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牛结节性皮肤病病毒ORF132蛋白的原核表达及其对小鼠的免疫原性分析
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作者 顾晓晓 刘紫威 +3 位作者 李红欢 王文星 马忠臣 陈创夫 《畜牧兽医学报》 北大核心 2026年第3期1595-1604,共10页
为研究牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)ORF132蛋白原核表达并评估其免疫效果。本研究将LSDV ORF132基因在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,纯化。与弗式佐剂乳化耦合,最终接种小鼠蛋白剂量为100µg·只^(-1),评估其... 为研究牛结节性皮肤病病毒(lumpy skin disease virus,LSDV)ORF132蛋白原核表达并评估其免疫效果。本研究将LSDV ORF132基因在大肠杆菌BL21(DE3)中表达,纯化。与弗式佐剂乳化耦合,最终接种小鼠蛋白剂量为100µg·只^(-1),评估其ELISA定量的抗体滴度,细胞免疫反应及淋巴细胞增殖水平。结果显示,ORF132蛋白免疫组总IgG抗体滴度较高,IFNγ分泌水平极显著高于PBS组。淋巴细胞增殖试验显示,ORF132组能刺激小鼠淋巴细胞显著增殖且中和抗体效价较高。本研究通过小鼠免疫试验证明ORF132可以诱导较好的体液免疫和细胞免疫,是具有免疫原性的优势候选抗原,为后续开展多个抗原的联合免疫和牛体试验提供了素材。 展开更多
关键词 结节性皮肤病病毒 原核表达 orf132 免疫效果评价
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羊痘病毒属病毒ORF132的克隆及序列分析 被引量:1
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作者 丁森 聂福平 +8 位作者 王昱 肖进文 周雪梅 肖雯 黄鹤 刘生峰 周庆 李应国 蔡家利 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第9期783-786,共4页
目的为得到实验室现有的山羊痘、绵羊痘、疙瘩皮肤病病毒的ORF132基因序列,以便于后续研究。方法本实验在参考GenBank公布的羊痘病毒、疙瘩皮肤病病毒ORF132基因序列的基础上,设计了3对引物,对1株山羊痘病毒,1株绵羊痘病毒,两株疙瘩皮... 目的为得到实验室现有的山羊痘、绵羊痘、疙瘩皮肤病病毒的ORF132基因序列,以便于后续研究。方法本实验在参考GenBank公布的羊痘病毒、疙瘩皮肤病病毒ORF132基因序列的基础上,设计了3对引物,对1株山羊痘病毒,1株绵羊痘病毒,两株疙瘩皮肤病病毒进行PCR扩增,克隆扩增产物,进行测序分析。结果测序结果在NCBI网站进行比对后发现其与标准毒株有较大相似性,同时存在不同的变异现象。结论羊痘病毒属的3种病毒同源性极高,相比之下,ORF132基因具有较好的特异性,通过该次的基因分析,可为PCR引物设计和基因芯片探针设计提供基础。 展开更多
关键词 羊痘病毒 疙瘩皮肤病病毒 orf132 测序分析
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牛疙瘩皮肤病病毒ORF132基因的克隆及其原核表达 被引量:1
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作者 周雪梅 聂福平 +3 位作者 王昱 肖进文 聂奎 李应国 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期320-322,共3页
为原核表达牛疙瘩皮肤病病毒(LDSV)ORF132并对该基因进行生物信息学分析,本研究采用PCR扩增LSDV的ORF132基因,将其亚克隆至pGEX-6p-1载体中,构建重组质粒pGEX-LSDV-ORF132。生物信息学分析表明,LSDV的ORF132与Neethling vaccine LW1959... 为原核表达牛疙瘩皮肤病病毒(LDSV)ORF132并对该基因进行生物信息学分析,本研究采用PCR扩增LSDV的ORF132基因,将其亚克隆至pGEX-6p-1载体中,构建重组质粒pGEX-LSDV-ORF132。生物信息学分析表明,LSDV的ORF132与Neethling vaccine LW1959株LW132、NI-2490株LSDV132和NW-LW株LD132的相应推导氨基酸同源性分别为100%、100%和94.4%,与山羊痘病毒、绵羊痘病毒相应推导氨基酸的同源性为20.7%~36%。SDS-PAGE和western blot分析表明,pGEX-LSDV-ORF132在大肠杆菌BL21中经IPTG诱导主要以包涵体形式存在,其重组蛋白大小约为48.95 ku,并且与特异性抗体具有抗原反应活性。 展开更多
关键词 牛疙瘩皮肤病病毒 LSDV-orf132基因 序列分析 原核表达
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