人乳头状瘤病毒18E6E7和TPA协同诱发人胚食管上皮细胞恶性转化的研究 被引量：28

1

作者 沈忠英 蔡维佳 +5 位作者 沈健 许锦阶 岑山 滕智平 胡智 曾毅 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期1-6,共6页

为了研究病毒和促癌物在食管癌形成中的作用，用带有人乳头状瘤病毒１８型Ｅ６Ｅ７片段的载体腺病毒（简称ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ）感染人胚食管上皮细胞，然后加ＴＰＡ协同作用，观察细胞转化。将人胚食管切碎，与ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ... 为了研究病毒和促癌物在食管癌形成中的作用，用带有人乳头状瘤病毒１８型Ｅ６Ｅ７片段的载体腺病毒（简称ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ）感染人胚食管上皮细胞，然后加ＴＰＡ协同作用，观察细胞转化。将人胚食管切碎，与ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７ＡＡＶ同孵育２小时，在加有１０％小牛血清的１９９培养液培养和传代，形成永生化细胞株，即人胚食管上皮细胞汕头株（ＳＨＥＥ）。实验分两组：一组ＳＨＥＥ细胞在传代至第５和１３代时，两次在培养基中加入ＴＰＡ（１２Ｏｔｅｔｒａｄｅｃａｎｏｙｌｐｈｏｒｂｏｌ１３ａｃｅｔａｔｅ）５ｎｇ／ｍｌ，每次诱导２周，所获得的细胞株称为人胚食管上皮癌细胞汕头株１号（ＳＨＥＥＣ１）；另一组ＳＨＥＥ细胞培养条件相同，未加ＴＰＡ，为对照组。细胞转化的形态表型由光学显微镜、电子显微镜和荧光显微镜检查；ＤＮＡ含量和细胞周期用流式细胞仪检测；用３５ｍｍ软琼脂培养皿接种１０３细胞（第２０代），每组５碟，计算集落形成率；裸鼠皮下接种１０６细胞检测致瘤性；用荧光原位杂交（ＦＩＳＨ）和ＰＣＲ检测ＨＰＶ１８Ｅ６Ｅ７。结果表明：细胞ＤＮＡ合成和增殖指数（ＰＩｘ），ＳＨＥＥＣ１组（４５％）高于ＳＨＥＥ组（３４％）；高倍体细胞数，ＳＨＥ? 展开更多

关键词 食管癌 病理 人胚食管 上皮细胞 HPV18e6E7 TPA

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喉癌组织中HPV16/18E6、p53和EZH2的表达及其相关性分析 被引量：7

2

作者 任晓勇 罗花南 +3 位作者 成颖 靳耀峰 常换换 康全清 《临床肿瘤学杂志》 CAS 2013年第10期893-897,共5页

目的检测HPV16/18E6、p53和EZH2在喉鳞状细胞癌(喉癌)组织中的表达,探讨它们在肿瘤发生发展过程中的相互作用。方法采用免疫组化En Vision法检测78例喉癌、15例癌旁正常组织、20例声带息肉中HPV16/18E6、p53和EZH2蛋白的表达情况,分析... 目的检测HPV16/18E6、p53和EZH2在喉鳞状细胞癌(喉癌)组织中的表达,探讨它们在肿瘤发生发展过程中的相互作用。方法采用免疫组化En Vision法检测78例喉癌、15例癌旁正常组织、20例声带息肉中HPV16/18E6、p53和EZH2蛋白的表达情况,分析它们的表达与喉癌临床病理特征之间的关系以及三者之间的相关性。结果喉癌组织、癌旁正常组织、声带息肉中HPV16/18E6蛋白的阳性表达率分别为47.4%(37/78)、20.0%(3/15)和0(0/20);p53蛋白阳性表达率为60.3%(47/78)、33.3%(5/15)和0(0/20);EZH2蛋白阳性表达率为65.4%(51/78)、40.0%(6/15)和5.0%(1/20),差异均具统计学意义(P<0.05)。HPV16/18E6、EZH2的阳性表达率均随肿瘤T分期升高而增高(P<0.05);淋巴结转移组HPV16/18E6、p53阳性表达率高于无淋巴结转移组(P<0.05);p53阳性表达率随分化程度升高而增高(P<0.05)。p53和EZH2阳性表达表达一致(kappa值=0.451,P<0.05)。结论 HPV16/18E6、p53和EZH2蛋白表达与喉癌的发生关系密切。EZH2过表达与p53失活有关,二者在促进喉癌发展过程中发挥重要作用。 展开更多

关键词 喉肿瘤 HPV16 18e6 P53 EZH2 免疫组织化学

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子宫颈癌、子宫颈上皮内病变组织中SIRT1、HPV 16/18E6的表达及其意义 被引量：9

3

作者 侯兴华 孙笑非 +1 位作者 李春杨 金素芬 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期994-997,共4页

目的检测子宫颈癌及癌前病变中SIRT1的表达情况,探讨其与临床病理特征的关系。同时检测早期癌蛋白中HPV16/18E6的表达,分析两者的相关性。方法应用免疫组化En Vision法检测30例子宫颈炎、100例子宫颈上皮内病变(高级别、低级别各50例)... 目的检测子宫颈癌及癌前病变中SIRT1的表达情况,探讨其与临床病理特征的关系。同时检测早期癌蛋白中HPV16/18E6的表达,分析两者的相关性。方法应用免疫组化En Vision法检测30例子宫颈炎、100例子宫颈上皮内病变(高级别、低级别各50例)、30例子宫颈鳞状细胞癌组织中SIRT1和HPV 16/18E6的表达。结果子宫颈癌组织中SIRT1阳性率为93.33%(28/30),高于子宫颈炎组织(13.33%,4/30),差异有统计学意义(P<0.05)。子宫颈高级别上皮内病变SIRT1阳性率(88%,44/50)高于低级别上皮内病变(14%,7/50),差异有统计学意义(P<0.05)。但高级别上皮内病变与子宫颈癌SIRT1阳性率差异无统计学意义(P>0.05);低级别上皮内病变与子宫颈炎中SIRT1阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。在子宫颈癌中,SIRT1的阳性率与临床分期和组织学分级有关,晚期、分化差的子宫颈癌阳性率高于早期、分化好的子宫颈癌,差异有统计学意义(P<0.05)。在子宫颈癌中SIRT1的阳性率(93.33%,28/30)高于HPV 16/18E6(30%,9/30),在子宫颈高级别上皮内病变中SIRT1的阳性率(88%,44/50)高于HPV 16/18E6(28%,14/50),但在低级别上皮内病变中SIRT1的阳性率(14%,7/50)低于HPV 16/18E6(36%,18/50),两者差异有统计学意义(P<0.05)。结论 SIRT1的阳性率随着病变程度增加而升高,提示SIRT1与细胞恶性转变有关,其过表达可能促进上皮向高级别内病变乃至子宫颈癌进展。 展开更多

关键词 子宫颈肿瘤 上皮内病变 SIRT1 HPV16/18e6

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HPV16/18E6、cyclinD1、hTERT在喉癌组织中的表达及意义 被引量：5

4

作者 吕彩凤 江黎珠 陈鸿雁 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期515-518,共4页

目的:检测人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)16/18E(HPV16/18E6),周期素D1(CyclinD1)、端粒酶逆转录酶(Human telomerase transcriptase,hTERT)在喉癌组织中的表达水平,探讨HPV16/18E6、cyclinD1、hTERT与喉癌的关系。方法:收... 目的:检测人乳头状瘤病毒(Human papillomavirus,HPV)16/18E(HPV16/18E6),周期素D1(CyclinD1)、端粒酶逆转录酶(Human telomerase transcriptase,hTERT)在喉癌组织中的表达水平,探讨HPV16/18E6、cyclinD1、hTERT与喉癌的关系。方法:收集手术标本的石蜡切片42例,用免疫组织化学法检测喉癌组织中HPV16/18E6、cyclinD1、hTERT的表达情况。结果:(1)在喉癌组织中,HPV16/18E6、cyclinD1、hTERT阳性表达率分别为42.9%(18/42)、50.0%(21/42)、83.3%(35/42),明显高于对照组。(2)在喉癌组织中,HPV16/18E6和cyclinD1阳性表达率随T分期的增加及淋巴结转移而升高。hTERT阳性表达率随T分期增加而升高,而与淋巴结转移无关。三者都与年龄及性别无关。(3)HPV16/18E与cyclinD1,HPV16/18E与hTERT两者相互间都呈正相关。结论:(1)HPV16/18E6、cyclinD1、hTERT的高表达可能与喉癌的发生及发展相关。(2)喉癌中HPV16/18E6与cyclinD1,HPV16/18E6与hTERT之间可能存在相互作用,这种相互作用可能导致喉癌的发生,这可能为HPV16/18与喉癌发生之间的关系研究提供重要信息。 展开更多

关键词 喉癌 HPV16/18e6 CYCLIND1 HTERT 免疫组织化学

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HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织的表达及意义 被引量：2

5

作者 黄金双 林蓓 +3 位作者 齐跃 王冬冬 董伟妍 张淑兰 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期465-467,共3页

目的:通过检测HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的表达情况,探讨由HLA-DR抗原介导的免疫应答在感染高危型人乳头瘤病毒(HPV)至发展为宫颈癌过程中的作用机制。方法:采用免疫组织化学SP法检测正常宫颈、宫颈上皮内瘤病变(CIN)... 目的:通过检测HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的表达情况,探讨由HLA-DR抗原介导的免疫应答在感染高危型人乳头瘤病毒(HPV)至发展为宫颈癌过程中的作用机制。方法:采用免疫组织化学SP法检测正常宫颈、宫颈上皮内瘤病变(CIN)及宫颈癌组织中HLA-DR抗原及HPV16/18E6的表达情况。结果:HLA-DR抗原的阳性表达率在正常宫颈、CIN、宫颈癌组织中分别为37.5%、73.3%、81.8%,而HPV16/18E6蛋白的阳性表达率则分别为37.5%、60.0%、75.8%,两者在3组的表达差异显著,P均<0.05。HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率随临床分期、分化程度及淋巴结是否转移而不同,但无显著性差异,P均>0.05。结论:HLA-DR抗原递呈病毒抗原给T细胞引起的免疫应答可能在宫颈癌的发生发展过程中起重要的作用。 展开更多

关键词 HLA-DR抗原 HPV16/18e6蛋白 宫颈癌

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p53基因第72位密码子多态性与宫颈癌及HPV-16、18E6之间关系的研究 被引量：2

6

作者 侯敏敏 郄明蓉 +2 位作者 曹泽毅 杨开选 孙芝琳 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期404-407,共4页

目的探讨宫颈癌及其癌前病变中p53基因第72位密码子多态性的表达及其与HPV16、18E6表达之间的关系，以了解p58基因第72位密码子多态性是否可以作为预测宫颈癌发生的一项高危因子。方法以PCR法检测81例宫颈鳞癌（高分化13例、中分化24例... 目的探讨宫颈癌及其癌前病变中p53基因第72位密码子多态性的表达及其与HPV16、18E6表达之间的关系，以了解p58基因第72位密码子多态性是否可以作为预测宫颈癌发生的一项高危因子。方法以PCR法检测81例宫颈鳞癌（高分化13例、中分化24例、低分化44例；Ⅰb期24例、Ⅱa期15例、Ⅱb期37例、Ⅲa期5例）、18例宫颈腺癌、88例宫颈上皮内瘤样病变（CINⅡ30例、CINⅢ58例）及60例正常宫颈组织中p53基因第72位密码子多态性及HPV16、18E6的表达。结果p53Arg纯合子、p53Arg／Pro杂合子及p53Pro纯合子在宫颈鳞癌、腺癌和CIN（Ⅱ～Ⅲ）中分别占58．02％、30．86％、11．12％；55．55％、27．78％、16．67％I59．09％、21．59％、19．32％。各组中p53Arg纯合子明显高于p53Arg／Pro杂合子及p53Pro纯合子，且差异有统计学意义（P〈0．05IP〈0．01）。正常宫颈组织中p53Arg纯合子、p53Arg／Pro杂合子及p53Pro纯合子分别为23．33％、40．OO％、36．67％，三者间无统计学意义（P〉0．05）。宫颈癌组（鳞癌及腺癌）、CIN（Ⅰ～Ⅱ）组中p53Arg纯合子均高于正常对照组中p53Arg纯合子，且差异有统计学意义（P〈0．05）；宫颈鳞癌中HPVl6、18E6（＋）亚组中p53Arg纯合子显著高于HPV16、18E6（-）亚组及HPVl6、18E6（＋）正常对照组亚组（P〈0．05，P〈0．01）。各组中p53Arg纯合子均高于p53Pro纯合子（P〈0．05）；p53Arg纯合子及等位基因均未随宫颈癌临床分期及分化程度而变化，与宫颈癌前病变程度亦无关系。结论p53Arg纯合子可作为预测宫颈癌及其癌前病变的一项高危因子，与高危型HPVE6同时检测可提示宫颈病变的发展趋势；p53Arg纯合子与宫颈癌临床分期及分化程度无明显相关性。 展开更多

关键词 宫颈癌 P53基因 第72位密码子多态性 HPV16 18e6 癌蛋白

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宫颈癌组织中HPV16、18E6与p53的表达水平及临床意义 被引量：11

7

作者 陈宓 《实用癌症杂志》 2019年第8期1267-1270,共4页

目的探究宫颈癌组织中HPV16、18E6与p53的表达水平及临床意义。方法收集131例宫颈癌患者的宫颈癌组织和癌旁正常组织分别作为研究组和对照组。采用免疫组织化学染色法检测2组组织中HPV16、18E6和p53的表达水平并比较其差异;分析宫颈癌... 目的探究宫颈癌组织中HPV16、18E6与p53的表达水平及临床意义。方法收集131例宫颈癌患者的宫颈癌组织和癌旁正常组织分别作为研究组和对照组。采用免疫组织化学染色法检测2组组织中HPV16、18E6和p53的表达水平并比较其差异;分析宫颈癌组织中p53的表达水平与HPV16、18E6的关系;分析宫颈癌病理临床特征与HPV16、18E6和p53的表达水平间的关系。结果宫颈癌组织中HPV16、18E6与p53的表达水平明显高于癌旁正常组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。宫颈癌组织中p53的表达水平与HPV16、18E6呈负相关(P<0.05)。宫颈癌组织中HPV16、18E6的表达水平与患者年龄、组织学分级和病理分型有关(P<0.05),与TNM分期和淋巴结转移情况无关(P>0.05);宫颈癌组织中p53的表达水平与患者TNM分期和组织学分级有关(P<0.05),与年龄、淋巴结转移和病理分型情况无关(P>0.05)。结论HPV16、18E6与p53蛋白在宫颈癌组织中的表达水平均呈上升趋势。宫颈癌组织中p53的表达水平与HPV16、18E6呈负相关;HPV16、18E6通过促使p53降解,促进宫颈癌的发生发展。HPV16、18E6的表达水平与患者年龄、组织学分级和病理分型呈相关性,p53与患者TNM分期和组织学分级呈相关性。 展开更多

关键词 宫颈癌 HPV16、18e6 P53 表达水平 临床意义

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宫颈癌及宫颈癌前病变组织HPV16/18E6E7基因突变分析

8

作者 吴玉萍 李文典 +4 位作者 郭裕萍 张颖 李隆玉 邓克华 汪亚平 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期215-216,共2页

关键词 宫颈癌 癌前病变 HPV16/18e6E7 基因突变

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HPV18E6真核表达载体的构建及其在HaCaT细胞的表达

9

作者 李兵 冯定庆 +5 位作者 李跃波 伍娇娇 张红丽 尤青叶 朱园园 凌斌 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2014年第11期1739-1742,共4页

目的:构建pEGFP-C2-HPV18E6真核表达载体,观察其在HaCaT细胞中的表达。方法:采用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出带有XhoⅠ、EcoRⅠ酶切位点的HPV18E6基因片段,双酶切技术将HPV18E6基因全长片段克隆到真核表达载体pEGFP-C2上,PCR、双酶切、... 目的:构建pEGFP-C2-HPV18E6真核表达载体,观察其在HaCaT细胞中的表达。方法:采用RT-PCR法从HeLa细胞中扩增出带有XhoⅠ、EcoRⅠ酶切位点的HPV18E6基因片段,双酶切技术将HPV18E6基因全长片段克隆到真核表达载体pEGFP-C2上,PCR、双酶切、测序鉴定重组质粒;将重组质粒pEGFP-C2-HPV18E6通过脂质体瞬时转染HaCaT细胞,RT-PCR及融合蛋白绿色荧光观察,检测目的基因的表达。结果:双酶切及测序结果表明真核表达载体pEGFP-C2-HPV18E6构建成功,转染HaCaT细胞48h后可见绿色荧光蛋白的表达,RT-PCR可扩增目的基因条带。结论:成功构建了pEGFP-C2-HPV18E6真核表达载体,为进一步研究HPV18E6的生物学功能提供了帮助。 展开更多

关键词 宫颈癌 HPV18e6 基因表达

原文传递

HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌的表达及其相互关系

10

作者 黄金双 齐跃 +5 位作者 林蓓 王冬冬 周丹 董伟妍 张帆 张淑兰 《现代肿瘤医学》 CAS 2010年第10期2023-2026,共4页

目的:通过检测HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的表达情况,探讨由HLA-DR抗原介导的免疫应答在感染高危型HPV至发展为宫颈癌过程中的作用机制。方法:采用免疫组织化学SP法检测宫颈癌、CIN及正常宫颈组织中HLA-DR抗原及HPV16/1... 目的:通过检测HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的表达情况,探讨由HLA-DR抗原介导的免疫应答在感染高危型HPV至发展为宫颈癌过程中的作用机制。方法:采用免疫组织化学SP法检测宫颈癌、CIN及正常宫颈组织中HLA-DR抗原及HPV16/18E6的表达情况。结果:HLA-DR抗原的阳性表达率在宫颈癌、CIN、正常宫颈组织中分别为81.8%、73.3%、37.5%,而HPV16/18E6蛋白的阳性表达率则分别为75.8%、60.0%、37.5%,两者在三组中的表达均有显著差异(P均(0.05)。HLA-DR抗原及HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的阳性表达率随临床分期、分化程度变化及淋巴结是否转移而不同,但其差异无显著意义(P均(0.05)。结论:HLA-DR抗原递呈病毒抗原给T细胞引起的免疫应答可能在宫颈癌的发生发展过程中起着重要的作用。 展开更多

关键词 HLA-DR抗原 HPV16/18e6蛋白 宫颈癌 免疫组织化学

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Western blot法检测CIN宫颈液基细胞残液中HPV16、18E6感染的临床意义

11

作者 杨秋实 潘静坤 +3 位作者 杨向红 李建华 刘楠 范玉 《沈阳医学院学报》 2006年第3期193-194,198,共3页

目的:探讨免疫印记法(Western blot)检测子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasis,CIN)宫颈液基细胞残液中人乳头状瘤病毒(human papillomaviruses,HPV)16、18E6感染的临床意义。方法:采用Western blot法检测经病理证实的8... 目的:探讨免疫印记法(Western blot)检测子宫颈上皮内瘤变(cervical intraepithelial neoplasis,CIN)宫颈液基细胞残液中人乳头状瘤病毒(human papillomaviruses,HPV)16、18E6感染的临床意义。方法:采用Western blot法检测经病理证实的86例CIN和14例慢性宫颈炎的宫颈液基细胞残液中HPV16、18E6的感染状况。结果:宫颈液基细胞残液中HPV16、18E6感染的阳性率分别为CINⅠ组33.3%(8/24);CINⅡ组46.7%(14/30);CINⅢ组59.3%(19/32)。慢性宫颈炎(对照组)阳性率7.1%(1/14)。CINⅠ组与对照组比较差异无显著性(P>0.05),CINⅡ组和CINⅢ组与对照组比较均有统计学差异(P<0.05)。结论:Westernblot法检测CIN患者宫颈液基细胞残液中HPV16、18E6感染可以补充细胞学检查结果,对预防宫颈癌发生及降低其死亡率有重要意义。 展开更多

关键词 宫颈液基细胞 人乳头状瘤病毒16 18e6 子宫颈上皮内瘤变 免疫印记法

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大肠癌组织中HPV16、18E6,p^(53)癌基因蛋白表达的研究

12

作者 任占平 石喆 +3 位作者 陈蔚麟 唐德艳 杜娟 阮伶 《医学文选》 2000年第2期127-129,共3页

目的　探讨人乳头瘤病毒 16、 18型感染与 p5 3癌基因协同在大肠癌发生机制中的作用。方法　采用 SP免疫组化技术 ,检测 30例大肠腺瘤、 10例腺瘤恶变、 5 3例大肠腺癌和 30例正常大肠粘膜组织中 HPV16、 18E6 ,p5 3蛋白并分析其相互关... 目的　探讨人乳头瘤病毒 16、 18型感染与 p5 3癌基因协同在大肠癌发生机制中的作用。方法　采用 SP免疫组化技术 ,检测 30例大肠腺瘤、 10例腺瘤恶变、 5 3例大肠腺癌和 30例正常大肠粘膜组织中 HPV16、 18E6 ,p5 3蛋白并分析其相互关系。结果　腺瘤、腺瘤恶变和腺癌组中 E6 ,p5 3的阳性表达分别为 36 .7% (11/ 30 )、 33.3% (10 / 30 ) ,6 0 .0 % (6 /10 )、 6 0 .0 % (6 / 10 )和 5 4.7% (2 9/ 5 3)、 6 2 .2 % (33/ 5 3) ,而正常组均呈阴性表达。在腺瘤组中 ,随着上皮不典型性增生程度的加重 ,E6、 p5 3的阳性表达呈逐渐上升的趋势。腺瘤、腺瘤恶变及腺癌组中 E6与 p5 3的双阳性表达具显著相关性 (P <0 .0 5 )。在有淋巴结转移组中 ,E6的阳性表达和 E6与 p5 3的双阳性表达均显著高于无淋巴结转移组 (P <0 .0 5 )。结论　高危 HPV16、 18感染并在 p5 3癌基因的协同参与下 ,与本地区大肠癌的发生、发展过程密切相关 ,HPV 16、 18感染后所致的 p5 3突变 /失活可能是大肠腺瘤恶变过程中的一个早期事件 ,在腺瘤中同时检测 E6、 p5 3蛋白有可能成为大肠癌早期诊断的免疫学指标之一。 展开更多

关键词 结直肠肿瘤 人乳头瘤病毒 HPV16 18e6 病因

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HPV18E6基因沉默对宫颈癌Hela细胞生长和凋亡的影响 被引量：2

13

作者 上官文学 杨业鹏 +1 位作者 周梅 李五岭 《现代肿瘤医学》 CAS 2008年第10期1653-1656,共4页

目的:观察RNA干扰法沉默HPV18E6基因表达对宫颈癌Hela细胞生长和凋亡的影响,探索宫颈癌基因治疗的新途径。方法:针对HPV18E6 mRNA序列合成一对60bp的编码siRNA的DNA模板和一对60bp的非特异性对照DNA模板,构建pSUPER-siRNA和pSUPER-con... 目的:观察RNA干扰法沉默HPV18E6基因表达对宫颈癌Hela细胞生长和凋亡的影响,探索宫颈癌基因治疗的新途径。方法:针对HPV18E6 mRNA序列合成一对60bp的编码siRNA的DNA模板和一对60bp的非特异性对照DNA模板,构建pSUPER-siRNA和pSUPER-con重组质粒,瞬时转染Hela细胞;采用RT-PCR法检测质粒转染后细胞HPV18E6基因表达的变化,用蛋白免疫印迹法检测转染后Hela细胞p53、p21、Bcl-2和Bax蛋白表达变化,以细胞计数法检测细胞生长情况,Hoechest/PI双荧光活细胞染色法检测细胞凋亡。结果:pSUPER-siRNA质粒转染能有效降低HPV18E6在mRNA水平的表达,转染后48小时,抑制效率达70%以上;转染后细胞p53、p21和Bax蛋白表达显著增加,Bcl-2蛋白表达减少。RNA干扰法沉默HPV18E6基因表达后,Hela细胞增殖受到明显抑制,细胞凋亡率明显增加。结论:pSUPER-siRNA质粒转染可有效抑制HPV18E6在人宫颈癌Hela细胞中的表达,抑制Hela细胞生长并促进其凋亡。以HPV18E6为靶点的RNA干扰技术可望成为宫颈癌基因治疗的新途径。 展开更多

关键词 宫颈癌 RNA干扰 HPV18e6 凋亡

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靶向HPV18E6基因siRNA对HeLa细胞p21、VEGF、Bax和Bcl-2基因的影响 被引量：1

14

作者 赵洪霞 王言奎 +1 位作者 罗兵 殷广洁 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期261-265,共5页

目的探讨针对人乳头瘤病毒18型E6基因的特异性小干扰RNA(siRNA)对宫颈癌HeLa细胞p21、VEGF、Bax和Bcl-2基因的影响。方法采用脂质体法将特异性siRNA瞬时转染HeLa细胞,半定量RT-PCR检测siRNA转染后HeLa细胞中p21、血管内皮生长因子(VEGF)... 目的探讨针对人乳头瘤病毒18型E6基因的特异性小干扰RNA(siRNA)对宫颈癌HeLa细胞p21、VEGF、Bax和Bcl-2基因的影响。方法采用脂质体法将特异性siRNA瞬时转染HeLa细胞,半定量RT-PCR检测siRNA转染后HeLa细胞中p21、血管内皮生长因子(VEGF)、Bax和Bcl-2mR-NA的变化,免疫组化检测HeLa细胞中p21和VEGF蛋白的变化。结果RT-PCR检测结果显示转染后24、48、72hp21和BaxmRNA的表达与转染前比较均有升高。转染后24、48、72hVEGF和Bcl-2mRNA的表达与转染前比较均有降低。免疫组化检测结果显示转染后48、72hp21蛋白的表达与转染前比较均有升高。转染后48、72hVEGF蛋白的表达与转染前比较均有降低。结论靶向HPV18E6基因的siRNA可有效干扰宫颈癌HeLa细胞中p21、VEGF、Bax和Bcl-2基因的表达,从而抑制细胞增殖。 展开更多

关键词 HPV18e6基因 小干扰RNA P21 VEGF BAX Bcl-2

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HPV18E6的感染及PCNA、p53的表达与子宫颈鳞状细胞癌的关系

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作者 姜巍 金晓明 《中国医药指南》 2011年第11期25-26,37,共3页

目的探讨HPV感染,PCNA,p53的表达与子宫颈鳞状细胞癌发生、发展的相关性及临床意义。方法利用免疫组织化学的方法分别对42例子宫颈鳞状细胞癌患者进行组织学和HPV18E6、PCNA、p53的检测。结果①42例子宫颈鳞状细胞癌,角化型鳞状细胞癌30... 目的探讨HPV感染,PCNA,p53的表达与子宫颈鳞状细胞癌发生、发展的相关性及临床意义。方法利用免疫组织化学的方法分别对42例子宫颈鳞状细胞癌患者进行组织学和HPV18E6、PCNA、p53的检测。结果①42例子宫颈鳞状细胞癌,角化型鳞状细胞癌30例(30/42,71.43%),未角化型鳞状细胞癌有12例(12/42,28.57%)。②HPV18E6在子宫颈鳞状细胞癌中的表达率为73.81%(31/42),在角化型鳞状细胞癌中的表达率为76.67%(23/30),角化型高于非角化型鳞状细胞癌(50.0%,6/12,P>0.05),但无统计学意义。③PCNA在子宫颈鳞状细胞癌中的阳性表达率达83.33%(35/42)。p53在子宫颈鳞状细胞癌中的阳性表达率达42.86%(18/42)。p53在有淋巴结转移的表达率76.0%(19/25)比无淋巴结转移的表达率高29.41%(5/17,P<0.05),有统计学意义。结论①HPV18E6的高表达,是预测子宫颈上皮异常增生、癌变的标志物。②HPV18E6表达与PCNA的表达呈正相关。二者的表达促进了抑癌基因p53的激活。而p53的过表达,与淋巴结的转移呈正相关,预测肿瘤恶性程度高,预后差。 展开更多

关键词 子宫颈鳞状细胞癌 HPV HPV18e6 PCNA P53

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高危型HPV-18E6引起小鼠骨髓源性树突细胞p53的磷酸化

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作者 孙丽娜 韦超 +1 位作者 吉兴照 李振军 《中国医药导报》 CAS 2016年第36期22-25,F0004,共5页

目的 探讨高危型HPV-18E6对树突细胞中p53蛋白磷酸化的作用。方法 构建真核表达载体pGFP-18E6,转染小鼠骨髓源性的树突细胞,采用磷酸化的p53抗体免疫荧光化学染色,共聚焦显微镜下动态观察其表达水平。选用p53磷酸化位点的抗体（包括Ser6... 目的 探讨高危型HPV-18E6对树突细胞中p53蛋白磷酸化的作用。方法 构建真核表达载体pGFP-18E6,转染小鼠骨髓源性的树突细胞,采用磷酸化的p53抗体免疫荧光化学染色,共聚焦显微镜下动态观察其表达水平。选用p53磷酸化位点的抗体（包括Ser6、Ser9、Ser15、Ser20、Ser37、Ser46和Ser392）对GFP-18E6融合蛋白表达的细胞进行免疫细胞化学染色,进一步探讨磷酸化的p53蛋白在转染后12-72 h的动态表达水平。结果 树突细胞在转染pGFP-18E6和p EGFP-C1质粒后,GFP-18E6主要定位于细胞核内,而对照组只表达GFP的蛋白则均匀分布于树突细胞。GFP-18E6诱导了p53蛋白的Ser15、Ser20和Ser392三个位点磷酸化。激光共聚焦显微镜测量细胞荧光强度显示,GFP-18E6的表达与时间有相关性。结论 高危型HPV-18E6可以诱导树突细胞的p53蛋白发生多个位点的磷酸化,包括Ser15、Ser20和Ser392,p53多个位点磷酸化是病毒宿主相互作用的一种机制。 展开更多

关键词 HPV18-E6 树突细胞 p53磷酸化 定位

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HPV16/18E6蛋白和PKR/p-PKR在宫颈病变的表达及意义 被引量：1

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作者 罗远材 瞿全新 糜若然 《现代妇产科进展》 CSCD 北大核心 2009年第8期613-617,共5页

目的：探讨宫颈病变组织HPV16/18感染对蛋白激酶R（PKR）激活的影响及两者在宫颈癌形成、演进过程中的作用和对宫颈癌患者预后的影响。方法：用免疫组化SP法检测HPV16/18型E6蛋白（E6）、PKR、磷酸化型PKR（p-PKR）在63例宫颈癌、114例... 目的：探讨宫颈病变组织HPV16/18感染对蛋白激酶R（PKR）激活的影响及两者在宫颈癌形成、演进过程中的作用和对宫颈癌患者预后的影响。方法：用免疫组化SP法检测HPV16/18型E6蛋白（E6）、PKR、磷酸化型PKR（p-PKR）在63例宫颈癌、114例宫颈上皮内瘤样病变（CINⅠ-Ⅲ）、15例正常宫颈组织的表达。结果：E6蛋白与PKR在各组的阳性表达率与宫颈病变级别呈正相关（P〈0.05,P〈0.05）,E6蛋白与PKR在各组的阳性表达率呈正相关（P〈0.05）;宫颈癌组PKR阳性表达率明显高于p-PKR（P〈0.01）;E6、PKR阳性表达率与肿瘤大小有关（P〈0.05,P〈0.05）;宫颈癌患者病情进展与临床分期显著相关（P〈0.01）,病情进展与E6、p-PKR阳性表达率相关（P〈0.05,P〈0.05）。结论：HPV16/18感染可阻碍PKR激活,突破机体防御HPV16/18感染的机制,在宫颈癌的发生及演进过程中可能起了重要作用,对宫颈癌患者预后不利;p-PKR能抑制宫颈癌患者病情进展,可能改善其预后。 展开更多

关键词 宫颈肿瘤 宫颈上皮内瘤样病变 16/18型人乳头状瘤病毒E6蛋白 蛋白激酶PKR 磷酸化型PKR

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SIPA1、HPV16/18E6在宫颈癌中的表达及其与临床病理之间的关系 被引量：2

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作者 陈标卫 叶锡银 《中国医学创新》 CAS 2019年第3期121-124,共4页

目的:探讨信号诱导增殖相关蛋白1(SIPA1)和16、18型人乳头瘤病毒E6蛋白(HPV16/18E6)在宫颈癌中的表达及其与临床病理之间的关系。方法:选取本院宫颈癌患者120例为宫颈癌组,子宫肌瘤患者80例为正常宫颈组,均采用ELPS法检测SIPA1、HPV16/1... 目的:探讨信号诱导增殖相关蛋白1(SIPA1)和16、18型人乳头瘤病毒E6蛋白(HPV16/18E6)在宫颈癌中的表达及其与临床病理之间的关系。方法:选取本院宫颈癌患者120例为宫颈癌组,子宫肌瘤患者80例为正常宫颈组,均采用ELPS法检测SIPA1、HPV16/18E6蛋白的表达。比较两组SIPA1、HPV16/18E6蛋白的阳性表达情况,分析SIPA1蛋白与HPV16/18E6蛋白在宫颈癌组织中的表达关系,以及宫颈癌组织中SIPA1、HPV16/18E6蛋白的阳性表达与临床病理特征之间的关系。结果:正常宫颈组SIPA1阳性率高于宫颈癌组,HPV16/18E6阳性率显著低于宫颈癌组,比较差异均有统计学意义(P<0.05);Spearman秩和检验显示,宫颈癌组织中SIPA1蛋白与HPV16/18E6蛋白呈负相关(P<0.05);单因素分析显示,宫颈癌组织中SIPA1、HPV16/18E6蛋白的阳性表达与盆腔淋巴结转移有关(P<0.05),与年龄、临床分期以及病理分级均无关(P>0.05)。结论:SIPA1蛋白低表达、HPV16/18E6蛋白高表达是宫颈癌组织学特征,且在宫颈癌盆腔淋巴结转移中发挥重要作用。 展开更多

关键词 信号诱导增殖相关蛋白1 16、18型人乳头瘤病毒E6蛋白 宫颈癌 免疫组织化学

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女性外阴病变及其与HPV16/18、HPV6的相关性 被引量：4

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作者 李虹 张雪红 +4 位作者 邢兰瑛 蔡东阁 潘艳艳 冯敏娟 王治荣 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期486-489,共4页

目的研究外阴病变及其与HPV16/18、HPV6的关系。方法收集西安交通大学医学院第二附属医院手术治疗的44例女性外阴病变患者的临床病理资料,包括鳞癌11例,鳞状上皮内瘤变(VIN)10例,尖锐湿疣9例及白色病变14例。采用免疫组化SP方法检测HPV1... 目的研究外阴病变及其与HPV16/18、HPV6的关系。方法收集西安交通大学医学院第二附属医院手术治疗的44例女性外阴病变患者的临床病理资料,包括鳞癌11例,鳞状上皮内瘤变(VIN)10例,尖锐湿疣9例及白色病变14例。采用免疫组化SP方法检测HPV16/18E6蛋白、HPV6L1蛋白的表达。结果①4组外阴病变患者年龄中位数依次为:外阴鳞癌61岁、VIN 45.5岁、尖锐湿疣24岁、外阴白色病44岁,尖锐湿疣组中位年龄低于外阴鳞癌组及白色病变组(P<0.05),其余各组间中位年龄无统计学差异。②HPV16/18E6蛋白在外阴白色病变组、尖锐湿疣组、VIN组及外阴鳞癌组的阳性率分别为2/14、3/9、3/10、8/11,外阴鳞癌组高于白色病变组(P<0.05),其余各组间无统计学差异;HPV6L1蛋白在外阴白色病变组、尖锐湿疣组、VIN组、外阴鳞癌组的阳性率分别为1/14、8/9、4/10、3/11,尖锐湿疣组高于其他各外阴病变组(P<0.05),其余各组间比较差异无统计学意义。③HPV16/18E6蛋白、HPV6L1蛋白在早期外阴鳞癌的阳性率均高于中晚期(P<0.05);HPV16/18E6蛋白、HPV6L1蛋白表达均与外阴鳞癌的组织学分级、年龄分组、绝经情况、产次不相关(P>0.05);HPV16/18E6蛋白与HPV6L1蛋白在外阴鳞癌中的表达不相关(P>0.05)。结论外阴病变的发病与年龄及HPV16/18、HPV6感染有关;外阴鳞癌中HPV16/18、HPV6的感染率与FIGO分期有关,HPV16/18感染率与HPV6的感染率无关。 展开更多

关键词 外阴病变 HPV16/18e6蛋白 HPV6 L1蛋白

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肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌的表达及其与HPV感染的关系 被引量：2

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作者 欧阳运薇 潘小玲 +2 位作者 彭芝兰 屈艺 张红英 《四川大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期410-413,共4页

目的探讨肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌中的蛋白表达以及人乳头瘤病毒(HPV)16E6、E7和HPV18E6/E7感染对其表达的影响。方法采用免疫组化SP法检测70例浸润性宫颈癌、15例原位癌、20例正常宫颈组织中KAI1蛋白的表达,采用PCR扩增-琼脂糖凝... 目的探讨肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌中的蛋白表达以及人乳头瘤病毒(HPV)16E6、E7和HPV18E6/E7感染对其表达的影响。方法采用免疫组化SP法检测70例浸润性宫颈癌、15例原位癌、20例正常宫颈组织中KAI1蛋白的表达,采用PCR扩增-琼脂糖凝胶电泳法检测浸润性宫颈癌组织中HPV16E6、E7和HPV18E6/E7的DNA状况。结果宫颈浸润癌及原位癌组织中的KAI1蛋白表达与正常宫颈上皮中的表达相比明显下调(P<0.05),原位癌与浸润癌中的表达差异无统计学意义;HPV16E6、E7和HPV18E6/E7在浸润性宫颈癌中的阳性率分别为67.1%、54.3%和12.9%,HPV16E6、E7和HPV18E6/E7感染与宫颈癌中的KAI1蛋白表达无相关性。结论肿瘤转移抑制基因KAI1在宫颈癌中呈下调表达,HPV16E6、E7和HPV18E6/E7感染不影响其表达。 展开更多

关键词 宫颈癌 肿瘤转移机制基因KAI1 人乳头瘤病毒16E6、E7 人乳头瘤病毒18e6/E7

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