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聚合稻瘟病抗性基因Pigm-1和Pid2的水稻三系不育系福梦A的选育与利用
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作者 程朝平 何旎清 +6 位作者 白康呈 林少俊 黄凤凰 刘军化 程祖锌 黄成志 杨德卫 《中国水稻科学》 北大核心 2026年第1期72-84,共13页
【目的】水稻稻瘟病是水稻生产上最主要的病害之一,对全球水稻生产构成严重威胁。大规模和长期种植具有单一抗性基因的水稻品种通常会导致抗性的丧失。通过分子标记辅助选择技术,选育抗病品种是防治稻瘟病最有效的方法之一。【方法】首... 【目的】水稻稻瘟病是水稻生产上最主要的病害之一,对全球水稻生产构成严重威胁。大规模和长期种植具有单一抗性基因的水稻品种通常会导致抗性的丧失。通过分子标记辅助选择技术,选育抗病品种是防治稻瘟病最有效的方法之一。【方法】首先,以泰丰B为受体,分别以携带Pigm-1的双抗77009和携带Pid2的地谷B为供体,通过杂交、回交和复交的方法,并借助于分子标记辅助育种技术,对各世代单株基因型进行分析与鉴定。其次,利用不同来源的12个稻瘟病菌和田间自然鉴定的方法对选育的福梦A及组合进行抗性鉴定。最后,通过田间种植与调查,对不育系福梦A的育性、主要农艺性状以及配合力与杂种优势进行系统的分析,并对其抑制恢复系感光的特性进行了分析。【结果】培育一个同时含有稻瘟病抗性基因Pigm-1和Pid2新的三系不育系福梦A,室内与田间接菌显示该不育系抗稻瘟病;育性鉴定结果显示福梦A不育株率和不育度均为100%,柱头外露率达57.39%;遗传背景与农艺性状分析显示福梦A遗传了轮回亲本的主要农艺性状,具有更好的丰产性;杂种优势分析显示,福梦A配制组合其产量有一半高于对照天优华占,具有较好的生产应用潜力。【结论】通过分子标记辅助育种技术,育成1个高抗稻瘟病、不育性稳定、柱头外露率高、农艺性状和产量性状优良的新三系不育系福梦A(B),实现了不育系稻瘟病抗性的定向改良,为三系杂交水稻育种应用创制了新的亲本材料。 展开更多
关键词 水稻 抗稻瘟病 Pigm-1 三系不育系 聚合育种 抑制感光
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烤烟品种渠首1号TMV抗性改良株系TMV-3的创制
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作者 李雪君 李建华 +5 位作者 郭敬 王亚乐 孙计平 孙焕 平文丽 李丽华 《浙江农业科学》 2026年第2期361-368,共8页
为定向提高烤烟品种渠首1号对烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)的抗性,以渠首1号为改良材料,以TMV免疫品种Va770为供体亲本,通过杂交、回交,利用分子标记结合表型筛选得到TMV免疫的纯合株系TMV-3。大田鉴定结果表明TMV-3农艺性... 为定向提高烤烟品种渠首1号对烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)的抗性,以渠首1号为改良材料,以TMV免疫品种Va770为供体亲本,通过杂交、回交,利用分子标记结合表型筛选得到TMV免疫的纯合株系TMV-3。大田鉴定结果表明TMV-3农艺性状与渠首1号基本保持一致;接种鉴定结果表明TMV-3对TMV的抗性表现为免疫,TMV接种后的活性氧积累量少于渠首1号,叶片中的TMV正调控基因NtRAR1、NtNTF4、NtPR1 a、NtHAK1、NtSGT1的相对表达量均高于渠首1号,负调控基因TMV-CP相对表达量低于渠首1号,黑胫病抗性有所下降。本研究表明,渠首1号定向改良品系TMV-3对TMV免疫,其他性状与渠首1号基本保持一致,为渠首1号病毒病抗性的定向改良提供了材料基础。 展开更多
关键词 烤烟 烟草花叶病毒(TMV) 渠首1 TMV-3株系
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甘蔗斑茅属间远缘杂交BC_(3)F_(1)品系抗倒伏性评价
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作者 梁华川 周家立 +2 位作者 蔡伟俊 李鸿博 沈万宽 《中国糖料》 2026年第1期1-15,共15页
【目的】对培育的甘蔗斑茅属间远缘杂交BC_(3)F_(1)品系进行抗倒伏性能评价。【方法】本文基于茎秆/叶梢重量比、下径/上径比、中部径/上径比、茎秆弯折性能、茎秆抗压强度和茎秆组织结构强度6个参数,结合数学模型综合评价华南农业大学... 【目的】对培育的甘蔗斑茅属间远缘杂交BC_(3)F_(1)品系进行抗倒伏性能评价。【方法】本文基于茎秆/叶梢重量比、下径/上径比、中部径/上径比、茎秆弯折性能、茎秆抗压强度和茎秆组织结构强度6个参数,结合数学模型综合评价华南农业大学培育的14个甘蔗斑茅属间远缘杂交BC_(3)F_(1)品系抗倒伏性能。【结果】评价结果表明,新植试验中‘HE15-40’‘HE15-81’‘HE15-30’‘HE15-77’‘HE15-61’‘HE15-63’‘HE15-19’为抗倒伏品系,占50.0%,而‘HE15-87’为弱抗倒伏性品系;宿根试验中‘HE15-63’‘HE15-77’‘HE15-61’‘HE15-19’‘HE15-31’为强抗倒伏品系,占35.7%,而‘HE15-84’为弱抗倒伏品系。【结论】在新植与宿根种植的综合评价下,14个参试BC_(3)F_(1)品系中‘HE15-77’‘HE15-61’‘HE15-63’‘HE15-19’的抗倒伏性较强。本研究为甘蔗抗倒伏品种改良提供了种质和评价技术。 展开更多
关键词 甘蔗 斑茅 属间远缘杂交 BC_(3)F_(1)品系 抗倒伏
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基于1∶10000 DLG的遥感地形影像局部变形纠正方法
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作者 王昭懿 《经纬天地》 2026年第1期23-27,共5页
针对遥感地形影像在采集和传输过程中易出现的局部变形问题,为提高影像精度,开展基于1∶10000数字线划图(DLG)的遥感地形影像局部变形纠正方法研究。通过融合1∶10000 DLG的高精度地理信息与遥感影像的空间特征,对遥感地形影像精度检测... 针对遥感地形影像在采集和传输过程中易出现的局部变形问题,为提高影像精度,开展基于1∶10000数字线划图(DLG)的遥感地形影像局部变形纠正方法研究。通过融合1∶10000 DLG的高精度地理信息与遥感影像的空间特征,对遥感地形影像精度检测。基于检测结果,识别并纠正遥感影像中的局部几何变形,同时保持影像的整体结构和细节信息。为了验证方法的有效性,进行了对比试验。试验结果表明:相较于现有纠正方法,新的方法在纠正遥感地形影像的局部变形方面具有更高的精度和鲁棒性。这一研究成果不仅为遥感地形影像的后续处理和应用提供了有力支持,也为进一步探索更高效、更准确的影像纠正方法奠定了坚实基础。 展开更多
关键词 110000 DLG 遥感地形影像 变形纠正
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程序性死亡蛋白1单克隆抗体联合安罗替尼及化疗作为晚期胰腺癌一线治疗的临床疗效观察
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作者 纪雅玲 韩尚 +2 位作者 王浩 陶云霞 汪海岩 《安徽医药》 2026年第2期404-409,共6页
目的 评估程序性死亡蛋白1(PD-1)单克隆抗体联合安罗替尼及化疗作为晚期胰腺癌一线治疗的临床疗效和安全性分析。方法 回顾性收集2021年5月至2023年5月徐州医科大学附属医院收治的PD-1单克隆抗体联合安罗替尼及化疗一线治疗晚期胰腺癌病... 目的 评估程序性死亡蛋白1(PD-1)单克隆抗体联合安罗替尼及化疗作为晚期胰腺癌一线治疗的临床疗效和安全性分析。方法 回顾性收集2021年5月至2023年5月徐州医科大学附属医院收治的PD-1单克隆抗体联合安罗替尼及化疗一线治疗晚期胰腺癌病人41例作为观察组,分析病人的近期、远期疗效及不良反应,利用Cox比例风险模型进行亚组分析,寻找免疫联合靶向及化疗治疗的优势人群。利用倾向评分配比法筛选同期一线接受单纯化疗的晚期胰腺癌病人41例作为对照组,比较两组在近期及远期疗效方面的差异。结果 观察组疾病控制率(82.9%比56.1%)高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。观察组中位无进展生存期(6.8个月比5.1个月,P=0.005)及中位总生存期(13.0个月比8.4个月,P=0.009)均优于对照组。亚组分析显示,东部肿瘤协作组体能状态评分为0~1分及单发转移病人更能从免疫联合靶向治疗中获益。安全性方面,观察组常见的不良反应为大多为1~2级,3~4级不良反应主要是血液学毒性和肝功能异常。无致死性不良事件。结论 PD-1单克隆抗体联合安罗替尼及化疗一线治疗晚期胰腺癌病人具有良好的疗效和安全性。 展开更多
关键词 胰腺肿瘤 程序性死亡蛋白1 单克隆抗体 安罗替尼 一线治疗
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Approximation Algorithms for Solving the 1-Line Minimum Steiner Tree of Line Segments Problem
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作者 Jian-Ping Li Su-Ding Liu +2 位作者 Jun-Ran Lichen Peng-Xiang Pan Wen-Cheng Wang 《Journal of the Operations Research Society of China》 EI CSCD 2024年第3期729-755,共27页
We address the 1-line minimum Steiner tree of line segments(1L-MStT-LS)problem.Specifically,given a set S of n disjoint line segments in R^(2),we are asked to find the location of a line l and a set E_(l) of necessary... We address the 1-line minimum Steiner tree of line segments(1L-MStT-LS)problem.Specifically,given a set S of n disjoint line segments in R^(2),we are asked to find the location of a line l and a set E_(l) of necessary line segments(i.e.,edges)such that a graph consisting of all line segments in S ∪ E_(l) plus this line l,denoted by T_(l)=(S,l,E_(l)),becomes a Steiner tree,the objective is to minimize total length of edges in E_(l) among all such Steiner trees.Similarly,we are asked to find a set E_(0) of necessary edges such that a graph consisting of all line segments in S ∪ E_(0),denoted by T_(S)=(S,E_(0)),becomes a Steiner tree,the objective is to minimize total length of edges in E_(0) among all such Steiner trees,we refer to this new problem as the minimum Steiner tree of line segments(MStT-LS)problem.In addition,when two endpoints of each edge in Eo need to be located on two different line segments in S,respectively,we refer to that problem as the minimum spanning tree of line segments(MST-LS)problem.We obtain three main results:(1)Using technique of Voronoi diagram of line segments,we design an exact algorithm in time O(n log n)to solve the MST-LS problem;(2)we show that the algorithm designed in(1)is a 1.214-approximation algorithm to solve the MStT-LS problem;(3)using the combination of the algorithm designed in(1)as a subroutine for many times,a technique of finding linear facility location and a key lemma proved by techniques of computational geometry,we present a 1.214-approximation algorithm in time O(n^(3) log n)to solve the 1L-MStT-LS problem. 展开更多
关键词 1-line minimum Steiner tree of line segments Minimum spanning tree of line segments Voronoi diagram of line segments Steiner ratio Approximation algorithms
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基于CRISPR/Cas9基因编辑系统建立WIP 1基因g.37536832 C>A位点突变的ST细胞系
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作者 王楠 杜伟伟 +7 位作者 王婉洁 王悦 袁茂莎 聂雨欣 孙亚茹 刘志国 吴添文 牟玉莲 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第5期1966-1976,共11页
【目的】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得野生型p53诱导磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase 1,WIP1)基因与精子活力显著相关的位点g.37536832 C>A突变的猪睾丸(swine testis,ST)细胞系,为在细胞层面上进一步探讨WIP 1基因... 【目的】利用CRISPR/Cas9基因编辑技术获得野生型p53诱导磷酸酶1(wild-type p53-induced phosphatase 1,WIP1)基因与精子活力显著相关的位点g.37536832 C>A突变的猪睾丸(swine testis,ST)细胞系,为在细胞层面上进一步探讨WIP 1基因与公猪精液品质性状之间的关系奠定基础。【方法】利用CRISPOR在线网站在猪WIP 1基因g.37536832 C>A位点附近区域设计3条向导RNA(single guide RNA,sgRNA),并将其连接至pX458-GFP载体;通过T7E1酶切试验检测3条sgRNA活性,选择效率较高的sgRNA。构建Donor载体,并将其与sgRNA载体共同转染至ST细胞,采用流式细胞术将表达绿色荧光蛋白(green fluorescent protein,GFP)的阳性细胞进行富集和单克隆细胞筛选,并对筛选出的单克隆细胞进行基因型鉴定。【结果】质粒测序结果表明,成功将3条sgRNA连接至pX458-GFP载体上;T7E1酶切结果显示,转染pX458-GFP-sgRNA1和pX458-GFP-sgRNA2质粒组产生了切割,效率分别为24%和27%,而转染pX458-GFP-sgRNA3质粒组未检测到切割,因此选择pX458-GFP-sgRNA2质粒进行试验。成功构建Donor载体,并将pX458-GFP-sgRNA2和Donor载体共转染至ST细胞。基因型鉴定结果显示,获得的269株单克隆中有205株细胞发生了基因编辑,基因编辑效率为76%,其中9株为WIP 1基因g.37536832 C>A位点纯合突变的ST细胞,精确突变效率为3%。【结论】本研究利用CRISPR/Cas9基因编辑技术成功获得了WIP 1基因g.37536832 C>A位点突变的ST细胞系,为深入研究WIP 1基因对公猪精液品质的影响提供了良好的细胞模型。 展开更多
关键词 CRISPR/Cas9 WIP 1基因 ST细胞系
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3-MA及OPTN对稳转SOD1-G93A突变蛋白NCS-34细胞系中自噬通路蛋白的作用
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作者 温迪 王娟 +2 位作者 李媛媛 王燕燕 刘亚坤 《脑与神经疾病杂志》 2025年第4期235-239,共5页
目的探索以自噬通路抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)及慢病毒(LV)为载体介导的视神经病变诱导反应蛋白(LV-OPTN)对稳转超氧化物歧化酶1(SOD1-G93A)突变蛋白的NCS-34细胞系自噬通路蛋白OPTN、p62、微管相关蛋白ⅠA/ⅠB轻链3(LC3)、TANK结合激酶... 目的探索以自噬通路抑制剂3-甲基腺嘌呤(3-MA)及慢病毒(LV)为载体介导的视神经病变诱导反应蛋白(LV-OPTN)对稳转超氧化物歧化酶1(SOD1-G93A)突变蛋白的NCS-34细胞系自噬通路蛋白OPTN、p62、微管相关蛋白ⅠA/ⅠB轻链3(LC3)、TANK结合激酶1(TBK1)的变化。方法采用稳转SOD1-G93A突变蛋白的NCS-34细胞系,并分为3组:无干预对照组、3-MA处理组(自噬通路抑制剂)、3-MA处理后给予LV-OPTN组,同时对3组细胞分别进行免疫荧光染色,特异性标记自噬通路蛋白p62、LC3、TBK1及OPTN,统计分析各蛋白的荧光含量。结果与对照组相比,3-MA组细胞中自噬相关蛋白的荧光强度p62增多,而LC3、TBK1及OPTN均减少,与对照组相比差异有统计学意义(^(均)P<0.05);对于3-MA预处理后再给予LV-OPTN组,我们观察到自噬通路相关蛋白的荧光表达有一定程度的恢复,即p62减少,而LC3、TBK1及OPTN均增加,与3-MA组相比差异均有统计学意义(^(均)P<0.05)。结论3-MA抑制稳转SOD1-G93A突变蛋白的NCS-34细胞系中自噬蛋白的活性,而LV-OPTN重新激活自噬,逆转了3-MA诱导的自噬通路的抑制作用。 展开更多
关键词 肌萎缩侧索硬化 超氧化物歧化酶1 神经元细胞系 3-甲基腺嘌呤 视神经病变诱导反应蛋白 自噬通路
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Drug resistance mutation profiles of the drug-nave and first-line regimen-treated HIV-1-infected population of Suzhou, China 被引量:3
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作者 Tingting Li Feng Qian +20 位作者 Ting Yuan Weilu Xu Li Zhu Jinlong Huang Haiyan Wang Yueping Zhu Yinling Wang Xiaohong Li Saihong Gu Zhuqing Tan Hui Chen Xiangrong Luo Wei Zhu Weniuan Lu Ping Xu Ming Li Yuying Chen Yong Gao Rongge Yang Chuanwu Zhu Binlian Sun 《Virologica Sinica》 SCIE CAS CSCD 2017年第4期271-279,共9页
Little is known about the prevalence of drug-resistant mutations in HIV-1-positive individuals in Suzhou, China. To elucidate the transmitted drug resistance(TDR) and acquired drug resistance mutation(ADR) profiles, w... Little is known about the prevalence of drug-resistant mutations in HIV-1-positive individuals in Suzhou, China. To elucidate the transmitted drug resistance(TDR) and acquired drug resistance mutation(ADR) profiles, we collected blood specimens from 127 drug-naive and 117 first-line drugtreated HIV-1-infected individuals sampled from 2014 to 2016 in Suzhou. We successfully amplified po/fragments from 100 drug-naive and 20 drug-treated samples. We then determined the drugresistant mutations to protease(PR) and reverse-transcriptase(RT) inhibitors according to the Stanford drug resistance database. Overall, 11 and 13 individuals had transmitted(drug-naive group) and acquired(treated group) resistance mutations, respectively. Six transmitted drugresistant mutations were found, including two mutations(L33F and L76V) in the protease region and four(K70N/E and V179D/E) in the RT region. Only L76 V was a major mutation, and K70N/E and V179D/E are known to cause low-level resistance to RT inhibitors. All 13 treated participants who had major drug resistance mutations demonstrated intermediate to high resistance to efavirenz and nevirapine, and six had a treatment duration of less than three months. No major mutations to RT inhibitors were found, implying that the epidemic of transmitted resistance mutations was not significant in this area. Our results suggest that more frequent virus load and drug resistance mutation tests should be conducted for individuals receiving antiretroviral treatment, especially for newly treated patients. Our research provides insights into the occurrence of HIV-1 drug resistance in Suzhou and will help to optimize the treatment strategy for this population. 展开更多
关键词 HIV-1 DRUG resistance MUTATION FIRST-line REGIMEN China
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鸡MMP7稳定过表达DF-1细胞系的构建与鉴定
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作者 邓梦玲 隋敏敏 +3 位作者 宋海洋 杨建发 邹丰才 贺君君 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第12期6442-6449,共8页
旨在构建稳定过表达鸡mmp7基因的DF-1细胞系,为细胞水平研究mmp7基因在相关疾病中的功能奠定基础。合成鸡mmp7基因序列,构建重组慢病毒质粒pLVX-MMP7-IRES-puro,利用三质粒慢病毒包装系统,将pLVX-MMP7-puro与辅助质粒pCMV-VSV-G、psPAX... 旨在构建稳定过表达鸡mmp7基因的DF-1细胞系,为细胞水平研究mmp7基因在相关疾病中的功能奠定基础。合成鸡mmp7基因序列,构建重组慢病毒质粒pLVX-MMP7-IRES-puro,利用三质粒慢病毒包装系统,将pLVX-MMP7-puro与辅助质粒pCMV-VSV-G、psPAX2共转染至对数生长期的293T细胞,获得携带mmp7基因序列的重组慢病毒,重组慢病毒感染DF-1细胞72 h后,使用含1.5μg·mL^(-1)嘌呤霉素的筛选,通过PCR验证mmp7基因在DF-1细胞基因组中的整合情况,RT-PCR检测mmp7基因的转录水平,以及Western blot分析MMP7蛋白的表达水平,以鉴定是否成功获得稳定过表达鸡MMP7的DF-1细胞系,并使用CCK-8试验评估过表达MMP7对DF-1细胞增殖的影响。本研究成功构建了稳定过表达鸡MMP7的DF-1细胞系,过表达MMP7在24~48 h对细胞活力无明显影响,但120~144 h后细胞活力显著降低(P<0.05)。该细胞系的构建为后续深入探究MMP7的生物学功能提供了重要工具。 展开更多
关键词 基质金属蛋白酶7 慢病毒 稳定过表达 DF-1细胞系
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Cobalt Determination by Means of Flow Injection On-line Sorbent Preconcentration-Flame Atomic Absorption Spectrometry with 1-Nitroso-2-naphthol as a Complexing Reagent
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作者 YIN Xue-feng ALI Akbar +3 位作者 XU Guang-ming LING Yun-yang GAO Jian YE Mei-ying 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2001年第3期264-270,共7页
The suitability of 1-nitroso-2-naphthol(NN) as a complexing agent for on-line preconcentration of cobalt eluted on the C_(18) microcolumn by means of the FI-FAAS system was tested. Various parameters affecting the com... The suitability of 1-nitroso-2-naphthol(NN) as a complexing agent for on-line preconcentration of cobalt eluted on the C_(18) microcolumn by means of the FI-FAAS system was tested. Various parameters affecting the complex formation and its elution were optimized. A 2.3×10^(-3) mol/L reagent solution and the aqueous sample solution acidified with 0.1% (volume fraction) nitric acid were on-line mixed (6.4 mL/min) on a reaction coil set at (65±1)℃ and flowed through the microcolumn for 30 s. The pH of the mixed solution was adjusted to 3—4 with HNO_3(1 mol/L) or NaOH(1 mol/L). The adsorbed complexes in the microcolumn were eluted into the nebulizer of FAAS in 10 s with ethanol acidified with 1% HNO_3(3.0 mL/min). A good precision(1.6% for 100μg/L Co(Ⅱ), n=10), a high enrichment factor 17.2, with detection limit (3σ) 3.2μg/L, and sample throughput (90 h^(-1)) were obtained. The method was applied to the certified reference materials(CRMs), NBS-362 and NBS-364, for the determination of cobalt and the results were in good agreement with the certified values. 展开更多
关键词 Cobalt FI on-line preconcentration AAS 1-Nitroso-2-naphthol
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基于卫星立体像对的1∶10000 DLG更新常见质量问题及控制措施
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作者 聂庆斌 付明生 +1 位作者 张敏 杨晨 《城市勘测》 2025年第5期219-223,共5页
为提高1∶10 000数字线划图(DLG)更新成果质量,基于项目实践,采用系统分析方法,全面梳理了生产过程中的常见错误类型及其成因。研究发现,主要错误可归纳为六大类:几何拓扑错误、属性与语义错误、综合取舍错误、空间关系与逻辑错误、接... 为提高1∶10 000数字线划图(DLG)更新成果质量,基于项目实践,采用系统分析方法,全面梳理了生产过程中的常见错误类型及其成因。研究发现,主要错误可归纳为六大类:几何拓扑错误、属性与语义错误、综合取舍错误、空间关系与逻辑错误、接边与一致性错误和数据组织错误。其成因在于技术标准执行偏差、专题资料应用不当和影像判读误差。针对这些问题,创新作业流程,构建了“试点验证—专项培训—质检—针对性再培训—闭环整改”的质量控制体系,并优化了数据自动化检查与处理工具,有效提高了成果质量。 展开更多
关键词 110000数字线划图(DLG) DLG更新 错误分类 流程优化 质量控制体系 自动化质检工具
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逆转座子LINE-1对293T细胞增殖及细胞形态的影响
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作者 李丹 刘红梅 张鹏 《中国生物工程杂志》 北大核心 2025年第7期1-10,共10页
目的:探索逆转座子LINE-1(long interspersed nuclear elements-1)编码的ORF-1p在维持293T细胞增殖和形态中的作用。方法:利用核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)技术,构建LINE-1 ORF-1p表达量下调的293T细胞系,通过qPCR(quantitative... 目的:探索逆转座子LINE-1(long interspersed nuclear elements-1)编码的ORF-1p在维持293T细胞增殖和形态中的作用。方法:利用核糖核酸干扰(RNA interference,RNAi)技术,构建LINE-1 ORF-1p表达量下调的293T细胞系,通过qPCR(quantitative polymerase chain reaction)和Western blot验证干扰效率,通过免疫荧光染色检测ORF-1p的表达和定位,通过细胞计数和克隆形成实验检测细胞增殖能力,通过鬼笔环肽和4’,6-二脒基-2-苯基吲哚(4’,6-diamidino-2-phenylindole,DAPI)染色分析细胞形态。结果:成功构建两种LINE-1敲低的293T细胞系,通过免疫荧光染色观察ORF-1p的表达定位,显示ORF-1p主要分布在细胞质,干扰LINE-1后ORF-1p表达减少;通过细胞计数和集落形成实验,发现下调ORF-1p后细胞的增殖能力和克隆形成能力显著降低(P<0.05);通过鬼笔环肽标记细胞骨架,DAPI标记细胞核,相差显微镜和共聚焦显微镜观察干扰LINE-1后细胞形态,结果显示,下调ORF-1p后shL1-749细胞面积减小,细胞圆润度增加(P<0.05)。结论:成功构建了LINE-1敲低的293T细胞系,发现下调ORF-1p蛋白能够抑制293T细胞的生长,改变细胞形态,为进一步了解LINE-1在细胞增殖和调控中的分子机制奠定了基础。 展开更多
关键词 LINE-1 ORF-1p RNAI 293T 细胞增殖 细胞形态
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Trx1通过抑制ROS缓解6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞炎性损伤
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作者 杨沛凇 张博熙 +3 位作者 夏雨欣 吕红明 徐彬 李士泽 《中国细胞生物学学报》 2025年第6期1313-1322,共10页
该文探讨了过表达硫氧化还原蛋白1(thioredoxin 1,Trx1)对多巴胺羟基衍生物6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的影响。将Trx1过表达腺病毒转染至SH-SY5Y细胞以构建Trx1过表达模型。实验分组为对照组(Ad-GFP)... 该文探讨了过表达硫氧化还原蛋白1(thioredoxin 1,Trx1)对多巴胺羟基衍生物6-羟基多巴胺(6-hydroxydopamine,6-OHDA)诱导的SH-SY5Y细胞损伤的影响。将Trx1过表达腺病毒转染至SH-SY5Y细胞以构建Trx1过表达模型。实验分组为对照组(Ad-GFP)、Trx1过表达组(Ad-Trx1)、6-OHDA组(Ad-GFP+6-OHDA)、Trx1过表达+6-OHDA组(Ad-Trx1+6-OHDA)。使用Western blot、qRT-PCR评估过表达模型构建效果并检测炎症因子表达情况;CCK-8法测定细胞活力;试剂盒检测LDH释放情况;荧光染色检测细胞中ROS含量以及晚期细胞凋亡和细胞坏死情况。结果显示,与对照组相比,Ad-Trx1组Trx1 mRNA丰度极显著升高;Trx1蛋白表达水平显著增加;荧光显微镜镜下显示Ad-Trx1组呈绿色荧光,表明Trx1过表达模型构建成功。CCK-8和LDH检测结果显示,过表达Trx1能极显著地改善6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞活力下降并抑制由6-OHDA诱导的SHSY5Y细胞LDH释放增加。荧光染色结果显示,过表达Trx1能够减少6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞中ROS的累积并减轻6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞晚期细胞凋亡和细胞坏死情况。qRT-PCR和Western blot结果显示,过表达Trx1能够抑制由6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞炎症因子表达增加。总之,过表达Trx1通过减少ROS的积累并抑制细胞凋亡、坏死从而缓解6-OHDA诱导的SH-SY5Y细胞炎性损伤。 展开更多
关键词 硫氧还蛋白1 人神经母细胞瘤细胞系 神经元损伤 氧化应激 炎症因子
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SPHK1过表达慢病毒载体的构建和稳定转染SKOV3细胞系的建立
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作者 苏秋源 赵玲 +6 位作者 谭佳佳 莫世恩 周海琴 卢芳芳 韦依 周洋 况燕 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第6期1709-1716,共8页
目的:构建鞘氨醇激酶1(SPHK1)过表达慢病毒载体,建立SKOV3慢病毒稳定转染细胞系。方法:根据美国生物技术信息中心(NCBI)数据库提供的SPHK1的数据信息设计并合成引物,扩增目的基因,连接至经Bam HⅠ和AgeⅠ限制性内切酶处理的GV492质粒,构... 目的:构建鞘氨醇激酶1(SPHK1)过表达慢病毒载体,建立SKOV3慢病毒稳定转染细胞系。方法:根据美国生物技术信息中心(NCBI)数据库提供的SPHK1的数据信息设计并合成引物,扩增目的基因,连接至经Bam HⅠ和AgeⅠ限制性内切酶处理的GV492质粒,构建SPHK1过表达慢病毒载体,选取阳性克隆进行PCR和测序鉴定。将慢病毒质粒和慢病毒包装辅助质粒共同转染至HEK-293T细胞进行包装和滴度测定。根据测得的最佳感染复数(MOI)为10,将各组相应的慢病毒量转染至SKOV3细胞,分为空白组(不进行处理)、GV492对照组(GV492对照慢病毒感染SKOV3细胞)和GV492-SPHK1过表达组(GV492-SPHK1过表达慢病毒感染SKOV3细胞,ov-SPHK1组)。使用最佳浓度为2 mg·L^(-1)的嘌呤霉素筛选稳定转染的SKOV3细胞系,48 h后换液,更换浓度为1 mg·L^(-1)嘌呤霉素筛选14 d,荧光显微镜下观察细胞形态和荧光表达情况。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组SKOV3细胞中SPHK1 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组SKOV3细胞中SPHK1蛋白表达水平。结果:PCR测序,SPHK1过表达慢病毒载体基因序列与目标序列完全一致,成功构建SPHK1过表达慢病毒载体,GV492对照组和ov-SPHK1组慢病毒滴度分别为5×10^(11)及8×10^(11)TU·L^(-1)。GV492对照组和ov-SPHK1组SKOV3细胞状态良好,荧光表达强烈,提示成功构建SPHK1过表达的SKOV3稳定转染细胞系。RT-qPCR法检测,与空白组和GV492对照组比较,ov-SPHK1组SKOV3细胞中SPHK1 mRNA表达水平明显升高(P<0.01)。Western blotting法检测,与空白组和GV492对照组比较,ov-SPHK1组SKOV3细胞中SPHK1蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:成功构建了SPHK1过表达慢病毒载体,并建立了稳定转染的SKOV3细胞。 展开更多
关键词 鞘氨醇激酶1 SKOV3细胞 慢病毒 稳定转染细胞系 卵巢肿瘤
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番茄果实挥发性风味物质1-辛烯-3-酮含量调控基因的定位
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作者 王立才 刘志强 +2 位作者 孙帅 崔霞 王海敬 《中国蔬菜》 北大核心 2025年第6期56-63,共8页
果实风味是番茄重要的品质性状之一。1-辛烯-3-酮作为一种关键的挥发性风味物质,对番茄香气的形成具有重要贡献。但调控番茄果实中1-辛烯-3-酮含量的基因尚未被克隆。为解析其遗传调控机制,利用栽培番茄Moneymaker(Solanum lycopersicum... 果实风味是番茄重要的品质性状之一。1-辛烯-3-酮作为一种关键的挥发性风味物质,对番茄香气的形成具有重要贡献。但调控番茄果实中1-辛烯-3-酮含量的基因尚未被克隆。为解析其遗传调控机制,利用栽培番茄Moneymaker(Solanum lycopersicum)和野生醋栗番茄PI365967(Solanum pimpinellifolium)所构建的重组自交系群体,通过关联分析,挖掘到3个与1-辛烯-3-酮含量密切相关的QTLs。其中,位于1号染色体的位点qGTA1为主效QTL,其表型贡献率为20.18%。通过构建定位群体,最终将qGTA1定位在465 kb区间,推测Solyc01g103770、Solyc01g103720和Solyc01g104070可能是调控1-辛烯-3-酮含量的候选基因。本研究为克隆番茄果实1-辛烯-3-酮含量的调控基因奠定了基础。 展开更多
关键词 番茄 挥发性风味物质 1-辛烯-3-酮 重组自交系 QTL
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计及N-1约束的联络线功率交互能力刻画与分析
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作者 肖强 周佳鑫 +5 位作者 范璇 邵先琪 周倩 瞿圣朋 林伟 杨知方 《重庆大学学报》 北大核心 2025年第9期12-20,共9页
电力系统联络线功率交互能力的精准表征,有助于实现中国跨区电力传输的可执行性和最优性。然而,现有方法仅考虑基态场景电力系统联络线功率交互能力,忽略N-1故障场景对电力系统联络线功率交互能力的影响,无法实现联络线功率交互能力的... 电力系统联络线功率交互能力的精准表征,有助于实现中国跨区电力传输的可执行性和最优性。然而,现有方法仅考虑基态场景电力系统联络线功率交互能力,忽略N-1故障场景对电力系统联络线功率交互能力的影响,无法实现联络线功率交互能力的精准表征。文中针对计及N-1约束的电力系统联络线功率交互能力展开研究,依据基态场景与N-1故障场景的耦合关系,提出基于解耦表征策略的N-1故障场景下电力系统联络线功率交互能力快速刻画方法;依据火电机组不同调控模式,分析N-1故障场景调控能力对电力系统联络线功率交互能力影响,辅助跨区电力资源优化配置决策制定。某省661节点系统算例表明:所提方法中能够精准、高效地表征联络线功率能力。 展开更多
关键词 联络线 功率传输能力 N-1故障场景 快速表征 机组控制模式
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Smad4-miR-128a-Bmi-1调控轴在肺腺癌A549细胞中的作用机制
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作者 李荟 武迎澳 +2 位作者 高雨欣 赵宝霞 孟秀香 《实用癌症杂志》 2025年第5期730-737,共8页
目的探讨Bmi-1是否可与Smad4和miR-128a形成Smad4-miR-128a-Bmi-1调控轴,并在人肺腺癌细胞株-A549中发挥调节作用,分析其作用机制。方法通过生物信息学技术、测序、染色质免疫共沉淀实验和Western Blot技术确定筛选的转录因子与miR-128... 目的探讨Bmi-1是否可与Smad4和miR-128a形成Smad4-miR-128a-Bmi-1调控轴,并在人肺腺癌细胞株-A549中发挥调节作用,分析其作用机制。方法通过生物信息学技术、测序、染色质免疫共沉淀实验和Western Blot技术确定筛选的转录因子与miR-128a之间的结合和调控关系,并通过5'Race实验明确miR-128a的转录起始位点;应用肿瘤免疫评估数据库和人类蛋白质图谱等数据库分析Smad4基因在肺腺癌中的表达情况,并在细胞水平验证Smad4、miR-128a和Bmi-1 mRNA和蛋白的表达情况;利用质粒构建过表达载体Smad4、敲减Bmi-1及化学合成miR-128a mimic,瞬时转染到A549细胞中,进一步验证转染效率;过表达Smad4、过表达miR-128a mimic和敲减Bmi-1后,验证Smad4、miR-128a和Bmi-1三者间的调控关系;分别共转染miR-128a mimic+Bmi-1及Smad4+miR-128a mimic,通过qRT-PCR实验反向验证Smad4、miR-128a和Bmi-1三者间的调控关系。结果经筛选确定与miR-128a可能存在结合和调控关系的候选转录因子为Smad3和Smad4。与对照组相比,在A549细胞中,Smad4和miR-128a表达水平低(P<0.01),而Bmi-1表达水平高(P<0.01)。在A549细胞中分别过表达Smad4、miR-128a和敲减Bmi-1后,可发现Smad4、miR-128a和Bmi-1之间存在调控关系,经共转染反向验证也可得到相同结果。结论转录因子Smad4可通过调节磷酸化Smad3进而调控miR-128a的表达,且miR-128a的转录起始位点位于其上游278bp的A碱基处;Smad4、miR-128a和Bmi-1可形成调控轴Smad4-miR-128a-Bmi-1,并在人肺腺癌细胞株-A549中发挥作用。 展开更多
关键词 SMAD4 miR-128a BMI-1 肺肿瘤 人肺腺癌细胞株-A549
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基于0-1规划的女式衬衫生产线平衡优化
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作者 兰小春 袁金宏 于小玲 《服装学报》 北大核心 2025年第2期110-115,共6页
为解决服装制造行业长期以来面临的作业负荷不均和生产效率低下等问题,以YU公司某款女式衬衫生产线为例,针对第Ⅰ类和第Ⅱ类生产线平衡问题,采用0-1规划模型进行优化研究。根据衬衫生产现状,以最小工作站数和最优生产节拍为目标,建立两... 为解决服装制造行业长期以来面临的作业负荷不均和生产效率低下等问题,以YU公司某款女式衬衫生产线为例,针对第Ⅰ类和第Ⅱ类生产线平衡问题,采用0-1规划模型进行优化研究。根据衬衫生产现状,以最小工作站数和最优生产节拍为目标,建立两类数学模型,并借助Lingo求解,得到作业元素最优组合,最后进行比较和选择。研究表明,第Ⅰ类平衡问题的模型在提高生产效率方面表现更优。该研究对服装生产领域开展生产系统优化具有一定的借鉴意义。 展开更多
关键词 生产线平衡 0-1规划 Lingo软件 平衡率改善 作业分配
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