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水稻核基因组DNA的YAC克隆和鉴定 被引量:2
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作者 王春新 王金发 +2 位作者 刘文华 黄雯 刘良式 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第1期11-16,共6页
将EcoRⅠ部分消化的水稻(Oryza saliva L.)细胞核高分子量DNA电泳分部,回收大于200kb的片段,与内切酶消化过的酵母人工染色体(YAC)双质粒载体pJS97,pJS98DNA连接,转化酵母YPH252感受态原生质球,用Ura^-,TrP^-双选择培养基直接筛选转化子... 将EcoRⅠ部分消化的水稻(Oryza saliva L.)细胞核高分子量DNA电泳分部,回收大于200kb的片段,与内切酶消化过的酵母人工染色体(YAC)双质粒载体pJS97,pJS98DNA连接,转化酵母YPH252感受态原生质球,用Ura^-,TrP^-双选择培养基直接筛选转化子,已获得2000多个克隆。转化子DNA的Southern杂交显示插入片段在200~820kb范围。 展开更多
关键词 水稻 酵母人工染色体 克隆 核基因组 DNA
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抗肌萎缩蛋白基因YAC克隆的筛选和鉴定
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作者 张成 柴建华 +1 位作者 刘焯霖 顾杨洪 《中山医科大学学报》 CSCD 1994年第4期249-252,共4页
应用完整的DMDcDNA探针,从人YAC基因文库中筛选并Southern杂交鉴定5个YAC-DMD克隆,其分子量分别为900kb,800kb,650kb,450kb和450kb。这些克隆是抗肌萎缩蛋白基因特定区域DN... 应用完整的DMDcDNA探针,从人YAC基因文库中筛选并Southern杂交鉴定5个YAC-DMD克隆,其分子量分别为900kb,800kb,650kb,450kb和450kb。这些克隆是抗肌萎缩蛋白基因特定区域DNA用之不竭的源泉,为抗肌萎缩蛋白基因结构和发病机制的研究创造了条件。 展开更多
关键词 肌营养不良症 抗肌萎缩蛋白 基因 克隆 筛选
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A 4.3Mb YAC Contig in Xp11.2:Long-range Restriction Mapping and Identification of CpG Islands
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作者 Wei Yong Cai Ti Kang Yibin Wu Xiaohui Chai Jianhua (Human Genome Laboratory,Institute of Genetics,Fudan University,Shanghai 200433,P.R.China) 《High Technology Letters》 EI CAS 1995年第1期10-17,共8页
The Xp.2 region of the human X chromosome contains genes involved in a number ofinherited diseases and at least one locus that escapes X chromosome inactivation as well asabnormal methylation polymorphism.We isolated ... The Xp.2 region of the human X chromosome contains genes involved in a number ofinherited diseases and at least one locus that escapes X chromosome inactivation as well asabnormal methylation polymorphism.We isolated a series of yeast artificial chromosome(YAC)clones by hybridization screening with DNA probes localized within this region andassemblied them into a 4.3 Mb contig spanning from Xp11.21 to Xp11.23 by a combinationof Alu-PCR fingerprinting and DNA probe cross hybridization.On the basis of these over-lapping YAC clones,we have constructed the long-range restriction map of this interval andexactly placed some DNA markers.Four CpG-dense regions between ARAF1 and OATL2were identified by the long-range restriction mapping,which indicated the distribution ofgenes within this interval.It should assist in the future nucleic acid sequence analysis andnovel gene identification in this region. 展开更多
关键词 yac eontig HUMAN X CHROMOSOME yac clone
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用Alu-VectorettePCR方法从酵母人工染色体末端分离人基因组单拷贝片段 被引量:1
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作者 韩顺生 余龙 +1 位作者 邓余 赵寿元 《高技术通讯》 CAS CSCD 1995年第3期40-43,共4页
分离和克隆YAC插入片段的末端顺序是构建YAC重叠群的重要手段之一,我们采用Alu载体(Alu-vectorette)PCR方法成功地从含人淀粉样蛋白前体(APP)基因的法国人类多态研究中心(CEPH,Centred... 分离和克隆YAC插入片段的末端顺序是构建YAC重叠群的重要手段之一,我们采用Alu载体(Alu-vectorette)PCR方法成功地从含人淀粉样蛋白前体(APP)基因的法国人类多态研究中心(CEPH,Centred'EtudeduPolymorphismeHuman)YAC克隆599G11的未端分离到一个0.58kb的单拷贝片段。测序后经核普酸顺序检索分析,证明这是一个新的STS顺序。用这个片段作探针,在英国肿瘤研究基金会(ICRF)的YAC库中筛选到一个新的YAC克隆,证明这是获得contig的有效而快捷的方法。 展开更多
关键词 yac 未端克隆 PCR 聚合酶链反应 基因组
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植物育种中的RFLP技术 被引量:8
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作者 宣朴 翟世洪 《西南农业学报》 CSCD 1994年第2期106-112,共7页
RFLP是一种新型的遗传标记。在一个经过有性繁殖过程产生的分离群体中,只要利用有效的克隆探针进行检测,就能获得丰富的RFLP标记,再结合常规的遗传分析和专门的计算机软件处理,就可以构建一套在精密度上都比其它遗传连锁图... RFLP是一种新型的遗传标记。在一个经过有性繁殖过程产生的分离群体中,只要利用有效的克隆探针进行检测,就能获得丰富的RFLP标记,再结合常规的遗传分析和专门的计算机软件处理,就可以构建一套在精密度上都比其它遗传连锁图更为先进的RFLP连锁图。利用RFLP连锁图及其检测技术可以在植物基因组中对一些控制重要农艺性状的主基因以及复杂的数量性状基因的位点进行准确的标记定位,从而能有效地进行重要农艺性状的遗传分析和作物改良,野生种质资源的利用以及种间杂交等研究,大大地提高植物育种的效率。利用人工酵母染色体和染色体逐段检测技术结合高密度的RFLP连锁图,可以将一些基因产物未知的目标基因克隆出来,以提高转基国植物创造的实用性。 展开更多
关键词 遗传标记 植物育种 RFLP连锁图
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以“末端修饰法”构建人基因组的酵母人工染色体克隆
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作者 张小晓 余龙 +6 位作者 邓余 刘国仰 杨玉美 黄尚志 杨焕明 罗会元 赵寿元 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第3期163-170,共8页
采用“末端修饰法”修饰酵母人工染色体(YAC)载体与基因组插入片段的酶切末端,并优化各个实验参数,成功地得到了4000多个YAC片段的克隆群,转化率为400~500转化子/μgDNA。经随机抽样初步鉴定:80%的阳性克隆能检出人工染色体,... 采用“末端修饰法”修饰酵母人工染色体(YAC)载体与基因组插入片段的酶切末端,并优化各个实验参数,成功地得到了4000多个YAC片段的克隆群,转化率为400~500转化子/μgDNA。经随机抽样初步鉴定:80%的阳性克隆能检出人工染色体,插入片段的大小范围为150~750kb,平均为450kb。载体连接实验检测表明,末端修饰法能有效防止“共连接”的发生。 展开更多
关键词 酵母人工染色体 克隆 嵌合体 末端修饰
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