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医院内流行社区型MRSA的分子生物学特点分析 被引量：3
1
作者 马笑雪 孙丹丹 +2 位作者 王斯 李苗 罗恩杰 《中国病原生物学杂志》 CSCD 2010年第10期725-728,共4页
目的调查2007-2009年沈阳医院分离MRSA感染的临床类型,并解析MRSA克隆的分子生物学特点。方法记录分析125株MRSA感染者的临床数据;多重PCR法分型SCCmec基因岛;凝固酶试验测定菌株的凝固酶型;聚合酶链式反应（PCR）测定PVL、CNA、SEH、TS... 目的调查2007-2009年沈阳医院分离MRSA感染的临床类型,并解析MRSA克隆的分子生物学特点。方法记录分析125株MRSA感染者的临床数据;多重PCR法分型SCCmec基因岛;凝固酶试验测定菌株的凝固酶型;聚合酶链式反应（PCR）测定PVL、CNA、SEH、TSST1等毒素基因在菌株中的分布情况。结果在检测的125株MR-SA中,76.0%（95/125）起源于社区,20.8%（26/125）起源于医院。成年MRSA感染平均年龄39.7岁,以皮肤、粘膜感染最常见;儿童患者以上呼吸道感染患者多见。CNA阳性菌株占73.6%,全部分泌4型血浆凝固酶,并携带IVc型SCC-mec基因岛。结论 1株起源于社区,基因型为IVc SCCmec-coagulase4且携带CNA毒素基因的特定MRSA克隆在医院内蔓延。 展开更多
关键词 金黄色葡萄球菌 凝固酶分型 SCCmec基因岛 毒素基因谱 mrsa克隆
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耐甲氧西林金黄色葡萄球菌CHIPS基因的克隆、序列分析及原核表达 被引量：3
2
作者 容莉莉 杨镒宇 +4 位作者 关锐梨 关小珊 邓秋连 谢永强 周珍文 《广州医药》 2013年第4期1-4,共4页
目的对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)趋化抑制蛋白(CHIPS)进行扩增、克隆、序列分析、原核表达及纯化,为后续的疫苗研究奠定基础。方法根据GenBank中趋化抑制蛋白(CHIPS)的序列,设计一对特异性引物,以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA为模... 目的对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)趋化抑制蛋白(CHIPS)进行扩增、克隆、序列分析、原核表达及纯化,为后续的疫苗研究奠定基础。方法根据GenBank中趋化抑制蛋白(CHIPS)的序列,设计一对特异性引物,以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌DNA为模板PCR扩增CHIPS基因,纯化DNA进行EcoRI、XhoI双酶切鉴定及测序鉴定,并将CHIPS亚克隆入表达载体PET-28α,转化感受态大肠杆菌BL21,对质粒进行双酶切鉴定及基因序列分析,用IPTG诱导表达重组蛋白,His标签单克隆抗体进行免疫印迹验证重组蛋白的表达。结果以金黄色葡萄球菌临床儿童分离株基因组为模板,成功扩增CHIPS基因,基因大小为450bp;重组PET-28a(+)-CHIPS双酶切鉴定可见目的片段,测序结果显示CHIPS在正确读框中,序列比对分析显示其与相关报道核苷酸序列一致性达99.98%。经IPTG诱导后,pET-28a(+)-CHIPS/BL21在相应分子量(17kDa)可见融合蛋白在上清表达,免疫印迹检测到目的蛋白。结论成功从儿童分离株MRSA中构建了CHIPS的原核表达系统,并成功在大肠杆菌BL21中融合表达,为后续的疫苗研究奠定基础。 展开更多
关键词 mrsa CHIPS 克隆 原核表达
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2017—2018年江西地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的分子流行特征 被引量：2
3
作者 曾凌 邓琼 +3 位作者 刘洋 张杰 曾婷 曹先伟 《中国感染控制杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第9期835-841,共7页
目的了解江西各地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子特征及主要流行克隆型别,探讨流行克隆可能的竞争优势,为后续的机制研究提供资料。方法收集2017年1月-2018年12月江西省11个地市11所三甲医院临床分离的MRSA,同时应用mecA+femB... 目的了解江西各地区耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的分子特征及主要流行克隆型别,探讨流行克隆可能的竞争优势,为后续的机制研究提供资料。方法收集2017年1月-2018年12月江西省11个地市11所三甲医院临床分离的MRSA,同时应用mecA+femB双重PCR法鉴定为MRSA菌株后纳入研究,应用spa分型、SCCmec分型、PFGE和MLST进行分子分型,采用PCR方法检测杀白细胞素(PVL)毒力基因。结果spa分型主要为t437(74株,占31.22%)、t030(32株,占13.50%);不同地区的spa型存在很大差异,南昌地区以t030为主,其余地区以t437为主。SCCmecIVa为优势型别(占66.67%),SCCmecⅢ占15.19%;除南昌地区以SCCmecⅢ为主要型别外(占59.38%),其余各地区均以SCCmecIVa为主要优势型别。经PFGE分型和MLST,优势克隆型别为ST239、ST59、ST1和ST338;优势克隆群为CC239、CC59和CC1。共检出32株(13.19%)PVL阳性菌,其中鹰潭地区PVL检出率最高(29.63%,8/27),其次为景德镇地区(26.32%,5/19)。结论ST59-MRSA-IVa-t437为江西地区的主要优势流行克隆型,且各地区之间存在一定程度的克隆播散。ST239-MRSA-Ⅲ-t30为次要优势流行克隆型,主要在南昌地区多见,其他地区散发。江西地区PVL阳性菌株的主要型别为ST59-MRSA-t437-IVa型。 展开更多
关键词 耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 mrsa 分子特征 克隆群 毒力
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