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Production of Ammonium Lactate by Fed-batch Fermentation of Rhizopus oryzaefrom Corncob Hydrolysate 被引量:3
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作者 BAIDong-mei LIShi-zhong LINFang-qian 《Chemical Research in Chinese Universities》 SCIE CAS CSCD 2004年第4期403-406,共4页
L-(+)-Lactic acid production from corncob hydrolysate as a cheap carbohydrate source by fed-batch fermentation of Rhizopus oryzaeHZS6 was studied. After 96 h of fermentation in a 5 L fermentor, the final concentration... L-(+)-Lactic acid production from corncob hydrolysate as a cheap carbohydrate source by fed-batch fermentation of Rhizopus oryzaeHZS6 was studied. After 96 h of fermentation in a 5 L fermentor, the final concentration of ammonium L-(+)-lactate, average productivity(based on initial xylose concentration) and maximum dry cell weight were 132.4 g/L, 1.38 g/(L·h), and 8.9 g/L respectively. The optical purity of L-(+)-lactate was 98.8%. 展开更多
关键词 Corncob hydrolysate Ammonium lactate Rhizopus oryzae fed-batch fermentation
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Fed-Batch Fermentation for Spinosad Production in an Improved Reactor 被引量:2
2
作者 Chunzhe Lu Jing Yin +1 位作者 Chuanbo Zhang Wenyu Lu 《Transactions of Tianjin University》 EI CAS 2017年第6期530-537,共8页
As a kind of aerobic bacteria, Saccharopolyspora spinosa exhibits a high demand for oxygen. In the fermentation process, the methods of increasing ventilation and improving agitation speed are usually adopted to achie... As a kind of aerobic bacteria, Saccharopolyspora spinosa exhibits a high demand for oxygen. In the fermentation process, the methods of increasing ventilation and improving agitation speed are usually adopted to achieve higher values of dissolved oxygen. These methods decrease the efficiency of spinosad biosynthesis. In this study, an improved reactor was designed to solve these problems. The exhaust gas reflux device, impellers, and baffles were improved. Furthermore, we established the kinetic models for the cell growth, substrate consumption and spinosad generation in batch fermentation process. The simulation results were in good agreement with the experimental data. Spinosad production reached 583.86 mg/L after employing the suitable feeding strategy by fed-batch fermentation in the improved reactor, whereas it was only 157.01 mg/L before optimization. The method described can provide insight to strengthen spinosad production and can be extended to the culturing process of filamentous aerobic bacteria. © 2017 Tianjin University and Springer-Verlag Berlin Heidelberg 展开更多
关键词 Aerobic bacteria BACTERIA BIOCHEMISTRY Bioreactors Dissolved oxygen Process control
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Strategies for Optimizing Feed Rate of Fed-Batch Yeast Fermentation by Fuzzy-Neural Network 被引量:1
3
作者 苗志奇 元英进 《Chinese Journal of Chemical Engineering》 SCIE EI CAS CSCD 1998年第4期62-69,共8页
In this paper,a novel fuzzy neural network model,in which an adjustable fuzzy sub-space was designed by uniform design,has been established and used in fed-batch yeast fermentationas an example.A brand-new optimizatio... In this paper,a novel fuzzy neural network model,in which an adjustable fuzzy sub-space was designed by uniform design,has been established and used in fed-batch yeast fermentationas an example.A brand-new optimization sub-network with special structure has been built andgenetic algorithm,guaranteeing the optimization in overall space,is introduced for the feed rateoptimization.On the basis of the model network,the optimal substrate concentration and theoptimal amount of fed-batch at different periods have been studied,aided with the optimizationnetwork and the genetic algorithm separately.The above results can be used as a basis for theestablishment of a fuzzy neural network controller. 展开更多
关键词 FUZZY NEURAL network optimization fed-batch FERMENTATION the GENETIC algorithm
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Fed-batch培养中补料及接种密度对RABV-G蛋白表达量的影响 被引量:2
4
作者 宋路萍 邢体坤 +3 位作者 王亚萍 李静波 宋彦君 张静静 《中国当代医药》 CAS 2022年第36期18-21,共4页
目的研究流加(Fed-batch)培养中补料及接种密度对狂犬病毒糖蛋白G(RABV-G)蛋白表达量的影响,初步建立RABV-G蛋白在重组中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中Fed-batch培养的较优工艺方案。方法复苏培养1支能够稳定表达狂犬病毒RABV-G蛋白的重组CHO细... 目的研究流加(Fed-batch)培养中补料及接种密度对狂犬病毒糖蛋白G(RABV-G)蛋白表达量的影响,初步建立RABV-G蛋白在重组中国仓鼠卵巢(CHO)细胞中Fed-batch培养的较优工艺方案。方法复苏培养1支能够稳定表达狂犬病毒RABV-G蛋白的重组CHO细胞,传代扩增后进行6种方案Fed-batch培养,从Fed-batch培养的第3天开始监测培养上清中目的蛋白表达量和细胞生长参数,第14天结束培养,分析比较不同策略所产生的目的蛋白表达量。结果本研究方案6中5%的Feed1补料及0.5×10~6cells/ml的起始接种密度在Fed-batch培养第14天,糖蛋白表达量达150 mg/L,显著高于其余5种方案,确立为优选方案。结论本研究建立了RABV-G蛋白在重组CHO细胞中流加(Fed-batch)培养的较优工艺方案,为重组狂犬病毒疫苗生产工艺研究提供基础。 展开更多
关键词 狂犬病病毒 糖蛋白 流加培养
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Isolation of enriched-yielders and fed-batch production of alkaline protease from the newly isolated <i>Bacillus</i>sp. BHA
5
作者 Bhawana Agarwal Brajesh S. Katiyar 《Natural Science》 2013年第6期1-9,共9页
An alkalophilc and thermophilic Bacillus sp. BHA that produced a thermostable alkaline protease was isolated from decaying protein substrates. The isolate was found to grow in pH range 7 - 11 with an optimum pH 9.0 an... An alkalophilc and thermophilic Bacillus sp. BHA that produced a thermostable alkaline protease was isolated from decaying protein substrates. The isolate was found to grow in pH range 7 - 11 with an optimum pH 9.0 and temperature up to 55℃. The activity of alkaline protease of Bacillus sp. BHA (68.98 APU/ml) was found higher than the standard strains of Bacillus amyloliquefaciens MTCC 610 (8.98 APU/ml) and Bacillus subtilis MTCC 8349 (12.14 APU/ml, used in this study, and was comparable (68.98 APU/ml, equivalent to 30.38 APU/mg) to the activity of the commercially produced standard protease procured from Novo Nordisk, Denmark (30.35 APU/mg). Hence, the proteolytic activity produced by this isolate was further investigated in batch and fed-batch process. Sucrose was the best carbon source for the production of protease activity by that isolate. Different organic nitrogen sources (casein, peptone and beef extract) at 1% (w/v) with varying levels of sucrose (1% - 4% w/v) initially repress enzyme synthesis. The duration and extent of repression decreased with increased concentration of sucrose. Maximum protease activity was found in basal medium with 4% (w/v) sucrose and 1% (w/v) yeast extract. Yeast-extract was thought to be an inducer of enzyme synthesis. Further, the basal medium was unique with respect to the enzyme production, as protease production was growth associated with the peak enzyme production being detected at the time of maximum growth. Interestingly, a rise in 34.2% (104.86 APU/ml) of protease activity was detected at incubation temperature of 50℃ and when culture filtrate was assayed at 60℃, signifying a high temperature stability of the produced protease by this isolate. Additional studies on the enzyme characterization were resulted in recognition of highly significant properties of the activity towards casein at pH 9.0 and stability at high temperature with retention of 96% the enzyme activity at 60℃. The parametric study under feed intervals had enabled improvement in the maximum protease activities attainable from batch cultures in excess of 21.78% and 26.32% via two feeding strategies. A small continual increase in enzyme activity (132.46 APU/ml during 24 h - 120 h) and enhancement in protease production in excess of 36.84% was observed by fed-batch process than the batch experiment. 展开更多
关键词 Industrial Enzymes Alkaline PROTEASE Feedback REPRESSION batch Culture fed-batch Process
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Batch, Fed Batch Production and Characterization of Glutaminase Free L-Asparaginase II of <i>Pectobacterium carotovorum</i>MTCC 1428 in <i>Escherichia coli</i>
6
作者 Rachna Goswami Krishnamoorthy Hegde Venkata Dasu Veeranki 《Advances in Microbiology》 2014年第10期667-680,共14页
The present study describes the production optimization of recombinant L-asparaginase II of Pectobacterium carotovorum MTCC 1428 in Escherichia coli BL21 (DE3) at batch and fed batch bioreactor level. Production of re... The present study describes the production optimization of recombinant L-asparaginase II of Pectobacterium carotovorum MTCC 1428 in Escherichia coli BL21 (DE3) at batch and fed batch bioreactor level. Production of recombinant L-asparaginase II in batch and fed batch mode was found to be 1.34 and 5.38 folds higher, respectively as compared to shake flask culture. SDS-PAGE and native PAGE of the purified enzyme revealed that molecular mass of the subunits and native enzyme are ~37.5 kDa and ~150 kDa, respectively. Optimum range of pH and temperature for hydrolysis of L-asparagine were found to be 7.5 - 8.5 and 47°C - 52°C, respectively. The recombinant enzyme is very specific for its natural substrate, L-asparagine. The activity of recombinant L-asparaginase II is improved by mono cations and diverse effectors including Na+, K+, L-cystine, L-histidine, glutathione and 2-mercaptoethanol whereas, it is moderately inhibited by different divalent cations and thiol group blocking reagent. The kinetic parameters Km, Vmax, kcat and Km/Kcat of purified recombinant L-asparaginase II were determined. The purified L-asparaginase II possesses no partial glutaminase activity, which is prerequisite to reduce the possibility of side effects during the course of anti-cancer therapy. 展开更多
关键词 batch FERMENTATION fed-batch FERMENTATION Recombinant L-ASPARAGINASE II Taguchi’s Method
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Principles and Case Studies of Fed Batch Fermentation and Continuous Fermentation
7
作者 Andrew Peng Yi 《Journal of Clinical and Nursing Research》 2022年第2期99-104,共6页
Modern fermentation processes include a variety of fermentation methods,such as fed batch fermentation and continuous fermentation.This paper will focus on the principles and case studies of these two methods.Fed batc... Modern fermentation processes include a variety of fermentation methods,such as fed batch fermentation and continuous fermentation.This paper will focus on the principles and case studies of these two methods.Fed batch fermentation originates from fractionation fermentation with closed culture and adjustment of the pH value of the carbon source,to which the process of feeding the carbon source to the cell culture in a controlled manner has been added.This type of fermentation is more commonly used compared to the other.Continuous fermentation is also a closed fermentation system,which can operate without restrictions by continuous or intermittent addition of fresh nutrient media to the fermenter;however,it is susceptible to contamination by stray bacteria and metabolic inconvenience. 展开更多
关键词 fed batch fermentation Continuous fermentation Fermentation process
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重组抗菌肽Plectasin的原核表达高密度发酵条件优化及抑菌活性
8
作者 苏琰 李融 《食品与机械》 北大核心 2025年第8期39-45,共7页
[目的]构建重组工程菌表达抗菌肽Plectasin,优化重组工程菌的高密度发酵条件,并对优化生产所得重组抗菌肽进行抑菌活性研究。[方法]为提高目的蛋白可溶性表达,依据原核表达系统的密码子偏爱性优化合成plectasin基因,切除信号肽部分,选择... [目的]构建重组工程菌表达抗菌肽Plectasin,优化重组工程菌的高密度发酵条件,并对优化生产所得重组抗菌肽进行抑菌活性研究。[方法]为提高目的蛋白可溶性表达,依据原核表达系统的密码子偏爱性优化合成plectasin基因,切除信号肽部分,选择pET32a(+)表达载体,构建重组质粒pET32a-plectasin,导入大肠杆菌(Escherichia coli)感受态细胞BL21(DE3)/pLysS。设计单因素试验和正交试验对重组工程菌的20 L高密度发酵参数进行优化。对优化条件后生产获得Plectasin进行纯化鉴定并对其抑菌活性进行分析。[结果]研究成功构建E.coli BL21(DE3)pLysS/pET32aplectasin表达菌株,优化后20 L高密度发酵工艺条件为:诱导温度30℃,接种量2%。发酵时长15 h,纯化后重组蛋白质量浓度为(0.62±0.02) g/L。表达产物对金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus,ATCC 25923)的最小抑菌质量浓度为32μg/mL。[结论]通过优化原核表达高密度发酵条件提高了重组Plectasin的可溶性表达产量,发酵产物对金黄色葡萄球菌表现出一定的抑菌活性。 展开更多
关键词 高密度发酵 可溶性表达 Plectasin 分批补料培养 抑菌活性
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流加培养与氧调控协同提高大肠杆菌产L⁃苏氨酸
9
作者 王泽建 银肖剑 +4 位作者 郭文慧 吕莹 范晓光 栗波 梁剑光 《食品研究与开发》 2025年第5期160-166,共7页
以实验室1株大肠杆菌为出发菌株,首先将活化后的大肠杆菌菌液按照5%接种量接种至优化后的发酵罐培养基中进行培养,调节控制溶解量不低于15%,并实时流加葡萄糖酸钠、磷酸甜菜碱和玉米浆干粉混合溶液,控制细胞的氧消耗速率(oxygen uptake ... 以实验室1株大肠杆菌为出发菌株,首先将活化后的大肠杆菌菌液按照5%接种量接种至优化后的发酵罐培养基中进行培养,调节控制溶解量不低于15%,并实时流加葡萄糖酸钠、磷酸甜菜碱和玉米浆干粉混合溶液,控制细胞的氧消耗速率(oxygen uptake rate,OUR)为215 mmol/(L·h),通过在线氧消耗速率控制系统、补料控制与OUR调节的作用关系,获得最优流加补料方案:流加25%氨水控制pH值,调整转速和通气控制溶氧15%以上,当溶氧开始回升时流加质量浓度为65%的葡萄糖,起始流加速度1 g(/L·h),控制残糖浓度不超过1.0 g/L。结果表明:L⁃苏氨酸产量提高了35%,达到155 g/L。 展开更多
关键词 L⁃苏氨酸 氧消耗速率 优化调控 流加培养 大肠杆菌
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光及补氮诱导对三角褐指藻岩藻黄素合成积累的影响
10
作者 李玉芹 钟亮 +1 位作者 孟醒 彭宗凡 《湘潭大学学报(自然科学版)》 2025年第1期1-10,共10页
该文探究了光及补氮诱导培养模式对三角褐指藻岩藻黄素合成积累的影响.研究结果显示,在光照色温4000 K、光照周期21 h(光照)∶3 h(黑暗)、初始光照强度4000 lux诱导培养192 h后光照强度降至3000 lux条件下,获得的三角褐指藻岩藻黄素含... 该文探究了光及补氮诱导培养模式对三角褐指藻岩藻黄素合成积累的影响.研究结果显示,在光照色温4000 K、光照周期21 h(光照)∶3 h(黑暗)、初始光照强度4000 lux诱导培养192 h后光照强度降至3000 lux条件下,获得的三角褐指藻岩藻黄素含量和产量分别为13.67 mg·g^(-1)和44.93 mg·L^(-1),分别为未进行光诱导培养模式的1.31倍和1.77倍.在此最佳光诱导条件下,流加补氮培养进一步提升了三角褐指藻生物量、岩藻黄素含量和产量,分别达到4.46 g·L^(-1)、15.77 mg·g^(-1)和70.62 mg·L^(-1),较未进行光及补氮诱导培养模式分别提高了1.89倍、1.51倍和2.78倍.实验证实了光优化及流加补氮培养可有效促进三角褐指藻生物量和岩藻黄素积累,且培养获得的岩藻黄素微生物和重金属含量均符合GB 26405—2011标准.研究结果为利用三角褐指藻规模化生产岩藻黄素及应用提供了新思路. 展开更多
关键词 三角褐指藻 光诱导 流加补氮 生物量 岩藻黄素
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双酶偶联一锅法高效合成虎杖苷 被引量:2
11
作者 戴景莉 闫子旭 +4 位作者 赵科学 李小利 臧永军 徐麒麟 朱富成 《生物工程学报》 北大核心 2025年第1期461-473,共13页
虎杖是传统中药之一,其主要活性成分虎杖苷具有调节糖代谢、脂代谢、镇咳平喘、抗菌抗炎等药理作用,但传统的虎杖苷制备方法不足以满足当下市场需求。本研究聚焦于绿色高效的虎杖苷制备方法,在已获得的糖基转移酶UGTBS三联突变体IGW(Y14... 虎杖是传统中药之一,其主要活性成分虎杖苷具有调节糖代谢、脂代谢、镇咳平喘、抗菌抗炎等药理作用,但传统的虎杖苷制备方法不足以满足当下市场需求。本研究聚焦于绿色高效的虎杖苷制备方法,在已获得的糖基转移酶UGTBS三联突变体IGW(Y14I/I62G/M315W)基础上,以白藜芦醇为底物,通过双酶偶联一锅法生物催化高效制备虎杖苷,同时实现尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphosphate-glucose,UDPG)的循环再生。对双酶偶联催化体系进行条件优化,在35℃,pH为8.0,IGW:AtSuSy1酶活比3:4,二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)体积比5%,尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)浓度0.10 mmol/L,蔗糖浓度0.6 mol/L的条件下,1 h内2 mmol/L白藜芦醇的转化率可达80.6%,虎杖苷的产物占比可达90%以上。本研究通过双酶偶联体系实现了UDPG的循环再生,缩短了反应时间,同时探究了分批补料策略,在一锅法偶联反应中24 h虎杖苷产量可达到6.28 g/L。本研究为绿色高效制备虎杖苷提供了新的策略。 展开更多
关键词 糖基转移酶 虎杖苷 一锅法偶联反应 尿苷二磷酸葡萄糖的再生 分批补料策略
原文传递
基于温和预处理玉米秸秆的酶解糖化工艺研究
12
作者 张欢欢 林钰程 +4 位作者 王圆圆 赵世强 杜朝军 赵子高 常春 《可再生能源》 北大核心 2025年第2期143-151,共9页
秸秆类生物质的预处理和酶解是实现其高值化转化、利用的关键技术之一。文章以玉米秸秆为原料,对甲酸、亚氯酸钠和碱性过氧化氢预处理方法进行了研究和比较。采用扫描电镜、X射线衍射和傅里叶变换红外光谱等方法对预处理前后玉米秸秆的... 秸秆类生物质的预处理和酶解是实现其高值化转化、利用的关键技术之一。文章以玉米秸秆为原料,对甲酸、亚氯酸钠和碱性过氧化氢预处理方法进行了研究和比较。采用扫描电镜、X射线衍射和傅里叶变换红外光谱等方法对预处理前后玉米秸秆的组成、形貌、晶体结构和官能团进行了分析。经过甲酸、亚氯酸钠和碱性过氧化氢预处理后,木质素去除率分别为66.71%,97.12%和91.88%,酶解率分别达到63.26%,71.83%和95.14%。在纤维素酶添加量为19.6 FPU/g,木聚糖酶添加量为35.44 IU/g,吐温80添加量为20.96 mg/g的条件下,碱性过氧化氢预处理后玉米秸秆的预测酶解率为95.57%,实际酶解率为94.42%。高固体酶解的最佳补料策略是初始底物浓度为8%,在6,12,24 h分别添加4%的底物,酶解120 h后,酶解率达到87.57%。 展开更多
关键词 玉米秸秆 预处理 高固酶解 分批补料
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DL-丙氨酸不对称降解菌Penicillium levitum Slu-B的筛选及D-丙氨酸制备条件的优化
13
作者 黄文英 吴冬杰 顾向阳 《南京农业大学学报》 北大核心 2025年第5期1053-1059,共7页
[目的]本文旨在对1株新分离的青霉属菌株Slu-B进行菌种鉴定,研究其不对称降解DL-丙氨酸的特性及制备D-丙氨酸的可行性。[方法]从环境样中分离筛选高效不对称降解DL-丙氨酸的真菌菌株,通过显微形态观察及rDNA ITS基因序列同源性比对将分... [目的]本文旨在对1株新分离的青霉属菌株Slu-B进行菌种鉴定,研究其不对称降解DL-丙氨酸的特性及制备D-丙氨酸的可行性。[方法]从环境样中分离筛选高效不对称降解DL-丙氨酸的真菌菌株,通过显微形态观察及rDNA ITS基因序列同源性比对将分离菌株鉴定至相应的种;以DL-丙氨酸为唯一碳氮源,通过摇瓶试验研究培养温度、培养基pH、酵母粉添加量、摇床转速、装液量、接种量等对该菌株不对称降解活性的影响;探究分批补料发酵制备D-丙氨酸的可行性。[结果]分离到1株不对称降解指数(ADI)值为1的不对称降解DL-丙氨酸的真菌菌株Slu-B,依据其显微形态特征及ITS序列同源性将该菌株鉴定为Penicillium levitum(平滑青霉)。摇瓶试验得出菌株Slu-B不对称降解DL-丙氨酸的最适发酵条件:培养温度25~35℃、培养基pH 4~6、摇床转速140~200 r·min^(-1)、装液量50~100 mL·500 mL^(-1)、接种量2.32 g·100 mL^(-1),在此条件下分批补料发酵,当L-丙氨酸被完全降解时发酵液中积累的D-丙氨酸质量浓度达9.68 g·L^(-1),D-丙氨酸的理论回收率达96.75%。[结论]分离菌株Penicillium levitum Slu-B具有完全不对称降解DL-丙氨酸的特性,在分批补料发酵中D-丙氨酸的理论回收率高达96.75%,为生物法制备D-丙氨酸积累了新的菌种资源。 展开更多
关键词 不对称降解指数 DL-丙氨酸 D-丙氨酸 平滑青霉 分批补料发酵
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高产维生素B乳酸菌的筛选、鉴定及培养优化的研究
14
作者 许媛 韩建邦 +4 位作者 祝晨琳 王欣雨 孙颖盈 陈雨濛 金海如 《微生物学杂志》 北大核心 2025年第2期15-22,共8页
为获得高产维生素B乳酸菌菌株,优化培养条件及发酵方式。从三种不同酸菜中分离纯化出乳酸菌,通过荧光分光光度法、HPLC法筛选出1株高产维生素B的菌株SC-65,对其进行形态学观察、生理生化鉴定和16S rDNA序列分析;运用单因素分析和正交实... 为获得高产维生素B乳酸菌菌株,优化培养条件及发酵方式。从三种不同酸菜中分离纯化出乳酸菌,通过荧光分光光度法、HPLC法筛选出1株高产维生素B的菌株SC-65,对其进行形态学观察、生理生化鉴定和16S rDNA序列分析;运用单因素分析和正交实验确定最佳培养条件和最佳培养基浓度;最后通过发酵罐扩大培养,分析其对菌株生物量及维生素B浓度的影响。结果显示,菌株SC-65为戊糖片球菌(Pediococcus pentosaceus)。确定接种量5%(体积分数)、温度37℃、装液量50%、pH 6.0、葡萄糖20.0 g/L、蛋白胨10.0 g/L,磷酸盐体系0.35 g/L为最佳培养方案。补料分批发酵细胞生物量为11.94 g/L,维生素B浓度为15.50 mg/L,相比于分批发酵生物量(质量分数)提高117.10%,维生素B浓度(质量分数)提高40.91%。该研究结果为进一步优化菌株的生产工艺,开发乳酸菌发酵产维生素B的应用提供参考。 展开更多
关键词 维生素B 乳酸菌 生物量 培养优化 发酵方式 补料发酵
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双阶段补料促进E.coli BL21(DE3)-pET28a-ADI高产精氨酸脱亚胺酶
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作者 梁子龙 洪皓 +1 位作者 齐佳琨 张春枝 《大连工业大学学报》 2025年第6期397-402,共6页
精氨酸脱亚胺酶(ADI)能催化L-精氨酸生成L-瓜氨酸。通过优化发酵工艺来提高E.coli BL21(DE3)-pET28a-ADI产精氨酸脱亚胺酶的酶活力。采用摇瓶发酵对E.coli BL21(DE3)-pET28a-ADI产ADI的诱导条件进行优化,结果表明,最佳诱导产酶条件为20... 精氨酸脱亚胺酶(ADI)能催化L-精氨酸生成L-瓜氨酸。通过优化发酵工艺来提高E.coli BL21(DE3)-pET28a-ADI产精氨酸脱亚胺酶的酶活力。采用摇瓶发酵对E.coli BL21(DE3)-pET28a-ADI产ADI的诱导条件进行优化,结果表明,最佳诱导产酶条件为20℃诱导16 h,加入IPTG终浓度为0.4 mmol/L,ADI的酶活力达到48.01 U/mL,是优化前(35.83 U/mL)的1.34倍。在5 L发酵罐上研究了分批发酵、溶氧反馈补料发酵、指数流加补料发酵和双阶段流加补料发酵对E.coli BL21(DE3)-pET28a-ADI产ADI的影响,结果显示,双阶段补料发酵ADI的酶活力达到241.58 U/mL,是指数流加补料发酵、溶氧反馈补料发酵、分批发酵酶活力的1.08倍、1.40倍、4.18倍。采用双阶段流加补料发酵工艺,E.coli BL21(DE3)-pET28a-ADI的产酶水平有较大幅度提高。该酶催化L-精氨酸生产L-瓜氨酸的转化率为100%,反应效率为50 g/(L·h)。 展开更多
关键词 精氨酸脱亚胺酶 L-瓜氨酸 双阶段补料 发酵工艺 补料方式
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基于双酶偶联高效合成红景天苷
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作者 闫子旭 戴景莉 +4 位作者 赵科学 李小利 徐雅婷 马静波 朱富成 《生物学杂志》 北大核心 2025年第5期75-80,共6页
为实现红景天苷绿色高效制备,在前期分子改造获得糖基转移酶高效突变体TW(S129T/F168W)的基础上,构建双酶偶联一锅法催化酪醇合成红景天苷反应体系,对温度、pH、尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)、蔗糖、酪醇、金属离子和双酶比例... 为实现红景天苷绿色高效制备,在前期分子改造获得糖基转移酶高效突变体TW(S129T/F168W)的基础上,构建双酶偶联一锅法催化酪醇合成红景天苷反应体系,对温度、pH、尿苷二磷酸(uridine diphosphate,UDP)、蔗糖、酪醇、金属离子和双酶比例进行优化,在最优条件下进行分批补料反应,实现尿苷二磷酸葡萄糖(uridine diphosphate-glucose,UDPG)的循环再生,提高红景天苷产量。结果表明:双酶偶联催化酪醇合成红景天苷最佳条件为温度35℃,pH 8.0,UDP浓度0.5 mmol/L,蔗糖浓度1 mol/L,酪醇浓度5 mmol/L,Ca^(2+)浓度5 mmol/L,突变体TW∶AtSuSy的酶活比0.5∶6;在10 mL反应体系中通过分批补料策略获得10.3 g/L的红景天苷。结合分子对接探究突变体催化酪醇合成红景天苷分子机制,为绿色高效制备红景天苷奠定基础。 展开更多
关键词 糖基转移酶 红景天苷 双酶偶联 UDPG再生 分批补料
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ARTP诱变选育高产DHA裂殖壶菌及其发酵条件优化
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作者 张标城 陈淑贞 林玟静 《药物生物技术》 2025年第2期141-146,共6页
二十二碳六烯酸(DHA)是一种重要的ω-3脂肪酸,在支持人类健康方面发挥着重要作用,它能够促进大脑功能、心血管健康以及免疫系统的正常运行。在微生物合成的宿主中,裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)因其能够积累高水平的脂质而成为DHA生产... 二十二碳六烯酸(DHA)是一种重要的ω-3脂肪酸,在支持人类健康方面发挥着重要作用,它能够促进大脑功能、心血管健康以及免疫系统的正常运行。在微生物合成的宿主中,裂殖壶菌(Schizochytrium sp.)因其能够积累高水平的脂质而成为DHA生产最具潜力的工业菌株之一。然而,裂殖壶菌的细胞生物量和DHA产量直接影响生产成本,提高其生产效率仍然是一个重要挑战。传统的菌株改良方法,如化学和物理诱变,通常存在效率低、精确性不足以及使用毒性诱变剂等缺点。本研究采用常温常压等离子体(ARTP)诱变技术,这是一种高效且环境友好的方法,开发了一种稳定的高DHA产量裂殖壶菌菌株。为了提高筛选效率,在筛选过程中使用丙二酸作为抑制剂,选择快速生长且高DHA产量的突变菌株。经过两轮严格筛选,成功分离出性能优异的突变菌株Schizochytrium sp.FN7-50。为了进一步提高DHA产量并降低生产成本,系统研究了常规及复合碳源和氮源对细胞生长、油脂积累及DHA合成的影响。通过发酵条件优化,在摇瓶培养条件下,该突变株的生物量、总油脂产量和DHA产量分别达到44.32、24.52和12.72 g/L。随后,为验证其工业应用潜力,在3 L发酵罐中进行了发酵试验,FN7-50突变株的DHA滴度达到28.17 g/L,相较于母株显著提升。脂肪酸组成分析显示,DHA在总脂质中的比例较高,进一步证实该菌株适合商业化DHA生产。本研究通过ARTP诱变及发酵优化,提供了一种有效的裂殖壶菌高DHA产量菌株构建策略,为工业化DHA生产提供了一种可持续且可扩展的解决方案。 展开更多
关键词 常温常压等离子体 裂殖壶菌 二十二碳六烯酸 碳氮源 发酵条件优化 补料分批发酵
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一株法夫酵母虾青素高产菌株的生产性能 被引量:15
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作者 倪辉 洪清林 +3 位作者 肖安风 李利君 蔡慧农 苏文金 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1065-1075,共11页
为了评价虾青素高产菌株-法夫酵母JMU-MVP14的生产性能及建立虾青素高产发酵技术,通过测定糖、生物量、虾青素产量、总类胡萝卜素产量等发酵参数,用摇瓶试验对比了法夫酵母JMU-MVP14和出发菌株的差异,用7 L罐试验对比了pH值调控方式及... 为了评价虾青素高产菌株-法夫酵母JMU-MVP14的生产性能及建立虾青素高产发酵技术,通过测定糖、生物量、虾青素产量、总类胡萝卜素产量等发酵参数,用摇瓶试验对比了法夫酵母JMU-MVP14和出发菌株的差异,用7 L罐试验对比了pH值调控方式及补料培养基成分对发酵的影响,用1 m3罐试验评估了法夫酵母JMU-MVP14高密度发酵虾青素的产量水平。摇瓶发酵结果表明,法夫酵母JMU-MVP14虾青素及总类胡萝卜素的细胞产率分别达到6.01 mg/g及10.38 mg/g;7 L罐分批发酵试验结果表明,自动流加调控pH值比间歇调控pH更有利于该法夫酵母的生长及虾青素合成;法夫酵母JMU-MVP14的μmax和Ks分别为0.20 h?1及21.73 g/L,其虾青素合成的模型为部分生长关联型。7 L罐补料分批发酵试验表明,在发酵过程中只补充糖液而不补充酵母膏及玉米浆有利于高密度、高产发酵虾青素;7 L罐补料分批发酵的生物量、虾青素和总类胡萝卜素的体积产率、虾青素和总类胡萝卜素的细胞产率分别达到了32.81 g/L、155.99 mg/L、399.99 mg/L、4.94 mg/g、12.19 mg/g。1 m3罐中试补料分批发酵的生物量、虾青素和总类胡萝卜素的体积产率、虾青素和总类胡萝卜素的细胞产率分别达到85.11 g/L、279.96 mg/L、618.01 mg/L、3.29 mg/g和7.26 mg/g;法夫酵母JMV-MVP14细胞中的蛋白质、总糖、脂肪含量分别为21.54%、41.34%和34.31%。该菌株具有很强的虾青素生产能力及良好的综合利用价值,能大幅度提高虾青素的发酵生产水平。 展开更多
关键词 法夫酵母 虾青素 高产菌株 动力学 补料分批发酵
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间歇补料分批发酵提高纳他霉素产量 被引量:23
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作者 何艳玲 邬建国 +1 位作者 路福平 杜连祥 《药物生物技术》 CAS CSCD 2002年第4期224-226,共3页
对间歇补料分批发酵提高纳他霉素产量的工艺进行了研究,结果表明,在5L自动发酵罐条件下,初始葡萄糖浓度40g/L,以发酵液中的还原糖为控制指标,当还原糖降至2%以下时开始间歇补糖使葡萄糖浓度维持在2%,葡萄糖流加总量为20-25g/L,在最佳... 对间歇补料分批发酵提高纳他霉素产量的工艺进行了研究,结果表明,在5L自动发酵罐条件下,初始葡萄糖浓度40g/L,以发酵液中的还原糖为控制指标,当还原糖降至2%以下时开始间歇补糖使葡萄糖浓度维持在2%,葡萄糖流加总量为20-25g/L,在最佳的间歇补料分批发酵工艺下,使纳他霉素的产量从1.5g/L提高到2.3g/L,提高率为35%。 展开更多
关键词 间歇补料 发酵 纳他霉素 产量
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rCHO细胞在葡萄糖限制流加培养过程中的生长与代谢特性 被引量:14
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作者 高量 游磊 +1 位作者 朱明龙 谭文松 《高校化学工程学报》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第1期74-78,共5页
以调控rCHO细胞的葡萄糖代谢为主要研究目标,通过在2L生物反应器中进行的批培养和葡萄糖限制恒速流加培养的方法,考察了在培养过程中葡萄糖浓度对rCHO细胞生长、葡萄糖和谷氨酰胺消耗,以及副产物乳酸、氨和丙氨酸生成的影响。结果表明:... 以调控rCHO细胞的葡萄糖代谢为主要研究目标,通过在2L生物反应器中进行的批培养和葡萄糖限制恒速流加培养的方法,考察了在培养过程中葡萄糖浓度对rCHO细胞生长、葡萄糖和谷氨酰胺消耗,以及副产物乳酸、氨和丙氨酸生成的影响。结果表明:葡萄糖限制的流加培养过程中,活细胞密度XV达到2.35×106cells·mL-1,较批培养提高一倍;而乳酸生成大幅减少。在葡萄糖限制培养阶段,qLac和YLac/Gluc持续降低至零,而qo2/qGluc由0.7mmol·mmol-1上升至4.3mmol·mmol-1,说明更多葡萄糖进入高效释能代谢途径。同时谷氨酰胺的消耗增加,YAmm/Gln增大,YAla/Gln下降,证明谷氨酰胺的能量利用率也有所提高。 展开更多
关键词 批培养 流加培养 葡萄糖限制 CHO细胞
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