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An in vivo assay for osteoclast activity using mouse calvaria
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作者 Christopher Grieg Maya Deza Culbertson J.Patrick O'Connor 《Animal Models and Experimental Medicine》 2026年第1期41-49,共9页
Osteoclasts are essential for maintaining healthy bone.Pathological elevation of os-teoclastogenesis or osteoclast activity can cause osteoporosis and increase the risk of bone fracture.However,a few options are avail... Osteoclasts are essential for maintaining healthy bone.Pathological elevation of os-teoclastogenesis or osteoclast activity can cause osteoporosis and increase the risk of bone fracture.However,a few options are available for directly measuring osteoclast activity in vivo to test interventions that may affect osteoclasts.Here,we describe an in vivo method to measure osteoclast-mediated bone loss targeted at normal mouse calvaria.The method employs a novel procedure for measuring osteoclast resorption pits using micro-computed tomography.The potential utility of this mouse calvaria model to assess therapies targeting osteoclasts was validated using zoledronic acid,which is a nitrogen-containing bisphosphonate drug used to treat osteoporosis. 展开更多
关键词 bone mouse model OSTEOCLAST OSTEOPOROSIS resorption assay
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Optical lateral flow immune assay technology for body fluid sensing
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作者 Chen Liu Tianqi Zhao +5 位作者 Jialing Zhou Xiaoyun Hu Dinghao Pan Jinlong Li Wei Li Zhihui Dai 《Chinese Chemical Letters》 2026年第1期106-115,共10页
Detecting biomarkers in body fluids by optical lateral flow immune assay(LFIA) technology provides rapid access to disease information for early diagnosis.LFIA is based on an antigen-antibody reaction and is rapidly b... Detecting biomarkers in body fluids by optical lateral flow immune assay(LFIA) technology provides rapid access to disease information for early diagnosis.LFIA is based on an antigen-antibody reaction and is rapidly becoming the preferred choice of physicians and patients for point-of-care testing due to its simplicity,cost-effectiveness,and rapid detection.Observing the optical signal change from the colloidal gold of the traditional LFIA strip has been widely applied for various biomarkers detection in body fluids.Despite the significant progress,rapid real-time detection of color changes in the colloidal gold by the naked eye still faces many limitations,such as large errors and the inability to quantify and accurately detect.New optical LFIA strip technology has emerged in recent years to extend its application scenarios for achieving quantitative detection such as fluorescence,afterglow,and chemiluminescence.Herein,we summarized the development of optical LFIA technology from single to hyphenated optical signals for biomarkers detection in body fluids from invasive and non-invasive sources.Moreover,the challenge and outlook of optical LFIA strip technology are highlighted to inspire the designing of next-generation diagnostic platforms. 展开更多
关键词 Optical signal Lateral flow immune assay Hyphenated optical technology Body fluid sensing Point-of-care testing
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Fluorescent Detection of Succinylcholine via an Amide Naphthotube-Based Indicator Displacement Assay
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作者 Yin Ye Wang Hui +4 位作者 Wu Jianfang Wang Lili Yang Liupan Zhao Chengda Yao Huan 《有机化学》 北大核心 2025年第8期2953-2959,共7页
Succinylcholine(SC)is a widely used depolarizing muscle relaxant,but improper use can lead to arrhythmias and,in severe cases,pose a life-threatening risk.Additionally,some criminals exploit SC for illicit activities.... Succinylcholine(SC)is a widely used depolarizing muscle relaxant,but improper use can lead to arrhythmias and,in severe cases,pose a life-threatening risk.Additionally,some criminals exploit SC for illicit activities.Therefore,rapid SC detection is paramount for clinical practice and public safety.Currently,however,limited methods are available for the rapid detection of SC.A fluorescent indicator displacement assay sensor based on molecular recognition of an amide naphthotube was developed.This sensor enabled the rapid fluorescent detection of SC through competitive binding between SC and methylene blue with the amide naphthotube.The sensor exhibited exceptional sensitivity with a detection limit as low as 1.1μmol/L and a detection range of 1.1~60μmol/L,coupled with outstanding selectivity and robust stability.Furthermore,this sensor accurately determined SC levels in biological samples such as serum.In summary,this research provides a new solution for the rapid and accurate sensing of SC in complex matrices and offers new insights for the swift identification and detection of toxins. 展开更多
关键词 SUCCINYLCHOLINE molecular recognition indicator displacement assay fluorescent sensor
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Toxicity testing of Ostreopsis cf.ovata:mouse bioassay,cytotoxicity,and hemolysis neutralization assay
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作者 Yuping LAI Qingchun XU +4 位作者 Wenyu GAN Hanbai WANG Shiwei KOU Tianjiu JIANG Tao JIANG 《Journal of Oceanology and Limnology》 2025年第6期1902-1912,共11页
Ostreopsis cf.ovata is a marine benthic dinoflagellate in tropical and temperate seas and can produce potent toxic compounds.The existence of O.cf.ovata has been found in the Chinese coastal areas,but studies on its t... Ostreopsis cf.ovata is a marine benthic dinoflagellate in tropical and temperate seas and can produce potent toxic compounds.The existence of O.cf.ovata has been found in the Chinese coastal areas,but studies on its toxicity are very few.This study investigated the toxicity of the O.cf.ovata(TIO991)isolated from Weizhou Island in the South China Sea by using methanol and chloroform to extract toxic compounds from the algal cells cultured indoor.Experiments on mouse acute toxicity showed that the crude methanol extract(CME)of O.cf.ovata caused the death of mice in 16–18 min.Furthermore,CME inhibited the cell reproduction of human neuroblastoma cells(BE(2)-M17 cells)by Cell Counting Kit-8 with a dose-and time-effect relationship and caused cell death in the form of cell necrosis.We found that CME had strong hemolytic activity and was significantly inhibited by ouabain,indicating that CME might contain palytoxins.By contrast,the crude chloroform extract of O.cf.ovata was relatively weak in toxicity as obtained in our experiments on mouse acute toxicity,cytotoxicity,and hemolytic activity.This suggests that the algae may raise the potential threat to marine ecosystems and public health. 展开更多
关键词 Ostreopsis cf.ovata hemolysis neutralization assay cytotoxic activity mouse bioassay
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改良型PCR-RFLP法快速检测降糖药物基因多态性组合
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作者 翟振谦 饶梓雯 +3 位作者 孙良平 李力 龙玉舟 欧阳东成 《实验室检测》 2025年第22期13-15,共3页
目的建立一种聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)的改良方法,实现与降糖药物疗效及不良反应相关的基因多态性快速检测。方法以2型糖尿病(type 2 diabe... 目的建立一种聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism,PCR-RFLP)的改良方法,实现与降糖药物疗效及不良反应相关的基因多态性快速检测。方法以2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)患者及健康对照的外周血DNA为研究对象,设计覆盖SLC22A1(rs628031、rs12208357)、SLC47A1(rs2289669)、KCNJ11[rs5219(E23K)]、ABCC8、CYP2C9(^(*)2、^(*)3)和TCF7L2(rs7903146)等位点的多重引物体系,引入错配引物并结合顺序/并联酶切,优化扩增与条带判读。结果建立的体系最低DNA投料量5~10 ng,特异性>98%,批内/批间RSD<5%,与Sanger测序一致率达99%以上。单个96孔板可完成约80例检测,单样本成本低于测序的20%。初步临床分析提示部分基因型与二甲双胍或磺脲类疗效存在差异。结论改良型多重PCR-RFLP体系可在单管或分池流程下实现多位点联合判型,方法学性能稳定、成本可控;可作为测序技术的筛查性补充工具,用于降糖药物相关基因多态性检测。 展开更多
关键词 改良型pcr-rflp 降糖药物 基因多态性 个体化用药 2型糖尿病
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Specific and visual detection of EBOV based on a one-pot RT-RAA-CRISPR/Cas12a assay
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作者 Zanheng Huang Pei Huang +9 位作者 Zengguo Cao Tianyi Zhang Kaikai Jin Meihui Liu Yujie Bai Zhiyuan Gong Xuemeng Li Yuanyuan Li Haili Zhang Hualei Wang 《Virologica Sinica》 2025年第6期1054-1057,共4页
Dear Editor,The frequent emergence of life-threatening infectious diseases has posed a constant global threat in recent decades.Since the first identification of Ebola Virus Disease(EVD)in the Democratic Republic of C... Dear Editor,The frequent emergence of life-threatening infectious diseases has posed a constant global threat in recent decades.Since the first identification of Ebola Virus Disease(EVD)in the Democratic Republic of Congo(then Zaire)in 1976,there have been approximately 40 outbreaks. 展开更多
关键词 ebola virus disease evd CRISPR Cas one pot RT RAA CRISPR Cas assay Ebola virus disease
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An improved reporter gene assay for evaluating the biological activity of recombinant human growth hormone
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作者 Xiaoming Zhang Heyang Li +8 位作者 Ying Huang Ping Lv Lvyin Wang Kezheng Xu Yi Li Xinyue Hu Yue Sun Cheng-gang Liang Jing Li 《Journal of Pharmaceutical Analysis》 2025年第5期1160-1162,共3页
Recombinant human growth hormone(rhGH)has been widely used for the treatment of disorders associated with GH deficiency and multiple clinical indications[1].Accurate determination of biological activity is essential i... Recombinant human growth hormone(rhGH)has been widely used for the treatment of disorders associated with GH deficiency and multiple clinical indications[1].Accurate determination of biological activity is essential in the development,registration,and quality control of rhGH pharmaceutical products[2].However,the existing in vivo bioassay procedure based on somatropin-induced weight gain in rats is complicated,and the use of a rat cell line-based approach(Nb2-11 bioassay),which measures the production of adenosine triphosphate(ATP)as a direct indicator of cell growth,has a low mechanism of action(MOA)relevance.Therefore,novel rhGH bioassays are still needed.To this end,we developed a reporter gene assay(RGA)based on the GH/insulin-like growth factor-1(IGF-1)axis. 展开更多
关键词 determination biological activity nb bioassay vivo bioassay treatment disorders associated BIOassay recombinant human growth hormone rhgh reporter gene assay somatropin
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A one-pot Cas12i3/Cas13d-based assay for rapid portable identification of genotypes Ⅰ and Ⅱ African swine fever viruses
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作者 Zhe Wang Haili Wang +7 位作者 Xinghui Yan Jin Li Yu Wang Guosong Qin Wenbo Sun Yanfang Wang Gaiping Zhang Jianguo Zhao 《Journal of Integrative Agriculture》 2025年第11期4456-4459,共4页
African swine fever(ASF),caused by the African swine fever virus(ASFV),has brought enormous economic loss and represents a major threat to the global pig industry(Vergne et al.2017).ASFVs are divided into 24 genotypes... African swine fever(ASF),caused by the African swine fever virus(ASFV),has brought enormous economic loss and represents a major threat to the global pig industry(Vergne et al.2017).ASFVs are divided into 24 genotypes based on their B646L gene,with only genotypes Ⅰ and Ⅱ circulating globally(Dixon et al.2019). 展开更多
关键词 one pot african swine fever asf caused african swine fever virus asfv b l genewith assay cas d RAPID cas i
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CRISPR-based assays for the detection of BK virus and JC virus infections post-kidney transplantation
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作者 Yu Liu Jing-Song Xu +9 位作者 Li Cao Shuang Yang Tian-Ming Li Hai-Qian Huang Jun-Heng Zhang Xue Zhao Qian Liu Shun Li Min Li Hua Wang 《Military Medical Research》 2025年第12期1904-1919,共16页
Background:Organ transplantation recipients encounter significant risks from acute or chronic infections that threaten graft survival.BK virus(BKV)and JC virus(JCV)are 2 prominent opportunistic infection viruses,and t... Background:Organ transplantation recipients encounter significant risks from acute or chronic infections that threaten graft survival.BK virus(BKV)and JC virus(JCV)are 2 prominent opportunistic infection viruses,and they may cause polyomavirus-associated nephropathy and graft kidney loss in patients who are in an immunosuppressed state after kidney transplantation.Hence,timely detection and sustained monitoring of the viral load are indispensable.However,the current diagnostic methods remain limited,and the development of new molecular detection technology is extremely urgent.Methods:The sequences and concentrations of clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR)RNA(crRNA),the concentration of Cas13a,and the primers for recombinase polymerase amplification(RPA)were optimized for BKV and JCV detection.Next,a novel microfluidic dual-droplet chip was designed and fabricated,and it was integrated with CRISPR(ddCRISPR)to simultaneously qualitatively detect BKV and JCV.Subsequently,the ddCRISPR assay was verified using clinical samples.Then,a lateral flow strip combined with CRISPR(LFCRISPR)was developed for the detection of BKV and JCV in resource-limited settings.Results:A one-pot RPA-CRISPR reaction system was established and optimized for BKV and JCV detection.ddCRISPR can simultaneously and rapidly detect BKV and JCV with high sensitivity(10 copies/ml for BKV and 1 copy/ml for JCV),and provide absolute quantification,which is suitable for viral load detection and conducive to personalized and precise treatment for organ transplant recipients.LFCRISPR simplified the operational process through a simple visual readout,facilitating virus screening after organ transplantation.Conclusion:These platforms incorporate molecular testing into the transplantation treatment model,thereby reducing costs,prolonging the survival time of the graft,improving the clinical outcomes of postoperative management in kidney transplantation,and enhancing the patients’quality of life. 展开更多
关键词 BK virus(BKV) JC virus(JCV) Kidney transplantation Clustered regularly interspaced short palindromic repeats(CRISPR) Microfluidic Lateral flow assay(LFA)
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IGF2基因PCR-RFLP多态性与脂肪沉积相关性状的关联分析 被引量:51
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作者 刘桂兰 蒋思文 +2 位作者 熊远著 郑嵘 屈彦纯 《Acta Genetica Sinica》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第12期1107-1112,共6页
胰岛素样生长因子 2在胎儿生长发育、肿瘤细胞增殖、肌肉生长等方面具有重要的调控作用 ,是影响猪瘦肉量的主要候选基因。采用PCR RFLP技术 ,分析了IGF2基因第 8内含子部分片段在猪资源家系群体中的NciⅠ酶切片段多态性分布。IGF2基因... 胰岛素样生长因子 2在胎儿生长发育、肿瘤细胞增殖、肌肉生长等方面具有重要的调控作用 ,是影响猪瘦肉量的主要候选基因。采用PCR RFLP技术 ,分析了IGF2基因第 8内含子部分片段在猪资源家系群体中的NciⅠ酶切片段多态性分布。IGF2基因该片段具有两个NciⅠ酶切位点 (切点位于第 8内含子 ,分别记录为位点A和位点B) ,两位点在资源家系中均具有多态性。IGF2基因B位点酶切未突变个体均比酶切突变的个体背膘薄 18 2 8% (P<0 0 1) ,肥肉率低 2 2 4 3% (P <0 0 1) ,瘦肉率高 8 71% (P <0 0 1) ,位点A具有相同的影响趋势。在该研究群体中 ,IGF2基因发挥作用的方式主要为加性效应 。 展开更多
关键词 IGF2基因 pcr-rflp 背膘厚
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我国主要地方绵羊品种mtDNA D-loop区PCR-RFLP研究 被引量:25
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作者 李祥龙 张增利 +3 位作者 巩元芳 刘铮铸 贾青 王立泽 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期165-170,共6页
利用5种限制性内切酶(HinfⅠ,MspⅠ,Sau3AⅠ,XspⅠ,TaqⅠ),采用PCRRFLP技术研究了我国9个地方绵羊品种以及2个引入品种共计83只绵羊个体线粒体DNADloop区的多态性。结果表明,我国主要地方绵羊品种线粒体DNADloop区存在两种基本单体型,... 利用5种限制性内切酶(HinfⅠ,MspⅠ,Sau3AⅠ,XspⅠ,TaqⅠ),采用PCRRFLP技术研究了我国9个地方绵羊品种以及2个引入品种共计83只绵羊个体线粒体DNADloop区的多态性。结果表明,我国主要地方绵羊品种线粒体DNADloop区存在两种基本单体型,提示我国主要地方绵羊品种起源于两个母系祖先。线粒体DNADloop区多态度为0.0421%,说明我国地方绵羊品种线粒体DNA多态度较为贫乏。 展开更多
关键词 地方绵羊品种 线粒体DNA D-LOOP pcr-rflp
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细胞色素B基因PCR-RFLP鉴定阿胶原料 被引量:18
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作者 汪小龙 潘洁 +6 位作者 王师 万俊芬 包振民 解锡军 尤金花 解福生 师秀梅 《中国海洋大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期645-648,共4页
用细胞色素B基因PCR-RFLP方法对阿胶原料进行鉴定。提取马、牛、驴3种动物干皮DNA,PCR扩增细胞色素B基因保守区域的359 bp片段,用限制性内切酶HinfⅠ和HaeⅢ酶切,采用琼脂糖凝胶电泳获得了DNA指纹图谱,根据获得的DNA指纹图谱判定样品所... 用细胞色素B基因PCR-RFLP方法对阿胶原料进行鉴定。提取马、牛、驴3种动物干皮DNA,PCR扩增细胞色素B基因保守区域的359 bp片段,用限制性内切酶HinfⅠ和HaeⅢ酶切,采用琼脂糖凝胶电泳获得了DNA指纹图谱,根据获得的DNA指纹图谱判定样品所属物种。该方法不仅简便,还可以100%准确鉴定阿胶原料皮样所属物种来源,适合作为常规技术应用于阿胶原料鉴定。 展开更多
关键词 物种鉴定 阿胶 CYT B pcr-rflp
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应用RAPD标记和细胞质基因组PCR-RFLP技术研究大花蕙兰的遗传多样性 被引量:16
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作者 甘娜 谭向红 +2 位作者 陈其兵 魏育明 郑有良 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期349-355,共7页
利用RAPD、叶绿体和线粒体基因组PCRRFLP标记系统评价了大花蕙兰20个品种的遗传多样性。在50个RAPD引物分析中,有36个引物(72.0%)能揭示材料间的多态性,材料间遗传相似系数为0.503~0.765,平均0.598,根据遗传相似系数进行聚类分析表明,R... 利用RAPD、叶绿体和线粒体基因组PCRRFLP标记系统评价了大花蕙兰20个品种的遗传多样性。在50个RAPD引物分析中,有36个引物(72.0%)能揭示材料间的多态性,材料间遗传相似系数为0.503~0.765,平均0.598,根据遗传相似系数进行聚类分析表明,RAPD标记能将所有材料区分开。在7个叶绿体基因组(cpDNA)的PCRRFLP分析中,6个标记(87.5%)可扩增出1至多条清晰的谱带;扩增产物经7种限制性内切酶消化后,6个标记的19种引物/酶组合共检测到53条DNA片段,其中多态性片段有37条,占69.8%;材料间遗传相似系数变化范围为0.571~0.949,平均值为0.766。在8个线粒体基因组(mtDNA)的PCRRFLP标记分析中,只有3个(37.5%)标记能得到1条清晰的谱带;利用7种限制性内切酶对3个标记的扩增产物消化后,在10种标记/酶组合中,共检测到33条酶切片段,其中21条(63.6%)具有多态性;遗传相似系数为0.634~1.000,平均0.829。这些结果表明,RAPD标记揭示的大花蕙兰遗传多样性最高,其次为cpDNAPCRRFLP标记,而mtDNAPCRRFLP标记揭示的遗传多样性最低。 展开更多
关键词 大花蕙兰 RAPD pcr-rflp CPDNA MTDNA
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药用植物束花石斛、流苏石斛及其形态相似种的PCR-RFLP鉴别研究 被引量:44
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作者 张婷 徐珞珊 +3 位作者 王峥涛 周开亚 张宁 史永峰 《药学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期728-733,共6页
目的建立简易的采用rDNAITS区作为分子标记对中药石斛的基源植物进行分子鉴定的技术。方法用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCRRFLP)方法获得ITS片段的限制性图谱。束花石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用ClaI和ApaLI酶切,流苏石... 目的建立简易的采用rDNAITS区作为分子标记对中药石斛的基源植物进行分子鉴定的技术。方法用聚合酶链反应—限制性片段长度多态性(PCRRFLP)方法获得ITS片段的限制性图谱。束花石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用ClaI和ApaLI酶切,流苏石斛及其形态相似种的PCR扩增产物用SphI酶切。结果根据预测的PCRRFLP图谱,可以鉴别药用植物束花石斛、流苏石斛及它们的形态相似种。用这种方法鉴定了市场上收集的25件商品束花石斛、流苏石斛新鲜药材的原植物。结论rDNAITS的PCRRFLP可用于鉴定石斛药材的原植物,具有简便、费用低的优点。 展开更多
关键词 石斛 束花石斛 流苏石斛 ITS区 pcr-rflp
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应用PCR-RFLP技术鉴别区分中国沿海四种主要养殖扇贝 被引量:9
15
作者 王师 包振民 +5 位作者 张玲玲 李宁 战爱斌 郭文波 汪小龙 胡景杰 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2006年第7期210-214,共5页
扇贝的物种鉴定,通常主要是依据形态学标准来进行。然而,当用于形态辨别的部分被去除时,对扇贝的物种鉴定工作则显得十分困难。本研究利用对扇贝核糖体ITS的PCR-RFLP分析,首次从分子水平上鉴定区分了中国沿海四种主要的养殖扇贝(栉孔扇... 扇贝的物种鉴定,通常主要是依据形态学标准来进行。然而,当用于形态辨别的部分被去除时,对扇贝的物种鉴定工作则显得十分困难。本研究利用对扇贝核糖体ITS的PCR-RFLP分析,首次从分子水平上鉴定区分了中国沿海四种主要的养殖扇贝(栉孔扇贝、华贵栉孔扇贝、虾夷扇贝及海湾扇贝)。根据四种扇贝ITS的测序结果,选取三种内切酶(SmaI、MseI及TaqI)应用于PCR-RFLP分析。根据三种内切酶产生的酶切图谱,四种扇贝可被有效鉴别区分。酶切结果在四种扇贝各群体间的稳定性,证明了利用该技术对四种扇贝进行物种鉴定的可行性。本研究同时成功地对扇贝加工品-干贝进行了物种鉴定,证明了该技术在实践中应用的可行性。 展开更多
关键词 扇贝 物种鉴定 干贝 pcr-rflp ITS
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16种商品海参16S rRNA的PCR-RFLP鉴定方法 被引量:18
16
作者 文菁 胡超群 +1 位作者 张吕平 范嗣刚 《中国水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期451-457,共7页
基于570bp左右的线粒体16SrRNA基因片段,利用3种核酸内切酶(DdeI,Hae Ⅲ和Sty Ⅰ)对16种海参PCR产物进行酶切,分别产生10种、5种和5种单倍型,通过单倍型的组合,即能有效区分16种海参的种类。运用此方法对19种商品海参(包括冻品和干品)... 基于570bp左右的线粒体16SrRNA基因片段,利用3种核酸内切酶(DdeI,Hae Ⅲ和Sty Ⅰ)对16种海参PCR产物进行酶切,分别产生10种、5种和5种单倍型,通过单倍型的组合,即能有效区分16种海参的种类。运用此方法对19种商品海参(包括冻品和干品)进行鉴定,结果表明,9种产品属于错误贴标。本研究建立的PCR-RFLP方法方便、有效,可靠,可为海参产品评估、进出口种类鉴定提供实用高效的方法。本研究旨在为市场海参产品贴标情况的评估提供技术支撑。 展开更多
关键词 海参 16S RRNA基因 pcr-rflp 鉴定方法
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我国南方常见的6种寡毛实蝇PCR-RFLP快速鉴定研究 被引量:24
17
作者 吴佳教 梁帆 +2 位作者 胡学难 赵菊鹏 梁广勤 《江西农业大学学报》 CAS CSCD 2004年第5期770-773,共4页
 应用PCR-RFLP技术,对我国南方发生和诱捕到的6种寡毛实蝇开展了快速鉴定方法研究,结果表明,设计出的2组引物对6种供试实蝇线粒体DNA(mtDNA)的PCR扩增片断大小分别约为350bp和450bp。用限制性内切酶MSEI和DRAI对PCR扩增产物进行酶切,...  应用PCR-RFLP技术,对我国南方发生和诱捕到的6种寡毛实蝇开展了快速鉴定方法研究,结果表明,设计出的2组引物对6种供试实蝇线粒体DNA(mtDNA)的PCR扩增片断大小分别约为350bp和450bp。用限制性内切酶MSEI和DRAI对PCR扩增产物进行酶切,得到的酶切位点可将供试的6种实蝇区分开来。该方法不受供试实蝇食物源的影响,对各种虫态(卵、幼虫、蛹)和不同性别的成虫均适用,可用于实蝇的快速鉴定。 展开更多
关键词 实蝇 寡毛实蝇 pcr-rflp 快速鉴定 南方地区 农业害虫
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PCR-RFLP鉴定隐孢子虫种类研究 被引量:23
18
作者 张龙现 蒋金书 +3 位作者 刘群 宁长申 赵金凤 刘红英 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期555-559,共5页
为快速、准确鉴别人畜隐孢子虫种类,建立了巢式PCR扩增隐孢子虫18SrRNA基因的特殊区域,扩增片段测序结果表明:安徽牛源分离株(Cryptosporidiummuris)781bp;北京鸡源分离株(C.baileyi)776bp;北京牛源分离株(C.muris)781bp;河南牛源分离株... 为快速、准确鉴别人畜隐孢子虫种类,建立了巢式PCR扩增隐孢子虫18SrRNA基因的特殊区域,扩增片段测序结果表明:安徽牛源分离株(Cryptosporidiummuris)781bp;北京鸡源分离株(C.baileyi)776bp;北京牛源分离株(C.muris)781bp;河南牛源分离株(C.muris)725bp;长春牛源分离株(C.muris)776bp;宁夏鸡源分离株(C.baileyi)725bp,该片段位于18SrRNA全序列271~1103bp之间。使用Ssp 限制性内切酶消化发现C.muris产生418~420bp和305~363bp两个片段,C.baileyi产生544~545bp和185~231bp两个片段。所检测的6个分离株可以显著区分为C.muris和C.baileyi两个种,所建立的PCR-RFLP可以有效鉴别隐孢子虫种类。 展开更多
关键词 隐孢子虫 种类鉴定 pcr-rflp 人兽共患病
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五指山、二花脸和皮特兰猪的SLA-DQB基因外显子2的PCR-RFLP多态性分析 被引量:14
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作者 周波 谈永松 +1 位作者 刘红林 王林云 《上海农业学报》 CSCD 2005年第4期1-4,共4页
采用PCR-RFLP法对五指山猪、二花脸猪及皮特兰猪的SLA-DQB基因外显子2的PCR产物进行了分析,结果显示,SLA-DQB基因外显子2经限制酶HaeⅢ和RsaⅠ酶切共分出9种RFLP组合带型,五指山猪、二花脸猪和皮特兰猪分别有3种、3种和5种组合带型。Har... 采用PCR-RFLP法对五指山猪、二花脸猪及皮特兰猪的SLA-DQB基因外显子2的PCR产物进行了分析,结果显示,SLA-DQB基因外显子2经限制酶HaeⅢ和RsaⅠ酶切共分出9种RFLP组合带型,五指山猪、二花脸猪和皮特兰猪分别有3种、3种和5种组合带型。Hardy-Weinberg平衡分析表明,五指山猪和二花脸猪的SLA-DQB基因外显子2的两个酶切位点的PCR-RFLP带型达平衡状态,而皮特兰猪中只有RsaⅠ酶切位点达到平衡状态。 展开更多
关键词 SLA-DQB pcr-rflp
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南阳牛DGAT2基因PCR-RFLP多态性及其与生长性状相关性研究 被引量:9
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作者 张争锋 陈宏 +5 位作者 李秋玲 雷初朝 张春雷 王新庄 王居强 王轶敏 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2007年第8期945-950,共6页
以131头纯种南阳牛为研究材料,利用PCR-RFLPs对二酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)基因的第6内含子和第7内含子的多态性及其与生长发育的相关性进行了分析。结果表明:南阳牛在该位点分别检测到两种等位基因A/B和N/M,频率分别为0.875/0.125和0.9... 以131头纯种南阳牛为研究材料,利用PCR-RFLPs对二酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)基因的第6内含子和第7内含子的多态性及其与生长发育的相关性进行了分析。结果表明:南阳牛在该位点分别检测到两种等位基因A/B和N/M,频率分别为0.875/0.125和0.971/0.029。A和N等位基因是群体中的优势等位基因。该基因内含子6对南阳牛6月龄的体高、2岁体重、6月龄到两岁的胸围和体斜长都有显著的影响,内含子6的AA基因型的6月龄的体高比杂合型高3.8%,两岁体重高3.9%,6月龄到两岁的胸围分别高3.8%、3.4%、3.7%、4.3%;6月龄到两岁的体斜长分别高3.8%、3.6%、3.8%、3.1%。内含子7对18月龄和两岁的坐骨端宽有极显著的影响(P<0.01);对两岁的胸围有显著的影响(P<0.05)。 展开更多
关键词 DGAT2 南阳牛 pcr-rflp 生长性状
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