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waxy Locus and Its Mutant Types in Maize Zea mays L. 被引量:6
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作者 HUANG Bin-quan TIAN Meng-liang +1 位作者 ZHANG Jun-jie HUANG Yu-bi 《Agricultural Sciences in China》 CAS CSCD 2010年第1期1-10,共10页
The waxy (wx) locus of Zea mays L. encodes a granule-bound starch synthase (GBSS I = waxy protein) required for the synthesis of amylose in endosperm and pollen grain. This review covers recent advances in underst... The waxy (wx) locus of Zea mays L. encodes a granule-bound starch synthase (GBSS I = waxy protein) required for the synthesis of amylose in endosperm and pollen grain. This review covers recent advances in understanding the waxy locus in maize, focusing particularly on the new information on mutant type and mutation mechanisms. The results showed that the insertion and deletion played an important role in the generation of spontaneous wx-mutations. The current status of utilizing waxy locus has been summarized and the perspectives of the further studies on this locus have also been proposed. 展开更多
关键词 MAIZE waxy locus mutant type mutation mechanism
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Adaptive Response of Wild and Mutant Type Synechococcus cedrorum to a Polychlorinated Pesticide-Endosulfan
2
作者 P.S.BISEN SHRUTIMATHUR 《Biomedical and Environmental Sciences》 SCIE CAS CSCD 1993年第3期265-272,共8页
The effect of endosulfan, a hexachlorinated pesticide, on growth, inorganic nitrogenous nutrient uptake (NO3-, NO2- and NH4+), change in pigmentation and glycogen content on wild type and chemically mutagenised cells ... The effect of endosulfan, a hexachlorinated pesticide, on growth, inorganic nitrogenous nutrient uptake (NO3-, NO2- and NH4+), change in pigmentation and glycogen content on wild type and chemically mutagenised cells of Synechococcus cedrorum was investigated. The pattern of response to pesticide stress in wild and mutant type was the same. Growth reappeared in both after a period of initial lag in presence of endosulfan. The duration of lag increased with increasing doses of pesticide. Paradoxically, however, the rate of uptake of NO-3, NO-2 and NH+4 pigment and glycogen content progressively increased with increasing doses. The difference in the adaptation response between wild and mutant types was observed only in the concentration of pesticide that could be tolerated; with the mutant tolerating 2.5 fold more. 展开更多
关键词 Adaptive Response of Wild and mutant type Synechococcus cedrorum to a Polychlorinated Pesticide-Endosulfan
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pH-Dependence of Manganese (II) Oxidation Reaction by Novel Wild-Type and Mutants Recombinant Phlebia radiata Manganese Peroxidase 3 (rPr-MnP3) Enzymes 被引量:1
3
作者 Usenobong F. Ufot Monday I. Akpanabiatu +2 位作者 Khasim Cali Ifiok D. Uffia Inyang Udosen 《American Journal of Molecular Biology》 2022年第2期67-84,共18页
The goal of this study was to determine whether mutation of the Mn-binding site of wild-type recombinant Phlebia radiata manganese peroxidase 3 affected the pH-dependence kinetic parameters. pH range investigated was ... The goal of this study was to determine whether mutation of the Mn-binding site of wild-type recombinant Phlebia radiata manganese peroxidase 3 affected the pH-dependence kinetic parameters. pH range investigated was 2.5 – 12.0. The catalytic efficiency of the mutant enzymes at high and low pH in comparison to the wild-type was investigated using standard rPr-MnP3 protocol. Wild-type recombinant Phlebia radiata MnP3 enzyme showed optimal activity with Mn (II) as substrate at pH 5.0 and remained moderately active (approximately 40%) in the pH range of 6.0 - 9.0. The rPr-MnP3 mutants’ maximum activity ranged between 5.5 and 8.0. Wild-type and mutants rPr-MnP3 enzymes exhibited a similar pH profile with optimum pH of 3.0 for ABTS oxidation. Mutation has severely decreased the catalytic efficiency for Mn (II) oxidation at pH 5.0. The rPr-MnP3 enzymes showed enhanced affinity for Mn (II) at alkaline pH and a more alkaline range for catalysis than ever reported for any Manganese Peroxidase. This study reveals that at higher pH, rPr-MnP3 can function with alternative ligands in the Mn (II) site and does not have an absolutely obligate requirement for an all carboxylate ligand set. These results further strongly confirm that Mn<sup>2+</sup> binding site is the only productive catalytic site for Mn (II) oxidation. 展开更多
关键词 PH-DEPENDENCE Phlebia radiata Manganese Peroxidase WILD-type mutantS Recombinant Enzyme
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Induction of Silencing Effect of Swedish Mutant Amyloid Precursor Protein by RNA interference
4
作者 邱昕 陈国华 +2 位作者 潘纪安 陈宇 张苏明 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2006年第4期399-401,共3页
Summary: Over-expression of APP and Swedish mutation could cause some familial early onset AD. In this study, a primary screening was conducted of effective small interference RNAs (siRNAs) targeted wild type APP ... Summary: Over-expression of APP and Swedish mutation could cause some familial early onset AD. In this study, a primary screening was conducted of effective small interference RNAs (siRNAs) targeted wild type APP (APPwt) and Swedish mutant APP (APPswe). One siRNA targeting APPwt and the other siRNA targeting APPswe were designed, All these siRNAs were endogenously expressed by siRNAs expressing plasmids, COS-7 cells were transiently co-transfected with APP-GFP recombinant plasmids and siRNA expression vector, The silencing effect of each siRNA was quantitatively assessed by the level of expression of green fluorescent protein (GFP). It was found that the siRNAs silenced APPwt and APPswe to different degrees, siRNA directed against APPswe was more effective in suppressing the expression of fusion gene of APPswe than that of APPwt. The silencing effect of siRNA directed against APPswe indicating allele-specific silencing property of the siRNAs. Therefore, siRNAs directed against APP play an important role both in the therapeutic study of Alzheimer disease and functional exploration ofAPP gene. 展开更多
关键词 amyloid precursor protein small interference RNA wild type APP Swedish mutant APP
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常规MRI特征联合T1WI增强直方图分析鉴别胶质母细胞瘤和4级星形细胞瘤
5
作者 雒攀 韩涛 +5 位作者 张斌 陈春晖 柳庆 王海升 朱凯博 周俊林 《磁共振成像》 北大核心 2025年第11期94-100,共7页
目的探讨基于常规MRI特征及T1WI增强直方图分析在术前无创鉴别异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)野生型胶质母细胞瘤(IDH-wildtype glioblastoma,IDH-wt GBM)和IDH突变型4级星形细胞瘤(IDH mutant grade 4 astrocytoma,IDHm... 目的探讨基于常规MRI特征及T1WI增强直方图分析在术前无创鉴别异柠檬酸脱氢酶(isocitrate dehydrogenase,IDH)野生型胶质母细胞瘤(IDH-wildtype glioblastoma,IDH-wt GBM)和IDH突变型4级星形细胞瘤(IDH mutant grade 4 astrocytoma,IDHmut-Astro-4)中的临床价值。材料与方法回顾性分析经组织病理整合诊断证实的IDH-wt GBM(n=44)和IDHmut-Astro-4(n=40)的临床、影像和病理资料。使用FireVoxel软件在横轴位T1WI增强图像上对全肿瘤进行逐层勾画并获得肿瘤区域的直方图参数。分类变量采用卡方检验或Fisher's精确检验进行分析,连续变量采用独立样本t检验或Mann-Whitney U检验进行分析,两个组的诊断效能通过受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线进行评估。结果IDH-wt GBM组中年龄(P<0.001)、肿瘤坏死(P<0.001)、肿瘤强化程度(P=0.021)和瘤周水肿最大径(P<0.001)均大于IDHmut-Astro-4组。IDH-wt GBM组T1WI增强直方图参数中的方差系数(P=0.009)、偏度(P=0.002)、峰度(P<0.001)和熵(P<0.001)均大于IDHmut-Astro-4组,差异有统计学意义。ROC曲线分析显示,年龄+融合常规MRI特征+融合直方图参数对二者的鉴别诊断效能最优,其曲线下面积、敏感度、特异度、准确度、阳性预测值和阴性预测值分别为0.962(0.896~0.992)、86.36%、92.50%、89.26%、92.68%和86.05%。结论常规MRI特征和T1WI增强直方图分析有助于术前无创鉴别IDH-wt GBM和IDHmut-Astro-4,其中以年龄+融合常规MRI特征+融合直方图参数的诊断效能最高。 展开更多
关键词 异柠檬酸脱氢酶野生型 异柠檬酸脱氢酶突变型 胶质母细胞瘤 星形细胞瘤 磁共振成像 直方图分析
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水稻矮化突变体相关基因的研究进展
6
作者 雷茂安 邱佳佳 +8 位作者 潘晓慧 刘伯全 杨文平 何文成 梁树群 刘良成 刘家钜 蔡柳文 孙伟 《安徽农学通报》 2025年第18期5-13,共9页
本文系统分析了水稻矮化的遗传特性与类型,剖析了植物激素在其中的作用,探讨了矮化育种的理想株型,并对未来研究方向进行了展望。水稻株高由节间数目和长度共同决定,是影响抗倒伏性和产量的关键性状;水稻矮化突变体类型多样,可根据节间... 本文系统分析了水稻矮化的遗传特性与类型,剖析了植物激素在其中的作用,探讨了矮化育种的理想株型,并对未来研究方向进行了展望。水稻株高由节间数目和长度共同决定,是影响抗倒伏性和产量的关键性状;水稻矮化突变体类型多样,可根据节间缩短模式分为d6型、dm型等;目前株高按高度可分为高秆、半矮秆和矮秆,但半矮秆与矮秆的界限仍需明确,反映了遗传机制的复杂性。水稻矮化主要与赤霉素(GA)、油菜素内酯(BR)和独脚金内酯(SL)3类激素的代谢或信号传导缺陷有关;其中GA和BR直接调控节间伸长,其基因突变导致矮化;SL合成基因突变则引起水稻矮化与分蘖增多;目前已克隆的sd1、d18等36个矮秆主效基因为水稻抗倒伏育种提供了重要基因资源。培育抗倒伏、高产且适宜机械化生产的水稻品种成为现代育种的重要方向之一。通过深入研究水稻矮化突变体基因功能、遗传多样性、关键基因网络等,结合现代基因编辑、表型组学等技术手段,可有效推动水稻矮化育种的进程。本文为水稻品种选育和改良提供参考。 展开更多
关键词 水稻 理想株型 突变体 矮化基因 激素调控
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Si对盐胁迫下水稻根系活力、丙二醛和营养元素含量的影响 被引量:38
7
作者 黄益宗 张文强 +1 位作者 招礼军 曹慧明 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2009年第6期860-866,共7页
为深入了解盐胁迫下外源硅(Si)对水稻生长的作用,采用溶液培养法研究了外源Si对盐(NaCl)胁迫下野生型水稻和硅突变体水稻(不能正常吸收Si)营养元素和生理指标的影响.结果表明:1)外源Si可显著提高盐胁迫下两种水稻的生物量.当NaCl的浓度... 为深入了解盐胁迫下外源硅(Si)对水稻生长的作用,采用溶液培养法研究了外源Si对盐(NaCl)胁迫下野生型水稻和硅突变体水稻(不能正常吸收Si)营养元素和生理指标的影响.结果表明:1)外源Si可显著提高盐胁迫下两种水稻的生物量.当NaCl的浓度为100mmol·L-1时,添加1.0mmol·L-1的Si可使野生型水稻茎叶和根系干重提高12.81%和15.25%,硅突变体水稻茎叶干重提高12.31%.2)外源Si可提高盐胁迫下两种水稻茎叶和根系中营养元素含量,降低Na的含量.3)外源Si可显著降低盐胁迫下野生型水稻叶片MDA含量,但对突变体水稻叶片MDA含量影响不大.4)外源Si可显著提高盐胁迫下两种水稻的根系活力.盐胁迫下,与不加Si的对照相比,添加1.0mmol·L-1的Si可分别使野生型和突变体水稻根系活力指数提高60.47%和42.42%. 展开更多
关键词 盐胁迫 水稻 野生型 突变体 营养元素
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盐胁迫下外源硅对硅突变体与野生型水稻种子萌发的影响 被引量:16
8
作者 张文强 黄益宗 +1 位作者 招礼军 曹慧明 《生态毒理学报》 CAS CSCD 2009年第6期867-873,共7页
为深入了解盐胁迫下外源硅(Si)对水稻种子萌发的作用,采用溶液培养法研究了外源Si对盐胁迫下野生型和硅突变体水稻(不能正常吸收Si)种子萌发各指标的影响.结果表明,随着NaCl浓度的提高(0~150mmol·L-1),两种水稻的芽长、发芽势、... 为深入了解盐胁迫下外源硅(Si)对水稻种子萌发的作用,采用溶液培养法研究了外源Si对盐胁迫下野生型和硅突变体水稻(不能正常吸收Si)种子萌发各指标的影响.结果表明,随着NaCl浓度的提高(0~150mmol·L-1),两种水稻的芽长、发芽势、发芽率均不断降低.在150mmol·L-1NaCl胁迫下,野生型和硅突变体水稻的芽长分别为0.33cm和0.55cm,仅为对照的8.0%和11.1%;发芽率仅为对照的29.7%和53.7%;发芽势则分别降低至0%和2%.外源Si可以提高盐胁迫下两种水稻的发芽指标,且对硅突变体水稻的影响显著大于野生型水稻.2mmol·L-1Si浸种+2mmol·L-1Si处理可使野生型水稻芽长、芽重和发芽率分别比对照增加127.27%、169.23%和55.17%,发芽势则由对照时的0%提高至23.33%;硅突变体水稻芽长、芽重和发芽率分别比对照增加307.27%、285.71%和80.29%,发芽势则由对照时的2%提高至82.22%. 展开更多
关键词 盐胁迫 水稻 野生型 突变体 种子萌发
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水稻航天诱变突变体全基因组测序研究 被引量:7
9
作者 张志勇 蒲志刚 +3 位作者 王平 向跃武 蔡平钟 张志雄 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第2期469-475,共7页
将航天诱交突变体和野生型水稻材料进行全基因组测定,以已经完成全基因组测定的籼型水稻9311基因组序列为对照,利用SOAPsnp、SOAPindel和SOAPsv软件对序列进行SNP、InDel和SV等分析.结果发现野生型中出现SNPs 348966个,插入缺失片段(1... 将航天诱交突变体和野生型水稻材料进行全基因组测定,以已经完成全基因组测定的籼型水稻9311基因组序列为对照,利用SOAPsnp、SOAPindel和SOAPsv软件对序列进行SNP、InDel和SV等分析.结果发现野生型中出现SNPs 348966个,插入缺失片段(1~5 bp)62 298个,结构变异9962个;突变体材料中出现SNPs452173个,插入缺失片段(1~5 bp)66 977个,结构变异10336个.分析表明航天诱变因子对水稻基因组的诱变作用基本上平均分布,它与各对染色体的大小呈正相关.突变体中发生的诱变类型是SNPs> InDel> SV,表明航天诱变因子对水稻基因组中单碱基的改变为主要因素.本研究为探索航天诱变规律和更全面利用突交体资源奠定基础,为水稻功能基因研究和杂交水稻新资源的利用作出贡献. 展开更多
关键词 突变体 野生型 全基因组测定 SNP INDEL SV
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EMS诱变谷子‘长农35号’M_1代成熟期株型突变体的鉴定与分析 被引量:18
10
作者 王军 杨慧卿 +1 位作者 袁峰 郭二虎 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2011年第18期84-89,共6页
为建立谷子突变体库,以便在谷子分子生物学研究中应用,以生产上主要推广种植的谷子品种‘长农35号’干种子为实验材料,采用0.8%和1.0%甲磺酸乙酯(EMS)进行诱变处理,试验共收获株型相关M1代突变体材料282份,其中,0.8%EMS诱变‘长农35号... 为建立谷子突变体库,以便在谷子分子生物学研究中应用,以生产上主要推广种植的谷子品种‘长农35号’干种子为实验材料,采用0.8%和1.0%甲磺酸乙酯(EMS)进行诱变处理,试验共收获株型相关M1代突变体材料282份,其中,0.8%EMS诱变‘长农35号’获得株型突变体材料100个单株,可分为10个组;1.0%EMS诱变‘长农35号’获得株型突变体材料182个单株,可分为17个组。M1代成熟期株型相关性状突变体分析结果表明:1.0%EMS处理‘长农35号’所获突变体,在株高、穗下节粗、穗下第一节间粗和茎节数4个性状与对照有显著差异,而0.8%处理与对照差异不显著。因此,对于‘长农35号’来讲,采用1.0%EMS进行诱变处理更有利于多类型大量突变单株的获得。 展开更多
关键词 谷子 '长农35号’ 甲基磺酸乙酯(EMS) 突变体 株型
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携带人鞘氨醇激酶及突变体基因重组腺病毒载体的制备及表达 被引量:2
11
作者 易军 鲁茁壮 +3 位作者 段海峰 王莉 陈光辉 王立生 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期520-523,共4页
目的 制备携带人野生型鞘氨醇激酶基因(SPKwt)及其突变体(SPKDN)的腺病毒载体,为研究SPK的生物学功能提供高效基因转移载体。方法 将野生型和突变体SPK基因亚克隆至穿梭载体pshuttle cmv,重组的穿梭质粒经PmeⅠ线性化后,电转化E. coli... 目的 制备携带人野生型鞘氨醇激酶基因(SPKwt)及其突变体(SPKDN)的腺病毒载体,为研究SPK的生物学功能提供高效基因转移载体。方法 将野生型和突变体SPK基因亚克隆至穿梭载体pshuttle cmv,重组的穿梭质粒经PmeⅠ线性化后,电转化E. coliBJ AD 1感受态,获得带有目的基因的腺病毒重组子质粒;重组子经PacⅠ线性化后,以脂质体介导转染293包装细胞,获得重组腺病毒载体;分别行PCR鉴定重组腺病毒是否携带目的基因,Western blot鉴定目的基因是否表达,酶活性检测判断野生型基因和突变体基因表达活性。结果 重组腺病毒带有目的基因,可以感染内皮细胞并正确表达,酶活性分析表明野生型SPK基因增强SPK活性,突变体SPK基因抑制SPK活性。结论 成功构建了携带SPK野生型及其突受体的重组腺病毒,为研究SPK的功能提供了物质基础。 展开更多
关键词 腺病毒科 鞘氨醇激酶 突变体
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大豆多小叶类型遗传规律初探 被引量:4
12
作者 宗春美 宁海龙 +5 位作者 任海祥 杜维广 岳岩磊 邵广忠 孙晓环 齐玉鑫 《植物遗传资源学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期299-303,共5页
利用合丰25×东农7296系谱法经5个世代选育获得多小叶突变体,并以其作为父本分别与4个小叶正常的栽培大豆配制杂交组合的F1、F2为试验材料,进行多小叶类型的遗传分析。结果表明:小叶数正常的不同大豆亲本与多小叶大豆杂交(3叶×... 利用合丰25×东农7296系谱法经5个世代选育获得多小叶突变体,并以其作为父本分别与4个小叶正常的栽培大豆配制杂交组合的F1、F2为试验材料,进行多小叶类型的遗传分析。结果表明:小叶数正常的不同大豆亲本与多小叶大豆杂交(3叶×5叶),F1全部植株均表现为5叶,说明5叶性状是受显性核基因控制;不同组合3片叶、3+4片叶、3+5片叶、3+4+5片叶、4+5片叶和5片叶类型组成遗传分离模式存在显著差异,而在3片叶和>3片叶的遗传分离模式相同。杂交F2单株复叶为3片叶和>3片叶的个体分离的比例呈1∶3,符合1对显性单基因的遗传规律。因此,该多小叶突变体牡5796-3的复叶数受1对显性基因控制,该多小叶突变体可作为新种质用于大豆遗传育种及基因克隆和功能研究。 展开更多
关键词 大豆 多小叶突变体 小叶类型 遗传规律
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水稻矮秆基因研究进展 被引量:6
13
作者 刘浩 王加峰 +4 位作者 孙大元 郭涛 刘永柱 王慧 陈志强 《广东农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第22期139-144,共6页
20世纪矮秆基因的利用使水稻育种发生了革命性的变化,随后大量的矮杆基因被不断挖掘,相关的研究给生产上带来了巨大的经济效益。目前,水稻的植株高度仍是育种中备受关注的性状之一。植株高度的降低有效地增强了水稻的抗倒伏能力,其可变... 20世纪矮秆基因的利用使水稻育种发生了革命性的变化,随后大量的矮杆基因被不断挖掘,相关的研究给生产上带来了巨大的经济效益。目前,水稻的植株高度仍是育种中备受关注的性状之一。植株高度的降低有效地增强了水稻的抗倒伏能力,其可变性为理想株型的选育奠定了基础,理想株型能够提高植株光合作用,进一步提高水稻单产;另一方面,对水稻矮化机理的研究有助于利用植物内源激素在生产上调节作物高度。对水稻矮秆基因的遗传、矮化机理、矮秆基因克隆、矮秆基因调控理想株型等几个方面进行了综述,并对已经报道的调控水稻株高的基因进行了全面总结;同时,对广东省已审定的水稻品种的株高以及现行品种当中矮秆基因遗传来源等问题进行了统计与分析,最后对未来水稻矮秆突变体的实际应用前景进行了展望。 展开更多
关键词 水稻 矮秆基因 株型 突变体
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红掌突变体花青素含量的测定与比较 被引量:7
14
作者 丛汉卿 徐立 +1 位作者 信彩云 李志英 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2009年第17期7832-7834,共3页
[目的]为在分子水平研究突变体的形成及调控机制提供理论基础。[方法]以红掌品种阿里巴巴的野生型及突变体为试材,对绿色突变体与野生型进行外部形态的观察。通过高效液相色谱(HPLC)测定了2种材料各部位的花青素种类和含量。[结果]突变... [目的]为在分子水平研究突变体的形成及调控机制提供理论基础。[方法]以红掌品种阿里巴巴的野生型及突变体为试材,对绿色突变体与野生型进行外部形态的观察。通过高效液相色谱(HPLC)测定了2种材料各部位的花青素种类和含量。[结果]突变体与野生型红掌花青素含量显著不同。在野生型的佛焰苞、叶片、叶柄中含有3种花色苷:花青素-芸香糖苷、花葵素-芸香糖苷、甲基花青素-芸香糖苷;而在突变体中,除了在叶柄中检测到花青素-芸香糖苷一种花色苷外,佛焰苞的叶片中检测不到任何花青素成分。[结论]突变体中可能出现了不可恢复的突变,造成花青素在合成与积累过程中出现问题,导致无法呈现正常的颜色。 展开更多
关键词 红掌 花青素 突变体 野生型
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esaC基因对迟缓爱德华氏菌的毒力及T3SS蛋白分泌的影响 被引量:2
15
作者 李杰 莫照兰 +3 位作者 茅云翔 王波 杨佳银 邵林 《高技术通讯》 EI CAS CSCD 北大核心 2010年第2期199-203,共5页
为了确定编码迟缓爱德华氏菌(E.tarda)Ⅲ型分泌系统(T3SS)装置蛋白的esaC基因的功能,采用基因敲除的方法构建了E.tarda野生型致病菌株LSFAO的esaC基因无极性缺失突变株LSE40ΔesaC,该突变株缺失了esaC的46-1452bp。Western blotting分... 为了确定编码迟缓爱德华氏菌(E.tarda)Ⅲ型分泌系统(T3SS)装置蛋白的esaC基因的功能,采用基因敲除的方法构建了E.tarda野生型致病菌株LSFAO的esaC基因无极性缺失突变株LSE40ΔesaC,该突变株缺失了esaC的46-1452bp。Western blotting分析表明,由于esaC的缺失,E.tarda T3SS的输送器蛋白(EseB,EseC,EseD)不能分泌到细胞外,同时细菌的自凝聚现象消失;毒力检测发现,突变株LSE40ΔesaC对蓝曼龙鱼的半数致死量比野生型菌株提高了11.5倍。结果表明,esaC基因影响T3SS输送器蛋白的分泌和E.tarda的毒力。此研究确定了esaC基因作为E.tarda T3SS装置蛋白的功能,加深了对E.tarda致病机理的了解。 展开更多
关键词 迟缓爱德华氏菌 esaC突变株 Ⅲ型分泌系统 毒力 输送器蛋白
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HSV-TK/HSV-sr39TK基因工程T细胞的研制 被引量:2
16
作者 李振宇 徐开林 +5 位作者 潘秀英 高飞 何徐彭 鹿群先 孙海英 李德鹏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期999-1003,共5页
目的:制备慢病毒载体为基础的野生型及突变型单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK/HSV-sr39TK)基因工程T细胞(TK+T及sr39TK+T细胞),观察给予前体药物丙氧鸟苷/无环鸟苷后小鼠T淋巴细胞对其敏感性及存活情况。方法:构建含HSV-TK/HSV-sr39TK及内... 目的:制备慢病毒载体为基础的野生型及突变型单纯疱疹病毒胸苷激酶(HSV-TK/HSV-sr39TK)基因工程T细胞(TK+T及sr39TK+T细胞),观察给予前体药物丙氧鸟苷/无环鸟苷后小鼠T淋巴细胞对其敏感性及存活情况。方法:构建含HSV-TK/HSV-sr39TK及内部核糖体进入位点序列(IRES)和绿色荧光蛋白基因(GFP)的双顺反子慢病毒载体;采用磷酸钙沉淀法将慢病毒载体三质粒转染293T细胞,收集病毒上清感染刀豆蛋白刺激的小鼠T淋巴细胞,给予不同浓度的前体药物GCV/ACV,用Cell Counting Kit(CCK-8)等方法检测T细胞的存活率。结果:转染293T细胞后,病毒滴度达106/U/ml以上;含不同启动子的病毒载体转染效率CMV>PUB>PGK,对小鼠T淋巴细胞的感染效率以CMV启动子最高;IC50值的测定显示sr39TK+T细胞对GCV和ACV的敏感性较TK+T细胞分别提高约2.5和17.4倍;ACV及GCV浓度在1~10μmol/Lsr39TK+T细胞活率下降最为明显,ACV组细胞存活率由(98.4±2.7)%下降为(49.9±5.9)%,GCV组由(97.9%±2.7)%下降为(33.7±5.3)%,P<0.05,随ACV及GCV浓度的增加,细胞活率下降趋势有所减弱;TK+T细胞对GCV敏感,细胞活率由(97.9±2.7)%下降为(38.4±5.5)%,(P<0.05),对ACV不敏感,细胞活率由(98.4±2.7)%下降为(73.8±7.4)%,P>0.05。结论:成功构建了HSV-TK/HSV-sr39TK基因工程T细胞,不同启动子对慢病毒载体在293T细胞的转染效率、转导自杀基因在T淋巴细胞内的表达均有影响;HSV-sr39TK+T细胞对GCV和ACV的敏感性高于TK+T细胞。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒胸苷激酶 突变型 野生型 基因工程T细胞 慢病毒载体
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高粱EMS诱变及突变体筛选、鉴定 被引量:26
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作者 王春语 朱振兴 +2 位作者 李丹 丛玲 张丽霞 《生物技术通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期78-83,共6页
突变率和突变类型是突变体表型筛选和构建饱和突变体库的重要依据。采用不同时间和不同浓度甲基磺酸乙酯(EMS)处理高粱品种BTx623的种子,突变率和突变类型差异较大。突变类型可分为叶色、叶形、穗型、育性及生育期等,变异类型较丰富。... 突变率和突变类型是突变体表型筛选和构建饱和突变体库的重要依据。采用不同时间和不同浓度甲基磺酸乙酯(EMS)处理高粱品种BTx623的种子,突变率和突变类型差异较大。突变类型可分为叶色、叶形、穗型、育性及生育期等,变异类型较丰富。根据处理后种子出苗率、结实率和突变率的情况,最终确定20 h+EMS 0.2%为最佳的诱变处理时间和浓度。但构建饱和突变体库,建议采用多浓度多时间处理方式。 展开更多
关键词 高粱 甲基磺酸乙酯(EMS) 突变体 突变率 突变类型
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重组人TNF-α诱导乳腺癌细胞ZR75-1凋亡及其机制的初步研究 被引量:2
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作者 李瑶琛 孔令洪 李康生 《癌症》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2006年第5期560-565,共6页
背景与目的:肿瘤坏死因子α(TNF-α)是抗肿瘤活性较强的细胞因子,是重要的抗肿瘤生物治疗制剂之一,但由于其对人体有较严重的副作用,临床应用受到了限制。为了降低其毒副作用,同时保留其抗肿瘤能力,TNF-α的突变体——突变型471TNF-α... 背景与目的:肿瘤坏死因子α(TNF-α)是抗肿瘤活性较强的细胞因子,是重要的抗肿瘤生物治疗制剂之一,但由于其对人体有较严重的副作用,临床应用受到了限制。为了降低其毒副作用,同时保留其抗肿瘤能力,TNF-α的突变体——突变型471TNF-α应运而生。本研究对重组人突变型471rhTNF-α与野生型rhTNF-α蛋白的抗肿瘤能力进行了比较,并对突变型471rhTNF-α诱导ZR75-1细胞发生凋亡的作用机制进行初步研究。方法:以乳腺癌细胞系ZR75-1为靶细胞,以基因组DNA琼脂糖凝胶电泳及流式细胞技术分析100"g/L突变体471rhTNF-α与100"g/L野生型rhTNF-α作用ZR75-1细胞12h,肿瘤细胞发生凋亡的情况;利用以ELISA为基础的TransAMTMNF-κBp65试剂盒检测10μg/L、50μg/L和100μg/L突变体471rhTNF-α或野生型rhTNF-α作用ZR75-1细胞4h后核因子NF-κB的活化情况。结果:2%琼脂糖凝胶电泳显示,突变体471rhTNF-α处理组的ZR75-1细胞基因组DNA呈现明显的“ladder”状分布,野生型rhTNF-α处理组的“ladder”条带明显减弱;流式细胞仪分析显示,突变型471rhTNF-α诱导的凋亡峰面积为(44.6±3.6)%,野生型rhTNF-α诱导凋亡峰面积占(24.7±2.7)%,两组差异具有显著性(P<0.05);从细胞周期结果来看,突变型471rhTNF-α处理组G1期细胞占(66.6±4.2)%,比例明显高于对照组[(34.8±3.1)%]与野生型hTNF-α[(46.2±3.8)%],S期细胞占(33.2±2.9)%,比例明显低于对照组[(50.1±3.8)%]与野生型hTNF-α处理组[(45.7±2.9)%],G2期细胞比例为(0.2±0.1)%,明显低于对照组[(15.1±2.2)%]和野生型hTNF-α处理组[(8.1±3.1)%],而野生型hTNF-α处理组与对照组相比均无明显变化(P>0.05)。NF-κB活化检测结果显示,50"g/L野生型rhTNF-α处理ZR75-1细胞4h后NF-κB的活化量(A值为3.27±0.1)明显高于突变型471rhTNF-α处理组(A值为1.51±0.2)。结论:突变型471rhTNF-α比野生型rhTNF-α具有更强的诱导ZR75-1细胞凋亡的能力;ZR75-1细胞内NF-κB活化明显受限是突变型471rhTNF-α诱导凋亡能力增强的主要原因之一。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 ZR75-1细胞 突变型471rhTNF-α 核因子N-αB 凋亡 生物治疗
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^(60)Co-γ射线辐射诱变蝴蝶兰M1代花型突变体的RAPD分析 被引量:8
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作者 章铁 刘秀清 +1 位作者 孙晓莉 潘海发 《激光生物学报》 CAS CSCD 2011年第1期27-31,共5页
利用72个10bp随机引物对蝴蝶兰(F141780)及其^(60)Co-γ射线辐射的8个表现型花型突变体进行RAPD分析。其中有30个引物能扩增出理想的带型,有4个随机引物扩增出的带型显示其中的25-6、30-4、30-8-2等3个突变体与对照品种之间具有稳定的... 利用72个10bp随机引物对蝴蝶兰(F141780)及其^(60)Co-γ射线辐射的8个表现型花型突变体进行RAPD分析。其中有30个引物能扩增出理想的带型,有4个随机引物扩增出的带型显示其中的25-6、30-4、30-8-2等3个突变体与对照品种之间具有稳定的多态性差异,即初定其为基因型花型突变体。 展开更多
关键词 蝴蝶兰 花型突变体 60Co-γ射线 辐射 RAPD
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粘性放线菌对牙面粘附机理的研究Ⅲ.粘性放线菌变异株的鉴定及兔抗菌毛Ⅰ及菌毛ⅡIgG的制备 被引量:2
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作者 赵丽娟 刘天佳 岳松龄 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 1997年第1期55-57,共3页
利用粘性放线菌的变异株制备全菌抗血清 ,采用免疫吸附、硫酸铵沉淀及离子交换层析制备了抗菌毛 、 Ig G,并用 SDS- PAGE电泳测定其分子量 ,EL ISA证明其特异性 ,为确定菌毛 、 在粘附中的作用 。
关键词 粘性放线菌 变异株 牙面粘附机理 粘附 鉴定
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