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加味定经汤调控TLR2/NF-κB/NLRP3信号通路减轻痤疮大鼠炎性皮损
1
作者 刘颖 萧闵 +1 位作者 周密思 邱百怡 《中国实验方剂学杂志》 北大核心 2025年第15期60-68,共9页
目的:探讨加味定经汤调控Toll样受体2(TLR2)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路抑制痤疮大鼠炎性皮损的作用及机制。方法:将48只大鼠随机分为正常组,模型组,加味定经汤低、中、高剂量组,盐酸多西环素组,每组8只。... 目的:探讨加味定经汤调控Toll样受体2(TLR2)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路抑制痤疮大鼠炎性皮损的作用及机制。方法:将48只大鼠随机分为正常组,模型组,加味定经汤低、中、高剂量组,盐酸多西环素组,每组8只。除正常组外,其余各组通过痤疮丙酸杆菌皮内注射和腹腔注射造模,造模成功后,加味定经汤低、中、高剂量组分别按8.1、16.2、32.4 g·kg^(-1)灌胃加味定经汤,盐酸多西环素组0.27 g·kg^(-1)灌胃,正常组和模型组以等体积生理盐水灌胃,各组均每天灌胃1次,连续14 d后取材。观察大鼠一般状态、耳廓厚度、体质量变化,生化法检测皮肤组织超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)水平;苏木素-伊红(HE)染色法观察皮肤组织病理学变化;马松(Masson)染色法观察皮肤组织胶原沉积;免疫组化检测皮肤组织白细胞介素-1β(IL-1β);酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测大鼠血清IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6含量;总抗氧化能力法检测皮肤组织活性氧(ROS)含量;蛋白免疫印迹法、实时荧光定量聚合酶链式反应分别检测皮肤组织TLR2、髓样分化因子88(MyD88)、NF-κB、NLRP3、胱天蛋白酶-1(Caspase-1)蛋白及mRNA表达水平。结果:与正常组比较,模型组大鼠耳廓皮肤厚度显著升高(P<0.01),皮肤组织ROS、MDA含量显著升高(P<0.01),SOD水平明显降低(P<0.05),胶原沉积显著增多(P<0.01);血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量显著升高(P<0.01),TLR2、MyD88、NF-κB、NLRP3、Caspase-1蛋白及mRNA表达水平显著升高(P<0.01)。与模型组比较,加味定经汤高、中剂量组大鼠上述指标均有明显改善(P<0.05,P<0.01),且皮肤组织TLR2、MyD88、NF-κB、NLRP3、Caspase-1蛋白及mRNA表达量明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论:加味定经汤能改善痤疮模型大鼠炎性皮损状况,其机制可能与TLR2/NF-κB/NLRP3信号通路有关。 展开更多
关键词 加味定经汤 Toll样受体2(tlr2)/核转录因子-κB(NF-κB)/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路 痤疮大鼠模型 炎性皮损 抗氧化
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基于TLR2/NF-κB信号通路探讨茵陈清肺颗粒对肺炎支原体肺炎小鼠的调控作用及机制 被引量：1
2
作者 王睿昊 张葆青 +1 位作者 贾广媛 周旭 《中医药学报》 CAS 2025年第1期29-34,共6页
目的:探究茵陈清肺颗粒治疗肺炎支原体肺炎(MPP)的作用机制和有效靶点。方法:选取SPF级BALB/c小鼠36只,普通饲料适应性喂养3 d后,随机选取6只作为空白组,剩余30只采用肺炎支原体(MP)菌液滴鼻联合高脂饮食和外环境法建立湿热闭肺证模型... 目的:探究茵陈清肺颗粒治疗肺炎支原体肺炎(MPP)的作用机制和有效靶点。方法:选取SPF级BALB/c小鼠36只,普通饲料适应性喂养3 d后,随机选取6只作为空白组,剩余30只采用肺炎支原体(MP)菌液滴鼻联合高脂饮食和外环境法建立湿热闭肺证模型。成功建立模型后随机分为模型组、阿奇霉素组(给予阿奇霉素90.1 mg·kg^(-1)·d^(-1))、茵陈清肺颗粒高(8.109 g·kg^(-1)·d^(-1)、)、中(5.406 g·kg^(-1)·d^(-1))、低剂量组(2.703 g·kg^(-1)·d^(-1)),模型组及空白组灌服等体积0.9%生理盐水。给药3 d后,在末次给药4 h后取材,HE染色观察小鼠肺组织病理变化;RT-qPCR技术检测肺组织TLR2、MyD88、NF-κB p65 mRNA表达水平;Western blot技术检测肺组织TLR2、MyD88、NF-κB p65蛋白表达水平。结果:HE染色结果表明,空白组可见肺泡结构清晰,模型组出现肺实变,大量炎性细胞浸润,血管内大量出血,各给药组均能改善小鼠肺组织病变、细胞浸润及炎症程度。mRNA表达水平检测结果表明,与空白组比较,模型组TLR2、MyD88以及NF-κB p65的mRNA表达显著增高(P<0.01),与模型组比较,除茵陈清肺颗粒低剂量组NF-κB p65外,其余给药组的mRNA表达显著降低(P<0.05,P<0.01),茵陈清肺颗粒高剂量组TLR2 mRNA表达低于阿奇霉素组(P<0.05)。蛋白表达水平检测结果表明,与空白组比较,模型组TLR2、MyD88以及NF-κB p65的蛋白表达水平明显升高(P<0.01),除茵陈清肺颗粒中剂量组MyD88、NF-κB p65蛋白表达外,其他给药组通路蛋白表达均显著低于模型组(P<0.05,P<0.01)。结论:茵陈清肺颗粒能明显改善MP小鼠肺组织炎性症状,其机制可能与抑制TLR2/NF-κB信号通路相关。 展开更多
关键词 tlr2/NF-κB 肺炎支原体肺炎 祛湿通络 茵陈清肺颗粒
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复方茵陈蒿汤通过TRPV3/TLR2/NF-κB信号通路抑制痤疮丙酸杆菌诱导的皮肤炎症的机制研究 被引量：1
3
作者 江雪冰 张文宪 +3 位作者 李怀军 张雪冰 刘成祥 战晶玉 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第19期1494-1501,共8页
目的:探讨复方茵陈蒿汤通过调控TRPV3/TLR2/NF-κB信号通路对痤疮丙酸杆菌诱导的巨噬细胞炎症反应的影响,阐明其治疗痤疮的作用机制。方法:采用肽聚糖刺激巨噬细胞构建痤疮丙酸杆菌感染的体外细胞模型,分别予以复方茵陈蒿汤或异维A酸干... 目的:探讨复方茵陈蒿汤通过调控TRPV3/TLR2/NF-κB信号通路对痤疮丙酸杆菌诱导的巨噬细胞炎症反应的影响,阐明其治疗痤疮的作用机制。方法:采用肽聚糖刺激巨噬细胞构建痤疮丙酸杆菌感染的体外细胞模型,分别予以复方茵陈蒿汤或异维A酸干预治疗。检测各组细胞一氧化氮(NO)生成量、炎症因子(TNF-α、IL-1β、iNOS、COX2)水平及氧化应激指标(SOD、MDA、ROS);通过蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测TRPV3/TLR2/NF-κB通路关键分子表达。结论:与模型组比较,复方茵陈蒿汤能够显著抑制巨噬细胞中NO的生成,降低TNF-α、IL-1β、iNOS、COX2、MDA的含量,抑制ROS的荧光强度,和增加SOD的活力,差异具有统计学意义(P<0.01)。Western blot与RTqPCR结果显示,复方茵陈蒿汤还能显著下调巨噬细胞TRPV3蛋白和mRNA的表达,抑制TLR2和p-IкBα蛋白的表达,降低p-IKKβ/IKKβ和p-p65/p65的比值,上调IκBα蛋白的表达,差异具有统计学意义(P<0.01);亚细胞定位分析表明,复方茵陈蒿汤可增加细胞质p-p65蛋白表达,同时降低核内p-p65水平,差异具有统计学意义(P<0.01)。结论:复方茵陈蒿汤可通过抑制TRPV3/TLR2/NF-κB信号通路活化调控氧化应激与炎症反应,从而发挥抗痤疮作用。 展开更多
关键词 复方茵陈蒿汤 痤疮丙酸杆菌 巨噬细胞 TRPV3/tlr2/NF-κB通路 氧化应激 炎症反应
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鱼腥草总黄酮通过调控TLR2/NF-κB信号通路改善小鼠单纯疱疹病毒性角膜炎的机制研究
4
作者 陆宏龙 赖飞娥 +1 位作者 黄洪 覃艺群 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第5期1426-1433,共8页
目的研究鱼腥草总黄酮对单纯疱疹病毒性角膜炎(Herpes simplex keratitis,HSK)小鼠的免疫调节作用,并初步探讨其作用机制。方法采用手术刀片于Balb/c小鼠角膜上皮层划“#”字并接种I型单纯疱疹病毒(I type herpes simplex virus,HSV-1)... 目的研究鱼腥草总黄酮对单纯疱疹病毒性角膜炎(Herpes simplex keratitis,HSK)小鼠的免疫调节作用,并初步探讨其作用机制。方法采用手术刀片于Balb/c小鼠角膜上皮层划“#”字并接种I型单纯疱疹病毒(I type herpes simplex virus,HSV-1)构建HSK模型。将鉴定成功的HSK小鼠随机分为模型组、鱼腥草总黄酮低(75 mg/kg)、高(300 mg/kg)剂量组和高剂量鱼腥草总黄酮+Toll样受体(Toll-like receptor,TLR)2激动剂Pam3CSK4(0.3 mg/kg)组,另设置对照组,每组12只。造模及给药期间,每日采用裂隙灯显微镜观察小鼠角膜病变情况,并进行评分。给药结束后,HE染色观察小鼠角膜病理变化;ELISA检测小鼠血清中干扰素-γ(Interferon-γ,INF-γ)、白介素-2(Interleukin-2,IL-2)、IL-4和IL-6水平;Western blot检测小鼠角膜组织中TLR2、兔抗髓样分化因子88(MyD88)、核转录因子-κB p65(NF-κB p65)和p-NF-κB p65蛋白表达水平。结果与对照组比较,模型组小鼠出现角膜水肿、溃疡及新生血管,角膜病变损伤严重,存在大量炎性细胞浸润,血清中INF-γ与IL-2水平显著降低,而IL-4和IL-6水平显著升高,角膜组织中TLR2、MyD88蛋白表达水平及p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白比值显著升高(P<0.01)。与模型组比较,鱼腥草总黄酮低、高剂量组小鼠角膜损伤得到改善,角膜病变评分显著降低,血清中INF-γ与IL-2水平显著升高,IL-4和IL-6水平显著降低,角膜组织中TLR2、MyD88蛋白表达水平及p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白比值显著降低(均P<0.01)。然而,TLR2激动剂Pam3CSK4可部分逆转鱼腥草总黄酮对HSK小鼠角膜炎及免疫失衡的改善作用。结论鱼腥草总黄酮可有效改善HSK小鼠角膜损伤,调节免疫反应,抑制炎症水平,其作用机制可能与调控TLR2/NF-κB信号通路有关。 展开更多
关键词 单纯疱疹病毒性角膜炎 I型单纯疱疹病毒 鱼腥草总黄酮 免疫反应 tlr2/NF-κB信号通路
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TLR2/NF-κB信号通路在帕金森病神经炎症中的作用
5
作者 雷欢 李红燕 《中国神经免疫学和神经病学杂志》 2025年第6期512-516,共5页
帕金森病(PD)是一种神经退行性疾病,主要表现为中脑黑质多巴胺能神经元丧失。其发病机制涉及遗传、环境和衰老等多种因素。其中环境因素通过多种机制引发神经毒性,包括氧化应激、α-突触核蛋白的异常聚集、线粒体功能障碍和神经炎症等... 帕金森病(PD)是一种神经退行性疾病,主要表现为中脑黑质多巴胺能神经元丧失。其发病机制涉及遗传、环境和衰老等多种因素。其中环境因素通过多种机制引发神经毒性,包括氧化应激、α-突触核蛋白的异常聚集、线粒体功能障碍和神经炎症等。近年来,神经炎症在PD的发生和发展中被证实起重要作用。Toll样受体2(TLR2)通过激活核因子κB(NF-κB)信号通路调控炎症反应,促使微胶质细胞活化并释放促炎因子,加剧神经损伤。NF-κB信号通路在TLR2介导的神经炎症中起核心作用,诱导炎症因子分泌,促进神经细胞凋亡和氧化应激。TLR2/NF-κB信号通路在PD的神经炎症中起桥梁作用。本文探讨TLR2/NF-κB信号通路在PD神经炎症中的作用及治疗前景。 展开更多
关键词 帕金森病 tlr2/NF-κB信号通路 神经炎症 治疗进展
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外周血单核细胞TLR2、TLR4及血清TNF-α、IL-1β在COPD急性加重期继发肺真菌感染患者中的应用研究
6
作者 王郡 潘志耘 +3 位作者 吴玉莹 姚志 王寒 周小妮 《转化医学杂志》 2025年第11期23-28,共6页
目的分析外周血单核细胞Toll样受体(TLR)2、TLR4及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)与慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期(AECOPD)继发肺真菌感染(PFI)的关系及应用意义,为PFI的防治提供借鉴。方法选取2022年2月至2025... 目的分析外周血单核细胞Toll样受体(TLR)2、TLR4及血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)与慢性阻塞性肺疾病(COPD)急性加重期(AECOPD)继发肺真菌感染(PFI)的关系及应用意义,为PFI的防治提供借鉴。方法选取2022年2月至2025年1月武汉市肺科医院收治的AECOPD患者98例,根据是否继发PFI分为PFI组(18例)和无PFI组(80例)。比较两组一般临床资料;比较两组TLR2、TLR4、TNF-α、IL-1β及肺通气功能指标[包括第1秒用力呼气容积(FEV1)、用力肺活量(FVC)、FEV1/FVC];采用Pearson相关性分析TLR2、TLR4、TNF-α、IL-1β与肺通气功能指标的相关性;采用多因素Logistic回归分析AECOPD患者继发PFI的危险因素;采用ROC曲线分析TLR2、TLR4、TNF-α、IL-1β对AECOPD患者继发PFI的预测价值。结果AECOPD患者PFI检出率为18.37%(18/98),共检出菌株19株,以念珠菌为主,其中白色念珠菌占比最高,达47.37%(9/19)。PFI组身体质量指数低于无PFI组,COPD病程、吸烟、侵入性操作比例高于无PFI组(P<0.05);两组肺功能分级比较,差异有统计学意义(P<0.05)。PFI组TLR2、TLR4、TNF-α、IL-1β显著高于无PFI组,FEV1、FVC、FEV1/FVC显著低于无PFI组(P<0.01)。TLR2、TLR4、TNF-α、IL-1β均与FEV1/FVC呈负相关(P<0.01)。多因素Logistic回归分析显示,TLR4、TNF-α为AECOPD患者继发PFI的独立危险因素(OR=1.545,95%CI:1.036~2.304,P=0.034;OR=1.458,95%CI:1.121~1.896,P=0.005)。ROC曲线分析显示,TLR2、TLR4、TNF-α、IL-1β联合预测AECOPD患者继发PFI的AUC为0.899,显著优于单独预测的0.758、0.768、0.714、0.768(Z=1.835、1.690、2.336、1.355,P=0.066、0.091、0.019、0.175),其中联合预测与TNF-α的AUC比较,差异有统计学意义(P<0.05),联合预测的敏感度、特异度分别为87.23%、84.69%。结论外周血单核细胞TLR2、TLR4及血清TNF-α、IL-1β对AECOPD患者继发PFI有较高预测价值,临床可加以监测。 展开更多
关键词 外周血单核细胞 tlr2 TLR4 TNF-α IL-1Β COPD 急性加重 肺真菌感染
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特女贞苷调节TLR2/TLR4信号通路抑制肝纤维化的作用机制
7
作者 冯亓垣 刘官成 +1 位作者 孙海明 宋健 《北华大学学报(自然科学版)》 2025年第6期751-755,共5页
目的 通过体外试验探讨特女贞苷抗肝纤维化的作用机制。方法 应用10 ng/mL转化生长因子β(trans-forming growth factor beta, TGF-β)诱导大鼠肝星状细胞系(HSC-T6)2 h,用不同浓度特女贞苷(0~100μmol/L)处理HSC-T6细胞24 h;通过Wester... 目的 通过体外试验探讨特女贞苷抗肝纤维化的作用机制。方法 应用10 ng/mL转化生长因子β(trans-forming growth factor beta, TGF-β)诱导大鼠肝星状细胞系(HSC-T6)2 h,用不同浓度特女贞苷(0~100μmol/L)处理HSC-T6细胞24 h;通过Western blot、RT-qPCR、细胞免疫荧光等方法检测HSC-T6细胞中TLR2、TLR4、α-SMA、Collagen-I表达情况,明确特女贞苷调节TLR2/TLR4信号通路抑制HSC-T6的作用机制。结果 TGF-β成功诱导HSC-T6细胞活化,特女贞苷能明显下调α-SMA、Collagen-I、TLR2、TLR4蛋白和mRNA表达,TGF-β诱导HSC-T6细胞活化可被特女贞苷通过调节TLR2/TLR4信号通路有效阻断。结论 特女贞苷能有效抑制细胞外基质(ECM)产生,调节肝纤维化,作用机制可能与抑制TLR2/TLR4信号通路有关。 展开更多
关键词 特女贞苷 肝纤维化 tlr2 TLR4
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孟鲁司特钠联合阿奇霉素对难治性肺炎支原体肺炎患儿肺功能、肺部炎症及血TLR2信号通路相关因子、microRNA-1323表达的影响
8
作者 殷平辉 张文静 +1 位作者 吴佳妮 张成健 《西北药学杂志》 2025年第6期22-29,共8页
目的观察孟鲁司特钠联合阿奇霉素对难治性肺炎支原体肺炎(refractory mycoplasma pneumoniae pneumonia,RMPP)患儿肺功能、肺部炎症及外周血Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)信号通路和微小核糖核酸-1323(microRNA-1323,miR-1323... 目的观察孟鲁司特钠联合阿奇霉素对难治性肺炎支原体肺炎(refractory mycoplasma pneumoniae pneumonia,RMPP)患儿肺功能、肺部炎症及外周血Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)信号通路和微小核糖核酸-1323(microRNA-1323,miR-1323)表达的影响。方法采用前瞻性研究,选取2022年1月—2023年12月符合纳入标准的RMPP患儿80例作为研究对象,用信封随机法均分为观察组(孟鲁司特钠联合阿奇霉素治疗,n=40)和对照组(阿奇霉素治疗,n=40),比较2组的临床疗效,住院时间及临床症状改善时间,肺功能指标[最大呼气中段流量(maximum mid-expiratory flow,MMEF)、最大呼气吸峰流速(peak expiratory flow,PEF)、第1秒用力呼气量(forced expiratory volume in the first second,FEV_(1))],炎性指标[干扰素-γ(interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)],miR-1323、TLR2信号通路[核转录因子-κB(nuclear transcription factor-κB,NF-κB)、髓样分化蛋白88(myeloid differentiation protein 88,MyD88)、TLR2 mRNA]水平,T细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)),总不良反应发生率。结果观察组的总有效率为95.00%,高于对照组(80.00%),P<0.05。治疗后,观察组的住院时间、临床症状改善时间均短于对照组(P<0.05);观察组的IFN-γ、IL-6、TNF-α水平均低于对照组(P<0.05),观察组的FEV_(1)、MMEF、PEF水平均高于对照组(P<0.05);观察组的miR-1323、TLR2信号通路相关蛋白的水平均低于对照组(P<0.05);观察组的CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)均高于对照组(P<0.05);2组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论孟鲁司特钠联合阿奇霉素治疗RMPP患儿,能提高治疗效果,加快临床症状恢复,提高肺功能,降低炎症因子的表达水平,抑制TLR2信号通路(TLR2、MyD88、NF-κB)和miR-1323的表达,且安全性良好。 展开更多
关键词 孟鲁司特钠 阿奇霉素 microRNA-1323 tlr2信号通路 难治性肺炎支原体肺炎
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芪白平肺胶囊调控HMGB1/TLR2/NF-κB信号通路干预COPD气道重塑的作用机制
9
作者 方莉 张璐 +3 位作者 杨程 童佳兵 高雅婷 李泽庚 《中药药理与临床》 北大核心 2025年第7期26-31,共6页
目的:研究芪白平肺胶囊调控基于高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体2(TLR2)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路干预慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道重塑的机制。方法:选取60只雄性SD大鼠,按随机方式分为正常对照组、模型对照组、芪白平... 目的:研究芪白平肺胶囊调控基于高迁移率族蛋白B1(HMGB1)/Toll样受体2(TLR2)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路干预慢性阻塞性肺疾病(COPD)大鼠气道重塑的机制。方法:选取60只雄性SD大鼠,按随机方式分为正常对照组、模型对照组、芪白平肺胶囊500 mg/kg组、吡咯烷二硫代甲酸铵(PDTC)100 mg/kg组、芪白平肺胶囊500 mg/kg+PDTC 100 mg/kg组,每组12只,复制COPD大鼠模型,由药物干预6 w后检测大鼠肺功能指标;以ELISA法测定大鼠白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-ɑ(TNF-ɑ)、NF-κB的含量;HE染色评价大鼠的肺组织病理变化和气道壁厚度进行分析;采用免疫组化法检测肺组织中HMGB1、TLR2、NF-κB p65蛋白阳性表达;运用免疫荧光染色(IF)观察大鼠肺组织中HMGB1、TLR2、NF-κB p65表达水平;以Western blot法检测大鼠肺组织中HMGB1、TLR2、NF-κB p65的蛋白表达。结果:与正常对照组比较,模型对照组大鼠支气管管腔狭窄,内部有大量炎性细胞分布,管壁内平滑肌及基底膜增生明显,支气管管壁厚度显著增加,肺功能指标显著降低(P<0.01),血清中NF-κB p65、IL-6、TNF-ɑ的含量显著升高(P<0.01),肺组织中HMGB1、TLR2、NF-κB p65蛋白表达显著上调(P<0.01);与模型对照组比较,各给药组大鼠支气管内炎性细胞明显减少,管壁内基底膜及平滑肌增生减轻,血清中NF-κB p65、IL-6、TNF-ɑ的含量显著降低(P<0.01),肺功能指标显著升高(P<0.01),肺组织中HMGB1、TLR2、NF-κB p65蛋白表达显著下调(P<0.01),其中芪白平肺胶囊500 mg/kg组+PDTC 100 mg/kg组效果最为显著(P<0.01)。结论:芪白平肺胶囊可能通过抑制HMGB1/TLR2/NF-κB信号传导通路,从而降低气道中IL-6、NF-κB p65、TNF-a等相关炎性因子的释放,减轻COPD气道重塑。 展开更多
关键词 芪白平肺胶囊 慢性阻塞性肺疾病 高迁移率族蛋白B1 TOLL样受体2 核转录因子-ΚB 气道重塑
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TLR2/MyD88信号系统在大鼠角膜移植术后排斥反应中的作用 被引量：5
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作者 郑艳华 白浪 +3 位作者 梁伟怡 于健 杨娟 谭青 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2015年第6期506-510,共5页
目的探讨Toll样受体2(Toll like receptor,TLR2)/MyD 88信号系统在大鼠角膜移植术后排斥反应中的作用。方法取14只SD大鼠为供体,28只Wistar大鼠为受体,建立28个同种异体穿透性角膜移植模型。建模后分为同种异体角膜移植组14只(6只用于... 目的探讨Toll样受体2(Toll like receptor,TLR2)/MyD 88信号系统在大鼠角膜移植术后排斥反应中的作用。方法取14只SD大鼠为供体,28只Wistar大鼠为受体,建立28个同种异体穿透性角膜移植模型。建模后分为同种异体角膜移植组14只(6只用于术后观察排斥情况),同种异体角膜移植TLR2单克隆抗体组14只(6只用于术后观察排斥情况)。另选16只Wistar大鼠,分为同种自体角膜移植组8只,正常对照组8只。3个手术组大鼠分别行穿透性角膜移植术。术后TLR2单克隆抗体组给予0.5 g·L-1TLR2单克隆抗体,分别于术后0 d、2 d、4 d、6 d、8 d分5次经球结膜下注射给药。正常对照组、同种自体角膜移植组及同种异体角膜移植组给等量生理盐水。术后每天于裂隙灯下观察角膜透明度、新生血管,并用排斥反应指数评分。第9天取材,行HE、免疫组织化学染色和实时荧光定量PCR检测。结果术后随时间变化各手术组角膜植片均出现不同程度的水肿、混浊和新生血管生长,以同种异体角膜移植组最为明显。HE染色结果显示在同种异体角膜移植组,角膜基质层出现水肿、大量炎症细胞浸润和新生血管,而在同种自体角膜移植组和TLR2单克隆抗体组中炎症反应较轻。免疫组织化学检测结果:TLR2和MyD 88分子在正常对照组、同种自体角膜移植组及TLR2单克隆抗体组的角膜上皮中均有微量表达,同种异体角膜移植组角膜上皮、基质细胞中TLR2和MyD 88分子的表达明显增多,尤以基质层明显。实时荧光定量PCR结果显示同种异体角膜移植组角膜组织TLR2 mR NA、MyD 88 mR NA的表达较同种自体角膜移植组(P=0.000、0.004)和正常对照组(P=0.000、0.000)显著增加,两者的表达亦较TLR2单克隆抗体组显著增加(P=0.000、0.003)。结论 TLR2单克隆抗体抑制TLR2及其下游信号分子MyD 88的表达;TLR2/MyD 88信号系统参与了角膜移植术后排斥反应,影响了角膜植片的转归。 展开更多
关键词 tlr2单克隆抗体 tlr2/MyD88信号系统 角膜移植 免疫排斥
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枸杞多糖通过TLR2-NF-κB/p38调控树突状细胞的成熟 被引量：8
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作者 张晓羽 兰亚如 +6 位作者 张晓娣 杨浩凯 李飞龙 薛晓楠 吴成 王琦 苏春霞 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期1293-1298,共6页
目的探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)促进骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDC)成熟的分子机制。方法6~8周龄C57BL/6小鼠♂,无菌取骨髓细胞,经granulocyte-mononuclear colony-stimulating... 目的探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides,LBP)促进骨髓来源树突状细胞(bone marrow-derived dendritic cells,BMDC)成熟的分子机制。方法6~8周龄C57BL/6小鼠♂,无菌取骨髓细胞,经granulocyte-mononuclear colony-stimulating factor(GM-CSF)和interleukine-4(IL-4)连续诱导7 d,收获悬浮及半贴壁细胞,即为未成熟的树突状细胞;RPMI 1640处理组为阴性对照,LPS处理组为阳性对照。未成熟树突状细胞分别用50、100、200 mg·L^-1 LBP处理30 min,另外,用Toll样受体2(Toll-like receptor 2,TLR2)抑制剂C29作用1 h后,再加不同浓度的LBP处理30 min,收集各组细胞。RT-qPCR检测不同处理组中TLR2、NF-κB、p38的mRNA表达水平;Western-blot检测不同处理组中TLR2、NF-κB及p-NF-κB、p38及p-p38的蛋白表达水平。结果LBP可以明显上调BMDC中TLR2、NF-κB和p38 mRNA及蛋白的表达。同时,TLR2抑制剂C29明显抑制LBP诱导BMDC中TLR2、NF-κB mRNA及蛋白表达水平,明显减弱p38蛋白的表达,对p38mRNA的表达有减低的趋势。结论LBP可能通过诱导BMDC中TLR2-NF-κB/p38的活化,促进BMDC的成熟。 展开更多
关键词 树突状细胞 枸杞多糖 tlr2 NF-ΚB P38 tlr2抑制剂C29
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奶牛TLR2基因遗传变异与乳房炎体细胞评分的相关研究 被引量：20
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作者 马腾壑 许尚忠 +3 位作者 王兴平 高雪 任红艳 陈金宝 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期332-336,共5页
选用中国荷斯坦奶牛、三河牛和中国西门塔尔牛共207头奶牛为研究对象,采用PCR-RFLP和创造酶切位点RFLP(CRS-RFLP)技术对其TLR2基因进行多态性研究,发现TLR2基因第2外显子上T/G,G/A和G/A 3个突变,分别是EcoRⅤ,HaeⅢ和HhaⅠ限制性内切酶... 选用中国荷斯坦奶牛、三河牛和中国西门塔尔牛共207头奶牛为研究对象,采用PCR-RFLP和创造酶切位点RFLP(CRS-RFLP)技术对其TLR2基因进行多态性研究,发现TLR2基因第2外显子上T/G,G/A和G/A 3个突变,分别是EcoRⅤ,HaeⅢ和HhaⅠ限制性内切酶的酶切多态位点,其中T/G突变引起蛋白质氨基酸天冬氨酸/谷氨酸的变化。对3个酶切多态位点进行基因型分析,χ2检验表明:中国荷斯坦奶牛、三河牛和中国西门塔尔牛在3个酶切多态位点都达到了Hardy-Weinberg平衡。中国西门塔尔牛在3个酶切多态位点PIC为最高。运用SAS9.0软件,采用最小二乘拟合一般线性模型分析了3个酶切多态位点与中国荷斯坦奶牛、三河牛和中国西门塔尔牛体细胞评分(SCS)的关系,结果表明:在这3个酶切多态位点中,只有EcoRⅤ酶切多态位点BB基因型个体的SCS显著低于AA和AB基因型个体(P<0.05),说明BB基因型可能为抵御乳房炎的有利基因型。 展开更多
关键词 奶牛 乳房炎 tlr2基因 PCR-RFLP CRS-RFLP体细胞评分
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黄芩总黄酮对金葡菌肺感染模式识别受体TLR2/Nod2及其相关炎性因子表达的影响 被引量：18
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作者 王玉刚 吴昊 +4 位作者 孟甄 兰嘉琦 游雪甫 邢东明 杜力军 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期866-870,共5页
目的观察黄芩总黄酮对金葡菌感染后肺脏模式识别受体TLRs和Nods及其相关炎性因子表达的作用,探讨其抗炎药理可能的作用靶点和机制。方法通过构建体外金葡菌感染鼠肺上皮细胞和体内金葡菌急性小鼠肺感染模型,利用RT-PCR技术,通过多种给... 目的观察黄芩总黄酮对金葡菌感染后肺脏模式识别受体TLRs和Nods及其相关炎性因子表达的作用,探讨其抗炎药理可能的作用靶点和机制。方法通过构建体外金葡菌感染鼠肺上皮细胞和体内金葡菌急性小鼠肺感染模型,利用RT-PCR技术,通过多种给药形式观察TLR2/Nod2和下游相关炎性因子的mRNA的表达,金葡菌的增殖数量,以探讨其可能的作用靶点和机制。结果黄芩总黄酮不能减少侵入到胞内的活菌数目,但可以下调由于金葡菌侵入导致的TNF-α的大量合成。金葡菌侵入后Nod2表达大幅升高,黄芩总黄酮有明显的抑制作用,并且和TNF-α的变化呈现一定的相关性。TLR2/MyD88的表达无变化。结论黄芩总黄酮的抗炎作用可能与其下调Nod2受体表达进而抑制下游炎性因子表达相关。 展开更多
关键词 黄芩总黄酮 金葡菌 抗炎作用 tlr2 NOD2 肺
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TLR2基因多态性与奶牛体细胞评分的相关性研究 被引量：15
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作者 白杰 林嘉鹏 +3 位作者 袁芳 侯敏 李文蓉 刘明军 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期356-362,共7页
旨在分析Toll-样受体2在奶牛隐性乳房炎中的作用。本研究以同一牛场内的中国荷斯坦奶牛和新疆褐牛为研究对象,选取奶牛体细胞数小于20万和大于100万的个体各15头,对TLR2基因进行测序,然后对发现的多态位点进行PCR-RFLP检测,分析这些位... 旨在分析Toll-样受体2在奶牛隐性乳房炎中的作用。本研究以同一牛场内的中国荷斯坦奶牛和新疆褐牛为研究对象,选取奶牛体细胞数小于20万和大于100万的个体各15头,对TLR2基因进行测序,然后对发现的多态位点进行PCR-RFLP检测,分析这些位点与体细胞评分(SCS)的相关性。结果发现了TLR2基因E+189、E+631和E+2260 3个SNP位点,其中E+631和E+2260位点为本试验首次发现。E+189、E+631和E+2260 3个SNP位点在2个品种内均处于Hardy-Weinberg平衡状态(P>0.05);3个位点在2个品种间的基因型分布差异都极显著(P<0.01)。分析每个SNP位点与SCS的相关性,显示TLR2E+189位点AA比BB和AB基因型个体的SCS高(P<0.05),AB与BB基因型个体的SCS差异不显著(P>0.05);说明BB基因型个体的乳房炎发病率低。而TLR2E+631的SCS和TLR2E+189位点表现相似,但各个基因型个体间的SCS差异不显著(P>0.05)。E+2260位点AA基因型个体比AB的SCS低(P>0.05)。新疆褐牛的SCS低于荷斯坦牛(P<0.01),说明新疆褐牛乳房炎发病率比荷斯坦牛低。在发现的3个SNP位点中,E+189位点对奶牛的SCS有显著影响(P<0.05),TLR2基因SNP位点在2个品种内的分布差异可能是新疆褐牛比荷斯坦牛乳房炎发病率低的原因之一。 展开更多
关键词 新疆褐牛 tlr2基因 隐性乳房炎 体细胞评分
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牦牛TLR2和TLR4基因mRNA在不同组织中的表达分布研究 被引量：14
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作者 林宝山 兰道亮 +3 位作者 黄偲 陈亚冰 黄勇 李键 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第11期901-903,共3页
为检测牦牛TLR2和TLR4基因m RNA在不同组织中的表达分布,本研究根据Gen Bank中牛TLR2和TLR4序列设计特异性引物,以β-actin为参照基因,建立了检测牦牛天然免疫受体TLRs家族TLR2和TLR4基因的荧光定量PCR方法,并对TLR2和TLR4基因在牦牛各... 为检测牦牛TLR2和TLR4基因m RNA在不同组织中的表达分布,本研究根据Gen Bank中牛TLR2和TLR4序列设计特异性引物,以β-actin为参照基因,建立了检测牦牛天然免疫受体TLRs家族TLR2和TLR4基因的荧光定量PCR方法,并对TLR2和TLR4基因在牦牛各组织中的表达分布进行了研究。结果表明,TLR2和TLR4基因在牦牛所有组织中均有表达,其中TLR2基因在小肠表达量最高,在卵巢表达量最低,在肾、肺、肝、心、脾、乳腺、大肠、肌肉等组织依次有较高的表达;TLR4基因在乳腺表达量最高,在肌肉表达量最低,在脾、肝、小肠、肾、卵巢、肺、心、大肠等组织依次有较高水平的表达。该研究结果提示TLR2和TLR4基因可能在牦牛抗病免疫分子机制中发挥重要的作用,对研究高原动物免疫机制和应对牦牛及其他高原动物重大疫病具有重要意义。 展开更多
关键词 牦牛 tlr2 TLR4 荧光定量PCR 组织表达分布
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黄芩苷对模式识别受体TLR2/4-NOD2的作用及其成药性意义 被引量：9
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作者 柴玉爽 雷帆 +2 位作者 邢东明 丁怡 杜力军 《中国中药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第16期2639-2644,共6页
激活模式识别受体可以引起下游信号通路启动,炎性因子表达,最终引起免疫炎性反应。无论是外源性病原微生物,还是内源性组织成分均可以配体方式不同程度上激活这种模式识别受体,引起机体免疫炎性反应。因此,抑制相关受体进而在一定程度... 激活模式识别受体可以引起下游信号通路启动,炎性因子表达,最终引起免疫炎性反应。无论是外源性病原微生物,还是内源性组织成分均可以配体方式不同程度上激活这种模式识别受体,引起机体免疫炎性反应。因此,抑制相关受体进而在一定程度上抑制这种免疫炎性反应,对于避免疾病过程中组织损伤具有重要的意义。黄芩苷能够特异性的抑制疾病过程中TLR2/4-NOD2的表达,抑制下游炎性因子IL-1β,IL-6和TNF-α的表达,可以减轻疾病过程中组织细胞的损伤。并且这种作用具有组织的非特异性。在成药性方面具有重要的理论和实际意义。此外,本文还从药物代谢和毒性等方面进一步探讨了其成药性。 展开更多
关键词 黄芩苷 tlr2 4 NOD2 中风 炎症
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TLR2 mAb和TLR4 mAb对急性期溃疡性结肠炎小鼠结肠黏膜炎症因子IFN-γ、IL-4及IL-17表达的影响 被引量：16
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作者 李鹃 刘懿 +6 位作者 董乐 岳文杰 黄剑平 蒋蔚茹 孙旭 钟良 刘杰 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期253-258,共6页
目的探讨TLR2单克隆抗体(toll-like receptor 2 monoclonal antibodies,TLR2 mAb)和TLR4单克隆抗体(toll-like receptor 4 monoclonal antibodies,TLR4 mAb)对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的急性期溃疡性结肠炎(ulcera... 目的探讨TLR2单克隆抗体(toll-like receptor 2 monoclonal antibodies,TLR2 mAb)和TLR4单克隆抗体(toll-like receptor 4 monoclonal antibodies,TLR4 mAb)对葡聚糖硫酸钠(dextran sulfate sodium,DSS)诱导的急性期溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)小鼠结肠黏膜的炎症因子IFN-γ、IL-4及IL-17表达的影响。方法50只雄性BALB/c小鼠分为5组(每组10只):对照组(A)、模型组(B)及TLR2 mAb干预组(C)、TLR4mAb干预组(D)、TLR2 mAb和TLR4 mAb联合干预组(E)。A组小鼠饮用蒸馏水7 d;B-E组小鼠仅饮用5%DSS水溶液7 d以产生急性期溃疡性结肠炎模型。造模开始的同时,每隔48 h分别给予C、D、E干预组小鼠以TLR2 mAb(10μg)、TLR4 mAb(10μg)、TLR2 mAb(10μg)+TLR4 mAb(10μg)腹腔内注射,A、B组给予腹腔内注射生理盐水,以观察TLR2 mAb和TLR4 mAb的干预作用。观察指标包括疾病活动指数(disease activityindex,DAI)、结肠组织病理学评分(histopathological score,HS)。造模及干预7 d后处死小鼠,Real-ti me PCR法检测各组结肠黏膜TLR2、TLR4、IFN-γ、IL-4及IL-17的mRNA表达。结果(1)与A组相比,B组小鼠肠道DAI及HS明显增高(P<0.01)。与B组相比,E组小鼠肠道DAI(P<0.05)和HS(P<0.01)均明显降低。与D组相比,E组小鼠肠道HS明显降低(P<0.05)。(2)与A组相比,B组小鼠结肠黏膜TLR2、TLR4表达明显增高(P<0.01,P<0.05)。与B组相比,C、D、E组小鼠结肠黏膜TLR2、TLR4表达均有不同程度的降低。(3)与A组相比,B组小鼠结肠黏膜IFN-γ、IL-4及IL-17的mRNA表达明显增高(P<0.01,P<0.05,P<0.01)。与B组相比,C、D、E组小鼠结肠黏膜IFN-γ、IL-4及IL-17的mRNA表达均有不同程度的降低。结论TLR2 mAb和TLR4 mAb可能通过下调小鼠结肠黏膜的炎症因子IFN-γ、IL-4、IL-17的mRNA表达而发挥其干预作用。 展开更多
关键词 溃疡性结肠炎 tlr2单克隆抗体 TLR4单克隆抗体 IFN-Γ IL-4 IL-17
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基于TLR2靶点探讨脐灸对寒凝血瘀型痛经大鼠穴区启动-神经-内分泌-靶器官的调控作用 被引量：17
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作者 马凤君 李姝婧 +6 位作者 潘亚辉 颜晓 杜冬青 李玉婕 于岩瀑 马玉侠 高树中 《中华中医药杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第9期4342-4347,共6页
目的:观察脐灸法对寒凝血瘀型痛经大鼠扭体反应及神阙穴区、下丘脑、脊髓、子宫组织中Toll样受体2(TLR2)表达的影响,初步探索脐灸法的穴区启动-神经-内分泌-靶器官的调控作用,完善脐灸镇痛效应信号通路。方法:将50只成年雌性Wistar大鼠... 目的:观察脐灸法对寒凝血瘀型痛经大鼠扭体反应及神阙穴区、下丘脑、脊髓、子宫组织中Toll样受体2(TLR2)表达的影响,初步探索脐灸法的穴区启动-神经-内分泌-靶器官的调控作用,完善脐灸镇痛效应信号通路。方法:将50只成年雌性Wistar大鼠随机分为5组,对照组、模型组、隔药灸脐组、药物贴脐组、艾条灸脐组。除对照组外均造寒凝血瘀型痛经模型,造模后给予相应治疗;采用免疫荧光法、蛋白免疫印迹法(Western Blot)、实时荧光定量PCR法(RT-PCR)检测神阙穴区、下丘脑、脊髓、子宫组织中TLR2蛋白及mRNA表达。结果:①脐灸组与模型组相比痛经模型大鼠寒凝血瘀状态改善,扭体潜伏期显著延长、扭体次数和评分降低(P<0.01),脐灸法具有显著的镇痛疗效,且隔药灸脐组优于艾条灸脐组及药物贴脐组(P<0.05,P<0.01)。②脐灸组与模型组相比可上调神阙穴区TLR2蛋白及mRNA表达(P<0.05,P<0.01),其中艾条灸脐组疗效优于隔药灸脐组及药物贴脐组。③脐灸组与模型组相比可下调下丘脑、脊髓及子宫TLR2蛋白及mRNA表达(P<0.01),其中下丘脑组织中的艾条灸脐组疗效优于隔药灸脐组及药物贴脐组(P<0.05,P<0.01),子宫及脊髓组织中的隔药灸脐组疗效最优(P<0.05,P<0.01)。结论:脐灸法通过上调神阙穴区TLR2蛋白和mRNA表达以激活穴区信息启动及下调下丘脑-脊髓-子宫中TLR2蛋白及mRNA表达以抑制中枢神经系统及靶器官中肥大细胞功能进而发挥镇痛疗效。 展开更多
关键词 tlr2 脐灸 痛经 寒凝血瘀 穴区启动-神经-内分泌-靶器官
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FoxP3、CD4^+CD25^+调节性T细胞、TLR2和TLR9在儿童传染性单核细胞增多症中的变化 被引量：14
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作者 王强 王佐凤 +1 位作者 曹玫 汪智英 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期469-473,共5页
本研究旨在探讨TLR2(Toll-like receptors,TLRs)、TLR9和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及其转录因子FoxP3在儿童传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)发病中的作用。2010年4月至2011年1月我院儿科诊治的初次发病的急性期IM... 本研究旨在探讨TLR2(Toll-like receptors,TLRs)、TLR9和CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)及其转录因子FoxP3在儿童传染性单核细胞增多症(infectious mononucleosis,IM)发病中的作用。2010年4月至2011年1月我院儿科诊治的初次发病的急性期IM患儿35例(IM急性期组),IM恢复期组35例以及健康对照儿童35例(对照组)纳入研究。采用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法检测外周血单个核细胞TLR2、TLR9、FoxP3mRNA的表达,运用流式细胞术检测外周血中T淋巴细胞亚群CD4+CD25+的表达。结果显示:IM急性期组TLR2mRNA(4.03±0.56)、TLR9 mRNA(8.88±1.56)相对表达水平显著高于对照组TLR2 mRNA(2.22±0.57)、TLR9mRNA(3.63±1.30)及恢复期组TLR2 mRNA(2.76±0.83)、TLR9 mRNA(5.34±1.60)相对表达水平(P<0.01)。IM急性期组FoxP3 mRNA(2.82±0.90)、CD4+CD25+(2.38±1.32%)表达水平显著低于对照组FoxP3mRNA(4.65±1.23)、CD4+CD25+(7.85±1.97%)及恢复期组FoxP3 mRNA(4.11±1.37)、CD4+CD25+(6.81±1.84%)(P<0.01),IM恢复期组FoxP3 mRNA、CD4+CD25+表达水平与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:IM急性期存在CD4+CD25+Treg数量降低及其特异性转录因子FoxP3表达下调,而TLR2和TLR9在IM急性期表达上调。 展开更多
关键词 tlr2 TLR9 FOXP3 CD4+CD25+TREG 传染性单核细胞增多症 儿童
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“芩部丹”中三种单体对结核分枝杆菌作用下TLR2表达的影响 被引量：22
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作者 王莉新 吴燕燕 王易 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期1284-1287,共4页
目的观察"芩部丹"中3种单体对巨噬细胞TLR2的调节作用,以探寻其抗结核的可能作用机制。方法取黄芩苷、对叶百部碱、丹参多酚酸盐单体作用于感染结核杆菌的U937单核巨噬细胞,分别采用RT-QPCR、FACS方法检测用药前后巨噬细胞表... 目的观察"芩部丹"中3种单体对巨噬细胞TLR2的调节作用,以探寻其抗结核的可能作用机制。方法取黄芩苷、对叶百部碱、丹参多酚酸盐单体作用于感染结核杆菌的U937单核巨噬细胞,分别采用RT-QPCR、FACS方法检测用药前后巨噬细胞表面TLR2的表达差异。结果与模型组相比,黄芩苷、对叶百部碱、丹参多酚酸盐均具有上调TLR2表达的作用。结论 "芩部丹"中3种单体抗结核作用可能通过纠正TLR2的表达而发挥作用。 展开更多
关键词 芩部丹 黄芩苷 对叶百部碱 丹参多酚酸盐 tlr2 结核分枝杆菌
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