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栗酒裂殖酵母来源黄素单加氧酶的性质及催化合成S-甲基-L-半胱氨酸亚砜的应用 被引量：1
1
作者 连蒙卡 宋兆霖 +6 位作者 高文静 朱刚 董孟君 李玉 刘逸寒 王凤华 路福平 《生物工程学报》 北大核心 2025年第1期474-485,共12页
S-甲基-L-半胱氨酸亚砜(S-methyl-L-cysteine sulfoxide,SMCO)是一种具有多种功能特性的非蛋白质含硫氨基酸。目前关于催化S-甲基-L-半胱氨酸(S-methyl-L-cysteine,SMC)生物合成SMCO的酶鲜有报道。本研究将栗酒裂殖酵母(Schizosaccharom... S-甲基-L-半胱氨酸亚砜(S-methyl-L-cysteine sulfoxide,SMCO)是一种具有多种功能特性的非蛋白质含硫氨基酸。目前关于催化S-甲基-L-半胱氨酸(S-methyl-L-cysteine,SMC)生物合成SMCO的酶鲜有报道。本研究将栗酒裂殖酵母(Schizosaccharomyces pombe)来源的黄素单加氧酶基因(spfmo)通过大肠杆菌(Escherichia coli)BL21(DE3)进行异源表达,并对其酶学性质进行了分析。重组SpFMO的最适催化条件为30℃、pH 8.0,该条件下比酶活为72.77 U/g;此外,适当的Mg2+可以提高SpFMO的酶活;经酶动力学分析,该酶对底物SMC的酶促反应动力学参数Km值为23.89μmol/L,催化效率kcat/Km为61.71 L/(min·mmol)。在最适条件下,SpFMO催化SMC在9 h内生成SMCO的产率为12.31%。本研究为酶法合成SMCO提供了一定参考。 展开更多
关键词 黄素单加氧酶 酶学性质 S-甲基-l-半胱氨酸 S-甲基-l-半胱氨酸亚砜 金属离子
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叶状ZIF-L@Ag复合材料的合成、表征和抗菌性能
2
作者 徐建铭 戴乐 +1 位作者 朱家骅 韩晓乐 《中南民族大学学报(自然科学版)》 2025年第3期301-306,共6页
ZIF系列是类沸石的咪唑酸盐框架材料.ZIF-L是Zn^(2+)与2-甲基咪唑的N原子配位后自组装形成的材料,具有良好的加载和吸附能力.通过水溶液合成方法,合成了叶状ZIF-L,并与Ag纳米颗粒(NPs)吸附结合,形成叶片状ZIF-L@Ag复合材料.通过最小抑... ZIF系列是类沸石的咪唑酸盐框架材料.ZIF-L是Zn^(2+)与2-甲基咪唑的N原子配位后自组装形成的材料,具有良好的加载和吸附能力.通过水溶液合成方法,合成了叶状ZIF-L,并与Ag纳米颗粒(NPs)吸附结合,形成叶片状ZIF-L@Ag复合材料.通过最小抑制浓度(MIC)、CFU计数法分析,发现ZIF-L@Ag复合材料对耐碳青霉烯铜绿假单胞菌表现出了优异的抗菌性能.细胞膜通透性测定结果表明,ZIF-L@Ag NPs复合材料能够改变细菌细胞膜的通透性. 展开更多
关键词 ZIF-l咪唑酸盐框架材料 ZIF-l@Ag复合材料 抗菌材料
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Savonius-L型垂直轴风力机结构优化与性能分析
3
作者 杜深慧 谢奇龙 +2 位作者 孙仲淳 谷越阳 高亦凡 《可再生能源》 北大核心 2025年第10期1339-1345,共7页
为更好地满足小型风力发电系统的需求,文章对传统Savonius型风力机进行了改进,设计了一种具有更高风能利用率(C_(p))和更好性能的Savonius-L型垂直轴风力机。利用Solidworks软件搭建了风轮模型,基于SIMPLCE算法和标准的k-ε湍流模型在AN... 为更好地满足小型风力发电系统的需求,文章对传统Savonius型风力机进行了改进,设计了一种具有更高风能利用率(C_(p))和更好性能的Savonius-L型垂直轴风力机。利用Solidworks软件搭建了风轮模型,基于SIMPLCE算法和标准的k-ε湍流模型在ANSYS CFX软件中对风轮结构进行仿真优化,以提高C_(p)为目标,选择合适的叶片数目和叶片弯曲角度(β),并与传统Savonius型风轮进行对比分析。研究结果表明,4叶片、叶片β为45°的风轮结构C_(p)最高,可达0.281,风轮的C_(p)整体上高于传统Savonius型风力机。从流场分析可知,叶片β为45°的B型风轮压力分布集中且数值较大。在风力发电实验中,Savonius-L型风力机启动性能好、运行稳定、发电电压幅值高,综合性能最优。 展开更多
关键词 Savonius-l型垂直轴风力机 风轮模型 风能利用率 风力发电 小型风力发电系统
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L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽对杂交施氏鲟幼鱼生长和能量收支的影响 被引量：1
4
作者 王晗雅 刘烊廷 +5 位作者 杜飞 王帅 陆绍霞 韩世成 王常安 刘红柏 《动物营养学报》 北大核心 2025年第4期2587-2598,共12页
本试验旨在探究饲料中添加L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对杂交施氏鲟(Acipenser schrenckii♀×Acipenser baerii)幼鱼生长和能量收支的影响。选取450尾初始体重为(21.23±0.17)g的杂交施氏鲟,随机分成5组,每组3个重复,每... 本试验旨在探究饲料中添加L-丙氨酰-L-谷氨酰胺二肽(Ala-Gln)对杂交施氏鲟(Acipenser schrenckii♀×Acipenser baerii)幼鱼生长和能量收支的影响。选取450尾初始体重为(21.23±0.17)g的杂交施氏鲟,随机分成5组,每组3个重复,每个重复30尾。对照组(G1组)饲喂基础饲料,试验组分别饲喂在基础饲料中添加0.25%(G2组)、0.50%(G3组)、0.75%(G4组)和1.00%Ala-Gln(G5组)的饲料。试验期56 d。结果表明:1)随着饲料中Ala-Gln添加量的提高,试验鱼终末体重、增重率和肥满度逐渐提高,饲料系数逐渐降低,其中与G1组相比,G5组终末体重显著提高(P<0.05),G4组和G5组肥满度显著提高(P<0.05)。2)随着饲料中Ala-Gln添加量的提高,全鱼粗蛋白质含量呈现先降低后升高的变化趋势,其中G4组全鱼粗蛋白质含量最高;G5组全鱼粗脂肪含量最低,显著低于G2组(P<0.05)。3)饲料中添加Ala-Gln未改变全鱼氨基酸组成模式。G5组全鱼总氨基酸含量最高,显著高于G4组(P<0.05)。4)随着饲料中Ala-Gln添加量的提高,血清谷氨酰胺和丙氨酸含量均逐渐升高,与G1组相比,G3组、G4组和G5组血清谷氨酰胺和丙氨酸含量显著提高(P<0.05)。5)随着饲料中Ala-Gln添加量的提高,粪能和排泄能逐渐降低,其中与G1组相比,G3组、G4组和G5组粪能和排泄能显著降低(P<0.05);G5组生长能最高,显著高于G1组和G2组(P<0.05);同时,G5组代谢能显著低于G1组(P<0.05)。综上所述,饲料中添加适量Ala-Gln可提高杂交施氏鲟幼鱼终末体重和肥满度,促进机体蛋白质合成,并提高能量利用效率。在本试验条件下,杂交施氏鲟幼鱼饲料中以添加0.75%~1.00%Ala-Gln效果较佳。 展开更多
关键词 L-丙氨酰-l-谷氨酰胺二肽 施氏鲟 生长性能 能量收支
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HKUST-1改性MgAl-LDHs复合材料(HKMA-L)对四环素的吸附性能的研究
5
作者 熊润文 胡立兵 唐风琴 《广东化工》 2025年第5期44-46,14,共4页
在室温下采用快速一锅法制备了一种MgAl-LDH负载HKUST-1的复合材料(HKMA-L),并将HKMA-L用于去除水中的TC污染物。采用SEM、XRD、FT-IR等多种技术对制备的HKMA-L进行表征,考察HKMA-L对TC吸附性能的影响及其重复利用性,结果表明重复循环4... 在室温下采用快速一锅法制备了一种MgAl-LDH负载HKUST-1的复合材料(HKMA-L),并将HKMA-L用于去除水中的TC污染物。采用SEM、XRD、FT-IR等多种技术对制备的HKMA-L进行表征,考察HKMA-L对TC吸附性能的影响及其重复利用性,结果表明重复循环4次后对TC的去除率仍达到80.36%。使用吸附动力学与热力学模型对吸附过程进行拟合研究,HKMA-L在吸附TC的过程中以化学吸附为主。 展开更多
关键词 MgAl-lDHs HKUST-1 HKMA-l 吸附 TC
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硫化氢信号分子介导S-烯丙基-L-半胱氨酸调控水稻镉胁迫 被引量：1
6
作者 火兴宇 张宇 +4 位作者 王常荣 齐麟 刘斌 黄雁飞 黄永春 《农业环境科学学报》 北大核心 2025年第5期1160-1168,共9页
土壤Cd污染不仅影响水稻的正常生长发育,而且导致Cd在水稻籽粒中累积,从而给人体健康造成潜在危害。硫化氢(H2S)作为一种重要的信号分子在调控植物重金属胁迫中发挥重要作用。本文利用水培试验研究了具有内源H2S供体功能的大蒜提取物S-... 土壤Cd污染不仅影响水稻的正常生长发育,而且导致Cd在水稻籽粒中累积,从而给人体健康造成潜在危害。硫化氢(H2S)作为一种重要的信号分子在调控植物重金属胁迫中发挥重要作用。本文利用水培试验研究了具有内源H2S供体功能的大蒜提取物S-烯丙基-L-半胱氨酸(SAC)调控水稻Cd胁迫的潜在机制。选用我国南方主栽水稻品种“中早35”作为试验材料喷施系列浓度SAC,结果表明:喷施0.2 mmol·L^(-1)SAC后水稻幼苗地上部和根部H2S含量随时间延长持续增加,12 h后与对照(CK)处理相比分别显著增加44.57%和83.22%。采用荧光标记法对水稻幼苗叶片和根部的测定结果也表明H2S荧光强度与CK处理相比分别显著增加254.55%和700.25%。进一步对水稻幼苗地上部和根部H2S主要合成酶L-半胱氨酸脱硫酶(LCD)活性进行测定,结果表明,喷施0.2 mmol·L^(-1)SAC后地上部和根部LCD活性与CK处理相比分别显著增加94.17%和41.05%。喷施0.2 mmol·L^(-1)SAC后对水稻抗氧化酶系统的测定结果表明,水稻幼苗地上部超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)活性与CK处理相比分别显著增加32.36%、26.69%、24.87%,根部分别显著增加38.61%、11.99%、62.93%。地上部和根部丙二醛(MDA)含量与CK处理相比分别显著降低37.37%和28.54%。对水稻幼苗Cd含量的测定结果表明,当SAC喷施浓度达到0.2 mmol·L^(-1)时地上部和根部Cd含量与CK处理相比分别显著降低18.07%和46.05%。研究表明,喷施SAC诱导了幼苗LCD活性,促进了水稻合成H2S信号分子,调控了水稻Cd胁迫和转运。 展开更多
关键词 水稻 镉 S-烯丙基-l-半胱氨酸 硫化氢 信号分子
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粮仓仓内图像分类检测的ConvNeXt-L-CA方法研究 被引量：1
7
作者 陈荣喆 许德刚 +2 位作者 张蕙 任飞燕 李智 《粮油食品科技》 北大核心 2025年第2期182-189,共8页
近年来,为响应国家关于创新粮食监管手段、实现“穿透式”监管的要求,基于粮仓仓内视频监控系统和计算机视觉的粮食储存数量动态监测技术在粮食行业逐步得到了应用。在实际应用中发现,通过视频监控系统采集到的仓内图像存在较多异常情况... 近年来,为响应国家关于创新粮食监管手段、实现“穿透式”监管的要求,基于粮仓仓内视频监控系统和计算机视觉的粮食储存数量动态监测技术在粮食行业逐步得到了应用。在实际应用中发现,通过视频监控系统采集到的仓内图像存在较多异常情况,亟需对其进行智能分类并对视频监控系统进行维护,以提高仓内粮食数量监测的准确性。对此,以ConvNeXt模型为主干网络,引入CA注意力机制及Lion优化器,提出一种ConvNeXt-L-CA的粮仓仓内图像分类方法。实验结果表明,改进后的ConvNeXt-L-CA模型的准确率、精确率、召回率和F1指数分别达到了98.24%、98.00%、98.04%、98.00%,较原模型的准确率提高了0.53%,验证了该方法的有效性,为进一步提升粮食信息化监管的可靠性和准确性提供了技术支撑。 展开更多
关键词 信息化监管 粮仓仓内图像 图像分类 ConvNeXt-l-CA
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白叶1号发酵茶复配养生茶调节3T3-L1细胞脂质代谢的作用 被引量：1
8
作者 朱天乐 盛思杰 +4 位作者 徐铃琳 吴媛媛 刘仲华 王凯茜 屠幼英 《中国茶叶》 2025年第1期50-57,共8页
随着肥胖问题的日益突出,调节血脂、预防肥胖成了人们的关注焦点,通过健康饮食方法解决该问题是最简单可行的途径。试验采用白叶1号发酵茶配伍枸杞、山楂制成养生茶,就其对小鼠3T3-L1前脂肪细胞的调脂效果和作用机理进行了研究。将3T3-L... 随着肥胖问题的日益突出,调节血脂、预防肥胖成了人们的关注焦点,通过健康饮食方法解决该问题是最简单可行的途径。试验采用白叶1号发酵茶配伍枸杞、山楂制成养生茶,就其对小鼠3T3-L1前脂肪细胞的调脂效果和作用机理进行了研究。将3T3-L1细胞诱导为成熟脂肪细胞后,通过测定油红O染色面积、脂肪和甘油三酯(TG)含量来判断养生茶对脂质形成的抑制作用。结果显示,在200~500μg/mL范围内,随着养生茶质量浓度的升高,3T3-L1前脂肪细胞的油红O染色面积下降,表明养生茶具有降脂功效。当茶样质量浓度为300、400、500μg/mL时,与模型组相比,细胞脂肪含量分别降低了22.64、23.17、30.63个百分点,降脂效果优于阳性药物辛伐他丁。此外,养生茶可以显著减少细胞中的TG含量,具有剂量依赖效应。当养生茶质量浓度为500μg/mL时,细胞内TG含量最低,与模型组相比降低了89.33%。通过茶饮代谢物与3T3-L1细胞脂肪指标的相关性分析发现,该养生茶中多种成分与3T3-L1细胞的脂质代谢物呈强相关关系。本研究可为开发具有降脂功能的新式茶饮产品提供科学依据。 展开更多
关键词 发酵白化茶 枸杞 山楂 3T3-l1前脂肪细胞 调节脂肪代谢 功效成分
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EPA/DHA干预的C2C12肌管细胞对3T3-L1脂肪细胞脂质代谢的作用 被引量：1
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作者 杨娴 曾欢婷 +1 位作者 毛联智 毛丽梅 《营养学报》 北大核心 2025年第1期60-67,共8页
目的探讨二十二碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)或二十碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA干预的C2C12肌管细胞对脂肪细胞脂质代谢功能的改善作用。方法用50、100、200、400μmol/LEPA或DHA干预肌管细胞24 h,同时设立对照组,干预... 目的探讨二十二碳五烯酸(eicosapentaenoic acid,EPA)或二十碳六烯酸(docosahexaenoic acid,DHA干预的C2C12肌管细胞对脂肪细胞脂质代谢功能的改善作用。方法用50、100、200、400μmol/LEPA或DHA干预肌管细胞24 h,同时设立对照组,干预结束后,撤掉干预液,将干预后的肌管细胞在transwell小室中与成熟的脂肪细胞共培养24h。用油红O定量脂肪细胞内的脂质蓄积情况,用PCR法测定脂肪细胞的脂肪甘油三酯脂肪酶(adipose triglyceride lipase,Atgl)、激素敏感性脂肪酶(hormone-sensitive lipase,Hsl)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ的共激活物1α(PPARG coactivator 1 alpha,Pgc-1α)、解偶联蛋白-1(uncoupling protein-1,Ucp-1)和固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element binding protein-1c,Srebp-1c)基因mRNA表达水平,用Western blot检测脂肪细胞腺苷酸活化蛋白激酶(adenosine5’-monophosphate(AMP)-activatedproteinkinase,AMPK)与信号转导和转录激活因子3(signal transduction and activator of transcription 3,STAT3)信号通路的蛋白表达。结果经100、200、400μmol/L EPA干预的肌管细胞可以显著降低脂肪细胞的脂质蓄积(P<0.05或P<0.001),而DHA干预后的肌管细胞则没有显著的改善脂质蓄积的作用;经一定浓度的EPA或DHA干预的肌管细胞可以显著上调脂肪细胞脂肪分解基因Atgl和Hsl的表达(P<0.05或P<0.01);经一定浓度的EPA或DHA干预的肌管细胞可以显著提高脂质氧化基因Ucp-1和Pgc-1α的表达(P<0.05或P<0.01);经一定浓度EPA干预的肌管细胞可以显著提升脂质合成基因Srebp-1c的表达(P<0.05或P<0.01),而一定浓度DHA干预的肌管细胞则是可以显著降低脂质合成基因Srebp-1c的表达(P<0.01);经所有浓度EPA干预的肌管细胞可以显著提高脂肪细胞p-STAT3/STAT3的比值(P<0.01),对p-AMPK/AMPK比值变化的影响则没有显著性;经200、400μmol/L DHA干预的肌管细胞可以显著提高脂肪细胞p-AMPK/AMPK的比值(P<0.01),但是p-STAT3/STAT3比值的变化没有显著性意义。结论EPA和DHA在适宜浓度均可以促进肌管细胞提高脂肪细胞的脂质分解和脂质氧化,EPA干预的肌管细胞还可以一定程度提高脂质合成,DHA干预的肌管细胞可以一定程度降低脂质合成;EPA干预后的肌管细胞可能通过STAT3通路改善脂质代谢,DHA干预后的肌管细胞可能通过AMPK通路改善脂质代谢。 展开更多
关键词 二十碳五烯酸 二十二碳六烯酸 C2C12肌管细胞 3T3-l1脂肪细胞 脂质代谢 STAT3/AMPK信号通路 细胞共培养
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S-乙酰-L-谷胱甘肽的药理作用与应用探讨 被引量：1
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作者 杨欣 郑阳 +1 位作者 李天泉 李頔 《中国药业》 2025年第6期128-128,I0001-I0004,共5页
目的为S-乙酰-L-谷胱甘肽(SAG)的进一步研发和应用提供参考。方法分析SAG的药物代谢动力学(PK)/药物效应动力学(PD)特性、药理作用、临床及其他领域的应用,并探讨其应用前景。结果相比谷胱甘肽及其他谷胱甘肽衍生物,SAG稳定性好、起效... 目的为S-乙酰-L-谷胱甘肽(SAG)的进一步研发和应用提供参考。方法分析SAG的药物代谢动力学(PK)/药物效应动力学(PD)特性、药理作用、临床及其他领域的应用,并探讨其应用前景。结果相比谷胱甘肽及其他谷胱甘肽衍生物,SAG稳定性好、起效快、生物利用度高、安全性高。SAG具有抗氧化应激、清除自由基、抑制铁死亡等多种药理作用。SAG在肝病、急性肾损伤、阿尔茨海默病、帕金森病、免疫调节、急性胰腺炎、糖尿病、病毒感染、囊性纤维化、慢性阻塞性肺疾病等临床领域,以及食品保健、皮肤美容、动物医疗等其他领域的应用均有数据支持。结论与谷胱甘肽及其他谷胱甘肽衍生物相比,SAG更有药理学优势,且在临床医疗和其他领域显示出一定的研发与应用价值。 展开更多
关键词 S-乙酰-l-谷胱甘肽 药理作用 抗氧化剂 谷胱甘肽 肝损伤 活性氧
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重症急性胰腺炎继发感染性胰腺坏死APOA5基因多态性及血清LPS、sPD-L1和PCT水平 被引量：2
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作者 刘斐 张丽骞 +5 位作者 高乃坤 乔志飞 王磊 刘春艳 李福龙 姚杰 《中华医院感染学杂志》 北大核心 2025年第5期662-666,共5页
目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)继发感染性胰腺坏死(IPN)患者APOA5基因多态性及血清脂肪酶(LPS)、可溶性程序死亡配体1(sPD-L1)和降钙素原(PCT)水平变化。方法选取河北北方学院附属第一医院2020年1月-2023年11月收治的SAP患者122例为研究... 目的探讨重症急性胰腺炎(SAP)继发感染性胰腺坏死(IPN)患者APOA5基因多态性及血清脂肪酶(LPS)、可溶性程序死亡配体1(sPD-L1)和降钙素原(PCT)水平变化。方法选取河北北方学院附属第一医院2020年1月-2023年11月收治的SAP患者122例为研究对象,根据继发IPN情况分为继发组31例和非继发组91例。采用限制性片段长度多态性聚合酶链反应(PCR-RFLP)检测两组患者APOA5基因多态性并比较分布情况;比较两组LPS、sPD-L1、PCT水平及Ranson评分;采用Spearman法分析血清LPS、sPD-L1、PCT水平与Ranson评分的相关性;采用受试者工作特征(ROC)曲线分析LPS、sPD-L1和PCT联合检测对SAP继发IPN的诊断价值。结果继发组APOA5基因rs619054位点AA基因型、A等位基因频率比非继发组高(P<0.05),G等位基因频率比非继发组低(P<0.05)。继发组血清LPS、sPD-L1、PCT水平及Ranson评分与非继发组比较,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman分析发现Ranson评分和血清LPS、sPD-L1、PCT水平呈正相关(r=0.738、0.701、0.721,P<0.05)。绘制ROC曲线获得三者联合检测诊断SAP继发IPN的曲线下面积(AUC)比各项单独检测高(P<0.05),敏感度90.30%,特异度84.60%。结论SAP继发IPN后LPS、sPD-L1和PCT水平呈高表达,联合检测有助于诊断SAP继发IPN。LPS、sPD-L1、PCT水平与Ranson评分相关,APOA5基因rs619054位点可能参与SAP继发IPN的发生。 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎 感染性胰腺坏死 可溶性程序死亡配体1 脂肪酶 降钙素原 载脂蛋白A5 基因多态性 受试者工作特征曲线
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酶法制备2-O-α-D-吡喃葡萄糖基-L-抗坏血酸的分离纯化工艺及抗氧化活性分析
12
作者 张秋莹 孙晶晶 +3 位作者 王伟 江承程 刘莉莉 郝建华 《现代食品科技》 北大核心 2025年第5期68-78,共11页
该研究以L-抗坏血酸和β-环糊精为底物,在海洋环糊精葡萄糖基转移酶MY20的催化下制备了2-O-α-D-吡喃葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2G),研究了其分离纯化工艺和抗氧化活性。通过使用阳离子离子交换树脂SK1B和阴离子离子交换树脂WA30,重点优... 该研究以L-抗坏血酸和β-环糊精为底物,在海洋环糊精葡萄糖基转移酶MY20的催化下制备了2-O-α-D-吡喃葡萄糖基-L-抗坏血酸(AA-2G),研究了其分离纯化工艺和抗氧化活性。通过使用阳离子离子交换树脂SK1B和阴离子离子交换树脂WA30,重点优化了阴离子交换树脂WA30分离AA-2G的工艺参数,通过响应面试验确定了最佳工艺参数为:洗脱液浓度0.15 mol/L、洗脱液流量3 mL/min、洗脱液pH值为7,在该条件下纯化AA-2G的纯度为91.23 wt.%,回收率89.92 wt.%;在此基础上,建立了多步纯化工艺,使AA-2G的纯度由最初的50.31 wt.%提高到了95.62 wt.%,纯度提高了1.90倍,回收率达到85.12 wt.%;对制备的AA-2G进行体外抗氧化性分析发现,AA-2G对超氧阴离子、羟自由基和DPPH自由基的清除率分别为91.63%、90.21%和95.20%,验证了酶法制备的AA-2G具有抗氧化活性。该研究可为高纯度AA-2G的开发提供理论依据。 展开更多
关键词 2-O-α-D-吡喃葡萄糖基-l-抗坏血酸 L-抗坏血酸 分离纯化 离子交换树脂 海洋环糊精葡萄糖基转移酶:氧化分析
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联合突变对α-L-鼠李糖苷酶性质的影响
13
作者 唐艺玲 刘小琴 +2 位作者 李乐 李利君 倪辉 《食品与生物技术学报》 北大核心 2025年第2期23-32,共10页
【目的】提升α-L-鼠李糖苷酶(EC 3.2.1.40)的催化活性、热稳定性和pH稳定性。【方法】基于已改良的单点突变体,构建了3个联合突变体:K423R-R307Y-D508N、K423R-R307Y-N561D和K389R-R307Y-N561D。【结果】相比于原始酶(wild type,WT),K4... 【目的】提升α-L-鼠李糖苷酶(EC 3.2.1.40)的催化活性、热稳定性和pH稳定性。【方法】基于已改良的单点突变体,构建了3个联合突变体:K423R-R307Y-D508N、K423R-R307Y-N561D和K389R-R307Y-N561D。【结果】相比于原始酶(wild type,WT),K423R-R307Y-D508N在温度为65、70℃时的半衰期均提高了0.24 min,在pH为7.0、8.0时的半衰期分别提高了145.64、4.91 min,但其相对酶活力仅为WT的41.01%;K423RR307Y-N561D在pH为7.0、8.0时的半衰期分别提高了51.42、20.65 min,相对酶活力为WT的63.26%;K389R-R307Y-N561D的相对酶活力是WT的167.20%,在温度为65、70℃时的半衰期分别提高了1.60、1.34 min,但在碱性环境下的pH稳定性未发生明显变化。通过分子对接、分子动力学模拟和MM-PBSA分析发现,K389R-R307Y-N561D的催化结构域Loop区和底部部分α螺旋结构的柔性增大,使酶与底物结合更充分,提升了亲和性;但R307突变引发局部扰动,破坏氢键网络及π-π疏水相互作用,导致结构稳定性下降。【结论】联合突变触发位点补偿机制是α-L-鼠李糖苷酶催化活性与结构稳定性难以协同提升的主要原因。 展开更多
关键词 α-l-鼠李糖苷酶 联合突变 位点组合效应 分子动力学模拟
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支链氨基酸通过Stat3通路双向调控3T3-L1前脂肪细胞分化
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作者 蔡兴华 高洁 +5 位作者 徐媛颖 张会会 买热艳木·肉孜 沙雯君 鲁郡 雷涛 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第3期494-501,共8页
目的 探讨不同浓度支链氨基酸(BCAA)对3T3-L1前体脂肪细胞分化的作用及其机制。方法 将3T3-L1前体脂肪细胞分为空白对照(Control)组、分化介质(DM)组、低浓度BCAA组和高浓度BCAA组;CCK-8法检测不同浓度BCAA对前脂肪细胞存活率的影响;油... 目的 探讨不同浓度支链氨基酸(BCAA)对3T3-L1前体脂肪细胞分化的作用及其机制。方法 将3T3-L1前体脂肪细胞分为空白对照(Control)组、分化介质(DM)组、低浓度BCAA组和高浓度BCAA组;CCK-8法检测不同浓度BCAA对前脂肪细胞存活率的影响;油红O染色观察各组脂肪细胞脂滴形成情况;酶法检测细胞内三酰甘油(TG)和总胆固醇(TC)含量;RT-qPCR和Western blot检测Stat3和脂肪细胞分化相关基因mRNA和蛋白表达情况。结果 CCK-8结果显示,当BCAA浓度≤10 mmol/L时,3T3-L1细胞的存活率不受BCAA的影响。与DM组相比,低浓度BCAA组(0.5、1.0 mmol/L)细胞内脂滴明显增大、脂滴数目明显增加,且细胞内TC(0.88 vs 0.68 mmol/g;0.83 vs 0.68 mmol/g,P<0.01)和TG水平(0.77 vs 0.40 mmol/g;0.62 vs 0.40 mmol/g,P<0.01)明显上升;而高浓度BCAA组(5.0、10.0 mmol/l)细胞分化较DM组明显下降。RT-qPCR和Western blot检测显示低浓度BCAA组PPARγ、C/EBPα、Adiponectin、FABP4的mRNA和蛋白表达均明显上升,而高浓度BCAA组上述基因表达均明显下降(P<0.01)。此外,低浓度BCAA促进Stat3磷酸化水平,而高浓度BCAA抑制其磷酸化水平(P<0.01)。结论 BCAA通过Stat3双向调控前脂肪细胞脂肪分化,即低浓度BCAA可通过促进Stat3磷酸化水平诱导其向成熟脂肪细胞分化;而高浓度BCAA则抑制Stat3磷酸化及细胞分化。 展开更多
关键词 BCAA 3T3-l1 脂肪细胞分化 STAT3 脂肪生成 肥胖
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山羊痘病毒融合蛋白P32-L1R的原核表达及多克隆抗体制备
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作者 王永璇 胡茜 +6 位作者 胡鹏飞 瞿正文 朱二鹏 王乃秀 文明 肖琨 程振涛 《动物医学进展》 北大核心 2025年第10期49-55,共7页
为了对山羊痘病毒(Goatpox virus,GTPV)的截短融合结构蛋白P32-L1R进行生物信息学分析、原核表达及制备多克隆抗体,使用多种生物信息学工具对P32-L1R进行预测,利用SDS-PAGE与Western blot对P32-L1R重组蛋白进行鉴定,以纯化后的P32-L1R免... 为了对山羊痘病毒(Goatpox virus,GTPV)的截短融合结构蛋白P32-L1R进行生物信息学分析、原核表达及制备多克隆抗体,使用多种生物信息学工具对P32-L1R进行预测,利用SDS-PAGE与Western blot对P32-L1R重组蛋白进行鉴定,以纯化后的P32-L1R免疫BALB/c小鼠进行多克隆抗体制备,通过间接ELISA方法及Western blot技术检测制备抗体的效价和免疫反应性。结果显示,P32-L1R由458个氨基酸组成,相对分子质量为51 ku;偏碱性,原子组成为C _(2283) H_( 3614) N _(594 )O _(707 )S_( 17);是稳定亲水蛋白;无跨膜结构域无信号肽,包含16个抗原决定簇,共有57个磷酸化位点和3个N-糖基化位点;二级结构主要由α-螺旋、β-转角、延伸链及无规则卷曲组成。将pCold I-P32-L1R转化到大肠埃希氏菌中,诱导表达重组蛋白P32-L1R,该重组蛋白主要以包涵体的形式存在;免疫Balb/c小鼠后产生的多克隆抗体效价为1∶819200。研究结果为建立GTPV检测方法及开发GTPV亚单位疫苗提供了参考。 展开更多
关键词 山羊痘病毒 P32-l1R 原核表达 多克隆抗体
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加味温胆汤对3T3-L1脂肪细胞糖脂代谢及PI3K/Akt/FOXO1信号通路的影响
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作者 张凯茵 姚凤云 +6 位作者 韩瑶瑶 姜劼琳 王琳 李雯 杨红芳 张桓源 崔言坤 《中成药》 北大核心 2025年第10期3242-3248,共7页
目的探讨不同剂量加味温胆汤对3T3-L1脂肪细胞分化及PI3K/Akt/FOXO1糖脂代谢通路的影响。方法CCK-8法筛选加味温胆汤含药血清浓度。将从3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成的3T3-L1脂肪细胞分为空白组、模型组、罗格列酮组(10 mg/L)和加味温胆... 目的探讨不同剂量加味温胆汤对3T3-L1脂肪细胞分化及PI3K/Akt/FOXO1糖脂代谢通路的影响。方法CCK-8法筛选加味温胆汤含药血清浓度。将从3T3-L1前脂肪细胞诱导分化成的3T3-L1脂肪细胞分为空白组、模型组、罗格列酮组(10 mg/L)和加味温胆汤低、中、高剂量组(5%、10%、20%),给予不同浓度血清干预48 h后收集样本。油红O染色检测脂质积累,葡萄糖氧化酶(GOD)法检测细胞葡萄糖消耗量,RT-qPCR法检测细胞IRS-1、PI3K、Akt、GLUT4、IL-6、TNF-α、IL-1βmRNA表达,Western blot法检测细胞INSR、IRS-1、PI3K-p85、Akt、FOXO1、GLUT4蛋白表达。结果不同浓度加味温胆汤含药血清干预3T3-L1前脂肪细胞24、48、72 h后,对细胞活性无显著影响(P>0.05)。3T3-L1前脂肪细胞可在14 d内诱导为成熟脂肪细胞。与模型组比较,加味温胆汤各剂量组脂肪细胞脂质积累减少,IRS-1、IL-6、TNF-α、IL-1βmRNA表达降低(P<0.01);加味温胆汤低剂量组PI3K、GLUT4 mRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),INSR、IRS-1、PI3K-p85、Akt、GLUT4蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01);加味温胆汤中剂量组GLUT4 mRNA表达升高(P<0.01),INSR、FOXO1蛋白表达升高(P<0.05);加味温胆汤高剂量组干预24 h后,脂肪细胞葡萄糖消耗量增加(P<0.01),INSR、Akt、FOXO1蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01)。结论加味温胆汤可减少脂肪细胞脂质积累,激活PI3K/Akt/FOXO1信号通路,调节糖脂代谢,促进脂肪细胞代谢稳态。 展开更多
关键词 加味温胆汤 3T3-l1脂肪细胞 肥胖 糖脂代谢 PI3K/Akt/FOXO1信号通路
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P-V-L键理论在微波介质陶瓷性能调控中的应用
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作者 胡智超 杨鸿宇 +3 位作者 杨鸿程 孙成礼 杨俊 李恩竹 《无机材料学报》 北大核心 2025年第6期609-626,共18页
目前通信技术的飞速发展对介质陶瓷滤波器提出了越来越严苛的要求,如何高效设计新的介质材料以推动其发展意义重大。材料结构与性能之间的关系对于微波介质陶瓷的合成与设计至关重要。P-V-L键理论旨在通过计算提供晶体结构参数和基本化... 目前通信技术的飞速发展对介质陶瓷滤波器提出了越来越严苛的要求,如何高效设计新的介质材料以推动其发展意义重大。材料结构与性能之间的关系对于微波介质陶瓷的合成与设计至关重要。P-V-L键理论旨在通过计算提供晶体结构参数和基本化学键特征,例如化学键的键离子性、键共价性、键敏感性、晶格能、键能等,这些参数为微波介质陶瓷的改性设计提供了理论基础和指导。近年来,研究人员致力于将P-V-L键理论运用到众多陶瓷体系中,解释微波介质陶瓷结构与性能之间的关系,并以此理论为基础提出新的改性策略,从而获得优异的微波介电性能。本文详细介绍了P-V-L键理论的基本概念和复杂多晶的二元键合公式,概述了该理论在微波介质陶瓷领域中针对化学键参数和化学键特征的计算方法,同时分析了近年来P-V-L键理论在几类常见微波介质陶瓷体系中的应用。通过P-V-L键理论分析可以提供离子掺杂改性体系中的键特征、结构演变和介电性能,这对于微波介质陶瓷的发展和应用具有重要意义。 展开更多
关键词 微波介质陶瓷 晶体结构 P-V-l键理论 应用 综述
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基于NF-κB/NLRP3信号通路探讨香青兰总黄酮对ox-LDL诱导RAW264.7巨噬细胞炎症反应的影响
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作者 赵云丽 黄川生 +3 位作者 郭新红 曹文疆 袁勇 王新春 《中成药》 北大核心 2025年第2期413-420,共8页
目的研究香青兰总黄酮(TFDM)通过调节核因子κB(NF-κB)/NOD样受体家族3(NLRP3)信号通路减轻ox-LDL诱导RAW264.7巨噬细胞炎症反应的作用。方法体外培养RAW264.7巨噬细胞,将其分为正常组、模型组(50μg/mL ox-LDL)、香青兰总黄酮组(100μ... 目的研究香青兰总黄酮(TFDM)通过调节核因子κB(NF-κB)/NOD样受体家族3(NLRP3)信号通路减轻ox-LDL诱导RAW264.7巨噬细胞炎症反应的作用。方法体外培养RAW264.7巨噬细胞,将其分为正常组、模型组(50μg/mL ox-LDL)、香青兰总黄酮组(100μg/mL TFDM+50μg/mL ox-LDL)、NF-κB抑制剂组(10μmol/L Bay11-7821+50μg/mL ox-LDL)、香青兰总黄酮+抑制剂组(100μg/mL TFDM+10μmol/L Bay11-7821+50μg/mL ox-LDL)。采用CCK-8法检测细胞活力,试剂盒测定ROS表达,RT-qPCR法检测细胞NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、IL-18和IL-1βmRNA表达,Western blot法检测细胞NF-κB p65、IκBα、NLRP3、pro-Caspase-1、Caspase-1、IL-18和IL-1β蛋白表达,免疫荧光法检测细胞NF-κB p65和NLRP3蛋白表达。结果与正常组比较,模型组细胞ROS表达升高(P<0.01),NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、IL-18和IL-1βmRNA表达升高(P<0.05,P<0.01),IκBα、胞浆NF-κB p65蛋白表达降低(P<0.01),细胞核NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白表达升高(P<0.01),NF-κB p65和NLRP3蛋白荧光强度增强(P<0.01)。与模型组比较,香青兰总黄酮组和香青兰总黄酮+抑制剂组ROS表达降低(P<0.01);香青兰总黄酮组、NF-κB抑制剂组和香青兰总黄酮+抑制剂组NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、IL-18和IL-1βmRNA表达降低(P<0.05,P<0.01),IκBα、胞浆NF-κB p65蛋白表达升高(P<0.05,P<0.01),细胞核NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白表达降低(P<0.05,P<0.01),NF-κB p65和NLRP3蛋白荧光强度减弱(P<0.01)。与香青兰总黄酮组比较,NF-κB抑制剂组各指标无明显变化(P>0.05),香青兰总黄酮+抑制剂组IL-1β和IL-18 mRNA表达降低(P<0.05),IκBα蛋白表达升高(P<0.05),细胞核NF-κB p65、NLRP3、Caspase-1、IL-1β和IL-18蛋白表达降低(P<0.05),NLRP3蛋白免疫荧光强度减弱(P<0.05)。结论香青兰总黄酮可抑制ox-LDL诱导的RAW264.7巨噬细胞炎症反应,该作用可能与减少ROS和炎症因子的表达,抑制NF-κB/NLRP3信号通路的活化有关。 展开更多
关键词 香青兰总黄酮 ox-lDL RAW264.7巨噬细胞 炎症反应 NF-κB/NLRP3信号通路
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基于UPLC-Q TOF-MS/MS探究泽泻醇G对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂质代谢的影响
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作者 苏代丰 张鸿燕 +5 位作者 周洁 林亚娟 郭琳娟 曾雪锦 陈全成 张伟云 《药物分析杂志》 北大核心 2025年第8期1347-1359,共13页
目的:探讨泽泻醇G(alisol G,AC)对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂质代谢的影响。方法:使用胰岛素、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、地塞米松联合诱导的方法,建立3T3-L1前脂肪细胞分化为模型,加入AG介导后,采用油红O染色法对细胞脂质累积进行分析... 目的:探讨泽泻醇G(alisol G,AC)对3T3-L1前脂肪细胞分化过程中脂质代谢的影响。方法:使用胰岛素、3-异丁基-1-甲基黄嘌呤、地塞米松联合诱导的方法,建立3T3-L1前脂肪细胞分化为模型,加入AG介导后,采用油红O染色法对细胞脂质累积进行分析,测定细胞内相对脂质、甘油三酯(TG)总胆固醇(TC)的含量,并采用超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q TOF-MS/MS)技术分析脂质组的变化及脂质代谢通路的影响。结果:5 mol·L^(-1)和10 mol·L^(-1) AG显著地降低了3T3-L1前脂肪细胞分化过程中的TG、TC含量(P<0.01)。经细胞脂质组学分析后,筛选到的差异脂质代谢物主要为脂肪酸(FA)类和甘油磷脂(GP)类物质,KEGG富集分析发现AG主要通过不饱和脂肪酸的合成、糖基磷脂酰肌醇锚定生物合成、甘油磷脂代谢等代谢通路影响3T3-L1前脂肪细胞分化过程中的脂质代谢。结论:AG在一定程度上抑制了3T3-L1前脂肪细胞分化,说明AG有改善脂质代谢紊乱的潜力。脂质组学结果表明,AG可以调节脂肪细胞FA、GP类代谢物的水平,从而改善脂肪分化过程中脂质代谢异常的状态。 展开更多
关键词 泽泻醇G 脂质代谢紊乱 3T3-l1前脂肪细胞分化 脂质组学 超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱
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枸杞多糖对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化的影响
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作者 王晓娟 杨晨晨 +3 位作者 齐玮瑜 姜宇宸 李相辰 张莉 《中兽医医药杂志》 2025年第1期26-31,共6页
枸杞多糖(L.barbarum polysaccharides,LBP)具有抗氧化、降血糖、降血脂、免疫调节等多种功效,然而枸杞多糖在细胞水平上对脂肪细胞分化过程的影响及具体的作用机制,目前尚无深入研究。本研究旨在初步探讨枸杞多糖在3T3-L1前脂肪细胞分... 枸杞多糖(L.barbarum polysaccharides,LBP)具有抗氧化、降血糖、降血脂、免疫调节等多种功效,然而枸杞多糖在细胞水平上对脂肪细胞分化过程的影响及具体的作用机制,目前尚无深入研究。本研究旨在初步探讨枸杞多糖在3T3-L1前脂肪细胞分化中的作用及其机制。试验采用“经典鸡尾酒法”诱导3T3-L1前脂肪细胞,在细胞接触抑制后2 d(分化第0天),加入诱导剂及不同浓度的枸杞多糖(100µg/mL、200µg/mL、400µg/mL)处理细胞,对照组则不加入药物,分化至第12天时,通过油红O染色分析3T3-L1细胞脂肪积累情况,并采用生化法检测3T3-L1细胞中甘油三酯(TG)的含量;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)、脂肪酸合成酶(FAS)及激素敏感性脂肪酶(HSL)蛋白的表达水平。结果表明,不同浓度的枸杞多糖均能够显著降低3T3-L1细胞中脂滴与甘油三酯的含量(P<0.05),极显著下调PPARγ和FAS蛋白的表达水平(P<0.01),极显著上调HSL蛋白的表达水平(P<0.01)。结果提示,枸杞多糖能够有效抑制3T3-L1前脂肪细胞的分化,减少脂肪细胞的生成和脂质积累,其潜在机制可能与抑制PPARγ相关通路的蛋白表达密切相关。 展开更多
关键词 枸杞多糖 3T3-l1前脂肪细胞 分化 过氧化物酶体增殖物激活受体Γ 脂肪酸合成酶 激素敏感性脂肪酶
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