编码RNa-H19 微小RNa-199a-5p 双萤光素酶报告基因
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参附注射液调控大鼠心肌肥大模型microRNA-199a-5p的表达机制 被引量：3
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作者 毛竹君 熊耀康 +1 位作者 宋洁 袁文俊 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第10期3999-4002,共4页
目的:研究参附注射液对大鼠心肌肥大模型micro RNA-199a-5p的调控机制。方法:60只健康SD大鼠分成3组,模型组和参附注射液组行腹主动脉缩窄术建立心肌肥大模型,假手术组腹主动脉不作缩窄。参附注射液组腹腔注射参附注射液6.0m L·kg^... 目的:研究参附注射液对大鼠心肌肥大模型micro RNA-199a-5p的调控机制。方法:60只健康SD大鼠分成3组,模型组和参附注射液组行腹主动脉缩窄术建立心肌肥大模型,假手术组腹主动脉不作缩窄。参附注射液组腹腔注射参附注射液6.0m L·kg^(-1)·d^(-1);模型组和假手术组均腹腔注射0.9%氯化钠溶液6.0m L·kg^(-1)·d^(-1),连续12周。采用Realtime RT-PCR方法检测大鼠心肌micro RNA-199a-5p的表达。利用生物信息学方法分析micro RNA-199a-5p的候选靶基因,并用Western blot方法检测靶基因HSP70的蛋白表达水平。结果:与假手术组比较,模型组大鼠心肌micro RNA-199a-5p上调(P<0.05);参附注射液组大鼠心肌micro RNA-199a-5p表达量较模型组下调(P<0.05);参附注射液组HSP70蛋白表达较假手术组和模型组显著增加(P<0.01)。结论:micro RNA-199a-5p在心肌肥大中可能发挥重要作用,参附注射液可能通过抑制micro RNA-199a-5p的上调,增加HSP70的蛋白表达水平,抑制心肌肥大大鼠心室重构,从而改善大鼠心功能。 展开更多
关键词 参附注射液 心肌肥大 MICRO RNa-199a-5p 热休克蛋白70
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lncRNA LUCAT1通过靶向调控miR-199a-5p/HIF-1α促进肾透明细胞癌786-O细胞的增殖和迁移 被引量：7
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作者 林其玲 陈畅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期273-281,共9页
目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺癌相关转录物1(lung cancer associated transcript 1,LUCAT1)对肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)786-O细胞的增殖和迁移能力的影响及其作用机制。方法:选取2... 目的:探讨长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)肺癌相关转录物1(lung cancer associated transcript 1,LUCAT1)对肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)786-O细胞的增殖和迁移能力的影响及其作用机制。方法:选取2013年6月至2017年6月宜昌市第一人民医院泌尿外科行手术切除的40例ccRCC患者癌组织及相应的癌旁组织样本,组织均经病理检查诊断明确。ccRCC细胞株786-O、ACHN、UM-RC-2及正常肾上皮细胞系KiMA培养完成后,用qPCR法检测cc RCC组织和细胞株中miR-199-a-5p、HIF-1α和LUCAT1T mRNA的表达,用CCK-8实验检测786-O细胞的增殖能力,Transwell法检测786-O细胞的迁移能力,双荧光素酶报告基因实验验证LUCAT1与miR-199a-5p的靶向作用关系,Western blotting实验检测LUCAT1、miR-199a-5p对HIF-1α蛋白表达的影响。结果:LUCAT1在ccRCC组织和细胞系786-O、ACHN和UM-RC-2中呈高表达(均P<0.01),敲低LUCAT1后可明显抑制786-O细胞的增殖和迁移(均P<0.01)。miR-199a-5p在ccRCC组织和细胞系中呈低表达(均P<0.01),StarBase数据库分析结果显示LUCAT1含有miR-199a-5p的保守目标位点,miR-199a-5p对LUCAT1-Wt的报告活性具有明显的抑制作用(P<0.01);敲低LUCAT1可明显降低miR-199a-5p的表达(P<0.01)。LUCAT1在转染miR-199a-5p模拟物的786-O细胞中呈低表达,但在LUCAT1+miR-199a-5p模拟物共转染的786-O细胞中出现逆转(P<0.05或P<0.01)。转染miR-199a-5p模拟物的786-O细胞中HIF-1αmRNA和蛋白表达水平升高,而LUCAT1过表达可逆转该效应(P<0.05或P<0.01)。转染miR-199a-5p模拟物抑制786-O细胞的增殖和迁移,而转染LUCAT1可部分消除转染miR-199a-5p模拟物对786-O细胞增殖和迁移的影响(P<0.05或P<0.01)。结论:lncRNA LUCAT1通过靶向调节miR-199a-5p/HIF-1α的表达从而在ccRCC中发挥促癌效应。 展开更多
关键词 长链非编码RNA 肺癌相关转录物1 miR-199a-5p HIF-1Α 肾透明细胞癌 786-O细胞 增殖 迁移
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Caveolin-1和miR-199a-5p在缺血性脑卒中患者外周血及模型大鼠脑组织、脾脏中的表达及其意义 被引量：5
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作者 李鹏飞 李帆 +1 位作者 高峰 张春兵 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2019年第7期1558-1562,共5页
目的探讨缺血性脑卒中(IS)患者外周血及模型大鼠脑组织、脾脏中miR-199a-5p和膜微囊蛋白(Cav)-1的表达水平及临床意义。方法初发IS患者(发病24 h内)外周血标本24例,同时收集在体检中心体检的健康人外周血标本22例。Ficoll淋巴细胞分离... 目的探讨缺血性脑卒中(IS)患者外周血及模型大鼠脑组织、脾脏中miR-199a-5p和膜微囊蛋白(Cav)-1的表达水平及临床意义。方法初发IS患者(发病24 h内)外周血标本24例,同时收集在体检中心体检的健康人外周血标本22例。Ficoll淋巴细胞分离液分离外周血单个核细胞(PBMC)。荧光定量PCR检测PBMC中miR-199a-5p和Cav-1的表达水平。采用改良Zea Longa线栓法构建SD大鼠大脑中动脉梗死(MCAO)模型。再灌注24 h后进行神经功能评分,收集脑皮质和脾脏组织。荧光定量PCR检测脑皮质和脾脏miR-199a-5p和Cav-1表达水平。结果 IS患者外周血PBMC中miR-199a-5p表达明显升高(P<0.001),Cav-1 mRNA表达显著下降(P<0.05)。与假手术组比较,MCAO模型组脑皮质和脾脏miR-199a-5p明显升高(P<0.001,P<0.01),Cav-1 mRNA表达显著下降(P<0.001,P<0.01)。结论 miR-199a-5p和Cav-1可能为IS患者重要的炎症指标。 展开更多
关键词 缺血性脑卒中 miR-199a-5p 膜微囊蛋白-1
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