SPOP在急性髓系白血病中的表达及其生物学功能研究 被引量：1

1

作者 万雪莹 许晶 +1 位作者 刘晓丽 王宏伟 《中国实验血液学杂志》 北大核心 2025年第1期32-38,共7页

目的:研讨SPOP在急性髓系白血病(AML)患者中的表达情况及其对AML细胞增殖、凋亡和周期的影响。方法:采用荧光定量PCR法检测初发AML患者和正常对照者骨髓样本中SPOP mRNA的表达。通过脂质体转染法进行慢病毒包装构建SPOP稳定过表达的AML... 目的:研讨SPOP在急性髓系白血病(AML)患者中的表达情况及其对AML细胞增殖、凋亡和周期的影响。方法:采用荧光定量PCR法检测初发AML患者和正常对照者骨髓样本中SPOP mRNA的表达。通过脂质体转染法进行慢病毒包装构建SPOP稳定过表达的AML细胞系THP-1和U937,应用CCK-8法检测SPOP对细胞增殖的影响,流式细胞术检测其对凋亡和周期的作用。Western blot检测抗凋亡蛋白Bcl-2和凋亡蛋白Bax、Caspase3的表达。结果:正常对照组SPOP mRNA表达水平的中位数为0.9931(0.6303,1.433),AML组为0.5221(0.2422,0.7237),AML组SPOP表达水平显著低于正常对照组(P<0.001)。将SPOP过表达后,U937过表达组凋亡细胞比例为10.9%±0.3%,明显高于空载组的8.9%±0.3%(P<0.05);THP-1过表达组凋亡细胞比例为4.6%±0.15%,明显高于空载组的3.0%±0.30%(P<0.05)。U937过表达组和THP-1过表达组Caspase3表达量分别为1.154±0.086、1.2±0.077,均高于空载组(空载组为1)(均P<0.05);U937过表达组和THP-1过表达组Bax/Bcl-2比值分别为1.328±0.057、1.669±0.15,亦高于空载组(空载组为1)(均P<0.05)。在细胞增殖实验中,U937过表达组和THP-1过表达组细胞数量均略微低于空载组,但比较差异无统计学意义(P>0.05)。在细胞周期实验中,U937过表达组和THP-1过表达组处于G1期细胞比例均略微高于空载组,但比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:SPOP可以促进白血病细胞的凋亡,其机制可能与Bcl-2下调,Bax、Caspase3上调有关。 展开更多

关键词 spop 急性髓系白血病 细胞增殖 凋亡 细胞周期

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SPOP和软骨寡聚基质蛋白表达与肝内胆管癌患者预后不良的关系

2

作者 康洲 彭勇 吕其君 《中华实用诊断与治疗杂志》 2025年第8期693-697,共5页

目的观察肝内胆管癌患者癌组织SPOP、软骨寡聚基质蛋白(COMP)表达情况,探讨其与肝内胆管癌患者预后不良的关系。方法2019年1月—2022年1月南充市中心医院诊治肝内胆管癌患者80例,均行手术切除治疗,采用免疫组织化学法检测肝内胆管癌组... 目的观察肝内胆管癌患者癌组织SPOP、软骨寡聚基质蛋白(COMP)表达情况,探讨其与肝内胆管癌患者预后不良的关系。方法2019年1月—2022年1月南充市中心医院诊治肝内胆管癌患者80例,均行手术切除治疗,采用免疫组织化学法检测肝内胆管癌组织与癌旁正常组织SPOP、COMP表达情况,比较不同临床病理特征患者癌组织SPOP、COMP阳性表达率。随访2年,比较不同临床病理特征患者生存时间,采用多因素Cox回归分析肝内胆管癌患者预后不良的影响因素。结果肝内胆管癌组织SPOP低表达率、COMP高表达率(63.75%、66.25%)均高于癌旁正常组织(41.25%、18.75%)(χ^(2)=8.120,P=0.004;χ^(2)=36.931,P<0.001)。SPOP低表达率、COMP高表达率在TNM分期Ⅲ~Ⅳ期患者(80.85%、82.98%)高于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期者(39.39%、42.42%)、有淋巴结转移患者(85.71%、90.48%)高于无淋巴结转移者(55.93%、57.63%)(χ^(2)=7.474~14.419,P均<0.05)。TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、肿瘤多发、SPOP低表达、COMP高表达患者生存时间[(7.34±2.14)、(6.41±2.24)、(7.37±2.36)、(9.24±2.39)、(9.97±2.71)个月]短于TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无淋巴结转移、肿瘤单发、SPOP高表达、COMP低表达者[(15.86±4.79)、(13.25±3.68)、(15.23±4.09)、(15.58±3.35)、(16.39±4.36)个月](t=7.151~10.779,P均<0.05)。TNM分期(HR=1.931,95%CI:1.176~3.171,P=0.024)、淋巴结转移(HR=1.984,95%CI:1.213~3.245,P=0.017)、SPOP(HR=3.121,95%CI:1.508~6.456,P<0.001)和COMP表达情况(HR=2.662,95%CI:1.362~5.202,P<0.001)是肝内胆管癌患者预后不良的影响因素。结论肝内胆管癌患者癌组织SPOP呈低表达、COMP呈高表达,TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有淋巴结转移、SPOP低表达、COMP高表达的肝内胆管癌患者预后不良的风险较大。 展开更多

关键词 肝内胆管癌 spop 软骨寡聚基质蛋白 预后

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SENP1在SPOP去SUMO化修饰中的作用研究 被引量：1

3

作者 张赟豪 韩博昂 +5 位作者 王瑜 朱琴 乐珅 俞婷婷 程雁 刘晨 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS 北大核心 2024年第6期753-761,共9页

目的:研究小泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)修饰对SPOP(speckle type BTB/POZ protein)蛋白水平和细胞定位的影响,并尝试在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中探讨SUMO特异性蛋白酶1(sentr... 目的:研究小泛素相关修饰物(small ubiquitin-related modifier,SUMO)修饰对SPOP(speckle type BTB/POZ protein)蛋白水平和细胞定位的影响,并尝试在肾透明细胞癌(clear cell renal cell carcinoma,ccRCC)中探讨SUMO特异性蛋白酶1(sentrin-specific proteases 1,SENP1)和SPOP之间的相关性。方法:利用野生型(wild type,WT)和Senp1敲除的小鼠胚胎成纤维细胞研究Senp1对Spop蛋白水平和细胞定位的影响,并通过比较外源WT-Spop和Spop的SUMO修饰位点突变体的蛋白表达量,进一步确认SUMO修饰对Spop蛋白水平的影响。后续通过邻位连接技术(proximity ligation assay,PLA)研究WT-Spop及其SUMO修饰位点突变体与SUMO1的结合能力。最后通过ccRCC患者的RNA表达数据和ccRCC细胞系探讨SENP1和SPOP在ccRCC中的相关性。结果:Senp1敲除下调小鼠胚胎成纤维细胞中Spop的蛋白量和稳定性,但不影响其细胞核定位。突变Spop的SUMO修饰位点后,其与Sumo1的结合能力下降,蛋白量也有所降低。SENP1和SPOP的表达在ccRCC中呈正相关。结论:Senp1通过去SUMO化修饰稳定Spop蛋白,SENP1和SPOP的表达在ccRCC中呈正相关。 展开更多

关键词 spop SENP1 SUMO修饰 肾透明细胞癌

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SPOP促进SETD2蛋白的降解并增强肾癌细胞的体外成瘤与增殖能力 被引量：6

4

作者 刘全海 赵文彩 +5 位作者 申骏龙 周建成 杜双宽 程永毅 孙羿 屈卫星 《现代肿瘤医学》 CAS 2017年第13期2019-2023,共5页

目的:新近发现E3泛素化连接酶的成员之一SPOP在肾癌中作用关键,我们前期的研究表明SPOP在肾癌中表达上调且通过活化β-Catenin的活性来促进肾癌细胞的侵袭与转移。本研究继续研究SPOP在肾癌成瘤与增殖中的作用,并探索其潜在的分子机制... 目的:新近发现E3泛素化连接酶的成员之一SPOP在肾癌中作用关键,我们前期的研究表明SPOP在肾癌中表达上调且通过活化β-Catenin的活性来促进肾癌细胞的侵袭与转移。本研究继续研究SPOP在肾癌成瘤与增殖中的作用,并探索其潜在的分子机制。方法:siRNA靶向沉默肾癌细胞内SPOP的表达后,采用克隆形成实验及MTT实验检测细胞的体外成瘤与增殖能力的变化;运用realtime-PCR及western blot技术探索SPOP在肾癌细胞内发挥生物学功能的潜在靶分子;采用免疫组织化学方法检测SPOP与其靶分子SETD2在人肾癌组织中的表达情况,并行相关性分析。结果:SPOP siRNA显著减低肾癌细胞的体外成瘤及增殖能力;SPOP的变化不影响肾癌细胞内SETD2 mRNA的表达,但当采用蛋白合成抑制剂cycloheximide预先阻断细胞内SETD2蛋白的合成后,SPOP siRNA能明显延缓SETD2蛋白的降解。进一步检测人肾癌组织标本中SPOP与SETD2的表达结果证实,SPOP与SETD2蛋白的表达呈显著的负相关(r=-0.41,P<0.05)。结论:SPOP能增强肾癌细胞的体外成瘤与增殖能力,其潜在的机制可能为促进抑癌蛋白SETD2的降解。 展开更多

关键词 肾癌 spop SETD2 肿瘤形成 增殖

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SPOP蛋白在肾细胞癌中的表达及其功能的研究进展 被引量：1

5

作者 陈志 李伟 《临床泌尿外科杂志》 2020年第2期153-157,共5页

肾细胞癌(肾癌)约占肾恶性肿瘤的85%,肾透明细胞癌是肾癌最常见的组织亚型,早期往往缺乏临床表现,多数被诊断为肾细胞癌的患者已到了肾癌晚期。早期肾癌的患者通过根治性肾切除术可以达到较好的治愈效果。晚期肾癌具有多药物耐药基因,... 肾细胞癌(肾癌)约占肾恶性肿瘤的85%,肾透明细胞癌是肾癌最常见的组织亚型,早期往往缺乏临床表现,多数被诊断为肾细胞癌的患者已到了肾癌晚期。早期肾癌的患者通过根治性肾切除术可以达到较好的治愈效果。晚期肾癌具有多药物耐药基因,对放化疗均不敏感,目前仍没有理想的治疗手段;靶向治疗是晚期肾癌的一线治疗方案,但长期使用靶向药物后容易出现耐药及相关的不良反应。因此,迫切需要探索肾癌的敏感生物标志物和特异性治疗靶点。SPOP蛋白作为E3泛素连接酶CUL-3的接头分子,能与肿瘤细胞中的多种蛋白结合,促使靶蛋白发生泛素化和降解。以往的研究发现,SPOP蛋白在肾癌细胞胞质中呈过表达状态,特别是在肾透明细胞癌中高度表达,并可能通过对肾癌细胞中的肿瘤相关因子,如抑癌因子PTEN、死亡结构域相关蛋白DAXX等进行泛素化和降解发挥促癌作用。在本文中,我们将对SPOP蛋白在肾癌中的表达及其分子功能的研究进展作以下综述。 展开更多

关键词 spop蛋白 肾细胞癌 靶向治疗

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Molecular Cell:SPOP通过促进ERG蛋白泛素化和降解抑制前列腺癌进展 被引量：1

6

作者 郭鹏 《现代泌尿外科杂志》 CAS 2015年第10期749-749,共1页

已知有65%的前列腺癌存在SPOP突变或TMPRSS2-ERG重排,虽然这两个事件相互排斥,但人们还不清楚二者在功能上是否相关。来自中国长海医院和美国Mayo中心的团队、哈佛大学医学院的研究人员,分别独立发现相似的研究成果：SPOP通过促进ERG癌... 已知有65%的前列腺癌存在SPOP突变或TMPRSS2-ERG重排,虽然这两个事件相互排斥,但人们还不清楚二者在功能上是否相关。来自中国长海医院和美国Mayo中心的团队、哈佛大学医学院的研究人员,分别独立发现相似的研究成果：SPOP通过促进ERG癌蛋白泛素化和降解抑制了前列腺癌进展,为前列腺癌治疗提供了新的重要靶点。两篇论文最近在线发表在Molecular Cell（AN J,REN S,MURPHY SJ,et al. Molecular Cell 59, http：//dx. doi. org/10. 1016/j. molcel. 2015. 07. 25; GAN W, DAI X, LUNARDI A, et al. Molecular Cell 59, ht- tp：//dx, doi. org/10. 1016/j. moleel. 2015.07.26）杂志上。 展开更多

关键词 前列腺癌 肿瘤抑制 spop突变 ERG基因 TMPRSS2-ERG重排

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miR-101靶向调控SPOP影响口腔鳞癌转移机制的研究

7

作者 许志鹏 陈琳 +2 位作者 李建虎 高岭 郅克谦 《现代肿瘤医学》 CAS 2018年第21期3358-3363,共6页

目的:探讨miR-101对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞SPOP基因的靶向关系及其对细胞迁移的影响。方法:使用Real time-PCR技术检测miR-101在OSCC细胞中的表达;利用生物信息分析预测SPOP可能是miR-101靶基因,将miR-... 目的:探讨miR-101对口腔鳞状细胞癌(oral squamous cell carcinoma,OSCC)细胞SPOP基因的靶向关系及其对细胞迁移的影响。方法:使用Real time-PCR技术检测miR-101在OSCC细胞中的表达;利用生物信息分析预测SPOP可能是miR-101靶基因,将miR-101转染至Tca-8113细胞株,通过增强或者抑制miR-101的表达,利用蛋白质印迹实验检测SPOP表达,从而判断两者靶向关系;利用细胞迁移试验,通过miR-101表达强弱改变,判断Tca-8113细胞株迁移能力的变化情况。结果:miR-101在三个OSCC细胞株中表达均降低;在Tca-8113细胞株中增强miR-101表达,则SPOP表达下降,细胞迁移能力减弱;抑制miR-101表达,则SPOP表达升高,细胞迁移能力增强。结论:miR-101对OSCC细胞SPOP有靶向抑制作用,并且可以抑制OSCC细胞转移。 展开更多

关键词 口腔鳞状细胞癌 miR-101 spop 调控

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人SPOP真核表达质粒的构建及其在胃癌细胞中的表达

8

作者 曾春艳 罗时文 《重庆医学》 CAS 北大核心 2015年第17期2335-2337,共3页

目的构建人pUB6/V5-HisB-SPOP真核表达质粒及稳定表达外源性人SPOP基因的人胃癌AGS细胞系。方法采用基因重组技术将人SPOP cDNA插入真核表达载体pUB6/V5-HisB,构建人pUB6/V5-HisB真核表达质粒。脂质体介导空载体pUB6/V5-HisB和表达质粒p... 目的构建人pUB6/V5-HisB-SPOP真核表达质粒及稳定表达外源性人SPOP基因的人胃癌AGS细胞系。方法采用基因重组技术将人SPOP cDNA插入真核表达载体pUB6/V5-HisB,构建人pUB6/V5-HisB真核表达质粒。脂质体介导空载体pUB6/V5-HisB和表达质粒pUB6/V5-HisB-SPOP分别转染人胃癌AGS细胞株,杀稻瘟菌素筛选阳性克隆,扩大培养,逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)分别检测SPOP mRNA和蛋白表达。结果双酶切和基因测序结果均证实人pUB6/V5-HisB-SPOP真核表达质粒构建成功。SPOP转染组与空白对照组、空载体组比较,SPOP蛋白表达显著上调(P<0.05)。结论成功构建人SPOP真核表达质粒并获得稳定表达SPOP基因的胃癌AGS细胞系,为进一步研究SPOP基因在胃癌发生发展中作用奠定实验基础。 展开更多

关键词 胃肿瘤 spop AGS细胞 基因表达

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SPOP蛋白在肾透明细胞癌中的表达 被引量：6

9

作者 卢国栋 袁明振 +1 位作者 俎树禄 赵升田 《山东大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第7期74-77,共4页

目的检测SPOP蛋白在人肾透明细胞癌细胞株、肾透明细胞癌组织及正常肾组织中的表达,探讨其表达与肾透明细胞癌的关系。方法采用免疫细胞化学EnVision二步法检测肾癌细胞株A498中SPOP的表达情况。取山东大学第二医院泌尿外科肾癌患者手... 目的检测SPOP蛋白在人肾透明细胞癌细胞株、肾透明细胞癌组织及正常肾组织中的表达,探讨其表达与肾透明细胞癌的关系。方法采用免疫细胞化学EnVision二步法检测肾癌细胞株A498中SPOP的表达情况。取山东大学第二医院泌尿外科肾癌患者手术标本,采用HE染色明确肿瘤病理分级,分别采用免疫组织化学EnVision二步法、蛋白质印迹法定性及定量检测肾透明细胞癌及正常肾组织中SPOP的表达水平。结果 SPOP在人肾癌细胞株A498、肾透明细胞癌组织中均为阳性表达,正常肾组织中SPOP表达为阴性。结论 SPOP可能是一种肾透明细胞癌的分子标记物,对其监测将有可能协助肾透明细胞癌的诊断。 展开更多

关键词 肾肿瘤 spop蛋白 A498细胞 泛素化 免疫组织化学法

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SPOP对卵巢癌细胞生物学行为的影响及其分子机制的研究 被引量：2

10

作者 李若涵 袁冬 +4 位作者 余秋波 罗婧 李颜希 孙一瑄 杨竹 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第4期1878-1885,共8页

探讨人卵巢癌组织中斑点状蛋白(SPOP)的表达及对其卵巢癌细胞生物行为学的影响及相关机制。采用免疫组化技术分别检测正常卵巢组织10例、卵巢癌组织90例的组织芯片中SPOP的表达;体外培养永生化人卵巢癌细胞株OVCAR-3、SKOV3及永生化的... 探讨人卵巢癌组织中斑点状蛋白(SPOP)的表达及对其卵巢癌细胞生物行为学的影响及相关机制。采用免疫组化技术分别检测正常卵巢组织10例、卵巢癌组织90例的组织芯片中SPOP的表达;体外培养永生化人卵巢癌细胞株OVCAR-3、SKOV3及永生化的人卵巢表皮上皮细胞株HOSE,RT-PCR、WB检测3种细胞株SPOP的表达。用慢病毒稳定转染OVCAR-3、HOSE细胞株,构建过表达、敲低SPOP的细胞株。流式细胞仪检测转染后细胞株的凋亡,CCK8检测转染后细胞株的增殖情况,Transwell小室检测转染后细胞株的迁移侵袭情况。WB检测转染后细胞株PI3K-Akt通路相关蛋白的表达情况。组织学免疫组化评分显示卵巢癌组织染色明显高于正常卵巢组织。细胞学实验显示,成功构建过表达、敲低SPOP的OVCAR-3细胞,过表达组、过表达空载组、敲低组、敲低空载组细胞凋亡及增殖能力无明显差异;各组细胞迁移及侵袭结果与空载组有明显差异,且差异有统计学意义(p<0.05)。过表达组细胞P-GSK3β(Ser9)表达水平明显低于敲低组(p<0.05),MMP-9表达水平明显高于敲低组(p<0.05)。SPOP在卵巢癌组织中表达上升,且具有促进卵巢癌细胞迁移侵袭的作用,其调节机制可能与p-GSK3β(Ser9)通路相关。 展开更多

关键词 人卵巢癌 卵巢癌细胞 spop 迁移 侵袭 MMP9

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SPOP蛋白在胃癌中的表达及其临床意义

11

作者 徐骏飞 《交通医学》 2017年第5期409-412,共4页

目的:探讨SPOP蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:使用Western blot方法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测60例胃癌组织及癌旁组织中SPOP蛋白和mRNA表达,采用Pearsonχ~2检验胃癌中SPOP表达与临床病理学特征的相关性... 目的:探讨SPOP蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法:使用Western blot方法和实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)法检测60例胃癌组织及癌旁组织中SPOP蛋白和mRNA表达,采用Pearsonχ~2检验胃癌中SPOP表达与临床病理学特征的相关性,采用Kaplan-Meier法分析SPOP表达与胃癌患者生存期的关系,Cox回归分析各因素与生存期的关系。结果:胃癌组织SPOP蛋白及mRNA表达水平明显低于癌旁组织,差异具有统计学意义(P<0.05)。SPOP表达与胃癌TNM分期(P=0.038)、分化程度(P=0.029)、浸润深度(P=0.009)、淋巴结转移(P=0.001)相关,但与患者性别、年龄、肿瘤大小以及是否远处转移无关。Cox比例风险模型分析发现,SPOP表达(P=0.002)、TNM分期(P=0.018)及分化程度(P=0.010)是影响胃癌生存预后的独立因素;SPOP高表达组患者的生存率高于低表达组,差异有统计学意义(P=0.036)。结论:SPOP可能参与胃癌的发生发展,是胃癌独立的预后影响因素。 展开更多

关键词 胃癌 spop蛋白 复发 预后

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埃洛石纳米管偶联SPOP抗体负载抗癌药物靶向控释作用研究 被引量：1

12

作者 姚希辉 刘昊阳 +2 位作者 徐怡 陈云 田卫群 《功能材料》 EI CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1121-1126,共6页

通过对埃洛石纳米管(HNTs)表面用生物活性分子进行修饰,使其具备靶向特性,探讨其负载抗癌药物及其靶向控制释放给药作用效果。首先对HNTs表面进行氨基化修饰,再偶联肾癌标志物斑点型POZ蛋白(speckle-type POZ protein,SPOP)抗体,构建HNT... 通过对埃洛石纳米管(HNTs)表面用生物活性分子进行修饰,使其具备靶向特性,探讨其负载抗癌药物及其靶向控制释放给药作用效果。首先对HNTs表面进行氨基化修饰,再偶联肾癌标志物斑点型POZ蛋白(speckle-type POZ protein,SPOP)抗体,构建HNTs-SPOPab靶向载体,采用扫描电镜、透射电镜、傅立叶变换红外光谱、X射线衍射图谱等对其进行形态和性能表征;然后在HNTs-SPOPab管腔内载入抗肾癌药物索拉菲尼(sorafenib,SOR),与肾癌细胞A498共培养24h,通过流式细胞仪检测证实有抑制肾癌细胞生长增殖的作用。另外,还在HNTs-SPOPab管腔内载入了另一种抗肺癌药物吉西他滨(gemcitabine,GEM),与肺癌细胞A549(无SPOP特异抗原)共培养24h,通过Edu掺入试验,观察其对肺癌细胞增殖的抑制效果。HNTs-SPOPab作为药物载体具有相对稳定的结构和功能。流式结果显示HNTs-SPOPab负载索拉菲尼对肾癌细胞周期具有更强的抑制作用,抑制百分率相对于无药物载体的原药直接给药组提高了(16.12±0.45)%。Edu掺入实验结果表明,HNTsSPOPab负载GEM对肺癌细胞抑制作用虽然相对于直接给药组略高,荧光抑制比率HNTs-SPOPab-GEM:(94.12±3.91)%>GEM:(87.83±1.42)%,但两组间无显著性差异。HNTs-SPOPab作为一种新的纳米靶向药物载体,具有靶向肾癌细胞给药传递的潜能。 展开更多

关键词 埃洛石纳米管 spop 靶向控制释放 抗癌药物 药物载体

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慢病毒转染SPOP基因对滋养层细胞HTR8-SVneo增殖和侵袭的影响及其机制 被引量：2

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作者 袁冬 陈奕余 余秋波 《基因组学与应用生物学》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期2353-2360,共8页

为了探讨慢病毒转染SPOP基因后对滋养层细胞HTR8-SVneo增殖和侵袭能力的影响,并阐明其可能的机制,分别构建过表达和敲低SPOP基因的慢病毒载体,转入到HTR8-SVneo细胞中。分别在荧光显微镜下观察转染的荧光效率。用qRT-PCR法检测感染病毒... 为了探讨慢病毒转染SPOP基因后对滋养层细胞HTR8-SVneo增殖和侵袭能力的影响,并阐明其可能的机制,分别构建过表达和敲低SPOP基因的慢病毒载体,转入到HTR8-SVneo细胞中。分别在荧光显微镜下观察转染的荧光效率。用qRT-PCR法检测感染病毒后的细胞中SPOP mRNA的表达量,Western blotting法检测各组细胞中SPOP、PTEN、AKT、p-AKT、GSK3β、p-GSK3β和GAPDH的表达量。采用CCK-8法检测各组细胞的增殖活力,Transwell小室法检测各组细胞的侵袭能力。结果显示,在HTR8-SVneo、JAR和JEG3这3种滋养层细胞中,HTR8-SVneo细胞中SPOP蛋白表达相对最高。HTR8-SVneo细胞经慢病毒转染后,与对照组比较,过表达组中SPOP mRNA和蛋白表达量明显升高(p<0.01),PTEN蛋白表达量升高,而p-AKT和p-GSK3β表达量降低,细胞的侵袭能力明显下降(p<0.05),细胞增殖活力无明显变化。相反,敲低组中SPOP mRNA和蛋白表达量明显下降(p<0.01),PTEN蛋白表达量降低,p-AKT和p-GSK3β表达量升高,细胞的侵袭能力和增殖活力均明显增强(p<0.05)。研究结果表明,慢病毒转染SPOP基因可以影响滋养层细胞HTR-8/SVneo的增殖和迁移能力,其机制可能与PTEN/AKT/GSK3β信号通路调节有关。 展开更多

关键词 spop HTR8-SVneo 增殖 侵袭 PTEN/AKT/GSK3β

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SPOP上调c-Jun蛋白表达并促进肾癌细胞的增殖和侵袭 被引量：6

14

作者 吴林慧 余珂 +3 位作者 崔悦 朱雪莲 杨正 马佳 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第3期447-452,共6页

目的探讨SPOP对肾癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等的影响及潜在的作用机制。方法体外培养肾癌细胞株786-O、A704、Caki-2,对照组(EV)和过表达组(SPOP)质粒采用脂质体法转染至上述肾癌细胞株;分别利用克隆形成实验及MTT法检测SPOP基因对... 目的探讨SPOP对肾癌细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭等的影响及潜在的作用机制。方法体外培养肾癌细胞株786-O、A704、Caki-2,对照组(EV)和过表达组(SPOP)质粒采用脂质体法转染至上述肾癌细胞株;分别利用克隆形成实验及MTT法检测SPOP基因对肾癌细胞株增殖的影响;采用TUNEL法检测SPOP基因对肾癌细胞株凋亡的影响;利用创伤愈合实验和Transwell实验检测SPOP基因对肾癌细胞株迁移和侵袭能力的作用;运用Real-time PCR和Western blotting技术检测转染后肾癌细胞株SPOP和c-Jun的mRNA水平以及相关蛋白的表达情况。结果在786-O、A704、Caki-2细胞上调SPOP的表达能促进肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭(P<0.05);与对照组相比,SPOP组的肾癌细胞株786-O、Caki-2的凋亡率较对照组相对减少(P<0.05);Real-time PCR结果显示,c-Jun mRNA的表达水平未发生改变,但Western blotting结果显示,SPOP组肾癌细胞株786-O、Caki-2的SPOP蛋白表达明显高于对照组(P<0.05),c-Jun蛋白的表达也明显高于对照组(P<0.05)。结论SPOP能促进肾癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,抑制肾癌细胞的凋亡,潜在的机制可能为促进c-Jun的表达。 展开更多

关键词 spop C-JUN 肾癌 增殖 迁移 侵袭 凋亡

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鸡SPOP和MyD88基因分子特征及其组织表达特性分析 被引量：3

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作者 王燕碧 赵采芹 +4 位作者 唐宏 周磊 韩一帆 张福平 段志强 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期3111-3120,共10页

【目的】掌握SPOP和MyD88基因分子特征及其在鸡不同组织发育过程中的表达特征,为后续研究其调控鸡组织生长发育机理及开展抗病育种提供参考依据。【方法】通过RT-PCR克隆鸡SPOP和MyD88基因编码区(CDS)序列,运用ExPASy、SOPMA、SWISS-MO... 【目的】掌握SPOP和MyD88基因分子特征及其在鸡不同组织发育过程中的表达特征,为后续研究其调控鸡组织生长发育机理及开展抗病育种提供参考依据。【方法】通过RT-PCR克隆鸡SPOP和MyD88基因编码区(CDS)序列,运用ExPASy、SOPMA、SWISS-MODEL及PSORT II Prediction等在线软件进行生物信息学分析,并以实时荧光定量PCR检测这2个基因在鸡胚14胚龄(E14 d)及出壳后1 d(H1 d)、7 d(H7 d)和14 d(H14 d)各组织中的表达情况。【结果】鸡SPOP、MyD88基因CDS序列长为1125和900 bp,分别编码374和299个氨基酸残基。SPOP蛋白分子式为C_(1866)H_(2926)N_(496)O_(559)S_(28),相对分子量为42 kD,理论等电点(pI)为5.58,为相对不稳定蛋白;MyD88蛋白分子式为C_(1502)H_(2394)N_(410)O_(438)S_(18),相对分子量为33 kD,pI为5.93,为相对不稳定蛋白。鸡SPOP和MyD88蛋白二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主,主要定位于细胞质(占60.9%)。与人类和哺乳动物相比,鸡SPOP蛋白的3个功能结构域(MATH、BTB-POZ和BACK)较保守,而MyD88蛋白的2个功能结构域(Death和TIR)存在多处氨基酸位点变异。SPOP和MyD88基因在鸡不同发育阶段各组织中均有表达,但以肺脏中的相对表达量最高,且二者间的表达差异极显著(P<0.01,下同)。从E14 d发育至H14 d,SPOP基因在眼球和肺脏中的表达整体上呈上升趋势,且至H14 d时肺脏中的表达趋于稳定,在脑组织、心脏和肌胃中的表达呈先上升后下降的变化趋势,在肝脏中的表达呈先下降后上升再下降的变化趋势;MyD88基因在眼球、肝脏和肺脏中的表达均呈先上升后下降再上升的变化趋势,在肌胃和胸肌中的表达呈下降趋势,至H14 d时降至最低值。【结论】SPOP和MyD88基因在鸡胚不同发育阶段肺脏、眼球和肌胃中的表达相对较高,SPOP基因的表达水平均极显著高于MyD88基因,且二者的相对表达量呈负相关,即SPOP基因负调控MyD88基因的表达。 展开更多

关键词 鸡 spop基因 MyD88基因 分子特征 组织表达

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SPOP在肿瘤发生中的作用 被引量：2

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作者 张方军 何素 金志刚 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2020年第6期1104-1112,共9页

SPOP(speckle type BTB/POZ protein)是E3泛素连接酶接头蛋白,SPOP的缺失或突变通常引发包括肿瘤在内的多种疾病。迄今为止,已经报道多种肿瘤的发生发展与SPOP基因的缺失或突变有关。SPOP发挥的功能具有组织特异性,SPOP主要通过泛素–... SPOP(speckle type BTB/POZ protein)是E3泛素连接酶接头蛋白,SPOP的缺失或突变通常引发包括肿瘤在内的多种疾病。迄今为止,已经报道多种肿瘤的发生发展与SPOP基因的缺失或突变有关。SPOP发挥的功能具有组织特异性,SPOP主要通过泛素–蛋白酶体途径降解促进肿瘤生长、侵袭和转移等过程的蛋白,从而在前列腺癌、子宫内膜癌和乳腺癌中发挥抑癌基因的作用。该文讨论了SPOP在不同组织来源肿瘤的进展过程中的作用及其作用机制。 展开更多

关键词 spop 肿瘤发生 抑癌基因 泛素化

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E3泛素连接酶接头蛋白SPOP抑制子宫内膜癌研究的进展 被引量：1

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作者 庄慧 林子涵 +2 位作者 林婷 曹心怡 金晓锋 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2021年第4期423-433,共11页

子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)是最常见的妇科恶性肿瘤,其发病率逐年上升.近年来,随着靶向治疗在临床上的广泛应用,探索与研究新靶点成为实现子宫内膜癌精准治疗的重要一环.越来越多的研究发现,E3泛素连接酶斑点型锌指结构蛋白(spe... 子宫内膜癌(endometrial cancer,EC)是最常见的妇科恶性肿瘤,其发病率逐年上升.近年来,随着靶向治疗在临床上的广泛应用,探索与研究新靶点成为实现子宫内膜癌精准治疗的重要一环.越来越多的研究发现,E3泛素连接酶斑点型锌指结构蛋白(speckle-type POZ protein,SPOP)对子宫内膜癌的发生发展起到了重要的抑制作用.本文将介绍泛素-蛋白酶体系统(ubiquitin-proteasome system,UPS)SPOP的结构、功能,探讨调控和影响SPOP的因素以及SPOP在子宫内膜癌中的突变情况和相关底物.重点围绕SPOP的下游三条信号通路:雌激素受体α(estrogen receptor-α,ERα)介导的信号通路、溴结构域和端外蛋白(bromodomain and extraterminal protein,BET)通路及锌指和BTB结构域蛋白3(zinc finger and BTB domain-containing protein 3,ZBTB3)通路,对它们抑制子宫内膜癌发生发展的分子机制进行总结,以期为SPOP作为新的子宫内膜癌治疗靶点提供理论基础. 展开更多

关键词 子宫内膜癌 泛素化修饰 spop 突变

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E3泛素连接酶接头蛋白SPOP抑制前列腺癌的研究进展

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作者 李倩(综述) 王健 金晓锋(审校) 《复旦学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期929-937,共9页

前列腺癌(prostate cancer,Pca)是男性最常见的肿瘤之一,发病率和病死率呈逐年上升趋势,发生发展的遗传因素复杂多样。随着靶向治疗广泛应用于临床,新靶点的探索与研究在Pca的精准治疗中至关重要。研究发现E3泛素连接酶斑点型锌指结构蛋... 前列腺癌(prostate cancer,Pca)是男性最常见的肿瘤之一,发病率和病死率呈逐年上升趋势,发生发展的遗传因素复杂多样。随着靶向治疗广泛应用于临床,新靶点的探索与研究在Pca的精准治疗中至关重要。研究发现E3泛素连接酶斑点型锌指结构蛋白(speckle-type POZ protein,SPOP)在Pca的发生发展中起重要抑制作用。本文重点介绍SPOP的结构、功能及其在Pca中的突变情况及相关底物;总结SPOP抑制Pca发生发展的分子机制:调控雄激素受体(androgen receptor,AR)介导的信号通路,DNA损伤修复及免疫应答;探讨SPOP在Pca中的临床意义及研究中存在的机遇与挑战。 展开更多

关键词 前列腺癌(Pca) spop 泛素化修饰 雄激素受体(AR) 信号通路

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泛素E3连接酶接头蛋白SPOP和MDM2在DNA损伤修复中的作用 被引量：1

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作者 林子涵 曹心怡 金晓锋 《中国细胞生物学学报》 CAS CSCD 2021年第1期110-117,共8页

DNA损伤修复是维持细胞基因组稳定性和完整性的基础,越来越多的研究发现,E3泛素连接酶在DNA损伤修复中起着重要的作用。该文将介绍DNA损伤修复的机制、DNA损伤修复与疾病的关系、及E3泛素连接酶接头蛋白MDM2和SPOP在DNA损伤修复中的作... DNA损伤修复是维持细胞基因组稳定性和完整性的基础,越来越多的研究发现,E3泛素连接酶在DNA损伤修复中起着重要的作用。该文将介绍DNA损伤修复的机制、DNA损伤修复与疾病的关系、及E3泛素连接酶接头蛋白MDM2和SPOP在DNA损伤修复中的作用。重点围绕DNA损伤修复的两条通路:E3泛素连接酶接头蛋白SPOP与ATM/ATR信号通路以及MDM2/p53信号通路对DNA修复的分子机制进行总结,以期为DNA损伤修复提供新思路。 展开更多

关键词 DNA损伤修复 ATM/ATR spop MDM2 P53

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抑癌基因SPOP在前列腺癌中的研究进展

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作者 马俊豪 李亚东 +1 位作者 谭伟 刘川 《临床医学进展》 2022年第4期2857-2863,共7页

前列腺癌(prostate cancer, PCa)仍是全球男性第二大常见癌症,发病率逐年上升,严重威胁男性健康。随着基因组学及蛋白组学的发展,我们对前列腺的基因组及分子复杂性有了新的认识。斑点型锌指结构蛋白(speckle-type POZ (pox virus and z... 前列腺癌(prostate cancer, PCa)仍是全球男性第二大常见癌症,发病率逐年上升,严重威胁男性健康。随着基因组学及蛋白组学的发展,我们对前列腺的基因组及分子复杂性有了新的认识。斑点型锌指结构蛋白(speckle-type POZ (pox virus and zinc finger) protein, SPOP)作为一个抑癌基因,当其突变或下调时,可促进肿瘤发生,本文就SPOP在PCa中发挥的重要作用及其最新的研究进展作一个系统的综述。 展开更多

关键词 前列腺癌(PCa) 抑癌基因 spop 泛素化修饰

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