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高粱SbCAD4基因的克隆与序列分析及原核表达分析
被引量：
5
1
作者
王丽华
李杰勤
+1 位作者
詹秋文
樊飞飞
《湖南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期595-601,共7页
以高粱品系早亨加利为材料,通过RT–PCR扩增,克隆高粱Sb CAD4基因。测序结果表明,克隆的Sb CAD4基因与NCBI基因库中高粱IS11861品系只在编码序列第548位有1个碱基的差异,而二者的氨基酸序列完全一致。进化树分析结果表明,Sb CAD4与拟南...
以高粱品系早亨加利为材料,通过RT–PCR扩增,克隆高粱Sb CAD4基因。测序结果表明,克隆的Sb CAD4基因与NCBI基因库中高粱IS11861品系只在编码序列第548位有1个碱基的差异,而二者的氨基酸序列完全一致。进化树分析结果表明,Sb CAD4与拟南介、水稻、玉米的木质素合成CAD基因位于同/L1个群中。比对分析结果表明,Sb CAD4与木质素合成基因具有相同的结构域。将构建正确的重组质粒(p MAL–Sb CAD4)转化入大肠杆菌菌种BL21中进行诱导表达的结果表明,IPTG的最佳诱导浓度为0.5 mmol/L。经Amylose Resin亲和层析柱纯化后,Sb CAD4融合蛋白在SDS–PAGE电泳分析时呈现1条蛋白带。利用纯化的蛋白对Sb CAD4进行酶活测定,其酶动力学参数Km值为5.2μmol/L,Vmax为5.8μmol/(min·mg),表明Sb CAD4具有肉桂醇脱氢酶活性。
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关键词
高粱
sbcad4
基因
基因克隆
序列分析
原核表达
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职称材料
题名
高粱SbCAD4基因的克隆与序列分析及原核表达分析
被引量：
5
1
作者
王丽华
李杰勤
詹秋文
樊飞飞
机构
安徽科技学院农学院
出处
《湖南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015年第6期595-601,共7页
基金
国家自然科学基金项目(31301383)
国家星火计划项目(2012GA710076)
+1 种基金
安徽科技学院项目(ZRC2014437)
安徽科技学院作物学重点学科项目(AKZDXK2015A03)
文摘
以高粱品系早亨加利为材料,通过RT–PCR扩增,克隆高粱Sb CAD4基因。测序结果表明,克隆的Sb CAD4基因与NCBI基因库中高粱IS11861品系只在编码序列第548位有1个碱基的差异,而二者的氨基酸序列完全一致。进化树分析结果表明,Sb CAD4与拟南介、水稻、玉米的木质素合成CAD基因位于同/L1个群中。比对分析结果表明,Sb CAD4与木质素合成基因具有相同的结构域。将构建正确的重组质粒(p MAL–Sb CAD4)转化入大肠杆菌菌种BL21中进行诱导表达的结果表明,IPTG的最佳诱导浓度为0.5 mmol/L。经Amylose Resin亲和层析柱纯化后,Sb CAD4融合蛋白在SDS–PAGE电泳分析时呈现1条蛋白带。利用纯化的蛋白对Sb CAD4进行酶活测定,其酶动力学参数Km值为5.2μmol/L,Vmax为5.8μmol/(min·mg),表明Sb CAD4具有肉桂醇脱氢酶活性。
关键词
高粱
sbcad4
基因
基因克隆
序列分析
原核表达
Keywords
Sorghum
sbcad4
gene cloning
sequence analysis
prokaryotic expression
分类号
S514.035 [农业科学—作物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
高粱SbCAD4基因的克隆与序列分析及原核表达分析
王丽华
李杰勤
詹秋文
樊飞飞
《湖南农业大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2015
5
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