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基于RUBY及CaREF1的辣椒高效遗传转化体系构建 被引量:3
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作者 王中一 刘熠 +7 位作者 胡博文 朱凡 刘峰 杨莎 熊程 欧立军 戴雄泽 邹学校 《园艺学报》 北大核心 2025年第4期1093-1104,共12页
以新型可视化报告系统RUBY为标记,筛选获得基因递送高效辣椒受体材料3份,并结合促再生因子小肽CaREF1,构建了辣椒高效遗传转化体系。结果表明,线椒‘L27’、朝天椒‘遵辣1号’及珠子椒‘1-51’的基因瞬时表达效率显著高于其他材料;利用... 以新型可视化报告系统RUBY为标记,筛选获得基因递送高效辣椒受体材料3份,并结合促再生因子小肽CaREF1,构建了辣椒高效遗传转化体系。结果表明,线椒‘L27’、朝天椒‘遵辣1号’及珠子椒‘1-51’的基因瞬时表达效率显著高于其他材料;利用搭载RUBY报告系统的发根农杆菌K599进行遗传转化,于不定芽再生分化培养基(MS+5 mg·L^(-1)6-BA+1.2 mg·L^(-1)IAA+10 nmol·L^(-1)CaREF1)及壮芽培养基[MS+(5~10)mg·L^(-1)6-BA+0.5 mg·L^(-1)IAA+3 mg·L^(-1)GA3+10 nmol·L^(-1)CaREF1]培养60 d后,平均再生效率可达84%±7%,平均再生芽数约为5.52个,阳性转化率约为5‰。基于该体系建立了辣椒农杆菌介导的可视化遗传转化体系,且有效在多个辣椒种质中实现了CRISPR/Cas9介导的基因编辑,T_(0)代植株编辑效率高达100%。 展开更多
关键词 辣椒 遗传转化 RUBY 再生因子ref1 基因编辑
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压力及维生素B_1作用下视网膜神经细胞p53、MDM_2及Ref1基因的表达 被引量:1
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作者 杨智宽 葛坚 +3 位作者 银巍 申煌煊 刘海泉 郭彦 《眼科学报》 2004年第4期259-263,共5页
目的:探讨压力及压力加维生素B1联合作用下SD大鼠视网膜神经细胞p53、MDM2及Ref1基因的表达情况.方法:新生SD大鼠视网膜神经细胞体外培养,倒置相差显微镜观察细胞的生长情况,细胞分单纯加压组、实验加压组(加入维生素B1)及未加压对照组... 目的:探讨压力及压力加维生素B1联合作用下SD大鼠视网膜神经细胞p53、MDM2及Ref1基因的表达情况.方法:新生SD大鼠视网膜神经细胞体外培养,倒置相差显微镜观察细胞的生长情况,细胞分单纯加压组、实验加压组(加入维生素B1)及未加压对照组,于加压后2 d(培养第9~10天)行苔盼兰染色检查计数细胞成活率,p53免疫组化检查并提取细胞总RNA,用逆转录聚合酶链反应法检测p53、MDM2及Ref1基因的表达.结果:单纯压力组p53/MDM2基因的表达较正常未加压组增强,Ref1基因表达无增强;而维生素B1作用后的加压组,其p53/MDM2基因的表达较单纯加压组明显减弱.结论:压力作用下视网膜神经细胞的损害有凋亡机制参与,维生素B1对压力作用下视网膜神经细胞具有保护作用. 展开更多
关键词 凋亡 P53 MDM2 ref1 维生素B1 视网膜神经细胞 压力
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从损伤到重生——REF1小肽如何激发植物的内在再生潜能 被引量:1
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作者 廖人玉 王佳伟 《植物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第3期347-350,共4页
多细胞生物常因暴露在各种生物和非生物胁迫下而导致器官损伤或缺失。植物因固着性而演化出强大的再生能力以适应环境。尽管细胞损伤是植物组织修复和器官再生的原初物理诱因,然而引发再生反应局部伤口信号的化学本质及其调控再生机制... 多细胞生物常因暴露在各种生物和非生物胁迫下而导致器官损伤或缺失。植物因固着性而演化出强大的再生能力以适应环境。尽管细胞损伤是植物组织修复和器官再生的原初物理诱因,然而引发再生反应局部伤口信号的化学本质及其调控再生机制一直是科学界的难解之谜。最近一项研究发现1个调控植物局部伤口响应与再生能力的小肽REF1。研究表明,REF1与其受体PORK1通过植物损伤响应及细胞重编程关键转录因子WIND1促进植物再生。尤为重要的是,外源施加REF1小肽可不同程度地提高几种作物的再生效率。这一发现不仅为理解植物损伤响应和再生的分子机制打开了全新视角,而且为提高作物的再生能力和遗传转化效率提供了潜在的应用策略。 展开更多
关键词 ref1(REGENERATION FACTOR1) 植物诱导肽(Pep) 番茄 损伤响应 损伤信号 再生 再生因子 系统素
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三羟基异黄酮联合放疗对人肺腺癌细胞增殖凋亡的影响
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作者 周芊 李少林 +3 位作者 杨镇洲 王东 李梦侠 曾林立 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第19期2008-2011,共4页
目的观察三羟基异黄酮(Genistein)联合放疗对人肺腺癌细胞A549增殖凋亡及其Ape1/Ref1蛋白的影响。方法 1组单用0、10、30、60、90μmol/L的Genistein处理A549细胞48 h,另1组用同样浓度的Genistein预处理24 h后予以直线加速器放疗8 Gy,... 目的观察三羟基异黄酮(Genistein)联合放疗对人肺腺癌细胞A549增殖凋亡及其Ape1/Ref1蛋白的影响。方法 1组单用0、10、30、60、90μmol/L的Genistein处理A549细胞48 h,另1组用同样浓度的Genistein预处理24 h后予以直线加速器放疗8 Gy,继续培养24 h后用噻唑蓝比色法(MTT)检测各组活细胞数,确定最适Genistein联合放疗的浓度。用流式细胞仪检测对照组、单纯放疗组(IR 8 Gy)、单纯Genistein组(GEN 30μmol/L)、Genistein+IR组(GEN30μmol/L+IR 8 Gy)的细胞凋亡;采用Western blot法检测各组细胞中Ape1/Ref1蛋白表达。结果 30、60、90μmol/L的Genistein联合放疗比单用相应浓度的Genistein处理细胞增殖抑制率高(P<0.05),但低浓度10μmol/L联合放疗与单纯放疗比较差异不明显[(26.67±1.26)%vs(24.70±0.72)%,P=0.102]。IR组、Genistein+IR组早期凋亡率较对照组明显增高[(30.88±7.63)%、(42.98±1.46)%vs(6.80±0.98)%,P<0.05],加药组较对照组无明显统计学差异[(12.96±4.99)%vs(6.80±0.98)%,P=0.143)];与对照组、单纯放疗组、单纯加药组比,Genistein+IR组中Ape1/Ref1的表达明显下调。结论三羟基异黄酮可增加放疗对A549细胞的增殖抑制作用,可能与减少Ape1/Ref1蛋白的表达有关。 展开更多
关键词 三羟基异黄酮 人肺腺癌A549细胞 Ape1/ref1蛋白表达
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准三维波生近岸流数学模型在裂流研究中的应用 被引量:3
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作者 白志刚 张志显 陈志春 《水运工程》 北大核心 2007年第3期12-17,43,共7页
阐述了一种考虑波流耦合作用的准三维近岸流模型SHORECIRC,该模型耦合了REF/DIF波浪模型(折/绕射模型)对近岸流进行模拟计算。基于该模型,将模拟结果与Borthwick等人在英国海岸工程研究所做的实验进行对比,验证了模型的正确性和适用性... 阐述了一种考虑波流耦合作用的准三维近岸流模型SHORECIRC,该模型耦合了REF/DIF波浪模型(折/绕射模型)对近岸流进行模拟计算。基于该模型,将模拟结果与Borthwick等人在英国海岸工程研究所做的实验进行对比,验证了模型的正确性和适用性。在此基础上,进一步分析了波浪入射波高、入射角度、底摩阻及驼峰高度对裂流的影响,得出了一些有用的结论。 展开更多
关键词 波流相互作用 SHORECIRC模型 REF/DIF1模型 裂流
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边界适应曲线网格在天文潮、风暴潮数值模拟中的应用 被引量:1
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作者 白志刚 黄明 《港工技术》 北大核心 2008年第1期5-9,共5页
采用曲线坐标系下的准三维近岸流波流耦合数值模型,采用边界适应曲线计算网格和两层嵌套方法,设计一套简单实用的天文潮预报系统,并引入风场以及考虑天文潮和风暴潮之间非线性作用的开边界水位,对2003年渤海发生的一次温带风暴潮进行模... 采用曲线坐标系下的准三维近岸流波流耦合数值模型,采用边界适应曲线计算网格和两层嵌套方法,设计一套简单实用的天文潮预报系统,并引入风场以及考虑天文潮和风暴潮之间非线性作用的开边界水位,对2003年渤海发生的一次温带风暴潮进行模拟,计算结果与实测潮位吻合较好。 展开更多
关键词 风暴潮 REF/DIF1 准三维近岸流 边界适应曲线网格 波流耦合
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