期刊文献+
共找到87篇文章
< 1 2 5 >
每页显示 20 50 100
首款靶向抗凝血酶治疗血友病的干扰小RNA药物:fitusiran
1
作者 黄佩文 王旭东 《中国新药与临床杂志》 北大核心 2025年第8期591-595,共5页
fitusiran是一种由赛诺菲制药公司基于Alnylam制药公司的ESC-Ga1NAc偶联技术开发的靶向抗凝血酶的干扰小RNA(siRNA)治疗药物。2025年3月28日,fitusiran获得美国食品药品管理局(FDA)批准上市,用于12岁及以上有或无凝血因子抑制剂的血友病... fitusiran是一种由赛诺菲制药公司基于Alnylam制药公司的ESC-Ga1NAc偶联技术开发的靶向抗凝血酶的干扰小RNA(siRNA)治疗药物。2025年3月28日,fitusiran获得美国食品药品管理局(FDA)批准上市,用于12岁及以上有或无凝血因子抑制剂的血友病A/B患者。临床试验表明,fitusiran可显著降低目标人群的出血率,常见治疗相关不良事件包括病毒感染、呼吸道感染、鼻咽炎、转氨酸升高等。 展开更多
关键词 fitusiran 干扰小rna 血友病 替代治疗 抗凝血酶
原文传递
干扰小RNA抗高血压药Zilebesiran的研究进展
2
作者 关芳 康雅隆 +4 位作者 谭娟娟 齐鸿飞 秦墁 王若楠 王海芳 《心血管病学进展》 CAS 2024年第12期1099-1104,共6页
高血压是心脑血管疾病的重要危险因素之一。目前中国的高血压发病率高,但知晓率、诊断率、治疗率相对较低。高血压发病机制复杂,尚不完全清楚,且具有较大的个体差异性。西医治疗以口服抗高血压药为主要手段,用药间隔时间短、患者依从性... 高血压是心脑血管疾病的重要危险因素之一。目前中国的高血压发病率高,但知晓率、诊断率、治疗率相对较低。高血压发病机制复杂,尚不完全清楚,且具有较大的个体差异性。西医治疗以口服抗高血压药为主要手段,用药间隔时间短、患者依从性差,部分患者联合用药后血压控制仍欠佳。zilebesiran是一类新型、尚处于临床研究阶段的干扰小RNA抗高血压药,能够特异性阻断肝脏血管紧张素原信使RNA的表达,从而减少肝脏血管紧张素原的合成,实现降压目的。该药物的作用靶点较传统抗高血压药更为上游,效果更为全面、强效,且半衰期长,用药频次明显减低,当前研究结果提示其短期应用具有良好的耐受性及安全性。现旨在介绍zilebesiran的作用机制和临床试验的初步结果,包括疗效及安全性,以期提高国内相关领域研究人员对该药的全面深入认识。 展开更多
关键词 Zilebesiran 高血压 干扰小rna 血管紧张素原
暂未订购
干扰小RNA下调瘦素受体抑制人骨关节炎软骨细胞白细胞介素-1β和一氧化氮的信使RNA表达 被引量:3
3
作者 唐新 郑果 +7 位作者 陈卓 黄强 李棋 付维力 李箭 陈刚 周宗科 裴福兴 《华西医学》 CAS 2016年第5期854-858,共5页
目的观察干扰小RNA(si RNA)下调瘦素受体对人骨关节炎软骨细胞白细胞介素(IL)-1β和一氧化氮(NO)表达的抑制作用,为临床基础研究提供参考依据。方法取全膝置换术患者残存的无菌膝关节软骨进行分离培养人关节软骨细胞,取第3代软骨细胞对... 目的观察干扰小RNA(si RNA)下调瘦素受体对人骨关节炎软骨细胞白细胞介素(IL)-1β和一氧化氮(NO)表达的抑制作用,为临床基础研究提供参考依据。方法取全膝置换术患者残存的无菌膝关节软骨进行分离培养人关节软骨细胞,取第3代软骨细胞对瘦素受体的Ob-Rb的分别用携带si RNA的脂质体(实验组)和空白脂质体(对照组)进行转染,转染成功后24、48、72 h采用荧光定量聚合酶链反应测前炎性因子基因IL-1β和NO的信使RNA表达量。结果转染成功后24、48及72 h,实验组IL-1β的表达逐渐略有上升,NO的m RNA表达逐渐下降,但均明显低于对照组(P<0.05),且随时间推移差值逐渐变大。结论 si RNA技术下调瘦素受体可明显抑制人骨关节炎软骨细胞IL-1β和NO的m RNA的表达水平。 展开更多
关键词 骨关节炎 人软骨细胞 干扰小rna 白细胞介素-1Β 一氧化氮
原文传递
动物新型内源干扰小RNA研究
4
作者 李培旺 卢向阳 +2 位作者 李昌珠 方俊 田云 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期17-20,共4页
微RNA(microRNA,miRNA)和Piwi作用RNA(Piwi-interacting RNA,piRNA)是动物体内具有重要调控作用的两类内源小RNA分子。最近科学家相继从动物体细胞和生殖细胞中发现了一种新型内源小RNA——内源干扰小RNA(endogenous small interfering ... 微RNA(microRNA,miRNA)和Piwi作用RNA(Piwi-interacting RNA,piRNA)是动物体内具有重要调控作用的两类内源小RNA分子。最近科学家相继从动物体细胞和生殖细胞中发现了一种新型内源小RNA——内源干扰小RNA(endogenous small interfering RNA,endo-siRNA)。研究表明endo-siRNA分子在结构、分布及其功能上均与miRNA和piRNA分子存在着显著的异同点。 展开更多
关键词 内源小分子rna 内源干扰小rna rna Piwi作用rna
原文传递
新型降脂药物干扰小RNA Inclisiran最新研究进展 被引量:2
5
作者 许海南 龙明智 《心血管病学进展》 CAS 2021年第7期590-592,618,共4页
血脂异常是动脉粥样硬化性疾病的主要危险因素之一,临床上有相当比例患者即使应用大剂量他汀类药物仍不能使低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)达标。前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)是近年来发现的非他汀类降脂药物作用的新靶点,目前已上市的针... 血脂异常是动脉粥样硬化性疾病的主要危险因素之一,临床上有相当比例患者即使应用大剂量他汀类药物仍不能使低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)达标。前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)是近年来发现的非他汀类降脂药物作用的新靶点,目前已上市的针对PCSK9的单克隆抗体可使LDL-C水平显著降低,但因其需每2~4周的皮下注射及价格昂贵,使得患者的依从性降低,影响药物的推广应用。干扰小RNA inclisiran是一种经化学修饰的双链RNA,可直接抑制肝脏中PCSK9的合成,目前已公布的inclisiran大型临床试验ORION系列研究均表明其每年两次的给药方案可使LDL-C水平显著降低,现就inclisiran的最新研究进展加以综述。 展开更多
关键词 低密度脂蛋白胆固醇 前蛋白转化酶枯草溶菌素9 干扰小rna Inclisiran
暂未订购
干扰小RNA序列非依赖性地影响胰腺癌细胞的基因表达
6
作者 宋珏 魏超 张玉祥 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第5期530-539,共10页
干扰小RNA(small interference RNA,siRNA)是基因敲减的常用工具,广泛用于基因沉默技术和基因功能研究,在临床疾病治疗等方面也有潜在的应用。一般认为,达到一定长度(比如大于27 bp)的双链RNA可以诱导干扰素反应,降低相关基因的表达。目... 干扰小RNA(small interference RNA,siRNA)是基因敲减的常用工具,广泛用于基因沉默技术和基因功能研究,在临床疾病治疗等方面也有潜在的应用。一般认为,达到一定长度(比如大于27 bp)的双链RNA可以诱导干扰素反应,降低相关基因的表达。目前,siRNA对基因表达的非特异性作用尚不完全清楚。为研究siRNA干扰的非特异基因表达,本研究以胰腺癌细胞HPAC和Bx PC3为模型,采用高通量测序技术对6种不同干扰小RNA处理及未作处理的HPAC和Bx PC3细胞进行转录组测序分析,筛选出干扰小RNA处理后表达量共同下调的基因进行研究。通过生物信息学方法对表达下调基因的功能进行研究,并利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)技术对部分下调基因进行验证。结果表明,短片段双链小RNA能够显著改变细胞的基因表达,而这些基因表达谱的变化是有规律的,特定功能的基因优先发生变化。在表达下调的基因中,某些特定类型的基因变化非常显著,包括氨基酸代谢相关基因、Hedgehog信号途径基因和多巴胺受体D5基因等。这些结果表明,在使用siRNA时需要考虑其序列非依赖性地基因表达调控作用。 展开更多
关键词 干扰小rna 非特异性作用 转录组测序技术 基因表达
原文传递
干扰小RNA下调瘦素的表达对人病理性瘢痕成纤维细胞增殖能力及转化生长因子-β1、Ⅰ型胶原蛋白表达水平的影响 被引量:6
7
作者 陈晓娟 周国富 +1 位作者 蔡燕 向小燕 《中华整形外科杂志》 CSCD 2022年第2期215-221,共7页
目的探讨干扰小RNA(siRNA)下调瘦素(leptin)的表达对体外培养的人病理性瘢痕成纤维细胞增殖能力及转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白表达水平的影响。方法收集川北医学院附属医院烧伤整形科手术切除的病理性瘢痕组织(增生性瘢痕... 目的探讨干扰小RNA(siRNA)下调瘦素(leptin)的表达对体外培养的人病理性瘢痕成纤维细胞增殖能力及转化生长因子-β1(TGF-β1)、Ⅰ型胶原蛋白表达水平的影响。方法收集川北医学院附属医院烧伤整形科手术切除的病理性瘢痕组织(增生性瘢痕、瘢痕疙瘩)。经原代细胞培养及细胞传代,取第3代细胞用于实验研究。实验分为2组:转染leptin-siRNA为实验组;转染空载体为阴性对照组。细胞转染48 h后进行后续实验。以CCK-8法测定细胞增殖能力。以实时定量聚合酶链反应(PCR)检测leptin、TGF-β1、Ⅰ型胶原蛋白的mRNA表达水平。以免疫荧光法和Western blotting测定leptin、TGF-β1、Ⅰ型胶原蛋白的蛋白表达量。组间比较采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果增生性瘢痕及瘢痕疙瘩组织各纳入5例。与阴性对照组相比,leptin-siRNA转染后24 h和48 h成纤维细胞增殖能力(吸光度A450值)的差异无统计学意义(P>0.05)。增生性瘢痕及瘢痕疙瘩组织中,leptin、TGF-β1以及Ⅰ型胶原蛋白的mRNA相对表达量比较,实验组比阴性对照组均明显减少(P<0.05)。免疫荧光显示,瘢痕疙瘩中leptin、TGF-β1、Ⅰ型胶原蛋白的表达高于增生性瘢痕,且应用siRNA下调leptin后,增生性瘢痕及瘢痕疙瘩成纤维细胞中leptin、TGF-β1、Ⅰ型胶原蛋白表达明显减少。Western blotting检测结果示增生性瘢痕和瘢痕疙瘩成纤维细胞中leptin、TGF-β1和Ⅰ型胶原蛋白在siRNA干扰下显著降低,其转染siRNA组的leptin、TGF-β1、Ⅰ型胶原蛋白表达水平均小于阴性对照组(P均值<0.01)。结论RNA干扰下调leptin基因的表达可抑制TGF-β1和Ⅰ型胶原蛋白的表达,有希望用于病理性瘢痕的治疗。 展开更多
关键词 瘦素 转化生长因子-Β Ⅰ型胶原蛋白 病理性瘢痕 成纤维细胞 干扰小rna
原文传递
单链抗体靶向递送系统在RNA干扰中的应用
8
作者 黄秀兰 崔国辉 周克元 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期324-326,共3页
RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种由干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA介)导的转录后基因沉默。随着医学的发展,通过RNAi来抑制靶基因的表达已经成为一种强有力的研究基因功能、验证药物靶标和治疗多种疾病的方法。然而,RNAi... RNA干扰(RNA interference,RNAi)是一种由干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA介)导的转录后基因沉默。随着医学的发展,通过RNAi来抑制靶基因的表达已经成为一种强有力的研究基因功能、验证药物靶标和治疗多种疾病的方法。然而,RNAi在哺乳动物中的治疗应用却受到基因递送系统的限制,即siRNA在体内递送的靶向性。目前,各种配体,如糖基化分子、肽类、蛋白质、抗体和基因工程抗体片段对于靶向递送siRNA具有巨大的应用潜力。它们改善了基因递送系统的有效性、特异性和安全性。本文主要就单链抗体-鱼精蛋白截短体融合蛋白在RNAi中的应用进行综述。 展开更多
关键词 干扰小rna rna干扰 单链抗体 靶向递送 基因沉默
在线阅读 下载PDF
Innovative trends in RNA interference drugs:a comprehensive patent analysis
9
作者 Xing Li Lu Ma +2 位作者 Yali Zhao Xiaoxia Zhang Zijia Li 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 2025年第8期701-714,共14页
Nucleic acid drugs represent the third wave of innovation in drug research and development,succeeding small-molecule and antibody drugs.These drugs,particularly RNA interference(RNAi)therapies,have become a pivotal fo... Nucleic acid drugs represent the third wave of innovation in drug research and development,succeeding small-molecule and antibody drugs.These drugs,particularly RNA interference(RNAi)therapies,have become a pivotal focus in the pharmaceutical industry.RNAi drugs are extensively utilized in the treatment of chronic and rare diseases due to their exceptional gene-silencing efficiency,manageable side effects,and straightforward synthesis process.This study undertook a thorough analysis of the global landscape of RNAi drug patents,highlighting the latest technological advancements and trends.We meticulously identified and cataloged the key technologies that dominated this patent landscape.The goal was to provide valuable insights and references for researchers involved in the development of RNAi drugs within the domestic pharmaceutical sector. 展开更多
关键词 Nucleic acid drugs rna interference(rnai)drugs sirna Patent analysis
原文传递
RNA干扰作用(RNAi)研究进展 被引量:36
10
作者 陈忠斌 于乐成 王升启 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期525-528,共4页
RNA干扰作用 (RNAi)是生物界一种古老而且进化上高度保守的现象 ,是基因转录后沉默作用 (PTGS)的重要机制之一 .RNAi主要通过dsRNA被核酸酶切割成 2 1~ 2 5nt的干扰性小RNA即siRNA ,由siRNA介导识别并靶向切割同源性靶mRNA分子而实现 .... RNA干扰作用 (RNAi)是生物界一种古老而且进化上高度保守的现象 ,是基因转录后沉默作用 (PTGS)的重要机制之一 .RNAi主要通过dsRNA被核酸酶切割成 2 1~ 2 5nt的干扰性小RNA即siRNA ,由siRNA介导识别并靶向切割同源性靶mRNA分子而实现 .RNAi要有多种蛋白因子以及ATP参与 ,而且具有生物催化反应特征 .RNAi是新发现的一种通过dsRNA介导的特异性高效抑制基因表达途径 。 展开更多
关键词 rna干扰作用 rnaI 研究进展 基因转录后沉默 干扰小rna 沉默复合体 反义药物
在线阅读 下载PDF
FLIP干扰性小RNA促进大肠癌细胞的凋亡 被引量:5
11
作者 孙保存 臧凤琳 +3 位作者 牛瑞芳 魏熙胤 赵秀兰 张诗武 《世界华人消化杂志》 CAS 北大核心 2005年第13期1519-1523,共5页
目的:研究对应FLIP基因的siRNA片段对大肠癌细胞株HT-29凋亡的影响,明确FLIP在Fas介导的凋亡途径中的作用. 方法:体外培养大肠癌细胞HT-29,通过电穿孔技术将特异性siRNA片段转染入细胞,半定量RT-PCR 法判断干扰前后FLIP mRNA水平的变化... 目的:研究对应FLIP基因的siRNA片段对大肠癌细胞株HT-29凋亡的影响,明确FLIP在Fas介导的凋亡途径中的作用. 方法:体外培养大肠癌细胞HT-29,通过电穿孔技术将特异性siRNA片段转染入细胞,半定量RT-PCR 法判断干扰前后FLIP mRNA水平的变化,分析RNA 干扰的特异性、时效性,并比较对应不同位点的两个siRNA片段对FLIP的干扰效果.经凋亡诱导型抗体激活后,以Annexin V染色法及DNA降解片段检测分析干扰前后HT-29细胞对Fas介导的凋亡敏感性的改变. 结果:特异性siRNA片段能有效降低FLIP mRNA水平,最大干扰效率达65.02%,明显高于作为对照的非相关片段;干扰作用于转染后24 h即可出现,48 h达高峰,72 h稍有降低;对应不同位点的两个siRNA片段对FLIP均可产生干扰作用,彼此间差别不大.在诱导型抗体的刺激下,与未转染细胞相比,转染siRNA 的HT-29细胞中凋亡细胞所占比例明显增加. 结论:特异性siRNA片段可显著降低FLIP基因mRNA 的表达水平,并提高HT-29细胞对Fas介导的凋亡敏感性.以FLIP为靶点的RNA干扰技术可望成为大肠癌基因治疗的新方法. 展开更多
关键词 FLIP 干扰小rna 大肠癌细胞株HT-29 HT-29细胞 半定量RT-PCR法 rna片段 mrna水平 FAS介导 Annexin DNA降解片段 rna干扰技术 凋亡敏感性 基因mrna 干扰作用 电穿孔技术 sirna 癌基因治疗 特异性 体外培养 凋亡途径 抗体激活
暂未订购
RNA干扰VEGF-C基因下调COX-2、Bcl-2表达对乳腺癌细胞凋亡的影响 被引量:3
12
作者 顾斐 邹强 倪泉兴 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期168-171,共4页
目的利用人血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)小RNA干扰(siRNA)表达载体——重组质粒pSilencer3.0-VEGF-C/siRNA,研究VEGF-C基因下调抑制COX-2、Bcl-2表达及对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435的体外作用。方法... 目的利用人血管内皮生长因子-C(vascular endothelial growth factor-C,VEGF-C)小RNA干扰(siRNA)表达载体——重组质粒pSilencer3.0-VEGF-C/siRNA,研究VEGF-C基因下调抑制COX-2、Bcl-2表达及对人乳腺癌细胞株MDA-MB-435的体外作用。方法pSilencer3.0-VEGF-C/siRNA表达质粒和阴性对照质粒稳定转染人乳腺癌细胞株MDA-MB-435,RT-PCR和Western blot检测转染前后VEGF-C、COX-2基因和VEGF-C、COX-2、Bcl-2蛋白的表达;MTT法和流式细胞仪检测VEGF-CRNA干扰对细胞的作用。结果pSilencer3.0-VEGF-C/siRNA转染乳腺癌细胞MDA-MB-435,VEGF-C基因和蛋白水平表达量明显降低,COX-2和Bcl-2表达下调,细胞体外活性下降,72h后凋亡率达60%。结论针对人VEGF-C基因的siRNA表达载体抑制VEGF-C表达的同时下调COX-2和Bcl-2的表达,促进乳腺癌细胞MDA-MB-435的凋亡。 展开更多
关键词 乳腺癌 血管内皮生长因子-C 小rna干扰 COX-2 BCL-2
暂未订购
RNA干扰沉默缺氧诱导因子1α逆转肺癌细胞耐药性 被引量:3
13
作者 刘胜岗 陈琼 +3 位作者 何白梅 陈莹 聂华萍 梁伟军 《现代生物医学进展》 CAS 2011年第13期2486-2489,共4页
目的:观察RNA干扰沉默缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对肺癌细胞耐药性的影响。方法:构建靶向HIF-1α小干扰RNA基因,并转染到人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP细胞中。逆转录聚合酶链反应RT-PCR)检测细胞的HIF-1α、多药耐药基因1(MDR-1)以多药... 目的:观察RNA干扰沉默缺氧诱导因子1α(HIF-1α)对肺癌细胞耐药性的影响。方法:构建靶向HIF-1α小干扰RNA基因,并转染到人肺腺癌耐顺铂细胞株A549/DDP细胞中。逆转录聚合酶链反应RT-PCR)检测细胞的HIF-1α、多药耐药基因1(MDR-1)以多药耐药相关蛋白基因(MRP)mRNA变化,免疫细胞化学法观察干扰后HIF-1α、P-糖蛋白以及MRP蛋白的变化。MTT法检测不同浓度的顺铂作用下细胞死亡率。结果:HIF-1αsiRNA组中HIF-1α、MDR-1、MRP mRNA水平显著降低(P<0.05),且蛋白水平也显著下降(P<0.05)。HIF-1αsiRNA组细胞死亡率较未转染组均明显增高(P<0.05),转染siRNA阴性组不影响肿瘤细胞的耐药性。结论:HIF-1αsiRNA可显著降低A549/DDP细胞中HIF-1α、MDR-1、MRP表达,从而起到逆转肺腺癌A549/DDP细胞的耐药作用。 展开更多
关键词 小rna干扰 低氧诱导因子-1Α 多药耐药基因1 多药耐药相关蛋白
原文传递
小RNA干扰联合电针治疗对脊髓损伤后结缔组织生长因子的沉默作用 被引量:5
14
作者 赵伟 柴勇 +1 位作者 房清敏 杨成 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第2期185-190,共6页
目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)siRNA联合电针治疗对脊髓损伤(SCI)后CTGF阳性表达的沉默作用。方法将SD大鼠随机分为对照(control)组、脊髓损伤(SCI)组、电针(EA)组、CTGF干扰(CTGF)组、CTGF干扰联合电针(EA+CTGF)组。制备SCI模型,将含... 目的探讨结缔组织生长因子(CTGF)siRNA联合电针治疗对脊髓损伤(SCI)后CTGF阳性表达的沉默作用。方法将SD大鼠随机分为对照(control)组、脊髓损伤(SCI)组、电针(EA)组、CTGF干扰(CTGF)组、CTGF干扰联合电针(EA+CTGF)组。制备SCI模型,将含有CTGF siRNA/invivofectamine的复合物植入CTGF、EA+CTGF组大鼠的脊髓(T10)损伤断端,SCI、EA组用invivofectamine转染试剂代替。EA、EA+CTGF组在模型制备后每天给予电针治疗。各组在3 d、7 d、14 d取损伤脊髓,应用Western blotting、RT-PCR测定CTGF、转化生长因子β-1(TGF-β1)及GFAP蛋白和mRNA表达变化,应用免疫荧光做形态学观察。结果与SCI组相比,CTGF组、EA+CTGF组的CTGF、TGF-β1、GFAP蛋白表达下调,联合治疗效果更明显(P<0.05);EA+CTGF组CTGF、TGF-β1、GFAP mRNA表达明显低于SCI组、EA组和CTGF组(P<0.01)。免疫荧光发现,SCI组CTGF阳性细胞反应性增生;CTGF组CTGF表达减弱,阳性细胞数减少;EA+CTGF组CTGF阳性细胞数明显减少。结论 CTGF siRNA联合电针治疗使损伤脊髓CTGF表达下调,胶质反应减轻,抑制瘢痕形成。 展开更多
关键词 脊髓损伤 结缔组织生长因子 小rna干扰 电针 胶质化 免疫荧光 大鼠
原文传递
小RNA干扰Akt2对U87恶性胶质瘤细胞迁移和侵袭能力的影响 被引量:2
15
作者 张宝刚 谷峰 +3 位作者 李文良 郭华 张宁 马勇杰 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期691-695,共5页
目的探讨转染Akt2-siRNA表达载体阻断Akt2信号转导通路对U87恶性胶质瘤细胞运动、迁移和侵袭能力的影响。方法利用siRNA技术,稳定转染恶性胶质瘤细胞系U87;用RT-PCR和免疫印迹技术分别检测Akt2的mRNA和蛋白的表达;划痕实验和体外侵袭实... 目的探讨转染Akt2-siRNA表达载体阻断Akt2信号转导通路对U87恶性胶质瘤细胞运动、迁移和侵袭能力的影响。方法利用siRNA技术,稳定转染恶性胶质瘤细胞系U87;用RT-PCR和免疫印迹技术分别检测Akt2的mRNA和蛋白的表达;划痕实验和体外侵袭实验分别检测恶性胶质瘤细胞的运动和侵袭能力;用细胞黏附实验检测细胞的黏附能力,纤维型肌动蛋白(F-actin)聚合实验检测F-actin的聚合能力;免疫印迹技术检测LIMK的磷酸化,证明Akt2影响F-actin聚合的机制。结果稳定转染siAkt2载体后,Akt2的mRNA和蛋白水平均下降;细胞向划痕移动的速度比对照组慢(P<0.05);侵袭并穿透基质胶(Matrigel)的细胞数量比对照组少(P<0.01);细胞内F-actin聚合比对照组减少(P<0.05);黏附实验结果显示,黏附5min、15min后,低表达Akt2的细胞比对照组的黏附数量均减少(P<0.05)。结论Akt2基因沉默可以通过降低F-actin聚合、降低黏附于细胞外基质的能力而降低恶性胶质瘤细胞的运动和侵袭能力。 展开更多
关键词 胶质瘤 细胞运动 侵袭 小rna干扰 免疫印迹法
原文传递
β淀粉样前体蛋白裂解酶特异性小干扰RNA真核表达载体的构建和鉴定 被引量:2
16
作者 董炜疆 胡海涛 +2 位作者 冯改丰 杨广笑 王全颖 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期413-416,423,共5页
目的构建β淀粉样前体蛋白裂解酶(BACE)特异性小干扰RNA真核表达载体。方法用PCR扩增BACE特异性小干扰RNA,转入带有增强型绿荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的pUC19质粒,再将重组基因片段导入逆转录病毒真核表达载体pLXSN中,通过限制性酶切对... 目的构建β淀粉样前体蛋白裂解酶(BACE)特异性小干扰RNA真核表达载体。方法用PCR扩增BACE特异性小干扰RNA,转入带有增强型绿荧光蛋白(EGFP)和启动子U6的pUC19质粒,再将重组基因片段导入逆转录病毒真核表达载体pLXSN中,通过限制性酶切对该重组表达载体进行鉴定。结果成功构建了BACE真核表达载体pLXSN/EGFP-U6-siBACE。结论pLXSN/EGFP-U6-siBACE载体的成功构建对进一步利用基因干扰技术治疗阿尔茨海默病的研究奠定了重要的基础。 展开更多
关键词 干扰小rna 阿尔茨海默病 β淀粉样蛋白分泌酶
暂未订购
小RNA干扰MMP-2基因表达对结直肠癌细胞生物学特性的影响 被引量:4
17
作者 刘秀兰 陈世杰 《蚌埠医学院学报》 CAS 2019年第10期1305-1309,共5页
目的:探讨小RNA干扰基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因表达对结直肠癌细胞生物学特性的影响。方法:收集结直肠癌病人的结直肠癌组织及正常的癌旁组织,Western blotting检测MMP-2表达水平。取结直肠癌细胞SW620作为对照组,将MMP-2 siRNA、siRNA... 目的:探讨小RNA干扰基质金属蛋白酶2(MMP-2)基因表达对结直肠癌细胞生物学特性的影响。方法:收集结直肠癌病人的结直肠癌组织及正常的癌旁组织,Western blotting检测MMP-2表达水平。取结直肠癌细胞SW620作为对照组,将MMP-2 siRNA、siRNA control转染至结直肠癌细胞中,Western blotting检测转染48 h后MMP-2 siRNA组、siRNA control组和对照组细胞中MMP-2水平,MTT法检测各组细胞存活情况,流式细胞术检测各组细胞凋亡变化,Western blotting检测各组细胞中B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、β-连环蛋白(β-catenin)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、下游靶基因C-myc、细胞周期蛋白D1(cyclin D1)水平。结直肠癌细胞与Wnt/β-catenin信号通路抑制剂FH535作用后,测定抑制剂组和未处理组(不加抑制剂)细胞增殖、凋亡变化,同时检测细胞中Bcl-2、β-catenin、Bax、C-myc、cyclin D1蛋白变化。结果:结直肠癌组织中MMP-2蛋白表达水平明显高于癌旁组织(P<0.01)。MMP-2 siRNA组MMP-2水平均低于对照组和siRNA control组(P<0.05),细胞存活率低于对照组(P<0.05),细胞凋亡率均高于对照组和siRNA control组(P<0.05)。Bcl-2、β-catenin、C-myc、cyclin D1水平均低于对照组和siRNA control组(P<0.05),Bax水平均高于对照组和siRNA control组(P<0.05)。Wnt/β-catenin信号通路抑制剂作用后,抑制剂组细胞存活率低于未处理组(P<0.05),细胞凋亡率高于未处理组(P<0.05),Bcl-2、β-catenin、C-myc、cyclin D1水平均明显低于未处理组(P<0.01),Bax水平明显高于未处理组(P<0.01),与转染MMP-2 siRNA的结直肠癌细胞一致。结论:MMP-2在结直肠癌组织中表达上调,抑制MMP-2的结直肠癌细胞增殖受到抑制,凋亡增多,其作用机制与Wnt/β-catenin信号通路有关。 展开更多
关键词 结直肠肿瘤 基质金属蛋白酶2 小rna干扰 WNT/Β-CATENIN信号通路
暂未订购
小RNA干扰技术在治疗肝细胞肝癌中的应用 被引量:1
18
作者 金响国 胡凯 +3 位作者 李兴江 崔立然 许景伟 周涛 《齐齐哈尔医学院学报》 2013年第3期320-321,共2页
目的探讨利用小RNA干扰技术作用缺氧诱导因子1α2α稳定转染肝癌细胞后VEGFR蛋白表达情况。方法构建HIF1α、HIF2α基因的真核表达载体HIF1α、HIF2α-pcDNA3.1,检测48 h(Western Blots);同时用Western Blots方法检测VEGFR蛋白表达。结... 目的探讨利用小RNA干扰技术作用缺氧诱导因子1α2α稳定转染肝癌细胞后VEGFR蛋白表达情况。方法构建HIF1α、HIF2α基因的真核表达载体HIF1α、HIF2α-pcDNA3.1,检测48 h(Western Blots);同时用Western Blots方法检测VEGFR蛋白表达。结果缺氧诱导因子1α2α小RNA干扰稳定转染肝癌细胞。与未转染组和转染空载体组相比,伴随HIF-1α、HIF-2α基因沉默同时VEGF的蛋白表达也下降。结论缺氧诱导因子1α2α小RNA干扰转染肝癌细胞有效抑制HIF-1α与HIF-2α的表达。为肝癌治疗的新策略奠定了基础。 展开更多
关键词 肝细胞肝癌 HIF-1α与HIF-2α 小rna干扰 转染肝癌细胞
暂未订购
RNA干扰技术及其在遗传育种中的应用 被引量:2
19
作者 侯娅丽 刘文忠 《动物科学与动物医学》 2004年第9期37-38,共2页
RNA干扰(RNAinterference,RNAi)是二十世纪末发现的一种基因沉默机制,具有广大的应用前景。本文就RNAi的可能机制、特征、RNAi技术中存在的问题及其在基因组、基因表达调控和干细胞研究、基因治疗、育种等方面的应用进行了综述。
关键词 rnaI 双链rna 干扰小rna
在线阅读 下载PDF
一种可电离阳离子脂质构建脂质体用于siRNA递送的体外研究
20
作者 胡敦 邹俊娜 +2 位作者 聂盛丹 王艳 王珊 《中南大学学报(医学版)》 CSCD 北大核心 2024年第10期1591-1600,共10页
目的:干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)可通过序列特异性的RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默疾病相关基因的表达。含有阳离子脂质的脂质体能够有效地将核酸递送至胞质使其发挥作用,但毒性较大。本文旨在通过利用天然氨基酸合... 目的:干扰小RNA(small interfering RNA,siRNA)可通过序列特异性的RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默疾病相关基因的表达。含有阳离子脂质的脂质体能够有效地将核酸递送至胞质使其发挥作用,但毒性较大。本文旨在通过利用天然氨基酸合成一种新型可电离脂质——N^(ε)-月桂酰基赖氨酸酰胺(N^(ε)-laruoyl-lysine amide,LKA)并构建脂质体,探究其理化性质的表征及细胞相关实验,系统评估这一新型可电离脂质构建的脂质体作为核酸递送系统的潜力。方法:采用化学法合成LKA,并通过核磁共振氢谱和质谱进行表征验证;采用纸电泳实验探究LKA的pH响应性电荷变化情况;采用乙醇注入法制备LKA构建的空白脂质体(N^(ε)-laruoyl-lysine amide-Lipoprotein,LKA-LP)、包载信号转导及转录激活因子3-siRNA(signal transducer and activator of transcription 3-siRNA,STAT3-siRNA)的脂质体(LKA-LP@STAT3-siRNA)和包载尼罗红的脂质体(LKA-LP@Nile Red)。采用激光粒度分析仪和扫描电子显微镜对LKA-LP@STAT3-siRNA进行粒径大小及形态表征检测;采用琼脂糖凝胶电泳法检测LKA-LP@STAT3-siRNA的包封率。采用LKA-LP@Nile Red考察人宫颈上皮癌细胞系HeLa细胞和小鼠胚胎成纤维细胞系3T3对于脂质体的摄取情况;采用花菁5(Cyanine 5,Cy5)标志STAT3-siRNA,结合溶酶体绿色荧光探针评价人肺腺癌上皮细胞系A549细胞中LKA-LP@STAT3-siRNA的溶酶体逃逸能力;采用实时反转录聚合酶链反应检测STAT3基因沉默效果;采用细胞计数试剂盒-8(cell counting kit-8,CCK-8)法测定LKA-LP@STAT3-siRNA对于HeLa细胞的杀伤作用。结果:核磁共振氢谱和质谱检测结果提示LKA合成成功。纸电泳实验结果显示从pH 7.4减小至pH 5.5的过程中,LKA的正电荷量逐渐增加。LKA-LP@STAT3-siRNA呈大小均匀的类球形,粒径为(164.1±3.27)nm,多分散性指数为0.174±0.029,7 d内可以保持较好的稳定性,核酸的包封率为(64.6±2.8)%。细胞摄取实验结果显示,与pH 7.4时比较,pH5.0时细胞对LKA-LP摄取增多,且与3T3细胞比较,HeLa细胞摄取增多更明显。溶酶体逃逸实验显示LKA-LP与溶酶体重叠率约为42.34%,证明LKA-LP可以顺利地从溶酶体逃逸。基因沉默实验结果显示,50和100 nmol/L的LKALP@STAT3-siRNA处理后,HeLa细胞中STAT3的mRNA相对表达水平均显著降低(均P<0.01)。细胞毒性实验结果显示,50和100 nmol/L的LKA-LP@STAT3-siRNA处理后,HeLa细胞存活率均显著低于3T3细胞(均P<0.01)。结论:可电离阳离子脂质LKA可构建脂质体LKA-LP以用于siRNA药物的递送。在细胞层面成功实现了基因沉默,且对HeLa细胞产生了特异性杀伤作用,为LKA-LP作为核酸递送载体的核酸药物的开发奠定了坚实且充足的基础。 展开更多
关键词 干扰小rna递送 可电离阳离子脂质 脂质体 化学合成 HELA细胞
暂未订购
上一页 1 2 5 下一页 到第
使用帮助 返回顶部