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鸡毒支原体黏附因子MGC2的克隆及原核表达 被引量：3
1
作者 徐建义 赵杰 +3 位作者 隋兆峰 迟灵芝 杨明彩 韩春杨 《中国家禽》 北大核心 2015年第14期53-55,共3页
为表达鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)黏附基因MGC2蛋白,探索其作为诊断抗原的可能性,参考Gen Bank登录的鸡毒支原体F株MGC2基因序列,利用Primer 5.0软件设计合成引物,通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)对鸡毒支原体MGC2基因的1个位... 为表达鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)黏附基因MGC2蛋白,探索其作为诊断抗原的可能性,参考Gen Bank登录的鸡毒支原体F株MGC2基因序列,利用Primer 5.0软件设计合成引物,通过重叠延伸PCR(SOE-PCR)对鸡毒支原体MGC2基因的1个位点进行定点突变,将此突变基因克隆到表达载体p ET-30a(+)中,具有正确阅读框架的重组表达质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,经IPTG诱导后采用SDS-PAGE和Western blot检测。结果表明,PCR扩增的目的基因大小约为918 bp;SDS-PAGE检测重组蛋白相对分子质量约为39.6 ku;Western blot检测表明重组蛋白具有鸡毒支原体反应原性。该研究结果为鸡毒支原体抗体ELISA检测方法的建立奠定基础。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 mgc2蛋白 原核表达 WESTERN BLOT
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鸡毒支原体套式PCR检测方法的建立及初步应用
2
作者 周鲁阳 陈学圣 +9 位作者 宋法慧 吴际坤 俞长旭 王傲菲 魏书琦 杨硕 汪建华 张瑞华 姜世金 朱岩丽 《中国家禽》 北大核心 2025年第6期162-168,共7页
为建立一种快速实用的检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的方法,试验根据MG黏附蛋白的mgc2基因序列,选择其保守区域的基因片段,设计两对特异性引物,通过对反应条件和试剂浓度进行优化,建立鸡毒支原体套式PCR检测方法,并应用... 为建立一种快速实用的检测鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)的方法,试验根据MG黏附蛋白的mgc2基因序列,选择其保守区域的基因片段,设计两对特异性引物,通过对反应条件和试剂浓度进行优化,建立鸡毒支原体套式PCR检测方法,并应用该方法检测鸭的临床样品。结果显示,建立的检测方法与其他病原体无交叉反应,特异性良好,MG DNA模板检测限为5×10^(-6) ng/μL,其敏感性是常规PCR的1000倍以上,且批内和批间试验重复性良好;利用该方法对临床病死鸭胚与咽、肛拭子混合样本的检出率分别为10%(5/50)和33%(21/63)。研究表明,建立的MG套式PCR检测方法具有特异性强、灵敏度高等优点,适用于鸭群中MG早期感染的检测,为MG的检测和防控及分子流行病学调查提供有力的检测手段。 展开更多
关键词 鸭 鸡毒支原体 套式PCR mgc2
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鸡毒支原体套式PCR检测方法的建立及应用 被引量：14
3
作者 赵杰 徐建义 +4 位作者 隋兆峰 迟灵芝 杨明彩 沈美艳 韩春杨 《中国兽医科学》 CAS CSCD 北大核心 2015年第7期706-710,共5页
为了建立鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)套式PCR检测方法并初步将其应用于临床检测,对目前常用的5对引物(gapA-F/gapA-R、16SrRNA-F/16SrRNA-R、mgc2-F1/mgc2-R1、mgc2-F2/mgc2-R2、LP-F/LP-R)检测MG的灵敏度进行了比较,从中... 为了建立鸡毒支原体(Mycoplasma gallisepticum,MG)套式PCR检测方法并初步将其应用于临床检测,对目前常用的5对引物(gapA-F/gapA-R、16SrRNA-F/16SrRNA-R、mgc2-F1/mgc2-R1、mgc2-F2/mgc2-R2、LP-F/LP-R)检测MG的灵敏度进行了比较,从中选出灵敏度较强的引物建立套式PCR检测方法,同时进行了特异性、敏感性及临床检测试验。结果表明,以mgc2基因设计的引物灵敏度最高,能检测出的MG的最低质量浓度为57.6pg/μL,用此引物建立的套式PCR能够扩增的基因片段的大小为300bp,与GenBank中收录的相关序列的同源性为98%,而与大肠杆菌、沙门菌、鸡滑液囊支原体均无交叉反应,能够检测出DNA的最小质量浓度为0.18fg/μL。通过对山东地区疑似MG的50只病死鸡进行检测,阳性检出率为80%。本研究建立的鸡毒支原体套式PCR具有敏感性高、特异性强等优点,可用于MG的临床诊断和分子流行病学调查。 展开更多
关键词 鸡毒支原体 套式PCR mgc2
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ZnC_2O_4·2H_2O-MgC_2O_4·2H_2O在空气中的热分解动力学 被引量：4
4
作者 林传明 陈栋华 《武汉大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期149-153,共5页
通过热重微分热重法(TG DTG)、差示扫描量热法(DSC)、X 射线衍射(XRD)技术研究了固态物质ZnC2O4·2H2O MgC2O4·2H2O机械混合物(摩尔比3∶1)在空气中热分解的过程.TG DTG的曲线表明,其热分解过程TG曲线中4个明显的台阶与理论失... 通过热重微分热重法(TG DTG)、差示扫描量热法(DSC)、X 射线衍射(XRD)技术研究了固态物质ZnC2O4·2H2O MgC2O4·2H2O机械混合物(摩尔比3∶1)在空气中热分解的过程.TG DTG的曲线表明,其热分解过程TG曲线中4个明显的台阶与理论失重相吻合;XRD结果表明样品在800 ℃煅烧时有较好晶型的MgxZn1-xO的生成.同时,用Ozawa法和Kissinger Akahira Sunose (KAS)法求取活化能Ea,用热分解动力学机理函数求算的比较法判断出可能的机理函数.ZnC2 O4 热分解的活化能分别为151.08 kJ/mol (Ozawa法)、147.73 kJ/mol(KAS法),MgC2O4热分解的活化能分别为164.17 kJ/mol(Ozawa法)、159.94kJ/mol(KAS法);ZnC2O4和MgC2O4热分解反应过程都遵循随机成核和随后生长型机理函数Am(Avrami Erofeer). 展开更多
关键词 mgc2O4·2H2O ZnC2O4·2H2O 热重-微分热重法 差示扫描量热法 X-射线衍射 热分解动力学
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家族性中枢神经系统海绵状血管畸形致病基因的研究进展 被引量：1
5
作者 陈大兴 徐宇伦 《国际神经病学神经外科学杂志》 2009年第4期372-375,共4页
本文首先简要介绍家族性中枢神经系统海绵状血管畸形(Familial cerebral cavernous malformation,FCCM)发病特点及临床治疗,然后主要从分子遗传学的角度,介绍该病致病基因的研究进展,特别是CCM2/MGC4607和CCM3/PDCD10这两个基因的最新... 本文首先简要介绍家族性中枢神经系统海绵状血管畸形(Familial cerebral cavernous malformation,FCCM)发病特点及临床治疗,然后主要从分子遗传学的角度,介绍该病致病基因的研究进展,特别是CCM2/MGC4607和CCM3/PDCD10这两个基因的最新研究成果,从而对该疾病在分子遗传学水平的发生发展有更深入的了解。由于基因突变是本病发生的明确致病因素,可见对其深入的研究可以为病因学分子病理学以及基因诊断学奠定坚实的基础,同时为今后的临床治疗乃至基因治疗提供新的治疗方法与手段。 展开更多
关键词 家族性中枢神经系统海绵状血管畸形 CCM2/MGC4607 CCM3/PDCDl0
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