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源自嗜热菌的α-L-鼠李糖苷酶交联聚集体的制备及应用 被引量：2
1
作者 许锦 徐佳慧 +2 位作者 张小濛 卢昌宁 赵林果 《林业工程学报》 CSCD 北大核心 2020年第2期122-129,共8页
研究了一种制备嗜热菌Thermotoga petrophila DSM 13995来源的α-L-鼠李糖苷酶交联聚集体的方法。试验结果表明:在酶蛋白与Pluronic F127质量比为1∶8、沉淀剂硫酸铵质量浓度为75 mg/mL、戊二醛浓度为40 mmol/L时固定α-L-鼠李糖苷酶,... 研究了一种制备嗜热菌Thermotoga petrophila DSM 13995来源的α-L-鼠李糖苷酶交联聚集体的方法。试验结果表明:在酶蛋白与Pluronic F127质量比为1∶8、沉淀剂硫酸铵质量浓度为75 mg/mL、戊二醛浓度为40 mmol/L时固定α-L-鼠李糖苷酶,酶活回收率可达49.45%。以硫酸铵-戊二醛(CLEA)的常规顺序制备固定化酶(PAG-R)时,酶活回收率仅为30.87%,而在Pluronic F127-硫酸铵-戊二醛(PL-AS-GL)顺序下制备PAG-R,酶活回收率达到60.90%,固定化剩余酶活力为34 U/mL。此外,研究了固定化酶PAG-R的酶学性质,结果表明PAG-R的最适温度为90℃,最适pH为5.0,与游离酶TpeRha的酶学性质相近,但在不同温度和pH条件下PAG-R的比酶活更高。PAG-R在90℃保温3 h后剩余酶活力为77.11%,而游离酶TpeRha则完全丧失活力,说明固定化酶的温度稳定性得到了较大的提升。以芦丁为底物,比较了PAG-R与TpeRha催化芦丁生成异槲皮素的产率差异。在温度80℃、pH 6.5、加酶量4 U/mL、反应时间90 min时,PAG-R能完全转化3 g/L底物,摩尔转化率为100%,产物的生成量是游离酶的2.31倍。连续反应10次后,芦丁相对转化率仍能保持在60%以上,由此可知固定化后的鼠李糖苷酶其催化效率得到了提高,且重复使用性能良好,更有利于工业化应用。 展开更多
关键词 α-L-鼠李糖苷酶 嗜热菌Thermotoga petrophila DSM 13995 Pluronic F127 固定化 循环次数
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