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LRP16基因启动子的克隆及荧光素酶报道重组子的构建 被引量：5
1
作者 卢学春 楼方定 +4 位作者 韩为东 于力 徐周敏 李续建 靳海杰 《军事医学科学院院刊》 CSCD 北大核心 2003年第1期19-21,共3页
目的 :克隆LRP16基因启动子及构建LRP16基因启动子_pGL3_Basic载体。方法 :①以LRP16基因全长作为探针 ,在NCBI的人类基因组数据库中搜索并下载LRP16基因 5′端 3kb基因组DNA序列。②以健康献血员基因组DNA为模板进行PCR扩增目的片段 ,... 目的 :克隆LRP16基因启动子及构建LRP16基因启动子_pGL3_Basic载体。方法 :①以LRP16基因全长作为探针 ,在NCBI的人类基因组数据库中搜索并下载LRP16基因 5′端 3kb基因组DNA序列。②以健康献血员基因组DNA为模板进行PCR扩增目的片段 ,将分离纯化的PCR产物用T4DNA连接酶与pGEM_TEasy载体相连 ,转入JM10 9感受态化大肠杆菌 ,筛选阳性克隆并测序 ,进行KpnⅠ和BamHⅠ双酶切和巢式PCR鉴定。③将LRP16启动子_pGEM_TEasy载体再次酶切 ,纯化回收鉴定过的目的DNA片段 ,构建LRP16基因启动子_pGL3_Basic载体。结果与结论 :长度为 2 .7kb的LRP16基因启动子克隆成功 ,并构建了LRP16基因启动子_pGL3_Basic载体。充分利用因特网上人类基因组数据库的生物信息资源 ,搜索已知基因的启动子序列 ,可实现快速。 展开更多
关键词 LRP16基因 启动子 pGL3-Basic载体 聚合酶链反应
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