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缺氧和高糖对人视网膜色素上皮细胞VEGF_(165)及VEGF_(165b)表达的影响 被引量:1
1
作者 陆璐 余锦强 黄煜薇 《湖北医药学院学报》 2025年第1期28-34,共7页
目的:通过研究体外培养的人视网膜色素上皮细胞(RPE)在人工模拟的缺氧和高糖环境中VEGF_(165)及VEGF_(165b)表达的情况,探讨VEGF_(165)、VEGF_(165b)在糖尿病视网膜病变(DR)发生发展中的作用及相互之间的关系。方法:正常接种并体外培养... 目的:通过研究体外培养的人视网膜色素上皮细胞(RPE)在人工模拟的缺氧和高糖环境中VEGF_(165)及VEGF_(165b)表达的情况,探讨VEGF_(165)、VEGF_(165b)在糖尿病视网膜病变(DR)发生发展中的作用及相互之间的关系。方法:正常接种并体外培养人视网膜色素上皮细胞,150μmol/LCoCl2和25mmol/L葡萄糖分别模拟细胞缺氧和高糖环境,将接种细胞分为正常组、缺氧组、高糖组、联合组共4组。每组分别于12、24、36、48h提取RNA和蛋白,RT-PCR法和WesternBlot法检测四组RPE细胞VEGF_(165)、VEGF_(165b)的mRNA和蛋白相对表达量,比较缺氧和高糖环境下VEGF_(165)和VEGF_(165b)在人视网膜色素上皮细胞的表达及关系。结果:⑴缺氧和高糖环境下RPE细胞分裂增殖受限,细胞活力降低。⑵VEGF_(165)及VEGF_(165b)mRNA和蛋白的表达情况:在缺氧模型建立后12h各组细胞间的表达差异无统计学意义,而24、36、48h时各组细胞的表达差异有统计学意义,其中VEGF_(165)mRNA和蛋白在缺氧组、高糖组、联合组的表达随时间变化而逐渐增加且均高于同一时间的正常组,而VEGF_(165b)mRNA和蛋白的表达则随时间变化而逐渐减少且均低于同一时间的正常组,差异均有统计学意义(P均<0.05)。⑶联合组的VEGF_(165)mRNA和蛋白表达较缺氧组、高糖组表达增加更多,缺氧组与高糖组比较只在24h时间点差异有统计学意义;而联合组的VEGF_(165b)mRNA和蛋白的表达较缺氧组、高糖组的表达降低更多,缺氧组与高糖组比较差异无统计学意义。结论:体外培养RPE细胞能够正常表达VEGF_(165b),缺氧和高糖在转录水平诱导VEGF_(165)mRNA和蛋白的表达上调,同时降低VEGF_(165b)mRNA和蛋白的表达量。将促血管生成的VEGF_(165)转换为抑制血管生成的VEGF_(165b)将有望成为DR的治疗新思路。 展开更多
关键词 VEGF_(165) VEGF_(165b) 糖尿病视网膜病变 视网膜色素上皮细胞
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血管内皮生长因子165b对人肝癌HepG_2细胞生物学特性的影响 被引量:8
2
作者 赵燕颖 王秀岩 +3 位作者 秦国涛 孙远杰 刘志忠 李然伟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期101-105,共5页
目的:探讨血管内皮生长因子165b(VEGF165b)对人肝癌HepG_2细胞生物学特性的影响,并初步研究其作用机制。方法:HepG_2细胞分为空白组(仅加转染试剂)、对照组(转染阴性对照PcDNA3.0表达载体)和PcDNA-VEGF165b组(转染VEGF165b表达载体PcDNA... 目的:探讨血管内皮生长因子165b(VEGF165b)对人肝癌HepG_2细胞生物学特性的影响,并初步研究其作用机制。方法:HepG_2细胞分为空白组(仅加转染试剂)、对照组(转染阴性对照PcDNA3.0表达载体)和PcDNA-VEGF165b组(转染VEGF165b表达载体PcDNA-VEGF165b)。MTT法检测各组HepG_2细胞生存率,RT-PCR法和Western blotting法检测HepG_2细胞中VEGF165b和VEGF165 mRNA和蛋白表达水平,Transwell小室法检测HepG_2细胞迁移能力。结果:与空白组比较,对照组HepG_2细胞中VEGF165b和VEGF165mRNA和蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。与空白组比较,PcDNA-VEGF165b组细胞中VEGF165bmRNA和蛋白表达水平明显升高(P<0.05),VEGF165 mRNA和蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。空白组和对照组细胞生存率比较差异无统计学意义(P>0.05);与空白组和对照组比较,PcDNAVEGF165b组细胞生存率有所降低,但差异无统计学意义(P>0.05)。细胞迁移实验,空白组和对照组细胞迁移率比较差异无统计学意义(P<0.05);与空白组和对照组比较,PcDNA-VEGF165b组HepG_2细胞迁移率明显降低(P<0.05)。结论:VEGF 165b能抑制VEGF165基因和蛋白的表达,VEGF165b对肝癌细胞增殖无明显影响,但可降低肝癌细胞的迁移能力。 展开更多
关键词 肝肿瘤 HEPG2细胞 血管内皮细胞生长因子165b 血管内皮细胞生长因子165 细胞增殖 细胞迁移
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食管鳞癌中VEGF_(165b)、HIF-1α的表达及临床意义 被引量:6
3
作者 胡建莉 陈萍 +3 位作者 刘伟 李振宇 陈叶珊 伍钢 《肿瘤防治研究》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期9-11,共3页
目的检测食管鳞癌组织中VEGF165b和HIF-1α的表达及与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测143例食管鳞状细胞癌组织中VEGF165b和HIF-1α的表达。结果VEGF165b和HIF-1α在食管鳞癌组织中的阳性表达率分别为13.3%和43.4%;VE... 目的检测食管鳞癌组织中VEGF165b和HIF-1α的表达及与临床病理特征的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测143例食管鳞状细胞癌组织中VEGF165b和HIF-1α的表达。结果VEGF165b和HIF-1α在食管鳞癌组织中的阳性表达率分别为13.3%和43.4%;VEGF165b阳性表达率与HIF-1α阳性表达率呈负相关关系(P=0.035)。HIF-1α阳性表达率与饮酒程度、分期、纵隔淋巴结转移及肿瘤的分化程度呈正相关(P<0.05)。结论VEGF165b和HIF-1α在食管癌的发生发展和淋巴转移中起重要的作用,VEGF165b的表达与HIF-1α存在相关性,饮酒是食管癌的重要危险因素。VEGF165b可能成为治疗的靶点。 展开更多
关键词 食管肿瘤 VEGF165b HIF-1Α 饮酒
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外源性表达VEGF165b对人膀胱癌T24细胞侵袭力的影响 被引量:3
4
作者 尹健 张斯棋 +2 位作者 冯树强 张金 李然伟 《吉林大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期64-68,I0002,共6页
目的:观察人膀胱癌T24细胞中外源性表达血管内皮生长因子(VEGF)变构体(VEGF165b)对T24细胞生存率、迁移率和侵袭力的作用,探讨VEGF165b对人膀胱癌细胞生物学特性的影响。方法:构建VEGF165b表达载体pcDNA-VEGF165b;T24细胞根据处理因素... 目的:观察人膀胱癌T24细胞中外源性表达血管内皮生长因子(VEGF)变构体(VEGF165b)对T24细胞生存率、迁移率和侵袭力的作用,探讨VEGF165b对人膀胱癌细胞生物学特性的影响。方法:构建VEGF165b表达载体pcDNA-VEGF165b;T24细胞根据处理因素不同分为T24细胞组(正常对照)、pcDNA3.0组(转染pcDNA3.0表达载体)和pcDNA-VEGF165b组(转染pcDNA-VEGF165b表达载体)。MTT法检测T24细胞生存率,Western blotting法检测T24细胞中VEGF165b、基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达水平,Transwell小室法检测T24细胞迁移率和穿膜细胞数。结果:与T24细胞组比较,pcDNA3.0组T24细胞中VEGF165b、MMP-2和MMP-9蛋白表达水平无明显变化(P>0.05)。与T24细胞组和pcDNA3.0组比较,pcDNA-VEGF165b组细胞中VEGF165b蛋白表过水平明显升高(P<0.05),MMP-2和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P<0.05)。T24细胞组、pcDNA3.0组和pcDNA-VEGF165b组细胞存活率比较差异无统计学意义(P>0.05)。与T24细胞组细胞迁移率(100%)比较,pcDNA3.0组细胞迁移率(97.2%±7.8%)无明显变化(P>0.05),pcDNA-VEGF165b组细胞迁移率(63.5%±10.4%)明显降低(P<0.05)。细胞侵袭力实验,与T24细胞组穿膜细胞数(70.8±8.5)比较,pcDNA3.0组穿膜细胞数(66.3±11.2)无明显变化(P>0.05),pcDNA-VEGF165b组穿膜细胞数(23.5±7.3)明显降低(P<0.05)。结论:外源性表达VEGF165b对T24细胞增殖无明显影响,但可明显降低其迁移力和侵袭力。 展开更多
关键词 膀胱肿瘤 血管内皮生长因子165b 肿瘤浸润
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VEGF165b和VEGF165在胃癌组织中的表达及与预后的关系 被引量:2
5
作者 关云艳 诸静芬 +3 位作者 欧希龙 吴海荣 吴锡平 王倩 《中国现代医学杂志》 CAS 北大核心 2015年第27期41-44,共4页
目的研究VEGF165b和VEGF165在胃癌及癌旁正常组织中的表达及胃癌组织中VEGF165b m RNA/VEGF165 m RNA与预后的关系。方法分别应用实时RT-PCR和免疫组织化学法检测胃癌及癌旁正常组织中VEGF165b和VEGF165的基因及蛋白表达,并对患者进行2... 目的研究VEGF165b和VEGF165在胃癌及癌旁正常组织中的表达及胃癌组织中VEGF165b m RNA/VEGF165 m RNA与预后的关系。方法分别应用实时RT-PCR和免疫组织化学法检测胃癌及癌旁正常组织中VEGF165b和VEGF165的基因及蛋白表达,并对患者进行2年的随访,比较VEGF165b m RNA/VEGF165 m RNA比值及这两种蛋白表达水平在胃癌及癌旁组织中的变化;同时分析VEGF165b与VEGF165蛋白表达的相关性以及胃癌组织中VEGF165b m RNA/VEGF165 m RNA与预后的关系。结果在胃癌组织中VEGF165b m RNA/VEGF165 m RNA低于癌旁正常组织中的水平;在癌旁正常组织中VEGF165b基因及蛋白表达强于VEGF165,在胃癌组织中VEGF165b基因及蛋白的表达则低于VEGF165,而且两者表达呈负相关关系;此外,在两年内死亡的患者中VEGF165b m RNA/VEGF165 m RNA明显低于生存患者中的比值水平。结论与正常组织相比,胃癌组织中存在VEGF165b向VEGF165基因及蛋白水平上的优势转换,这种变化有望成为治疗胃癌的新靶点。 展开更多
关键词 VEGF165b VEGF165 实时RT-PCR 免疫组织化学 胃癌
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VEGF165b在肝细胞癌中的表达及其作用机制 被引量:2
6
作者 赵燕颖 李亚刚 +3 位作者 颜波群 刘志忠 秦国涛 孙远杰 《世界华人消化杂志》 CAS 2016年第3期355-361,共7页
目的:研究血管内皮生长因子165b(vascular endothelial growth factor 165b,VEGF165b)在肝细胞癌和正常肝组织中的表达情况,初步探讨其与肝细胞癌的关系和作用机制.方法:用免疫组织化学法检测28例肝细胞癌组织和30例正常肝组织中VEGF165... 目的:研究血管内皮生长因子165b(vascular endothelial growth factor 165b,VEGF165b)在肝细胞癌和正常肝组织中的表达情况,初步探讨其与肝细胞癌的关系和作用机制.方法:用免疫组织化学法检测28例肝细胞癌组织和30例正常肝组织中VEGF165b蛋白的表达情况;用RT-PCR法分别检测肝细胞癌和正常肝组织中VEGF165b和VEGF165 mRNA的表达情况.用Western blot法检测上述肝细胞癌组织和正常肝组织中VEGF165b和VEGF165蛋白的表达情况.用Western blot法检测上述肝细胞癌和正常肝组织中FAK和P-Akt蛋白的表达情况.结果:正常肝脏组织中VEGF165b蛋白表达率为96.67%(29/30),肝细胞癌组织中VEGF165b蛋白的表达率为21.4%(6/28),表达差异有统计学意义(P<0.05).VEGF165b mRNA和蛋白在肝癌组织中的表达明显低于正常肝脏组织的表达(P<0.01).VEGF165 mRNA和蛋白在肝癌组织中的表达明显高于正常肝脏组织的表达(P<0.01).FAK和P-Akt蛋白在肝癌组织中的表达明显高于正常肝脏组织的表达(P<0.01).结论:VEGF165b在肝细胞癌组织中的表达明显低于正常肝组织的表达,而VEGF165和FAK、P-Akt在肝细胞癌组织中的表达明显高于正常肝组织的表达.提示VEGF165b与肝癌发生、发展有关,其机制可能是VEGF165b抑制VEGF165、FAK和P-Akt表达及他们的促进血管生成、肿瘤生长作用. 展开更多
关键词 肝细胞癌 血管内皮生长因子165b 血管内皮生长因子165 黏着斑激酶 磷酸化-丝氨酸苏氨酸蛋白激酶
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ILK和VEGF165b在人肾癌组织中的表达及意义 被引量:1
7
作者 蓝建华 唐贤富 +2 位作者 郑兴明 徐小涵 王德林 《生命科学研究》 CAS CSCD 2011年第3期259-262,共4页
探讨整合素连接激酶(ILK)和血管内皮生长因子165b(VEGF165b)在人肾癌组织中的表达及临床意义.利用免疫组织化学S-P法检测35例肾癌组织和25例正常肾组织中ILK和VEGF165b蛋白的表达,并与肾癌临床分期进行比较.35例肾癌组织中,ILK表达率为8... 探讨整合素连接激酶(ILK)和血管内皮生长因子165b(VEGF165b)在人肾癌组织中的表达及临床意义.利用免疫组织化学S-P法检测35例肾癌组织和25例正常肾组织中ILK和VEGF165b蛋白的表达,并与肾癌临床分期进行比较.35例肾癌组织中,ILK表达率为82.9%(29/35),VEGF165b表达率为17.1%(6/35);而25例正常肾组织中ILK表达率为28.0%(7/25),VEGF165b表达率为96.0%(24/25).肾癌中ILK的表达与VEGF165b的表达呈负相关(P<0.01);ILK与VEGF165b的表达均与肾癌的临床分期有关.ILK在肾癌组织中异常活性表达,VEGF165b在肾癌组织的表达明显降低,二者表达成负相关,与肾癌的发生、发展密切相关. 展开更多
关键词 肾肿瘤 整合素连接激酶 血管内皮生长因子165b(VEGF165b) 免疫组织化学
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肾细胞癌组织与正常组织中VEGF165b的差异表达及其意义 被引量:2
8
作者 姜翠苹 王德林 彭波 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期281-284,共4页
目的:研究血管内皮生长因子165b(Vascular endothelial growth factor 165b,VEGF165b)在肾细胞癌(Renalcellcarcino-ma,RCC)组织和正常组织中的表达情况,初步探讨其与肾细胞癌发生发展的关系。方法:(1)用S-P免疫组化法检测30例肾细胞癌... 目的:研究血管内皮生长因子165b(Vascular endothelial growth factor 165b,VEGF165b)在肾细胞癌(Renalcellcarcino-ma,RCC)组织和正常组织中的表达情况,初步探讨其与肾细胞癌发生发展的关系。方法:(1)用S-P免疫组化法检测30例肾细胞癌组织和29例正常肾组织中VEGF165b蛋白的表达情况;(2)用RT-PCR法分别检测32例肾细胞癌组织和30例正常肾组织中VEGF165b mRNA的表达情况。结果:(1)正常肾组织中VEGF165b蛋白表达率为96.55%(28/29),肾细胞癌组织中VEGF165b蛋白的表达率为20.00%(6/30),表达差异有统计学意义(P<0.05)。(2)正常肾组织中VEGF165b mRNA阳性表达率为93.33%(28/30),肾细胞癌组织中VEGF165b mRNA的阳性表达率为18.75%(6/32),具有统计学意义(P<0.05)。结论:VEGF165b在肾细胞癌组织中的表达低于正常肾组织的表达,这种表达差异可能与肾癌发生、发展的机制有关。 展开更多
关键词 肾肿瘤 VEGF165b 免疫组织化学 逆转录-聚合酶链反应(RT—PCR)
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VEGF165b在结直肠癌组织中的差异表达及其意义 被引量:1
9
作者 赵一军 梁勇 +3 位作者 石忱长 韩华中 朱庆超 杨俊 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2014年第2期273-278,共6页
目的:研究血管内皮生长因子165b(vascular endothelial growth factor 165b,VEGF 165b)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织及其配对的正常黏膜组织中的表达情况,探讨其与结直肠癌发生与发展的关系.方法:用实时荧光定量逆转录聚合酶... 目的:研究血管内皮生长因子165b(vascular endothelial growth factor 165b,VEGF 165b)在结直肠癌(colorectal cancer,CRC)组织及其配对的正常黏膜组织中的表达情况,探讨其与结直肠癌发生与发展的关系.方法:用实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(real-time quantitative reverse transcriptase polymerase chain reaction,real-time qRT-PCR)分别检测20对结直肠癌组织及其配对的正常肠黏膜组织中VEGF 165b mRNA的表达情况;运用统计学方法对结直肠癌组织与正常黏膜组织、浆膜内侧与浆膜外侧组织、无淋巴结转移与有淋巴结转移组织以及TNM分期Ⅱ期与Ⅲ期组织中的VEGF 165b mRNA的表达情况统计与分析.结果:VEGF l65b在结直肠癌组织中的表达明显低于正常黏膜组织的表达,统计具有显著性差异(P=0.006);在浆膜内侧与浆膜外侧组织、无淋巴结转移与有淋巴结转移组织以及TNM分期Ⅱ期与Ⅲ期组织中的VEGF 165b mRNA的表达无明显差别,统计无显著性差异(P>0.05).结论:VEGF 165b在结直肠癌组织中的表达明显低于正常黏膜组织的表达,提示VEGF165b可能具有抗血管生成、抑制肿瘤生长的作用,为结直肠癌的诊断、治疗和预后提供新的靶点. 展开更多
关键词 结直肠癌 选择性剪接 VEGF 165b 实时 荧光定量逆转录聚合酶链反应
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外源性表达VEGF165b对人膀胱癌裸鼠移植瘤生长影响的研究 被引量:1
10
作者 张金 尹健 +2 位作者 张斯棋 冯树强 李然伟 《中国实验诊断学》 2014年第7期1066-1068,共3页
目的建立人膀胱癌T24细胞裸鼠移植瘤模型,探讨外源性表达VEGF165b对其生长的影响及其机制。方法分别移植未转染和转染VEGF165b表达载体的人膀胱癌T24细胞到裸鼠膀胱内,28d使处死动物,称量肿瘤重量,测定肿瘤体积。Western blot法检测肿瘤... 目的建立人膀胱癌T24细胞裸鼠移植瘤模型,探讨外源性表达VEGF165b对其生长的影响及其机制。方法分别移植未转染和转染VEGF165b表达载体的人膀胱癌T24细胞到裸鼠膀胱内,28d使处死动物,称量肿瘤重量,测定肿瘤体积。Western blot法检测肿瘤VEGF165b、p-VEGFR2、AKT、p-AKT蛋白表达。结果转染pcDNA-VEGF165b组肿瘤重量和体积与未转染组和转染pcDNA3.0组相比明显降低(P<0.05),而未转染组和转染pcDNA3.0组比较无统计学差异(P>0.05)。Western blot结果显示,转染pcDNA-VEGF165b组与未转染组和转染pcDNA3.0组比较,VEGF165b表达增高,p-VEGFR2、p-AKT表达降低,而未转染组和转染pcDNA3.0组间无明显差异。结论外源性表达VEGF165b可通过抑制VEGFR2信号通路传导而明显抑制人膀胱癌裸鼠移植瘤生长。 展开更多
关键词 膀胱癌 血管内皮生长因子165b 肿瘤侵袭
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VEGF_(165)和VEGF_(165b)与肿瘤关系的研究进展 被引量:3
11
作者 关云艳 欧希龙 《现代医学》 2006年第6期447-450,共4页
关键词 VEGF165 VEGF165b 血管生成 抗血管生成 肿瘤 综述
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食管鳞癌中HIF-1α和EGFR及VEGF_(165b)的表达及相关性 被引量:1
12
作者 胡建莉 陈萍 +3 位作者 刘伟 李振宇 陈叶珊 伍钢 《中国肿瘤临床与康复》 2009年第6期503-505,共3页
目的检测食管鳞癌组织中乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、表皮生长因子受体(EGFR)和血管内皮生长因子165b(VEGF165b)的表达,并探讨三者间在食管鳞癌发生发展中的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测143例食管鳞状细胞癌组织中HIF-1α、EGFR... 目的检测食管鳞癌组织中乏氧诱导因子-1α(HIF-1α)、表皮生长因子受体(EGFR)和血管内皮生长因子165b(VEGF165b)的表达,并探讨三者间在食管鳞癌发生发展中的关系。方法应用免疫组织化学SP法检测143例食管鳞状细胞癌组织中HIF-1α、EGFR和VEGF165b的表达。结果食管鳞癌组织中HIF-1α、EGFR和VEGF165b的阳性表达率分别为43.4%、58.0%和13.3%;其中HIF-1α阳性表达率与EGFR阳性表达率呈正相关关系(r=0.272,P=0.001),与VEGF165b阳性表达率呈负相关关系(r=-0.203,P=0.015)。结论HIF-1α、EGFR和VEGF165b在食管鳞癌的发生发展中起重要作用,食管鳞癌中HIF-1α的表达与EGFR及VEGF165b的表达存在相关性。 展开更多
关键词 食管肿瘤 HIF-1Α EGFR VEGF165b 免疫组织化学
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低氧环境对高原鼢鼠不同组织VEGF_(165b)基因表达量及微血管密度的影响 被引量:3
13
作者 赵伟民 贾桂花 +1 位作者 周婷婷 拉毛吉 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 2017年第1期68-70,共3页
目的:探讨高原低氧环境下高原鼢鼠不同组织血管内皮生长因子165b(VEGF_(165b))表达量及微血管密度(MVD)的变化。方法:克隆高原鼢鼠VEGF_(165b)基因并测定其在不同海拔脑、肺和骨骼肌组织内的表达量;免疫组化法观察脑、肺和骨骼肌组织内... 目的:探讨高原低氧环境下高原鼢鼠不同组织血管内皮生长因子165b(VEGF_(165b))表达量及微血管密度(MVD)的变化。方法:克隆高原鼢鼠VEGF_(165b)基因并测定其在不同海拔脑、肺和骨骼肌组织内的表达量;免疫组化法观察脑、肺和骨骼肌组织内微血管并测定其在不同海拔组织内的密度。结果:高海拔VEGF_(165b)表达量显著低于低海拔表达量(P<0.05);微血管密度随海拔高度升高而增加(P<0.05)。结论:VEGF_(165b)基因调节动物组织微血管密度是高原动物适应低氧环境的重要机制之一。 展开更多
关键词 高原鼢鼠 血管内皮生长因子165b 微血管密度
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重组人血管内皮生长因子165b在毕赤酵母中的表达及纯化 被引量:1
14
作者 戴惠云 朱瑞宇 +3 位作者 雷楗勇 侯颖 陈蕴 金坚 《中国生物制品学杂志》 CAS CSCD 2013年第7期966-968,973,共4页
目的在毕赤酵母中表达重组人血管内皮生长因子(recombinant human vascular endothelial growth factor,rhVEGF)165b(rhVEGF-165b),并进行纯化。方法 PCR扩增hVEGF165b基因,插入毕赤酵母表达载体pPIC9k,构建重组表达质粒pPIC9k-VEGF165b... 目的在毕赤酵母中表达重组人血管内皮生长因子(recombinant human vascular endothelial growth factor,rhVEGF)165b(rhVEGF-165b),并进行纯化。方法 PCR扩增hVEGF165b基因,插入毕赤酵母表达载体pPIC9k,构建重组表达质粒pPIC9k-VEGF165b,SalⅠ酶切线性化后,电击转化毕赤酵母GS115,甲醇诱导表达。表达产物经Ni-NTA sephrose镍柱纯化后,进行Western blot鉴定。结果重组表达质粒pPIC9k-VEGF165b经双酶切和测序,证明构建正确;表达的rhVEGF165b蛋白相对分子质量约为23 000,纯化后纯度达90%以上,具有人VEGF的抗原性。结论成功在毕赤酵母中表达了rhVEGF165b蛋白,纯化的蛋白纯度较高,为进一步研究其生物学功能奠定了基础。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子165b 毕赤酵母 表达 纯化
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血管内皮生长因子165b抑制肿瘤血管生成的研究进展 被引量:2
15
作者 谷芳 李秀丽 姚元庆 《解放军医学院学报》 CAS 2014年第7期770-772,共3页
研究认为血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因差异剪接后能够产生促进血管生成的VEGFxxx和抑制血管生成的VEGFxxxb。在VEGFxxxb家族中,VEGF165b在功能上具有代表性地位,表现出明显的抑制VEGF165所介导的血... 研究认为血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)基因差异剪接后能够产生促进血管生成的VEGFxxx和抑制血管生成的VEGFxxxb。在VEGFxxxb家族中,VEGF165b在功能上具有代表性地位,表现出明显的抑制VEGF165所介导的血管生成作用。由于VEGF165b具有机体自然产生、不具有免疫原性的优势,有望通过强制高表达、外源性给予重组蛋白或促进VEGF外显子8b选择性剪接抑制肿瘤血管生成,从而用于肿瘤的治疗。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子165b 血管内皮生长因子 抗血管生成 肿瘤
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骨髓CD11b^(+)巨噬细胞分泌VEGF-A165b抑制老年小鼠新血管形成的作用机制
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作者 张文晨 刘元值 +2 位作者 孙文静 成宪武 赵光贤 《中国老年学杂志》 CAS 北大核心 2024年第1期89-96,共8页
目的探讨老年小鼠缺血组织中骨髓(BM)源性CD11b^(+)巨噬细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)-A165b抑制老年小鼠新血管形成的作用机制。方法制备8周龄小鼠(对照组)和>72周龄小鼠(观察组)后肢缺血模型,每组6只,分别于术前、术后第0、4、7... 目的探讨老年小鼠缺血组织中骨髓(BM)源性CD11b^(+)巨噬细胞分泌血管内皮生长因子(VEGF)-A165b抑制老年小鼠新血管形成的作用机制。方法制备8周龄小鼠(对照组)和>72周龄小鼠(观察组)后肢缺血模型,每组6只,分别于术前、术后第0、4、7、14天用激光散斑血流成像(LSBFI)评估血流恢复状态。采用免疫组织化学染色方法于术后第4天,对巨噬细胞(Mac-3)进行染色,计算巨噬细胞数量,于第14天对CD31+巨噬细胞进行染色检测两组缺血后肢肌肉中毛细血管密度。采用Western印迹,于术后第4天检测两组缺血肌肉组织中VEGF-A、丝氨酸精氨酸蛋白剪接因子(SC35)、Wnt5a蛋白表达水平。采用实时荧光聚合酶链反应(RT-qPCR)于术后第4天检测两组缺血肌肉组织中BM源性CD11b^(+)巨噬细胞裂解物及缺血肌肉中VEGF-A165b、Wnt5a mRNA水平。采用含有观察组BM源性CD11b^(+)巨噬细胞的特殊培养液在缺氧条件下培养人脐静脉内皮细胞(HUVECs)24 h,计算每个板口的6个区域中出芽数量和长度评估CD11b^(+)巨噬细胞分泌的VEGF对血管生成的影响。结果LSBFI显示,观察组后肢缺血呈现低灌注信号(深蓝色),而对照组呈现高灌注信号(红色)。与对照组相比,观察组缺血后肢肌肉中毛细血管密度明显降低(P<0.05)。与对照组相比,观察组缺血肌肉组织中VEGF-A、SC35、Wnt5a蛋白表达水平明显升高,观察组BM源性CD11b^(+)巨噬细胞中及缺血肌肉组织中VEGF-A165b、Wnt5a mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。HUVEC芽的数量和长度,与不含有观察组小鼠BM源性的CD11b^(+)巨噬细胞的培养液相比,其生长明显受到抑制(P<0.05)。结论衰老可通过VEGF-A165b机制损害缺氧组织的新血管形成,其机制可能由Wnt5a-SC35信号通路介导。 展开更多
关键词 衰老 血管生成 血管内皮生长A 血管内皮生长A165b WNT5A
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血管内皮生长因子-A165b在心血管疾病中的研究进展 被引量:6
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作者 张文晨 刘元值 +3 位作者 孙文静 杜川 金磊 赵光贤 《中国心血管病研究》 CAS 2022年第9期839-843,共5页
心血管疾病已成为导致人类死亡的最常见疾病之一,医学界对心血管疾病已进行许多研究,其中对其发病机制的研究最为常见。血管内皮生长因子-A165b(vascular endothelial growth factor A165b,VEGF-A165b),作为血管内皮生长因子A(vascular ... 心血管疾病已成为导致人类死亡的最常见疾病之一,医学界对心血管疾病已进行许多研究,其中对其发病机制的研究最为常见。血管内皮生长因子-A165b(vascular endothelial growth factor A165b,VEGF-A165b),作为血管内皮生长因子A(vascular endothelial growth factor A,VEGF-A)的一种亚型,在心血管疾病的发病中起到了重要作用。本文综述了近几年来关于VEGF-A165b在心血管疾病中所起作用的研究成果以及其对心血管疾病的病情评估及治疗中所起的临床意义。 展开更多
关键词 血管内皮生长因子-A165b 心血管疾病
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Vascular endothelial growth factor-165b protects the blood-retinal barrier from damage after acute high intraocular pressure in rats 被引量:1
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作者 Jing Shen Yi Li +4 位作者 Min Li Wei-Xian Liu Hong-Liang Sun Quan-Peng Zhang Xi-Nan Yi 《International Journal of Ophthalmology(English edition)》 SCIE CAS 2022年第8期1231-1239,共9页
AIM:To elucidate the role of vascular endothelial growth factor-165b(VEGF-165b)in blood-retinal barrier(BRB)injury in the rat acute glaucoma model.METHODS:In this study,the rat acute high intraocular pressure(HIOP)mod... AIM:To elucidate the role of vascular endothelial growth factor-165b(VEGF-165b)in blood-retinal barrier(BRB)injury in the rat acute glaucoma model.METHODS:In this study,the rat acute high intraocular pressure(HIOP)model was established before and after intravitreous injection of anti-VEGF-165b antibody.The expression of VEGF-165b and zonula occludens-1(ZO-1)in rat retina was detected by double immunofluorescence staining and Western blotting,and the breakdown of BRB was detected by Evans blue(EB)dye.RESULTS:The intact retina of rats expressed VEGF-165b and ZO-1 protein,which were mainly located in the retinal ganglion cell layer and the inner nuclear layer and were both co-expressed with vascular endothelial cell markers CD31.After acute HIOP,the expression of VEGF-165b was up-regulated;the expression of ZO-1 was down-regulated at 12h and then recovered at 3d;EB leakage increased,peaking at 12h.After intravitreous injection of anti-VEGF-165b antibody,the expression of VEGF-165b protein was no significantly changed;and the down-regulation of the expression of ZO-1 was more obvious;EB leakage became more serious,peaking at 3d.EB analysis also showed that EB leakage in the peripheral retina was greater than that in the central retina.CONCLUSION:The endogenous VEGF-165b protein may protect the BRB from acute HIOP by regulating the expression of ZO-1.The differential destruction of BRB after acute HIOP may be related to the selective loss of retinal ganglion cells. 展开更多
关键词 vascular endothelial growth factor-165b blood-retinal barrier high intraocular pressure Evans blue zonula occludens-1
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Expression of VEGF165 and VEGF165b during ovarian follicular development
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作者 Chinnarat Changsangfa Bongkoch Turathum +1 位作者 Morakot Sroyraya Khwanthana Grataitong 《Asian pacific Journal of Reproduction》 2023年第6期281-287,共7页
Objective:To investigate the role of vascular endothelial growth factor(VEGF)165a,VEGF165b,and VEGF receptor(VEGFR)in the development of bovine follicles.Methods:We cultured follicular cells that were collected from s... Objective:To investigate the role of vascular endothelial growth factor(VEGF)165a,VEGF165b,and VEGF receptor(VEGFR)in the development of bovine follicles.Methods:We cultured follicular cells that were collected from small,medium,and large sized bovine follicles with estrogen and measured the expression of VEGF,VEGFR2 and VEGF165b by Western blot analysis and immunofluorescence.Results:The expression of VEGF165 increased in all follicle sizes and the expression of VEGF165b was increased in the small and large follicles after culturing in an estrogen containing medium.The expression of VEGFR2 was increased in the medium and large follicles after culturing with estrogen for 96 h.VEGF165 was activated at 100 ng/mL estrogen in the large follicles for 96 h.In addition,VEGFR2 was upregulated in the medium and large follicles after treated with 100 ng/mL estrogen for 96 h.Conclusions:This evidence suggests that the expression of VEGF165 and VEGFR is associated with estrogen stimulation during the development of bovine follicles and in an autocrine or paracrine manner.This reveals an advantage during oocyte maturation in vitro. 展开更多
关键词 Ovarian follicles Vascular endothelial growth factor VEGF VEGFR2 VEGF165b Estrogen stimulation
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