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紫苏PfMYB80转录因子正向调控花青素的生物合成 被引量：1
1
作者 李锐 胡婷 +2 位作者 陈树溦 王尧 王计平 《生物技术通报》 北大核心 2025年第6期243-255,共13页
【目的】R2R3-MYB转录因子主要参与调控类黄酮及花青素等次生代谢产物生物合成途径。验证其在紫苏(Perilla frutescens(L.)Britt.)花青素生物合成中的功能,为揭示R2R3-MYB转录因子在调控植物花青素合成中的作用奠定基础。【方法】基于... 【目的】R2R3-MYB转录因子主要参与调控类黄酮及花青素等次生代谢产物生物合成途径。验证其在紫苏(Perilla frutescens(L.)Britt.)花青素生物合成中的功能,为揭示R2R3-MYB转录因子在调控植物花青素合成中的作用奠定基础。【方法】基于生物信息学技术鉴定了紫苏基因组数据库的R2R3-MYB转录因子,并对其理化性质、系统进化、染色体定位、启动子顺式作用元件进行预测分析;筛选到可能参与调控紫苏花青素生物合成的R2R3-MYB成员,应用RT-qPCR分析该转录因子在紫苏叶片中的表达模式,克隆叶片中高表达的PfMYB80基因编码序列,探讨PfMYB80对紫苏花青素的合成调控作用及对红、蓝光胁迫的响应机制。【结果】共鉴定到186个R2R3-MYB成员,系统进化分析显示,紫苏PfMYB80、PfMYB146与拟南芥S6亚组调控植物花青素合成的基因亲缘关系最近,推测其可能参与调控花青素的合成。启动子顺式作用元件分析结果表明,紫苏R2R3-MYB基因启动子区含有光胁迫响应元件;RT-qPCR分析结果显示,PfMYB80基因在紫苏叶片不同发育时期的表达量逐渐升高,与花青素的合成趋势一致,推测其可能参与花青素的生物合成,该蛋白定位于细胞核;PfMYB80与花青素合成相关结构基因表达谱分析结果表明,紫苏LDOX基因的表达量与PfMYB80的表达趋势一致,且与紫苏花青素积累趋势一致,推测PfMYB80转录因子可能通过直接调控LDOX基因的转录表达来调节花青素的合成。通过转基因烟草的功能分析发现,PfMYB80响应蓝光诱导,并正向调控花青素的合成。【结论】紫苏PfMYB80转录因子正向调控花青素的生物合成,且响应光应答,蓝光下过表达PfMYB80烟草植株更有利于花青素的积累,同时可提高SOD酶活性,降低POD酶活性和MDA含量。 展开更多
关键词 紫苏 R2R3-MYB转录因子 PfMYB80转录因子 花青素 光胁迫响应 功能分析
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温经汤调控活化转录因子6/转录因子C/EBP同源蛋白通路抑制内质网应激改善卵巢储备功能下降模型的机制研究 被引量：5
2
作者 刘鹏 邢易 +2 位作者 郭权磊 聂晓博 任艳青 《中草药》 北大核心 2025年第1期121-132,共12页
目的探究温经汤调控内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)介导的活化转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)/转录因子C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)信号通路改善卵巢储备功能下降(decreased ovar... 目的探究温经汤调控内质网应激(endoplasmic reticulum stress,ERS)介导的活化转录因子6(activating transcription factor 6,ATF6)/转录因子C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)信号通路改善卵巢储备功能下降(decreased ovarian reserve,DOR)的作用机制。方法通过ig雷公藤多苷建立DOR大鼠模型,分为对照组、模型组、芬吗通组(采用第1~2天ig雌二醇片0.2 mg/kg,第3~5天ig雌二醇地屈孕酮片1.2 mg/kg的序贯疗法)及温经汤低、中、高剂量(4.85、9.70、19.40 g/kg)组,各组给药4周后计算卵巢及子宫指数;ELISA法检测血清抗缪勒管激素(anti-mullerian hormone,AMH)、卵泡刺激素(follicle stimulating hormone,FSH)、雌二醇(estradiol,E2)、促黄体生成素(luteinizing hormone,LH)水平;苏木素-伊红(Hematoxylin eosin,HE)染色观察卵巢病理结构,并对各级卵泡进行计数;qRT-PCR检测各组大鼠卵巢组织ERS标志物葡萄糖调节蛋白78(glucose-regulated protein 78,GRP78)、ATF6、CHOP mRNA表达;Western blotting检测GRP78、ATF6、CHOP、半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-12(cysteine aspartic acid specific protease-12,Caspase-12)蛋白表达水平。采用CCK-8法筛选雷公藤多苷的造模浓度;将人类卵巢颗粒KGN细胞分为对照组、雷公藤多苷组、雷公藤多苷+5%空白血清组、雷公藤多苷+5%温经汤血清组、ERS激动剂毒胡萝卜素(thapsigargin,TG)组,CCK-8法检测温经汤对雷公藤多苷处理的KGN细胞活力的影响;Fluo-4 AM钙离子(Ca^(2+))荧光探针检测各组细胞中Ca^(2+)浓度;Western blotting检测各组细胞GRP78、ATF6、CHOP、Caspase-12蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组大鼠卵巢及子宫指数显著下降(P<0.05、0.01),血清AMH、E2水平显著降低(P<0.01),FSH、LH水平显著升高(P<0.01),卵巢组织颗粒细胞数量及层数较少、排列稀疏、卵巢皮质空洞,发育期卵泡数量显著减少(P<0.01),闭锁卵泡数量显著增加(P<0.01);卵巢组织GRP78、ATF6、CHOP mRNA及蛋白表达、Caspase-12蛋白表达水平显著升高(P<0.05、0.01);与模型组比较,芬吗通组及温经汤中、高剂量组大鼠卵巢及子宫指数显著升高(P<0.05、0.01),各给药组大鼠血清AMH水平均显著升高(P<0.01),FSH水平均降低(P<0.01),芬吗通组及温经汤中、高剂量组大鼠血清LH水平显著降低(P<0.01),E2水平显著升高(P<0.05、0.01),各给药组卵巢组织发育期卵泡数量增多,闭锁卵泡数量减少(P<0.05、0.01),芬吗通组及温经汤中、高剂量组大鼠卵巢组织GRP78、ATF6、CHOP mRNA及蛋白表达、Caspase-12蛋白表达水平均显著降低(P<0.05、0.01)。体外实验表明40、80、120、200、500μg/mL的雷公藤多苷能够显著抑制KGN细胞增殖(P<0.05);雷公藤多苷+5%空白血清组细胞存活率、Ca^(2+)含量,GRP78、ATF6、CHOP、Caspase-12蛋白表达水平无明显变化(P>0.05);雷公藤多苷+5%温经汤血清组细胞存活率升高(P<0.01),Ca^(2+)显著降低(P<0.01),GRP78、ATF6、CHOP、Caspase-12蛋白表达水平显著降低(P<0.05、0.01)。结论温经汤可显著提高大鼠卵巢储备功能,对DOR具有较好的治疗作用,其作用机制可能与调控ATF6/CHOP通路、抑制ERS有关。 展开更多
关键词 温经汤 卵巢储备功能下降 雷公藤多苷 内质网应激 活化转录因子6 转录因子C/EBP同源蛋白 半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白酶-12
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植物热激转录因子研究进展与展望 被引量：2
3
作者 郭秀林 戚润思 +6 位作者 孟祥照 张华宁 马贞玉 段硕楠 李国良 刘子会 尚忠林 《华北农学报》 北大核心 2025年第1期1-13,共13页
作为植物抵御多种逆境胁迫的重要调节因子,植物热激转录因子(Hsf)家族基因数目多,结构、特性和功能复杂多样。植物Hsf不仅通过直接转录调控热激蛋白和相关基因的表达,参与对多种逆境胁迫的响应和适应过程,还介导植物诸多生命活动过程。... 作为植物抵御多种逆境胁迫的重要调节因子,植物热激转录因子(Hsf)家族基因数目多,结构、特性和功能复杂多样。植物Hsf不仅通过直接转录调控热激蛋白和相关基因的表达,参与对多种逆境胁迫的响应和适应过程,还介导植物诸多生命活动过程。自20世纪80年代酵母Hsf被首先克隆以来,多个物种的Hsf家族被识别和研究,模式植物番茄和拟南芥Hsf研究比较早且相对深入,研究主要集中在HsfA族,B族研究较少,C族报道更少。随着全球气候变化,极端高温事件频发,已严重威胁小麦、玉米等粮食作物的产量和品质,深入研究作物耐热性机制从而挖掘功能基因、通过生物技术方法改良作物的耐热性,是抵抗高温逆境的关键。大田作物中Hsf家族数目大小不等,基因组复杂,研究起步晚。为此,植物生理与分子生物学研究室从2009年开始对作物Hsf家族基因进行研究,依据最新的基因组信息,确定了家族基因数目及核酸和蛋白质结构特性、明确了家族基因的时空表达特性及其对多种非生物逆境的响应规律。克隆获得多个基因并借助遗传转化和基因编辑技术创制转基因材料和突变体,对其耐热性以及抗逆性调控功能多层面进行了鉴定,并对下游调控机制进行了深入解析。研究不仅丰富了大田作物耐热性调控理论基础,也为作物耐热性研究和生物育种提供优异新种质。目前,关于Hsf的研究主要集中在功能鉴定和对下游基因的转录调控方面,其上游哪些组分通过何种方式介导Hsf参与耐热性调控方面的研究还缺乏证据,机制尚不清楚。基于本研究室多年来对小麦、玉米Hsf家族的研究结果,结合他人的相关研究报道,详述了近年来植物Hsf在抗逆性响应和适应过程中调控功能、机制及其主要研究进展,以期为深入阐明Hsf家族的作用及其调控网络提供理论依据,为耐热生物育种挖掘强效的基因资源和备选位点。 展开更多
关键词 植物热激转录因子 非生物胁迫 功能与机制 调控网络
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绿豆R2R3-MYB转录因子家族鉴定及其类黄酮合成调控基因的筛选 被引量：2
4
作者 郭飞翔 李春霞 +3 位作者 周爽 郭彬彬 张均 马超 《作物学报》 CAS 北大核心 2025年第1期117-133,共17页
R2R3-MYB转录因子家族在植物次生代谢物合成、胁迫应答和生长发育等生命过程起着重要的调控作用。本研究基于生物信息学鉴定了绿豆(Vigna radiata L.)全基因组水平的R2R3-MYB转录因子,并对其理化性质、系统进化、染色体定位、启动子顺... R2R3-MYB转录因子家族在植物次生代谢物合成、胁迫应答和生长发育等生命过程起着重要的调控作用。本研究基于生物信息学鉴定了绿豆(Vigna radiata L.)全基因组水平的R2R3-MYB转录因子,并对其理化性质、系统进化、染色体定位、启动子顺式作用元件及基因结构做了预测分析;此外,转录组数据和实时荧光定量PCR(QuantitativeReal-timePCR,RT-PCR)分析该转录因子在不同组织、逆境胁迫下的表达模式;并基于相关分析及蛋白互作网络,筛选到可能参与调控绿豆类黄酮生物合成的R2R3-MYB成员。结果表明,共鉴定到168个R2R3-MYB成员,其中145个分布于11条染色体, 23个成员染色体信息未知;大多数R2R3-MYB含有3个外显子,编码99~1645个氨基酸,均为亲水性蛋白;系统进化将绿豆R2R3-MYB基因家族分为30个亚组(V1~V30),不同亚组成员的基因结构存在差异;共线性分析表明,片段复制事件均进行了纯化选择;启动子顺式作用元件分析表明,绿豆R2R3-MYB基因启动子区含有大量激素响应、胁迫响应及少量的类黄酮合成响应等元件;基因表达分析表明,在叶片、叶柄、下胚轴和籽粒种皮中表达量较高的成员分别占15.5%、16.1%、16.1%和10.7%。RT-PCR分析发现,几乎所有的R2R3-MYB家族成员在低温胁迫下的相对表达量显著下调,不同成员对逆境胁迫有不同的响应模式。蛋白互作与相关性分析可知,VrMYB6、VrMYB77、VrMYB93这3个基因可能参与了绿豆类黄酮生物合成的调控。 展开更多
关键词 绿豆 R2R3-MYB转录因子 转录因子家族分析 类黄酮合成调控基因
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微生物转录因子工程的研究进展 被引量：1
5
作者 梁志慧 陆孔泳 +1 位作者 郑洋洋 王智文 《宁夏大学学报(自然科学版中英文)》 2025年第1期59-67,共9页
随着合成生物学的快速发展,微生物细胞工厂成为绿色生物制造的重要方式.转录因子工程作为一种通过转录因子来调控基因表达的技术,具有可同时调控代谢途径的多个基因的功能,在微生物代谢工程和合成生物学研究中发挥着重要作用.介绍转录... 随着合成生物学的快速发展,微生物细胞工厂成为绿色生物制造的重要方式.转录因子工程作为一种通过转录因子来调控基因表达的技术,具有可同时调控代谢途径的多个基因的功能,在微生物代谢工程和合成生物学研究中发挥着重要作用.介绍转录因子及其调控机制,综述当前微生物中转录因子的研究进展和转录因子工程的应用进展等,讨论转录因子工程面临的挑战和未来发展趋势. 展开更多
关键词 转录因子 转录因子工程 调控机制 耐受性 生物传感器
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丙泊酚对脂多糖诱导的MHCC97H细胞黏附、迁移、侵袭和炎症因子的影响及与核转录因子-κB信号通路的关系 被引量：2
6
作者 齐少霞 杨栋宝 +2 位作者 靳涛 王建华 兰基山 《安徽医药》 2025年第2期263-267,I0002,共6页
目的探究丙泊酚与脂多糖(LPS)刺激下MHCC97H细胞功能、炎症水平及核转录因子-κB(NF-κB)表达的关联。方法该研究起止时间为2021年12月至2022年12月。体外培养人MHCC97H细胞系,分为对照组(等量的溶剂),LPS组(1 mg/L LPS),实验组(LPS+6.2... 目的探究丙泊酚与脂多糖(LPS)刺激下MHCC97H细胞功能、炎症水平及核转录因子-κB(NF-κB)表达的关联。方法该研究起止时间为2021年12月至2022年12月。体外培养人MHCC97H细胞系,分为对照组(等量的溶剂),LPS组(1 mg/L LPS),实验组(LPS+6.25组、LPS+12.5组、LPS+25组,LPS组基础上分别加入6.25、12.5和25μmol/L丙泊酚),用酶联免疫吸附试验、细胞计数试剂盒检测炎症因子白细胞介素6(IL-6)的表达水平和细胞活力筛选出丙泊酚的最适浓度进行后续实验,后将细胞分为对照组、LPS组、LPS+25组和LPS+25+抑制剂组(LPS+25组基础上联合10μmol/L BAY 11-7082),干预24 h。细胞黏附实验测定黏附细胞数;Transwell小室法检测细胞迁移与侵袭水平;蛋白质印迹法测定上皮间质转化(EMT)及NF-κB通路相关蛋白表达水平。结果根据细胞活力和炎症因子IL-6表达选择LPS+25组进行后续实验,与对照组相比,LPS组细胞黏附数、迁移数、侵袭数、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(Vimentin)、纤连蛋白(FN)、IκB激酶α(IKKα)和p-NF-κB p65蛋白水平分别为(152.00±9.01)个、(84.01±10.44)个、(65.67±3.06)个、0.46±0.02、0.47±0.03、0.99±0.02、1.03±0.02、0.95±0.05上调,E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达0.42±0.02下调(P<0.05);与LPS组相比,LPS+25组显著扭转了上述指标的变化(P<0.05);与LPS+25组相比,LPS+25+抑制剂组加入NF-κB通路抑制剂后,上述指标变化扭转得更为显著(P<0.05)。结论丙泊酚对LPS刺激下MHCC97H细胞炎症因子表达、黏附、迁移、侵袭能力及EMT进程具有抑制作用,可能与NF-κB通路活性受到抑制有关。 展开更多
关键词 二异丙酚 MHCC97H 核转录因子-κB信号通路 黏附 迁移 侵袭
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WRKY转录因子在水稻抗逆基因工程中的应用进展
7
作者 段俊枝 燕照玲 +5 位作者 齐红志 张会芳 陈海燕 杨翠苹 王楠 卓文飞 《中国稻米》 北大核心 2025年第1期61-67,73,共8页
水稻在其生长过程中经常面临各种非生物胁迫(包括干旱、高盐度、低温及高温等)和生物胁迫(如病虫害),严重影响其正常生长发育。WRKY转录因子家族作为植物界中最为庞大的转录因子家族之一,在调控植物生长发育及应对非生物胁迫和生物胁迫... 水稻在其生长过程中经常面临各种非生物胁迫(包括干旱、高盐度、低温及高温等)和生物胁迫(如病虫害),严重影响其正常生长发育。WRKY转录因子家族作为植物界中最为庞大的转录因子家族之一,在调控植物生长发育及应对非生物胁迫和生物胁迫方面发挥着关键作用。本文综述了WRKY转录因子的结构特点及其在水稻抗非生物胁迫(干旱、高盐、低温、高温等)、生物胁迫(稻瘟病、白叶枯病、纹枯病、稻飞虱等)基因工程中的应用进展,旨在为WRKY转录因子在水稻及其他作物抗逆性遗传改良中的应用提供理论基础和实践指导。 展开更多
关键词 水稻 WRKY转录因子 干旱 高盐度 温度胁迫 稻瘟病 白叶枯病 纹枯病 稻飞虱
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基于转录组和AlphaFold快速鉴定水稻特异性响应稻瘟病菌侵染的转录因子和靶标
8
作者 凤舞剑 张莹 +1 位作者 韩波 强承魁 《江苏农业科学》 北大核心 2025年第4期23-30,共8页
转录因子是调控植物免疫响应的关键因子之一。为鉴定水稻早期响应稻瘟病菌侵染的关键转录因子及相互作用的靶基因,探究早期病原菌诱导型转录因子的调控功能,为水稻的免疫机制研究和抗病种质创制提供理论依据,利用生物信息学方法对水稻... 转录因子是调控植物免疫响应的关键因子之一。为鉴定水稻早期响应稻瘟病菌侵染的关键转录因子及相互作用的靶基因,探究早期病原菌诱导型转录因子的调控功能,为水稻的免疫机制研究和抗病种质创制提供理论依据,利用生物信息学方法对水稻基因组中的转录因子进行鉴定,通过水稻-稻瘟病菌互作转录组和Mfuzz表达模式特征分析,筛选受稻瘟病菌诱导的转录因子和参与调控的功能。利用AlphaFold3对关键的转录因子和靶基因构建蛋白-DNA相互作用的复合体模型,并对转录因子潜在的结合靶标进行筛选。结果在水稻中总共鉴定到1948个转录因子,约89类转录因子。其中1、3、2、6号染色体的转录因子数目较多,分别为279、250、235、176个。共鉴定到673个转录因子受稻瘟病菌侵染水稻诱导,其中主要包含11%的WRKY、11%的MYB和11%的C2H2转录因子。这些转录因子主要调控植物信号转导、植物-病原菌的相互作用和MAPK信号、响应乙烯、响应水杨酸、响应茉莉酸、天然免疫和对细菌的防御响应等功能;鉴定到集合1和集合6中的转录因子受病原菌特异性诱导后表达量持续增加;利用AlphaFold3发现Os5t0343400编码的WRKY转录因子与SIB1基因启动子存在互作。结果表明,水稻在响应稻瘟病菌早期侵染中,约172个转录因子通过调控激素和免疫防御等途径响应稻瘟病菌的侵染,并预测到1个响应病原菌的转录因子及作用靶标在水稻免疫响应中发挥重要作用。 展开更多
关键词 转录因子 稻瘟病菌 水稻 AlphaFold3 作用靶标
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小麦耐盐相关NAC转录因子的生物信息与表达分析
9
作者 王伟伟 罗政辉 +6 位作者 邹景伟 张玉杰 钮力亚 王志 王奉芝 赵振杰 于亮 《麦类作物学报》 北大核心 2025年第3期287-299,共13页
NAC转录因子对植物抗逆境胁迫具有重要作用。为了解小麦耐盐相关NAC转录因子的生物学信息,对耐盐品种沧麦6005和盐敏感品种科农9204进行转录组测序,筛选耐盐相关NAC转录因子,并对其进行生物信息学分析;对供试材料进行盐胁迫处理,提取根... NAC转录因子对植物抗逆境胁迫具有重要作用。为了解小麦耐盐相关NAC转录因子的生物学信息,对耐盐品种沧麦6005和盐敏感品种科农9204进行转录组测序,筛选耐盐相关NAC转录因子,并对其进行生物信息学分析;对供试材料进行盐胁迫处理,提取根部分生组织RNA,反转录为cDNA,对重点候选基因进行qRT-PCR分析。结果表明,共筛选出28个耐盐相关NAC转录因子,其中10个的等电点呈碱性,其余等电点呈酸性,且均为亲水性蛋白;亚细胞定位主要定位在细胞核;蛋白质二级结构以无规则卷曲和α-螺旋为主。经共线性分析,小麦和水稻的NAC转录因子含有多对共线性关系,表明小麦与水稻亲缘关系较近。NAC转录因子启动子区域含有多种与激素响应和逆境胁迫诱导相关顺式作用元件,其中TaNAC24含有顺式调控元件结合位点最多,共有51个。盐胁迫处理后,9个重要基因中,4个基因表达量显著上调,5个基因表达量显著下调,与转录组测序结果一致,这些基因可能介导了小麦的抗盐性。 展开更多
关键词 小麦 盐胁迫 NAC 转录因子 生物信息学分析
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法师类多肉植物转录组测序及相关转录因子筛选
10
作者 李素华 赵荣 +5 位作者 韩浩章 张丽华 王芳 王晓立 蒋亚华 张楠 《分子植物育种》 北大核心 2025年第6期1780-1789,共10页
为探讨不同色系法师系多肉品种叶片中差异表达基因及分子调控途径。以绿叶系法师品种‘绿羊绒’和紫叶系‘墨法师’为材料,对呈色期的叶片进行转录组测序。结果表明:共获得62129条unigenes,其中47911条unigenes在NR、NT、KEGG、SwissPro... 为探讨不同色系法师系多肉品种叶片中差异表达基因及分子调控途径。以绿叶系法师品种‘绿羊绒’和紫叶系‘墨法师’为材料,对呈色期的叶片进行转录组测序。结果表明:共获得62129条unigenes,其中47911条unigenes在NR、NT、KEGG、SwissProt、PFAM、GO、KOG数据库中获得注释;共获得89个转录因子家族,其中MYB(MYB-related)、AP2/ERF-ERF、WRKY、NAC、C2H2、bHLH、bZIP、C3H家族转录因子数量较多;在获得的7707条差异表达基因中,MYB家族转录因子42个,bHLH家族转录因子22个;选取2个样本间表达量差异显著且可能与色素代谢相关的转录因子基因进行RT-qPCR验证,RT-qPCR结果与转录组测序结果相关性显著,基因表达趋势基本一致。本研究为进一步探索MYB、bHLH类转录因子在多肉植物叶色调控中的作用提供了依据。 展开更多
关键词 法师系多肉植物 转录组测序 转录因子
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转录因子SOX4调控Beclin1介导的自噬对小细胞肺癌细胞行为的影响
11
作者 韩忠诚 马丽丽 +1 位作者 苏莹 柳江 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第4期684-691,共8页
目的探究性别决定区Y框转录因子4(SOX4)调控自噬对小细胞肺癌(SCLC)细胞的影响及机制。方法小干扰RNA(siRNA)介导敲低人SCLC细胞系NCI-H446细胞中的SOX4。RT-qPCR和Western blot检测转染siRNA后NCI-H446细胞中SOX4的表达。细胞实验分为... 目的探究性别决定区Y框转录因子4(SOX4)调控自噬对小细胞肺癌(SCLC)细胞的影响及机制。方法小干扰RNA(siRNA)介导敲低人SCLC细胞系NCI-H446细胞中的SOX4。RT-qPCR和Western blot检测转染siRNA后NCI-H446细胞中SOX4的表达。细胞实验分为对照组、si-SOX4组、si-SOX4+oe-Beclin1组、oe-Beclin1组。Western blot检测各分组细胞中微管相关蛋白1轻链3(LC3)-II/LC3-Ⅰ的表达之比、Beclin1及p62的表达。荧光素酶报告基因实验和染色质免疫共沉淀PCR(ChIP-PCR)实验检测SOX4对Beclin1的转录调控作用。CCK-8法检测各分组细胞增殖能力。流式细胞术检测各分组细胞凋亡率。Transwell实验检测分组细胞迁移与侵袭能力。结果与对照组或si-NC组比较,si-SOX4组NCI-H446细胞中SOX4 mRNA和蛋白表达下调(P<0.05),LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达比率和Beclin1蛋白表达下降(P<0.05),p62蛋白表达升高(P<0.05)。si-SOX4组的Beclin1 WT相对荧光素酶活性低于si-NC组(P<0.05);Anti-SOX4组中Beclin1启动子相对富集程度高于Anti-IgG组(P<0.05)。与对照组比较,si-SOX4组NCI-H446细胞增殖活性降低、细胞凋亡率增加、迁移数目和侵袭数目也减少(P<0.05);与si-SOX4组比较,si-SOX4+oe-Beclin1组NCI-H446细胞中LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ蛋白表达比率和Beclin1蛋白表达升高、p62蛋白表达下降,同时NCI-H446细胞增殖活性升高、细胞凋亡率减少、迁移数目和侵袭数目也增加(P<0.05)。结论下调SOX4通过抑制Beclin1表达来抑制自噬,降低NCI-H446细胞增殖活性,抑制细胞迁移与侵袭。 展开更多
关键词 小细胞肺癌 性别决定区Y框转录因子4 自噬 增殖 迁移 侵袭
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胎盘表达转录因子1在多囊卵巢综合征大鼠卵巢组织中的表达及其对大鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响
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作者 付璐璐 邹颖刚 +5 位作者 郑晓宇 张雪莹 张京顺 王敏 张嫱 郑连文 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期1177-1184,共8页
目的:探讨胎盘表达转录因子1(Plet1)在来曲唑构建的多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠卵巢组织中的表达及其对大鼠卵巢颗粒细胞增殖调控作用,并阐明Plet1参与PCOS发病的可能机制。方法:取课题组前期研究采集的大鼠卵巢样本,分为对照组和PCOS... 目的:探讨胎盘表达转录因子1(Plet1)在来曲唑构建的多囊卵巢综合征(PCOS)模型大鼠卵巢组织中的表达及其对大鼠卵巢颗粒细胞增殖调控作用,并阐明Plet1参与PCOS发病的可能机制。方法:取课题组前期研究采集的大鼠卵巢样本,分为对照组和PCOS组,采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和Western blotting法检测2组大鼠卵巢组织中Plet1 mRNA和蛋白表达水平。另取24只大鼠,采用阴道涂片鉴定将大鼠分为发情前期、发情期、发情后期及发情间期4组,RT-qPCR法检测不同发情周期大鼠卵巢组织中Plet1 mRNA表达水平,免疫组织化学法检测大鼠卵巢组织中Plet1表达定位。转染大鼠卵巢颗粒细胞,分为对照组、si-Plet1-rat-266组、si-Plet1-rat-383组和si-Plet1-rat-554组。采用细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞增殖活性,采用RT-qPCR法检测各组大鼠卵巢颗粒细胞中细胞分裂蛋白激酶6(CDK6)和P53 mRNA表达水平。结果:RT-qPCR法检测,Plet1 mRNA在正常大鼠卵巢中表达,Plet1 mRNA表达水平在各发情周期组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学检测,Plet1蛋白在大鼠卵巢组织中表达定位主要在卵巢颗粒细胞和黄体细胞。与对照组比较,PCOS组大鼠卵巢中Plet1 mRNA和蛋白表达水平均明显降低(P<0.05)。RT-qPCR法检测,与对照组比较,si-Plet1-rat-383组大鼠卵巢颗粒细胞中Plet1 mRNA表达水平明显降低(P<0.01),且下降幅度最大。CCK-8法检测,与对照组比较,si-Plet1-rat-383组大鼠卵巢颗粒细胞增殖活性明显降低(P<0.05)。与对照组比较,si-Plet1-rat-383组CDK6和P53 mRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01)。结论:Plet1蛋白在正常大鼠卵巢组织中表达分布主要集中于卵巢颗粒细胞和黄体细胞。PCOS模型大鼠卵巢组织内Plet1基因表达下调,干扰Plet1基因表达可抑制大鼠卵巢颗粒细胞增殖。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 胎盘表达转录因子1 发情周期 卵巢颗粒细胞 细胞增殖
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玉米STAT转录因子家族成员基因的鉴定及其表达谱分析
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作者 张红梅 杨海鹏 +7 位作者 刘娅娟 龙芸 张鹏安 陈伟 张杰 侯凌鹏 韩志玲 刘小红 《华北农学报》 北大核心 2025年第4期10-18,共9页
STAT蛋白是一类在信号传导和基因转录激活方面具有重要作用的转录因子。在植物中STAT基因的表达与高温等非生物胁迫相关。为了研究玉米STAT基因是否参与响应高温胁迫,以耐高温胁迫的Zheng 58和对高温敏感的PH6WC玉米自交系为材料,选取... STAT蛋白是一类在信号传导和基因转录激活方面具有重要作用的转录因子。在植物中STAT基因的表达与高温等非生物胁迫相关。为了研究玉米STAT基因是否参与响应高温胁迫,以耐高温胁迫的Zheng 58和对高温敏感的PH6WC玉米自交系为材料,选取高温和常温2个条件下生长的植株根、茎、叶、花粉和花丝5个部位的组织进行转录组测序。基于测序数据,对玉米STAT基因结构、编码蛋白的理化性质及其在不同玉米材料、不同温度条件下的组织表达模式进行分析。结果表明,在玉米中鉴定到2个STAT基因Zm-STAT1和Zm-STAT2,其中,Zm-STAT1编码的蛋白是疏水蛋白,而Zm-STAT2编码的蛋白是亲水蛋白,它们都具有多个功能位点和磷酸化修饰位点。进一步表达分析发现,以常温为对照,在高温条件下,Zm-STAT1基因在PH6WC的根中、Zm-STAT1基因在Zheng 58的花粉和花丝中表现为上调表达,而Zm-STAT1基因在PH6WC的茎和叶中、Zm-STAT2基因在PH6WC的叶中则表现为下调表达。在2个温度条件下,Zm-STAT2在5个组织中的表达量均显著高于Zm-STAT1,且ZmSTAT2在耐高温胁迫材料Zheng 58的根、茎、花粉和花丝中均受高温诱导,暗示Zm-STAT2基因参与了玉米高温胁迫响应。 展开更多
关键词 玉米 高温胁迫 STAT转录因子 基因结构 表达模式
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香蕉枯萎病菌C2H2型锌指转录因子FocFlbC的功能研究
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作者 卢松茂 林秀香 +5 位作者 林亚琪 林晓兰 杨帅 郑文辉 云英子 鲁国东 《植物病理学报》 北大核心 2025年第4期649-662,共14页
由香蕉枯萎病菌4号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense tropical race 4,Foc TR4)引起的香蕉枯萎病是全球香蕉产业面临的重大土传病害,其土壤中的分生孢子和厚垣孢子是主要侵染源。构巢曲霉(Aspergillus nidulans)C2H2型锌指转... 由香蕉枯萎病菌4号生理小种(Fusarium oxysporum f.sp.cubense tropical race 4,Foc TR4)引起的香蕉枯萎病是全球香蕉产业面临的重大土传病害,其土壤中的分生孢子和厚垣孢子是主要侵染源。构巢曲霉(Aspergillus nidulans)C2H2型锌指转录因子FlbC是调控分生孢子发育的关键因子。本研究在Foc TR4中鉴定到FlbC的同源基因FocFlbC,利用原生质体介导的遗传转化技术构建了其敲除突变体(ΔFocFlbC)和回补菌株,并分析了该蛋白的亚细胞定位和生物学功能。结果显示,FocFlbC定位于菌丝和分生孢子的细胞核。与野生型相比,ΔFocFlbC突变体在麦芽糖培养基上的菌丝生长速率显著降低,但在其他碳源培养基上无明显差异;该突变体在不同碳源培养基上的产孢量均显著降低,其中在麦芽糖培养基上野生型与突变体的产孢量比率最高,显著高于其他碳源培养基。虽然FocFlbC缺失突变对Foc TR4生物量累积和分生孢子萌发无显著影响,但与野生型相比,该突变体表现出:细胞壁和盐胁迫耐受性降低;α-淀粉酶、滤纸酶及β-1,4-D-葡聚糖酶活性下降,且相应水解酶基因的表达水平下调;以及致病力减弱。上述表型缺陷均可被回补菌株恢复。综上,FocFlbC不仅调控Foc TR4在麦芽糖培养基上的菌丝生长与产孢,还参与调控细胞壁完整性、盐胁迫响应、水解酶合成以及致病力等多个重要生物学过程,为深入揭示Foc TR4生长发育和致病分子机制奠定了理论基础。 展开更多
关键词 香蕉枯萎病菌 C2H2型锌指结构域 转录因子 碳源利用 胁迫响应 水解酶活性 致病性
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蚕豆NAC转录因子家族鉴定分析及抗叶斑病基因筛选
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作者 卞晓春 王凡 +3 位作者 刘陈玮 徐仁超 陆红臣 吴春芳 《江苏农业学报》 北大核心 2025年第9期1683-1695,共13页
NAC转录因子在植物生长发育及逆境胁迫响应中具有重要作用。为明确蚕豆(Vicia faba L.)NAC转录因子的功能,本研究利用生物信息学方法从蚕豆基因组数据库中鉴定蚕豆NAC家族基因成员,分析其基因结构、启动子顺式作用元件、染色体分布以及... NAC转录因子在植物生长发育及逆境胁迫响应中具有重要作用。为明确蚕豆(Vicia faba L.)NAC转录因子的功能,本研究利用生物信息学方法从蚕豆基因组数据库中鉴定蚕豆NAC家族基因成员,分析其基因结构、启动子顺式作用元件、染色体分布以及编码蛋白质的理化性质等,结合造成蚕豆叶斑病的病原菌链格孢菌(Alternaria alternata)侵染的蚕豆转录组数据筛选与抗病相关的候选基因。结果表明,蚕豆NAC转录因子基因家族共有77个成员,不均匀分布于6条染色体上,其编码的蛋白质大小介于133 aa至665 aa之间;VfNAC蛋白分为16个亚家族,均含有NAM保守结构域,均定位于细胞核。VfNAC基因启动子上包含光响应元件、激素响应元件、干旱响应元件等多种顺式作用元件。转录组测序结果显示,链格孢菌侵染后蚕豆中有33个VfNAC基因差异表达,筛选出4个差异表达显著的基因作为关键抗病候选基因进一步研究。本研究为蚕豆NAC转录因子后续的生物学功能解析及抗病分子机制研究提供了参考。 展开更多
关键词 蚕豆 NAC转录因子 链格孢菌 抗病基因
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绿豆C2H2型锌指蛋白转录因子家族鉴定及非生物胁迫下的表达分析
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作者 张均 郭飞翔 +2 位作者 田文仲 李春霞 马超 《核农学报》 北大核心 2025年第9期1875-1885,I0008-I0010,共14页
C2H2型锌指转录因子家族在植物非生物胁迫应答和生长发育等生命过程中起着重要的调控作用。为明确C2H2型锌指转录因子家族在绿豆生长发育中的功能,本研究利用绿豆(Vigna radiata L.)基因组数据和生物信息学技术鉴定了C2H2转录因子,对其... C2H2型锌指转录因子家族在植物非生物胁迫应答和生长发育等生命过程中起着重要的调控作用。为明确C2H2型锌指转录因子家族在绿豆生长发育中的功能,本研究利用绿豆(Vigna radiata L.)基因组数据和生物信息学技术鉴定了C2H2转录因子,对其理化性质、系统进化、染色体定位、共线性、启动子顺式作用元件及基因结构做了预测分析,并通过绿豆转录组数据和实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分析了其在不同组织与非生物胁迫下的表达模式。结果表明,共鉴定到60个C2H2转录因子成员,其中53个分布于9条染色体,7个成员染色体信息未知;Motif1和Motif3是绿豆C2H2转录因子家族所特有的保守基序,Motif3则是部分C2H2转录因子家族成员所特有的一段保守序列“QALGGH”;编码155~1 581个氨基酸,均为亲水性蛋白且均定位在细胞核中;系统进化将绿豆C2H2转录因子家族分为7个亚组(V1~V7)。共线性分析表明,片段复制事件均进行了纯化选择;启动子顺式作用元件分析表明,绿豆C2H2基因启动子区含有大量与生长发育、逆境胁迫和激素相关的响应元件;基因表达分析表明,叶柄、叶片、下胚轴、籽粒种皮中表达量较高(FPKM值大于10)的基因分别占25.0%、26.7%、20.0%、26.7%;qRT-PCR分析发现,VrC2H2-22和VrC2H2-46对于温度胁迫具有特异性的调控作用,VrC2H2-51对干旱胁迫的响应程度较强。本研究结果为进一步对绿豆C2H2锌指转录因子家族的功能研究提供了理论基础。 展开更多
关键词 绿豆 C2H2锌指蛋白转录因子 生物信息学 共线性分析 基因表达
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转录因子acj6在昆虫嗅觉中的功能研究进展
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作者 谢桂英 张继康 +2 位作者 陈淑婷 陈文波 赵新成 《河南农业大学学报》 北大核心 2025年第1期1-12,共12页
综述了acj6的发现及突变造成的嗅觉异常行为,介绍了acj6的结构及表达模式,阐述了acj6在昆虫嗅觉中的功能,包括调控Or表达、塑造嗅觉神经元的形态和靶向、维持神经递质乙酰胆碱水平和调控嗅小球形成,指出今后应注重研究acj6对昆虫嗅觉的... 综述了acj6的发现及突变造成的嗅觉异常行为,介绍了acj6的结构及表达模式,阐述了acj6在昆虫嗅觉中的功能,包括调控Or表达、塑造嗅觉神经元的形态和靶向、维持神经递质乙酰胆碱水平和调控嗅小球形成,指出今后应注重研究acj6对昆虫嗅觉的调控机制、与其他转录因子的互作关系,以期为阐明昆虫的嗅觉调控机制并制定基于嗅觉的害虫防治策略提供参考。 展开更多
关键词 acj6 转录因子 嗅觉 嗅觉受体 神经元
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bHLH转录因子UNE10克隆及其在丁香罗勒挥发性化合物合成调控中的功能
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作者 王斌 林冲 +3 位作者 袁晓 蒋园园 王玉昆 肖艳辉 《生物技术通报》 北大核心 2025年第9期207-218,共12页
【目的】bHLH转录因子是调控芳香植物次生代谢产物合成的关键因子,探究bHLH转录因子UNE10对丁香罗勒(Ocimum gratissimum)挥发性化合物合成的调控作用,为丁香罗勒精油组分精细调控提供关键调控因子。【方法】从丁香罗勒中挖掘在叶片显... 【目的】bHLH转录因子是调控芳香植物次生代谢产物合成的关键因子,探究bHLH转录因子UNE10对丁香罗勒(Ocimum gratissimum)挥发性化合物合成的调控作用,为丁香罗勒精油组分精细调控提供关键调控因子。【方法】从丁香罗勒中挖掘在叶片显著高表达的bHLH家族基因OgUNE10,利用PCR法扩增OgUNE10的编码序列,通过农杆菌介导的超表达方法在丁香罗勒叶片中过表达OgUNE10,探究其对丁香罗勒叶片挥发性化合物合成的影响。【结果】OgUNE10表达呈现明显的组织特异性,在叶片中显著高表达。从丁香罗勒叶片中克隆了OgUNE10基因,其编码161个氨基酸残基的蛋白质。OgUNE10含有保守的bHLH结构域,定位于细胞核,与模式植物bHLH氨基酸序列相似性较低。在叶片中过表达OgUNE10显著影响丁香罗勒精油主要组分的含量,提高丁香酚含量并降低草蒿脑和肉桂酸甲酯含量。过表达OgUNE10显著上调3个苯丙氨酸解氨酶(PAL)基因和2个甲酯酶(MES)基因的表达,下调1个甲酯转移酶(MTA)基因的表达,并影响6个萜烯合成相关基因的表达。【结论】OgUNE10可能通过整合苯丙烷途径、MEP和MVA途径调控丁香罗勒挥发性次生代谢产物的生物合成。 展开更多
关键词 丁香罗勒 挥发性化合物 合成调控 bHLH转录因子 UNE亚家族
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大豆转录因子GmMYB46调控植物耐旱性的功能研究
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作者 张斌 《干旱地区农业研究》 北大核心 2025年第3期45-51,70,共8页
为解析大豆转录因子MYB家族成员GmMYB46基因在干旱胁迫应答中的调节机制,通过荧光定量PCR检测其在PEG模拟干旱处理的大豆中的表达水平。克隆GmMYB46基因编码序列构建过表达载体,利用农杆菌介导转化野生型拟南芥,在正常培养和干旱处理条... 为解析大豆转录因子MYB家族成员GmMYB46基因在干旱胁迫应答中的调节机制,通过荧光定量PCR检测其在PEG模拟干旱处理的大豆中的表达水平。克隆GmMYB46基因编码序列构建过表达载体,利用农杆菌介导转化野生型拟南芥,在正常培养和干旱处理条件下观察转基因和野生型(WT)拟南芥植株的生长情况,测定叶片电导率、可溶性糖和脯氨酸含量以及抗氧化酶活性,观察对比叶片气孔开度。结果表明:GmMYB46受干旱胁迫诱导在根和叶中的表达量显著上调,最高达8.9倍和16.3倍。成功获得GmMYB46基因过表达的拟南芥植株OE,在培养基和营养土培养模式下OE植株耐旱性均明显增强,其长势优于WT植株。干旱处理后,OE植株电导率较WT降低46.1%;可溶性糖和脯氨酸含量均显著高于WT植株,分别增加54.9%和225.0%;超氧化物歧化酶、过氧化物酶和过氧化氢酶活性也明显上升,在根中分别增加8.8%、14.6%和47.0%,叶中则分别增加11.2%、69.2%和21.2%。说明大豆GmMYB46基因可能与细胞渗透调节、抗氧化酶活性以及气孔开度等生理过程的调节相关。 展开更多
关键词 大豆 转录因子 GmMYB46基因 耐旱性
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玉米大斑病菌转录因子StTOXE的生信分析
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作者 张运峰 张淑红 +4 位作者 纪景欣 许可 李亚子 刘会娟 范永山 《唐山师范学院学报》 2025年第3期20-23,84,共5页
利用ProtParam、SOMPA、Blast-P和InterProm分析StTOXE理化性质、二级结构和结构域,利用I-TASSER、MEGA 11构建StTOXE的高级结构和亲缘关系树。发现StToxE位于scaffold_1:77152-78961(Strand:-),StTOXE蛋白含379个氨基酸,分子量39.5kDa... 利用ProtParam、SOMPA、Blast-P和InterProm分析StTOXE理化性质、二级结构和结构域,利用I-TASSER、MEGA 11构建StTOXE的高级结构和亲缘关系树。发现StToxE位于scaffold_1:77152-78961(Strand:-),StTOXE蛋白含379个氨基酸,分子量39.5kDa,以无规则卷曲和α-螺旋为主,属亲水、不稳定蛋白,该蛋白具有1个basical domain和4个ankyrin repeat。聚类分析表明5种真菌TOXE-homo蛋白分为3类,其中StTOXE与PtrTOXE相似性最高。说明StToxE是玉米大斑病菌毒素合成的重要因子。 展开更多
关键词 玉米大斑病菌 转录因子 StToxE 生物信息学分析
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