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里氏木霉木聚糖酶基因XYN2的克隆与表达 被引量：4
1
作者 王向明 欧阳嘉 +1 位作者 严明 许琳 《南京工业大学学报（自然科学版）》 CAS 2007年第5期82-87,共6页
采用RT-PCR(reverse-transcription PCR assay)技术,从里氏木霉QM9414 mRNA中扩增出木聚糖酶基因XYN2,并与质粒pYX212相连,构建了组成型表达载体pYX212/XYN2.将此重组质粒转化入酿酒酵母菌株YPH499进行表达.分析了不同碳源、温度、摇瓶... 采用RT-PCR(reverse-transcription PCR assay)技术,从里氏木霉QM9414 mRNA中扩增出木聚糖酶基因XYN2,并与质粒pYX212相连,构建了组成型表达载体pYX212/XYN2.将此重组质粒转化入酿酒酵母菌株YPH499进行表达.分析了不同碳源、温度、摇瓶转速、初始pH对其产酶的影响.实验结果表明,最佳碳源是葡萄糖,最佳转速是260 r/min,最佳初始pH是6.0.优化重组菌的发酵条件后得到的最大酶活为0.55 IU/mL. 展开更多
关键词 RT-PCR TRICHODERMA REESEI xyn2基因 酿酒酵母 克隆 表达
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转木霉菌激发子基因的链霉工程菌株构建及检测
2
作者 吴琼 陈捷 +3 位作者 李莹莹 高士刚 余传金 李雅乾 《中国生物防治学报》 CSCD 北大核心 2013年第1期157-162,共6页
里氏木霉菌Trichoderma reesei QM 6a蛋白激发子基因xyn2及绿木霉菌蛋白激发子基因sm1通过调节植物乙烯、茉莉酸等信号途径激发其诱导抗性,提高其免疫力。本研究根据天蓝色链霉菌偏爱密码子人工合成了这两个基因,将其单价连接到链霉菌... 里氏木霉菌Trichoderma reesei QM 6a蛋白激发子基因xyn2及绿木霉菌蛋白激发子基因sm1通过调节植物乙烯、茉莉酸等信号途径激发其诱导抗性,提高其免疫力。本研究根据天蓝色链霉菌偏爱密码子人工合成了这两个基因,将其单价连接到链霉菌表达载体pIB139中。通过酶切鉴定的阳性质粒pIB139-xyn2(sm1)转化入ET12567(pUZ8002)中间菌株,利用接合转移技术定点整合到利迪链霉菌A01基因组中,采用PCR技术鉴定工程菌株A01-xyn2(sm1)。随后构建A01-xyn2+sm1双价链霉菌工程菌株并验证。实验结果表明:利用接合转移技术已成功获得含xyn2,sm1,xyn2+sm1的链霉菌工程菌株,将实现抗生与诱抗的协同作用,提高防治植物病害的效果。 展开更多
关键词 利迪链霉菌A01 木霉菌xyn2基因 木霉菌sm1基因 工程菌株
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瑞氏木霉木聚糖酶Ⅱ启动子功能区缺失分析的初探
3
作者 刘谨 李晓 汪天虹 《山东大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期102-105,共4页
木聚糖酶Ⅱ (XylanaseⅡ )是瑞氏木霉中两种主要的内切木聚糖酶之一 .序列分析显示其 1.1kb的启动子区含有多种丝状真菌转录因子结合位点 ,可受多种激活因子、抑制因子、增强子的转录调控 .以编码 β -葡糖苷酸酶(GUS)的E .coliuidA基... 木聚糖酶Ⅱ (XylanaseⅡ )是瑞氏木霉中两种主要的内切木聚糖酶之一 .序列分析显示其 1.1kb的启动子区含有多种丝状真菌转录因子结合位点 ,可受多种激活因子、抑制因子、增强子的转录调控 .以编码 β -葡糖苷酸酶(GUS)的E .coliuidA基因为报告基因 ,分别与木聚糖酶Ⅱ启动子及功能区 (- 312～ - 10 80 )缺失启动子融合 ,构建报告质粒pXIIPU与pXIIPΔEXU ,引入瑞氏木霉蛋白酶缺陷株TrichodermareeseiRutC30U4 .先后对转化子进行发酵实验 ,测定GUS活性 ,结果显示功能区 - 312～ - 10 80缺失后的启动子活性是原启动子活性的 19% .结果表明在缺失的木聚糖酶Ⅱ启动子 - 312～ - 10 80区仍存在调节转录活性的顺式作用元件 ,值得进一步研究 . 展开更多
关键词 瑞氏木霉 木聚糖酶Ⅱ启动子 缺失分析 GUS
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