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人冠状病毒0C43在北京成人呼吸道感染患者中感染的初步分析 被引量：4
1
作者 胡琴 陆柔剑 +4 位作者 彭堃 王文 赵彦杰 楼永良 谭文杰 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2014年第2期117-119,共3页
目的调查北京地区成人上呼吸道感染患者中人冠状病毒（HCoV—OC43）的感染状况，了解HCoV．OC43的流行分布和临床表现特点。方法针对主要结构蛋白S与N分别设计引物，建立两套一步法逆转录PCR检测方法，并对559份采集自2011年1月至2012年... 目的调查北京地区成人上呼吸道感染患者中人冠状病毒（HCoV—OC43）的感染状况，了解HCoV．OC43的流行分布和临床表现特点。方法针对主要结构蛋白S与N分别设计引物，建立两套一步法逆转录PCR检测方法，并对559份采集自2011年1月至2012年1月北京地区成人呼吸道感染患者的鼻咽拭子标本进行HCoV-0C43筛查；同时对阳性标本进行常见呼吸道病毒的共感染筛查，并进一步分析HCoV．OC43感染的流行病学和临床表现特点。结果559例鼻咽拭子样本中检测出HCoV．OC43阳性70例（12．52％，95％可性区间：9．78％～15．26％）；秋季是其流行季节，而性别和各年龄段（青年，中年和老年）HCoV．0C43的发病率没有差异；HCoV一0C43感染患者的临床表现主要是发热、咽痛、头痛、咳嗽、鼻塞、流涕等，其中8例患者出现呕吐或腹泻，鼻塞是HCoV一0C43感染的特异性临床表现；有25例（35．71％，25／70，95％可性区间：24．49％-46．93％）与其他常见呼吸道病毒共感染。结论采用双靶标核酸检测方法与鼻咽拭子检查结果表明，近年北京地区成人急性呼吸道感染患者中HCoV-OC43检出率为12．52％。 展开更多
关键词 冠状病毒0c43 人 逆转录聚合酶链反应 呼吸道感染
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新冠状病毒与SARS 被引量：4
2
作者 周密 李凡 《国外医学（病毒学分册）》 2003年第4期114-118,共5页
冠状病毒可引起人和动物的多种疾病 ,人类冠状病毒 HCo V- OC4 3和 HCo V- 2 2 9E主要引起人类的普通感冒。但是最近新分离出的冠状病毒可引起严重急性呼吸综合征 (severe acute respiratory syndrome,SARS) ,本文将就冠状病毒的生物学... 冠状病毒可引起人和动物的多种疾病 ,人类冠状病毒 HCo V- OC4 3和 HCo V- 2 2 9E主要引起人类的普通感冒。但是最近新分离出的冠状病毒可引起严重急性呼吸综合征 (severe acute respiratory syndrome,SARS) ,本文将就冠状病毒的生物学特性与致病性 ,新冠状病毒与 SARS的关系 ,SARS冠状病毒的研究进展作一综述。 展开更多
关键词 新冠状病毒 SARS HCoV-0c43 HCoV-229E 严重急性呼吸综合征
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六重荧光RT-PCR快速检测A、B型流感等呼吸道病毒方法的建立 被引量：1
3
作者 连昌虎 唐屹君 刘涛 《热带医学杂志》 CAS 2017年第7期872-876,共5页
目的利用六重荧光RT-PCR法建立起一种快速检测A、B型流感病毒/人偏肺病毒/NL63型、HKU1型和OC43型冠状病毒的方法。方法根据A、B型流感病毒/人偏肺病毒/NL63型、HKU1型和OC43型冠状病毒的保守序列,设计相应的引物和Taqman探针,利用一步... 目的利用六重荧光RT-PCR法建立起一种快速检测A、B型流感病毒/人偏肺病毒/NL63型、HKU1型和OC43型冠状病毒的方法。方法根据A、B型流感病毒/人偏肺病毒/NL63型、HKU1型和OC43型冠状病毒的保守序列,设计相应的引物和Taqman探针,利用一步法RT-PCR试剂盒优化反应体系后,采用十倍稀释体外转录RNA检验建立体系的灵敏度和重复性,并建立相对定量的标准曲线;利用具有多种相似临床症状的呼吸道病毒检验建立体系的特异性。结果 A、B型流感病毒/人偏肺病毒/NL63型、HKU1型和OC43型冠状病毒的检测灵敏度为100 copies/μL,标准曲线的相关系数都在99%以上,重复性良好,特异性实验未发现有非特异性扩增。结论本研究建立的六重荧光RT-PCR技术可以快速、准确地检测A、B型流感病毒/人偏肺病毒/NL63型、HKU1型和OC43型冠状病毒等六种呼吸道病毒。 展开更多
关键词 流感病毒A 流感病毒B 偏肺病毒 冠状病毒NL63 冠状病毒HKU1 冠状病毒OC43 六重荧光RT-PCR
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人冠状病毒229E、OC43与SARS-CoV血清学相关性的研究 被引量：4
4
作者 王压娣 丘立文 +2 位作者 廖志勇 梅亚波 车小燕 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期747-751,共5页
目的检测正常人和SARS患者血清中3种人冠状病毒(229E、OC43和SARS-CoV)特异性抗体,分析3种冠状病毒血清学相关性。方法采用免疫印迹、免疫荧光和ELISA方法检测100例健康献血员、34例SARS患者恢复期以及11例SARS患者双份血清中229E、OC43... 目的检测正常人和SARS患者血清中3种人冠状病毒(229E、OC43和SARS-CoV)特异性抗体,分析3种冠状病毒血清学相关性。方法采用免疫印迹、免疫荧光和ELISA方法检测100例健康献血员、34例SARS患者恢复期以及11例SARS患者双份血清中229E、OC43和SARS-CoV 3种冠状病毒核衣壳(N)蛋白抗体。结果用免疫荧光方法检测100例健康献血员血清中229E、OCA3和SARS-CoV IgG阳性率分别为98％、100％和1％,34例SARS患者恢复期血清中3种冠状病毒IgG的阳性率均为100％;免疫印迹检测100例健康献血员血清中229E、OC43和SARS-CoV N蛋白IgG阳性率分别97％、99％和2％,34例SARS患者恢复期血清中229E、OC43和SARS-CoV N蛋白IgG阳性率分别97%、100％和100%;11例SARS患者的急性期和恢复期双份血清中,免疫荧光检测有5例出现229E IgG滴度4倍或以上升高,10例出现OC43 IgG滴度4倍或以上升高,ELISA检测2例出现229E N蛋白IgG滴度4倍以上升高,没有一例出现OCA3 N蛋白抗体滴度升高。结论正常人群中普遍存在229E和OC43两种人冠状病毒抗体,SARS-CoV感染者存在对人冠状病毒229E和OC43血清学交叉反应,提示核衣壳蛋白不是引起血清学交叉反应的主要抗原,结果对研究SARS溯源有重要意义。 展开更多
关键词 冠状病毒 229E 0c43 SARS-COV 血清学
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2010-2012年广州地区人冠状病毒分子进化分析 被引量：1
5
作者 庹玖玲 黄旭斌 +6 位作者 杨权 罗洪娇 周凯 张素粉 张甜 曹开源 徐霖 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2017年第3期212-217,共6页
目的 了解2010-2012年广州地区发热呼吸道感染患者的人冠状病毒各亚型分子进化情况.方法 采用RT-PCR法扩增HCoV-OC43、HCoV-229E和HCoV-NL63阳性标本的NP、RdRp和S基因部分片段,构建载体后进行测序,利用Bio-edit、Mega4.0、Clustal1.83... 目的 了解2010-2012年广州地区发热呼吸道感染患者的人冠状病毒各亚型分子进化情况.方法 采用RT-PCR法扩增HCoV-OC43、HCoV-229E和HCoV-NL63阳性标本的NP、RdRp和S基因部分片段,构建载体后进行测序,利用Bio-edit、Mega4.0、Clustal1.83等生物信息学软件对测序成功的基因序列进行比对和分析,建立HCoV-OC43、HCoV-229E和HCoV-NL63不同基因区域的分子进化树.结果 2010-2012年期间,HCoV-OC43、HCoV-229E和HCoV-NL63亚型在广州均未检测到重大变异株或重组株.HCoV-OC43与Belgium和中国香港来源流行株亲缘关系较近（GenBank登录号JN129834和AY903460）;HCoV-229E与Amsterdam来源的病毒株亲缘关系最近（GenBank登录号JX503060）;HCoV-NL63与中国北京和Amsterdam来源的流行株亲缘关系较近（GenBank登录号JX104161和DQ445911）.各亚型NP和RDRp为保守基因,S基因变异较大.结论 2010-2012年期间,广州至少存在3种HCoV-OC43、HCoV-229E和HCoV-NL63流行株,没有发现重大变异株或重组株.各亚型NP和RDRp均为保守基因,可用于病毒的检测,S基因变异较大,适用于对分子变异规律的研究. 展开更多
关键词 呼吸道感染 人冠状病毒0c43 人冠状病毒NL63 人冠状病毒229E 分子进化
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福州地区重症呼吸道感染患儿中4种人冠状病毒的检测与分析 被引量：11
6
作者 修文琼 郑奎城 +4 位作者 吴冰珊 黄萌 谢剑锋 康育兰 刘光华 《中华实验和临床病毒学杂志》 CAS CSCD 2017年第5期429-433,共5页
目的 了解4种人冠状病毒（HCoV-HKU1、HCoV-NL63、HCoV-OC43、HCoV-229E）在福州急性重症下呼吸道感染患儿中的感染状况及临床意义.方法 收集2007年11月至2015年1月因呼吸道感染住进医院儿科重症监护病房的小儿鼻咽抽取物标本,共计266份... 目的 了解4种人冠状病毒（HCoV-HKU1、HCoV-NL63、HCoV-OC43、HCoV-229E）在福州急性重症下呼吸道感染患儿中的感染状况及临床意义.方法 收集2007年11月至2015年1月因呼吸道感染住进医院儿科重症监护病房的小儿鼻咽抽取物标本,共计266份.通过RT-PCR法先用一对通用引物对人冠状病毒pol基因片段进行检测.测序并BLAST比对分析8份阳性产物.对用HCoV通用引物检测阳性的标本,再分别用两种人新型冠状病毒HCoV-HKU1和HCoV-NL63的特异性引物进行扩增检测.对这8株病毒进行系统进化分析.结果 检出8例HCoV感染阳性病例,检出率3.0％.其中2例感染HCoV-HKU1,1例感染HCoV-NL63,1例感染HCoV-229E,4例感染HCoV-OC43.在这266例住院患儿中HCoV-HKU1感染的检出率约为0.75％;HCoV-NL63和HCoV-229E感染的检出率约为0.38％;HCoV-OC43感染的检出率约为1.50％.检测出两例HCoV-HKU1与人副流感病毒3型（HPIV-3）的混合感染.系统进化分析表明这8株HCoV分成4簇,2株HCoV-HKU1属于HKU1基因型A.结论 4种人冠状病毒可能是儿童下呼吸道感染中较为重要的病原. 展开更多
关键词 呼吸道感染 人冠状病毒 HCoV-HKU1 HCoV—NL63 HCoV-OC43 HCoV-229E
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携带绿色荧光蛋白报告基因的HCoV-OC43感染性克隆的构建与病毒拯救 被引量：2
7
作者 杨扬 申梁 +3 位作者 陆柔剑 王惠娟 王文玲 谭文杰 《中华微生物学和免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期256-262,共7页
目的：探索利用HCoV-OC43感染性克隆表达外源基因的可行性及插入区域。方法在HCoV-OC43全长感染性克隆pBAC-OC43 FL的基础上,利用融合PCR和酶切连接等方法,成功构建了在3个不同位置插入绿色荧光蛋白报告基因（ GFP替换 NS2基因或NS12.9... 目的：探索利用HCoV-OC43感染性克隆表达外源基因的可行性及插入区域。方法在HCoV-OC43全长感染性克隆pBAC-OC43 FL的基础上,利用融合PCR和酶切连接等方法,成功构建了在3个不同位置插入绿色荧光蛋白报告基因（ GFP替换 NS2基因或NS12.9基因以及插入N基因后）的重组质粒,利用反向遗传学操作技术进行病毒拯救,通过免疫荧光、Western blot和病毒感染等试验对重组病毒进行鉴定分析。结果 GFP替换NS2或NS12.9基因的感染性克隆可以成功拯救出重组病毒（OC43-GFPΔNS2和OC43-GFPΔNS12.9）,其中OC43-GFPΔNS2在感染BHK-21细胞后能够观察到GFP基因的高效表达,OC43-GFPΔNS12.9在感染细胞后仅有少量GFP基因的表达,而GFP插入N基因后的感染性克隆未能拯救出病毒。结论 NS2基因可以作为HCoV-OC43感染性克隆表达外源基因的插入位点,并且外源基因插入至该位点可获得稳定高效表达,为进一步研究HCoV-OC43的复制规律及研发基于HCoV-OC43的冠状病毒载体提供了参考依据。 展开更多
关键词 人冠状病毒OC43 感染性克隆 病毒拯救 绿色荧光蛋白 病毒载体
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