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PRV感染小鼠三叉神经节细胞后通过RIG-Ⅰ信号通路调控Ⅰ型干扰素分泌
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作者 廖正波 汤德元 +7 位作者 曾智勇 王彬 黄涛 陈旭 袁盛林 何松 周飘 毛茵茗 《中国兽医学报》 北大核心 2025年第2期255-265,共11页
为探究伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)感染小鼠三叉神经节(TG)细胞后对其抗病毒免疫信号通路及Ⅰ型干扰素因子(IFN-Ⅰ)的影响。本试验使用1 MOI PRV接种感染TG原代细胞,使用106.29TCID50PRV滴鼻感染小鼠,使用实时荧光定量PCR(qP... 为探究伪狂犬病病毒(pseudorabies virus, PRV)感染小鼠三叉神经节(TG)细胞后对其抗病毒免疫信号通路及Ⅰ型干扰素因子(IFN-Ⅰ)的影响。本试验使用1 MOI PRV接种感染TG原代细胞,使用106.29TCID50PRV滴鼻感染小鼠,使用实时荧光定量PCR(qPCR)、Western blot和ELISA等技术检测小鼠TG原代细胞不同攻毒时间点及体内攻毒组和对照组的基因转录、蛋白表达及IFN-α和IFN-β的分泌情况。结果显示,PRV感染小鼠TG原代细胞后引起RIG-I、MAVS和IRF3的基因及蛋白表达变化,诱导了体内外IRF3和IκBα的磷酸化。ELISA结果显示,PRV感染后可调控小鼠TG原代细胞及小鼠TG内IFN-α和IFN-β的分泌。使用siRNA干扰TG细胞内RIG-Ⅰ表达后Western blot检测RIG-Ⅰ信号通路相关蛋白表达结果及IFN-α和IFN-β的分泌情况。结果显示,siRIG-Ⅰ成功干扰TG细胞内RIG-Ⅰ蛋白表达,并引起下游MAVS和IRF3等蛋白表达发生变化,同时调控TG细胞内IFN-α和IFN-β的分泌。研究结果表明,PRV感染可诱导小鼠TG原代细胞及小鼠TG内RIG-Ⅰ的表达,并通过RIG-Ⅰ-MAVS-IRF3信号轴调控TG细胞内IFN-Ⅰ的抗病毒免疫反应,以及PRV会抑制TG内IRF3表达,并在感染后期显著上调IFN-β的表达,这可能是PRV在感染后期导致小鼠快速死亡的重要原因。本试验揭示了PRV感染小鼠TG细胞后通过RIG-Ⅰ-MAVS-IRF3信号通路调控IFN-Ⅰ的部分抗病毒免疫机制,以及发现IRF3蛋白在体内外不同的变化趋势,为后续深入研究奠定了基础。 展开更多
关键词 prv RIG-Ⅰ IRF3 信号通路 Ⅰ型干扰素 小鼠
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基于PRV-copGFP的伪狂犬病毒快速中和抗体效价检测方法的建立
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作者 李晨雨 马琦 +7 位作者 王冰丹 王菲 冯霞 张晓光 李红霞 马晶 郝彦哲 李淑英 《病毒学报》 北大核心 2025年第3期825-834,共10页
本研究开发了一种高效且精准的伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)中和抗体效价检测新方法。通过同源重组和CRISPR-Cas9技术,将桡足纲绿色荧光蛋白(copepod Pontellina plumata Green Fluorescent Protein,copGFP)基因表达盒精确嵌... 本研究开发了一种高效且精准的伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus, PRV)中和抗体效价检测新方法。通过同源重组和CRISPR-Cas9技术,将桡足纲绿色荧光蛋白(copepod Pontellina plumata Green Fluorescent Protein,copGFP)基因表达盒精确嵌入PRV基因组的UL40/41区域,经过多轮筛选与纯化,成功构建了重组病毒PRV-copGFP。生长特性对比实验表明,PRV-copGFP与野生型PRV-Bartha之间无显著差异(P>0.05)。借助CTL-ImmunoSpot?S6仪器计数表达copGFP的细胞数目,确定了最佳观测时间和最佳病毒滴度。该方法可精确计算中和抗体效价,并通过传统噬斑减少中和试验(Plaque reduction neutralization test, PRNT)进行验证。与传统方法相比,本检测方法将检测窗口缩短至10h,且通量显著提升。本方法在快速评估PRV中和抗体效价方面具有显著优势,可为PRV疫苗研发、疾病防控及相关研究提供有力的技术支持。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒(prv) 中和抗体效价 桡足纲绿色荧光蛋白(copGFP) 重组病毒 快速检测
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Chinese herbal extracts with antiviral activity:evaluation,mechanisms,and potential for preventing PRV,PEDV and PRRSV infections
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作者 Yumei Sun Chang Li +7 位作者 Zhongzhu Liu Wei Zeng Muhammad Jamil Ahmad Mengjia Zhang Lina Liu Shujun Zhang Wentao Li Qigai He 《Animal Diseases》 2025年第2期205-219,共15页
The rapid expansion of large-scale pig farming has brought about a surge in viral diseases with high morbidity rates and diverse manifestations.This widespread occurrence of multiple viral diseases in pig farms has in... The rapid expansion of large-scale pig farming has brought about a surge in viral diseases with high morbidity rates and diverse manifestations.This widespread occurrence of multiple viral diseases in pig farms has inflicted severe economic losses on the global swine industry.Consequently,there is an urgent need for eco-friendly and efficient antivi-ral drugs that can effectively combat viruses and prevent diseases such as PEDV,PRRSV,PRV,and other viral infections.To this end,we conducted a study on the antiviral activity and cytotoxicity of eleven different Chinese herbal extracts(CHE) against PRV.In vitro testing of several extracts,namely,Echinacea,Ilex purpurea Hassk,Ganoderma lucidum Kars,Taraxacum mongolicum,and Ilex rotunda Thunb,exhibited remarkable inhibition of PRV infection without causing any cytotoxic effects.Specifically,their antiviral selectivity indexes were significantly higher,with values ranging from 6-to 144-fold.The antiviral efficacy of five CHEs was evaluated against other RNA viruses,including PRRSV and PEDV.The extracts showed substantial inhibition of PEDV and PRRSV proliferation.Echinacea and Ilex purpurea Hassk extracts exhibited the highest virus inhibitory effects.To understand the antiviral mechanisms underlying their potent activity,a time-of-addition experiment was conducted.The results indicated that these extracts effectively targeted the early infection and postinfection stages of PRV,PEDV,and PRRSV.The study found that the Chinese herbal extracts,Echinacea and Ilex purpurea Hassk,had both direct and indirect effects on virus particles and cellular targets,demonstrating broad-spectrum antiviral activity against multiple clinical strains of PRV and PEDV.These findings provide a strong foundation for the development of herbal medicines to prevent and treat infections caused by PRV,PEDV and PRRSV in the swine industry.The identified extracts show great promise for the formulation of effective and environmentally friendly antiviral interventions. 展开更多
关键词 CHE prv PEDV PRRSV Antiviral activity
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Bartha-K61疫苗对PRV变异株免疫效果的Meta分析 被引量:4
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作者 徐玉 王彬 +8 位作者 曾智勇 梁海英 汤德元 何信群 徐松平 黄二素 万娟 张婧旭 祝羊 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2022年第11期80-85,共6页
为了给预防与控制伪狂犬病(PR)提供科学参考,本试验采用Meta分析的方法对已发表的Bartha-K61疫苗对伪狂犬病病毒(PRV)变异株免疫效果进行评估。首先通过计算机建立检索式检索中国知网、万方、维普和PubMed数据库,收集对照试验;然后采用R... 为了给预防与控制伪狂犬病(PR)提供科学参考,本试验采用Meta分析的方法对已发表的Bartha-K61疫苗对伪狂犬病病毒(PRV)变异株免疫效果进行评估。首先通过计算机建立检索式检索中国知网、万方、维普和PubMed数据库,收集对照试验;然后采用RevMan 5.4.1软件以攻毒保护率为结局指标进行Meta分析;共纳入15篇文献,190头仔猪,试验组105头,对照组85头,试验组均采用接种Bartha-K61疫苗+攻毒PRV变异株的干预方式,对照组有3种干预方式,分别为接种Bartha-K61疫苗+攻毒PRV经典株、不接种PRV疫苗+攻毒PRV变异株、接种其他PRV疫苗+攻毒PRV变异株,其中只有不接种PRV疫苗+攻毒PRV变异株对照组的数据有统计学意义。结果显示:各研究间同质(P=0.91>0.1,I~2=0<50%),研究结果稳定性较好,Bartha-K61疫苗对PRV变异株的攻击可以提供免疫保护(合并OR=22.77,95%CI=9.91~52.28)。综合分析15篇单个试验研究的结果表明,经典疫苗Bartha-K61对PRV变异株的免疫保护达到80%以上,且高滴度的疫苗效果更好,但比起其对经典株的保护效果略差;而且,以PRV变异株为亲本研制的疫苗对亲本毒株的攻毒保护效果优于Bartha-K61疫苗。 展开更多
关键词 Bartha-K61疫苗 prv变异株 prv经典株 META分析 免疫效果
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应用多联PCR对引发猪繁殖障碍有关病毒的检测Ⅱ.JEV、PPV、PRRSV、PRV单项PCR检测方法的建立 被引量:15
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作者 孙明 李红卫 +5 位作者 高显明 涂长春 何旭玉 白晓鸿 金宁一 殷震 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期10-13,共4页
在利用计算机设计出检测流行性乙型脑炎病毒 ( JEV)、猪细小病毒 ( PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒( PRRSV)、猪伪狂犬病病毒 ( PRV)的多联 PCR引物的基础上 ,分别进行各单项 PCR检测相应病毒试验 ,确定了各单项 PCR反应条件范围 ,并对各... 在利用计算机设计出检测流行性乙型脑炎病毒 ( JEV)、猪细小病毒 ( PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒( PRRSV)、猪伪狂犬病病毒 ( PRV)的多联 PCR引物的基础上 ,分别进行各单项 PCR检测相应病毒试验 ,确定了各单项 PCR反应条件范围 ,并对各 PCR扩增产物进行了点杂交和部分测序鉴定。用单项 PCR对感染猪相关病毒的检测证实 ,本试验已经建立了有效、特异、敏感的检测 JEV、PPV、PRRSV、PRV的单项 PCR技术 ,为进一步建立多联 展开更多
关键词 JEV PPV PRRSV prv PCR 繁殖障碍 病毒 检测方法
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PRVLA株gD基因的序列测定及其重复高变区的发现 被引量:10
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作者 范伟兴 魏荣 +2 位作者 张雪莲 陈溥言 赵宏坤 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期350-352,共3页
对猪伪狂犬病病毒鲁 A株 (PRV L A株 ) g D基因进行了克隆和序列测定 ,结果表明 :在测序的 14 5 3bp的 DNA序列中包括着 1个 12 0 3bp的 ORF(即 g D基因 ) ,它编码 4 0 0个氨基酸组成的多肽 ;在整个 g D基因的 ORF内 PRVL A株与 PRV Ea... 对猪伪狂犬病病毒鲁 A株 (PRV L A株 ) g D基因进行了克隆和序列测定 ,结果表明 :在测序的 14 5 3bp的 DNA序列中包括着 1个 12 0 3bp的 ORF(即 g D基因 ) ,它编码 4 0 0个氨基酸组成的多肽 ;在整个 g D基因的 ORF内 PRVL A株与 PRV Ea株、Hubei株、Rice株、NIA- 3株、Kaplan株的 g D基因比较 ,核苷酸的同源性分别为 98.3%、98.3%、98.0 %、98.1%、98.6 % ,氨基酸的同源性分别为 97.8%、97.8%、97.5 %、98.1%、98.6 % ;发现 PRV L A株 g D基因与Ea株、Hubei株、Rice株、NIA- 3株、Kaplan株的 g D基因均在 80 2~ 837nt处有 1个 C(A) GGCCC的重复高变区 ,其对应的是 g D2 6 7~ 2 79位氨基酸残基 Arg- Pro的重复高变区。正是该重复高变区的碱基缺失或插入使得 PRV g D的ORF在 1194~ 12 15 nt间变化 ,g D前体的氨基酸残基为 398~ 4 0 4个。 展开更多
关键词 猪伪狂犬病病毒 prv LA株 GD基因 序列测定 重复高变区 伪狂犬病 同源性
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PCV2、PRV和PRRSV多重PCR方法的建立及其应用 被引量:14
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作者 耿庆华 彭永刚 +1 位作者 张波 裴程程 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期1393-1397,共5页
根据GenBank登录的猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的参考基因序列,设计3对引物分别用于扩增PCV2的ORF2基因、PRV的gE基因、PRRSV的N基因的目的片段,通过优化反应中各个影响因素,建立了PRV、PCV... 根据GenBank登录的猪伪狂犬病毒(PRV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)的参考基因序列,设计3对引物分别用于扩增PCV2的ORF2基因、PRV的gE基因、PRRSV的N基因的目的片段,通过优化反应中各个影响因素,建立了PRV、PCV2、PRRSV的多重PCR(mPCR)检测方法。敏感性和特异性的结果表明,该方法对这3种病毒的最低核酸检出量分别为32.5(PRV)、25.2(PCV2)、35.9pg(PRRSV)。该方法对猪流感病毒(SIV)、猪圆环病毒1型(PCV1)、大肠杆菌、猪瘟病毒(CSFV)、猪流行性腹泻病毒(TGE)等病毒的检测结果均为阴性。200份临床样品的多重PCR结果表明,PCV2感染率为80%(160/200),PRV感染率为21%(42/200),PRRSV的感染率为78%(156/200)。200份临床样品主要为PCV2和PRRSV混合感染,阳性率达56.0%(112/200)。该方法的建立对这3种病毒病的早期快速检测和指导临床实践具有十分重要的意义。 展开更多
关键词 prv PCV2 PRRSV 多重PCR
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多重PCR/RT-PCR技术检测PRRSV、PPV、PRV和PCV-2 被引量:15
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作者 王娟萍 姚敬明 +6 位作者 高英杰 金扩世 丁馥香 周胜花 曹日亮 贺东昌 雷宇平 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期258-262,共5页
根椐GenBank中已发表的猪蓝耳病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)等4种病毒基因序列,对各病毒基因区进行同源性分析,确定PRRSV M和N、PPV VP2、PRVgD、PCV-2ORF2基因的保守区为各病毒的诊断靶序列... 根椐GenBank中已发表的猪蓝耳病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、伪狂犬病毒(PRV)和猪圆环病毒Ⅱ型(PCV-2)等4种病毒基因序列,对各病毒基因区进行同源性分析,确定PRRSV M和N、PPV VP2、PRVgD、PCV-2ORF2基因的保守区为各病毒的诊断靶序列。在建立各病毒单项PCR技术的基础上,优化多重PCR反应条件,建立了4种病毒的四重PCR技术,可同时扩增PRRSV的660 bp(北美株),PPV的313 bp,PRV的217 bp,PCV-2的447 bp的特异性片段。用82份临床病料对本研究多重PCR技术和单项PCR/RT-PCR技术进行对比验证,结果显示,两者的总符合率为93%以上。表明建立的多重PCR检测方法,具有特异、快速、准确的特点,可用于对这4种病毒的同时检测和鉴别诊断。 展开更多
关键词 多重PCR PRRSV PPV prv PCV2
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伪狂犬病毒(PRV)GZ-JS2017株的分离鉴定及主要毒力基因分子特征分析 被引量:6
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作者 徐国 梁海英 +7 位作者 曾智勇 汤德元 王彬 黄涛 叶百川 张爱琼 何小莉 咸文 《病毒学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第2期209-216,共8页
为查明贵州省合肥地区某规模化养殖场猪只发生急性死亡的病因,以及明确病原主要毒力基因的分子特征。本试验采用PCR技术、细胞接种试验、动物试验及透射电子显微镜观察等方法进行病原的分离鉴定,并对该病原的主要毒力基因进行克隆、测... 为查明贵州省合肥地区某规模化养殖场猪只发生急性死亡的病因,以及明确病原主要毒力基因的分子特征。本试验采用PCR技术、细胞接种试验、动物试验及透射电子显微镜观察等方法进行病原的分离鉴定,并对该病原的主要毒力基因进行克隆、测序及生物信息学分析。结果显示:PCR检测可扩增出PRV特异性核酸阳性条带,接种Vero细胞后可见明显CPE现象,在透射电子显微镜下可见囊泡中呈圆形、160nm左右的成熟病毒粒子,胞核中可见病毒包涵体和实心、空心2种无囊膜病毒粒子;接种健康猪可引起神经症状,最后麻痹死亡;通过生物信息学分析显示该毒株的gE、gC、gD及TK基因序列均与参考毒株中湖北HNX株和河南HN1201株相对应的核苷酸同源性最高,且在gE基因的48位和496位都有1个天冬氨酸(Asp)的插入;根据gE、gC、gD及TK基因序列的遗传进化树结果显示本次分离毒株与2011年以后所分离鉴定的变异毒株属同一分支。说明本试验成功分离鉴定一株猪伪狂犬病病毒变异毒株,以期为贵州省猪伪狂犬病病毒的流行及变异提供一些参考。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒(prv) 分离鉴定 gE、gC、gD及TK基因 分子特征
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PRV基因缺失株在体外细胞中增殖的超微结构 被引量:5
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作者 徐志文 郭万柱 +3 位作者 朱玲 徐凯 王印 王小玉 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第8期1008-1012,共5页
用伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)Fa株和本实验室构建的系列PRV基因缺失株(PRV-TK-、PRV-gI\gE-、PRV-TK\gI\gE-株)感染不同的细胞系(IBRS-2、Marc145、ST、Vero、MDBK细胞),对感染细胞的形态学观察发现,受试各PRV毒株在以上细... 用伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)Fa株和本实验室构建的系列PRV基因缺失株(PRV-TK-、PRV-gI\gE-、PRV-TK\gI\gE-株)感染不同的细胞系(IBRS-2、Marc145、ST、Vero、MDBK细胞),对感染细胞的形态学观察发现,受试各PRV毒株在以上细胞均能增殖并引起细胞病变,但对不同的细胞却表现差异,其中在ST细胞上增殖滴度最低,在MDBK上最高;同PRV Fa株相比,PRV-gI\gE-和PRV-TK\gI\gE-株的增殖力有所降低,而PRV-TK-则变化不明显;对细胞感染后的超微结构分析发现,基因缺失对该毒株在细胞上的吸附和穿入过程没有影响,但与Fa株相比,主要表现为增殖速度的减缓和病毒粒子数量的减少。 展开更多
关键词 prv基因缺失疫苗 细胞感染 形态学 超微结构
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表达猪细小病毒VP2蛋白的猪伪狂犬病病毒rPRV-VP2株的生物学特性 被引量:8
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作者 付朋飞 乔涵 +3 位作者 张宇 杨兴武 徐朋丽 陈红英 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第1期11-17,共7页
探索重组PPV VP2基因的猪伪狂犬病病毒rPRV-VP2株作为弱毒疫苗候选株的潜在价值,对其在多种细胞上的增殖特性、病毒滴度、最适培养细胞中的遗传稳定性、一步生长曲线、转录和翻译水平等生物学特性进行研究,并初步探索对小鼠安全性。结... 探索重组PPV VP2基因的猪伪狂犬病病毒rPRV-VP2株作为弱毒疫苗候选株的潜在价值,对其在多种细胞上的增殖特性、病毒滴度、最适培养细胞中的遗传稳定性、一步生长曲线、转录和翻译水平等生物学特性进行研究,并初步探索对小鼠安全性。结果显示:重组病毒rPRV-VP2株在VERO、ST、PK-15和IPEC细胞上的TCID50分别为104.375/0.1mL、106.5/0.1mL、103.75/0.1mL、105.625/0.1mL。重组毒与亲本毒PRV HB-98株在ST细胞中的毒力(106.125 TCID50/0.1mL)和细胞病变相当,重组病毒保持了PRV病毒的通性。连续传毒20代后的绿色荧光观察、RTPCR、Western blot试验结果均表明重组病毒中的VP2基因得到了有效表达,且遗传稳定性良好。安全性试验结果显示:重组毒对小鼠安全。本试验为后期对PPV VP2基因重组猪伪狂犬病毒rPRV-VP2株的开发利用奠定了基础。 展开更多
关键词 重组 猪细小病毒 VP2基因 prv 生物学特性
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多重PCR检测PRV、PPV、PCV方法的建立及其应用 被引量:8
12
作者 姜焱 周斌 张常印 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期110-115,共6页
根据GenBank上已发表的猪伪狂犬病病毒(PRV)的gE、gI基因序列、猪细小病毒(PPV)的E蛋白的基因序列、II型猪圆环病毒(PCV-2)的ORF2基因序列,分别设计并合成3对能特异性扩增PRV、PPV、PCV-2的引物,通过DNAstar软件分析这3对引物不存在cros... 根据GenBank上已发表的猪伪狂犬病病毒(PRV)的gE、gI基因序列、猪细小病毒(PPV)的E蛋白的基因序列、II型猪圆环病毒(PCV-2)的ORF2基因序列,分别设计并合成3对能特异性扩增PRV、PPV、PCV-2的引物,通过DNAstar软件分析这3对引物不存在cross d im er。建立了PCR方法分别检测PRV、PPV、PCV-2,然后通过条件的优化,建立了PCR同时检测PRV、PPV、PCV-2的方法并研制出试剂盒。对试剂盒的特异性和有效期进行了研究。结果表明,该试剂盒具有很好的特异性,有效期在-20℃至少可以保存1年。 展开更多
关键词 prv PPV PCV-2 PCR 特异性 敏感性
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重组猪细小病毒VP2基因的猪伪狂犬病毒rPRV-VP2株的构建及纯化 被引量:2
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作者 付朋飞 乔涵 +5 位作者 杨兴武 张宇 王林青 郭晓庆 潘鑫龙 陈红英 《中国兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第9期1476-1483,共8页
参考GenBank中登录的猪细小病毒(PPV)(M38367.1)基因序列,设计1对可以扩增出约1.6kb PPV VP2基因片段的特异性引物,上、下游引物的5′端均引入BamHⅠ酶切位点,PCR扩增得到VP2目的片段后,连接到pMD18-T载体中得到重组质粒pMD-VP2。取本... 参考GenBank中登录的猪细小病毒(PPV)(M38367.1)基因序列,设计1对可以扩增出约1.6kb PPV VP2基因片段的特异性引物,上、下游引物的5′端均引入BamHⅠ酶切位点,PCR扩增得到VP2目的片段后,连接到pMD18-T载体中得到重组质粒pMD-VP2。取本实验室构建的含绿色荧光蛋白标记基因的伪狂犬病毒(PRV)通用转移质粒pG和构建好的pMD-VP2质粒,用BamHⅠ对质粒pG和pMD-VP2进行酶切,然后用CIAP对酶切产物进行去磷酸化处理,纯化回收后将VP2基因插入pG质粒中获得重组伪狂犬病毒转移质粒pGVP2。用脂质体转染法将PRV HB-98株全基因组与质粒pGVP2共转染ST细胞,得到携带有PPV VP2外源抗原基因和绿色荧光蛋白标记基因的重组伪狂犬病毒rPRV-VP2株。结合VP2基因PCR扩增和绿色荧光观察,经5轮病毒空斑纯化得到了纯化的重组病毒rPRV-VP2株。 展开更多
关键词 prv 猪细小病毒 VP2基因 重组
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伪狂犬病病毒(PrV)糖蛋白gE基因在重组杆状病毒中的表达 被引量:4
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作者 倪建强 张绍杰 +5 位作者 冉智光 仇华吉 王柳 孟松树 王玫 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第3期213-215,共3页
应用PCR方法扩增出 1 .8Kb的伪狂犬病毒糖蛋白gE基因 ,克隆到pUC1 1 9中形成重组质粒pRZE。经测序鉴定后再将gE基因定向亚克隆到杆状病毒转移载体pVL1 392中 ,形成重组质粒pVLgE。将pVLgE与杆状病毒线性DNA(BAC_N_BlueDNA)共转染Sf9昆... 应用PCR方法扩增出 1 .8Kb的伪狂犬病毒糖蛋白gE基因 ,克隆到pUC1 1 9中形成重组质粒pRZE。经测序鉴定后再将gE基因定向亚克隆到杆状病毒转移载体pVL1 392中 ,形成重组质粒pVLgE。将pVLgE与杆状病毒线性DNA(BAC_N_BlueDNA)共转染Sf9昆虫细胞 ,经三轮蚀斑纯化 ,获得重组病毒rpVLgE。通过PCR方法鉴定证明gE基因正确插入到杆状病毒基因组中 ,直接免疫荧光试验和WesternBlot结果表明gE基因在重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞中获得高效表达。表达的gE蛋白将作为伪狂犬病强毒和gE基因缺失弱毒疫苗鉴别诊断ELISA方法的抗原 。 展开更多
关键词 糖蛋白E 伪狂犬病 prv 基因表达 杆状病毒
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自制猪PPV和PRV二联灭活苗对后备母猪免疫效果观察 被引量:2
15
作者 杨明凡 崔保安 +4 位作者 张素梅 王学斌 徐端红 杨静远 王莉 《动物医学进展》 CSCD 2003年第6期110-111,共2页
用自制猪细小病毒和猪伪狂犬病毒二联灭活苗对后备母猪免疫 ,效果观察表明 :猪细小病毒 HI抗体滴度最高达 1∶ 640 ,猪伪狂犬病毒血清抗体中和指数为 1 4 0 0以上 ,实验组母猪均未发生繁殖障碍 ,且平均产健康活仔率比对照组高出 1 .9%。
关键词 PPV prv 二联灭活苗 后备母猪 免疫效果 自制疫苗
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应用PRV VP6蛋白McAb间接免疫荧光法检测猪轮状病毒 被引量:4
16
作者 边亚娟 林长水 +5 位作者 田志军 唐丽杰 王玉玲 张海峰 张炳丽 李一经 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第4期36-37,共2页
关键词 猪轮状病毒 间接免疫荧光法 McAb prv 急性肠道传染病 应用 检测 蛋白
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检测PCV_2、PPV、PRV疫苗株与野毒株的多重PCR方法 被引量:7
17
作者 潘群兴 陈德 +1 位作者 何孔旺 黄克和 《中国病毒学》 CSCD 2005年第6期603-606,共4页
本文建立了一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、细小病毒(PPV)、及伪狂犬病毒(PRV)疫苗株与野毒株 的多重PCR方法。根据GenBank上发表的PCV2、PPV和PRV gB、gE基因序列,针对各自保守区各设计一对特 异性引物,用这四对引物对同一样品中的P... 本文建立了一种同时检测猪圆环病毒2型(PCV2)、细小病毒(PPV)、及伪狂犬病毒(PRV)疫苗株与野毒株 的多重PCR方法。根据GenBank上发表的PCV2、PPV和PRV gB、gE基因序列,针对各自保守区各设计一对特 异性引物,用这四对引物对同一样品中的PCV2、PPV和PRV gB、gE进行检测,结果可同时扩增出269bp(PCV2)、 581bp(PPV)、372bP(PRV gB)及147bp(PRV gE)四条特异性片段。对JEV、PRRSRV、大肠杆菌和双蒸水的PCR 扩增结果均为阴性;敏感性测定结果表明,该多重PCR能检出10pg PCV2、PPV和PRV gB、gE检测敏感度分别为 106.2、103.8、10-5.8 TCID50的模板。该方法的建立对临床上进行这三种疾病的鉴别诊断和混合感染的检测具有重要 意义。 展开更多
关键词 多重聚合酶链式反应 伪狂犬病毒(prv) 细小病毒(PPV) 猪圆环病毒2型(PCV2)
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抗微生物脂肽体外抗PRV和PPV的研究 被引量:7
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作者 黄现青 别小妹 +2 位作者 陆兆新 吕凤霞 杨淑晶 《中国病毒学》 CSCD 2006年第5期426-429,共4页
本试验研究了枯草芽孢杆菌fmbJ株产生的抗微生物脂肽(Antimicrobiallipopeptide,AMI)的体外抗伪狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)、猪细小病毒(Porcineparvovirus,PPV)南京株活性并对其可能的机理进行了初步探讨。结果表明该抗微生物... 本试验研究了枯草芽孢杆菌fmbJ株产生的抗微生物脂肽(Antimicrobiallipopeptide,AMI)的体外抗伪狂犬病病毒(Pseudorabiesvirus,PRV)、猪细小病毒(Porcineparvovirus,PPV)南京株活性并对其可能的机理进行了初步探讨。结果表明该抗微生物脂肽对猪肾(PorcineKidney,PK-15)细胞的半数中毒浓度(MedianToxicosisDose,TD50)和最大无毒浓度(TD0)分别为47.57mg/L、18.9mg/L;对PRV株、PPV南京株所致细胞病变效应(CytopathicEffects,CPE)有明显的抑制作用,可使细胞存活率显著升高;但不能抑制PRV株、PPV南京株在PK-15细胞上的感染和复制。由此可知,该抗微生物脂肽可以直接作用于PRV株、PPV南京株,从而抑制其对PK-15细胞的感染作用,其作用效果显著低于抗病毒药物阿昔洛韦(Acyclovir,ACV),但由于其对PK-15细胞毒性较弱,可作为一种抗病毒药物进行进一步开发研究。 展开更多
关键词 抗微生物脂肽 prv PPV 抗病毒作用
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伪狂犬病病毒(PRV)不同毒株抗原相关性研究 被引量:1
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作者 程晓霞 车勇良 +6 位作者 王劭 肖世峰 朱小丽 陈仕龙 林锋强 陈少莺 周伦江 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2018年第4期337-340,共4页
为了解PRV不同毒株之间的抗原性差异,评价弱毒FB株预防新型PRV的潜力,以4株PRV(FA、FB、Bartha-K61和FJ2012)毒株及其高免血清为材料,应用交叉中和试验测定PRV不同毒株的抗原性差异,通过FB免疫猪攻毒试验评价弱毒FB株对新型PRV的保护潜... 为了解PRV不同毒株之间的抗原性差异,评价弱毒FB株预防新型PRV的潜力,以4株PRV(FA、FB、Bartha-K61和FJ2012)毒株及其高免血清为材料,应用交叉中和试验测定PRV不同毒株的抗原性差异,通过FB免疫猪攻毒试验评价弱毒FB株对新型PRV的保护潜力。结果表明:中和抗体测定表明兔抗FB株、FA株、Bartha-K61株和FJ2012株高免血清的中和效价分别为1∶54、1∶91、1∶91和1∶215。交叉中和试验显示FB株与FA株、FB株与FJ2012株、FA株与FJ2012株的抗原相关性(R值)均大于0.8,Bartha-K61株与FA株、FB株、FJ2012株的R值均小于0.4,表明FB株与FJ2012株的抗原相关性高于Bartha-K61株与FJ2012株。仔猪免疫攻毒试验显示FB免疫猪能抵抗新型PRV(FJ2012株)的攻毒,保护率100%。提示PRV弱毒FB株有望成为预防新型猪伪狂犬病毒(FJ2012株)的疫苗候选株。 展开更多
关键词 伪狂犬病病毒(prv) FA株 FB株 Bartha-K61株 FJ2012株 抗原相关性 免疫保护
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PRV-gE^-~PPV混合制剂的细胞感染及动物免疫实验 被引量:2
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作者 张婉华 叶向阳 +2 位作者 朱永军 张春玲 陆鑫芳 《上海农业学报》 CSCD 2007年第1期124-126,共3页
PPVS-1A毒株和PRV-gE-毒株按一定的比例混合,在ST和BHK-21细胞上,分别测定PPV TCID50和PRV TCID50;接种3-4月龄的PPV、PRV抗体阴性猪,定期采血,分别测定PPV、PRV抗体,结果表明:二者在细胞上无明显干扰现象,具有较好的相容性;免疫猪体,... PPVS-1A毒株和PRV-gE-毒株按一定的比例混合,在ST和BHK-21细胞上,分别测定PPV TCID50和PRV TCID50;接种3-4月龄的PPV、PRV抗体阴性猪,定期采血,分别测定PPV、PRV抗体,结果表明:二者在细胞上无明显干扰现象,具有较好的相容性;免疫猪体,能产生良好的抗体反应,无明显的免疫干扰现象。 展开更多
关键词 PPVs A毒株 prv-gE^-毒株 相容性 抗体反应
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