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高效离子排斥色谱法检测复方氨基酸注射液(18AA)中山梨醇含量
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作者 左利民 肖菁 +6 位作者 郭鑫 赵婷 连晓芳 刘惠一 谷永升 周怡 山广志 《中国新药杂志》 北大核心 2025年第3期312-316,共5页
目的:建立高效离子排斥色谱法测定复方氨基酸注射液(18AA)中山梨醇含量。方法:采用Rezex ROA-organic Acid H^(+)(8%)色谱柱(300 mm×7.8 mm,8μm),流动相为12.5×10^(-3)mol·L^(-1)硫酸溶液,等度洗脱,流速为0.5 mL·m... 目的:建立高效离子排斥色谱法测定复方氨基酸注射液(18AA)中山梨醇含量。方法:采用Rezex ROA-organic Acid H^(+)(8%)色谱柱(300 mm×7.8 mm,8μm),流动相为12.5×10^(-3)mol·L^(-1)硫酸溶液,等度洗脱,流速为0.5 mL·min^(-1),柱温为55℃,进样10μL,检测波长200 nm。结果:氨基酸成分不干扰山梨醇测定,山梨醇峰与相邻色谱峰分离度良好,在4.905~19.62 mg·mL^(-1)浓度范围线性良好(r=1.000,n=5),精密度、重复性、稳定性试验的RSD均<1.0%,平均回收率为98.90%,RSD为1.55%(n=9)。3批市售复方氨基酸注射液(18AA)中山梨醇含量分别为标示量的98.54%,97.92%,97.24%。结论:采用该方法能够有效解决氨基酸成分的干扰,不需进行复杂的前处理工作,快速简便、专属性强、准确度高,可用于复方氨基酸注射液(18AA)中山梨醇的含量测定。 展开更多
关键词 高效离子排斥色谱法 复方氨基酸注射液(18aA) 山梨醇 含量测定
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出生缺陷相关基因SLC18A3基因研究进展
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作者 付天明 舒敏思 高春元 《四川生理科学杂志》 2025年第4期942-944,共3页
出生缺陷防控是当前妇幼保健工作的重点和难点。随着技术的不断革新,新的致病基因不断被发现。目前的研究显示SLC18A3基因与多种出生缺陷相关,它的诸多结构及功能尚在进一步探索之中。本文就目前对SLC18A3基因结构及功能的研究进展进行... 出生缺陷防控是当前妇幼保健工作的重点和难点。随着技术的不断革新,新的致病基因不断被发现。目前的研究显示SLC18A3基因与多种出生缺陷相关,它的诸多结构及功能尚在进一步探索之中。本文就目前对SLC18A3基因结构及功能的研究进展进行阐述。 展开更多
关键词 出生缺陷 全外显子测序 全基因组测序 SLC18a3基因
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关中奶山羊产奶性状候选基因ALDH18A1和PRKAG1的生物信息学分析
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作者 杨利娜 王卫宁 +3 位作者 倪洁 贤明 孟金铭 胡建宏 《家畜生态学报》 北大核心 2025年第6期29-35,共7页
为了探究关中奶山羊产奶性状候选基因ALDH18A1和PRKAG1编码的蛋白结构功能,本研究基于Fst、θπ以及Tajima'D方法对ALDH18A1和PRKAG1基因在基因组上的受选择信号进行分析,并对受选择位点进行连锁不平衡分析以鉴定位点的连锁情况,最... 为了探究关中奶山羊产奶性状候选基因ALDH18A1和PRKAG1编码的蛋白结构功能,本研究基于Fst、θπ以及Tajima'D方法对ALDH18A1和PRKAG1基因在基因组上的受选择信号进行分析,并对受选择位点进行连锁不平衡分析以鉴定位点的连锁情况,最后通过生物信息学分析确定基因编码蛋白的结构,预测基因中存在的非同义突变对编码蛋白的影响,为关中奶山羊的分子育种奠定理论基础。 展开更多
关键词 关中奶山羊 产奶性状 ALDH18a1 PRKAG1 非同义突变
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外周血microRNA-18a-5p、FLR、NLR水平与中晚期胃癌患者预后的关系 被引量:1
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作者 李惠子 袁忆航 张全安 《中国现代医学杂志》 2025年第8期73-78,共6页
目的 探讨外周血microRNA-18a-5p(miR-18a-5p)联合纤维蛋白原与淋巴细胞比值(FLR)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)变化与中晚期胃癌患者预后的关系。方法 选取2019年12月—2024年3月南京市江宁医院收治的102例中晚期胃癌患者,于治疗前... 目的 探讨外周血microRNA-18a-5p(miR-18a-5p)联合纤维蛋白原与淋巴细胞比值(FLR)、中性粒细胞与淋巴细胞比值(NLR)变化与中晚期胃癌患者预后的关系。方法 选取2019年12月—2024年3月南京市江宁医院收治的102例中晚期胃癌患者,于治疗前采用全自动血液细胞分析仪检测中性粒细胞计数、淋巴细胞计数,计算NLR;采用免疫比浊法测定FIB,计算纤维蛋白原;采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-18a-5p表达。给予患者化疗,采取门诊、电话形式进行随访,2024年10月31日随访终止,根据患者预后状况分为预后良好组和预后不良组(患者出现远处转移、复发或死亡)。比较预后良好组和预后不良组患者临床资料,分析中晚期胃癌患者预后不良的因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评估预测价值。结果 102例中晚期胃癌患者,预后不良24例,预后不良率为23.59%。预后不良组低分化占比、Ⅳ期占比、FLR、NLR和miR-18a-5p相对表达量均高于预后良好组(P <0.05)。多因素逐步Logistic回归分析结果显示:分化程度为低分化[OR=4.240(95%CI:1.603,11.217)]、临床分期为Ⅳ期[OR=4.833(95%CI:1.832,12.752)]、FLR水平高[OR=4.750(95%CI:2.072,10.889)]、NLR水平高[OR=3.481(95%CI:1.767,6.858)]、miR-18a-5p相对表达量高[OR=2.548(95%CI:1.566,4.146)]均是中晚期胃癌患者预后不良的危险因素(P <0.05)。ROC曲线结果显示,FLR、 NLR、 miR-18a-5p水平预测中晚期胃癌患者预后的敏感性分别为79.2%(95%CI:0.673,0.910)、62.5%(95%CI:0.506,0.744)、75.0%(95%CI:0.631,0.869),特异性分别为70.5%(95%CI:0.586,0.824)、73.1%(95%CI:0.612,0.851)、67.9%(95%CI:0.561,0.798)。3者联合预测的敏感性为87.5%(95%CI:0.756,0.994),特异性为85.9%(95%CI:0.740,0.978)。结论 FLR、NLR、miR-18a-5p联合预测中晚期胃癌患者预后具有较高的价值。 展开更多
关键词 中晚期胃癌 microRNA-18a-5p 纤维蛋白原与淋巴细胞比值 中性粒细胞与淋巴细胞比值
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热处理对铸态Ti-18Al-10Nb合金组织和性能的影响
5
作者 李伟 秦春 杨易 《热加工工艺》 北大核心 2025年第24期213-215,228,共4页
研究了热处理温度以及冷却方法对Ti-18Al-10Nb合金铸态组织和力学性能的影响规律。结果表明:铸态Ti-18Al-10Nb合金的显微组织是由α2相和β相组成。随着固溶温度的升高,α2相的含量和厚度随之减少,合金的压缩性能呈下降趋势。铸态下Ti-1... 研究了热处理温度以及冷却方法对Ti-18Al-10Nb合金铸态组织和力学性能的影响规律。结果表明:铸态Ti-18Al-10Nb合金的显微组织是由α2相和β相组成。随着固溶温度的升高,α2相的含量和厚度随之减少,合金的压缩性能呈下降趋势。铸态下Ti-18Al-10Nb合金的压缩强度为1454 MPa,但在985℃保温1 h+空冷处理后,合金压缩强度为1355 MPa,压应变为0.047,相比铸态,应变降低了68.5%。相同热处理温度下,水冷后合金的压缩强度增加;在785℃保温1 h+水冷处理后,压缩强度为1210 MPa,而空冷后的压缩强度为1178 MPa。 展开更多
关键词 Ti-18al-10Nb合金 显微组织 力学性能
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沉默MRPS18A对胆管癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及机制
6
作者 刘鑫慧 胡守奎 +1 位作者 葛洁洁 吕朋举 《河南医学研究》 2025年第8期1391-1398,共8页
目的 探讨沉默线粒体核糖体蛋白S18a(MRPS18A)对胆管癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及相关机制。方法 通过GEPIA2数据库分析MRPS18A在胆管癌组织和正常胆管组织中的相对表达差异,并分析MRPS18A高表达患者与低表达患者的生存期差异... 目的 探讨沉默线粒体核糖体蛋白S18a(MRPS18A)对胆管癌细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭的影响及相关机制。方法 通过GEPIA2数据库分析MRPS18A在胆管癌组织和正常胆管组织中的相对表达差异,并分析MRPS18A高表达患者与低表达患者的生存期差异。检测MRPS18A在胆管癌细胞和正常胆管上皮细胞中的表达水平。通过细胞转染沉默胆管癌细胞RBE、QBC939中MRPS18A的表达。将RBE、QBC939细胞随机分为si-NC组、si-MRPS18A-1组。MTT和克隆形成实验检测RBE、QBC939细胞增殖水平。流式细胞术和原位末端标记(TUNEL)染色检测RBE、QBC939细胞凋亡水平。Transwell检测RBE、QBC939细胞迁移、侵袭水平。蛋白质免疫印迹(Western blot)检测MRPS18A、p21、Cyclin B1、B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、切割型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved Caspase-3)、E-钙黏蛋白(E-cad)、N-钙黏蛋白(N-cad)表达水平。结果 MRPS18A在胆管癌组织中表达水平高于正常胆管组织(P<0.05)。MRPS18A高表达胆管癌患者的总生存期和无病生存期低于MRPS18A低表达胆管癌患者(P<0.05)。MRPS18A在胆管癌细胞RBE、QBC939、HuH28、KMBC中的表达水平高于正常胆管上皮细胞HIBEC(P<0.05)。与si-NC组RBE、QBC939细胞比较,si-MRPS18A-1组RBE、QBC939细胞MRPS18A、OD _(450)、克隆形成数、细胞迁移数、细胞侵袭数、Cyclin B1、Bcl-2、N-cad水平降低(P<0.05),凋亡率、凋亡指数、p21、Bax、cleaved Caspase-3、E-cad水平升高(P<0.05)。结论 沉默MRPS18A可抑制胆管癌细胞增殖、迁移、侵袭并诱导细胞凋亡。其机制可能与MRPS18A调控细胞周期、线粒体凋亡通路和上皮间质转化进程有关。 展开更多
关键词 胆管癌 MRPS18a 增殖 凋亡 迁移 侵袭
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SWRCH18A盘条冷镦开裂原因分析
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作者 韩丽娟 赵磊 +1 位作者 李桂英 柯炜 《金属制品》 2025年第6期46-49,共4页
SWRCH18A盘条冷镦螺栓螺母过程中开裂,分析开裂样品化学成分、显微组织及缺陷特征。结果表明:开裂件化学成分符合GB/T 6478—2015要求,但螺母与杆部表面存在深度154μm的异常增碳层,珠光体体积分数超过85%,显微硬度280 HV0.2,显著高于基... SWRCH18A盘条冷镦螺栓螺母过程中开裂,分析开裂样品化学成分、显微组织及缺陷特征。结果表明:开裂件化学成分符合GB/T 6478—2015要求,但螺母与杆部表面存在深度154μm的异常增碳层,珠光体体积分数超过85%,显微硬度280 HV0.2,显著高于基体160 HV0.2。增碳层破坏组织连续性,导致局部塑性变形能力下降,冷镦时沿增碳与基体界面开裂。增碳源于连铸过程中保护渣卷入导致的表面渗碳。建议优化保护渣配方,严格控制连铸操作流程及盘条表面检测。 展开更多
关键词 SWRCH18a 冷镦 增碳 珠光体 化学成分
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冷镦钢SWRCH18A拉拔断裂原因分析
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作者 吕孝光 《福建冶金》 2025年第5期38-40,共3页
针对某厂SWRCH18A盘条拉拔断裂问题,通过金相高倍检测,扫描电镜和能谱分析,分析导致SWRCH18A盘条拉拔断裂的主要原因。结果表明:盘条表面外伤和盘条内部大尺寸非金属夹杂物是导致某厂SWRCH18A盘条拉拔断裂的主要原因。
关键词 SWRCH18a 拉拔断裂 表面外伤 非金属夹杂物
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原子吸收分光光度法测定复方氨基酸注射液(18AA-I)中钠
9
作者 张俊朋 连莹 王宣宣 《化学分析计量》 2025年第3期79-85,共7页
建立原子吸收分光光度法测定复方氨基酸注射液(18AA-I)中钠含量。样品以0.5%硫酸铜的硝酸溶液为溶剂,乙炔空气燃助比为1.3∶10,检测波长为589 nm,狭缝宽度为0.2 nm,以标准曲线法定量。钠的质量浓度在1~5μg/mL范围内与吸光度值线性关系... 建立原子吸收分光光度法测定复方氨基酸注射液(18AA-I)中钠含量。样品以0.5%硫酸铜的硝酸溶液为溶剂,乙炔空气燃助比为1.3∶10,检测波长为589 nm,狭缝宽度为0.2 nm,以标准曲线法定量。钠的质量浓度在1~5μg/mL范围内与吸光度值线性关系良好,相关系数为0.9994,方法检出限为0.028μg/mL。样品测定结果的相对标准偏差为0.6%(n=6),空白基质加标回收率为98.4%~101.9%。该方法准确简便,能够有效消除样品中基质干扰,适用于复方氨基酸注射液(18AA-I)中钠含量的测定。 展开更多
关键词 复方氨基酸注射液(18aA-I) 原子吸收分光光度法 钠含量
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优质抗稻瘟病水稻不育系蓉18A的选育与应用 被引量:23
10
作者 徐敬洪 沈超 +5 位作者 陈胜 袁亚章 蔡良俊 李志义 文勇 梁义 《杂交水稻》 CSCD 北大核心 2011年第4期11-13,共3页
蓉18A是成都市农林科学院作物研究所以绵5B为母本,D香1B为父本进行杂交,经多代自交后与绵5A测交、回交育成的籼稻三系不育系,具有穗大、配合力好、米质优、抗稻瘟病性强等特点,2006年通过四川省技术鉴定。利用该不育系配组育成的蓉稻41... 蓉18A是成都市农林科学院作物研究所以绵5B为母本,D香1B为父本进行杂交,经多代自交后与绵5A测交、回交育成的籼稻三系不育系,具有穗大、配合力好、米质优、抗稻瘟病性强等特点,2006年通过四川省技术鉴定。利用该不育系配组育成的蓉稻415、蓉18优447、蓉18优188 3个杂交稻组合已通过四川省农作物品种审定委员会审定。 展开更多
关键词 杂交水稻 三系不育系 18a 抗稻瘟病 选育
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CYP3A4*18A、CYP3A4*18B和MDR1 C3435T基因多态性对阿托伐他汀血药浓度及疗效的影响 被引量:9
11
作者 刘亦伟 林翠鸿 +3 位作者 王长连 蔡斌 柯蒙 黄品芳 《中国药学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第19期1682-1689,共8页
目的探讨高脂血症患者CYP3A4*18A、*18B和MDR1 C3435T基因多态性对阿托伐他汀血药浓度、调脂疗效的影响。方法 115例福建籍汉族高脂血症患者以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(polymerase chain reaction-restriction fragment len... 目的探讨高脂血症患者CYP3A4*18A、*18B和MDR1 C3435T基因多态性对阿托伐他汀血药浓度、调脂疗效的影响。方法 115例福建籍汉族高脂血症患者以聚合酶链反应-限制性片段长度多态性法(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)进行基因分型,HPLC-UV检测阿托伐他汀稳态血药谷浓度,均相酶法监测治疗前、用药1个月后血清总胆固醇(TC)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、甘油三酯(TG)水平。用SPSS13.0软件以ANOVA方差分析高脂血症患者基因型与调脂疗效、血药浓度之间的关系。结果 115例高脂血症患者,CYP3A4*18A、*18B的突变频率分别为3.48%和23.48%,MDR1 C3435T突变率为31.74%,三基因位点SNPs分布与文献报道的国人正常人群无显著性差异(P>0.05);CYP3A4*18A和MDR1 C3435T各基因型患者ATV血药浓度组间及组内差异均无统计学意义(P>0.05)。CYP3A4*18B基因突变纯合子(AA)组患者ATV血药浓度显著高于突变杂合子(GA)组和野生型纯合子(GG)组(P=0.016)。CYP3A4*18A、MDR1 C3435T不同基因型患者的调脂效率无显著性差异(P>0.05),CYP3A4*18B基因的AA组患者TC调脂效果显著优于GA组和GG组患者(P=0.02);LDL-C变化率三基因型组间均有显著差异,依次为AA组>GA组>GG组(P=0.01),对TG和HDL-C的调节作用3种基因型患者无显著性差异(P>0.05)。治疗前后,TC的变化率与血药浓度呈显著性相关(P=0.031),而其余3种脂质变化率与血药浓度相关性无统计学意义(P>0.05)。结论 MDR1 C3435T与CYP3A4*18A基因SNPs(single nucleotide polymorphisms),不影响ATV血药浓度及其疗效。携带CYP3A4*18B基因的患者接受ATV治疗时,比未携带者血药浓度高,调脂疗效更显著。 展开更多
关键词 阿托伐他汀 CYP3A4*18a CYP3A4*18B MDR1 C3435T 基因多态性 血药浓度 聚合酶链反应-限制性片段长度多 态性法
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HMGCS1基因对猪肌肉生长发育的影响及miRNA-18a/b对HMGCS1基因的调控 被引量:6
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作者 孙伟 唐中林 +2 位作者 谭林 雷初朝 李奎 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期2543-2549,共7页
【目的】研究HMGCS1基因对猪骨骼肌生长发育的影响及其靶标的验证。【方法】采用real-time PCR对通城猪不同组织以及背最长肌不同发育时间点的HMGCS1基因的表达变化进行检测。【结果】①HMGCS1基因在成年猪肺组织中的表达量最高;②在背... 【目的】研究HMGCS1基因对猪骨骼肌生长发育的影响及其靶标的验证。【方法】采用real-time PCR对通城猪不同组织以及背最长肌不同发育时间点的HMGCS1基因的表达变化进行检测。【结果】①HMGCS1基因在成年猪肺组织中的表达量最高;②在背最长肌发育中,该基因分别在胚胎期33和65 d高表达,出生后20、30、40和60 d低表达;③双荧光素酶试验显示,转染miR-18a/b minics组荧光素酶活性低于对照组。【结论】HMGCS1参与了猪骨骼肌生长发育过程,并受miR-18a/b的调控,是猪的产肉性状的潜在候选基因。 展开更多
关键词 HMGCS1基因 miR-18a b 骨骼肌 生长发育
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优质抗稻瘟病水稻不育系蓉18A配合力分析 被引量:9
13
作者 徐敬洪 沈超 +6 位作者 蔡良俊 张帆 袁亚章 李志义 杨震 王富全 文勇 《杂交水稻》 CSCD 北大核心 2016年第1期70-73,共4页
通过双列杂交试验分析了水稻不育系蓉18A的配合力,结果表明,蓉18A产量一般配合力与宜香1A相当,显著高于中9A和与金23A,穗大粒多是蓉18A产量一般配合力较高的主要原因;主要米质性状一般配合力与宜香1A相当,优于中9A和金23A。蓉18A产量和... 通过双列杂交试验分析了水稻不育系蓉18A的配合力,结果表明,蓉18A产量一般配合力与宜香1A相当,显著高于中9A和与金23A,穗大粒多是蓉18A产量一般配合力较高的主要原因;主要米质性状一般配合力与宜香1A相当,优于中9A和金23A。蓉18A产量和米质性状一般配合力均较高,是选育优质、高产杂交水稻的优良亲本。 展开更多
关键词 杂交水稻 不育系 18a 产量性状 米质性状 配合力
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家蚕P450基因CYP18A1的克隆、序列分析及转录活性 被引量:12
14
作者 艾均文 王根洪 +4 位作者 李艳红 余泉友 张学松 朱勇 向仲怀 《昆虫学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期237-245,共9页
蜕皮激素对昆虫生长、发育和繁殖有重要调控作用,尤其对蜕皮和变态过程。利用GenBank上登录的蜕皮激素C26羟基化酶候选基因CYP18A1的氨基酸序列对家蚕Bombyx mori全基因组数据库进行BLASTP比对,发现了家蚕直向同源基因(ortholog),其完... 蜕皮激素对昆虫生长、发育和繁殖有重要调控作用,尤其对蜕皮和变态过程。利用GenBank上登录的蜕皮激素C26羟基化酶候选基因CYP18A1的氨基酸序列对家蚕Bombyx mori全基因组数据库进行BLASTP比对,发现了家蚕直向同源基因(ortholog),其完全编码序列经RT-PCR检测和克隆、测序验证后,再以此为信息探针检索家蚕表达序列标签(expressed sequence tags,EST)数据库进行拼接延伸,获得了一条包括5′非翻译区在内的长度为1737bp的cDNA序列,验证结果也表明与电子克隆序列完全一致(GenBank登录号为EF421988,P450命名委员会将其命名为CYP18A1)。该基因的开放阅读框为1623bp,编码541个氨基酸,含有包括P450s特征结构域在内的所有昆虫P450基因的5个保守结构域,其推定的分子量为61.67kD,等电点为8.54。将该基因cDNA序列与家蚕基因组序列进行比对,结果表明该基因具有6个外显子,5个内含子,外显子/内含子边界符合经典的GT-AG规则。同源性分析也发现家蚕CYP18A1与其他昆虫的直向同源基因具有较高相似性。用RT-PCR方法对家蚕主要发育变态时期与组织进行检测,显示出该基因的转录表达不仅具有时空特异性,而且在表达时期上与已报道的蚕体内蜕皮激素含量变化有紧密的一致性。该研究进一步证实了CYP18A1基因与昆虫体内蜕皮激素代谢平衡相关联。 展开更多
关键词 家蚕 细胞色素氧化酶 CYP18a1基因 克隆 序列分析 转录活性
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抗病优质水稻不育系蓉18A的特征特性及高产繁殖技术 被引量:11
15
作者 蔡良俊 徐敬洪 +6 位作者 沈超 李良玉 谢永华 袁亚章 赵永康 李兰 张帆 《种子》 CSCD 北大核心 2014年第6期119-121,共3页
蓉18A不育系是目前在四川省把米质和抗稻瘟病这2个性状结合得最好的水稻骨干不育系,利用该不育系为基础材料育成并通过国家、省级审定的水稻新品种12个。根据其特征特性,结合多年的繁殖生产实践经验,总结提出了蓉18 A多项高产繁殖关键... 蓉18A不育系是目前在四川省把米质和抗稻瘟病这2个性状结合得最好的水稻骨干不育系,利用该不育系为基础材料育成并通过国家、省级审定的水稻新品种12个。根据其特征特性,结合多年的繁殖生产实践经验,总结提出了蓉18 A多项高产繁殖关键技术措施。 展开更多
关键词 抗病优质 水稻不育系 18a 特征特性 繁殖技术
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miR-18a过表达及抑制表达人鼻咽癌细胞株的构建 被引量:3
16
作者 常利红 黄子真 +4 位作者 黄健聪 王君 陈晓红 赖晓萍 张革化 《中山大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期119-129,共11页
【目的】建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系,为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中的功能奠定基础。【方法】将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中,DNA测序鉴定;将构建好的载体转染293T细胞,获... 【目的】建立稳定miR-18a过表达及表达的人鼻咽癌细胞系,为研究miR-18a在鼻咽癌发生发展中的功能奠定基础。【方法】将miR-18a前体的编码基因片段及miR-18a反义寡核苷酸克隆到慢病毒载体中,DNA测序鉴定;将构建好的载体转染293T细胞,获得重组miR-18a过表达及抑制表达的慢病毒载体,感染人鼻咽癌细胞CNE1和CNE2,嘌呤霉素筛选获得稳定干扰miR-18a表达及过表达miR-18a的细胞系,PCR及western blot鉴定。【结果】成功构建真核表达的慢病毒miR-18a干扰载体及过表达载体,滴度均为3×10~8TU/mL;转染miR-18a抑制表达的慢病毒载体的CNE1和CNE2中ATM表达增高;与对照病毒转染相比,转染miR-18a过表达慢病毒载体的CNE1(20.3倍,P<0.01)和CNE2(122.5倍,P<0.01)中miR-18a表达显著增高,靶蛋白ATM表达下调。【结论】成功构建人miR-18a慢病毒抑制表达和过表达载体,并获得相应的慢病毒稳转人鼻咽癌细胞株。 展开更多
关键词 miR-18a 慢病毒 过表达载体 抑制载体 鼻咽癌细胞
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CASC2/miR-18a/BTG3信号抑制非小细胞肺癌迁移和侵袭 被引量:4
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作者 陈兴峰 王应琼 +4 位作者 陈亚红 王茂泽 陈山 许铁峰 石慧芳 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期1537-1544,共8页
目的:研究长链非编码RNA CASC2在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭中的作用及调控机制。方法: RT-qPCR和Western blot法检测正常人支气管上皮细胞系16-HBE及NSCLC细胞系A549和H1299中CASC2、微小RNA-18a (miR-18a)和BTG3的表达;生物... 目的:研究长链非编码RNA CASC2在非小细胞肺癌(NSCLC)细胞迁移和侵袭中的作用及调控机制。方法: RT-qPCR和Western blot法检测正常人支气管上皮细胞系16-HBE及NSCLC细胞系A549和H1299中CASC2、微小RNA-18a (miR-18a)和BTG3的表达;生物信息学预测CASC2和miR-18a及miR-18a和BTG3的靶向关系,并利用双萤光素酶报告基因实验加以验证;Transwell小室法检测NSCLC细胞的迁移和侵袭能力;RT-qPCR和Western blot测定CASC2对miR-18a和BTG3表达的调控。结果:与16-HBE细胞相比,CASC2和BTG3在NSCLC细胞系中表达量明显下调,而miR-18a出现明显的高表达( P<0.05 );CASC2能够靶向吸附miR-18a,且 BTG3 被证实是miR-18a的一个靶基因;CASC2过表达抑制NSCLC细胞的迁移和侵袭能力,但外源回补miR-18a可促进细胞的迁移和侵袭;外源回补miR-181a可逆转CASC2对BTG3蛋白表达的促进作用。结论: CASC2通过负调控miR-18a促进BTG3表达,进而抑制NSCLC细胞的迁移和侵袭。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 长链非编码RNA CASC2 微小RNA-18a BTG3蛋白 细胞迁移 细胞侵袭
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菜薹(菜心)亲本材料的创制及新品种18A1菜心的选育 被引量:10
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作者 张德双 张凤兰 +6 位作者 余阳俊 赵岫云 于拴仓 汪维红 苏同兵 李佩荣 卢桂香 《中国蔬菜》 北大核心 2020年第5期77-80,I0002,共5页
为了拓宽菜薹(菜心)种质资源,筛选优良亲本材料,进而选育菜心雄性不育系杂交种,本试验利用菜心与大白菜亚种间杂交、菜心与芥菜种间杂交及自然突变体筛选等3种途径,创制和鉴定优良的菜心育种材料,并广泛转育菜心CMS96细胞质不育系和配制... 为了拓宽菜薹(菜心)种质资源,筛选优良亲本材料,进而选育菜心雄性不育系杂交种,本试验利用菜心与大白菜亚种间杂交、菜心与芥菜种间杂交及自然突变体筛选等3种途径,创制和鉴定优良的菜心育种材料,并广泛转育菜心CMS96细胞质不育系和配制CMS96细胞质不育系组合。结果表明,菜心与大白菜杂交、菜心与芥菜杂交及自然突变体筛选等方法是创制菜心种质资源的有效途径。利用亚种间杂交,获得菜心CMS96细胞质不育系、菜心瓣化型萝卜胞质Ogu CMS,叶片深紫色菜心,叶片塌地菜心;利用种间杂交,获得圆叶锯齿菜心,叶色翠绿菜心和叶片浅紫色菜心;基于自然突变,筛选到橘红色花菜心,乳白色花菜心和隐性核雄性不育系突变体。同时,以菜心细胞质不育系CMS96.农家菜心8与新西兰50天自交系杂交,成功选育出菜心新品种18A1菜心,中熟,叶色深绿,菜薹油绿,臺质脆嫩,口感好,适合广州等南方地区秋冬季和菜场基地种植。 展开更多
关键词 菜薹(菜心) 亲本材料 种(亚种)间杂交 18a1菜心 品种选育
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微小RNA-18a联合子宫动脉血流参数对早发型子痫前期的预测价值 被引量:10
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作者 王勇 李传刚 《天津医药》 CAS 北大核心 2021年第12期1311-1315,共5页
目的探讨微小RNA-18a(miR-18a)联合阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、子宫动脉收缩期与舒张期血流速度比值(S/D)等子宫动脉血流参数对早发型子痫前期(E-PE)的预测价值。方法纳入孕检的孕妇628例根据其是否发生E-PE分为E-PE组(34例)和对照组(... 目的探讨微小RNA-18a(miR-18a)联合阻力指数(RI)、搏动指数(PI)、子宫动脉收缩期与舒张期血流速度比值(S/D)等子宫动脉血流参数对早发型子痫前期(E-PE)的预测价值。方法纳入孕检的孕妇628例根据其是否发生E-PE分为E-PE组(34例)和对照组(594例)。采用彩色多普勒超声诊断仪检测RI、PI、S/D等参数,采用实时定量PCR法检测血清miR-18a的相对表达水平。采用受试者工作特征曲线分析血清miR-18a、RI、PI、S/D对E-PE的预测价值。结果 E-PE组的血清miR-18a相对表达水平低于对照组,RI、PI、S/D高于对照组(P<0.05);E-PE患者血清miR-18a相对表达水平与RI、PI、S/D均呈负相关(P<0.05);血清miR-18a、RI、PI均可用于预测E-PE的发生风险,曲线下面积分别为0.780(95%CI:0.727~0.832)、0.729(95%CI:0.644~0.814)、0.782(95%CI:0.695~0.870),而S/D对E-PE的预测价值较低,曲线下面积为0.602(95%CI:0.496~0.708)。miR-18a联合PI对E-PE的预测价值较高,敏感度为82.35%、特异度为83.84%,约登指数为0.662。结论 miR-18a在E-PE患者血清中异常低表达,且其表达水平与RI、PI、S/D等子宫动脉血流参数均呈负相关,miR-18a联合PI对E-PE的预测价值较高。 展开更多
关键词 先兆子痫 诊断 微RNAS 超声检查 多普勒 彩色 子宫动脉 血流动力学 早发型子痫前期 微小RNA-18a
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MicroRNA-18a对乳腺癌细胞MCF-7/PTX紫杉醇耐药性的影响 被引量:3
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作者 孟庆榆 刘淑杰 +1 位作者 代春梅 吴晓丽 《武汉大学学报(医学版)》 CAS 2020年第2期225-230,共6页
目的:探讨微小RNA-18a(microRNA-18a)对紫杉醇(PTX)耐药的乳腺癌细胞MCF-7/PTX耐药性的影响及其作用机制。方法:将MCF-7/PTX细胞分为microRNA-18a转染组、microRNA-18a敲除对照组、阴性对照组(转染无关序列)、空白对照组,并于转染24,48... 目的:探讨微小RNA-18a(microRNA-18a)对紫杉醇(PTX)耐药的乳腺癌细胞MCF-7/PTX耐药性的影响及其作用机制。方法:将MCF-7/PTX细胞分为microRNA-18a转染组、microRNA-18a敲除对照组、阴性对照组(转染无关序列)、空白对照组,并于转染24,48,72及96 h后,采用实时定量荧光PCR(qRT-PCR)检测转染效率。细胞计数试剂盒-8(CCK-8)检测转染48 h后MCF-7/PTX细胞对PTX药物敏感性的变化,流式细胞术(FCM)检测转染MCF-7/PTX细胞的细胞凋亡比例及细胞周期的变化,蛋白免疫印迹(Western Blot)实验检测转染48 h后,MCF-7/PTX细胞内共济失调毛细血管扩张突变基因蛋白(ATM)及磷酸化ATM(p-ATM)的表达情况。结果:转染24,48,72和96 h时,microRNA-18a转染组microRNA-18a相对表达量显著高于阴性对照组和空白对照组(P<0.05),而敲除对照组microRNA-18a相对表达量显著低于阴性对照组和空白对照组(P<0.05)。microRNA-18a转染组PTX的半数抑制浓度(IC50)低于敲除对照组、阴性对照组、空白对照组(P<0.05)。与敲除对照组、阴性对照组、空白对照组相比,microRNA-18a转染组MCF-7/PTX细胞的凋亡比例及G2/M期细胞比例均升高,ATM及p-ATM蛋白水平均降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:增加microRNA-18a表达水平可以部分逆转MCF-7/PTX细胞对PTX的耐药性,可能与microRNA-18a下调ATM及p-ATM的表达有关。 展开更多
关键词 微小RNA-18a 乳腺癌 紫杉醇 耐药性
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