背景:纳米细胞囊泡具有再上皮化、抗氧化、抗炎以及调节细胞外基质重塑等功能,凋亡小体具有免疫调节作用,因此二者结合所形成的纳米融合囊泡可协同促进糖尿病皮肤创面愈合。目的:探讨纳米融合囊泡对糖尿病小鼠皮肤创面的愈合作用。方法...背景:纳米细胞囊泡具有再上皮化、抗氧化、抗炎以及调节细胞外基质重塑等功能,凋亡小体具有免疫调节作用,因此二者结合所形成的纳米融合囊泡可协同促进糖尿病皮肤创面愈合。目的:探讨纳米融合囊泡对糖尿病小鼠皮肤创面的愈合作用。方法:①材料制备及表征:分离提取C57BL/6J乳鼠原代骨髓间充质干细胞纳米囊泡和C57BL/6J小鼠骨髓来源中性粒细胞凋亡小体,将二者结合采用微型挤出机制备纳米融合囊泡。②体外实验:采用MTT检测不同浓度纳米融合囊泡对NIH-3T3细胞和人脐静脉内皮细胞的增殖作用;采用活性氧荧光探针检测纳米融合囊泡对过氧化氢干预的NIH-3T3细胞的抗氧化作用;采用实时定量RT-qPCR法检测纳米融合囊泡对脂多糖引发的RAW 264.7巨噬细胞炎症反应的抑制效果。③体内实验:36只雄性C57BL/6J小鼠构建糖尿病小鼠模型,造模成功后在糖尿病小鼠脊柱两侧使用打孔机分别制备直径6 mm的2个圆形创面,采用随机数字表法分为3组,对照组创缘皮下注射0.1 mL磷酸盐缓冲液,纳米囊泡组注射0.1 mL 25μg/mL纳米囊泡,纳米融合囊泡组注射0.1 mL 25μg/mL纳米融合囊泡,连续治疗3 d,观察创面愈合情况与组织形态学变化。结果与结论:①体外实验:纳米融合囊泡在质量浓度为0-100μg/mL时均无毒性作用,且可促进NIH-3T3细胞和人脐静脉内皮细胞的增殖,其中25μg/mL纳米融合囊泡促进NIH-3T3细胞增殖的效果最明显,而人脐静脉内皮细胞的存活率则随着纳米融合囊泡质量浓度的增加不断增强。纳米融合囊泡具有良好的抗氧化效果,与过氧化氢组相比,纳米囊泡组和纳米融合囊泡组的活性氧荧光信号依次减弱。此外,纳米融合囊泡还具有抗炎能力,降低了脂多糖诱导的巨噬细胞炎症反应。②体内实验:苏木精-伊红染色与Masson染色显示,与对照组相比,术后第6天纳米囊泡组和纳米融合囊泡组创面均表达出丰富的胶原纤维以及肉芽组织,其中以纳米融合囊泡组最多;术后第12天,纳米融合囊泡组创面显著缩小,且愈合速度显著快于其他组,促创面愈合效果最为显著。结果表明,纳米融合囊泡能够展现出促细胞增殖、抗氧化和抗炎特性,从而在促进糖尿病小鼠皮肤创面愈合过程中发挥积极作用。展开更多
文摘背景:纳米细胞囊泡具有再上皮化、抗氧化、抗炎以及调节细胞外基质重塑等功能,凋亡小体具有免疫调节作用,因此二者结合所形成的纳米融合囊泡可协同促进糖尿病皮肤创面愈合。目的:探讨纳米融合囊泡对糖尿病小鼠皮肤创面的愈合作用。方法:①材料制备及表征:分离提取C57BL/6J乳鼠原代骨髓间充质干细胞纳米囊泡和C57BL/6J小鼠骨髓来源中性粒细胞凋亡小体,将二者结合采用微型挤出机制备纳米融合囊泡。②体外实验:采用MTT检测不同浓度纳米融合囊泡对NIH-3T3细胞和人脐静脉内皮细胞的增殖作用;采用活性氧荧光探针检测纳米融合囊泡对过氧化氢干预的NIH-3T3细胞的抗氧化作用;采用实时定量RT-qPCR法检测纳米融合囊泡对脂多糖引发的RAW 264.7巨噬细胞炎症反应的抑制效果。③体内实验:36只雄性C57BL/6J小鼠构建糖尿病小鼠模型,造模成功后在糖尿病小鼠脊柱两侧使用打孔机分别制备直径6 mm的2个圆形创面,采用随机数字表法分为3组,对照组创缘皮下注射0.1 mL磷酸盐缓冲液,纳米囊泡组注射0.1 mL 25μg/mL纳米囊泡,纳米融合囊泡组注射0.1 mL 25μg/mL纳米融合囊泡,连续治疗3 d,观察创面愈合情况与组织形态学变化。结果与结论:①体外实验:纳米融合囊泡在质量浓度为0-100μg/mL时均无毒性作用,且可促进NIH-3T3细胞和人脐静脉内皮细胞的增殖,其中25μg/mL纳米融合囊泡促进NIH-3T3细胞增殖的效果最明显,而人脐静脉内皮细胞的存活率则随着纳米融合囊泡质量浓度的增加不断增强。纳米融合囊泡具有良好的抗氧化效果,与过氧化氢组相比,纳米囊泡组和纳米融合囊泡组的活性氧荧光信号依次减弱。此外,纳米融合囊泡还具有抗炎能力,降低了脂多糖诱导的巨噬细胞炎症反应。②体内实验:苏木精-伊红染色与Masson染色显示,与对照组相比,术后第6天纳米囊泡组和纳米融合囊泡组创面均表达出丰富的胶原纤维以及肉芽组织,其中以纳米融合囊泡组最多;术后第12天,纳米融合囊泡组创面显著缩小,且愈合速度显著快于其他组,促创面愈合效果最为显著。结果表明,纳米融合囊泡能够展现出促细胞增殖、抗氧化和抗炎特性,从而在促进糖尿病小鼠皮肤创面愈合过程中发挥积极作用。
