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circ_0061140靶向miR-548b-3p调控胃癌细胞增殖、周期分布和凋亡的机制研究 被引量：2
1
作者 牛涛 庄唯 伍苏娟 《蚌埠医科大学学报》 2025年第3期298-303,308,共7页
目的:研究胃癌细胞中circ_0061140和miR-548b-3p表达水平,探讨circ_0061140靶向miR-548b-3p对胃癌细胞增殖、周期分布和凋亡的影响。方法:RT-qPCR检测人胃黏膜细胞GES1和胃癌细胞系(SNU-1、AGS、HS-746T)中circ_0061140和miR-548b-3p相... 目的:研究胃癌细胞中circ_0061140和miR-548b-3p表达水平,探讨circ_0061140靶向miR-548b-3p对胃癌细胞增殖、周期分布和凋亡的影响。方法:RT-qPCR检测人胃黏膜细胞GES1和胃癌细胞系(SNU-1、AGS、HS-746T)中circ_0061140和miR-548b-3p相对水平。将circ_0061140的小干扰RNA、miR-548b-3p模拟物、circ_0061140的小干扰RNA+miR-548b-3p抑制物分别转染到SNU-1细胞,通过CCK-8实验检测SNU-1细胞活力,通过流式细胞仪检测细胞凋亡和周期分布。采用双荧光素酶报告实验、RIP实验和RT-qPCR分析circ_0061140和miR-548b-3p靶向调控关系。结果:与GES1细胞比较,SNU-1、AGS、HS-746T细胞中circ_0061140相对水平升高(P<0.05~P<0.01),miR-548b-3p相对水平降低(P<0.05~P<0.01)。干扰circ_0061140表达后SNU-1细胞活力、S期比例降低(P<0.05),凋亡率、G0/G1期比例、miR-548b-3p相对水平升高(P<0.05)。过表达miR-548b-3p后SNU-1细胞活力、S期比例降低(P<0.01),凋亡率、G0/G1期比例升高(P<0.01)。过表达circ_0061140后SNU-1细胞miR-548b-3p相对水平降低(P<0.05)。circ_0061140与miR-548b-3p直接特异性结合。抑制miR-548b-3p表达明显减弱干扰circ_0061140对SNU-1细胞活力、周期分布以及凋亡的影响(P<0.01)。结论:胃癌细胞中circ_0061140表达上调,miR-548b-3p表达下调。干扰circ_0061140通过上调miR-548b-3p能够抑制胃癌细胞增殖,使细胞阻滞在G0/G1期,并诱导细胞凋亡。 展开更多
关键词 胃肿瘤 细胞增殖 细胞周期 凋亡 circ_0061140 miR-548b-3p
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circ_0061140靶向miR-6838-5p促进非小细胞肺癌细胞的增殖、阻滞细胞周期、诱导细胞凋亡 被引量：1
2
作者 蒋君霞 杨国荣 +1 位作者 谷涉群 喻珣 《医学分子生物学杂志》 CAS 2022年第6期464-471,共8页
目的通过实验研究确认环状RNA(circRNA)circ_0061140是否能靶向miR-6838-5p调控非小细胞肺癌细胞的增殖、细胞周期和凋亡。方法采用逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_0061140和miR-6838-5p在非小细胞肺癌细胞中的表达情况。将... 目的通过实验研究确认环状RNA(circRNA)circ_0061140是否能靶向miR-6838-5p调控非小细胞肺癌细胞的增殖、细胞周期和凋亡。方法采用逆转录-定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测circ_0061140和miR-6838-5p在非小细胞肺癌细胞中的表达情况。将非小细胞肺癌NCI-H1299细胞分为si-circ_0061140组(转染si-circ_0061140;低表达circ_0061140)、si-NC组(转染si-NC;阴性对照)、NC组(未转染;空白对照)、miR-6838-5p组(转染miR-6838-5p模拟物;高表达miR-6838-5p)、miR-NC组(转染miR-NC;高表达miR-6838-5p的阴性对照)、si-circ_0061140+anti-miR-NC组(共转染si-circ_0061140与anti-miR-NC)、si-circ_0061140+anti-miR-6838-5p组(共转染si-circ_0061140与anti-miR-6838-5p)。采用Western印迹检测细胞周期蛋白D1(cyclinD1)、活化的含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(cleavedcaspase-3)蛋白表达,MTT法检测细胞增殖能力,流式细胞仪检测细胞周期和凋亡情况。双荧光素酶活性检测circ_0061140和miR-6838-5p的靶向结合。结果非小细胞肺癌组织、细胞NCI-H1299、NCI-H2170、NCI-H1975中的circ_0061140表达量均比癌旁组织或正常肺上皮细胞BEAS-2B高,miR-6838-5p表达量比癌旁组织或BEAS-2B细胞低(P_(均)<0.05)。si-circ_0061140组或miR-6838-5p组NCI-H1299细胞的CyclinD1蛋白表达量、增殖能力、S期细胞比例比NC组减少,Cleaved-caspase-3蛋白表达量、G_(0)/G_(1)期细胞比例、凋亡率比si-NC组或miR-NC组增加(P均<0.05)。circ_0061140靶向调控miR-6838-5p的表达。共转染si-circ_0061140、anti-miR-6838-5p可减弱转染si-circ_0061140对细胞生物学行为的作用。结论低表达circ_0061140通过靶向非小细胞肺癌细胞的miR-6838-5p,抑制细胞增殖、阻滞G_(0)/G_(1)期细胞周期,并加速凋亡。 展开更多
关键词 circ_0061140 非小细胞肺癌 miR-6838-5p 细胞增殖 细胞周期 细胞凋亡
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circ_0061140靶向miR-338-3p调控多发性骨髓瘤细胞的增殖和凋亡 被引量：2
3
作者 刘玉香 江庭秀 汤杰 《蚌埠医学院学报》 CAS 2024年第4期454-458,463,共6页
目的:研究环状RNA 0061140(circ_0061140)对多发性骨髓瘤Sko-007细胞增殖和凋亡的影响和调控机制。方法:采用生物信息学数据库预测circ_0061140的靶miRNA,双荧光素酶报告实验证实circ_0061140与miR-338-3p靶向关系。实时定量PCR分析健... 目的:研究环状RNA 0061140(circ_0061140)对多发性骨髓瘤Sko-007细胞增殖和凋亡的影响和调控机制。方法:采用生物信息学数据库预测circ_0061140的靶miRNA,双荧光素酶报告实验证实circ_0061140与miR-338-3p靶向关系。实时定量PCR分析健康对照者和多发性骨髓瘤病人外周血中circ_0061140和miR-338-3p表达。将circ_0061140小干扰RNA(si-circ_0061140)、miR-338-3p模拟物、si-circ_0061140联合miR-338-3p抑制剂分别转染Sko-007,采用CCK-8法、流式细胞术分析干扰circ_0061140或过表达miR-338-3p或同时抑制circ_0061140和miR-338-3p对Sko-007细胞增殖、凋亡的影响。蛋白质印迹法分析B细胞淋巴瘤-2蛋白(Bcl-2)和Bcl相关x蛋白(Bax)表达变化。结果:miR-338-3p是circ_0061140达靶基因。circ_0061140在多发性骨髓瘤病人血清中的表达显著高于健康对照者(P<0.01),miR-338-3p在多发性骨髓瘤病人血清中的表达显著低于健康对照者(P<0.01)。干扰circ_0061140表达后Sko-007细胞增殖活力、Bcl-2表达显著降低(P<0.01),miR-338-3p和Bax表达、细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。过表达miR-338-3p后Sko-007细胞增殖活力、Bcl-2表达显著降低(P<0.01),细胞凋亡率、Bax表达显著升高(P<0.01)。与干扰circ_0061140比较,同时抑制circ_0061140和miR-338-3p表达后Sko-007细胞增殖活力、Bcl-2表达显著升高(P<0.01),细胞凋亡率、Bax表达显著降低(P<0.01)。结论:circ_0061140通过靶向miR-338-3p促进多发性骨髓瘤细胞增殖,抑制细胞凋亡,在多发性骨髓瘤中具有致癌作用。 展开更多
关键词 多发性骨髓瘤 环状RNA 0061140 细胞增殖 凋亡 miR-338-3p
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