期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到5篇文章
< 1 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
人ZP3B-细胞表位嵌合肽DNA的设计和合成 被引量：2
1
作者 曹佐武 杨林 +1 位作者 潘善培 王自能 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 2000年第4期42-45,共4页
目的 :设计和合成适合在昆虫细胞中表达的一个人ZP3B细胞表位的DNA序列。方法 :根据国外的研究基础 ,设计由人ZP3的B细胞表位肽段和外源Th细胞表位肽段串联而成的 4 5肽嵌合肽序列 ,并根据昆虫细胞对密码子的偏爱性设计出该嵌合肽的DNA... 目的 :设计和合成适合在昆虫细胞中表达的一个人ZP3B细胞表位的DNA序列。方法 :根据国外的研究基础 ,设计由人ZP3的B细胞表位肽段和外源Th细胞表位肽段串联而成的 4 5肽嵌合肽序列 ,并根据昆虫细胞对密码子的偏爱性设计出该嵌合肽的DNA序列。然后人工合成该嵌合肽的DNA链 ,并克隆到PUC18载体上。结果 :通过酶切分析和测序证明 ,合成的DNA与所设计的嵌合肽DNA序列一致。结论 :　按设计合成了人ZP3的B细胞表位和外源Th细胞表位串联而成的嵌合肽DNA序列。 展开更多
关键词 人zp3 透明带基因 B细胞表位 嵌合肽 DNA序列
在线阅读 下载PDF
人ZP3基因的RT-PCRcDNA克隆 被引量：1
2
作者 叶志华 梁建庆 《生物技术》 CAS CSCD 2005年第4期1-4,共4页
目的:研究人ZP3基因的结构及构建人ZP3基因原核表达系统。方法:从人卵巢组织中分离出mRNA并以此作为模版,通过RT-PCR扩增出人ZP3基因cDNA片段,然后将其克隆在pUC18质粒上,并对克隆片段进行序列分析。结果:共克隆到ZP3-A(1300bp)、ZP3-B(... 目的:研究人ZP3基因的结构及构建人ZP3基因原核表达系统。方法:从人卵巢组织中分离出mRNA并以此作为模版,通过RT-PCR扩增出人ZP3基因cDNA片段,然后将其克隆在pUC18质粒上,并对克隆片段进行序列分析。结果:共克隆到ZP3-A(1300bp)、ZP3-B(1180bp)、ZP3-C(1200bp)和ZP3-D(1080bp)4种不同长度的人ZP3基因cDNA片段,对其中最长的ZP3-A片段的测序结果表明,它包含了人ZP3基因阅读框内的全部序列,与NCBISequenceViewer中公布的人ZP3mRNA序列(NM-007155)相比较,在1275bp长的编码区内只有一个碱基不同,两者同源性达到99.92%。结论:本研究克隆到的ZP3-AcDNA片段确是人ZP3基因无疑。 展开更多
关键词 人zp3基因 CDNA克隆 序列
在线阅读 下载PDF
重组人ZP3蛋白在大肠杆菌中的高效表达
3
作者 叶志华 梁建庆 《生物技术》 CAS CSCD 2006年第6期3-7,共5页
目的：用基因工程方法制备重组人ZP3蛋白。方法：以全长人ZP3 cDNA片段为模板，通过PCR扩增出编码人ZP3蛋白不同肽段的cDNA片段，然后将这些cDNA片段分别插入到表达载体pET-I9b的Nco I-BamH I或Nde I-BamH I位点内，共构建成6种人ZP3蛋... 目的：用基因工程方法制备重组人ZP3蛋白。方法：以全长人ZP3 cDNA片段为模板，通过PCR扩增出编码人ZP3蛋白不同肽段的cDNA片段，然后将这些cDNA片段分别插入到表达载体pET-I9b的Nco I-BamH I或Nde I-BamH I位点内，共构建成6种人ZP3蛋白非融合表达质粒（pFZP3-1-pEZP3-6）和3种人ZP3蛋白融合表达质粒（pFZP3-7-Pfzp3-9）.将这9种表达质粒分别转化大肠杆菌Rosetta2（DE3）感受态细胞并选择出Ap转化子，将Ap转化子接种到NZCYM培养基中（含AP 100μg/mL），在35-37℃振荡培养到对数生长期，加入IPTG至1.0-1.5mmol/L浓度诱导培养3h，离心收集细胞进行SDS-PAGE电泳检测和Western Blot杂交分析。结果：这9种人ZP3蛋白表达质粒在大肠杆菌Rosetta2（DE3）中得到高效表达，目的蛋白占总细胞蛋白的10-25%，表达产物均以包涵体形式存在。结论：成功构建了重组人ZP3蛋白原核表达系统，为地一步研究和应用人ZP3蛋白打下了基础。 展开更多
关键词 人zp3蛋白 表达 大肠杆菌
在线阅读 下载PDF
人ZP3 186S突变蛋白在毕赤酵母X33细胞中的表达
4
作者 王弘駂 李质馨 +4 位作者 田洪艳 徐冶朱 辛为 林冬静 窦肇华 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期910-912,918,共4页
目的:利用毕赤酵母表达人ZP3186S蛋白(23～348氨基酸),为临床相关疾病的诊断提供实验材料。方法:经PCR获得编码人ZP3(23～348氨基酸)的基因,构建表达载体pPICZα-hZP3。将ZP3186位点精氨酸突变为丝氨酸构建pPICZα-hZP3186S质粒。转染... 目的:利用毕赤酵母表达人ZP3186S蛋白(23～348氨基酸),为临床相关疾病的诊断提供实验材料。方法:经PCR获得编码人ZP3(23～348氨基酸)的基因,构建表达载体pPICZα-hZP3。将ZP3186位点精氨酸突变为丝氨酸构建pPICZα-hZP3186S质粒。转染毕赤酵母X33细胞,用高浓度Zeocin筛选转染细胞,甲醇诱导目的蛋白分泌,通过SDS-PAGE和Western blot鉴定人ZP3186S蛋白。结果:pPICZα-hZP3186S表达质粒经测序正确,并在毕赤酵母X33中能够高效表达。结论:毕赤酵母能够分泌性表达重组人ZP3186S蛋白(23～348氨基酸),进一步研究其生物学活性为研制不孕症诊断试剂和免疫避孕疫苗提供实验材料。 展开更多
关键词 透明带 人zp3蛋白 毕赤酵母 基因表达
在线阅读 下载PDF
昆虫细胞杆状病毒表达系统表达重组人类ZP3蛋白的研究
5
作者 卢慧 刁华 +3 位作者 肖玉芳 于合国 李铮 施惠娟 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2014年第11期978-983,共6页
目的：探讨利用重组表达系统制备重组人类ZP3（hZP3）蛋白的方法和技术难点,为hZP3蛋白的制备和应用打下技术基础。方法：构建hZP3的载体质粒pFASTBAC HTa-hZP3,在大肠杆菌宿主细胞中利用杆状病毒Bac-to-Bac系统同源重组构建重组的杆状... 目的：探讨利用重组表达系统制备重组人类ZP3（hZP3）蛋白的方法和技术难点,为hZP3蛋白的制备和应用打下技术基础。方法：构建hZP3的载体质粒pFASTBAC HTa-hZP3,在大肠杆菌宿主细胞中利用杆状病毒Bac-to-Bac系统同源重组构建重组的杆状病毒穿梭载体Bacmid,用重组的Bacmid转染Sf9细胞制备重组杆状病毒,分别表达带HIS标签的h ZP3全长蛋白（氨基酸1-424）和截短的hZP3蛋白（氨基酸23-348）。摸索重组hZP3蛋白的表达时间和纯化制备方法。结果：成功制备了表达重组人hZP3全长蛋白和截短体蛋白的Bacmid和杆状病毒颗粒,Western印迹检测表明,在Sf9细胞中较好的表达时间段为感染后72-96 h。重组表达的hZP3蛋白可以部分被钴柱亲和纯化,大量的重组hZP3蛋白不能结合到亲和介质而流穿,但确切的原因还未知。纯化得到的hZP3经荧光素Dylight Dye488标记,能与人精子结合。结论：利用昆虫细胞杆状病毒表达系统表达hZP3蛋白是可行的,可以进一步优化,但hZP3蛋白的有效富集和纯化方法是最大的瓶颈,还需要进一步摸索。 展开更多
关键词 人zp3 精子 重组蛋白 昆虫细胞杆状病毒表达系统
原文传递
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 下一页 到第 页
使用帮助 返回顶部