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玉米钼辅助因子硫酸化酶基因启动子的克隆与功能验证 被引量：3
1
作者 高学焕 付凤玲 +3 位作者 牟巍 周树峰 张素芝 李晚忱 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2014年第6期584-591,共8页
为克服组成型启动子启动外源基因过量表达引起的诸多问题,同源克隆(Mo-molybdopterin cofactor sulfurase)基因(ABA3)的启动子(ABA3s)序列,并用PlantCARE软件分析其非生物逆境应答元件,实时定量PCR检测ABA3基因在非生物逆境诱导下的差... 为克服组成型启动子启动外源基因过量表达引起的诸多问题,同源克隆(Mo-molybdopterin cofactor sulfurase)基因(ABA3)的启动子(ABA3s)序列,并用PlantCARE软件分析其非生物逆境应答元件,实时定量PCR检测ABA3基因在非生物逆境诱导下的差异表达后。然后,用该启动子构建启动GUS(β-glucuronidase)基因的表达载体,基因枪法转化玉米愈伤组织。经组织化学染色法检测其表达后,在高渗、高盐、低温胁迫处理及ABA诱导下检测GUS酶荧光值与荧光素酶(内参)发光值的比值(GUS/LUC),以此评价ABA3s启动子在非生物逆境胁迫下的启动活性。结果表明,ABA3基因在模拟干旱、低温、高温、高盐胁迫及ABA、乙稀诱导下差异表达,说明该基因的启动子(ABA3s)具有非生物逆境诱导活性。序列分析表明,ABA3s启动子全长777 bp,含有ARE、HSE、MBS、TGA、Circadian等多种非生物逆境胁迫应答元件。用ABA3s启动GUS基因构建的表达载体转化的玉米愈伤组织,响应干旱、低温、高温、高盐胁迫等多种非生物逆境胁迫,及ABA和乙稀诱导,GUS检测呈阳性。在8%甘露醇高渗条件下,GUS/LUC比值比空白对照高6倍。上述结果表明,ABA3s启动子具有非生物逆境诱导特性,经进一步验证其功能后,可用于玉米抗逆转基因研究。 展开更多
关键词 玉米 非生物胁迫 钼辅助因子硫酸化酶 启动子
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硫唑嘌呤致AOX1和MOCOS基因型药品不良反应相关性分析 被引量：1
2
作者 钱家健 陈超 +3 位作者 王振疆 黄载伟 张晓敏 艾新波 《中国药物警戒》 2020年第10期665-671,共7页
目的以核苷二磷酸连接部分X型基序15(NUDT15)rs116855232作为对照位点,分析醛氧化酶1(AOX1)rs55754655和钼辅因子硫化酶(MOCOS)rs594445基因多态性对硫唑嘌呤所致药品不良反应相关性。方法招募曾经接受或正在服用硫唑嘌呤的患者,收集静... 目的以核苷二磷酸连接部分X型基序15(NUDT15)rs116855232作为对照位点,分析醛氧化酶1(AOX1)rs55754655和钼辅因子硫化酶(MOCOS)rs594445基因多态性对硫唑嘌呤所致药品不良反应相关性。方法招募曾经接受或正在服用硫唑嘌呤的患者,收集静脉血。采用直接测序法测定上述位点基因型,高效液相色谱法检测红细胞中硫唑嘌呤活性代谢产物6-硫鸟嘌呤核苷酸血药浓度,监测患者药品不良反应。结果 80例患者中AOX1突变杂合子(AG)2例,无纯合突变;MOCOS突变杂合子(CA)24例,纯合突变(AA)4例;NUDT15突变杂合子(CT)16例,未发现纯合突变。Logistic回归分析表明,MOCOS突变对硫唑嘌呤所致骨髓抑制有保护性(P=0.012);与硫唑嘌呤所致流感样症状和脱发相关(P=0.043,0.030);NUDT15突变与硫唑嘌呤所致骨髓抑制相关(P=0.012);其他药品不良反应与上述位点突变无相关性。6-硫鸟嘌呤核苷酸血药浓度在上述位点野生型和突变型之间差异无统计学意义(P> 0.05)。NUDT15 rs116855232与MOCOS rs594445联合分析,MOCOS野生型且NUDT15突变型患者发生骨髓抑制的风险会更高(OR=18.40, P=0.001)。结论硫唑嘌呤首次用药前检测患者MOCOS rs594445和NUDT15rs116855232基因型,可提高用药安全性。 展开更多
关键词 硫唑嘌呤 醛氧化酶1 钼辅因子硫化酶 药品不良反应 6-硫鸟嘌呤核苷酸 相关性分析
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