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氧化克班宁促进人乳腺癌MCF-7细胞微管解聚的机制研究
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作者 于蕾 闫彩凤 +4 位作者 宋辉 郎朗 于晶涵 马瑗晗 王正文 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第4期264-269,共6页
目的:探究氧化克班宁通过Rho/ROCK信号通路,促进人乳腺癌MCF-7细胞微管解聚的作用机制。方法:首先采用免疫荧光法,研究氧化克班宁对MCF-7细胞骨架关键蛋白F-actin的影响;其次,采用Western Blot法检测氧化克班宁作用MCF-7细胞后,F-actin... 目的:探究氧化克班宁通过Rho/ROCK信号通路,促进人乳腺癌MCF-7细胞微管解聚的作用机制。方法:首先采用免疫荧光法,研究氧化克班宁对MCF-7细胞骨架关键蛋白F-actin的影响;其次,采用Western Blot法检测氧化克班宁作用MCF-7细胞后,F-actin的蛋白表达水平、Rho/ROCK信号通路关键性蛋白Rho A、ROCK1和ROCK2的蛋白表达水平,以及经氧化克班宁和抑制剂GSK429286A联用处理后,MCF-7细胞内Rho/ROCK下游蛋白MYPT和LIMK的磷酸化水平。结果:氧化克班宁作用MCF-7细胞48 h后,与空白对照组相比,F-actin蛋白荧光强度逐渐降低,F-actin蛋白表达水平显著降低(P<0.01),Rho A、ROCK1和ROCK2蛋白表达水平显著降低(P<0.01);氧化克班宁与抑制剂GSK429286A联用,MCF-7细胞内pMYPT1及pLIMK1蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。结论:氧化克班宁可破坏细胞骨架,干预Rho/ROCK通路,调控其下游蛋白MYPT和LIMK磷酸化水平,促进微管解聚,抑制人乳腺癌MCF-7细胞生长。 展开更多
关键词 海南地不容 氧化克班宁 mcf-7细胞 微管 Rho/ROCK通路
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过表达Armcx3促进人乳腺上皮MCF-10A细胞增殖转移的作用研究
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作者 田甜 葛方惠 +3 位作者 黄茜阳 孙丰慧 张红 王建东 《西部医学》 2025年第10期1451-1455,共5页
目的构建过表达X连锁犰狳重复蛋白3(Armcx3)的人乳腺上皮MCF-10A细胞模型,探索其对MCF-10A细胞增殖、迁移和上皮间充质转化的影响。方法生物信息学分析Armcx3在乳腺癌和正常组织中的表达情况;将对照慢病毒和Armcx3慢病毒感染MCF-10A细... 目的构建过表达X连锁犰狳重复蛋白3(Armcx3)的人乳腺上皮MCF-10A细胞模型,探索其对MCF-10A细胞增殖、迁移和上皮间充质转化的影响。方法生物信息学分析Armcx3在乳腺癌和正常组织中的表达情况;将对照慢病毒和Armcx3慢病毒感染MCF-10A细胞并用嘌呤毒素筛选;将实验细胞分为空白对照组(MCF-10A组)、过表达对照组(Control组)和过表达Armcx3组(LV-Armcx3组);Western blot检测各组细胞中Armcx3蛋白及EMT相关蛋白的表达情况;使用CCK-8实验检测细胞增殖能力,划痕实验和Transwell迁移实验检测细胞迁移能力。结果Armcx3的mRNA和蛋白在乳腺癌中的表达均显著高于正常组织(P<0.001);过表达Armcx3的MCF-10A细胞模型构建成功;CCK-8实验结果显示,与MCF-10A组和Control组相比,LV-Armcx3组MCF-10A细胞的增殖能力显著增加(P<0.001);划痕实验和Transwell迁移实验结果显示,与MCF-10A组和Control组相比,LV-Armcx3组MCF-10A细胞的迁移能力显著增强(P<0.01);Western blot实验结果显示,与MCF-10A组和Control组相比,LV-Armcx3组MCF-10A细胞中E-cadherin蛋白的表达水平显著降低(P<0.0001),Vimentin蛋白的表达水平显著增加(P<0.05)。结论Armcx3在乳腺癌中高表达,并且过表达Armcx3促进MCF-10A细胞的增殖、迁移和上皮间充质转化的能力。 展开更多
关键词 X连锁犰狳重复蛋白3 mcf-10A细胞 增殖 迁移 上皮间充质转化
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TRIM21通过干预谷氨酰胺代谢影响人乳腺癌MCF-7细胞生物学行为的研究
3
作者 胡杨霖 何雄斌 何建怀 《河北医药》 2025年第10期1589-1593,1599,共6页
目的 探讨三结构域蛋白21(TRIM21)通过干预谷氨酰胺代谢对人乳腺癌MCF-7细胞生物学行为的影响。方法 购置人乳腺癌细胞MCF-7以及人正常乳腺上皮细胞MCF-10A,采用Western blot法检测TRIM21蛋白在MCF-7细胞及MCF-10A细胞中表达情况。将MC... 目的 探讨三结构域蛋白21(TRIM21)通过干预谷氨酰胺代谢对人乳腺癌MCF-7细胞生物学行为的影响。方法 购置人乳腺癌细胞MCF-7以及人正常乳腺上皮细胞MCF-10A,采用Western blot法检测TRIM21蛋白在MCF-7细胞及MCF-10A细胞中表达情况。将MCF-7细胞分为control组(不予转染)、pc DNA-NC组(转染pc DNA3.1-NC质粒)、pc DNA-TRIM21组(转染pc DNA3.1-TRIM21质粒),采用MTT法、Transwell侵袭实验、划痕实验检测3组MCF-7细胞增殖、侵袭、迁移能力,采用流式细胞术检测各组MCF-7细胞周期、凋亡率,采用ELISA法测定各组MCF-7细胞中谷氨酰胺(Gln)、谷胱甘肽(GSH)、谷氨酸(Glu)水平,采用Western blot法检测3组MCF-7细胞中TRIM21、谷氨酸脱氢酶(GLUD1)、谷氨酰胺酶(GLS1)蛋白相对表达量。结果 与MCF-10A细胞比较,MCF-7细胞中TRIM21蛋白相对表达量显著降低(P<0.05);与control组、pc DNA-NC组比较,转染pc DNA-TRIM21后MCF-7细胞凋亡率、TRIM21蛋白相对表达量显著升高(P<0.05),细胞穿膜率、细胞迁移率、Gln、Glu、GSH及GLS1、GLUD1蛋白相对表达量显著降低(P<0.05)。与control组和pc DNA-NC组比较,转染pc DNA-TRIM21后S期细胞明显增多(P<0.05),G0~G1期和G2~M期细胞明显减少(P<0.05),各时间点(24、48、72 h)细胞增殖率明显降低(P<0.05)。结论TRIM21在乳腺癌中呈低表达,过表达TRIM21对乳腺癌细胞增殖、侵袭、迁移有抑制作用,可阻滞细胞周期停于S期,并诱导其凋亡,其调控机制与抑制谷氨酰胺代谢有关。 展开更多
关键词 三结构域蛋白21 乳腺癌 mcf-7细胞 细胞生物学行为 谷氨酰胺代谢
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白屈菜碱-延胡索乙素联合阿霉素通过NLRP3/Caspase-1途径协同诱导人乳腺癌MCF-7/ADR细胞焦亡作用机制 被引量:2
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作者 邹翔 孙雨恒 +5 位作者 刘凯丽 宋冬雪 盛洁静 袁洪亮 隋洋 曲中原 《中草药》 北大核心 2025年第4期1234-1243,共10页
目的探究白屈菜碱-延胡索乙素联合阿霉素协同诱导人乳腺癌阿霉素耐药细胞MCF-7/ADR细胞焦亡的作用机制。方法以乳腺癌MCF-7/ADR细胞为研究对象,采用CCK-8法检测白屈菜碱-延胡索乙素联合阿霉素对MCF-7/ADR细胞增殖的影响;采用划痕实验和T... 目的探究白屈菜碱-延胡索乙素联合阿霉素协同诱导人乳腺癌阿霉素耐药细胞MCF-7/ADR细胞焦亡的作用机制。方法以乳腺癌MCF-7/ADR细胞为研究对象,采用CCK-8法检测白屈菜碱-延胡索乙素联合阿霉素对MCF-7/ADR细胞增殖的影响;采用划痕实验和Transwell小室实验检测白屈菜碱-延胡索乙素联合阿霉素对MCF-7/ADR细胞侵袭、迁移的影响;荧光显微镜测定白屈菜碱-延胡索乙素联合阿霉素对MCF-7/ADR细胞线粒体膜电位的影响;采用分子对接技术考察各成分与焦亡相关蛋白核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide-binding oligomerization domain-like receptor protein 3,NLRP3)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-1(Cystein-asparate protease-1,Caspase-1)、消皮素D(gasdermin D,GSDMD)和白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)的结合能力;采用qRT-PCR、Western blotting检测焦亡相关蛋白的表达水平。结果白屈菜碱-延胡索乙素联合阿霉素可显著增强阿霉素对MCF-7/ADR细胞的增殖抑制作用,说明白屈菜碱-延胡索乙素对阿霉素具有协同效应作用。与白屈菜碱-延胡索乙素、阿霉素单独使用比较,白屈菜碱-延胡索乙素联合阿霉素对MCF-7/ADR细胞侵袭、迁移的抑制作用更为显著(P<0.01);同时,亦可显著降低线粒体膜电位(P<0.01)。分子对接结果显示,白屈菜碱、延胡索乙素和阿霉素与焦亡相关蛋白NLRP3、Caspase-1、GSDMD和IL-18均具有良好的结合活性。qRT-PCR结果表明,与白屈菜碱-延胡索乙素、阿霉素单独使用比较,白屈菜碱-延胡索乙素联合阿霉素可显著上调GSDMD、NLRP3和Caspase-1 mRNA表达水平(P<0.01)。Western blotting结果表明,与白屈菜碱-延胡索乙素、阿霉素单独使用比较,白屈菜碱-延胡索乙素联合阿霉素可显著上调NLRP3、GSDMD、Caspase-1和IL-18的蛋白表达水平(P<0.01),与相应的mRNA表达结果一致。结论白屈菜碱-延胡索乙素可协同增强阿霉素对人乳腺癌MCF-7/ADR细胞的增殖抑制作用,并可通过激活NLRP3/Caspase-1/GSDMD信号通路诱导耐药细胞发生细胞焦亡。 展开更多
关键词 白屈菜碱 延胡索乙素 人乳腺癌耐药细胞mcf-7/ADR 阿霉素耐药 细胞焦亡
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阿霉素诱导MCF10A上皮细胞衰老模型的构建
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作者 王增盛 牛祖彪 +7 位作者 张波 郝佳慧 朱一超 杨瑞刚 任禾 刘辰瑜 孙强 任立成 《中国生物化学与分子生物学报》 北大核心 2025年第1期147-155,共9页
本研究旨在构建稳定的上皮细胞衰老模型,以期用于衰老细胞清除剂(senolytics)药物的筛选和评价研究。探究了阿霉素(doxorubicin)诱导人非转化乳腺上皮细胞系MCF 10A衰老的最佳条件,包括最佳诱导浓度、最佳干预时长和最佳衰老天数,并多... 本研究旨在构建稳定的上皮细胞衰老模型,以期用于衰老细胞清除剂(senolytics)药物的筛选和评价研究。探究了阿霉素(doxorubicin)诱导人非转化乳腺上皮细胞系MCF 10A衰老的最佳条件,包括最佳诱导浓度、最佳干预时长和最佳衰老天数,并多维度验证了MCF 10A作为细胞衰老模型的可行性。阿霉素诱导MCF 10A细胞衰老的最佳条件是:用0.6μmol/L的阿霉素处理16 h在第8 d MCF 10A细胞达到最佳衰老状态。在最佳诱导条件下,加药组的衰老相关-β-半乳糖苷酶(senescence-associated β-galactosidase,SA-β-gal)染色阳性率达到97%;同时,检测mRNA、蛋白质和免疫荧光(immunofluorescence,IF)的表达,结果显示:加药组细胞相对于正常细胞的衰老相关分泌表型(senescence-associated aecretory phenotype,SASP)、p16、p21和p53蛋白质的表达量均显著升高,核纤层蛋白B1(lamin B1)显著下降(P<0.001)。加药组细胞与衰老细胞特有特征一致。本研究用阿霉素成功构建了MCF 10A上皮细胞衰老模型,为基于衰老上皮细胞的衰老细胞清除剂的筛选奠定了研究基础。 展开更多
关键词 上皮细胞衰老模型 阿霉素 人非转化乳腺上皮细胞系mcf 10A 衰老相关-β-半乳糖苷酶 衰老相关分泌表型
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扁蒴藤素经AKT/GSK-3β信号通路增强乳腺癌MCF-7细胞对多柔比星的敏感性
6
作者 程超 王胄 张卫群 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第8期823-830,共8页
目的:探讨扁蒴藤素(PT)通过蛋白激酶B(AKT)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号通路对人乳腺癌细胞MCF-7多柔比星(DOX)敏感性的影响。方法:体外培养MCF-7细胞并建立DOX耐药细胞MCF-7/DOX。MCF-7细胞设NC组、L-PT组(2μmol/L PT)、M-PT组(4... 目的:探讨扁蒴藤素(PT)通过蛋白激酶B(AKT)/糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)信号通路对人乳腺癌细胞MCF-7多柔比星(DOX)敏感性的影响。方法:体外培养MCF-7细胞并建立DOX耐药细胞MCF-7/DOX。MCF-7细胞设NC组、L-PT组(2μmol/L PT)、M-PT组(4μmol/L PT)、H-PT组(8μmol/L PT)、H-PT+SC79组(8μmol/L PT+10μmol/L的AKT/GSK-3β信号通路抑制剂SC79)、H-PT+LY294002组(8μmol/L PT+2.5μmol/L的AKT/GSK-3β信号通路激活剂LY294002)。MCF-7/DOX细胞设MCF-7/DOX组(未处理)、DOX组(50 nmol/L DOX)、PT+DOX组(8μmol/L PT和50 nmol/L DOX)、PT+DOX+SC79组(8μmol/L PT+50 nmol/L DOX+10μmol/L SC79)、PT+DOX+LY294002组(8μmol/L PT+50 nmol/L DOX+2.5μmol/L LY294002)。采用MTT法、平板克隆实验、划痕愈合实验、Transwell实验及WB法分别检测细胞增殖、集落形成数、迁移、侵袭和AKT/GSK-3β信号通路蛋白表达。建立MCF-7细胞裸鼠移植瘤模型,观察PT对移植瘤生长、移植瘤组织中AKT/GSK--3β信号通路蛋白表达的影响。结果:与NC组相比,L-PT、M-PT、H-PT组MCF-7细胞增殖率、集落形成数、划痕愈合率、侵袭细胞数及p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达均呈PT浓度依赖性降低(均P<0.05);与H-PT组对比,H-PT+SC79组MCF-7细胞上述指标变化趋势与上述相反,PT+DOX+LY294002组MCF-7细胞上述指标变化趋势与上述相同(均P<0.05)。MCF-7/DOX组与DOX组细胞增殖率、集落形成数、划痕愈合率、侵袭细胞数及p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达无明显差异(均P > 0.05);分别与MCF-7/DOX组、DOX组对比,PT+DOX组MCF-7/DOX细胞上述指标均降低(均P<0.05);对比PT+DOX组,PT+DOX+SC79组上述指标均升高,PT+DOX+LY294002组上述指标均降低(均P<0.05)。裸鼠移植瘤实验显示,与对照组和DOX相比,PT+DOX组移植瘤质量、体积、p-AKT、p-GSK-3β蛋白表达均降低(均P<0.05)。结论:PT抑制乳腺癌细胞增殖、迁移和侵袭,并增强其对DOX的化疗敏感性,其机制与抑制AKT/GSK-3β信号通路有关。 展开更多
关键词 扁蒴藤素 蛋白激酶B/糖原合成酶激酶-3β 乳腺癌 mcf-7细胞 化疗敏感性
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基于高通量测序技术研究蛇床子素逆转MCF-7/Adr 细胞对阿霉素的耐药性及潜在作用机制
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作者 何晴 袁静静 +6 位作者 吉章鑫 张心语 杨东梅 彭辉 许娜 于庆生 储俊 《安徽中医药大学学报》 2025年第2期80-87,共8页
目的基于高通量测序技术探究蛇床子素(osthole,OST)逆转MCF-7/Adr细胞对阿霉素(adriamycin,Adr)耐药性的潜在机制。方法首先采用CCK-8法检测细胞活力,采用荧光染色法评估细胞内Adr的滞留情况;其次测定多药耐药基因1(multidrug resistanc... 目的基于高通量测序技术探究蛇床子素(osthole,OST)逆转MCF-7/Adr细胞对阿霉素(adriamycin,Adr)耐药性的潜在机制。方法首先采用CCK-8法检测细胞活力,采用荧光染色法评估细胞内Adr的滞留情况;其次测定多药耐药基因1(multidrug resistance 1,MDR1)和P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)水平;最后对OST给药的MCF-7/Adr细胞进行高通量测序,筛选差异表达的微小RNA(micro RNA,miRNA)并进行生物信息学分析。结果20μmol/L OST处理MCF-7/Adr细胞48 h后,对Adr的耐药倍数由20.3下降至2.8,Adr积累增加,并且MDR1 mRNA及其编码的P-gp表达水平下降。miRNA测序鉴定出92个miRNA上调,32个miRNA下调。生物信息学分析结果表明,差异表达的miRNA的主要功能是调节细胞增殖和细胞对化疗药物的耐药性;其靶基因可能与DNA结合、蛋白质运输、核苷酸结合等生物学过程相关,以及与Ras、Rap1、MAPK等信号通路有关。结论OST可逆转MCF-7/Adr细胞对Adr的耐药性,其机制可能与调节miRNA表达有关。 展开更多
关键词 mcf-7/ADR细胞 耐药性 蛇床子素 单细胞测序 微小RNA
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没食子酸诱导人乳腺癌MCF-7细胞铁死亡的作用机制研究
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作者 杨荣生 林晶晶 +2 位作者 王伟 刘异 黄靓 《中南药学》 2025年第11期3218-3223,共6页
目的探究没食子酸促进人乳腺癌MCF-7细胞铁死亡的机制。方法采用MTT法测定没食子酸对MCF-7细胞活力的影响;Hochest33258染色、流式细胞术检测细胞凋亡情况,试剂盒检测细胞内Fe^(2+)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含... 目的探究没食子酸促进人乳腺癌MCF-7细胞铁死亡的机制。方法采用MTT法测定没食子酸对MCF-7细胞活力的影响;Hochest33258染色、流式细胞术检测细胞凋亡情况,试剂盒检测细胞内Fe^(2+)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量,使用C11-BODIPY荧光探针检测细胞内脂质过氧化情况;Western blot法检测溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、酰基辅酶A合成酶长链家族成员4(ACSL4)的表达情况;RT-qPCR检测在铁死亡抑制剂存在下SLC7A11和GPX4 mRNA的表达。结果与空白组相比,当没食子酸质量浓度超过25μg/mL后,没食子酸可显著抑制MCF-7细胞的生长(P<0.01),并诱导细胞凋亡(P<0.01);上调Fe2+和MDA含量(P<0.01),显著降低SOD和GSH含量(P<0.01);显著增加MCF-7细胞内脂质过氧化,并抑制SLC7A11、GPX4的表达(P<0.01),促进ACSL4的表达(P<0.01);在没食子酸存在下,铁死亡抑制剂Liproxstatin-1、Ferrostatin-1能够提高SLC7A11和GPX4 mRNA的表达。结论没食子酸能够诱导MCF-7细胞凋亡和铁死亡,铁死亡的发生与SLC7A11/GPX4信号相关,该研究为开发没食子酸抗乳腺癌相关药物提供理论基础和科学依据。 展开更多
关键词 没食子酸 mcf-7细胞 SLC7A11/GPX4 铁死亡
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熊果酸诱导人乳腺癌细胞MCF-7凋亡的实验研究 被引量:32
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作者 张维文 黎银燕 +2 位作者 张贵平 吕嘉春 区彗坚 《中药材》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期297-301,共5页
目的:探讨三萜类中药成分熊果酸(UrsolicAcid,UA)诱导乳腺癌MCF 7细胞的凋亡作用,从而为开发应用于治疗乳腺癌的药物提供科学依据。方法:应用细胞培养技术,用不同浓度的药物在一定的时间内处理MCF -7细胞,采用MTT法、活细胞原位光镜和... 目的:探讨三萜类中药成分熊果酸(UrsolicAcid,UA)诱导乳腺癌MCF 7细胞的凋亡作用,从而为开发应用于治疗乳腺癌的药物提供科学依据。方法:应用细胞培养技术,用不同浓度的药物在一定的时间内处理MCF -7细胞,采用MTT法、活细胞原位光镜和荧光染色技术、流式细胞技术(FCM)、荧光免疫组织化学技术,研究药物诱导细胞凋亡引起的形态改变、细胞周期变化、p53蛋白表达。结果:UA剂量依赖性的抑制MCF -7细胞增殖,半数生长抑制剂量(IC50 )为22. 6±3. 0μmol/L,凋亡促进因子p53蛋白表达量增加,有典型的凋亡形态学特征,核质向边缘固缩,有凋亡小体。结论:UA通过抑制MCF -7细胞生长和上调p53的表达诱导细胞凋亡发挥其抗肿瘤细胞的作用。 展开更多
关键词 乳腺癌细胞mcf-7 熊果酸 实验研究 mcf-7细胞增殖 免疫组织化学技术 诱导细胞凋亡 p53蛋白表达 细胞培养技术 荧光染色技术 流式细胞技术 剂量依赖性 mol/L 形态学特征 抗肿瘤细胞 中药成分 Acid 凋亡作用 科学依据 药物提供
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姜黄素对乳腺癌MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白表达的影响及其机制研究 被引量:7
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作者 王寅声 李晓智 +4 位作者 沈杰 李絮 温纯洁 吴兰香 周宏灏 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2015年第7期769-774,共6页
目的:研究姜黄素对人乳腺癌MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白表达的影响及其作用机制。方法:MTS比色法检测姜黄素对MCF-7与MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性的影响;实时定量PCR与Western Blot方法检测姜黄素处理后,MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-... 目的:研究姜黄素对人乳腺癌MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白表达的影响及其作用机制。方法:MTS比色法检测姜黄素对MCF-7与MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性的影响;实时定量PCR与Western Blot方法检测姜黄素处理后,MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白在mRNA与蛋白质水平的表达变化;流式荧光法检测姜黄素对MCF-7与MCF-7/DOX细胞中多柔比星药物浓度的影响;亚硫酸氢盐处理后测序(bisulfite sequencing PCR,BSP)法检测姜黄素处理前后MCF-7与MCF-7/DOX细胞中P-糖蛋白编码基因多药耐药基因1(multidrug resistance protein1,MDR1)启动子区甲基化状态的改变。结果:与对照组相比,姜黄素处理后,MCF-7和MCF-7/DOX细胞多柔比星IC50值显著下降(P<0.05);姜黄素处理后,MCF-7和MCF-7/DOX细胞中的P-糖蛋白在mRNA及蛋白质水平的表达均有显著上调(P<0.05),而细胞内多柔比星的药物浓度下降;MCF-7和MCF-7/DOX细胞中MDR1基因启动子区域的甲基化程度在姜黄素处理后明显降低(P<0.05)。结论:姜黄素可增强乳腺癌MCF-7与MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性,但同时可显著诱导P-糖蛋白表达水平增高,从而降低细胞内多柔比星药物浓度,此作用与其对MDR1基因去甲基化功能密切相关。 展开更多
关键词 姜黄素 mcf-7细胞 mcf-7/DOX细胞 P-糖蛋白 DNA甲基化
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巨噬细胞集落刺激因子经PI3K/AKT信号途径影响人乳腺癌MCF-7细胞糖代谢 被引量:8
11
作者 田云 刘臻 +3 位作者 宁倩 莫中成 张蒙夏 唐圣松 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2019年第4期398-405,共8页
本文探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对人乳腺癌MCF-7细胞糖代谢的影响及其机制.构建胞质稳定转染M-CSF的MCF-7细胞(MCF-7-M);ATP检测试剂盒检测MCF-7和MCF-7-M细胞的ATP生成;葡萄糖测定试剂盒、乳酸测试盒检测MCF-7和MCF-7-M细胞的葡... 本文探讨巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)对人乳腺癌MCF-7细胞糖代谢的影响及其机制.构建胞质稳定转染M-CSF的MCF-7细胞(MCF-7-M);ATP检测试剂盒检测MCF-7和MCF-7-M细胞的ATP生成;葡萄糖测定试剂盒、乳酸测试盒检测MCF-7和MCF-7-M细胞的葡萄糖摄取和乳酸分泌情况;蛋白质印迹法检测在糖酵解抑制剂2-脱氧葡萄糖(2-DG)和氧化磷酸化抑制剂OLIG处理后,M-CSF对MCF-7细胞的糖酵解关键酶:己糖激酶2 (HK2)、丙酮酸激酶M2 (PKM2)及葡萄糖转运体1 (GLUT-1)表达的影响;MTT法检测在ATP消耗剂3-溴丙酮酸(3-BrPA)处理后,MCF-7和MCF-7-M细胞对5-FU敏感性的变化.结果发现:MCF-7-M细胞的ATP水平显著高于MCF-7细胞(P<0.05);2-DG降低了MCF-7和MCF-7-M细胞的ATP水平,并且降低MCF-7-M细胞ATP的效果更明显(P<0.01);MCF-7-M细胞的糖摄取能力和乳酸分泌量显著高于MCF-7细胞(P<0.01),经API-2处理后,MCF-7和MCF-7-M细胞葡萄糖消耗和乳酸分泌量均显著减少(P<0.01);MCF-7-M细胞GLUT-1、HK2和PKM2的表达显著高于MCF-7细胞(P<0.01);LY294002和API-2均可抑制MCF-7-M细胞GLUT-1的表达(P<0.05);用3-BrPA处理后,MCF-7-M和MCF-7细胞对5-FU的药物敏感性显著增强(P<0.01).综上,得出结论:胞质M-CSF通过诱导GLUT-1、HK2和PKM2的表达,活化MCF-7细胞糖酵解途径;PI3K/AKT信号通路参与胞质M-CSF活化MCF-7细胞的糖酵解途径. 展开更多
关键词 M-CSF mcf-7细胞 mcf-7-M细胞 糖酵解 PI3K/AKT
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姜黄素通过调控组蛋白乙酰化修饰上调乳腺癌MCF-7和MCF-7/DOX细胞中MDR1表达 被引量:3
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作者 李絮 代谊 +5 位作者 黄家凤 温纯洁 邹镇 吴兰香 王果 周宏灏 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2017年第5期512-517,共6页
目的:从组蛋白乙酰化修饰角度探讨姜黄素上调乳腺癌MCF-7和MCF-7/DOX细胞中多药耐药基因1(multidrug resistance protein 1,MDR1)表达水平的作用机制。方法:CCK-8(Cell Counting Kit-8)法观察姜黄素对MCF-7和MCF-7/DOX细胞生长增殖以及... 目的:从组蛋白乙酰化修饰角度探讨姜黄素上调乳腺癌MCF-7和MCF-7/DOX细胞中多药耐药基因1(multidrug resistance protein 1,MDR1)表达水平的作用机制。方法:CCK-8(Cell Counting Kit-8)法观察姜黄素对MCF-7和MCF-7/DOX细胞生长增殖以及多柔比星敏感性的影响;Realtime PCR和Western blot方法检测姜黄素处理前后两种细胞中MDR1 mRNA和蛋白质表达水平的变化;染色质免疫共沉淀技术(chromatin immunoprecipitation assay,CHIP)检测姜黄素对两种细胞中MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4乙酰化水平的影响。结果:不同浓度姜黄素处理72 h对MCF-7和MCF-7/DOX细胞的生长增殖有显著抑制作用,其IC50值分别为22.03μmol/L和27.46μmol/L;10μmol/L姜黄素处理72 h可显著提高两种细胞多柔比星敏感性,多柔比星IC50值分别下降了57.14%和54.52%(P<0.05);姜黄素处理MCF-7和MCF-7/DOX细胞后,MDR1在mRNA水平分别上调(32.90±0.96)和(5.70±0.55)倍(P<0.05),在蛋白质水平分别上调(2.26±0.18)与(2.90±0.21)倍(P<0.05);CHIP结果显示姜黄素对两种细胞中MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4的乙酰化水平均有显著上调作用。结论:姜黄素在增强MCF-7和MCF-7/DOX细胞多柔比星敏感性的同时,可通过调控MDR1启动子区相关组蛋白H3、H4的乙酰化水平而上调MDR1的表达。 展开更多
关键词 姜黄素 mcf-7 mcf-7/DOX 多药耐药基因1 乙酰化
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功劳木对乳腺癌耐药MCF7/ADM逆转MDR1的作用研究 被引量:3
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作者 田博 董明 +3 位作者 杨得振 贾勇 权文娟 侯俊明 《河南中医》 2015年第12期3193-3194,共2页
目的:观察功劳木对乳腺癌耐药细胞MCF7/ADM逆转MDR1的作用。方法:选取乳腺癌细胞株MCF7/ADM和MCF-7/S,将其分为对照组和观察组。观察组给予功劳木加ADM,对照组给予ADM,通过台盼蓝拒染实验、MTT法和流式细胞仪对癌细胞毒性、功能等进行检... 目的:观察功劳木对乳腺癌耐药细胞MCF7/ADM逆转MDR1的作用。方法:选取乳腺癌细胞株MCF7/ADM和MCF-7/S,将其分为对照组和观察组。观察组给予功劳木加ADM,对照组给予ADM,通过台盼蓝拒染实验、MTT法和流式细胞仪对癌细胞毒性、功能等进行检测,对比两组乳腺癌细胞在相同浓度下的抑制程度。结果:观察组MCF7/ADM和MCF-7/S的抑制情况明显高于对照组(P<0.05)。结论:功劳木对乳腺癌耐药细胞MCF7/ADM逆转MDR1具有明显的抑制作用。 展开更多
关键词 乳腺癌 功劳木 mcf7/ADM mcf-7/S 逆转MDR1
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GINS1对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及EMT相关蛋白的影响
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作者 刘元 朱珠 冯琛 《淮海医药》 2025年第4期341-345,351,共6页
目的:探讨GINS1对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的影响。方法:收集2022年6月—2023年6月蚌埠医科大学第一附属医院收治的25例乳腺癌患者的病理组织,通过生物信息学、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT... 目的:探讨GINS1对乳腺癌MCF-7细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭及上皮-间质转化(EMT)相关蛋白的影响。方法:收集2022年6月—2023年6月蚌埠医科大学第一附属医院收治的25例乳腺癌患者的病理组织,通过生物信息学、实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)、蛋白印迹法(Western blot)分析GINS1在正常乳腺组织和乳腺癌组织中的表达情况;体外培养MDAMB-453、MDAMB-231及MCF-7乳腺癌细胞,根据GINS1表达水平,选择MCF-7细胞构建GINS1过表达和敲低体系;通过CCK-8实验、流式细胞术、细胞划痕实验、Transwell实验分别检测过表达和敲低GINS1对MCF-7细胞增殖、凋亡、迁移、侵袭能力的影响;采用Western blot法检测过表达和敲低GINS1对MCF-7细胞中EMT相关蛋白的影响。结果:GINS1在乳腺癌组织中的表达水平高于癌旁正常组织(P<0.05)。与对照组相比,过表达GINS1导致MCF-7细胞增殖、迁移、侵袭能力增强,抑制细胞凋亡,促进EMT相关蛋白表达水平升高,而敲低GINS1则与之相反(P<0.05)。结论:GINS1使乳腺癌MCF-7细胞的增殖、迁移、侵袭能力增强及EMT相关蛋白表达水平升高,并抑制细胞凋亡。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤 GINS1 mcf-7细胞 增殖 迁移 凋亡 侵袭 上皮-间质转化
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叶酸受体及二氢叶酸还原酶与人乳腺癌细胞MCF-7/ADR多药耐药的关系 被引量:8
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作者 黄瀚 李兵 +2 位作者 欧阳林旗 李佐军 刘世坤 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第1期99-103,共5页
目的以人乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/ADR及其敏感亲本系MCF-7为对象,探讨叶酸受体(FOLRα)及其下游基因二氢叶酸还原酶(DHFR)的表达与乳腺癌细胞多药耐药的关系。方法 MTT法测定阿霉素的细胞毒性作用及DHFR抑制剂对MCF-7/ADR细胞多药耐... 目的以人乳腺癌多药耐药细胞系MCF-7/ADR及其敏感亲本系MCF-7为对象,探讨叶酸受体(FOLRα)及其下游基因二氢叶酸还原酶(DHFR)的表达与乳腺癌细胞多药耐药的关系。方法 MTT法测定阿霉素的细胞毒性作用及DHFR抑制剂对MCF-7/ADR细胞多药耐药的逆转作用;RT-PCR检测细胞FOLRα和DHFR mRNA的表达水平;免疫细胞化学检测FOLRα、P-gp的表达水平。结果 MCF-7细胞增殖速度快于MCF-7/ADR细胞,MCF-7细胞FOLRα mRNA转录水平较MCF-7/ADR细胞高,而MCF-7/ADR细胞DHFR mRNA较MCF-7细胞转录水平高;免疫细胞化学显示MCF-7细胞FOLRα的表达高于MCF-7/ADR细胞,而MCF-7/ADR细胞P-gp的表达较MCF-7细胞高;MCF-7/ADR对甲氨蝶啶无耐药性,甲氨蝶啶对MCF-7/ADR细胞多药耐药有逆转作用。结论 MCF-7/ADR细胞FOLRα的表达水平下调可能与细胞增殖水平有关,其下游基因DHFR表达水平与MCF-7/ADR细胞的MDR可能存在相关性。 展开更多
关键词 叶酸受体 二氢叶酸还原酶 mcf-7 mcf-7/ADR 多药耐药 阿霉素 甲氨蝶啶
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介孔材料MCFs的合成及组装青霉素酰化酶的性质研究 被引量:14
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作者 高波 陈静 +3 位作者 朱广山 傅学奇 王春雷 裘式伦 《高等学校化学学报》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2004年第11期1998-2000,共3页
Silica mesoporous material MCFs with 16.0 nm pore sizes was prepared by using non-ionic block copolymers and the swelling agents, and was used as the support for the immobilization of enzyme. Penicillin G acylase, an ... Silica mesoporous material MCFs with 16.0 nm pore sizes was prepared by using non-ionic block copolymers and the swelling agents, and was used as the support for the immobilization of enzyme. Penicillin G acylase, an enzyme, was assembled in the channel of MCFs by immersion method. The activity and stability of immobilized penicillin G acylase were studied. It was found that the activity and stability of the immobilized penicillin G acylase increased significantly compared to those of free enzyme. The optimum reaction temperature is 60 ℃. After incubation at 60 ℃ for 1 h, the activity of these immobilized penicillin G acylase remains 69%. These results showed that thermostability and durability on heating of the immobilized penicillin G acylase in MCFs was improved remarkably. The silica mesoporous material MCFs with 3-dimensional channel structure is a good support for the immobilization of enzyme. 展开更多
关键词 介孔材料mcfs 青霉素酰化酶 活性 稳定性
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本芴醇衍生物LY980503逆转人乳腺癌多药耐药细胞株MCF/DOX对多柔比星的耐药性 被引量:7
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作者 吴达龙 吕焕章 +4 位作者 黄丰 尹立新 万永玲 郭军华 吴德政 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期211-215,共5页
目的 探讨本芴醇衍生物LY980 5 0 3对肿瘤多药耐药的逆转作用及其作用机理。方法 采用噻唑蓝 (MTT)法检测细胞毒作用 ;采用流式细胞术测定细胞内多柔比星 (Dox)浓度 ;应用人乳腺癌裸鼠移植瘤模型研究LY980 5 0 3对肿瘤多药耐药的体内... 目的 探讨本芴醇衍生物LY980 5 0 3对肿瘤多药耐药的逆转作用及其作用机理。方法 采用噻唑蓝 (MTT)法检测细胞毒作用 ;采用流式细胞术测定细胞内多柔比星 (Dox)浓度 ;应用人乳腺癌裸鼠移植瘤模型研究LY980 5 0 3对肿瘤多药耐药的体内逆转作用。结果 LY980 5 0 3在 4 .0 μmol·L- 1(非细胞毒剂量 )能大部逆转人乳腺癌耐Dox细胞株MCF/Dox对Dox的耐药性 ;药物蓄积实验表明 ,LY980 5 0 3能显著增加MCF/Dox细胞内Dox蓄积 ;10 μmol·L- 1LY980 5 0 3作用 96h能明显抑制MCF/Dox细胞mdr 1基因表达水平。将MCF/Dox细胞接种于裸鼠皮下 ,接种后d 4 2 ,合用LY980 5 0 3(2 0 0mg·kg- 1·d- 1×3,ig)的移植瘤体积 (0 .34± 0 .19)cm3较单用Dox的移植瘤体积 (0 .90± 0 .32 )cm3显著缩小。结论LY980 5 0 3在体外及体内均能有效逆转MCF/Dox细胞对Dox的耐药性。 展开更多
关键词 本芴醇衍生物 LY980503 乳腺癌 多药耐药 细胞株 mcf/DOX 多柔比星 耐药性
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青蒿素和青蒿琥酯对人乳腺癌MCF-7细胞的体外抑制作用比较研究 被引量:40
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作者 林芳 钱之玉 +2 位作者 薛红卫 丁健 林莉萍 《中草药》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期347-349,共3页
目的 对比研究青蒿素及其衍生物青蒿琥酯对人乳腺癌 MCF- 7细胞增殖的影响并探讨其作用机制。方法采用体外培养的人乳腺癌 MCF- 7细胞株 ,利用 SRB法测定青蒿素和青蒿琥酯对 MCF- 7细胞增殖的影响 ,FCM法测定细胞周期的变化 ,亚 G1 期... 目的 对比研究青蒿素及其衍生物青蒿琥酯对人乳腺癌 MCF- 7细胞增殖的影响并探讨其作用机制。方法采用体外培养的人乳腺癌 MCF- 7细胞株 ,利用 SRB法测定青蒿素和青蒿琥酯对 MCF- 7细胞增殖的影响 ,FCM法测定细胞周期的变化 ,亚 G1 期含量测定和 DAPI荧光染色法观察细胞凋亡。结果  10 μmol/L 青蒿素和 1μmol/L青蒿琥酯能明显改变 MCF- 7细胞的细胞周期 ,使 S期细胞显著减少 ,G0 +G1 期细胞明显增加。青蒿素对 MCF-7细胞增殖仅有微弱抑制作用 ,但其衍生物青蒿琥酯却有显著的抑制作用 ,IC50 为 0 .31μmol/L。同样 ,1μmol/L 青蒿琥酯引起 MCF- 7细胞的凋亡和直接的细胞毒作用明显强于 10μm ol/L青蒿素的作用。结论 体外研究表明 ,对肿瘤细胞增殖的抑制青蒿琥酯比青蒿素作用强。 展开更多
关键词 青蒿素 青蒿琥酯 乳腺癌 mcf-7细胞 体外抑制作用 细胞凋亡
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粉防己碱逆转人乳腺癌MCF-7多药耐药细胞的抗凋亡作用 被引量:32
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作者 王金华 叶祖光 +4 位作者 孙爱续 薛宝云 梁爱华 李春英 王岚 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期46-50,共5页
目的 :研究粉防己碱与长春新碱合用能否逆转人乳腺癌MCF 7多药耐药细胞的抗凋亡作用。方法 :用荧光染料Hoechst 3334 2和碘化丙锭联染观察染色质凝集 ,流式细胞术检测G1亚峰 ,TUNEL法检测凋亡细胞 ,Fluo 3染色法测定细胞内游离钙。结果 ... 目的 :研究粉防己碱与长春新碱合用能否逆转人乳腺癌MCF 7多药耐药细胞的抗凋亡作用。方法 :用荧光染料Hoechst 3334 2和碘化丙锭联染观察染色质凝集 ,流式细胞术检测G1亚峰 ,TUNEL法检测凋亡细胞 ,Fluo 3染色法测定细胞内游离钙。结果 :抗肿瘤药物长春新碱处理MCF 7敏感和耐药细胞后 2 4h ,可观察到 2种类型的染色质凝集 ;但在耐药细胞中 ,相同浓度处理下染色质凝集的细胞明显减少。无明显细胞毒性的粉防己碱(2 0 μmol·L-1)与长春新碱合用 ,荧光显示法和TUNEL法均证实敏感和耐药的凋亡细胞明显增多。粉防己碱与长春新碱合用明显升高细胞内的游离钙含量。结论 :粉防己碱能有效地逆转人乳腺癌MCF 展开更多
关键词 粉防已碱 长春新碱 多药耐药性 细胞凋亡 人乳腺癌 mcf-7细胞 抗凋亡作用
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沉默HuR的表达增加人乳腺癌耐药MCF-7/Adr细胞对多柔比星的敏感性 被引量:4
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作者 楚慧丽 王俊 +5 位作者 朱忠鹏 郭燕 王宝成 毕经旺 李锴男 梁秀菊 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期182-186,共5页
目的:研究RNA干扰人抗原R(human antigen R,HuR)基因的表达对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/Adr对多柔比星(doxorubicin)敏感性的影响。方法:构建靶向HuR基因的shRNA表达质粒(pGenesil-siHuR),稳定转染至MCF-7/Adr细胞,real-time PCR检测细胞... 目的:研究RNA干扰人抗原R(human antigen R,HuR)基因的表达对人乳腺癌耐药细胞株MCF-7/Adr对多柔比星(doxorubicin)敏感性的影响。方法:构建靶向HuR基因的shRNA表达质粒(pGenesil-siHuR),稳定转染至MCF-7/Adr细胞,real-time PCR检测细胞中MDR1 mRNA的表达,Western blotting检测MCF-7/Adr细胞中由MDR1基因编码的P糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)的表达,MTT法检测pGenesil-siHuR转染后MCF-7/Adr细胞在多柔比星作用后的存活率和IC50,流式细胞术检测MCF-7/Adr细胞的凋亡率。结果:与未转染的MCF-7/Adr细胞比较,pGenesil-siHuR质粒转染MCF-7/Adr细胞中MDR1 mRNA的表达水平明显减低[(0.184±0.029)vs(1.203±0.026),P<0.01],P-gp表达水平明显降低。pGenesil-siHuR质粒转染MCF-7/Adr细胞后,MCF-7/Adr细胞对多柔比星的IC50从未转染的(148.2±2.3)nmol/L降至(42.9±0.4)nmol/L;经多柔比星处理后,pGenesil-siHuR质粒转染组MCF-7/Adr细胞的凋亡率明显上升[(34.6±1.1)%vs(1.1±0.2)%,P<0.01]。结论:RNA干扰HuR的表达能抑制MDR1基因的表达,增加耐药乳腺癌MCF-7/Adr细胞对多柔比星的敏感性。 展开更多
关键词 人抗原R基因 乳腺癌 mcf 7 Adr细胞 多药耐药 多柔比星 RNA干扰
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