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基于混合Nested Logit模型的用户需求估计
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作者 罗陈斌 薛巍立 张莲民 《管理工程学报》 北大核心 2026年第2期270-283,共14页
收益管理中,估计用户需求是产品品类管理、产品定价等后续优化工作的首要任务。准确地对用户的选择行为进行刻画和建模,可以帮助企业提升运营管理决策效果。在线零售环境下,用户的产品点击、购买、离开等行为都会被准确地记录下来。然而... 收益管理中,估计用户需求是产品品类管理、产品定价等后续优化工作的首要任务。准确地对用户的选择行为进行刻画和建模,可以帮助企业提升运营管理决策效果。在线零售环境下,用户的产品点击、购买、离开等行为都会被准确地记录下来。然而,很少有研究对用户购买前的离散行为进行刻画。并且,现有方法多使用单一模型分析所有用户的选择,忽略了用户选择行为的异质性。因此,本文提出混合Nested Logit模型,在考虑用户异质性的基础上,对用户两阶段选择行为进行刻画,将用户分类和类内选择构建在同一框架内。为同时估计选择模型参数并识别用户类型,本文使用EM算法求解模型参数。结果显示,EM算法能有效提升估计效率,并且保证结果的收敛性。本文使用京东移动应用程序(App)的零售数据进行实证研究。结果显示,在数据稀疏程度较高的情况下,本文模型的预测准确度平均比基准模型高13.71%,说明考虑用户异质性和多阶段选择能更准确地刻画用户选择行为;进一步将需求估计结果应用于产品品类管理策略制定上,结果显示,本文模型生成的产品品类所带来的收益平均比基准模型高5.11%,这进一步说明,在线环境中不准确的用户行为刻画会导致次优的运营决策。 展开更多
关键词 离散选择模型 混合nested Logit模型 需求估计 EM算法
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应用PCR及Nested-PCR技术检测柑橘黄龙病病原研究 被引量:35
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作者 丁芳 易干军 王国平 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期803-806,共4页
以采自田间和广东省农业科学院果树研究所防虫隔离网室内嫁接并感染黄龙病的5个柑橘品种叶片为材料,以草本指示植物长春花(Catharanthusroseas)和木本指示植物柑(CitrusreticulataBlanco)鉴定为基础,采用改良的CTAB法提取总DNA,在此... 以采自田间和广东省农业科学院果树研究所防虫隔离网室内嫁接并感染黄龙病的5个柑橘品种叶片为材料,以草本指示植物长春花(Catharanthusroseas)和木本指示植物柑(CitrusreticulataBlanco)鉴定为基础,采用改良的CTAB法提取总DNA,在此基础上进行常规PCR与NestedPCR检测,并对特异目的片段进行克隆、测序。试验证明NestedPCR比常规PCR的灵敏度更高。这两种方法均可以检测出未显症的黄龙病材料,但NestedPCR可以在木本指示植物嫁接后40d左右、草本指示植物摩擦接种1个月左右检测到病原;而常规PCR在木本植物嫁接后60d左右、草本植物摩擦接种近2个月左右才能检测到病原。常规PCR所能检测到的最低DNA的量为pg数量级;NestedPCR检测病原DNA灵敏度约为常规PCR的104倍。 展开更多
关键词 柑橘 黄龙病 PCR nested—PCR 检测
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广西砂糖橘黄龙病亚洲种的Nested-PCR检测 被引量:8
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作者 黄宏明 王茜 +2 位作者 徐宁 韦宗便 廖惠红 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期1997-2000,共4页
【目的】利用柑橘黄龙病病原亚洲种16S rDNA序列的特异引物检测疑似黄龙病的砂糖橘叶片样品,为砂糖橘黄龙病的综合防控提供理论依据。【方法】选取采自广西9市17个采样点的214份疑似黄龙病及无症状砂糖橘叶片样品,用试剂盒法提取叶脉基... 【目的】利用柑橘黄龙病病原亚洲种16S rDNA序列的特异引物检测疑似黄龙病的砂糖橘叶片样品,为砂糖橘黄龙病的综合防控提供理论依据。【方法】选取采自广西9市17个采样点的214份疑似黄龙病及无症状砂糖橘叶片样品,用试剂盒法提取叶脉基因组DNA,采用柑橘黄龙病亚洲种16S rDNA特异引物进行PCR扩增,扩增结果在1%琼脂糖凝胶电泳上检测,统计待检样品柑橘黄龙病病原菌亚洲种的带菌率。【结果】对214份样品的Nested-PCR扩增结果,部分样品可得到1160 bp左右的特异条带,与预期大小相符但条带明暗不同。来自广西9市17个采样点的砂糖橘叶片样品均检测出黄龙病亚洲种病原,平均检出率均在66.0%以上,其中检出率最高的是来自东兴市的样品,检出率为100.0%,检出率最低的是来自南宁市的样品,检出率为66.9%;斑驳、缺素型黄化、叶脉黄化、小叶和无症状叶片样品中均可检测出黄龙病亚洲种。【结论】Nested-PCR技术具有灵敏度高、特异性强的特点,能够快速、准确检测出各种症状样品的黄龙病病原,可用于柑橘黄龙病的早期诊断。 展开更多
关键词 砂糖橘 黄龙病病原 检测率 nested—PCR 广西
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禽弱毒疫苗中鸡传染性贫血病病毒nested-PCR检测方法的建立 被引量:3
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作者 李晓晗 房立春 +3 位作者 李阳 崔治中 常爽 赵鹏 《中国家禽》 北大核心 2017年第10期18-22,共5页
疫苗中污染鸡传染性贫血病毒(CIAV)是造成CIAV感染的途径之一,而通常疫苗中CIAV污染剂量较低,应用一般的技术难以检测到。为了更灵敏地检测禽弱毒疫苗中CIAV的污染,根据Gen Bank已发表的CIAV基因序列,针对其保守区设计了外用引物和内用... 疫苗中污染鸡传染性贫血病毒(CIAV)是造成CIAV感染的途径之一,而通常疫苗中CIAV污染剂量较低,应用一般的技术难以检测到。为了更灵敏地检测禽弱毒疫苗中CIAV的污染,根据Gen Bank已发表的CIAV基因序列,针对其保守区设计了外用引物和内用引物,通过优化反应体系和反应条件建立了检测CIAV的nested-PCR检测方法。结果显示,所建立的检测方法灵敏度比常规PCR高100倍,该方法可以检测到1 000羽份弱毒疫苗中1 EID_(50)的低剂量CIAV污染,应用该方法从送检的50个疫苗样品中检测出4个样品为CIAV阳性。该方法与禽白血病病毒、禽网状内皮组织增生症病毒以及马立克氏病病毒等的基因均无交叉反应,具有很好的特异性。提示所建立的nested-PCR灵敏度高、特异性强,可用于检测禽弱毒疫苗中CIAV低剂量的污染。 展开更多
关键词 CIAV nested—PCR 灵敏性 特异性 污染
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用Nested-PCR诊断鸡弯曲菌病的研究 被引量:2
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作者 张康 龚振华 +8 位作者 李蕾 王洪伟 李玉清 张丽娟 王丽萍 庄青叶 于建敏 李金平 刘国庆 《中国动物检疫》 CAS 2012年第11期44-46,共3页
本研究采用Nested-PCR方法,对于临床采集的感染空肠弯曲菌的病鸡组织样品进行了检测,研究结果表明,采用Nested-PCR方法检测空肠弯曲菌具有结果清晰,操作简便,快速等特点。研究还发现,空肠弯曲菌对鸡的致病性可能增强,应引起重视。
关键词 空肠弯曲菌 nested PCR 禽病诊断
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进口锦鲤暴发病病原的nested-PCR鉴定 被引量:63
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作者 刘荭 史秀杰 +1 位作者 高隆英 江育林 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期414-418,共5页
为了查明锦鲤暴发性疾病的病因 ,将患病锦鲤的脑、肝、脾和肾等组织悬液接种到CO、CK和EPC等鱼类细胞系中培养 ,均未发现细胞病变 ;从病灶中取样进行病原菌的分离和培养 ,证明锦鲤有副溶血弧菌和嗜水气单胞菌的感染。制备锦鲤疱疹病毒 (... 为了查明锦鲤暴发性疾病的病因 ,将患病锦鲤的脑、肝、脾和肾等组织悬液接种到CO、CK和EPC等鱼类细胞系中培养 ,均未发现细胞病变 ;从病灶中取样进行病原菌的分离和培养 ,证明锦鲤有副溶血弧菌和嗜水气单胞菌的感染。制备锦鲤疱疹病毒 (KHV)的 2对引物KHV9/ 5F和KHV9/ 5R ,KHV1和KHV2 ,用嵌套式聚合酶链式反应 (nested -PCR)在脑和脾脏组织的抽提物中扩增出长度为 4 12bp的特异性的DNA片段。将该片段的nested -PCR扩增产物纯化后 ,克隆、测序。用NCBI -Blast软件将测序结果在Genebank中进行搜寻、比较 ,结果发现与注册号为AF4 1180 3的KHV基因序列的一部分片段有 99%的同源性。因此初步判断这次锦鲤暴发性疾病是由KHV引起的 。 展开更多
关键词 锦鲤 暴发病 病原 nested-pcr鉴定 嵌套式聚合酶链式反应
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应用RT-nested-PCR检测犬唾液中狂犬病毒的初步研究 被引量:5
7
作者 张建明 王灵岚 +2 位作者 林代华 张志珊 严延生 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期641-643,共3页
目的建立RT-nested-PCR方法,用于检测可疑狂犬唾液中的狂犬病毒,为狂犬病的快速诊断提供一种新思路。方法根据N基因的保守区序列设计2对引物,通过反应条件的优化,建立RT-nested-PCR的方法,以扩增狂犬病毒的N基因,并用该方法检测可疑狂... 目的建立RT-nested-PCR方法,用于检测可疑狂犬唾液中的狂犬病毒,为狂犬病的快速诊断提供一种新思路。方法根据N基因的保守区序列设计2对引物,通过反应条件的优化,建立RT-nested-PCR的方法,以扩增狂犬病毒的N基因,并用该方法检测可疑狂犬唾液中的狂犬病毒。结果该方法的最小RNA检出量可达11.2fg,并具有较好的特异性和重复性。结论建立的RT-nested-PCR检测法,特异性强,敏感度高,结果可靠,操作便捷,值得推广应用。 展开更多
关键词 狂犬病毒 RT-nested—PCR 唾液
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nested-PCR试剂盒检测牛精液中的布鲁氏菌DNA 被引量:6
8
作者 曹小安 邱昌庆 +2 位作者 周继章 蔺国珍 郑福英 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期137-139,共3页
目的布鲁氏菌是兼性细胞内寄生菌,能够在吞噬细胞内长期存活并繁殖,引起家畜流产和人的波浪热。根据病原性和感染宿主的不同将布鲁氏菌分为六个种,能否快速、有效地从各种病料中检出布鲁氏菌,对及时控制布鲁氏菌在家畜中的传播和预防对... 目的布鲁氏菌是兼性细胞内寄生菌,能够在吞噬细胞内长期存活并繁殖,引起家畜流产和人的波浪热。根据病原性和感染宿主的不同将布鲁氏菌分为六个种,能否快速、有效地从各种病料中检出布鲁氏菌,对及时控制布鲁氏菌在家畜中的传播和预防对人的感染十分重要。方法2006年6月,宁夏某公司奶牛场工作人员送检3份奶牛冻干精液,用巢式PCR检测出其中的2份为布鲁氏菌感染阳性,这年8月,重复取这2头种公牛的冻精、鲜精复查。结果用本方法检测全部为布鲁氏菌感染阳性。结论这是国内首次用巢式聚合酶链反应(nested-PCR)试剂盒从送检的牛精液中检出了布鲁氏菌DNA片段。 展开更多
关键词 布鲁氏菌 nested-pcr 牛精液 检测
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用Nested-PCR检测广西黄皮与九里香黄龙病病原 被引量:5
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作者 邓崇岭 陈传武 +5 位作者 赵小龙 付慧敏 陈国平 白先进 娄兵海 吴礽超 《中国农学通报》 CSCD 北大核心 2010年第17期273-276,共4页
运用Nested-PCR技术对来自广西部分市、县的40个黄皮和九里香进行柑桔黄龙病(CitrusHuanglongbing,HLB)病原检测,结果表明:从部分黄皮和九里香样品抽提的DNA中,可扩增出一条特异性的400bp条带,说明广西种植的黄皮和九里香均可感染黄龙病... 运用Nested-PCR技术对来自广西部分市、县的40个黄皮和九里香进行柑桔黄龙病(CitrusHuanglongbing,HLB)病原检测,结果表明:从部分黄皮和九里香样品抽提的DNA中,可扩增出一条特异性的400bp条带,说明广西种植的黄皮和九里香均可感染黄龙病;在柑桔黄龙病疫区,黄皮和九里香黄龙病感染率分别为35.0%和40.0%,黄龙病感染率已相当高。为了减少柑桔黄龙病的发生,有利于对柑桔黄龙病进行综合防控,不宜在柑桔种植区栽种黄皮和九里香,铲除已感染黄龙病的植株。 展开更多
关键词 黄皮 九里香 黄龙病 nested-pcr
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应用套入式聚合酶链反应(Nested-PCR)检测蓝舌病病毒的研究 被引量:4
10
作者 马洪超 孙淑芳 +8 位作者 陶茂辉 尹燕博 郭福生 龚振华 蔡丽娟 蒋正军 丁有胜 黄运生 陈书琨 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第2期145-149,共5页
本实验建立了一种Nested PCR方法。应用该方法检测 5株标准株蓝舌病病毒 (T4、T10、T11、T16、T2 0 )和 5株国内蓝舌病病毒分离株 (CF4、AF6、Z1、H1、G14) ,检测结果均为阳性 ,而检测相关环状病毒 (EHD2、EHD6、Ibraki) ,检测结果均为... 本实验建立了一种Nested PCR方法。应用该方法检测 5株标准株蓝舌病病毒 (T4、T10、T11、T16、T2 0 )和 5株国内蓝舌病病毒分离株 (CF4、AF6、Z1、H1、G14) ,检测结果均为阳性 ,而检测相关环状病毒 (EHD2、EHD6、Ibraki) ,检测结果均为阴性。研究证明 ,此方法可检测到3 5fg的BTV—RNA ,灵敏度较高。该方法成功区分了蓝舌病病毒和相关环状病毒 ,比血清学方法更加优越 ,在临床检测方面具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 家畜 蓝舌病病毒 nested-pcr 检测方法
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16S nested-PCR技术检测玉米细菌性枯萎病菌(英文) 被引量:10
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作者 吴琼 陈枝楠 +1 位作者 范怀忠 金显忠 《植物病理学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期420-427,共8页
玉米细菌性枯萎病是玉米上的重要种传病害,病原菌为Pantoea stewartiisubsp.stewartii。本研究设计了16S通用引物,扩增该病菌及其近似种的16S rDNA,通过序列测定和分析,针对该病菌设计了特异性引物,采用nested-PCR技术,能够准确地区别... 玉米细菌性枯萎病是玉米上的重要种传病害,病原菌为Pantoea stewartiisubsp.stewartii。本研究设计了16S通用引物,扩增该病菌及其近似种的16S rDNA,通过序列测定和分析,针对该病菌设计了特异性引物,采用nested-PCR技术,能够准确地区别该病菌及其近似种,检测的灵敏度在DNA水平上达到10-3pg级,检测活菌则达到2 cfu。检测人工污染的玉米种子时,不受种子提取液中其它物质的干扰,灵敏度依然达到2 cfu。 展开更多
关键词 玉米细菌性枯萎病菌 16S RDNA 检测 巢式PCR
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Nested-PCR检测种传番茄细菌性溃疡病菌 被引量:6
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作者 闵现华 刘箐 +6 位作者 韩跃武 文朝慧 王军平 刘姝彤 刘雅莉 宋蕤 施颖波 《西北农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期28-31,共4页
利用番茄溃疡病菌特异性引物对纯菌液、模拟带菌种子及自然感染种子提取液分别进行Direct-PCR和Nested-PCR检测。结果在纯菌液中,Direct-PCR的检测灵敏度为105cfu/mL,Nested-PCR为102cfu/mL;在模拟带菌种子提取液中,Direct-PCR的检测灵... 利用番茄溃疡病菌特异性引物对纯菌液、模拟带菌种子及自然感染种子提取液分别进行Direct-PCR和Nested-PCR检测。结果在纯菌液中,Direct-PCR的检测灵敏度为105cfu/mL,Nested-PCR为102cfu/mL;在模拟带菌种子提取液中,Direct-PCR的检测灵敏度为107cfu/mL,Nested-PCR为104cfu/mL;在自然感染种子提取液中,稀释104倍后Nested-PCR仍然可以检出。建立的番茄种子Nested-PCR检测技术,无需经过核酸提取步骤,可以在8 h内完成整个检测过程,方便快捷,成本低廉,可作为番茄种子带菌的常规检测方法。 展开更多
关键词 番茄溃疡病 番茄种子 Direct-pcr nested-pcr
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应用Nested-PCR技术检测人工感染绵羊蓝舌病病毒 被引量:1
13
作者 马洪超 孙淑芳 +4 位作者 陶茂晖 尹燕博 郑文伯 蒋正军 蔡丽娟 《中国动物检疫》 CAS 2000年第12期20-22,共3页
实验采用6只绵羊分成3组,一组作为对照接种BHK21细胞上清液,另二组分别接种BTV10和中国分离株Z1株,攻毒定期采血提取抗原并提取病毒RNA,同时进行琼脂扩散试验、普通PCR、Nested-PCR试验。结果在整个... 实验采用6只绵羊分成3组,一组作为对照接种BHK21细胞上清液,另二组分别接种BTV10和中国分离株Z1株,攻毒定期采血提取抗原并提取病毒RNA,同时进行琼脂扩散试验、普通PCR、Nested-PCR试验。结果在整个攻毒期间,琼脂扩散方法检测不到抗原,普通 PCR方法只能在攻毒后 12 d~ 15 d测得抗原,而 Nested-PCR在攻毒后 6 d即可测得病毒 RNA,并且可一直持续到 30 d。试验证明, Nested- PCR方法是高度敏感的检测抗原的方法。在临床上能够较早地检出抗原,这对于及时采取有效措施,控制疾病流行具有积极的意义。 展开更多
关键词 nested-pcr技术 检测 人工感染 绵羊 蓝舌病病毒 琼脂扩散试验
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Nested-PCR检测恒河猴泡沫病毒 被引量:2
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作者 唐东红 李晓燕 +3 位作者 仝品芬 李春花 陈瑜 代解杰 《中国实验动物学报》 CAS CSCD 2009年第1期61-64,共4页
目的用nested-PCR检测恒河猴泡沫病毒SFV的前病毒形式。方法从SFV-1的pol区域选择两对引物分别对原代猴肾细胞(rhesus monkey kidney,RMK)及猴外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBLs)进行体外扩增,扩增产物经1.0%的琼脂糖... 目的用nested-PCR检测恒河猴泡沫病毒SFV的前病毒形式。方法从SFV-1的pol区域选择两对引物分别对原代猴肾细胞(rhesus monkey kidney,RMK)及猴外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBLs)进行体外扩增,扩增产物经1.0%的琼脂糖凝胶电泳,证实其特异性。阳性对照使用具有典型泡沫样病变的RMK377细胞株的前病毒DNA,阳性对照的PCR扩增产物经测序证实,阴性对照为恒河猴的SRV-1cDNA。结果nested-PCR能快速灵敏的直接从猴外周血淋巴细胞检出SFV的前病毒形式,与RMK细胞培养结果基本相一致。结论本实验所建立的检测SFV的nested-PCR法能快速准确的检测猴群中的SFV的带毒情况,对于提高实验猴的质量具有重要意义。 展开更多
关键词 猴泡沫病毒 前病毒 巢式PCR
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应用NESTED-PCR法检测细胞培养物中的支原体污染 被引量:2
15
作者 张曦 滕峥 朱兆奎 《上海预防医学》 CAS 2002年第9期414-415,419,共3页
[目的 ] 研究细胞培养物中支原体污染的快速检测方法。  [方法 ] 引物选择各型支原体 16S和 2 3SrRNA处的共同保守区域 ,应用NESTED -PCR ,检测细胞培养物中的支原体污染。  [结果 ] NESTED -PCR能检测 6种常见的污染细胞培养物的... [目的 ] 研究细胞培养物中支原体污染的快速检测方法。  [方法 ] 引物选择各型支原体 16S和 2 3SrRNA处的共同保守区域 ,应用NESTED -PCR ,检测细胞培养物中的支原体污染。  [结果 ] NESTED -PCR能检测 6种常见的污染细胞培养物的支原体 ,扩增的片段分别在 3 60~ 5 0 0bp和 15 0~ 3 0 0bp ;NESTED -PCR检测敏感性比一步法高。  [结论 ] 应用NESTED -PCR检测细胞培养物中的支原体污染 ,具有快速、特异和敏感的特点。 展开更多
关键词 支原体 细胞培养物 nested-pcr
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One tube nested-PCR在SNP基因型分型中的应用
16
作者 张羽 张晓娟 +2 位作者 王胜宝 宋晓利 李小刚 《湖南农业大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期136-142,共7页
nested–PCR是一种在普通PCR基础上发展起来的专门用于检测单核苷酸多态性(SNP)的技术。结合nested–PCR技术在水稻中检测SNP的研究,以1个水稻香味基因Fgr和3个稻瘟病基因Pi–ta、Pi9、Pigm为例,把nested–PCR的4条引物同时加在一管PCR... nested–PCR是一种在普通PCR基础上发展起来的专门用于检测单核苷酸多态性(SNP)的技术。结合nested–PCR技术在水稻中检测SNP的研究,以1个水稻香味基因Fgr和3个稻瘟病基因Pi–ta、Pi9、Pigm为例,把nested–PCR的4条引物同时加在一管PCR反应中进行扩增,在其序列内针对SNP位点设计功能标记,用来扩增含有突变位点的DNA片段。通过优化引物浓度梯度和改良反应程序,达到了一步快速检测SNP基因型的目的。 展开更多
关键词 nested–PCR 单核苷酸多态性 基因型分型
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Nested-PCR在人间布鲁氏菌病早期快速诊断中的探讨 被引量:6
17
作者 刘志国 王妙 +6 位作者 塔娜 李晓燕 尉瑞平 米景川 李丹 崔步云 李振军 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第2期188-192,共5页
目的探讨Nested-PCR在布鲁氏菌病(布病)患者早期快速诊断中的可行性。方法用Nested-PCR对布鲁氏菌标准菌株的19生物型、4个疫苗株(M5、A19、S2和104M)和有血清交叉反应的菌株(人苍白杆菌、大肠杆菌O∶157、小肠结肠炎耶尔森氏菌O∶9)进... 目的探讨Nested-PCR在布鲁氏菌病(布病)患者早期快速诊断中的可行性。方法用Nested-PCR对布鲁氏菌标准菌株的19生物型、4个疫苗株(M5、A19、S2和104M)和有血清交叉反应的菌株(人苍白杆菌、大肠杆菌O∶157、小肠结肠炎耶尔森氏菌O∶9)进行扩增,评价该方法的特异性;用Nested-PCR对倍比稀释的16M菌株DNA(100~10^(-7))进行扩增,评价该方法的分析敏感性。用Nested-PCR对临床采集的200份布病样本DNA进行检测,评价该方法在临床样本检测中的可行性。结果Nested-PCR能特异性的检出所有布鲁氏菌种,而与布鲁氏菌有血清学交叉反应的菌株和阴性对照未见扩增。试验表明该方法的分析敏感性至少为10-6(相当于43 fg/μL羊种布鲁氏菌DNA),明显高于BCSP31-PCR。该方法首轮引物的扩增阳性率为4.5%(9/200),次轮引物扩增的阳性率为75.5%(151/200),与血清学检测结果有较高的一致性。结论Nested-PCR可尝试用于布病患者的早期筛查,但尚需优化改进。 展开更多
关键词 布病 nested-pcr 早期诊断
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安祖花细菌性疫病的Nested-PCR检测 被引量:3
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作者 孟鹤 金茂勇 +5 位作者 肖橘清 张宝珠 明军 袁素霞 刘春 张宁 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期2017-2022,共6页
根据基因库中已发表的安祖花细菌性疫病致病菌粉黛黄单胞杆菌(Xanthomonas campestris pv.dieffenbachiae)基因序列设计引物XcF1/XcR1、XcF2/XcR2,通过扩增条件优化,建立了安祖花细菌性疫病的Nested-PCR检测方法,可以直接从感染细菌性... 根据基因库中已发表的安祖花细菌性疫病致病菌粉黛黄单胞杆菌(Xanthomonas campestris pv.dieffenbachiae)基因序列设计引物XcF1/XcR1、XcF2/XcR2,通过扩增条件优化,建立了安祖花细菌性疫病的Nested-PCR检测方法,可以直接从感染细菌性疫病的安祖花组织DNA中扩增出1条343bp的特异性条带。分析表明该序列完全存在于GenBank登录的Xanthomonas campestris pv.dieffenbachiae序列X70380.1中。通过对安祖花植株进行Nested-PCR扩增,在植株不同部位均检测到了343bp的特异性条带,且病原菌在植株中分布不均匀,其中老叶叶柄中扩增强度最高,根茎连接处、老叶、嫩叶柄、嫩叶、佛焰苞柄扩增强度次之,根、佛焰苞和花序中扩增最弱。 展开更多
关键词 安祖花 细菌性疫病 粉黛黄单胞杆菌 nested-pcr
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沃柑黄龙病亚洲种Nested-PCR检测与调查分析 被引量:1
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作者 刘福平 王茜 +5 位作者 陈东奎 陈香玲 廖惠红 汪妮娜 黄宏明 黄其椿 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2020年第1期101-107,共7页
【目的】探究沃柑感染黄龙病的田间症状表现及各症状与感染黄龙病的相关性,为种植者尽早鉴别黄龙病树和及时做好黄龙病防控工作提供参考依据。【方法】从广西不同地区沃柑果园采集沃柑黄龙病疑似样品,对样品按症状分类并记录,用试剂盒... 【目的】探究沃柑感染黄龙病的田间症状表现及各症状与感染黄龙病的相关性,为种植者尽早鉴别黄龙病树和及时做好黄龙病防控工作提供参考依据。【方法】从广西不同地区沃柑果园采集沃柑黄龙病疑似样品,对样品按症状分类并记录,用试剂盒法提取叶脉和果柱基因组DNA,采用黄龙病亚洲种的16S r DNA特异引物f D1/fD2和OI1/OI2进行巢式PCR(Nested-PCR)扩增,扩增结果在1%琼脂糖凝胶电泳上检测,统计不同症状样品的阳性率。【结果】收集的214份黄龙病疑似样品中,不同症状样品均检出黄龙病亚洲种病原菌,检出阳性率表现为典型红鼻子果=斑驳黄化叶>果蒂稍红果>均匀黄化叶>叶脉黄化叶>僵果>缺锌黄化叶>其他黄化叶>正常叶。各症状类型与感染黄龙病均存在相关性,但存在差异,其中,典型红鼻子果和斑驳黄化叶阳性率均为100.0%,与感染黄龙病相关性最大;其次果蒂稍红果阳性率为90.9%,与感染黄龙病相关性很大;夏、秋梢均匀黄化叶阳性率为46.5%,与感染黄龙病相关性大。沃柑感染黄龙病后症状复杂,大多出现两种以上复合症状,结果树最初症状为出现果蒂稍红果,落果较多,未结果树以夏、秋梢黄化居多,根系容易受损;正常叶阳性率达16.7%,说明沃柑感染黄龙病早期不易显症。【结论】沃柑出现典型红鼻子果和斑驳黄化叶,可田间诊断为黄龙病树;出现果蒂稍红果,并严重落果,基本可田间诊断为黄龙病树;夏、秋梢均匀黄化黄龙病检出率高,但确诊还需与其他疑似症状(叶脉黄化叶、僵果、缺锌黄化叶、其他黄化叶和正常叶)一样通过PCR进一步检测。Nested-PCR检测技术灵敏性高,可作为沃柑感染黄龙病的早期鉴定技术。 展开更多
关键词 沃柑 黄龙病病原 nested-pcr检测 调查分析
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柑橘黄龙病nested-PCR检测技术在柑橘苗木生产中的应用 被引量:12
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作者 陈传武 白先进 +4 位作者 赵小龙 付慧敏 邓崇岭 吴礽超 王明召 《植物保护》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期91-93,共3页
柑橘黄龙病(huanglongbing,HLB)是柑橘生产上的一种毁灭性病害。本研究以柑橘叶脉为材料,采用nes-ted-PCR技术对广西部分柑橘苗圃苗木进行了黄龙病检测。结果表明,nested-PCR技术不仅可以检测已经表现症状的苗木样品,还可以检测出带病... 柑橘黄龙病(huanglongbing,HLB)是柑橘生产上的一种毁灭性病害。本研究以柑橘叶脉为材料,采用nes-ted-PCR技术对广西部分柑橘苗圃苗木进行了黄龙病检测。结果表明,nested-PCR技术不仅可以检测已经表现症状的苗木样品,还可以检测出带病但不显症的苗木样品。2007年共检测柑橘苗木样品1 950个,2008年共检测样品1 480个,黄龙病苗木检出率分别为10.31%和6.22%。本研究对及早控制带病苗木的传播,繁育柑橘无病毒苗木具有重要的意义。 展开更多
关键词 柑橘 黄龙病 nested-pcr 苗木
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