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肺炎克雷伯氏菌荚膜多糖表达量评价指标的建立及发酵条件优化 被引量：2
1
作者 张燕 李轻舟 +2 位作者 杜连祥 戚薇 陈锦英 《工业微生物》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期16-21,共6页
建立了特异性强的肺炎克雷伯氏菌荚膜多糖全菌ELISA检测方法,检测结果与多糖表达量相关性好;以全菌ELISA值结合菌数为评价指标,对影响荚膜多糖表达的培养基组成及发酵条件进行了优化,优化后的摇瓶培养条件下发酵液活性和生物量分别比优... 建立了特异性强的肺炎克雷伯氏菌荚膜多糖全菌ELISA检测方法,检测结果与多糖表达量相关性好;以全菌ELISA值结合菌数为评价指标,对影响荚膜多糖表达的培养基组成及发酵条件进行了优化,优化后的摇瓶培养条件下发酵液活性和生物量分别比优化前提高72.7和33倍,并经7L罐放大实验,绘制发酵动力学曲线,为肺炎克雷伯氏菌荚膜多糖进一步开发打下基础。 展开更多
关键词 KLEBSIELLA PNEUMONIAE 荚膜多糖 全菌elisa 发酵条件
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尿道致病性大肠杆菌fimA基因的克隆与表达 被引量：1
2
作者 董杰 吕莉琨 +1 位作者 杨东靖 陈锦英 《环境与健康杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第3期223-225,共3页
目的对尿道致病性大肠杆菌(UPEC)132编码Ⅰ型菌毛的结构基因fimA进行克隆与表达,建立免疫学检测方法。方法采用PCR方法扩增fimA基因,定向克隆pET32a载体,原核表达获得FimA重组蛋白;免疫小鼠制备FimA多克隆抗体;建立全菌ELISA方法,检测UP... 目的对尿道致病性大肠杆菌(UPEC)132编码Ⅰ型菌毛的结构基因fimA进行克隆与表达,建立免疫学检测方法。方法采用PCR方法扩增fimA基因,定向克隆pET32a载体,原核表达获得FimA重组蛋白;免疫小鼠制备FimA多克隆抗体;建立全菌ELISA方法,检测UPEC132的Ⅰ型菌毛表型。结果 PCR扩增fimA全基因,构建重组质粒pET32a-fimA,经转化构建重组菌E.coli BL21(DE3)/pET32a-fimA;经IPTG诱导表达及镍亲和层析纯化获得重组蛋白FimA;制备的FimA多克隆抗体效价≥1∶51 200,Western blot显示其良好的特异性;全菌ELISA获得满意结果。结论成功地克隆UPECⅠ型菌毛的结构基因fimA,制备的多克隆抗体为UPEC的检测和致病性的研究奠定了基础。 展开更多
关键词 尿道致病性大肠杆菌 fimA 克隆 表达 全菌elisa
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