双生病毒严重危害农作物产量。双生病毒编码的复制起始蛋白(replication initiator protein,Rep)是病毒复制的必需蛋白。甜菜严重曲顶病毒(beet severe curly top virus,BSCTV)属于双生病毒科曲顶病毒属,其Rep蛋白可以诱导拟南芥E3泛素...双生病毒严重危害农作物产量。双生病毒编码的复制起始蛋白(replication initiator protein,Rep)是病毒复制的必需蛋白。甜菜严重曲顶病毒(beet severe curly top virus,BSCTV)属于双生病毒科曲顶病毒属,其Rep蛋白可以诱导拟南芥E3泛素化连接酶VIM5在叶片中表达,VIM5介导甲基转移酶通过泛素化途径降解,进而降低了BSCTV基因组C2-3启动子区域的甲基化水平,然而Rep蛋白中负责诱导VIM5的具体结构域并不清楚。一些双生病毒的Rep蛋白具有抑制基因沉默的功能,然而BSCTV编码的Rep蛋白是否具有沉默抑制活性尚不明确。本研究利用烟草瞬时表达系统,研究Rep蛋白的不同结构域在抑制基因沉默和诱导VIM5表达方面的功能。发现Rep蛋白N端结构域(第1-180个氨基酸)可以抑制外源GFP在16c-GFP转基因烟草注射叶片上的降解;进一步研究发现,Rep蛋白N端的第1-104个氨基酸可以显著诱导VIM5的表达,而Rep蛋白C端的结构则不能诱导VIM5的表达。本研究表明BSCTV编码的Rep蛋白的N端结构域能够抑制基因沉默同时诱导VIM5表达,有助于更加深入地理解双生病毒复制起始蛋白Rep和宿主植物的互作机制。展开更多
采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器和RCS离心式采样器在山东泰安4个鸡场舍内空气、舍外环境上风向10、50m和下风向10、50、100、200、400m不同距离处收集金黄色葡萄球菌，计算每个采样点的金黄色葡萄球菌浓度；与此同时，收集鸡的...采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器和RCS离心式采样器在山东泰安4个鸡场舍内空气、舍外环境上风向10、50m和下风向10、50、100、200、400m不同距离处收集金黄色葡萄球菌，计算每个采样点的金黄色葡萄球菌浓度；与此同时，收集鸡的粪便，分离金黄色葡萄球菌。利用金黄色葡萄球菌DNA基因外重复一致回文序列聚合酶链式反应（Repetitive extragenic palindromic elements PCR，REP—PCR）鉴定技术，扩增不同测量点和粪便分离的金黄色葡萄球菌的DNA图谱。通过每个采样点的金黄色葡萄球菌的浓度变化以及金黄色葡萄球菌遗传相似性分析确认动物舍微生物气溶胶向舍外环境的传播。结果显示：4个鸡场舍内空气中金黄色葡萄球菌的浓度远远高于舍外上风和下风向的金黄色葡萄球菌浓度（P〈0．05或P〈0．01），但是舍外下风不同距离间的金黄色葡萄球菌浓度差异并不显著（P〉0．05）。REP-PCR结果表明，从鸡的粪便中分离的金黄色葡萄球菌与从舍内空气中分离的部分金黄色葡萄球菌（38．7％）相似性可达100％，从鸡场舍外下风方向分离到的多数金黄色葡萄球菌（55．9％）与舍内空气或粪便中分离的金黄色葡萄球菌相似性可达100％。可见，它们分别是由粪便中遗传基因完全相同的菌株繁殖而来。而从鸡舍上风分离到的金黄色葡萄球菌与舍内空气或粪便中分离的金黄色葡萄球菌相似性仅在60％～87％。结果显示，鸡粪便中的金黄色葡萄球菌能够形成气溶胶，进入气悬状态，不仅能在舍内传播，而且还能够借助舍内外气体交换，传播到舍外下风一定的距离。从而说明，来自动物体的金黄色葡萄球菌既能污染舍内空气，对本舍鸡群构成传染威胁，又能传播一定的距离，对周边社区环境空气造成生物污染。展开更多
文摘双生病毒严重危害农作物产量。双生病毒编码的复制起始蛋白(replication initiator protein,Rep)是病毒复制的必需蛋白。甜菜严重曲顶病毒(beet severe curly top virus,BSCTV)属于双生病毒科曲顶病毒属,其Rep蛋白可以诱导拟南芥E3泛素化连接酶VIM5在叶片中表达,VIM5介导甲基转移酶通过泛素化途径降解,进而降低了BSCTV基因组C2-3启动子区域的甲基化水平,然而Rep蛋白中负责诱导VIM5的具体结构域并不清楚。一些双生病毒的Rep蛋白具有抑制基因沉默的功能,然而BSCTV编码的Rep蛋白是否具有沉默抑制活性尚不明确。本研究利用烟草瞬时表达系统,研究Rep蛋白的不同结构域在抑制基因沉默和诱导VIM5表达方面的功能。发现Rep蛋白N端结构域(第1-180个氨基酸)可以抑制外源GFP在16c-GFP转基因烟草注射叶片上的降解;进一步研究发现,Rep蛋白N端的第1-104个氨基酸可以显著诱导VIM5的表达,而Rep蛋白C端的结构则不能诱导VIM5的表达。本研究表明BSCTV编码的Rep蛋白的N端结构域能够抑制基因沉默同时诱导VIM5表达,有助于更加深入地理解双生病毒复制起始蛋白Rep和宿主植物的互作机制。
文摘采用ANDERSEN-6级空气微生物样品收集器和RCS离心式采样器在山东泰安4个鸡场舍内空气、舍外环境上风向10、50m和下风向10、50、100、200、400m不同距离处收集金黄色葡萄球菌，计算每个采样点的金黄色葡萄球菌浓度；与此同时，收集鸡的粪便，分离金黄色葡萄球菌。利用金黄色葡萄球菌DNA基因外重复一致回文序列聚合酶链式反应（Repetitive extragenic palindromic elements PCR，REP—PCR）鉴定技术，扩增不同测量点和粪便分离的金黄色葡萄球菌的DNA图谱。通过每个采样点的金黄色葡萄球菌的浓度变化以及金黄色葡萄球菌遗传相似性分析确认动物舍微生物气溶胶向舍外环境的传播。结果显示：4个鸡场舍内空气中金黄色葡萄球菌的浓度远远高于舍外上风和下风向的金黄色葡萄球菌浓度（P〈0．05或P〈0．01），但是舍外下风不同距离间的金黄色葡萄球菌浓度差异并不显著（P〉0．05）。REP-PCR结果表明，从鸡的粪便中分离的金黄色葡萄球菌与从舍内空气中分离的部分金黄色葡萄球菌（38．7％）相似性可达100％，从鸡场舍外下风方向分离到的多数金黄色葡萄球菌（55．9％）与舍内空气或粪便中分离的金黄色葡萄球菌相似性可达100％。可见，它们分别是由粪便中遗传基因完全相同的菌株繁殖而来。而从鸡舍上风分离到的金黄色葡萄球菌与舍内空气或粪便中分离的金黄色葡萄球菌相似性仅在60％～87％。结果显示，鸡粪便中的金黄色葡萄球菌能够形成气溶胶，进入气悬状态，不仅能在舍内传播，而且还能够借助舍内外气体交换，传播到舍外下风一定的距离。从而说明，来自动物体的金黄色葡萄球菌既能污染舍内空气，对本舍鸡群构成传染威胁，又能传播一定的距离，对周边社区环境空气造成生物污染。
