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病原靶向高通量测序技术质量评价联合研究
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作者 刘东来 王婧 +4 位作者 关文达 任珊珊 赵兰青 鲁炳怀 许四宏 《中国食品药品监管》 2025年第3期92-103,共12页
目的:开展病原靶向高通量测序(t NGS)技术质量评价联合研究,以期了解我国病原t NGS试剂的性能现状并梳理质量控制要点,为推动该技术的规范发展提供参考。方法:参加单位使用按照体外诊断试剂研发的t NGS试剂,对包含30种病原微生物的参考... 目的:开展病原靶向高通量测序(t NGS)技术质量评价联合研究,以期了解我国病原t NGS试剂的性能现状并梳理质量控制要点,为推动该技术的规范发展提供参考。方法:参加单位使用按照体外诊断试剂研发的t NGS试剂,对包含30种病原微生物的参考品进行检测并回报结果,用于分析t NGS技术选型的特点及检测性能。结果:共有11款t NGS试剂符合技术资料完整性要求,且完成参考品的检测并回报数据。其中,9款试剂的靶向技术路线为多重扩增法,2款为探针捕获法;测序技术路线包括3种测序平台的5款测序仪;各试剂的检测病原谱范围为30~706个。11款t NGS试剂的总体性能表现为:阳性符合率的中位值为88%(67%~100%),阴性符合率的中位值为91%(75%~100%),变异系数的中位值为50%(17%~69%),对于1×10^(3)CFU/ml和1×10^(2)CFU/ml(或1×10^(3)copies/ml和1×10^(2)copies/ml)浓度水平病原微生物的检出率分别为79%(48%~100%)和62%(21%~96%),线性相关系数为0.44(0.18~0.82)。与17款病原宏基因组高通量测序(m NGS)试剂相比,t NGS试剂的阳性符合率无显著差异,样本交叉污染问题对t NGS试剂阴性符合率的影响较大。结论:本次联合研究表明,现阶段不同t NGS试剂的技术选型和性能差异较大,总体性能表现与2019年m NGS试剂相近。 展开更多
关键词 病原靶向高通量测序 病原宏基因组高通量测序 质量控制与评价
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基于高通量测序的青花菜KASP标记开发与应用 被引量:1
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作者 张振超 陶美奇 +4 位作者 潘永飞 孙国胜 王传友 安林海 戴忠良 《核农学报》 北大核心 2025年第3期513-521,I0003-I0005,共12页
为提高青花菜分子标记辅助育种水平,本研究基于高通量测序数据开发了70组KASP标记,并采用KASP检测平台对43份青花菜试验材料进行分型,根据分型结果筛选出分型效果好、多态性高的标记,用于指纹图谱构建、遗传关系确定和纯度鉴定。结果表... 为提高青花菜分子标记辅助育种水平,本研究基于高通量测序数据开发了70组KASP标记,并采用KASP检测平台对43份青花菜试验材料进行分型,根据分型结果筛选出分型效果好、多态性高的标记,用于指纹图谱构建、遗传关系确定和纯度鉴定。结果表明,70组KASP标记中,未分型成功有3个,未分型材料>5份有13个,多态性差的有6个,分型成功48个(成功率68.6%)。48个标记中,多态性信息含量(PIC)值≥0.30的标记有37个(占比77.08%),其中PIC值为0.37的标记数量最多,为11个,0.38的标记有3个。将48个标记的分型结果转化为二元编码数据,获得了43份青花菜育种材料的SNP-DNA指纹图谱。聚类分析结果发现,Br05与其他材料的遗传关系较远;Br12和Br19、Br33和Br34之间遗传系数均为100,Br14和Br32的遗传系数为99,表明两两间为同一株系的可能性大,这与在田间的表型观察结果基本一致。10组标记对30株Br19的一致性进行鉴定,发现纯度值区间为83.3%~96.7%,说明Br19株系间存在差异;采用10组标记对亲本Br19、Br35和杂交种F1(Br19×Br35)进行基因分型,结果有5个标记(SNP07、SNP09、SNP10、SNP11和SNP19)在三者间的分型结果不同,可用于杂交制种田F1(Br19×Br35)种子纯度鉴定。本研究结果对青花菜种质资源鉴定、分子标记辅助育种与新品种保护具有重要的应用价值。 展开更多
关键词 高通量测序 竞争性等位基因特异性PCR 指纹图谱 纯度鉴定 分子标记
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基于高通量测序技术对口腔扁平苔藓患者相关癌变差异LncRNAs的筛选与分析 被引量:2
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作者 董文亮 黄一丹 +2 位作者 郭文卓 杨慧霞 张敬 《实用口腔医学杂志》 北大核心 2025年第1期80-87,共8页
目的:筛选并分析口腔扁平苔藓(OLP)黏膜组织的长链非编码RNAs(LncRNAs)的癌变相关差异性表达谱,并对其功能进行初步分析,探索其在OLP发生发展过程中可能的作用。方法:收集OLP(糜烂型)病损黏膜组织和正常黏膜组织各5例,应用高通量测序技... 目的:筛选并分析口腔扁平苔藓(OLP)黏膜组织的长链非编码RNAs(LncRNAs)的癌变相关差异性表达谱,并对其功能进行初步分析,探索其在OLP发生发展过程中可能的作用。方法:收集OLP(糜烂型)病损黏膜组织和正常黏膜组织各5例,应用高通量测序技术构建OLP中基因差异表达谱,生物信息学分析得到与口腔扁平苔藓癌变关系密切的LncRNAs。结果:筛选获得400个与OLP相关的LncRNAs,其中250个表达上调,150个表达下调,得到5个与口腔扁平苔藓癌变相关的差异表达LncRNAs:54055、100128560、399717、378825、100130231。结论:筛选得到的OLP病损黏膜中差异表达LncRNAs400个,发现其中5个LncRNAs可能与OLP发病、癌变倾向相关。 展开更多
关键词 长链非编码RNAs 口腔扁平苔藓 高通量测序 生物信息学分析 癌变
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基于16S rRNA高通量测序的驻岛人员肠道菌群分析
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作者 吴浩 谢沛 +4 位作者 张菂 黄文 李兆申 薛芊 鞠金涛 《海军军医大学学报》 北大核心 2025年第3期400-405,共6页
目的分析驻岛人员肠道菌群特征,为维护驻岛人员的肠道微生态平衡及提供精准的医疗保障奠定基础。方法采用随机抽样的方法纳入驻岛人员若干,同时纳入沿海地区人员若干作为对照,对人员粪便标本进行16S rRNA高通量测序。比较两组人员肠道... 目的分析驻岛人员肠道菌群特征,为维护驻岛人员的肠道微生态平衡及提供精准的医疗保障奠定基础。方法采用随机抽样的方法纳入驻岛人员若干,同时纳入沿海地区人员若干作为对照,对人员粪便标本进行16S rRNA高通量测序。比较两组人员肠道菌群多样性及菌群组成差异。结果肠道菌群alpha多样性分析显示驻岛人员肠道菌群丰度较沿海地区人员升高,beta多样性分析提示驻岛人员肠道微生物群落构成与沿海地区人员相比差异有统计学意义(P=0.001)。驻岛人员肠道内拟杆菌门丰度低于沿海地区人员(30.8%vs 48.3%,P<0.001),而肠道内变形菌门丰度高于沿海地区人员(28.3%vs 10.2%,P<0.001)。经多重假设检验校正后发现,驻岛人员肠道内拟杆菌属、罗斯氏菌属、另枝菌属、副拟杆菌属丰度显著下降,普雷沃氏菌属、大肠埃希菌-志贺菌属、柠檬酸杆菌属、产粪甾醇真杆菌属丰度显著提升。结论海岛特殊环境影响驻岛人员肠道菌群特征,肠道微生态健康亟需精准保障。 展开更多
关键词 驻岛人员 海岛 肠道菌群 16S rRNA 高通量测序
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宏基因组高通量测序辅助诊断日本斑点热一例
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作者 阮永春 周宜庆 +4 位作者 张海旺 周洁 段金楠 张晓静 李明晖 《中国医学科学院学报》 北大核心 2025年第1期146-149,共4页
日本斑点热是由日本立克次体感染引起的一种自然疫源性疾病,临床症状缺乏特异性,易误诊。本文报道1例日本斑点热病例,采用宏基因组高通量测序技术在血细胞中检出日本立克次体,经多西环素治疗好转,为该病的临床诊治提供参考。
关键词 日本立克次体 日本斑点热 诊断 宏基因组高通量测序
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肝棘球蚴感染与肝外胆管癌类器官生态微环境的相关性高通量测序分析
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作者 于志清 赵斌 李培武 《中国病原生物学杂志》 北大核心 2025年第1期64-70,76,共8页
目的通过16S rRNA高通量测序技术和类器官模型,探讨肝棘球蚴抗原处理对肝外胆管癌(CCA)类器官生态微环境的影响,揭示肝棘球蚴在CCA发病机制中的潜在作用。方法本研究为前瞻性对照研究,纳入60例肝外胆管癌(CCA)的患者,分为实验组(暴露于... 目的通过16S rRNA高通量测序技术和类器官模型,探讨肝棘球蚴抗原处理对肝外胆管癌(CCA)类器官生态微环境的影响,揭示肝棘球蚴在CCA发病机制中的潜在作用。方法本研究为前瞻性对照研究,纳入60例肝外胆管癌(CCA)的患者,分为实验组(暴露于肝棘球蚴抗原)和对照组(暴露于PBS),每组30例样本。通过类器官技术培养肿瘤组织样本,并使用16S rRNA高通量测序技术分析2组样本的微生物群落组成和功能基因丰度。使用线性判别分析效应量(LEfSe)方法和PICRUSt工具进行微生物群落差异分析和功能预测分析,进一步通过qPCR和细胞功能实验验证关键微生物类群和信号通路的变化。结果实验组和对照组的主要微生物门包括厚壁菌门(Firmicutes)、拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria)、放线菌门(Actinobacteria)和耐热菌门(Thermotogae)。实验组中厚壁菌门和放线菌门的丰度显著高于对照组,而拟杆菌门的丰度显著降低(P<0.05)。α多样性分析显示,实验组的Chao1指数(150.25±15.75)和Shannon指数(3.50±0.45)均显著高于对照组(Chao1指数:140.80±14.95,Shannon指数:3.31±0.40,P<0.05)。β多样性分析基于Bray-Curtis距离的主坐标分析(PCoA)和非度量多维尺度分析(NMDS)结果显示,实验组和对照组在微生物群落组成上存在显著差异(PERMANOVA:F=2.423,P<0.001)。PICRUSt分析结果显示,实验组在碳水化合物代谢(25.30%±2.50%vs 23.10%±2.40%)、能量代谢(18.75%±1.95%vs 17.50%±2.10%)、脂类代谢(15.20%±1.80%vs 14.00%±1.75%)、氨基酸代谢(12.50%±1.60%vs 11.20%±1.55%)、核苷酸代谢(10.00%±1.25%vs 9.00%±1.20%)和信号转导(8.75%±1.10%vs 7.50%±1.05%)等功能路径的基因丰度上显著高于对照组(P<0.05)。qPCR结果显示,实验组中厚壁菌门(t=2.191,P=0.033)、变形菌门(t=2.253,P=0.029)和放线菌门(t=2.311,P=0.026)的相对丰度显著增加,而拟杆菌门(t=2.432,P=0.021)和耐热菌门(t=2.732,P=0.009)的相对丰度显著降低。细胞功能实验显示,实验组在细胞增殖、迁移和侵袭能力上显著增强(P<0.05)。Spearman相关性分析表明厚壁菌门的丰度与患者年龄(r=0.452,P=0.001)和病史(r=0.322,P=0.013)呈显著正相关,与肿瘤分级呈显著负相关(r=-0.455,P=0.001),而与肿瘤分期呈显著正相关(r=0.311,P=0.024)。结论本研究通过高通量测序和功能预测分析,揭示了肝棘球蚴抗原处理对肝外胆管癌类器官微生态环境的显著影响,尤其体现在微生物群落组成和功能基因丰度的改变。 展开更多
关键词 肝棘球蚴感染 肝外胆管癌 类器官 16S rRNA高通量测序 微生物群落
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基于高通量测序的草莓白粉病和向日葵白粉病群落组成分析
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作者 张振荣 朱维贤 +4 位作者 董琼娥 钱玲 任建青 李亚平 王薇 《贵州农业科学》 2025年第3期93-100,共8页
【目的】探明相邻地点同时爆发草莓白粉病(CM)、向日葵白粉病(XRK)的微生物多样性与群落种类差异性,为研究白粉病的侵染特点和防治提供理论依据。【方法】2023年5—7月,分别取位于昆明市农业科学院嵩明基地的温室大棚草莓白粉病样品,与... 【目的】探明相邻地点同时爆发草莓白粉病(CM)、向日葵白粉病(XRK)的微生物多样性与群落种类差异性,为研究白粉病的侵染特点和防治提供理论依据。【方法】2023年5—7月,分别取位于昆明市农业科学院嵩明基地的温室大棚草莓白粉病样品,与之相隔300 m的露天爆发严重的向日葵白粉病样品,进行Illumina MiSeq高通量测序,对这2种植物感染白粉病部位表面的白粉层真菌群落组成与结构进行比较分析。【结果】在97%相似水平下物种分析和聚类显示,草莓白粉病样本群落涵盖1域1界5门17纲26目35科39属50种62个OTU的真菌;向日葵白粉病样本群落涵盖1域1界2门5纲7目10科13属13种15个OTU的真菌;草莓白粉病样本的物种丰富度高于向日葵白粉病样本;2个样本的真菌群落组成与物种在门、科和属水平上均呈显著差异。子囊菌门(Ascomycota)在2个样本的相对丰度均大于93%。草莓白粉病优势群落以枝孢科(Cladosporiaceae)枝孢属(Cladosporium)真菌为主,同时含有青霉科(Aspergillacea)青霉属(Penicillium)、白粉菌科(Erysiphaceae)叉丝单囊壳属(Podosphaera)等多种真菌微生物;向日葵白粉病优势群落由白粉菌科(Erysiphaceae)unclassified_f_Erysiphaceae真菌组成,群落组成相对单一。【结论】昆明市相邻地点同时爆发的向日葵白粉病和草莓白粉病的微生物多样性与群落种类差异极显著;草莓白粉病病原菌主要为枝孢属(Cladosporium)真菌,同时含有其他多种真菌微生物,向日葵白粉病由白粉菌科(Erysiphaceae)unclassified_f_Erysiphaceae真菌组成,群落组成相对单一,且云南省昆明市向日葵白粉病病原菌种类为白粉菌科(Erysiphaceae)真菌为首次报道。 展开更多
关键词 向日葵白粉病 草莓白粉病 真菌多样性 白粉菌科 Illumina高通量测序
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153例肺部感染患者支气管肺泡灌洗液的靶向高通量测序结果分析
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作者 朱娟娟 胡志军 +3 位作者 潘恺 杭修兵 王慧君 陈继中 《安徽医学》 2025年第10期1260-1264,共5页
目的 分析153例肺部感染患者支气管肺泡灌洗液的靶向高通量测序(tNGS)结果,探讨肺部感染相关的病原微生物谱及其分布特征。方法 回顾性分析2023年8月至2024年9月铜陵市人民医院153例肺部感染患者的支气管肺泡灌洗液样本的tNGS检测结果,... 目的 分析153例肺部感染患者支气管肺泡灌洗液的靶向高通量测序(tNGS)结果,探讨肺部感染相关的病原微生物谱及其分布特征。方法 回顾性分析2023年8月至2024年9月铜陵市人民医院153例肺部感染患者的支气管肺泡灌洗液样本的tNGS检测结果,并结合临床资料对病原微生物谱的分布进行分析。结果 153例患者中,141例患者的tNGS检测结果为阳性,阳性率为92.2%。检出细菌22种、病毒16种、真菌11种、支原体和衣原体各1种。细菌中检出频数最多的为结核分枝杆菌复合群(19.9%,28/141),病毒中检出频数最多的为EB病毒(EBV)(15.6%,22/141),真菌中检出最多的是白念珠菌(12.8%,18/141),特殊病原体中肺炎支原体检出比例最多(15.6%,22/141)。同时检出14例患者含大环内酯类抗生素耐药基因的肺炎支原体、4例含碳青霉烯酶基因的肺炎克雷伯菌以及1例含碳青霉烯酶基因的黏质沙雷菌。141例患者中,混合感染87例,非混合感染54例,混合感染中以病毒+细菌和病毒+真菌的组合最多(均为19.54%,17/87),2种或2种以上病毒组合最少(2.30%,2/87);54例非混合感染患者中,细菌感染的比例最高(50.0%,27/54),真菌感染的比例最低(5.6%,3/54)。混合性感染患者中,重症患者、合并基础性疾病的患者以及医院获得性感染的患者比例高于非混合性患者(P<0.05)。社区获得性感染检出频数前5的分别为结核分枝杆菌复合群、肺炎支原体、流感嗜血杆菌、鼻病毒和EBV;医院获得性感染检出频数前5的分别为肺炎克雷伯菌、EBV、鲍曼不动杆菌、白念珠菌和热带念珠菌。结论 支气管肺泡灌洗液tNGS检测对肺部感染患者病原体检出率较高,可在短时间同时检出多种病原体及其耐药基因,有助于及时准确地指导临床治疗。 展开更多
关键词 靶向高通量测序 肺部感染 支气管肺泡灌洗液 混合感染
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基于探针捕获法的病原靶向高通量测序检测流程的建立和验证研究
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作者 李丽莉 任珊珊 +4 位作者 王嘉平 易玉婷 田超 刘东来 许四宏 《中国药事》 2025年第4期415-429,共15页
目的:研究基于探针捕获法的病原靶向高通量测序(tNGS)检测流程的建立和优化,以及自动化的实现,并对分析性能进行验证研究。方法:分析tNGS的影响因素,包括探针设计、生产质控、数据量和测序读长等,通过采用多种细菌、真菌、病毒和非典型... 目的:研究基于探针捕获法的病原靶向高通量测序(tNGS)检测流程的建立和优化,以及自动化的实现,并对分析性能进行验证研究。方法:分析tNGS的影响因素,包括探针设计、生产质控、数据量和测序读长等,通过采用多种细菌、真菌、病毒和非典型病原体等62种微生物构建的参考盘进行分析性能评价,同时比较手工操作与自动化流程在检出限、精密度和交叉污染等性能指标的差异。结果:62种微生物不同病原浓度的准确性、检出限、精密度、特异性及线性的结果显示随着探针覆盖度的提高,目标病原的检出限性能随之提高,且仍保持较高的特异性;经优化后的tNGS检测流程在准确性、检出限、精密度、特异性、线性等方面均表现出良好的分析性能;自动化流程在检出限性能保持一致的前提下,精密度和抗交叉污染性能均优于手工操作流程。结论:研究建立的探针捕获法tNGS检测流程具有良好的分析性能,为临床病原检测提供了新策略。未来进一步研究应着重于临床样本确认、自动化流程的全面验证,以推动该技术在临床实际工作中更好的应用。 展开更多
关键词 病原靶向高通量测序 探针捕获法 分析性能 自动化
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高通量测序技术在肾移植术后肺部感染中的临床应用
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作者 丁利民 熊睿 +1 位作者 罗文峰 李新长 《现代诊断与治疗》 2025年第3期398-400,404,共4页
目的探索高通量测序技术(NGS)在肾移植术后肺部感染患者管理中的应用价值。方法回顾性分析2022年1月至2023年12月我院器官移植中心收治的20例肾移植术后肺部感染患者的临床资料,对患者住院时间、住院费用、治疗前后肌酐(Scr)、C反应蛋白... 目的探索高通量测序技术(NGS)在肾移植术后肺部感染患者管理中的应用价值。方法回顾性分析2022年1月至2023年12月我院器官移植中心收治的20例肾移植术后肺部感染患者的临床资料,对患者住院时间、住院费用、治疗前后肌酐(Scr)、C反应蛋白(CRP)、降钙素原(PCT)、CD4水平变化、肺泡灌洗液检测情况(阳性检出率、非致病菌检出率、致病菌种类)、检测费用进行总结分析,对比常规病原学培养与高通量测序技术针对肺泡灌洗液诊断的价值。结果共收集患者资料20例、标本信息22例,全部患者住院中位时间19(9~30)d,住院中位费用23952.05(14623.39~176825.69)元,感染治疗前后Scr171(78~453)vs 186(66~580)μmol/L,CRP 39.8(1~239)vs 2.41(0.25~19.9)mg/L,PCT 0.225(0.04~55)vs 0.06(0.02~0.85)ng/mL,CD4140.5(35~633)vs 395.5(112~1024)/μL。阳性检出率院内检测组vs NGS检测组为7/22(31.8%)vs20/22(90.9%)。非致病菌检出率院内组2/22(9.1%)vs NGS组6/22(27.3%)。感染病原体以耶氏肺孢子菌(8例,40%)、新型冠状病毒(7例,35%)为主。结论NGS检测可以显著提高肺泡灌洗液阳性检出率,提高感染治疗效果,对肾移植术后肺部感染患者应尽早完善NGS检测以制定个体化治疗方案。 展开更多
关键词 高通量测序 肾移植 肺部感染
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基于高通量测序技术对文冠木-4味汤混合粉末鉴定研究
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作者 敖敦格日乐 乌仁珠日哈 +4 位作者 萨其儿 马雅茹 哈布日 包桂花 拉喜那木吉拉 《亚太传统医药》 2025年第3期63-67,共5页
目的:建立基于高通量测序技术对文冠木-4味汤混合样品鉴定研究的鉴定方法。方法:采用高通量测序技术提取文冠木-4味汤混合粉末样品中的总DNA,对ITS2片段进行PCR扩增,利用Illumina MiSeq平台对DNA片段进行双端测序,最后采用FLASH、QIIME... 目的:建立基于高通量测序技术对文冠木-4味汤混合样品鉴定研究的鉴定方法。方法:采用高通量测序技术提取文冠木-4味汤混合粉末样品中的总DNA,对ITS2片段进行PCR扩增,利用Illumina MiSeq平台对DNA片段进行双端测序,最后采用FLASH、QIIME、GraPhlAn及MEGA 7.0软件对序列进行整理并聚类分析,鉴定混合粉末中的物种。结果:混合样品中得到高质量的ITS2序列共331436条,最终比对到了4个物种(文冠木、诃子、秦艽和黄柏)。采用Krona软件进行群落分类学组成的交互展示秦艽序列占有效序列总量的42%、文冠木为22%,诃子为20%、黄柏为16%。结论:以ITS2作为条形码,采用高通量测序技术可以鉴定出文冠木-4味汤混合样品中的物种,也为其混合药材的鉴定提供新思路。 展开更多
关键词 文冠木-4味汤 高通量测序技术 ITS2 混合粉末 分子鉴定
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基于高通量测序技术探讨阴道微生物群与冻融胚胎移植妊娠结局的相关性
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作者 李霞 肖沁 刘朝霞 《中国妇幼保健》 2025年第7期1247-1250,共4页
目的 采用Illumina高通量测序方法对接受冻融胚胎移植(FET)治疗女性患者的阴道菌群多样性进行分析,探讨阴道菌群对妊娠结局的影响。方法 纳入2017年1月—2017年12月在江西省九江市妇幼保健院首次行常规FET治疗的不孕患者250例作为研究对... 目的 采用Illumina高通量测序方法对接受冻融胚胎移植(FET)治疗女性患者的阴道菌群多样性进行分析,探讨阴道菌群对妊娠结局的影响。方法 纳入2017年1月—2017年12月在江西省九江市妇幼保健院首次行常规FET治疗的不孕患者250例作为研究对象,采集其阴道分泌物样本,并根据妊娠结局选取43例患者,提取阴道菌群基因组总DNA后,扩增16S rDNA V3-V4区基因,使用生物信息学软件进行数据处理。结果 临床资料分析显示,年龄与移植前子宫内膜厚度对FET的妊娠结局有显著影响,而BMI、内膜转化时LH、E2、P水平、内膜准备方案、女方染色体核型、胚胎移植数量差异无统计学意义(P>0.05)。Alpha多样性数据表明,流产(AB)组和未妊娠(NP)组阴道菌群的Chao 1指数(91.83±30.72 vs.97.87±23.31 vs.119.50±38.89)和Shannon指数(1.09±0.71 vs.2.00±1.06 vs.1.80±1.06)均明显高于妊娠活产(PR)组。Beta多样性分析结果表明PR组与AB组和NP组之间的阴道菌群差异明显。VENN图结果表明NP组的阴道菌群的物种丰度高于PR组和AB组。在门水平上,PR组Fusobacteria(0.02±0.01%vs.5.23±11.42%vs.2.04±7.28%)的相对丰度明显降低,差异有统计学意义(P<0.05),而Firmicutes(80.05±29.13%vs.69.32±32.41%vs.74.48±24.77%)、Proteobacteria(9.23±9.30%vs.9.03±8.40%vs.7.61±5.00%)及Bacteroidetes(0.26±0.90%vs.2.22±4.30%vs.3.31±7.67%)的相对丰度无明显差异。在属水平上,与PR组相比,AB组及NP组阴道“益生菌”Lactobacillus(73.28±36.64%vs.62.55±40.98%vs.61.97±38.23%)的相对丰度下降和“致病菌”Gardnerella(5.68±19.97%vs.9.52±13.41%vs.7.10±11.75%)、Atopobium(0.17±0.74%vs.3.40±5.92%vs.4.50±7.60%)、Sneathia(0.00±0.00%vs.5.22±11.43%vs.2.04±7.28%)、Prevotella(0.23±0.10%vs.2.21±4.27%vs.3.27±7.69%)的相对丰度明显增加。结论 阴道微生物群与FET妊娠结局之间存在密切联系。移植后NP组及AB组患者阴道微生物群物种丰度增加,并以益生菌减少和致病菌过度生长为特征,为预测FET妊娠结局提供了一种新的思路。 展开更多
关键词 阴道菌群 高通量测序 不孕症 辅助生殖技术
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高通量测序技术检测和实验室常规培养在肺泡灌洗液中细菌检出的应用效果
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作者 戚丽敏 《中国医药指南》 2025年第5期124-127,共4页
目的对高通量测序(NGS)技术检测和实验室常规培养在肺泡灌洗液中细菌检出的应用效果进行分析。方法选择睢宁县人民医院2022年1月至2024年6月收治的89例重症肺部感染患者,对患者进行肺泡灌洗液采集,所选患者均接受实验室常规培养、NGS技... 目的对高通量测序(NGS)技术检测和实验室常规培养在肺泡灌洗液中细菌检出的应用效果进行分析。方法选择睢宁县人民医院2022年1月至2024年6月收治的89例重症肺部感染患者,对患者进行肺泡灌洗液采集,所选患者均接受实验室常规培养、NGS技术,以细菌培养结果为金标准分析NGS技术和实验室常规培养在肺部感染患者细菌性病原体检出中诊断效能。结果89例患者中,经金标准诊断诊为细菌性肺部感染患者78例,实验室痰培养提示细菌阳性患者76例,NGS技术提示细菌阳性的患者79例;NGS技术的准确度、灵敏度、阴性预测值高于常规培养(均P<0.05),两种检测方式的特异、阳性预测值对比,差异无统计学意义(P>0.05);NGS检测平均时间短于实验室常规培养,检测细菌种类高于实验室常规培养(均P<0.05)。结论NGS技术在准确度、灵敏度和阴性预测值方面表现更优,且检测平均时间更短、能检测出更多种类的细菌,如对于需要快速诊断、检测低载量细菌或混合感染可能性高的情况,NGS技术可能更具优势。 展开更多
关键词 高通量测序技术 常规培养 肺泡灌洗液 细菌检出 诊断效能 时间
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基于形态学和高通量测序的春季南澳海域浮游植物群落特征及其与环境因子关系 被引量:3
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作者 周志希 唐汇娟 +2 位作者 柯志新 刘甲星 周伟华 《热带海洋学报》 北大核心 2025年第1期53-65,共13页
利用形态学鉴定和高通量测序技术,对2022年5月南澳海域浮游植物群落结构进行了研究,探讨其空间分布与环境因子的关系,并对两种不同方法得出的结果进行了比较和讨论。根据环境因子聚类分析,调查海域可分为近岸区域和远岸区域。通过形态... 利用形态学鉴定和高通量测序技术,对2022年5月南澳海域浮游植物群落结构进行了研究,探讨其空间分布与环境因子的关系,并对两种不同方法得出的结果进行了比较和讨论。根据环境因子聚类分析,调查海域可分为近岸区域和远岸区域。通过形态学方法鉴定浮游植物5门8纲27目39科52属10^(5)种,高通量测序鉴定出6门32纲97目155科272属543种,其中硅藻门(Bacillariophyta)和甲藻门(Dinophyta)为优势类群,分别平均占形态学鉴定结果的74.54%和24.78%以及高通量测序结果的17.52%和67.84%。形态学鉴定结果显示浮游植物丰度变化范围为0.11×10^(5)~6.85×10^(5)cells·L^(-1),与叶绿素a浓度分布显著相关,浮游植物多样性指数低于高通量测序方法。两种方法得到优势种均为7种,其中形态学鉴定结果中绝对优势种为扁面角毛藻(Chaetoceros compressus),高通量测序鉴定结果中绝对优势种为球形异帽藻(Heterocapsa rotundata)。相关性分析结果表明,春季影响南澳浮游植物群落结构的主要环境因子是pH、盐度和溶解态无机磷。利用形态学鉴定与高通量测序技术相结合的方法,可以更全面、更准确地描述浮游植物群落结构及多样性。 展开更多
关键词 南澳 浮游植物 群落结构 高通量测序 环境因子
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高通量测序在柑橘病毒鉴定与种群多样性分析中的应用 被引量:1
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作者 李向 杨进 +2 位作者 黄爱军 周俊 易龙 《果树学报》 北大核心 2025年第3期651-661,共11页
中国柑橘产业在全球占据至关重要的地位,然而,柑橘病毒病却给该产业带来了严重的经济损失。随着病毒种类的不断增多,快速、准确地对病毒进行鉴定及遗传多样性分析变得愈发关键。高通量测序(High-Throughput Sequencing,HTS)技术,具有高... 中国柑橘产业在全球占据至关重要的地位,然而,柑橘病毒病却给该产业带来了严重的经济损失。随着病毒种类的不断增多,快速、准确地对病毒进行鉴定及遗传多样性分析变得愈发关键。高通量测序(High-Throughput Sequencing,HTS)技术,具有高通量、高效快速以及效益高的优势,逐渐成为了鉴定柑橘病毒的核心技术手段。HTS技术的应用不仅成功揭示了多种新病毒的存在,还深入挖掘了已知病毒的全基因组信息,提供了大量的基因序列数据,极大地推动了柑橘病毒在遗传变异、进化关系以及生态系统作用等方面的研究。展望未来,随着技术的发展和优化,HTS将在柑橘病毒鉴定与种群多样性分析中发挥更为重要的作用,为柑橘产业的可持续发展提供坚实的支撑。综述了HTS技术在柑橘病毒检测与鉴定,以及种群多样性分析方面的最新进展,并深入探讨了当前面临的挑战、未来的发展前景及其意义。 展开更多
关键词 柑橘 高通量测序技术 柑橘病毒 种群多样性分析
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基于16S rRNA高通量测序技术检测结肠息肉湿热瘀阻证患者肠道菌群多样性 被引量:3
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作者 胡海荣 许冰 +5 位作者 刘苗 陈默岩 祁欢 徐婧 毛堂友 王梁敏 《中华医院感染学杂志》 北大核心 2025年第1期30-34,共5页
目的探究湿热瘀阻证结肠息肉患者与健康人肠道菌群结构的差异性,为探索湿热瘀阻证结肠息肉的生物学基础提供理论。方法纳入2022年3-9月就诊于北京中医药大学东方医院病房的结肠息肉患者32例,辨证属湿热瘀阻证;同期纳入体检中心健康人32... 目的探究湿热瘀阻证结肠息肉患者与健康人肠道菌群结构的差异性,为探索湿热瘀阻证结肠息肉的生物学基础提供理论。方法纳入2022年3-9月就诊于北京中医药大学东方医院病房的结肠息肉患者32例,辨证属湿热瘀阻证;同期纳入体检中心健康人32名,收集粪便后,采用16Sr RNA高通量测序技术进行菌群分析。结果与健康组比较,湿热瘀阻证结肠息肉组shannon指数(2.55±0.94)降低(P<0.05),而simpson指数(2.23±0.22)显著升高(P<0.05)。门水平上,两组均以厚壁菌门、变形菌门、放线菌门、拟杆菌门为主,其中湿热瘀阻证结肠息肉组的放线菌门较健康人群明显降低(P<0.05);属水平上,双歧杆菌属(Bifidobacterium)、罕见小球菌属(Subdoligranulum)、Agathobacter、Fusicatenibacter、粪杆菌属(Faecalibacterium)、丁酸球菌属(Butyricicoccus)等益生菌明显减少(P<0.05);而瘤胃球菌(Ruminococcus_gnavus)、克里斯滕森菌(Christensenellaceae R-7)、Hungatella等有害菌则显著增加(P<0.05)。结论湿热瘀阻证结肠息肉患者的肠道菌群与健康人群存在较大差异,主要表现为益生菌明显减少,而有害菌明显富集,提示湿热瘀阻证结肠息肉患者存在明显的肠道微生态失调,靶向调节肠道菌群将是防治结肠息肉的主要策略。 展开更多
关键词 结肠息肉 肠道菌群 16Sr RNA高通量测序 湿热瘀阻证 多样性
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利用高通量测序分析冷鲜羊肉优势腐败菌群及相关抑菌剂效价评定 被引量:1
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作者 温蕾 马艳丽 +6 位作者 柳尧波 王维婷 杜鹏飞 胡鹏 曹建芳 李永生 贺红军 《食品研究与开发》 2025年第4期149-154,共6页
为研究天然抑菌剂对冷鲜羊肉优势腐败菌的抑菌效力并筛选靶向抑菌剂,首先采用高通量测序法分析冷鲜羊肉在4℃贮藏过程中腐败菌的演替规律,然后针对性的选择两种醛类(柠檬醛和肉桂醛)天然抑菌剂,通过测定抑菌圈大小、最小抑菌浓度对比其... 为研究天然抑菌剂对冷鲜羊肉优势腐败菌的抑菌效力并筛选靶向抑菌剂,首先采用高通量测序法分析冷鲜羊肉在4℃贮藏过程中腐败菌的演替规律,然后针对性的选择两种醛类(柠檬醛和肉桂醛)天然抑菌剂,通过测定抑菌圈大小、最小抑菌浓度对比其对冷鲜羊肉腐败菌的抑制效果。结果表明,主要腐败菌为嗜冷假单胞菌(Pseudomonas psychrophila)、热杀索丝菌(Brochothrix thermosphacta)、溶酪葡萄球菌(Macrococcus caseolyticus)、不动杆菌(Acinetobacter)、养料嗜冷杆菌(Psychrobacter cibarius)。肉桂醛对各受试菌的抑菌能力更加显著,最小抑菌浓度为0.08~2.50 mg/mL。 展开更多
关键词 冷鲜羊肉 高通量测序 菌株鉴定 优势腐败菌 柠檬醛 肉桂醛
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基于高通量测序技术分析藏药浴发酵酒曲微生物群落结构及多样性 被引量:1
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作者 栗果 禄玉冰 +4 位作者 樊伊琳 赵有玺 段辉琴 张元 薛蓓 《高原农业》 2025年第2期211-222,共12页
本研究利用高通量测序技术对藏药浴发酵酒曲微生物群落结构组成及优势菌群的相对丰度进行研究和分析。结果表明,在属分类水平上,9组藏药浴发酵酒曲样品的细菌属富含丰富的微生物类群,而真菌属微生物群落丰富度较小。所有样品组共有的优... 本研究利用高通量测序技术对藏药浴发酵酒曲微生物群落结构组成及优势菌群的相对丰度进行研究和分析。结果表明,在属分类水平上,9组藏药浴发酵酒曲样品的细菌属富含丰富的微生物类群,而真菌属微生物群落丰富度较小。所有样品组共有的优势细菌门为变形菌门和厚壁菌门,优势菌属为醋杆菌属、明串珠菌属等;优势真菌门为子囊菌门,优势菌属为覆膜孢酵母属。结论:西藏同一地区藏药浴发酵酒曲中的微生物群落构成存在差异,且相同菌门的相对丰度也有显著差异。本研究全面分析了藏药浴发酵酒曲中各类优势菌群和微生物群落结构比例,对推动西藏地区民族特色藏药浴酒曲品质和产业化发展提供了理论参考。 展开更多
关键词 藏药浴发酵酒曲 高通量测序 群落结构 微生物多样性
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基于靶向高通量测序技术探讨新型冠状病毒大流行后扬州地区儿童社区获得性肺炎病原体的特征 被引量:1
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作者 孙苏敏 李勤 +2 位作者 李芸芸 魏文凭 陈晓 《临床医学进展》 2025年第1期1595-1604,共10页
目的:基于靶向高通量测序技术(Targeted Next Generation Sequencing, TNGS)分析新型冠状病毒(简称新冠病毒)大流行后扬州地区因社区获得性肺炎(community acquired pneumonia, CAP)住院儿童感染的病原体,了解政策改变后儿童CAP病原体... 目的:基于靶向高通量测序技术(Targeted Next Generation Sequencing, TNGS)分析新型冠状病毒(简称新冠病毒)大流行后扬州地区因社区获得性肺炎(community acquired pneumonia, CAP)住院儿童感染的病原体,了解政策改变后儿童CAP病原体感染分布情况。方法:回顾性分析2023年6月至2024年5月因CAP于儿童诊治量占扬州地区1/2的扬州大学附属医院儿科住院治疗患儿的呼吸道多种病原体靶向测序检查结果。分析儿童在不同年龄、季节间的呼吸道病原体感染情况。结果:1161例(上呼吸道样本1137例 + 肺泡灌洗液样本24例) CAP患儿中致病性A类病原体检出1087例(93.63%)、致病性B类病原体检出664例(57.19%)。A类病原体中:单一感染者71.85% (781/1087),混合感染者28.15% (306/1087),常见混合感染MP + 鼻病毒(HRV)阳性率5.98% (65/1087);人呼吸道合胞病毒(RSV)、人副流感病毒3型(PIV3)、人偏肺病毒(HMPV)阳性率随着年龄的增长呈下降趋势;学龄前期和学龄期儿童感染病原体主要是MP,MP感染仍以夏秋季最高,冬季最低;近1年MP感染耐药率为88.03% (618/702),基因变异位点以A2063G为主(100%)。B类病原体中:感染以革兰阴性菌为主(582/1161, 50.13%),流感嗜血杆菌为主要代表;≤2岁年龄组感染率最高,≥6岁感染率最低。结论:新冠病毒大流行后对CAP呼吸道病原体感染流行趋势带来改变。扬州地区儿童CAP感染的季节性与以往不同,RSV感染仍具有典型的年龄、季节性模式,MP感染季节性并未改变,感染年龄趋于低龄化。MP感染耐药率明显升高,基因变异均以A2063G为主。TNGS检测技术具有较高敏感性,可检测出机会致病菌,以流感嗜血杆菌最多见,有利于临床早期诊断及精准治疗。Objective: Targeted Next Generation Sequencing (TNGS) will be used to investigate the pathogens causing community-acquired pneumonia (CAP) in hospitalized children in Yangzhou after the SARS-CoV-2 pandemic. The goal is to comprehend the spread of CAP pathogens among children following the policy change. Methods: We conducted a retrospective analysis of the target sequencing test findings for several respiratory infections in children admitted to the Department of Pediatrics at Yangzhou University Hospital between June 2023 and May 2024. This period accounts for 50% of all pediatric consultations in Yangzhou. Children’s respiratory pathogen infections were examined at various age points and times of year. Results: There were 1161 instances of CAP in children (1137 upper respiratory tract samples plus 24 alveolar lavage fluid samples), and 1087 pathogenic class A pathogens (93.63%) and 664 pathogenic class B pathogens (57.19%) were found in those samples. Class A pathogens: 71.85% (781/1087) were single infections, 28.15% (306/1087) were mixed infections, and the common mixed infections MP + rhinovirus (HRV) positive rate was 5.98% (65/1087);the positive rate for human respiratory syncytial virus (RSV), human parainfluenza virus type 3 (PIV3), and human parapneumovirus (HMPV) decreased with age;the majority of pathogen-infected preschool and school-age children were MP infections, with summer and fall being the highest and winter being the lowest. In the past year, the resistance rate to MP infection was 88.03% (618/702), with A2063G dominating the gene variant locus 100% of the time. The most common pathogens in category B were caused by Gram-negative bacteria (582/1161, 50.13%), with Haemophilus influenzae as the primary representation. The age group with the highest infection rate was those under two, while the age group with the lowest incidence was those over six. Conclusions: The epidemiologic pattern of CAP respiratory pathogen infections was altered by the post-SARS-CoV-2 pandemic. However, MP infections still follow the same age and seasonal patterns associated with RSV infections. And MP infections typically manifest at a younger age. The sensitivity of NGS detection technology is high, while that of TNGS detection technology is high. It may identify opportunistic infections, the most prevalent of which is Haemophilus influenzae, which is useful for CAP infection identification and early clinical diagnosis. The TNGS test can identify opportunistic infections, including Hib, with a high degree of sensitivity. 展开更多
关键词 新型冠状病毒 社区获得性肺炎 病原学 儿童 靶向高通量测序
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基于高通量测序筛选鸽子下丘脑和卵巢组织早熟性状相关基因
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作者 蔡倩楠 施文莉 +8 位作者 赵邦哲 李丽 章琳俐 辛清武 缪中纬 朱志明 陈孝秋 吴进伟 郑嫩珠 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 北大核心 2025年第9期10-19,共10页
【目的】解析调控鸽子早熟性状的关键基因和信号通路,丰富鸽子早熟性状研究数据。【方法】选取同一批次180日龄开产和未开产大宝鸽各4只,处死后采集下丘脑和卵巢组织进行高通量测序分析,筛选与鸽子早熟性状相关的差异表达基因(different... 【目的】解析调控鸽子早熟性状的关键基因和信号通路,丰富鸽子早熟性状研究数据。【方法】选取同一批次180日龄开产和未开产大宝鸽各4只,处死后采集下丘脑和卵巢组织进行高通量测序分析,筛选与鸽子早熟性状相关的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs),并对其进行GO和KEGG富集分析。从DEGs中选取P值由小到大的前1000个基因进行蛋白互作(protein-protein interaction,PPI)分析,筛选早熟性状相关DEGs。采用qRT-PCR方法检测早熟相关DEGs的转录水平,验证高通量测序数据的可靠性。【结果】①下丘脑和卵巢共鉴定出685个DEGs。相比于未开产鸽子,已开产鸽子下丘脑中存在上调基因159个,下调基因201个;卵巢中存在上调基因118个,下调基因207个。②GO富集分析发现,DEGs显著富集于微管运动、神经系统过程、膜筏、细胞死亡和免疫反应等;KEGG分析显示,DEGs在ECM-受体相互作用、细胞因子-细胞因子受体相互作用、焦点黏连、MAPK信号通路、肌动蛋白细胞骨架调控等信号通路显著富集。这些信号通路和生物学过程涉及多个与卵泡形成和发育密切相关的基因。③筛选到AKR1D1、COL1A1、FAS、PRLR和TGFBR2等5个早熟性状相关DEGs,其中AKR1D1在开产鸽子下丘脑中上调表达,其他4个在卵巢中下调表达。④对5个DEGs进行qRT-PCR验证,结果与高通量测序结果一致,表明测序结果可靠。【结论】试验揭示了开产和未开产大宝鸽下丘脑和卵巢DEGs及相关信号通路,筛选到5个可能调控鸽子早熟性状的关键基因。 展开更多
关键词 鸽子 下丘脑 卵巢 早熟性状 差异表达基因 高通量测序
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