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南方水稻黑条矮缩病毒安徽分离物S5片段的克隆及S5-2基因的原核表达
被引量:
1
1
作者
江彤
单文书
+2 位作者
夏伟伟
张享享
蒋西子
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期58-62,共5页
【目的】探讨南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)安徽分离物(SRBSDVAn Hui-HN2)的遗传特性,并获得原核表达的P5-2蛋白。【方法】RT-PCR扩增SRBSDV S5片段,克隆、测序并进行序列分析。将S5-2基因插...
【目的】探讨南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)安徽分离物(SRBSDVAn Hui-HN2)的遗传特性,并获得原核表达的P5-2蛋白。【方法】RT-PCR扩增SRBSDV S5片段,克隆、测序并进行序列分析。将S5-2基因插入原核表达载体,重组载体转化大肠埃希菌并用IPTG诱导,Ni2+-NTA亲和柱纯化融合蛋白,SDS-PAGE分析P5-2蛋白的表达情况。【结果】SRBSDV-An Hui-HN2 S5片段全长3 167 bp,包含S5-2基因全长612 bp,编码204个氨基酸。序列比对结果显示,SRBSDV-An Hui-HN2 S5片段与其他SRBSDV分离物S5片段的序列相似性极高,达99.0%~99.7%,而与斐济病毒属(Fijivirus)其他成员S5片段的序列相似性较低,仅为38.0%~71.3%;构建的S5片段系统发育树表明SRBSDV和RBSDV聚成1个分支,其中6个SRBSDV分离物聚成1个亚分支。原核表达获得相对分子质量约为47 000的重组蛋白,Western blot分析显示,GST单抗能够与重组融合蛋白发生特异性反应。【结论】SRBSDV各分离物之间亲缘关系非常近,而与Fijivirus其他成员亲缘关系较远,原核表达获得的融合蛋白为靶标蛋白。
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关键词
南方水稻黑条矮缩病毒
s5
片段
s5
-2基因
原核表达
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职称材料
题名
南方水稻黑条矮缩病毒安徽分离物S5片段的克隆及S5-2基因的原核表达
被引量:
1
1
作者
江彤
单文书
夏伟伟
张享享
蒋西子
机构
安徽农业大学植物保护学院
出处
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017年第1期58-62,共5页
基金
国家自然科学基金(31371915)
公益性行业(农业)科研专项(201303028)
文摘
【目的】探讨南方水稻黑条矮缩病毒(Southern rice black-streaked dwarf virus,SRBSDV)安徽分离物(SRBSDVAn Hui-HN2)的遗传特性,并获得原核表达的P5-2蛋白。【方法】RT-PCR扩增SRBSDV S5片段,克隆、测序并进行序列分析。将S5-2基因插入原核表达载体,重组载体转化大肠埃希菌并用IPTG诱导,Ni2+-NTA亲和柱纯化融合蛋白,SDS-PAGE分析P5-2蛋白的表达情况。【结果】SRBSDV-An Hui-HN2 S5片段全长3 167 bp,包含S5-2基因全长612 bp,编码204个氨基酸。序列比对结果显示,SRBSDV-An Hui-HN2 S5片段与其他SRBSDV分离物S5片段的序列相似性极高,达99.0%~99.7%,而与斐济病毒属(Fijivirus)其他成员S5片段的序列相似性较低,仅为38.0%~71.3%;构建的S5片段系统发育树表明SRBSDV和RBSDV聚成1个分支,其中6个SRBSDV分离物聚成1个亚分支。原核表达获得相对分子质量约为47 000的重组蛋白,Western blot分析显示,GST单抗能够与重组融合蛋白发生特异性反应。【结论】SRBSDV各分离物之间亲缘关系非常近,而与Fijivirus其他成员亲缘关系较远,原核表达获得的融合蛋白为靶标蛋白。
关键词
南方水稻黑条矮缩病毒
s5
片段
s5
-2基因
原核表达
Keywords
Southern rice black-streaked dwarf virus
s5 segment
s5
-2 gene
prokaryotic expression
分类号
S435.111.4 [农业科学—农业昆虫与害虫防治]
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作者
出处
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被引量
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1
南方水稻黑条矮缩病毒安徽分离物S5片段的克隆及S5-2基因的原核表达
江彤
单文书
夏伟伟
张享享
蒋西子
《华南农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2017
1
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