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iNOS/IRS1/AKT/GSK-3β信号通路在慢性间歇低氧致胰岛素抵抗中的作用
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作者 靳美娜 周雪利 +8 位作者 李海波 白炜 贾楚璇 高立 任丽珏 陈青宇 王瑞 李华 魏翠英 《安徽医科大学学报》 北大核心 2025年第2期210-217,共8页
目的对照观察慢性间歇低氧-复氧条件下大鼠肝脏病理改变和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、磷酸化胰岛素受体底物1丝氨酸307(p-IRS1ser 307)、磷酸化蛋白激酶B丝氨酸473(p-AKTser 473)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、糖原合酶(GS)蛋白的表... 目的对照观察慢性间歇低氧-复氧条件下大鼠肝脏病理改变和诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、磷酸化胰岛素受体底物1丝氨酸307(p-IRS1ser 307)、磷酸化蛋白激酶B丝氨酸473(p-AKTser 473)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、糖原合酶(GS)蛋白的表达水平,探讨iNOS/IRS1/AKT/GSK-3β信号通路在慢性间歇低氧所致胰岛素抵抗中的作用。方法将40只SD大鼠随机分为对照组(NC组)和实验组(CIH组),每组20只。NC组置于常氧环境12周,CIH组先予间歇低氧8周,随后恢复常氧饲养至第12周。两组均于基线、第8周、第12周分别测定空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)水平,并取肝脏组织进行病理检测和iNOS、p-IRS1ser 307、p-AKTser 473、GSK3β、GS水平测定,比较组间差异。结果基线时,两组肝脏病理及各项观察指标间差异无统计学意义;8周时,与NC组比较,CIH组肝脏病理出现肝血窦和肝细胞索排列紊乱、肝细胞水肿、细胞核变小、淋巴细胞浸润增多并可见少量脂肪空泡,FBG、FINS、胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、iNOS mRNA、p-IRS1ser 307蛋白、GSK-3β蛋白水平升高,p-AKTser 473蛋白、GS蛋白水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05);12周时,与NC组比较,CIH组未见淋巴细胞浸润,脂肪空泡增多,其它已发生的病理损伤无改善,p-AKTser 473蛋白水平升高,p-IRS1ser 307蛋白与GS蛋白水平降低,差异均有统计学意义(均P<0.05)。Pearson相关分析显示:8周时CIH组HOMA-IR与iNOS mRNA、p-IRS1ser 307蛋白、GSK-3β蛋白水平正相关(r=0.874,0.817,0.872;均P<0.05),与p-AKTser473蛋白、GS蛋白水平呈负相关(r=-0.886,-0.879;均P<0.05)。结论慢性间歇低氧可以导致肝脏病理损害,即使复氧干预也不能逆转,并可能通过上调iNOS mRNA的表达,调控IRS1/AKT/GSK-3β信号通路,从而介导胰岛素抵抗的发生。 展开更多
关键词 慢性间歇低氧-复氧 胰岛素抵抗 诱导型一氧化氮合酶 IRS1/AKT/gsk-信号通路 SD大鼠 肝脏
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基于Wnt1和GSK-3β探究金郁欢对抑郁模型小鼠的抗抑郁机制研究
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作者 张梦迪 张雨薇 +4 位作者 仲丽丽 代巧妹 杨婧 李冀 刘宏 《陕西中医》 2025年第5期579-584,共6页
目的:采用慢性温和不可预知应激法制作小鼠抑郁模型,探究金郁欢治疗抑郁小鼠所涉及的相关机制。方法:将60只ICR小鼠进行随机分配,设立以下五个组别:对照组、模型组、低剂量金郁欢处理组、高剂量金郁欢处理组以及氟西汀治疗组,每组12只... 目的:采用慢性温和不可预知应激法制作小鼠抑郁模型,探究金郁欢治疗抑郁小鼠所涉及的相关机制。方法:将60只ICR小鼠进行随机分配,设立以下五个组别:对照组、模型组、低剂量金郁欢处理组、高剂量金郁欢处理组以及氟西汀治疗组,每组12只。悬尾实验观察动物抑郁样行为;尼氏染色检测小鼠海马CA3区尼氏小体平均黑度;免疫组织化学法、Western blotting检测Wnt1和GSK-3β蛋白水平;RT-PCR检测Wnt1和GSK-3βmRNA表达情况。结果:相较于对照组,模型组小鼠在悬尾测试中的静止持续时间出现了明显的延长,尼氏小体平均黑度值降低,Wnt1、Wnt1 mRNA表达减少,GSK-3β、GSK-3βmRNA表达增多。与模型组相比,金郁欢组悬尾静止时间缩短,尼氏小体平均黑度值升高,Wnt1、Wnt1 mRNA表达增多,GSK-3β、GSK-3βmRNA表达减少。结论:金郁欢可有效改善抑郁症小鼠抑郁样行为,通过改变Wnt1、GSK-3β蛋白表达,发挥抗抑郁作用。 展开更多
关键词 抑郁症 WNT1 gsk- 乌腺金丝桃 郁金 合欢花
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MIP-3α、SAA1、GSK-3β在急性冠脉综合征患者血清中的变化及其临床意义
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作者 李光华 石晓宇 刘洋 《承德医学院学报》 2025年第3期200-204,共5页
目的分析急性冠脉综合征(ACS)患者血清巨噬细胞炎症蛋白3α(MIP-3α)、淀粉样蛋白A1(SAA1)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)水平变化及其临床意义。方法回顾性收集河南宏力医院2023年2月~2024年2月收治的162例ACS患者资料为研究对象,并且... 目的分析急性冠脉综合征(ACS)患者血清巨噬细胞炎症蛋白3α(MIP-3α)、淀粉样蛋白A1(SAA1)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)水平变化及其临床意义。方法回顾性收集河南宏力医院2023年2月~2024年2月收治的162例ACS患者资料为研究对象,并且根据Gensini评分将患者按冠状动脉狭窄的程度分为重度组(n=50)、中度组(n=46)、轻度组(n=66),另选取同期55例健康体检者为健康组;对比4组入院时血清MIP-3α、SAA1、GSK-3β水平,并进行相关性分析;对比不同预后患者入院时血清各指标水平,并分析对患者预后的预测价值。结果4组入院时血清MIP-3α、SAA1、GSK-3β水平比较;重度组>中度组>轻度组>健康组(P<0.05);入院时血清MIP-3α、SAA1、GSK-3β均与Gensini评分呈正相关(P<0.05);预后不良患者入院时MIP-3α、SAA1、GSK-3β水平均高于预后良好患者(P<0.05);入院时血清MIP-3α、SAA1、GSK-3β水平联合检测对预测患者发生预后不良的AUC为0.805,均高于各指标单独诊断(P<0.05)。结论ACS患者血清MIP-3α、SAA1、GSK-3β水平升高,并与冠脉病变程度及预后有关,三者均可作为反应ACS病情严重程度的标志物,对预测患者预后具有重要价值。 展开更多
关键词 MIP-3Α SAA1 gsk- 急性冠脉综合征
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酸枣仁汤对抑郁模型大鼠海马DKK-1与β-catenin、GSK-3β的影响 被引量:12
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作者 张浩 孙田昊泽 +4 位作者 张策 刘沐垚 张小芳 王超颖 田旭升 《中国中医基础医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2022年第4期536-539,657,共5页
目的:探讨酸枣仁汤的抗抑郁作用及机制。方法:48只大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、酸枣仁汤低、中、高剂量组及氟西汀组,采用慢性轻度不可预见性应激制备抑郁大鼠模型,酸枣仁汤与氟西汀连续治疗28 d后观察各组大鼠体质量、糖水... 目的:探讨酸枣仁汤的抗抑郁作用及机制。方法:48只大鼠按随机数字表法分为空白组、模型组、酸枣仁汤低、中、高剂量组及氟西汀组,采用慢性轻度不可预见性应激制备抑郁大鼠模型,酸枣仁汤与氟西汀连续治疗28 d后观察各组大鼠体质量、糖水消耗、旷场实验得分,免疫组化法检测海马中DKK-1蛋白表达,荧光定量PCR法检测海马组织中β-catenin及GSK-3β的mRNA表达。结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量、糖水偏爱百分比和旷场试验得分均显著降低(P<0.01),海马区DKK-1蛋白表达明显上升(P<0.01),GSK-3β的mRNA表达明显下降(P<0.01);与模型组比较,酸枣仁汤中、高剂量组、氟西汀组较模型组体质量、糖水偏爱百分比和旷场试验得分均明显升高(P<0.05,P<0.01),酸枣仁汤低、中、高剂量组及氟西汀组大鼠海马中DKK-1蛋白表达显著下降(P<0.01),酸枣仁汤高剂量组大鼠海马中β-catenin、GSK-3βmRNA表达明显上升(P<0.05,P<0.01)。结论:酸枣仁汤能够调节抑郁模型大鼠海马组织中DKK-1蛋白与β-catenin、GSK-3βmRNA表达,其抗抑郁机制可能与对海马神经元的保护作用有关。 展开更多
关键词 酸枣仁汤 抑郁症 DKK-1 Β-CATENIN gsk-
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Akt/GSK-3β/Snail通路在TGF-β_1诱导A549/DDP细胞上皮间质转化中的作用 被引量:15
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作者 于丹 王莹 +1 位作者 高原 刘春英 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第6期1124-1128,共5页
目的:通过观察转化生长因子β_1(TGF-β_1)诱导前后Akt/GSK-3β/Snail信号通路相关分子的表达情况,探讨A549/DDP细胞发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的分子机制。方法:TGF-β_1(5μg/L)作用48 h,观察A549/... 目的:通过观察转化生长因子β_1(TGF-β_1)诱导前后Akt/GSK-3β/Snail信号通路相关分子的表达情况,探讨A549/DDP细胞发生上皮-间充质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的分子机制。方法:TGF-β_1(5μg/L)作用48 h,观察A549/DDP细胞的形态变化,并测定EMT标志物上皮型钙黏蛋白(E-cadherin)和神经型钙黏蛋白(N-cadherin)的表达情况,评估TGF-β_1是否成功诱导A549/DDP细胞发生EMT。进一步将A549/DDP细胞分为TGF-β_1(+)组、TGF-β_1(-)组和LY294002组,应用Western blot法检测各组Akt/GSK-3β/Snail通路相关分子Akt、p-Akt、GSK-3β、p-GSK-3βSer9和Snail的蛋白水平。结果:形态学观察可见TGF-β_1(+)组的细胞变得更加狭长,呈纺锤形,细胞间较为疏散,形态与间充质细胞相似。与TGF-β_1(-)组比较,TGF-β_1(+)组E-cadherin蛋白表达下调,N-cadherin蛋白表达上调(P<0.05);各组间Akt和GSK-3β的蛋白表达水平并无明显差别,TGF-β_1(+)组的p-Akt、p-GSK-3βSer9和Snail蛋白水平较TGF-β_1(-)组明显增强(P<0.05);PI3K抑制剂LY294002与TGF-β_1同时刺激细胞后,p-Akt、p-GSK-3βSer9和Snail的蛋白水平较TGF-β_1(+)组下调(P<0.05)。结论:TGF-β_1干预Akt/GSK-3β/Snail信号通路,促进Akt和GSK-3β的磷酸化,提高Snail的表达水平,诱导A549/DDP细胞发生EMT。 展开更多
关键词 转化生长因子β1 肺癌 上皮-间充质转化 Akt/gsk-/Snail信号通路
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胃癌前病变大鼠胃组织GSK-3β、β-catenin及Cyclin D1的表达及意义 被引量:7
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作者 陈婉珍 严展鹏 +2 位作者 刘宇旻 朱方石 张秀华 《辽宁中医杂志》 CAS 2018年第6期1278-1281,I0003,共5页
目的:探讨胃癌前病变大鼠胃组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白GSK-3β、β-catenin及Cyclin D1的表达及其意义。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组10只和模型组40只,正常组予自由饮用清洁水,进食普通颗粒饲料;模型组予150μg/m L... 目的:探讨胃癌前病变大鼠胃组织中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白GSK-3β、β-catenin及Cyclin D1的表达及其意义。方法:将50只SD大鼠随机分为正常组10只和模型组40只,正常组予自由饮用清洁水,进食普通颗粒饲料;模型组予150μg/m L的N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍(MNNG)自由饮用,同时自由进食含0.03%盐酸雷尼替丁的颗粒饲料,每4周各处死5只模型组大鼠观察造模情况,28周建立PLGC模型后处死全部大鼠。观察大鼠一般情况(体重、进食量及饮水量)及胃组织大体形态,H&E染色观察胃黏膜病理形态,免疫组织化学方法观察胃组织GSK-3β、β-catenin及Cyclin D1蛋白表达情况。结果:(1)大鼠体重及进食量、饮水量比较:与正常组比较,模型组大鼠体重、日进食量及日饮水量均有减少,具有统计学意义(P〈0.05或P〈0.01)。(2)病理形态学变化:正常组大鼠胃黏膜腺体形状规则、排列紧密,层次完整;模型组大鼠胃黏膜变薄,腺体减少,胃小凹粗大,或可见潘氏细胞,黏膜肌层增厚。(3)GSK-3β、β-catenin及Cyclin D1等蛋白表达情况:模型组GSK-3β于细胞质表达呈浅棕色或不着色,与正常组比较,阳性细胞平均光密度降低(P〈0.05);模型组β-catenin于细胞质及细胞核呈棕色或深棕褐色、Cyclin D1于细胞核表达呈深棕褐色颗粒状,与正常组比较,阳性细胞平均光密度较正常组明显升高(P〈0.01)。结论:PLGC发病与Wnt/β-catenin信号通路相关的异常激活,GSK-3β、β-catenin及Cyclin D1蛋白的异常表达有关。 展开更多
关键词 胃癌前病变 大鼠模型 gsk- Β-CATENIN CYCLIN D1
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补肾活血复方含药血清对大鼠成骨细胞磷酸化GSK-3β、p38MAPK及ERK1/2蛋白的影响 被引量:5
7
作者 王攀攀 朱晓峰 +1 位作者 杨丽 张荣华 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期1381-1383,共3页
目的:观察补肾活血复方含药血清对大鼠成骨细胞磷酸化糖原合成激酶3β(GSK-3β)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)蛋白的作用。方法:3月龄SD雌性大鼠灌胃制备空白血清和含药血清,并分离培养1日龄新生... 目的:观察补肾活血复方含药血清对大鼠成骨细胞磷酸化糖原合成激酶3β(GSK-3β)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 MAPK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)蛋白的作用。方法:3月龄SD雌性大鼠灌胃制备空白血清和含药血清,并分离培养1日龄新生鼠颅骨成骨细胞。实验分为空白血清组和含药血清组,分别采用MTT、ELISA、Western-blot等方法检测两组成骨细胞的增殖、ALP和BGP的分泌及磷酸化GSK-3β、p38 MAPK和ERK1/2蛋白的变化。结果:与空白血清组相比,含药血清组可明显促进成骨细胞的增殖、ALP和BGP的分泌,并促进胞内磷酸化p38 MAPK和ERK1/2蛋白的表达,对磷酸化GSK-3β蛋白的表达未见明显影响。结论:补肾活血复方含药血清可促进大鼠成骨细胞的增殖和分化,提高p38 MAPK和ERK1/2蛋白磷酸化水平。 展开更多
关键词 补肾活血复方 成骨细胞 gsk- P38MAPK ERK1/2
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在补脾益气法调节PKB/GSK-3β信号通路缓解糖尿病脑病中沉默LncRNA MALAT1的研究 被引量:9
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作者 冯晓帆 王艳杰 +2 位作者 刘羽茜 王靖宇 柳春 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2022年第7期1597-1601,共5页
目的 探讨归脾汤对糖尿病脑病作用的分子机制及沉默LncRNA MALAT1后产生的影响。方法 通过长期高脂饲料喂养及STZ注射建立并筛选糖尿病脑病大鼠模型;应用氧化酶法测大鼠血糖值,ELISA法检测胰岛素水平并计算胰岛素敏感指数,RT-PCR法检测... 目的 探讨归脾汤对糖尿病脑病作用的分子机制及沉默LncRNA MALAT1后产生的影响。方法 通过长期高脂饲料喂养及STZ注射建立并筛选糖尿病脑病大鼠模型;应用氧化酶法测大鼠血糖值,ELISA法检测胰岛素水平并计算胰岛素敏感指数,RT-PCR法检测各组大鼠海马中GSK-3β和PKBβmRNA相对表达;应用Western Blot法检测各组大鼠海马组织中GSK-3β、PKB和APP蛋白的相对表达。结果 在药物治疗4周后检测各组大鼠的指标,与模型组比较,M归脾汤组、归脾汤组和西药组大鼠的血糖水平显著降低(P<0.05)、胰岛素敏感指数明显升高(P<0.05);与归脾汤组比较,M归脾汤组大鼠血糖水平显著降低(P<0.05)、胰岛素敏感指数明显升高(P<0.05)。以上结果说明归脾汤在降低糖尿病脑病大鼠血糖水平方面有积极作用,并且能够使沉默LncRNA MALAT1的糖尿病脑病大鼠进一步降低血糖水平。与模型组比较,M归脾汤组、归脾汤组和西药组大鼠海马组织中的GSK-3βmRNA的相对表达显著降低(P<0.05)、PKBβmRNA的相对表达明显升高(P<0.05);与归脾汤组比较,M归脾汤组大鼠海马组织中的GSK-3βmRNA的相对表达显著降低(P<0.05)、PKBβmRNA的相对表达明显升高(P<0.05)。以上结果说明归脾汤在降低糖尿病脑病大鼠海马组织中GSK-3β的mRNA表达方面有积极作用。与模型组比较,M归脾汤组、归脾汤组和西药组大鼠海马组织中的GSK-3β蛋白的相对表达显著降低(P<0.05)、PKB蛋白的相对表达明显升高(P<0.05)、APP蛋白的相对表达显著降低(P<0.05)。与归脾汤组比较,M归脾汤组大鼠海马组织中的APP蛋白的相对表达显著降低(P<0.05)。结论 归脾汤能够缓解糖尿病脑病大鼠模型的胰岛素抵抗情况,这种作用可能是通过调节PKB/GSK-3β信号通路来实现的,并且在沉默大鼠的LncRNA MALAT1后能够使归脾汤的作用效果进一步加强,可为临床上缓解糖尿病脑病提供新的思路。 展开更多
关键词 糖尿病脑病 归脾汤 肺腺癌转移相关转录本1 gsk- PKB
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中药复方糖耐康含药血清对3T3-L1脂肪细胞GSK-3β及Glu-T4的影响 被引量:3
9
作者 王芬 何华亮 +3 位作者 王磊 刘铜华 秦灵灵 樊怡欣 《时珍国医国药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第10期2388-2391,共4页
目的观察中药复方糖耐康含药血清对3T3-L1脂肪细胞胰岛素信号转导途径中糖原合成激酶(Glycogen synthase kinase-3 GSK-3β)蛋白及葡萄糖转运子4(Glucose Transport 4 Glu T-4)mRNA表达的影响。方法将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂... 目的观察中药复方糖耐康含药血清对3T3-L1脂肪细胞胰岛素信号转导途径中糖原合成激酶(Glycogen synthase kinase-3 GSK-3β)蛋白及葡萄糖转运子4(Glucose Transport 4 Glu T-4)mRNA表达的影响。方法将3T3-L1前脂肪细胞诱导分化为成熟脂肪细胞(油红"O"染色鉴定),用胰岛素联合地塞米松造成胰岛素抵抗细胞模型。同时制备糖耐康、罗格列酮及空白含药血清,对细胞进行分组,分为正常组(3T3-L1脂肪细胞)、模型组、空白血清组、罗格列酮含药血清组(含8%罗格列酮血清)、中药高(含12%中药血清)、中(含8%中药血清)、低(含4%中药血清)7个剂量组。作用48h。后提取蛋白和RNA以检测。用半定量RT-PCR法测定抗性3T3-L1脂肪细胞中Glu T-4 mRNA的表达。免疫印迹杂交法(Western blot)测定GSK-3的蛋白表达含量。结果正常组各项指标表达量最高。与模型组比较,各给药组中蛋白及基因表达量均有一定程度上调,且随着中药含药血清浓度升高上调程度升高,西药血清组作用接近中药高组或中组。结论糖耐康含药血清可能通过上调胰岛素信号转导受体后途径中Glu T-4 mRNA,下调GSK-3β蛋白表达量等,从而成为糖耐康改善胰岛素抵抗状态的作用机制之一。 展开更多
关键词 糖耐康含药血清 3T3-L1脂肪细胞 gsk- Glu-T4
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Aβ_(25~35)和人参皂苷Rb1对鼠神经干细胞分化后GSK-3β、CDK-5和PP2A表达的影响 被引量:3
10
作者 赵庆霞 鄢文海 +2 位作者 韩雪飞 许燕 邢莹 《中国应用生理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期187-190,I0003,共5页
目的:研究大鼠神经干细胞诱导分化后GSK-3β、CDK-5和PP2A的表达以及Aβ25~35和人参皂苷Rb1的调节作用。方法:取新生SD大鼠的海马组织体外培养获得NSCs,诱导第3代的NSCs向神经细胞分化1周后,免疫荧光细胞化学染色检测活化型GSK-3β(pTy... 目的:研究大鼠神经干细胞诱导分化后GSK-3β、CDK-5和PP2A的表达以及Aβ25~35和人参皂苷Rb1的调节作用。方法:取新生SD大鼠的海马组织体外培养获得NSCs,诱导第3代的NSCs向神经细胞分化1周后,免疫荧光细胞化学染色检测活化型GSK-3β(pTyr279,216)和蛋白磷酸酯酶-2A(PP2A)的表达及Aβ25~35和人参皂苷Rb1对它们的影响;RT-PCR分析糖原合成激酶-3β(GSK-3β)、细胞周期依赖性蛋白激酶-5(CDK-5)和蛋白磷酸酯酶-2A(PP2A)的mRNA表达以及Aβ25~35和人参皂苷Rb1的影响。结果:免疫荧光细胞化学染色显示:NSCs诱导分化1周后有活化型GSK-3β(pTyr279,216)和PP2A的表达,Aβ25~35能增强GSK-3β(pTyr279,216)的表达同时抑制PP2A的表达,而人参皂苷Rb1则能逆转Aβ25~35的作用;RT-PCR检测发现:NSCs诱导分化1周后表达GSK-3β、CDK-5和PP2A的mRNA,使用Aβ25~35处理后GSK-3β、CDK-5的表达增强而PP2A的表达减弱,用人参皂苷Rb1预处理神经干细胞后Aβ25~35的作用受到抑制。结论:体外培养的神经干细胞分化后表达GSK-3β、CDK-5和PP2A,并受Aβ25~35和人参皂苷Rb1的调节,提示在体外由神经干细胞分化的细胞具备正常神经细胞的蛋白磷酸化调节系统。 展开更多
关键词 NSCS gsk- CDK-5 PP2A 人参皂苷RB1 AΒ25~35
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nm23-H_1基因转染能上调人肺癌细胞株L9981中GSK-3β激酶活性 被引量:3
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作者 付军科 周清华 +7 位作者 朱文 王艳萍 陈小禾 车国卫 聂强 李定彪 刘伦旭 李印 《中国肺癌杂志》 CAS 2004年第2期81-85,共5页
目的 探讨转移抑制基因nm2 3 H1对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中Wnt信号传导激酶GSK 3 β的表达量和活性的影响 ,为全面阐明nm2 3 H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依据。方法 将稳定转染nm 2 3 H1基因的... 目的 探讨转移抑制基因nm2 3 H1对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中Wnt信号传导激酶GSK 3 β的表达量和活性的影响 ,为全面阐明nm2 3 H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依据。方法 将稳定转染nm 2 3 H1基因的人高转移大细胞肺癌细胞株L9981 nm2 3 H1、原代细胞株L9981和空载体转染细胞株L9981 pLXSN培养传代 ,应用Westernblot分别检测应用 2 0mmol/LLiCl处理前后三个肺癌细胞株胞浆、胞核中GSK 3 β的表达水平 ,应用免疫共沉淀同位素闪烁计数法测定上述肺癌细胞株胞浆和胞核中的GSK 3 β激酶活性。 结果  ( 1)L9981 nm2 3 H1胞浆和胞核中GSK 3 β蛋白表达量分别为( 63 41± 5 41)和 ( 4 3 5 6± 490 )IOD ,L9981 pLXSN分别为 ( 3 613± 3 83 )和 ( 70 5± 75 )IOD ,L9981分别为 ( 373 6± 2 98)和 ( 65 7± 5 7)IOD。三个细胞株间胞浆和胞核中GSK 3 β表达量均有非常显著差异 (P <0 .0 1) ;两两比较 :L9981 nm2 3 H1胞浆和胞核GSK 3 β表达水平均显著高于L9981 pLXSN和L9981(P <0 .0 1) ,而后两者之间比较均无显著性差异 (P >0 .0 5 )。 ( 2 )L9981 nm2 3 H1胞浆和胞核GSK 3 β激酶活性分别为 ( 2 895 5±2 5 0 9)和 ( 92 47± 92 4)CPM ,L9981 pLXSN分别为 ( 112 41± 展开更多
关键词 nm23-H1 基因转染 肺癌 癌细胞 L9981 gsk- 信号传导激酶活性 转移抑制基因
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GSK-3β、DKK-1、β-catenin在近端胃癌中的表达及临床意义 被引量:3
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作者 杨学丽 路三军 +4 位作者 魏娉 桂红武 安欣 姜琳娜 尹峰 《现代中西医结合杂志》 CAS 2015年第24期2646-2648,2658,共4页
目的探讨GSK-3β、DKK-1、β-catenin在近端胃癌中的表达情况及其临床意义。方法采用免疫组织化学S-P方法分别检测79例患者近端胃癌组织、癌旁组织及正常胃黏膜组织的GSK-3β、DKK-1、β-catenin表达情况,并分析其临床意义。结果 GSK-3... 目的探讨GSK-3β、DKK-1、β-catenin在近端胃癌中的表达情况及其临床意义。方法采用免疫组织化学S-P方法分别检测79例患者近端胃癌组织、癌旁组织及正常胃黏膜组织的GSK-3β、DKK-1、β-catenin表达情况,并分析其临床意义。结果 GSK-3β在近端胃癌组织的表达比癌旁组织及正常胃黏膜组织表达量明显降低(P均<0.05),GSK-3β阳性表达率与TNM分期、分化程度、肌层浸润程度、淋巴结转移显著相关(P均<0.05)。DKK-1在近端胃癌的表达比癌旁组织及正常胃黏膜的表达量均明显升高(P均<0.05),DKK-1阳性表达率与TNM分期、分化程度、肌层浸润程度显著相关(P均<0.05)。β-catenin在近端胃癌中细胞质及细胞核的异常表达比癌旁组织及正常胃黏膜的异常表达均明显升高(P均<0.05)。GSK-3β的表达与DKK-1的表达及β-catenin的异常表达呈负相关(P均<0.05)。结论GSK-3β、DKK-1、β-catenin在近端胃癌的发展、侵袭和转移中起重要作用,可作为近端胃癌诊断和判断预后的指标。 展开更多
关键词 近端胃癌 gsk- DKK-1 Β-CATENIN
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nm23-H_1基因点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981的GSK-3β激酶活性的影响 被引量:3
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作者 马力 周清华 +7 位作者 朱文 朱大兴 杨雪琴 王艳萍 陈小禾 张敏 高利伟 赵颖 《中国肺癌杂志》 CAS 2006年第1期30-34,共5页
背景与目的我们的前期研究结果表明nm23-H1基因的肺癌转移抑制作用可能与上调Wnt信号通路中关键激酶GSK-3β的活性、进而抑制Wnt信号通路相关。本研究的目的是探讨nm23-H1点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中胞质和胞核的GSK-3β... 背景与目的我们的前期研究结果表明nm23-H1基因的肺癌转移抑制作用可能与上调Wnt信号通路中关键激酶GSK-3β的活性、进而抑制Wnt信号通路相关。本研究的目的是探讨nm23-H1点突变对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981中胞质和胞核的GSK-3β激酶活性的影响,为阐明nm23-H1基因调控肺癌转移相关信号传导通路的分子机制提供实验依据。方法将原代人低转移大细胞肺癌细胞株NL9980、原代人高转移大细胞肺癌细胞株L9981、空载体转染细胞株L9981-pEGFP、稳定转染nm23-H1基因的细胞株L9981-nm23-H1-pEGFP以及稳定转染在44、96、118、120号位点发生突变后的nm23-H1基因的转基因肺癌细胞株L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1H118F-pEGFP和L9981-nm23-H1S120G-pEGFP作为研究对象,应用免疫共沉淀同位素闪烁计数法测定上述肺癌细胞株胞质和胞核中的GSK-3β激酶活性。结果nm23-H1基因发生点突变后,所有转基因肺癌细胞株细胞胞质和胞核中的GSK-3β活性均较突变前有所下降。L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP、L9981-nm23-H1H118F-pEGFP、L9981-nm23-H1S120G-pEGFP分别与L9981-nm23-H1-pEGFP比较,胞质与胞核中GSK-3β激酶活性均存在显著性差异(P<0.05),其中L9981-nm23-H1P96S-pEGFP与L9981-nm23-H1-pEGFP胞质中GSK-3β活性存在极显著差异(P<0.01),L9981-nm23-H1S44A-pEGFP、L9981-nm23-H1P96S-pEGFP和L9981-nm23-H1H118F-pEGFP与L9981-nm23-H1-pEGFP的胞核中GSK-3β活性存在极显著差异(P<0.01)。结论①nm23-H1基因突变能显著影响其对人高转移大细胞肺癌细胞株L9981胞质和胞核中GSK-3β激酶活性的调控作用;②nm23-H1基因可能通过调控L9981中GSK-3β激酶活性来抑制L9981细胞株中Wnt信号传导。 展开更多
关键词 人高转移大细胞肺癌细胞株L9981 NM23-H1 基因 Wnt信号通路 gsk- 点突变
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“中风1号”对急性脑出血大鼠PI3K/Akt信号转导通路、GSK-3β蛋白表达的影响 被引量:3
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作者 梁群 杨洋 +2 位作者 李帅 潘郭海容 朱永志 《中国中医急症》 2022年第4期565-567,572,共4页
目的探讨“中风1号”通过激活PI3K/Akt信号通路,抑制GSK-3β蛋白表达,减少神经细胞凋亡、减轻脑出血后神经功能损伤机制。方法将SD雄性大鼠40只随机分为假手术组、模型组、中风1号组、甘露醇组,每组10只。评估大鼠术后24 h、3 d、7 d神... 目的探讨“中风1号”通过激活PI3K/Akt信号通路,抑制GSK-3β蛋白表达,减少神经细胞凋亡、减轻脑出血后神经功能损伤机制。方法将SD雄性大鼠40只随机分为假手术组、模型组、中风1号组、甘露醇组,每组10只。评估大鼠术后24 h、3 d、7 d神经功能评分,Western blotting检测PI3K、Akt、GSK-3β蛋白表达水平。结果各组大鼠术后24 h(给药前),模型组与假手术组比较(P<0.05),造模成功。术后3、7 d,模型组与假手术组比较神经功能评分明显升高(P<0.05),中风1号组、甘露醇组分别与模型组比较,评分明显降低(P<0.05)。与假手术组相比,模型组PI3K、Akt蛋白表达显著降低(P<0.05),GSK-3β蛋白表达显著增高(P<0.05)。与模型组相比,中风1号组、甘露醇组PI3K、Akt蛋白表达均显著上升(P<0.05),GSK-3β蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论“中风1号”可减轻脑出血后神经细胞凋亡、改善脑出血后神经功能损伤,其机制与PI3K/Akt信号通路、GSK-3β蛋白表达有关。 展开更多
关键词 脑出血 中风1 神经功能 PI3K/AKT gsk- 大鼠
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亚砷酸钠对Hacat细胞GSK-3β及CyclinD1表达的影响 被引量:4
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作者 胡楠楠 李昕 《中国地方病防治》 北大核心 2015年第2期81-83,共3页
目的探讨亚砷酸钠对人上皮角质形成细胞系(Hacat细胞)PI3K/AKT信号通路中细胞周期相关分子GSK-3β、CyclinD1的影响。方法将人Hacat细胞暴露于浓度分别为0、10、25、50、100μmol/L的亚砷酸钠6 h,采用Western Blot法检测细胞总蛋白的GS... 目的探讨亚砷酸钠对人上皮角质形成细胞系(Hacat细胞)PI3K/AKT信号通路中细胞周期相关分子GSK-3β、CyclinD1的影响。方法将人Hacat细胞暴露于浓度分别为0、10、25、50、100μmol/L的亚砷酸钠6 h,采用Western Blot法检测细胞总蛋白的GSK-3β,磷酸化GSK-3β(p-GSK-3β),CyclinD1和磷酸化CyclinD1(p-CyclinD1)的蛋白表达水平。结果与对照组比较,10、25、50、100μmol/L染砷组总蛋白中p-GSK-3β和CyclinD1蛋白表达水平均显著增高(P<0.05),而p-CyclinD1蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论亚砷酸钠可影响Hacat细胞中的GSK-3β分子,使其磷酸化失活,进而失去对细胞周期相关蛋白CyclinD1的磷酸化作用,从而促进CyclinD1的表达。 展开更多
关键词 亚砷酸钠 HACAT gsk- CYCLIND1
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GSK-3β与cyclin D1在糖尿病版纳微型猪肾脏组织中的表达及意义 被引量:1
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作者 张素君 肖国华 +4 位作者 余坚 尹卫东 张亚丽 王月婷 王宗保 《中国现代医生》 2012年第35期1-4,6,共5页
目的在建立版纳微型猪糖尿病胰岛素抵抗的模型基础上,观察其肾脏病变及GSK-3β、cyclin D1的表达变化,探讨二者之间可能存在的作用关系。方法高糖高脂饮食加低剂量STZ诱导版纳微型猪糖尿病模型,观察其血糖、胰岛素、肾脏组织结构病理变... 目的在建立版纳微型猪糖尿病胰岛素抵抗的模型基础上,观察其肾脏病变及GSK-3β、cyclin D1的表达变化,探讨二者之间可能存在的作用关系。方法高糖高脂饮食加低剂量STZ诱导版纳微型猪糖尿病模型,观察其血糖、胰岛素、肾脏组织结构病理变化,Realtime-PCR检测肾脏组织GSK-3β、cyclin D1 mRNA含量变化,研究二者相关性,探讨其作用机制。结果喂养12个月后,实验组较之对照组出现空腹血糖明显升高(P<0.01),阶段性低胰岛素血症,肾小管上皮细胞水肿,间质胶原纤维增生,部分肾小球囊腔增大,内部细胞数目增加,肾小球肥大,基底膜增厚,GSK-3β、cyclin D1mRNA肾脏组织明显上调。结论高糖高脂饮食加低剂量注射STZ构建了版纳微型猪糖尿病胰岛素抵抗模型,上调肾脏组织GSK-3β、cyclin D1表达,二者表达正相关。 展开更多
关键词 糖尿病 微型猪 gsk- cyclinD1
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人参皂苷Rb1通过AKT/GSK-3β/NFAT途径抑制硫化砷诱导的神经细胞PC12毒性 被引量:6
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作者 邓立军 吕育玲 吴丹 《中国动脉硬化杂志》 CAS 2019年第8期667-673,共7页
目的探索人参皂苷Rb1抑制硫化砷诱导的神经细胞--嗜铬细胞瘤细胞(PC12)毒性的作用机制。方法以PC12细胞为研究对象,加入0、2.5、5、10、15、20、50μmol/L硫化砷后观察细胞的损伤情况,采用噻唑蓝法检测细胞活性。在硫化砷损伤的PC12细... 目的探索人参皂苷Rb1抑制硫化砷诱导的神经细胞--嗜铬细胞瘤细胞(PC12)毒性的作用机制。方法以PC12细胞为研究对象,加入0、2.5、5、10、15、20、50μmol/L硫化砷后观察细胞的损伤情况,采用噻唑蓝法检测细胞活性。在硫化砷损伤的PC12细胞培养基内加入5、10、20μmol/L人参皂苷Rb1,采用磺酰罗丹明B法检测其对细胞增殖能力的影响;用流式细胞术检测其对细胞凋亡的影响;ATP试剂盒荧光素酶法测定其对细胞内ATP含量的影响;2′,7′-二氯四氟乙烷双乙酸盐探针染色法检测其对细胞内活性氧(ROS)含量的影响。Western blot检测PC12细胞中蛋白激酶B(AKT)、糖原合成酶激酶3(GSK-3β)、活化T细胞核因子(NFAT)、细胞色素C(Cyt C)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤2蛋白(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的蛋白表达。结果不同浓度硫化砷对PC12细胞有损伤,且随着浓度升高及作用时间延长,细胞损伤越严重;硫化砷可抑制PC12细胞的增殖。人参皂苷Rb1对硫化砷损伤的PC12细胞有保护作用,可有效抑制硫化砷诱导的PC12细胞的凋亡。硫化砷可降低PC12细胞内的ATP含量,增加ROS的含量;人参皂苷Rb1可增加ATP的含量,降低ROS的含量,加强细胞代谢。硫化砷刺激PC12细胞后细胞内p-AKT、p-GSK-3β、NFAT-c3、Bcl-2、Cleaved Caspase-3蛋白的表达显著降低,Caspase-3与Bax蛋白的表达明显提高,线粒体内Cyt C表达明显提高(P<0.01);人参皂苷Rb1干预后,细胞内p-AKT、p-GSK-3β、NFAT-c3、Bcl-2、Cleaved Caspase-3蛋白表达明显升高,Caspase-3与Bax蛋白的表达明显降低,线粒体内Cyt C表达明显降低(P<0.01)。结论人参皂苷Rb1可抑制硫化砷诱导的PC12细胞凋亡,从而保护神经细胞,其可能是通过调节AKT/GSK-3β/NFAT信号通路来实现的。 展开更多
关键词 人参皂苷RB1 硫化砷 嗜铬细胞瘤细胞 AKT/gsk-/NFAT途径
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DKK-1、GSK-3β、PGSK-3β在宫颈鳞癌组织中的表达及临床意义 被引量:1
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作者 黄裕 姜青明 +1 位作者 唐郢 王冬 《实用癌症杂志》 2014年第8期908-911,共4页
目的探讨DKK-1、GSK-3β、PGSK-3β在宫颈鳞癌组织中的表达及与其发生发展、临床病理特征的关系。方法收集病理组织标本:包括慢性宫颈炎25例,宫颈上皮内瘤变29例,宫颈鳞癌41例,采用免疫组织化学染色法分别检测其中DKK-1、GSK-3β、PGSK-... 目的探讨DKK-1、GSK-3β、PGSK-3β在宫颈鳞癌组织中的表达及与其发生发展、临床病理特征的关系。方法收集病理组织标本:包括慢性宫颈炎25例,宫颈上皮内瘤变29例,宫颈鳞癌41例,采用免疫组织化学染色法分别检测其中DKK-1、GSK-3β、PGSK-3β的表达情况。结果慢性宫颈炎、宫颈上皮内瘤变组织中DKK-1阳性表达率均明显高于宫颈鳞癌(P<0.05)。慢性宫颈炎组织中GSK-3β阳性表达率明显高于宫颈癌组织(P<0.05),而PGSK-3β阳性表达率低于宫颈癌组织(P<0.05);DKK-1、PGSK-3β阳性表达与宫颈鳞癌组织分化、FIGO临床分期及有无淋巴结转移显著相关(P<0.05);PGSK-3β蛋白表达量CINⅠ、CINⅡ~Ⅲ及宫颈鳞癌组织明显高于慢性宫颈炎组织(P<0.05);CINⅠ中PGSK-3β蛋白表达量明显高于宫颈癌组织(P<0.05)。结论 DKK-1、GSK-3β、PGSK-3β表达与宫颈鳞癌的发生、发展密切相关。 展开更多
关键词 DKK-1蛋白 gsk-蛋白 Pgsk-蛋白 宫颈鳞癌
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黄地安消胶囊调控IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路改善HepG2细胞胰岛素抵抗 被引量:2
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作者 高家荣 郭明飞 +1 位作者 单莉 魏良兵 《包头医学院学报》 CAS 2021年第7期48-54,共7页
目的:观察黄地安消胶囊改善HepG2细胞胰岛素抵抗的分子生物学机制。方法:MTT实验分离出黄地安消胶囊含药血清最佳作用浓度和作用时间,免疫荧光技术检测p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β的表达情况;RT-PCR技术检测细胞中IRS-1、PI3K、Akt... 目的:观察黄地安消胶囊改善HepG2细胞胰岛素抵抗的分子生物学机制。方法:MTT实验分离出黄地安消胶囊含药血清最佳作用浓度和作用时间,免疫荧光技术检测p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β的表达情况;RT-PCR技术检测细胞中IRS-1、PI3K、Akt、GSK-3β的mRNA表达,Western blot技术检测细胞中p-IRS-1、PI3K、p-Akt、p-GSK-3β的相对表达。结果:与正常组相比,模型组中IRS-1、PI3K、Akt表达降低(P<0.05);GSK-3β表达升高(P<0.05);与模型组相比,黄地安消胶囊含药血清组IRS-1、PI3K、Akt升高(P<0.05),GSK-3β表达降低(P<0.05)。结论:黄地安消胶囊可能通过调控IRS-1/PI3K/Akt/GSK-3β信号通路调节蛋白活性,促进糖原合成,降低血糖,改善胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 黄地安消胶囊 胰岛素抵抗 HEPG2细胞 IRS-1/PI3K/Akt/gsk-
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GSK-3β、PTEN、PLK1在儿童急性髓系白血病中的表达及意义 被引量:3
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作者 王妍 徐酉华 +3 位作者 胡艳妮 孙艳辉 金鑫 杨桂存 《重庆医学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第28期3347-3349,共3页
目的探讨糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、与张力蛋白同源的位于第10号染色体磷酸酶基因(PTEN)、Polo样激酶1(PLK1)在儿童急性髓系白血病(AML)中的表达及意义。方法 RT-PCR方法检测实验组(33例初诊AML患儿的骨髓)和对照组(10例正常骨髓)骨... 目的探讨糖原合酶激酶-3β(GSK-3β)、与张力蛋白同源的位于第10号染色体磷酸酶基因(PTEN)、Polo样激酶1(PLK1)在儿童急性髓系白血病(AML)中的表达及意义。方法 RT-PCR方法检测实验组(33例初诊AML患儿的骨髓)和对照组(10例正常骨髓)骨髓单个核细胞(BMMNC)中GSK-3βmRNA、PTEN mRNA、PLK1mRNA的表达,ELISA方法检测GSK-3β蛋白及P-GSK-3β的表达。结果实验组中GSK-3βmRNA、GSK-3β蛋白、PLK1mRNA的表达量高于对照组(P=0.012;P=0.014;P=0.040);PTEN mRNA、P-GSK-3β的表达量低于对照组(P=0.012;P=0.002)。GSK3β蛋白与PTEN mRNA的表达呈负相关(r=-0.415,P=0.016);GSK-3βmRNA、GSK3β蛋白与PLK1mRNA的表达成呈正相关(r=0.388,P=0.026;r=0.427,P=0.013)。外周血白细胞计数增高者GSK-3β蛋白表达增高;临床危险度高者GSK-3βmRNA、GSK-3β蛋白的表达增高,P-GSK-3β的表达降低。结论在儿童AML中,GSK-3β和PLK1可能起癌基因的作用,PTEN可能起抑癌基因的作用。 展开更多
关键词 gsk- PTEN PLK1 前体细胞淋巴母细胞白血病淋巴瘤
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