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针对微量细胞样本进行细胞核和线粒体基因组同步快速分离的方法研究
1
作者
胡胜
胡哲
汪方奎
《山东化工》
CAS
2024年第3期151-154,共4页
开发了一种针对微量细胞样本进行细胞核和线粒体基因组同步快速分离的方法。该方法首先利用体积分数1%非离子型表面活性剂NP-40能够选择性破坏细胞膜而维持细胞核完整性的特征,实现了细胞的轻柔裂解和细胞核完整性的维持;其次通过差速离...
开发了一种针对微量细胞样本进行细胞核和线粒体基因组同步快速分离的方法。该方法首先利用体积分数1%非离子型表面活性剂NP-40能够选择性破坏细胞膜而维持细胞核完整性的特征,实现了细胞的轻柔裂解和细胞核完整性的维持;其次通过差速离心,实现细胞核(核基因组)与线粒体基因组的同步分离。经过显微成像观察,核酸蛋白分析仪检测以及PCR分析,实现了从10^(2)到10^(6)个悬浮培养细胞中高质量线粒体基因组的分离纯化。本方法获取的线粒体基因组无核基因组污染,为后续开展线粒体群体遗传分析、线粒体疾病诊断提供了一种高效、快速、低成本的解决方案。
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关键词
线粒体分离纯化
微量细胞
np40
缓冲液
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职称材料
双向电泳比较两种方法获得的水稻叶片蛋白
被引量：
11
2
作者
梁书剑
张萌
+2 位作者
王巍
关双红
孙野青
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2009年第3期68-71,共4页
水稻是研究单子叶植物遗传和分子生物学的模式植物,是研究植物基因组学和蛋白质组学的一个重要的生物材料。双向电泳作为蛋白质组学中蛋白分离的主要方法,其关键步骤在于蛋白质的提取。为了比较不同蛋白提取方法,采用TCA/丙酮沉淀法和Mg...
水稻是研究单子叶植物遗传和分子生物学的模式植物,是研究植物基因组学和蛋白质组学的一个重要的生物材料。双向电泳作为蛋白质组学中蛋白分离的主要方法,其关键步骤在于蛋白质的提取。为了比较不同蛋白提取方法,采用TCA/丙酮沉淀法和Mg/NP-40提取法分别提取水稻叶片总蛋白,用双向凝胶电泳分离两种方法获得的蛋白。结果表明,在双向图谱中,Mg/NP-40提取法分离的蛋白点数较多,RuBisCO大亚基的含量较低,适于分离等电点在5～7范围内、分子量在14～20kD和高于67kD的水稻叶片蛋白质;TCA/丙酮沉淀法分离的蛋白点数较少,适于分离等电点在4～5范围内、分子量在31～67kD内的水稻叶片蛋白质。
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关键词
水稻蛋白
双向电泳
TCA/丙酮沉淀法
Mg/NP-40提取法
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职称材料
题名
针对微量细胞样本进行细胞核和线粒体基因组同步快速分离的方法研究
1
作者
胡胜
胡哲
汪方奎
机构
公安部鉴定中心现场物证溯源技术国家工程实验室法医遗传学公安部重点实验室
华中农业大学农业微生物资源发掘与利用全国重点实验室
出处
《山东化工》
CAS
2024年第3期151-154,共4页
基金
公安部鉴定中心开放课题(2019FGKFKT06)。
文摘
开发了一种针对微量细胞样本进行细胞核和线粒体基因组同步快速分离的方法。该方法首先利用体积分数1%非离子型表面活性剂NP-40能够选择性破坏细胞膜而维持细胞核完整性的特征,实现了细胞的轻柔裂解和细胞核完整性的维持;其次通过差速离心,实现细胞核(核基因组)与线粒体基因组的同步分离。经过显微成像观察,核酸蛋白分析仪检测以及PCR分析,实现了从10^(2)到10^(6)个悬浮培养细胞中高质量线粒体基因组的分离纯化。本方法获取的线粒体基因组无核基因组污染,为后续开展线粒体群体遗传分析、线粒体疾病诊断提供了一种高效、快速、低成本的解决方案。
关键词
线粒体分离纯化
微量细胞
np40
缓冲液
Keywords
mitochondrial isolation and purification
trace cells
np40 buffer
分类号
O65 [理学—分析化学]
Q2-33 [生物学—细胞生物学]
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职称材料
题名
双向电泳比较两种方法获得的水稻叶片蛋白
被引量：
11
2
作者
梁书剑
张萌
王巍
关双红
孙野青
机构
哈尔滨工业大学生物系
大连海事大学系统生物学研究所
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2009年第3期68-71,共4页
基金
大连市科技计划项目(编号:2006B10NC121)
文摘
水稻是研究单子叶植物遗传和分子生物学的模式植物,是研究植物基因组学和蛋白质组学的一个重要的生物材料。双向电泳作为蛋白质组学中蛋白分离的主要方法,其关键步骤在于蛋白质的提取。为了比较不同蛋白提取方法,采用TCA/丙酮沉淀法和Mg/NP-40提取法分别提取水稻叶片总蛋白,用双向凝胶电泳分离两种方法获得的蛋白。结果表明,在双向图谱中,Mg/NP-40提取法分离的蛋白点数较多,RuBisCO大亚基的含量较低,适于分离等电点在5～7范围内、分子量在14～20kD和高于67kD的水稻叶片蛋白质;TCA/丙酮沉淀法分离的蛋白点数较少,适于分离等电点在4～5范围内、分子量在31～67kD内的水稻叶片蛋白质。
关键词
水稻蛋白
双向电泳
TCA/丙酮沉淀法
Mg/NP-40提取法
Keywords
rice proteins
2-DE analysis
TCA-acetone
buffer
Mg
np40 buffer
分类号
Q51 [生物学—生物化学]
S792.153 [农业科学—林木遗传育种]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
针对微量细胞样本进行细胞核和线粒体基因组同步快速分离的方法研究
胡胜
胡哲
汪方奎
《山东化工》
CAS
2024
0
在线阅读
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职称材料
2
双向电泳比较两种方法获得的水稻叶片蛋白
梁书剑
张萌
王巍
关双红
孙野青
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2009
11
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