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纳米雄黄混悬液诱导Siha细胞凋亡及对HPV16E6/E7表达的影响 被引量：12
1
作者 刘嵘 濮德敏 +3 位作者 赵立波 程艳香 尹伶 李天 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期54-58,共5页
目的：探讨纳米雄黄混悬液对人宫颈癌Siha细胞的抑制增殖、诱导凋亡作用及其对HPV16E6和E7致瘤基因的影响。方法：采用微射流法制备纳米雄黄混悬液,应用不同质量浓度（6.25,12.5,25,50 mg.L^-1）的纳米雄黄混悬液作用于Siha细胞不同时间... 目的：探讨纳米雄黄混悬液对人宫颈癌Siha细胞的抑制增殖、诱导凋亡作用及其对HPV16E6和E7致瘤基因的影响。方法：采用微射流法制备纳米雄黄混悬液,应用不同质量浓度（6.25,12.5,25,50 mg.L^-1）的纳米雄黄混悬液作用于Siha细胞不同时间（12,24,48,72 h）,光镜和透射电镜观察实验组（不同质量浓度的纳米雄黄混悬液处理组）和对照组（不加药物的细胞）细胞的形态学变化;琼脂糖凝胶电泳观察凋亡细胞DNA Ladder形成;MTT比色法测定细胞生长抑制情况;流式细胞仪检测细胞凋亡率及细胞周期改变;RT-PCR方法检测HPV16E6和E7的表达。结果：纳米雄黄混悬液25~50 mg.L-1处理Siha细胞48,72 h后,细胞存活率降低,凋亡增加,作用呈时间-剂量依赖关系。电镜显示细胞呈典型的凋亡形态学改变,琼脂糖凝胶电泳显示凋亡细胞DNA Ladder形成;流式细胞术检测证实细胞凋亡率与纳米雄黄混悬液作用浓度呈明显相关,与对照组相比,差异有极显著意义（P〈0.01）,且细胞呈G0-G1期阻滞。RT-PCR检测显示随着纳米雄黄混悬液作用浓度的增加,HPV16E6和E7的表达不同程度地受到抑制。结论：纳米雄黄混悬液对于Siha细胞具有诱导凋亡、抑制增殖的作用,其机制可能与其抑制HPV16E6和E7致瘤基因的表达有关。 展开更多
关键词 纳米雄黄混悬液 SIHA细胞 细胞凋亡 HPV16e6 HPV16e7
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新疆哈萨克族食管癌组织中HPV16E6、E7基因的检测与p53的关系 被引量：4
2
作者 卢晓梅 温浩 +3 位作者 刘辉 林仁勇 张亚楼 张月明 《肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期464-466,共3页
目的 探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16型感染在新疆哈萨克族(哈族)食管癌发病中的作用,并分析HPV16感染与p53过表达之间的关系。方法 采用聚合酶链(PCR)技术.检测41例食管鳞状细胞癌组织中HPV16 E6与E7基因表达差异;用LSAB免疫组织化学方法分... 目的 探讨人乳头状瘤病毒(HPV)16型感染在新疆哈萨克族(哈族)食管癌发病中的作用,并分析HPV16感染与p53过表达之间的关系。方法 采用聚合酶链(PCR)技术.检测41例食管鳞状细胞癌组织中HPV16 E6与E7基因表达差异;用LSAB免疫组织化学方法分析p53蛋白的表达。结果 癌组织中HPV16 E6与E7基因阳性检出率分别为34.15％(14／41)和63.41％(26／41);用免疫组化检出p53蛋白阳性率分别在HPV16 E6阳性组(57.1％)与HPV16 E6阴性组(14.8％)间、HPV16 E7阳性组(42.3％)与HPV16 E7阴性组(6.7％)间均存在显著性差异(P<0.05);用PCR检出HPV16 E6、E7基因在食管癌的高分化组、中低分化组中的检出率分别为7.69％(1／13)、46.43％(13／28)和38.46％(5／13)、75.00％(21／28),差别均有统计学意义(P<0.05)。结论 提示p53基因突变与HPV16感染在哈族食管癌的发病过程中存在相互促进作用;另外,HPV16 E6与E7基因和哈萨克族食管癌病理组织学分级的生物学行为密切相关。 展开更多
关键词 食管肿瘤 癌 鳞状细胞 哈萨克族 P53蛋白 人乳头状瘤病毒16e6 人乳头状瘤病毒16e7
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基于UR16e机械臂的运动轨迹规划与仿真
3
作者 曹海燕 徐华珍 +3 位作者 梅香香 江小静 胡兆鹏 吴芳 《电脑知识与技术》 2025年第2期81-84,87,共5页
为提高UR16e机械臂运动轨迹的平滑度和稳定性,探讨七次多项式插值法的应用效果。基于UR16e的基本参数,在机械臂多个关节处建立局部坐标系,构建改进型Denavit-Hartenberg参数的机械臂运动学模型,并对机械臂的正运动和逆运动进行仿真分析... 为提高UR16e机械臂运动轨迹的平滑度和稳定性,探讨七次多项式插值法的应用效果。基于UR16e的基本参数,在机械臂多个关节处建立局部坐标系,构建改进型Denavit-Hartenberg参数的机械臂运动学模型,并对机械臂的正运动和逆运动进行仿真分析。七次多项式插值法不仅能够控制初始和终止位置、速度及加速度,还能控制加加速度,从而使轨迹在这些条件下更加平滑和稳定。因此,文章采用五次多项式插值法和七次多项式插值法分别对UR16e机械臂各关节的运动轨迹进行MATLAB仿真分析。通过对比发现,与五次多项式插值算法相比,七次多项式插值算法能够显著提高机械臂运行轨迹的平滑度和稳定性,更适用于需要精细控制速度和加速度变化的高精度任务。 展开更多
关键词 机械臂 MATLAB 五次多项式插值法 七次多项式插值法 UR16e
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HPV16E7抗原HLA-A2限制性CTL表位预测及其合成 被引量：9
4
作者 徐云升 郝飞 +3 位作者 吴玉章 林治华 贾正才 郝进 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期97-100,共4页
目的　预测、合成、纯化及鉴定人乳头瘤病毒E7抗原的HLA A2限制性细胞毒性T淋巴细胞表位 ,为表位抗原特异性鉴定和临床研究提供靶肽。方法　采用超模体、多项式和量化模体方案相结合的方法 ,对靶抗原HPV16E7的HLA A2限制性细胞毒性T淋... 目的　预测、合成、纯化及鉴定人乳头瘤病毒E7抗原的HLA A2限制性细胞毒性T淋巴细胞表位 ,为表位抗原特异性鉴定和临床研究提供靶肽。方法　采用超模体、多项式和量化模体方案相结合的方法 ,对靶抗原HPV16E7的HLA A2限制性细胞毒性T淋巴细胞 (CytotoxicTlymphocyte ,CTL)表位进行预测 ,并运用固相合成法合成多肽 ,经RP HPLC纯化及纯度分析 ,用质谱进行定性鉴定。结果　分别预测出了 16个、10个和 3个九肽表位 ,确定其中 5个九肽为候选合成表位 ,各合成肽的纯度都在 95 %以上。经质谱分析 ,各肽的分子量测定值与理论值相符。结论　超模体、多项式和量化模体方案联合应用可提高预测效率 ,避免了在研究E7抗原表位时盲目合成多肽 ;所合成的多肽为高纯度靶肽 。 展开更多
关键词 HPV16e7抗原 HLA-A2 CTL表位 人乳头瘤病毒
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siRNA抑制HPV16E6基因对鼻咽癌细胞生物学特性的影响 被引量：4
5
作者 沈娜 张潜英 +2 位作者 陈鸿雁 余晓燕 叶琳 《重庆医学》 CAS CSCD 2008年第20期2263-2265,共3页
目的通过RNA干扰(RNA interfering,RNAi)技术干扰E6癌基因的表达,探讨小干扰RNA(small interferirngRNA,siRNA)对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)HNE-1细胞生物学特性的影响。方法针对人乳头瘤病毒(humanpapilloma vinus,HPV)16 E... 目的通过RNA干扰(RNA interfering,RNAi)技术干扰E6癌基因的表达,探讨小干扰RNA(small interferirngRNA,siRNA)对鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma,NPC)HNE-1细胞生物学特性的影响。方法针对人乳头瘤病毒(humanpapilloma vinus,HPV)16 E6基因设计合成4条siRNA,利用lipofectamineTM2000脂质体转染鼻咽癌HNE-1细胞。通过半定量逆转录聚合酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)及Western blot检测转染后细胞E6 mRNA和蛋白变化,采用MTT检测转染后癌细胞的生长增殖情况,流式细胞仪PI染色法检测细胞的凋亡率。结果转染有效siRNA后,PT-PCR及Western blot结果显示,HNE-1细胞E6基因mRNA和蛋白的表达明显降低,抑制率分别为66.3%、56.7%。MTT法检测显示,细胞的生长增殖受到明显抑制。流式细胞仪检测细胞凋亡,发现凋亡率增加。结论siRNA可以有效干扰鼻咽癌HNE-1细胞内HPV16E6基因的表达,从而诱导肿瘤细胞的凋亡。 展开更多
关键词 SIRNA HPV16e6 RNAI 凋亡 鼻咽癌
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HPV16E6与抑癌基因p53在口腔癌中的表达及临床意义 被引量：5
6
作者 李怀奇 武和明 +2 位作者 丁旭 叶金海 吴煜农 《上海口腔医学》 CAS CSCD 2017年第6期615-618,共4页
目的 :探讨HPV16E6基因和p53基因在口腔癌中的表达,以及口腔癌的病理分级和临床分期与HPV16E6基因及p53基因的相关性。方法:纳入173例口腔癌、98例口腔癌癌前病变以及79例癌周正常组织,采用免疫组织化学方法进行HPV16E6和p53表达水平检... 目的 :探讨HPV16E6基因和p53基因在口腔癌中的表达,以及口腔癌的病理分级和临床分期与HPV16E6基因及p53基因的相关性。方法:纳入173例口腔癌、98例口腔癌癌前病变以及79例癌周正常组织,采用免疫组织化学方法进行HPV16E6和p53表达水平检测,统计口腔癌、口腔癌癌前病变、癌周正常组织以及不同病理分级和临床分期的口腔癌中HPV16E6基因及p53基因的阳性表达情况,采用SPSS21.0软件包对数据进行χ2检验。结果:在口腔癌组织中,HPV16E6的阳性表达率为81.5%(141/173),p53的阳性表达率23.7%(41/173);在口腔癌癌前病变组织中,HPV16E6的阳性表达率为39.8%(39/98),p53的阳性表达率为57.1%(56/98);在口腔癌癌周正常组织中,HPV16E6的阳性表达率为2.5%(2/79),p53的阳性表达率为89.9%(71/79)。3组中HPV16E6的阳性表达率和p53的阳性率表达存在差异,其中,HPV16E6在口腔癌中的阳性表达率显著高于其他2组(P<0.05);而口腔癌中p53的阳性表达率显著低于其他2组。随着口腔癌患者临床分期和病理分级的增加,HPV16E6阳性表达率逐渐升高,而p53的阳性表达率则显著下降(P<0.05)。结论:HPV16E6蛋白和p53蛋白在口腔癌的发生与发展过程中可能发挥十分重要的作用。 展开更多
关键词 HPV16e6 P53 口腔癌
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HPV16E7-HSP90 DNA疫苗治疗宫颈癌及其免疫机制的研究 被引量：10
7
作者 黄卓敏 李晴 +1 位作者 金平 姚秀华 《中国肿瘤》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期68-73,共6页
[目的]探讨HPV16E7-HSP90 DNA疫苗用于治疗宫颈癌的疗效及其可能的免疫机制。[方法]建立TC-1宫颈癌细胞小鼠模型,负瘤第5d开始,随机将小鼠分为HPV16E7-HSP90 DNA疫苗组与对照组：DNA疫苗组给予DNA溶液100μl（5μg）,对照组给予磷酸盐... [目的]探讨HPV16E7-HSP90 DNA疫苗用于治疗宫颈癌的疗效及其可能的免疫机制。[方法]建立TC-1宫颈癌细胞小鼠模型,负瘤第5d开始,随机将小鼠分为HPV16E7-HSP90 DNA疫苗组与对照组：DNA疫苗组给予DNA溶液100μl（5μg）,对照组给予磷酸盐缓冲溶液（PBS）100μl,两组均肌肉注射,每3d 1次,共4次。自负瘤第5d开始至治疗完成第8d,每3d测量肿瘤体积,绘制肿瘤生长曲线。治疗结束第8d,免疫组化方法检测小鼠肿瘤组织中CD8＋T细胞、肿瘤细胞凋亡分子FAS的表达情况,TUNEL法检测负瘤小鼠肿瘤细胞的凋亡率。[结果]HPV16E7-HSP90 DNA疫苗组的肿瘤生长速度明显低于PBS对照组（P〈0.05）。HPV16E7-HSP90 DNA疫苗组与对照组的小鼠宫颈癌组织中CD8＋T细胞表达的光密度平均值（MOD）分别为（8.76±1.27）vs（5.70±1.40）（P〈0.05）;肿瘤细胞FAS表达的MOD值分别为（8.73±0.99）vs（5.74±1.47）（P〈0.05）;小鼠肿瘤组织中CD8＋T细胞与FAS的表达呈正相关（P〈0.01）;HPV16E7-HSP90 DNA疫苗组与对照组小鼠肿瘤细胞的凋亡率分别为57.59%vs 13.11%（P〈0.05）。[结论 ]HPV16E7-HSP90 DNA疫苗可上调肿瘤细胞FAS的表达,促进肿瘤细胞凋亡,激活机体的CD8＋T细胞的免疫反应,从而产生明显的抗肿瘤效应,有望于未来用于宫颈癌及癌前病变的免疫治疗。 展开更多
关键词 HPV16e7-HSP90 DNA疫苗 宫颈癌 免疫治疗 CD8+T细胞 FAS 凋亡
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宫颈癌患者治疗前检测血清HPV16E6 mRNA和CK19 mRNA的临床意义 被引量：7
8
作者 杨琳琳 王薇 +2 位作者 张磊 张红平 杨宏英 《昆明医科大学学报》 CAS 2017年第1期23-26,共4页
目的检测宫颈癌患者治疗前外周血HPV16E6m RNA和CK19m RNA的表达,探讨其对宫颈癌的诊断意义及其与临床病理的相关性.方法对100例宫颈癌患者行治疗前外周血HPV16E6m RNA及CK19m RNA检测,以40例健康妇女为对照,分析其作为诊断参考的特异... 目的检测宫颈癌患者治疗前外周血HPV16E6m RNA和CK19m RNA的表达,探讨其对宫颈癌的诊断意义及其与临床病理的相关性.方法对100例宫颈癌患者行治疗前外周血HPV16E6m RNA及CK19m RNA检测,以40例健康妇女为对照,分析其作为诊断参考的特异性和敏感性,并对两者与宫颈癌临床病理特征的相关性进行分析.结果 HPV16E6m RNA、CK19m RNA检测诊断宫颈癌的特异性均为97.5%.HPV16E6m RNA、CK19m RNA升高用于治疗前诊断的敏感性分别为15%和39%,两者差异有统计学意义(P<0.05).HPV16E6m RNA升高与临床分期(P=0.012)、盆腔淋巴结转移(P=0.026)相关.CK19m RNA升高与深肌层浸润(P=0.031)、盆腔淋巴结转移(P=0.027)相关.结论外周血HPV16E6m RNA和CK19m RNA均是宫颈癌微转移有价值的肿瘤标志物;CK19m RNA在作为宫颈癌指标时,临床诊断价值优于HPV16E6m RNA. 展开更多
关键词 宫颈肿瘤 HPV16e6m RNA CK19m RNA 外周血
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利用昆虫-杆状病毒表达系统制备HPV16E6蛋白 被引量：5
9
作者 郑瑾 任斐 +2 位作者 余翔 来宝长 王一理 《西北大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期775-778,共4页
目的利用昆虫-杆状病毒表达系统高效表达HPV16E6蛋白。方法将HPV16E6基因克隆入供体质粒pFastBac-HTb,然后再重组入杆状病毒基因组;用带有目的基因的杆状病毒转染昆虫(Sf-9)细胞,27℃培养72 h,收集被转染细胞,SDS-PAGE,Western-blot分... 目的利用昆虫-杆状病毒表达系统高效表达HPV16E6蛋白。方法将HPV16E6基因克隆入供体质粒pFastBac-HTb,然后再重组入杆状病毒基因组;用带有目的基因的杆状病毒转染昆虫(Sf-9)细胞,27℃培养72 h,收集被转染细胞,SDS-PAGE,Western-blot分析鉴定表达蛋白。结果SDS-PAGE分析显示所表达蛋白分子量约为24KD,Western-blot结果表明表达产物为HPV16E6蛋白。结论利用昆虫杆状病毒表达系统获得HPV16E6蛋白的高效表达。 展开更多
关键词 昆虫杆状病毒表达系统 重组DAN技术 HPV16e6
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HPV16E7蛋白和Rb蛋白在人喉鳞状细胞癌中的表达及相关性研究 被引量：4
10
作者 英信江 赵舒薇 +2 位作者 邱杰 叶青 孙爱华 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期1364-1367,共4页
目的:探讨HPV16E7蛋白和Rb蛋白在人喉鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达及其在喉鳞癌发生和发展过程中的相互关系.方法:用免疫组织化学方法检测78例喉鳞癌、26例喉癌前病变、24例声带息肉和10例癌周正常喉组织标本中HPV16E7蛋白和Rb蛋白的表... 目的:探讨HPV16E7蛋白和Rb蛋白在人喉鳞状细胞癌(鳞癌)组织中的表达及其在喉鳞癌发生和发展过程中的相互关系.方法:用免疫组织化学方法检测78例喉鳞癌、26例喉癌前病变、24例声带息肉和10例癌周正常喉组织标本中HPV16E7蛋白和Rb蛋白的表达.结果:癌周正常喉组织、声带息肉、喉癌前病变和喉鳞癌组织中HPV16E7蛋白的阳性表达率分别为0(0/10)、4.1%(1/24)、27.0%(7/26)和43.6%(34/78),Rb蛋白的阳性表达率分别为80.0%(8/10)、79.2%(19/24)、61.5%(16/26)和50.0%(39/78);HPV16E7蛋白和Rb蛋白的阳性表达率在癌周正常喉组织、声带息肉与喉鳞癌组之间均有显著性差异(P＜0.05),HPV16E7蛋白表达呈明显升高趋势,而Rb蛋白表达呈明显下降趋势.HPV16E7蛋白的阳性表达率,喉鳞癌病理Ⅲ级明显高于Ⅰ级或Ⅱ级(P＜0.05),临床Ⅲ～Ⅳ期明显高于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.05);而Rb蛋白的表达正相反,肿瘤病理Ⅲ级明显低于Ⅰ级或Ⅱ级(P＜0.05),临床Ⅲ～Ⅳ期明显低于Ⅰ～Ⅱ期(P＜0.05).结论:HPV16E7蛋白的表达升高和Rb蛋白的表达下降可能会导致人喉鳞癌的发生和发展;检测HPV16E7蛋白和Rb蛋白的表达可用于喉鳞癌恶性程度的评定. 展开更多
关键词 喉肿瘤 癌 鳞状细胞 HPV16e7蛋白 RB蛋白
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HPV16E7蛋白在宫颈癌中的表达和意义 被引量：3
11
作者 尹如铁 彭芝兰 +2 位作者 宗文军 姚远 王和 《现代预防医学》 CAS 2000年第4期477-477,573,共2页
目的 :探讨人乳头瘤病毒 16 E7蛋白 (HPV16 E7)与宫颈癌间的关系。方法 :采用免疫组化 SP法对 15例正常宫颈组织、 80例宫颈鳞癌、 17例腺癌组织进行了研究。结果 :1HPV16 E7蛋白在宫颈癌中的表达明显高于正常宫颈组织 ,且在鳞癌中的表... 目的 :探讨人乳头瘤病毒 16 E7蛋白 (HPV16 E7)与宫颈癌间的关系。方法 :采用免疫组化 SP法对 15例正常宫颈组织、 80例宫颈鳞癌、 17例腺癌组织进行了研究。结果 :1HPV16 E7蛋白在宫颈癌中的表达明显高于正常宫颈组织 ,且在鳞癌中的表达明显高于腺癌 ;2 HPV16 E7蛋白表达与宫颈癌的临床分期成负相关 ,与组织学分级、淋巴结转移无关。结论 :预防 HPV感染是防止宫颈癌发生的重要措施之一。 展开更多
关键词 宫颈癌 HPV16e7蛋白 表达 免疫组化
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IEEE 802.16e休眠模式算法的研究和改进 被引量：7
12
作者 刘利 李津生 洪佩琳 《计算机学报》 EI CSCD 北大核心 2007年第1期146-152,共7页
IEEE802.16e为移动站点提供了大范围的无线接入,为了减少移动站点的功率消耗,它提出了一种节能机制休眠模式.移动站点在休眠间隔后进入监听间隔,检查其间是否有数据分组到达.如果有,它将进入清醒状态接收数据,否则,继续进入休眠间隔.草... IEEE802.16e为移动站点提供了大范围的无线接入,为了减少移动站点的功率消耗,它提出了一种节能机制休眠模式.移动站点在休眠间隔后进入监听间隔,检查其间是否有数据分组到达.如果有,它将进入清醒状态接收数据,否则,继续进入休眠间隔.草案中所提出的休眠模式指数增长算法在低业务量情况下,响应时间过长.文中提出了线性增长算法解决这一问题,理论分析了该算法的两个性能指标平均响应时间和平均能量消耗.并结合仿真实验,对比了这两种算法的性能,证实了后者具有较好的性能.进一步分析了休眠模式各个参数对上述两个性能指标的影响,对参数值的选取有重要帮助. 展开更多
关键词 无线接入 IEEE 802.16e 休眠模式 线性增长 响应时间
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HPV16E7、RB和MCM7蛋白在乳腺浸润性导管癌组织中的表达及意义 被引量：3
13
作者 任占平 石喆 +1 位作者 张芫 任珊 《广东医学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第7期1033-1036,共4页
目的探讨HPV16型感染对RB和MCM7蛋白表达调控的影响在乳腺癌发生机制中的作用及意义。方法采用免疫组化EnVision法检测30例正常乳腺组织、30例乳腺腺病、30例乳腺不典型导管上皮增生(ADH)和68例浸润性导管癌(IDC)组织中HPV16E7、RB和MCM... 目的探讨HPV16型感染对RB和MCM7蛋白表达调控的影响在乳腺癌发生机制中的作用及意义。方法采用免疫组化EnVision法检测30例正常乳腺组织、30例乳腺腺病、30例乳腺不典型导管上皮增生(ADH)和68例浸润性导管癌(IDC)组织中HPV16E7、RB和MCM7蛋白的表达。结果 IDC中HPV16E7蛋白阳性表达率高于正常乳腺组织、乳腺腺病和ADH,差异有统计学意义(P<0.05)。在乳腺腺病、ADH和IDC中HPV16E7阳性表达与RB蛋白表达之间呈负相关(r=-0.460,P<0.02;r=-0.680,P<0.01;r=-0.832,P<0.000),而与MCM7蛋白表达呈正相关(r=0.504,P<0.01;r=0.710,P<0.01;r=0.774,P<0.000)。HPV16E7、RB和MCM7蛋白的阳性表达与IDC组织学分级、淋巴结转移和pTNM分期相关(P<0.05),而与患者年龄和肿块最大径无关(P>0.05)。结论高危型HPV16感染通过其E7对RB和MCM7蛋白表达调控的影响可能在乳腺癌的发生、发展进程中起到重要的作用。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 HPV16e7 RB MCM7 免疫组织化学
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HPV16E7的表达对宫颈癌变过程中CD163+巨噬细胞的浸润及上皮间质转化的影响 被引量：5
14
作者 尚立娜 安利峰 +5 位作者 张城 龚川友 周彰映 田世馨 李晓琴 赵晋 《中国组织化学与细胞化学杂志》 CAS CSCD 2019年第5期428-435,共8页
目的研究人乳头瘤病毒16E7(HPV16E7)、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)“cadherin switch”标记物E-cadherin、N-cadherin,及肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)标记CD163在宫颈癌变过程中的表... 目的研究人乳头瘤病毒16E7(HPV16E7)、上皮间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)“cadherin switch”标记物E-cadherin、N-cadherin,及肿瘤相关巨噬细胞(tumor-associated macrophages,TAMs)标记CD163在宫颈癌变过程中的表达情况,探讨在不同的HPV16E7表达情况下,上皮间质转化程度及肿瘤相关巨噬细胞浸润的差异及二者之间的关系。方法通过免疫组化法检测宫颈鳞状细胞癌、高级别上皮内瘤变(CINII-III)、低级别上皮内瘤变(CINI)及慢性宫颈炎患者的HPV16E7、E-cadherin、N-cadherin、CD163的表达情况。结果E-cadherin的表达随着宫颈癌变的进展逐渐降低,N-cadherin的表达以及CD163+巨噬细胞数量随着宫颈病变的进展逐渐升高。慢性宫颈炎、CINI、CINII-III及宫颈鳞状细胞癌的HPV16E7阳性组和阴性组比较中,E-cadherin的表达在CINII-III及宫颈鳞状细胞癌中HPV16E7阳性组明显低于阴性组;N-cadherin的表达在宫颈鳞状细胞癌中HPV16E7阳性组明显高于阴性组;CD163+巨噬细胞数目在CINI、CINII-III及宫颈鳞状细胞癌中HPV16E7阳性组明显高于阴性组。进一步统计CD163+巨噬细胞与上皮间质转化间关系后发现,宫颈癌变过程中,随着CD163+巨噬细胞数目的增多,E-cadherin的表达逐渐降低,无论HPV16E7的表达如何,二者均呈负相关关系;宫颈鳞状细胞癌中,随着CD163+巨噬细胞数目的增多,N-cadherin的表达逐渐增加,HPV16E7阳性组二者仍呈正相关关系,而HPV16E7阴性组无明显相关关系。结论HPV16E7可能通过肿瘤相关巨噬细胞来调节上皮间质转化的“cadherin switch”,从而促进宫颈癌的癌变。 展开更多
关键词 宫颈癌 人乳头瘤病毒16e7 上皮间质转化 肿瘤相关巨噬细胞
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HPV16E7下调miR-29a促进PC3细胞增殖 被引量：3
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作者 熊焱强 冯晶 +1 位作者 刘朝奇 李志英 《华中科技大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期145-149,共5页
目的探讨人乳头瘤病毒16E7(human papillomavirus V16E7,HPV16E7)能否通过调控细胞内miR-29a表达促进细胞增殖,从microRNA的角度探讨高危型HPV的致癌机制。方法将HPV16E7基因构建到真核表达载体pcDNA3.1(-),将重组质粒及空载质粒分别转... 目的探讨人乳头瘤病毒16E7(human papillomavirus V16E7,HPV16E7)能否通过调控细胞内miR-29a表达促进细胞增殖,从microRNA的角度探讨高危型HPV的致癌机制。方法将HPV16E7基因构建到真核表达载体pcDNA3.1(-),将重组质粒及空载质粒分别转染人前列腺癌细胞PC3,经G418筛选,通过RT-PCR、流式细胞术检测稳定转染效果;用MTT法、流式细胞术检测克隆细胞株的生物学活性,半定量RT-PCR检测E7对PC3细胞中miR-29a表达的影响。结果重组质粒经酶切及测序鉴定显示构建成功,并获得稳定表达E7的PC3克隆细胞株。与阴性对照组PC3-3.1(-)比较,克隆细胞株PC3-E7增殖能力显著增强(P<0.01),G0/G1期细胞明显减少,而S期和G2/M期细胞明显增多(均P<0.05);PC3-E7细胞中miR-29a表达量显著低于对照组(P<0.01)。结论 HPV16E7可以加速细胞周期G1向S期进展,其机制可能与其下调miR-29a有关。 展开更多
关键词 宫颈癌 人乳头瘤病毒16e7 miR-29a 细胞增殖
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逆转录病毒载体介导HPV16E7对人关节软骨细胞的转化及其生长特性 被引量：6
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作者 何清义 李起鸿 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期516-520,共5页
目的　研究HPV16E7(humanpapillomavirus 16E7)基因片段对人关节软骨细胞的转化作用以及转化细胞的生长特性。方法　利用含HPV16E7基因的逆转录病毒载体pLXSN转染人关节软骨细胞 ,检测HPV16E7基因的整合与表达 ,并用生长曲线、血清依赖... 目的　研究HPV16E7(humanpapillomavirus 16E7)基因片段对人关节软骨细胞的转化作用以及转化细胞的生长特性。方法　利用含HPV16E7基因的逆转录病毒载体pLXSN转染人关节软骨细胞 ,检测HPV16E7基因的整合与表达 ,并用生长曲线、血清依赖试验 ,电镜及流式细胞仪细胞周期时相观察 ,了解转化细胞与正常软骨细胞的生长特性。结果　挑选出了能够在体外长期培养的经HPV16E7转化的细胞克隆 ,已传代 5 0代 ,PCR及RT PCR证实HPV16E7已与宿主细胞基因组成功整合及转录 ,转化细胞的生长速度要高于正常软骨细胞 ,二者都对血清有较大程度的依赖 ,转化细胞的核质比大 ,核仁明显 ,S期细胞数显著高于正常软骨细胞。结论　经HPV16E7基因转化的人关节软骨细胞增殖能力强 ,可连续传代达 5 0代。 展开更多
关键词 基因转化 软骨细胞 HPV16e7基因 逆转录载体
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MIP-1α和Flt3l基因佐剂联合应用对HPV16E7 DNA疫苗的免疫增强作用 被引量：2
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作者 蓝佳明 高志云 +7 位作者 耿媛 揣侠 赵娜 韩小艳 张永红 谢立新 金玉怀 王永祥 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第4期305-309,314,共6页
目的:探讨巨噬细胞炎性蛋白1α(Macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)和酪氨酸激酶受体3配体(Flt3ligand,Flt3l)基因佐剂联合应用增强人乳头瘤病毒16型(Human papillomavirus16,HPV16)E7DNA疫苗免疫效果的可能性。方法:构建真... 目的:探讨巨噬细胞炎性蛋白1α(Macrophage inflammatory protein-1α,MIP-1α)和酪氨酸激酶受体3配体(Flt3ligand,Flt3l)基因佐剂联合应用增强人乳头瘤病毒16型(Human papillomavirus16,HPV16)E7DNA疫苗免疫效果的可能性。方法:构建真核表达质粒pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7。C57BL/6小鼠随机分为8组,分别为pcDNA3组、pcDNA3/MIP-1α组、pcDNA3/Flt3l组、pcDNA3/MIP-1α和pcDNA3/Flt3l混合组、pcDNA3/HPV16E7组、pcDNA3/MIP-1α和pcDNA3/HPV16E7混合组、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组以及pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组。每组14只,肌肉注射质粒免疫小鼠,每3周免疫1次,共3次;末次免疫后2周每组随机抽取6只小鼠,取脾脏制备淋巴细胞悬液,用CCK-8试剂盒检测其对TC-1靶细胞的特异性杀伤能力。其余小鼠在腹股沟处皮下注射5×104个TC-1细胞,观察肿瘤生长情况。结果:成功构建了真核表达质粒pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7;pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组的CTL杀伤能力明显高于其它各组(P<0.01);肿瘤细胞攻击后16天,pcDNA3组小鼠全部长出肿瘤,而pcDNA3/MIP-1α、pcDNA3/Flt3l和pcDNA3/HPV16E7混合组的成瘤率仅为12.5%,明显低于其他组,统计学分析示8组之间成瘤率差异有显著性(P=0.007)。60天后各组成瘤率之间的差异无统计学意义(P=0.229)。结论:联合应用MIP-1α和Flt3l基因佐剂增强了HPV16E7DNA疫苗的免疫效果,一定程度上延缓了肿瘤的发生。 展开更多
关键词 人乳头瘤病毒16e7 酪氨酸激酶受体3配体 巨噬细胞炎性蛋白1Α 基因佐剂 质粒 DNA疫苗
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HPV16E6真核表达载体的构建及其在CaSki细胞中的表达及定位 被引量：2
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作者 王青元 周颖 +4 位作者 杨霞 李兵 陶峰 朱圆圆 凌斌 《中国妇幼保健》 CAS 北大核心 2011年第31期4904-4906,共3页
目的:构建pEGFP-C2-HPV16E6真核表达载体,转染CaSki细胞,检测其在CaSki细胞中的表达。方法:用RT-PCR法从CaSki细胞中扩增出带有HindⅢ、XbaⅠ酶切位点的HPV16E6基因片段,将HPV16E6基因全长片段克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因真核... 目的:构建pEGFP-C2-HPV16E6真核表达载体,转染CaSki细胞,检测其在CaSki细胞中的表达。方法:用RT-PCR法从CaSki细胞中扩增出带有HindⅢ、XbaⅠ酶切位点的HPV16E6基因片段,将HPV16E6基因全长片段克隆到增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因真核表达载体pEGFP-C2上,通过脂质体将pEGFP-C2-HPV16E6转染入CaSki细胞。结果:pEGFP-C2-HPV16E6真核表达载体构建成功,转染CaSki细胞48h后经RT-PCR及Western-blot检测可见HPV16E6蛋白的高表达,激光共聚焦显微镜观察融合蛋白主要在CaSki细胞核内表达。结论:成功构建了pEGFP-C2-HPV16E6真核表达载体,为进一步对HPV16E6的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 CASKI细胞 HPV16e6 真核表达载体
原文传递
中国妇女宫颈癌中HPV16E6基因序列分析及分子克隆 被引量：2
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作者 赵蔚明 许雪梅 +5 位作者 周亚滨 陈华波 栾怡 齐眉 卞继峰 于修平 《基础医学与临床》 CSCD 1999年第4期86-86,91,共2页
人乳头瘤病毒16型（Humanpapillomavirustype16，HPV16）感染与宫颈癌的发生有密切关系。研究发现，HPVI6早期蛋白E6是肿瘤相关抗原，可在HI，V相关肿瘤中持续表达，为肿瘤治疗性疫苗的研制及免疫治疗提供了靶位。但也有文献报道，宫颈... 人乳头瘤病毒16型（Humanpapillomavirustype16，HPV16）感染与宫颈癌的发生有密切关系。研究发现，HPVI6早期蛋白E6是肿瘤相关抗原，可在HI，V相关肿瘤中持续表达，为肿瘤治疗性疫苗的研制及免疫治疗提供了靶位。但也有文献报道，宫颈癌中HPVI6E6基因可有一定的变异性，... 展开更多
关键词 宫颈癌 HPV16e6 基因序列分析 分子克隆
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抗HPV-16E_6单抗对宫颈癌靶向性的研究 被引量：2
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作者 夏梦 刘凤英 +2 位作者 陶光实 吴永刚 潘佑明 《现代妇产科进展》 CSCD 2001年第4期241-243,共3页
目的 :评价抗HPV - 16E6 单克隆抗体靶向定位于宫颈癌组织的能力。方法 :用99Tcm 标记抗HPV - 16E6 单克隆抗体 (抗HPV - 16E6 +McAb ,实验组 )和正常鼠免疫球蛋白 (nMIgG ,对照组 )后 ,分别进行荷HPV - 16E6 +U14宫颈癌小鼠放射免疫显... 目的 :评价抗HPV - 16E6 单克隆抗体靶向定位于宫颈癌组织的能力。方法 :用99Tcm 标记抗HPV - 16E6 单克隆抗体 (抗HPV - 16E6 +McAb ,实验组 )和正常鼠免疫球蛋白 (nMIgG ,对照组 )后 ,分别进行荷HPV - 16E6 +U14宫颈癌小鼠放射免疫显像 ,并比较放免结果。结果 :99Tcm 抗HPV - 16E6 McAb及99Tcm-nMIgG标记率分别为 91.97%和92 .4 9% ;标记前后抗体的免疫活性未改变 ;2 4h显像可见实验组肿瘤部位放射性浓集 ,图象清晰 ,肿瘤和非肿瘤组织放射性比值 (T/NT)明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。结论 :抗HPV -16E6 单克隆抗体具有特异性定位于宫颈癌组织的能力 。 展开更多
关键词 乳头状瘤病毒 单克隆抗体 宫颈肿瘤 疾病模型 抗HPV-16e6
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