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高效递送趋化因子CXCL12工程益生菌的构建及其在糖尿病慢性创面愈合中的应用 被引量：1
1
作者 李胜杰 苏慧娟 +2 位作者 李晓婷 魏静 陈廷涛 《生物工程学报》 北大核心 2025年第6期2334-2348,共15页
糖尿病慢性创面具有难愈性、反复进展性和较高的致残/死亡率等特点,其临床治疗是亟待解决的医学难题之一。因其复杂的局部微环境,如高蛋白酶活性和持续的炎症反应等,使外源性因子(如趋化因子CXCL12)在局部慢性创面的生物利用率非常低,... 糖尿病慢性创面具有难愈性、反复进展性和较高的致残/死亡率等特点,其临床治疗是亟待解决的医学难题之一。因其复杂的局部微环境,如高蛋白酶活性和持续的炎症反应等,使外源性因子(如趋化因子CXCL12)在局部慢性创面的生物利用率非常低,限制了外源性因子在慢性创面的局部应用。本研究利用合成生物学技术原理,以植物乳杆菌WCFS1为底盘菌,旨在开发一种高效的CXCL12递送系统,并评估其在糖尿病慢性创面修复中的作用。采用分子克隆技术将植物乳杆菌内源性分泌信号肽lp_3050和乳酸菌常用分泌信号肽usp45分别与gusA报告基因融合,插入pTRK892-P_(32(pgm))质粒中,制备相应的工程菌,并通过GusA酶活分析表征了该菌株的蛋白分泌表达效率。结果表明,与usp45信号肽相比,lp_3050信号肽在植物乳杆菌WCFS1中能高效驱动GusA的分泌表达,其发酵上清中GusA酶活力提高了近5倍。基于此,将lp_3050分泌信号肽与密码子优化后的CXCL12基因进行融合表达,构建了高效分泌表达CXCL12的工程益生菌Lpw-CXCL12,其发酵上清中CXCL12的含量高达(13.40±0.20)μg/mL。随后,在慢性创面小鼠模型中发现Lpw-CXCL12工程益生菌可加速糖尿病慢性创面愈合。本研究构建了一株高效分泌表达趋化因子CXCL12的工程益生菌,并揭示了其在糖尿病慢性创面小鼠模型中的促创面愈合功效,为未来糖尿病慢性创面的治疗提供了新的思路和技术支撑。 展开更多
关键词 工程益生菌 合成生物学 药物递送 趋化因子CXCL12 慢性创面愈合
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连翘苷调节CXCL12/CXCR4信号通路对慢性盆腔炎大鼠的影响实验研究 被引量：2
2
作者 郭红艳 齐丽红 王亮 《陕西医学杂志》 2025年第2期175-180,共6页
目的:探讨连翘苷(Phil)调节CXC趋化因子配体12(CXCL12)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)信号通路对慢性盆腔炎(CPID)大鼠的影响。方法:采用机械损伤联合子宫腔注入混合菌液构建CPID大鼠模型,将造模成功的大鼠分为CPID组、Phil低、中、高剂量组(... 目的:探讨连翘苷(Phil)调节CXC趋化因子配体12(CXCL12)/CXC趋化因子受体4(CXCR4)信号通路对慢性盆腔炎(CPID)大鼠的影响。方法:采用机械损伤联合子宫腔注入混合菌液构建CPID大鼠模型,将造模成功的大鼠分为CPID组、Phil低、中、高剂量组(Phil-L、Phil-M、Phil-H组)和抑制剂组(CXCL12/CXCR4信号通路抑制剂AMD3100),每组12只。另选12只大鼠作为对照组(Sham组)。采用HE染色观察大鼠子宫组织病理学变化并进行病理评分。采用TUNEL染色观察大鼠子宫组织细胞凋亡情况。采用免疫组织化学法检测大鼠子宫组织中剪切的半胱天冬氨酸蛋白酶-1(Cleaved caspase-1)表达。采用ELISA法检测大鼠血清白细胞介素(IL)-6、肿瘤坏死因子(TNF-α)、IL-1β水平。采用Western blot检测大鼠子宫组织Bcl-2相关X蛋白(Bax)、B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2)、CXCL12、CXCR4蛋白表达。结果:Sham组大鼠上皮细胞紧密排列,未见明显病理损伤。与Sham组比较,CPID组大鼠子宫组织出现腺体、纤维结缔组织增生,水肿明显,内膜扩张充血,并有大量炎症因子浸润。与CPID组比较,Phil-L组、Phil-M组、Phil-H组、抑制剂组大鼠炎症浸润和纤维结缔组织增生依次减少,且Phil-H组、抑制剂组未见纤维结缔组织增生。与Sham组比较,CPID组大鼠子宫组织病理评分、子宫组织细胞凋亡率、子宫组织Cleaved caspase-1阳性表达率、血清IL-6、IL-1β和TNF-α水平以及子宫组织Bax、CXCL12、CXCR4蛋白表达水平升高,Bcl-2蛋白表达水平降低(均P<0.05)。与CPID组比较,Phil-L、Phil-M、Phil-H组大鼠子宫组织病理评分、子宫组织细胞凋亡率、子宫组织Cleaved caspase-1阳性表达率、血清IL-6、IL-1β和TNF-α水平以及子宫组织Bax、CXCL12、CXCR4蛋白表达水平降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(均P<0.05)。Phil-H组上述指标与抑制剂组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:Phil能够改善CPID大鼠子宫组织病理损伤,降低细胞凋亡,减轻炎症反应,其作用机制可能与抑制CXCL12/CXCR4信号通路有关。 展开更多
关键词 慢性盆腔炎 连翘苷 CXC趋化因子配体12/CXC趋化因子受体4信号通路 炎症反应 大鼠
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玉米大斑病菌热激蛋白HSP 9/12基因的克隆与表达分析
3
作者 张淑红 高凤菊 +5 位作者 武秋颖 纪景欣 张运峰 许可 谷守芹 范永山 《中国农业科学》 北大核心 2025年第18期3648-3663,共16页
【目的】克隆玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)非ACD结构域类小分子热激蛋白HSP 9/12基因,分析其在病菌发育、侵染和HT-毒素诱导过程中的表达模式。【方法】在玉米大斑病菌全基因组范围内筛选并克隆热激蛋白HSP 9/12基因,利用生物信... 【目的】克隆玉米大斑病菌(Setosphaeria turcica)非ACD结构域类小分子热激蛋白HSP 9/12基因,分析其在病菌发育、侵染和HT-毒素诱导过程中的表达模式。【方法】在玉米大斑病菌全基因组范围内筛选并克隆热激蛋白HSP 9/12基因,利用生物信息学方法进行编码蛋白的理化性质分析、亚细胞定位、结构预测和系统发育分析,利用RNA-seq和RT-qPCR分析HSP 9/12基因在玉米大斑病菌发育、侵染和HT-毒素诱导过程中的表达情况。【结果】从玉米大斑病菌基因组筛选并克隆到两个HSP 9/12基因,其编码蛋白分别含有99和100个氨基酸,根据分子量分别命名为StHsp10.1和StHsp10.7。理化性质分析表明,两个HSP 9/12均为亲水蛋白,亚细胞定位预测均为细胞质并含有核定位信号,无跨膜结构域和信号肽,均含有HSP9_HSP12(PF04119)结构域;StHSP10.1为酸性不稳定蛋白,StHSP10.7为碱性稳定蛋白,均以α-螺旋为主导的二级和三级结构形式存在;StHSP10.1与酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)HSP12亲缘关系较近,StHSP10.7与粟酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)HSP9亲缘关系较近。StHSP10.1在分生孢子发育期表达量最高,其次为菌丝、附着胞和侵入钉,芽管表达量较低;玉米大斑病菌接种后StHSP10.1表达量迅速上升,接种72 h时的FPKM达到接种24 h的6.37倍;HT-毒素诱导过程中的RT-qPCR分析结果表明,随着诱导时间增加,StHSP10.1在野生型菌株(WT)中相对基因表达量显著上升,诱导14、21和28 d分别为7 d的2.9、14.1和39.8倍,但在STK1基因敲除突变体(ΔSTK1)中表达量均极低;StHSP10.7在玉米大斑病菌发育阶段、侵染过程和HT-毒素诱导过程中均表达量极低。AlphaFold 3预测显示,StHSP10.1转录起始位点上游-38—-24 bp区域同时存在TATA-box、细胞分化蛋白RCD1结合位点和bZIP转录因子StbZIP11结合位点;利用STRING在线网站构建StHSP10.1蛋白质互作网络,发现2条StHSP10.1调控路径:Ras1→STK1→StbZIP11→StHSP10.1和Ras1→UBE2→CUE1→RCD1-like→StHSP10.1,推测分别在HT-毒素合成和胁迫诱导方面发挥重要作用。【结论】玉米大斑病菌HSP 9/12基因的表达模式存在显著差异,StHSP10.1是病菌发育、侵染和HT-毒素诱导过程中的关键调控基因,而StHSP10.7无调控作用。 展开更多
关键词 玉米大斑病菌 HSP 9/12 小分子热激蛋白 基因克隆 转录调控
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血清CXCL12、CCCK-18、MMP-9联合检测对急性出血性脑卒中患者近期预后不良的预测价值 被引量：1
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作者 夏文静 陈媛媛 +1 位作者 李义沙 王倩 《国际检验医学杂志》 2025年第3期297-302,307,共7页
目的 探讨血清CXC趋化因子配体12(CXCL12)、细胞角蛋白18裂解片段(CCCK-18)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)联合检测对急性出血性脑卒中患者近期预后不良的预测价值。方法 选取2021年10月至2023年3月该院收治的138例急性出血性脑卒中患者为... 目的 探讨血清CXC趋化因子配体12(CXCL12)、细胞角蛋白18裂解片段(CCCK-18)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)联合检测对急性出血性脑卒中患者近期预后不良的预测价值。方法 选取2021年10月至2023年3月该院收治的138例急性出血性脑卒中患者为研究对象。患者入院后治疗前检测血清CXCL12、CCCK-18、MMP-9水平。患者治疗后随访6个月,根据改良Rankin评分评估患者预后情况分为预后良好组与预后不良组。对比两组患者临床资料及血清CXCL12、CCCK-18、MMP-9水平,分析影响急性出血性脑卒中患者近期预后不良的因素,绘制受试者工作特征(ROC)曲线评价血清CXCL12、CCCK-18、MMP-9单项及联合检测对急性出血性脑卒中患者近期预后不良的预测价值。结果 138例患者中预后不良组52例,预后良好组86例,预后不良率为37.68%。预后不良组血清CXCL12、CCCK-18、MMP-9水平及年龄、入院时出血量、入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分、入院时收缩压、入院时舒张压均高于预后良好组,入院时格拉斯哥昏迷量表(GCS)评分低于预后良好组,差异有统计学意义(P<0.05)。多因素Logistic回归分析结果显示,血清CXCL12高水平、CCCK-18高水平、MMP-9高水平、高龄及入院时出血量大、NIHSS评分高、收缩压高均是急性出血性脑卒中近期预后不良的危险因素(P<0.05),入院时GCS评分高是保护因素(P<0.05)。ROC曲线分析显示,血清CXCL12、CCCK-18、MMP-9 3项联合预测曲线下面积高于各指标单独及两两联合预测(P<0.05)。结论 血清CXCL12、CCCK-18、MMP-9联合检测对急性出血性脑卒中患者近期预后不良具有较好的预测价值。 展开更多
关键词 CXC趋化因子配体12 细胞角蛋白18裂解片段 基质金属蛋白酶-9 急性出血性脑卒中
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乌鲁木齐市鼠伤寒沙门菌单相变种1,4,[5],12:i:-基因组特征
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作者 杨毅 陈国利 +6 位作者 胡锦瑞 尚月梅 杨艳梅 杜小莉 崔志刚 周海健 卢耀勤 《中国热带医学》 北大核心 2025年第10期1316-1322,共7页
目的分析2018—2021年乌鲁木齐市鼠伤寒沙门菌单相变种1,4,[5],12:i:-(S.1,4,[5],12:i:-)的基因组特征,为该血清型的监测及其引起的疫情处置提供依据。方法对2018—2021年乌鲁木齐市肠道门诊监测收集的32株S.1,4,[5],12:i:-菌株进行全... 目的分析2018—2021年乌鲁木齐市鼠伤寒沙门菌单相变种1,4,[5],12:i:-(S.1,4,[5],12:i:-)的基因组特征,为该血清型的监测及其引起的疫情处置提供依据。方法对2018—2021年乌鲁木齐市肠道门诊监测收集的32株S.1,4,[5],12:i:-菌株进行全基因组测序。利用Microobench平台进行耐药基因、毒力基因及可移动遗传元件的注释,以及多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)和核心基因组多位点序列分型(core genome multilocus sequence typing,cgMLST)型别鉴定,通过全基因组单核苷酸多态性(whole genome single nucleotide polymorphisms,wgSNPs)构建进化树,分析种群结构以及遗传进化关系。结果32株S.1,4,[5],12:i:-基因组序列共注释到11类41种耐药基因,59.4%(19/32)分离株携带aac(6')-Iaa-aph(6)-Id-aph(3'')-Ib-blaTEM-1B-sul2-tet(B)核心抗性组合,可移动遗传元件分析显示,以质粒IncQ1和插入序列ISVsa5为主的可移动遗传元件介导的获得性耐药机制协助相关耐药基因传播;所有菌株预测出88个与黏附、侵袭相关的毒力基因;MLST分为2个ST型(ST34和ST8333),ST34(90.6%,29/32)为S.1,4,[5],12:i:-优势克隆型别,3株ST8333型菌株均属于cgST253604型,遗传差异小(≤3个等位基因)且与ST34仅在hemD位点有差异,表明基因组正在变异;cgMLST分为13个cgST型,优势型别为cgST257566、cgST81900和cgST52428,各包含5个株菌;wg‐SNPs分析显示S.1,4,[5],12:i:-分布在不同的进化簇中,具有遗传多态性和局部进化特征;SNPs差异小于100,存在跨地区传播可能。结论乌鲁木齐S.1,4,[5],12:i:-携带耐药基因广泛,以ST34型为主导克隆,与国内流行趋势相符,表现出较高的遗传多样性。连续多年出现遗传高度相似的ST8333型值得警惕,建议通过各部门联动的实验室监测网络加强对该菌株的监测和防控。 展开更多
关键词 鼠伤寒沙门菌单相变种 1 4 [5] 12:i:- 全基因组测序 耐药基因 种群结构
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氮含量对12%Cr铁素体耐热钢冲击性能的影响
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作者 马廷威 王平 +2 位作者 王玉红 郝宪朝 雷腾 《材料与冶金学报》 北大核心 2025年第4期387-392,共6页
对3种不同氮含量(0.005%,0.020%,0.050%,均为质量分数)下的12%Cr铁素体耐热钢微观组织和冲击性能进行观察与测试,研究了氮含量对其微观组织和冲击性能的影响.结果表明:当试验钢中氮的质量分数从0.005%增加到0.050%时,其马氏体板条尺寸从... 对3种不同氮含量(0.005%,0.020%,0.050%,均为质量分数)下的12%Cr铁素体耐热钢微观组织和冲击性能进行观察与测试,研究了氮含量对其微观组织和冲击性能的影响.结果表明:当试验钢中氮的质量分数从0.005%增加到0.050%时,其马氏体板条尺寸从468 nm减小到264 nm, MX相(即钒的氮化物)的摩尔分数从0.03%增加到0.26%;当试验钢中氮的质量分数从0.005%增加到0.020%时,第二相析出强化作用明显,其韧脆转变温度升高了10.2℃,高阶能减小了29.8 J;当试验钢中氮的质量分数从0.020%增加到0.050%时,细晶强化作用显著,其韧脆转变温度降低了7.6℃,高阶能增加了19.1 J. 展开更多
关键词 氮含量 12%Cr铁素体耐热钢 冲击性能 韧脆转变温度
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基于UG12的NHX8000卧式加工中心后置处理优化设计研究 被引量：1
7
作者 叶选林 孙波 +1 位作者 陈丽 张丽 《南方农机》 2025年第2期132-135,共4页
【目的】直接利用通用后置处理器生成的NC代码一般与用户使用的数控机床和系统的要求不符,导致数控加工不能安全、可靠地进行。【方法】针对NHX8000卧式加工中心,结合UG/Post Builder后置处理器开发工具和后置处理算法,成功开发了该机... 【目的】直接利用通用后置处理器生成的NC代码一般与用户使用的数控机床和系统的要求不符,导致数控加工不能安全、可靠地进行。【方法】针对NHX8000卧式加工中心,结合UG/Post Builder后置处理器开发工具和后置处理算法,成功开发了该机床的专用后置处理器。该处理器基于FANUC数控系统进行配置,设定了机床参数、程序头、尾部及相关刀轨参数,并通过TCL(Tool Command Language)语言编写程序逻辑,实现了在加工过程中自动插入M10/M11、M29等指令的功能。【结果】该后置处理器支持多坐标系输出,包括G54-G59和G54.1 P1-P48的精确输出,确保生成的NC程序能够完全匹配满足NHX8000机床的需求。【结论】该后置处理器大幅缩短了程序的修改及加工时间,提高了生产效率,有效解决了实际生产中的问题,为类似机床的后置处理开发提供了宝贵的经验和借鉴。 展开更多
关键词 UG12 后置处理器 NHX8000卧式加工中心 TCL语言
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3种复位固定法对T_(12)椎体压缩骨折后脊柱力学稳定性变化的有限元分析
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作者 秦大平 张晓刚 +8 位作者 高国栋 权祯 赵雅文 徐斌 徐世伟 王志鹏 张华 赵希云 陶维天 《中华中医药杂志》 北大核心 2025年第7期3739-3747,共9页
目的:通过有限元分析3种复位固定法对T_(12)椎体压缩骨折椎体高度恢复不全状态下与人体正常脊柱进行对比分析,结合临床实际针对T_(12)椎体在骨折治疗前后椎体高度丢失相同状态下不同工况条件对脊柱力学稳定性变化差异进行有限元分析,明... 目的:通过有限元分析3种复位固定法对T_(12)椎体压缩骨折椎体高度恢复不全状态下与人体正常脊柱进行对比分析,结合临床实际针对T_(12)椎体在骨折治疗前后椎体高度丢失相同状态下不同工况条件对脊柱力学稳定性变化差异进行有限元分析,明确不同治疗方法之间的生物力学机制和临床适应证选择的差异性。方法:选择2名健康志愿者,选择16例住院T_(12)椎体压缩骨折患者CT及MRI扫描资料,通过PACS影像系统对符合条件的经过经皮球囊扩张椎体成形术(PKP)、经皮后凸椎体成形术(PVP)及中医过伸复位手法配合PKP治愈的临床真实病例,提取其CT及MRI扫描资料,建立T_(12)三维有限元模型并验证模型有效性,对3种复位固定法对T_(12)椎体压缩骨折后不同运动工况下椎体各结构应力变化。结果:经椎体强化术后PKP、PVP治疗在脊柱前屈、后伸,左、右侧弯,左、右旋转,轴向7种不同运动状态下与正常人体脊柱胸腰段模型应力变化比较,其椎体结构(包括椎体、椎间盘、纤维环、髓核)的Von Mises应力有明显增大趋势,对于T_(12)椎体压缩骨折经骨水泥强化术(PKP、PVK、手法配合PKP)后,其在左右旋转运动状态下椎体、关节突关节应力明显增大。纤维环、椎间盘的应力略低于正常人体;对终板的应力影响主要体现在骨折椎体经骨水泥强化术后对邻近椎体终板应力有明显的增加,与正常人体模型比较,从筋-骨系统进行分析,骨与肌肉、韧带所代表的动静力变化都明显降低。结论:采用PKP、中医过伸复位手法配合PKP与PVP 3种复位法治疗OVCF的临床疗效差异性和对人体脊柱胸腰段椎体、附属结构及相邻椎体长期稳定性方面的差异,明确中医过伸复位手法配合PKP方法能使纤维环、椎间盘、髓核及相邻椎体终板、关节突软骨的应力变化幅度减小,趋于一种稳定状态,降低了远期伤椎高度丢失、并发再骨折以及相邻椎体再骨折的发生比率,提高其远期疗效和增加OVCF胸腰段治疗后筋骨系统的稳定性。对选择不同治疗方法之间的生物力学差异和临床适应证匹配程度提供理论和生物力学依据。 展开更多
关键词 3种复位固定法 T_(12)椎体压缩骨折 力学稳定性 有限元分析
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木薯新品种‘桂热12号’的选育及栽培要点
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作者 赵英 罗燕春 +6 位作者 张美华 韦祖生 黄建祺 文峰 陈炯宇 宋恩亮 付海天 《分子植物育种》 北大核心 2025年第12期4024-4032,共9页
为了选育高产稳产、高淀粉、耐寒、较抗红蜘蛛和细菌性枯萎病、适应性广的木薯新品种,本研究从国际热带农业中心引进的杂交种子选育,经单株评选试验、各级系比试验、抗病虫与抗寒性评价、区域性试验、生产性试验,筛选和鉴定到优良品种... 为了选育高产稳产、高淀粉、耐寒、较抗红蜘蛛和细菌性枯萎病、适应性广的木薯新品种,本研究从国际热带农业中心引进的杂交种子选育,经单株评选试验、各级系比试验、抗病虫与抗寒性评价、区域性试验、生产性试验,筛选和鉴定到优良品种‘桂热12号’。经过多年品比试验,‘桂热12号’木薯株型紧凑、结薯较集中、掌状平伸、大小均匀,且遗传稳定,变异小,具有高产稳产、高淀粉、耐寒、较抗红蜘蛛和细菌性枯萎病、适应性广等优点,平均鲜薯产量比对照主栽品种SC205增产11.45%~20.62%,平均淀粉含量比对照提高2.2%~8.1%,在广西、广东和江西多点多年种植均获得高产。 展开更多
关键词 木薯品种 桂热12号 选育 栽培要点
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具有光热效应的多级Ti_(3)C_(2)/Bi_(12)O_(17)Br_(2)肖特基异质结简单合成及其太阳能驱动抗生素光降解的研究
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作者 刘超 余欢 +6 位作者 李佳明 余茜 郁壮志 宋玉玺 张峰 张勤芳 邹志刚 《物理化学学报》 北大核心 2025年第7期4-17,共14页
在去除盐酸四环素(TC)方面,光催化技术被认为是一种高效和绿色的方法,可满足可持续发展的需求。本研究采用简单的搅拌过程来构建具有多级结构的Ti_(3)C_(2)/Bi_(12)O_(17)Br_(2)(命名为TBOB)肖特基异质结,其中Bi_(12)O_(17)Br_(2)组分... 在去除盐酸四环素(TC)方面,光催化技术被认为是一种高效和绿色的方法,可满足可持续发展的需求。本研究采用简单的搅拌过程来构建具有多级结构的Ti_(3)C_(2)/Bi_(12)O_(17)Br_(2)(命名为TBOB)肖特基异质结,其中Bi_(12)O_(17)Br_(2)组分紧密地沉积在Ti_(3)C_(2)表面。通过模拟太阳光下降解TC来评价所有样品的光催化性能。与Bi_(12)O_(17)Br_(2)相比,所制备的TBOB复合材料表现出更好的光降解活性,活性的增强归功于Ti_(3)C_(2)和Bi_(12)O_(17)Br_(2)之间的协同效应,增加Ti_(3)C_(2)的负载量可提高光捕获能力,肖特基异质结的形成可促进有效的电荷载流子分离,以及光热效应可促进表面反应动力学。此外,对影响TBOB复合材料光催化性能的关键因素进行了详细的研究。自由基捕获实验和电子顺磁共振(EPR)技术证实了•O2−和e−是TC光催化降解的主要活性物种。结合实验分析和理论计算,提出并讨论了可能的电荷载流子转移途径和光催化降解机理。本研究为合理设计高效光热辅助Ti_(3)C_(2)基光催化剂提供了理论和实验依据。 展开更多
关键词 Bi_(12)O_(17)Br_(2) Ti_(3)C_(2) 肖特基异质结 光热效应 光降解
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2例Gitelman综合征患儿携带SLC12A3基因突变分析及相关文献复习 被引量：1
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作者 胡国生 李利 +1 位作者 何一旻 丁宇 《黑龙江医学》 2025年第6期720-723,727,共5页
目的:分析2例Gitelman综合征(GS)患儿基因突变分析并对相关文献复习。方法:回顾性分析2021年5—8月阜阳市人民医院收治的2例GS男患儿的临床特点及治疗过程,抽提其基因组DNA,进行全外显子组基因测序。结果:2例患儿均表现为不同程度的低... 目的:分析2例Gitelman综合征(GS)患儿基因突变分析并对相关文献复习。方法:回顾性分析2021年5—8月阜阳市人民医院收治的2例GS男患儿的临床特点及治疗过程,抽提其基因组DNA,进行全外显子组基因测序。结果:2例患儿均表现为不同程度的低血钾及相应的临床表现,血钾最低分别为1.8 mmol/L和1.61 mmol/L,其中患儿2低血钾长达10年。患儿1经检测发现SLCl2A3基因杂合突变c.179C>T,突变来源于无症状的父亲;患儿2 SLCl2A3基因复合杂合突变c.1315G>A和c.1844C>T,突变分别来源于患儿的父母。其中,患儿2的复合杂合突变尚未见于我国GS的报道。结论:低钾血症是儿童GS重要特征,基因检测有助于该病的诊断。 展开更多
关键词 SLC12A3基因 GITELMAN综合征 儿童
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基于重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12a的沙门氏菌可视化检测方法的建立 被引量：1
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作者 黄建飞 陈晶 +3 位作者 张倩 肖承荣 吴燕蕙 赖心田 《食品安全质量检测学报》 2025年第8期122-130,共9页
目的建立基于重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12a的沙门氏菌可视化检测方法。方法本研究将重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术与成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a(clustered regularly interspaced... 目的建立基于重组酶聚合酶扩增-CRISPR/Cas12a的沙门氏菌可视化检测方法。方法本研究将重组酶聚合酶扩增(recombinase polymerase amplification,RPA)技术与成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a(clustered regularly interspaced short palindromic repeats/associated protein 12a,CRISPR/Cas12a)系统相结合,以沙门氏菌invA作为目标基因,设计并合成RPA引物和CRISPR引导RNA(CRISPR-derived RNA,crRNA),通过荧光法和试纸条两种方法读取结果。对优化的RPA-CRISPR/Cas12检测体系进行特异性和灵敏度实验,并应用于食品样本检测。结果本研究成功研制纳米金核酸试纸条,建立的RPA-CRISPR/Cas12a体系可在1.5 h内特异性完成沙门氏菌的检测,灵敏度为80 CFU/mL。利用此方法对21个食品样本进行检测,荧光法、试纸条法与国家标准法检测结果完全一致,沙门氏菌检出率为4.8%。结论本研究建立的沙门氏菌RPA-CRISPR/Cas12a可视化检测方法具有高特异性和灵敏度,在沙门氏菌的现场快速检测方面具有应用价值。 展开更多
关键词 沙门氏菌 成簇规律间隔短回文重复序列及其相关蛋白12a 试纸条 重组酶聚合酶扩增 可视化检测
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ATG12在疾病发生发展中的作用
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作者 刘伟 田瑞 +1 位作者 周策凡 唐景峰 《生物化学与生物物理进展》 北大核心 2025年第5期1081-1098,共18页
自噬是一种真核细胞中保守的、依赖于液泡或溶酶体的物质降解途径,其调控异常与多种疾病密切相关。自噬相关蛋白12(ATG12)是一种泛素样(ubiquitin-like,UBL)蛋白,在自噬、细胞稳态及免疫调节中发挥着重要作用。ATG12能够通过泛素级联反... 自噬是一种真核细胞中保守的、依赖于液泡或溶酶体的物质降解途径,其调控异常与多种疾病密切相关。自噬相关蛋白12(ATG12)是一种泛素样(ubiquitin-like,UBL)蛋白,在自噬、细胞稳态及免疫调节中发挥着重要作用。ATG12能够通过泛素级联反应与ATG5结合,从而调控自噬的发生。此外,ATG12还促进线粒体途径的凋亡,并维持线粒体的稳态。它还可以调节核因子κB(NF-κB)信号通路和干扰素信号通路,从而影响宿主对病毒感染的抵抗能力。值得注意的是,ATG12的缺失会改变细胞内的能量代谢状态。研究表明,ATG12的表达与肿瘤细胞的增殖、转移及化疗耐药性密切相关,并在乳腺癌、肝癌、胃癌等多种肿瘤中表现出异常高表达,因此成为潜在的诊疗靶点。此外,ATG12基因的多态性与头颈鳞癌、肝细胞癌等疾病的遗传易感性显著相关,为精准医学提供了新视角。本文综述了ATG12的结构与功能、在自噬启动中的角色、所调控的生理功能以及与疾病发生发展的关联,同时探讨了未来的研究方向和可能面临的挑战,强调了ATG12作为自噬相关疾病的重要生物标志物和治疗靶点的潜力。 展开更多
关键词 自噬相关蛋白12 肿瘤 自噬 凋亡 抗病毒反应
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国际K-12人工智能教育实证研究现状与启示——一项系统性文献综述 被引量：1
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作者 王文岚 蓝可 《广东第二师范学院学报》 2025年第1期66-87,共22页
随着智能时代到来,人工智能教育逐渐从高等教育扩展至K-12阶段,并成为研究焦点。为了解国际K-12人工智能教育研究现状,运用系统性文献综述法,对WebofScience、ScienceDirect、Wiley和ERIC等数据库中发表于2020—2024年的实证研究文献进... 随着智能时代到来,人工智能教育逐渐从高等教育扩展至K-12阶段,并成为研究焦点。为了解国际K-12人工智能教育研究现状,运用系统性文献综述法,对WebofScience、ScienceDirect、Wiley和ERIC等数据库中发表于2020—2024年的实证研究文献进行梳理和总结。结果表明,该领域文献数量逐年上升,亚洲地区发文量领先;研究主要集中于中小学阶段,对学前阶段关注度较低;研究方法主要采用实验设计和混合方法,新兴研究方法应用有限;研究主题聚焦于“人工智能课程开发”“学生学习动态”“教师专业发展”三个方面,其中“人工智能课程开发”主题涵盖“整合形式”“内容模块”“教学方法”“教学工具”及“学习成果评估”五个二级指标。基于文献综述结果,建议未来研究加快探索学前阶段人工智能教育;推动情境化人工智能课程开发;整合正式课程与非正式学习;合理延长课程周期;鼓励使用设计导向学习方法和真实数据;构建标准化学习成果评估。 展开更多
关键词 人工智能 人工智能教育 系统性文献综述 K-12
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地黄益智方保护H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞损伤的作用机制
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作者 张彤 安红梅 张立敏 《中医药学报》 CAS 2025年第1期20-28,共9页
目的:研究地黄益智方对阿尔茨海默病(AD)中H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用,并通过蛋白质组学探讨其对PC12细胞的潜在保护机制。方法:不同浓度的地黄益智方预处理PC12细胞,然后用H_(2)O_(2)诱导氧化应激损伤。试剂盒检测丙... 目的:研究地黄益智方对阿尔茨海默病(AD)中H_(2)O_(2)诱导的PC12细胞氧化损伤的保护作用,并通过蛋白质组学探讨其对PC12细胞的潜在保护机制。方法:不同浓度的地黄益智方预处理PC12细胞,然后用H_(2)O_(2)诱导氧化应激损伤。试剂盒检测丙二醛(MDA)、8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量,以及超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽还原酶(GR)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性。100 mg/mL的地黄益智方处理H_(2)O_(2)损伤的PC12细胞,质谱分析筛选差异表达蛋白,并对其进行GO富集分析、KEGG富集分析和蛋白互作网络分析。结果:地黄益智方预处理PC12细胞可改善H_(2)O_(2)损伤诱导的SOD、GSH-Px、GR抗氧化酶活性和细胞内GSH的水平降低(P<0.05,P<0.01);降低MDA、8-OHdG含量及细胞凋亡(P<0.05,P<0.01)。地黄益智方作用后,H_(2)O_(2)损伤的PC12细胞有58个差异蛋白表达。相较于模型组,地黄益智方组中有18个蛋白表达发生上调,40个蛋白表达发生下调。差异蛋白涉及调节氧化应激反应、调节蛋白质磷酸化和调节肽反应等生物过程及调控细胞铁死亡通路、线粒体自噬通路等信号通路的表达。地黄益智方可通过调节GPX4、GPX1、Jun等蛋白改善氧化应激诱导的细胞损伤。结论:地黄益智方可以减轻H_(2)O_(2)诱导的氧化应激损伤,筛选出的差异蛋白为探究地黄益智方防治AD的作用机制提供了新的靶点——铁死亡通路。 展开更多
关键词 地黄益智方 阿尔茨海默病 PC12 氧化应激 蛋白质组学
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维生素B_(12)和叶酸治疗巨幼细胞贫血患者的临床疗效 被引量：1
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作者 孙兴卫 《医学临床研究》 2025年第2期255-257,共3页
【目的】探讨维生素B_(12)和叶酸治疗巨幼细胞贫血(MA)患者的临床疗效。【方法】收集50例采用维生素B_(12)和叶酸补充治疗的MA患者的临床资料,分析患者的临床表现,血液学指标的变化和治疗效果。【结果】治疗后,患者的平均红细胞体积(MCV... 【目的】探讨维生素B_(12)和叶酸治疗巨幼细胞贫血(MA)患者的临床疗效。【方法】收集50例采用维生素B_(12)和叶酸补充治疗的MA患者的临床资料,分析患者的临床表现,血液学指标的变化和治疗效果。【结果】治疗后,患者的平均红细胞体积(MCV)较治疗前降低,血红蛋白(Hb)、维生素B_(12)、叶酸水平较治疗前升高,且差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗后,乏力、面色苍白、食欲不振、体重下降、有神经症状的患者的比例较治疗前明显降低,差异有统计学意义(P<0.05)。相关性分析显示,维生素B_(12)与症状改善的关联最为密切,维生素B_(12)、叶酸、Hb水平与乏力、面色苍白、食欲不振、体重下降、神经症状均呈负相关(P<0.05)。MCV与上述症状均呈正相关(P<0.05)。【结论】维生素B_(12)和叶酸的补充治疗可以改善MA患者的血液学指标和临床症状,其中,维生素B_(12)在症状改善中发挥了关键作用,临床在诊治MA时,应重视维生素B_(12)水平的检测和补充。 展开更多
关键词 贫血 巨幼细胞性 维生素B_(12) 叶酸 治疗结果
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血根碱调节CXCL12/CXCR4信号通路对带状疱疹后遗神经痛大鼠的治疗作用及机制研究
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作者 田佳玉 冯丹 +3 位作者 胡焓 张书力 童胜雄 李少军 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第1期57-62,共6页
目的:探讨血根碱调节C-X-C趋化因子配体12(CXCL12)/C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)信号通路对带状疱疹后遗神经痛(PHN)大鼠的治疗作用及机制。方法:SD大鼠随机分为对照组、模型组、血根碱低剂量(50 mg/kg)组、血根碱高剂量(100 mg/kg)组、NU... 目的:探讨血根碱调节C-X-C趋化因子配体12(CXCL12)/C-X-C趋化因子受体4(CXCR4)信号通路对带状疱疹后遗神经痛(PHN)大鼠的治疗作用及机制。方法:SD大鼠随机分为对照组、模型组、血根碱低剂量(50 mg/kg)组、血根碱高剂量(100 mg/kg)组、NUCC-390(CXCL12/CXCR4信号激活剂,2.2 mg/kg)组、血根碱高剂量(100 mg/kg)+NUCC-390(2.2 mg/kg)组,每组10只,模型组和药物处理组大鼠腹腔注射树脂毒素(RTX)建立PHN模型,对照组大鼠腹腔注射等量含10%Tween 80和10%乙醇的生理盐水,血根碱和NUCC-390处理后,检测大鼠长时程自发痛、机械性痛觉过敏及热痛觉过敏症状,比较自发缩足反射次数、机械刺激缩足反射阈值(PWMT)、热刺激反应潜伏期(PWTL);TUNEL染色检测脊髓神经细胞凋亡;ELISA检测大鼠脊髓组织及血清炎症因子TNF-α、IL-1β、环氧化酶-2(COX-2)水平;免疫印迹法检测各组大鼠脊髓组织CXCL12/CXCR4通路相关蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组大鼠PWMT显著降低(P<0.05),自发缩足反射次数、PWTL、脊髓神经细胞凋亡指数、脊髓组织及血清TNF-α、IL-1β、COX-2水平、脊髓组织CXCL12、CXCR4蛋白表达显著升高(P<0.05)。与模型组比较,血根碱低、高剂量组大鼠PWMT均升高(P<0.05),自发缩足反射次数、PWTL、脊髓神经细胞凋亡指数、脊髓组织及血清TNF-α、IL-1β、COX-2水平、脊髓组织CXCL12、CXCR4蛋白表达均降低(P<0.05);NUCC-390组大鼠PWMT降低(P<0.05),自发缩足反射次数、PWTL、脊髓神经细胞凋亡指数、脊髓组织及血清TNF-α、IL-1β、COX-2水平、脊髓组织CXCL12、CXCR4蛋白表达升高(P<0.05)。与血根碱高剂量组比较,血根碱高剂量+NUCC-390组大鼠PWMT降低(P<0.05),自发缩足反射次数、PWTL、脊髓神经细胞凋亡指数、脊髓组织及血清TNF-α、IL-1β、COX-2水平、脊髓组织CXCL12、CXCR4蛋白表达升高(P<0.05)。结论:血根碱可通过下调CXCL12/CXCR4信号通路降低炎症因子表达,进而阻止PHN大鼠炎症反应发生,抑制脊髓神经细胞凋亡,减轻大鼠长时程自发痛、机械性痛觉超敏反应和热痛觉减退症状。 展开更多
关键词 血根碱 CXCL12/CXCR4 带状疱疹后遗神经痛 治疗作用 机制
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入ICU 12h内相关指标构建危重症患者预后预测模型
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作者 李淑娴 翁慧纯 洪春燕 《医学理论与实践》 2025年第1期34-37,共4页
目的:探讨危重症患者28d死亡的影响因子,以入ICU 12h内指标构建危重症患者预后预测模型。方法:回顾性分析2021年1月—2022年6月我院ICU接收的危重症患者资料,经多因素二元logistic回归模型筛选影响因子,构建预测模型,并采用Nomogram模... 目的:探讨危重症患者28d死亡的影响因子,以入ICU 12h内指标构建危重症患者预后预测模型。方法:回顾性分析2021年1月—2022年6月我院ICU接收的危重症患者资料,经多因素二元logistic回归模型筛选影响因子,构建预测模型,并采用Nomogram模型展示影响因子对预后影响可视化。结果:共纳入259例危重症患者,入ICU 28d存活180例,死亡79例。多因素logistic回归分析显示年龄(OR=1.021,95%CI:1.002~1.040)、收缩压(OR=0.990,95%CI:0.981~0.999)、血清肌酐(OR=1.142,95%CI:1.018~1.281)、氧合指数(OR=0.998,95%CI:0.996~1.000)、格拉斯哥昏迷评分(OR=0.992,95%CI:0.868~0.981)是危重症患者28d死亡的影响因子(P<0.05);建立危重症患者28d死亡的预测模型为P=1/(1^(+)e^(-z)),Z=0.021×年龄-0.010×SBP^(+)0.133×SCr-0.002×OI-0.081×GCS,该模型对危重症患者预后预测AUC为0.752(95%CI:0.685~0.819,P<0.001),敏感度为0.658,特异度为0.767。结论:入ICU 12h内的年龄、收缩压、血清肌酐、氧合指数、格拉斯哥昏迷评分是本组危重症患者28d死亡的影响因子,依托入ICU 12h内建立的预测模型在早期预测危重症患者有良好的价值。 展开更多
关键词 危重症患者 重症监护室 12h内相关指标 预测模型
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基于RPA-CRISPR/Cas12a的沙氏弧菌可视化检测方法的建立
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作者 葛辉 巫旗生 +8 位作者 宁岳 冯君雅 陈昊翔 李慧耀 叶军 吴丽云 温凭 徐春燕 任磊 《水产学报》 北大核心 2025年第11期203-215,共13页
【目的】建立基于RPA-CRISPR/Cas12a的沙氏弧菌实时荧光检测法和试纸条检测法,满足牡蛎新发病原沙氏弧菌的快速检测需求。【方法】实验针对沙氏弧菌toxR基因设计特异性片段,优选RPA引物和crRNA序列,确保基因标志物的准确扩增与识别;当CR... 【目的】建立基于RPA-CRISPR/Cas12a的沙氏弧菌实时荧光检测法和试纸条检测法,满足牡蛎新发病原沙氏弧菌的快速检测需求。【方法】实验针对沙氏弧菌toxR基因设计特异性片段,优选RPA引物和crRNA序列,确保基因标志物的准确扩增与识别;当CRISPR/Cas12a系统识别到RPA扩增的病原靶标基因并激活其反式切割活性后,生物素修饰的单链DNA荧光探针作为报告分子被切割,分别依据蓝光下的荧光强度和试纸条的显色情况判定检测结果;实验采用多种弧菌验证检测方法的特异性,并通过不同浓度沙氏弧菌菌液评估2种检测方法的灵敏度;最终将2种检测方法与PCR方法进行真实样本检测对比。【结果】本研究成功建立了RPA-CRISPR/Cas12a荧光检测法和试纸检测法,且均表现出优异的特异性,可准确识别沙氏弧菌,整个检测流程可在1 h内完成;2种方法的检测限均达到100 CFU/mL,检测结果与PCR高度一致(符合率100%)。【结论】本研究开发的基于RPA-CRISPR/Cas12a的荧光检测法和试纸检测法,突破了传统方法的局限,显著缩短检测时间,且无需复杂仪器,操作简便,为沙氏弧菌的现场快速检测提供了可靠的技术支持。本研究为沙氏弧菌的快速检测提供了高效、便捷的新方法,对水产养殖病害防控和食品安全保障具有重要意义。 展开更多
关键词 沙氏弧菌 重组酶聚合酶扩增(RPA) CRISPR/Cas12a 荧光检测 试纸检测
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血清CTRP5、Ficolin-3、CXCL12联合预测2型糖尿病微血管病变的价值
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作者 白杨 平忠孝 +2 位作者 樊姨君 李季萌 刘惠双 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期720-725,共6页
目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清肿瘤坏死因子相关蛋白5(CTRP5)、纤维凝胶蛋白-3(Ficolin-3)及CXC趋化因子配体12(CXCL12)与微血管病变的关系。方法选取2023年1月~2024年6月郑州市第七人民医院收治的75例T2DM微血管病变患者作为观察组... 目的探讨2型糖尿病(T2DM)患者血清肿瘤坏死因子相关蛋白5(CTRP5)、纤维凝胶蛋白-3(Ficolin-3)及CXC趋化因子配体12(CXCL12)与微血管病变的关系。方法选取2023年1月~2024年6月郑州市第七人民医院收治的75例T2DM微血管病变患者作为观察组,按照年龄、性别、体质量指数(BMI)1∶2匹配的原则,同期纳入150例单纯T2DM患者作为对照组。由医院医护人员统计两组一般资料、血糖指标、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)及血清CTRP5、Ficolin-3、CXCL12含量,采用Logistic回归分析T2DM微血管病变发病的影响因素,采用平滑曲线拟合法分析血清CTRP5、Ficolin-3、CXCL12含量与T2DM微血管病变的关系,绘制受试者工作特征曲线(ROC)分析血清CTRP5、Ficolin-3、CXCL12预测T2DM微血管病变的价值。结果两组性别、年龄、BMI、T2DM病程、腹围、DBP、SBP、TC、HDL-C、TG、LDL-C、吸烟史、饮酒史比较差异无统计学意义(均P>0.05);与对照组比较,观察组FPG、2hPG、HbA1c、HOMA-IR较高,差异有统计学意义(均P<0.01);与对照组比较,观察组血清CTRP5、Ficolin-3、CXCL12含量较高,差异有统计学意义(均P<0.01);经Logistic回归分析,结果显示FPG、2hPG、HbA1c、HOMA-IR、CTRP5、Ficolin-3、CXCL12均是T2DM微血管病变发生的影响因素(均P<0.01);校正FPG、2hPG、HbA1c、HOMA-IR等混杂因素后,采用曲线拟合分析血清Ficolin-3、CTRP5、CXCL12与T2DM微血管病变的关系,结果显示血清Ficolin-3、CTRP5、CXCL12与T2DM微血管病变呈线性正相关,随着其水平升高,T2DM发生微血管病变风险增加;ROC曲线显示,血清Ficolin-3、CTRP5、CXCL12水平预测T2DM微血管病变的AUC分别为0.756、0.761、0.791,三者联合预测AUC为0.931,敏感度及特异度分别为90.67%、80.00%。经Delong检验可知,联合预测AUC高于单一预测价值,差异有统计学意义(Z=32.123,P<0.01)。结论血清CTRP5、Ficolin-3、CXCL12水平变化与T2DM患者微血管病变密切相关,其可为临床早期预测T2DM患者微血管病变、制定相应干预方案提供参考依据。 展开更多
关键词 2型糖尿病 肿瘤坏死因子相关蛋白5 纤维凝胶蛋白-3 CXC趋化因子配体12 微血管病变
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