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MALDI-TOF MS在碳青霉烯耐药肺炎克雷伯菌同源性分析中的应用
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作者 高芳琳 阮海涛 詹文芳 《国际医药卫生导报》 2025年第14期2402-2407,共6页
目的探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)检测耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)同源性的... 目的探讨基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)检测耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌(carbapenem-resistant Klebsiella pneumoniae,CRKP)同源性的应用价值。方法收集2024年5月至6月福建中医药大学附属人民医院ICU同一患者痰、尿、血分离的3株CRKP,分别采用MALDI-TOF MS与单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNP)差异位点变异检测对3株CRKP进行同源性分析。结果MALDI-TOF MS同源性分析结果显示,3株CRKP中分离自痰和血的CRKP1与CRKP3同源性更高,表明该患者血液检出的CRKP3可能来源于呼吸道,该结果与SNP差异位点变异检测的同源性分析结果一致。结论MALDI-TOF MS能够对同一患者不同来源菌株进行同源性分析,实现菌株溯源,对临床实现快速诊断具有重要意义。 展开更多
关键词 CRKP maldi-tof MS 单核苷酸多态性检测 同源性分析
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基于MALDI-TOF MS与机器学习算法的高毒力肺炎克雷伯菌快速鉴定模型效果评价
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作者 麦东媚 蓝嘉娜 +2 位作者 何宇巍 李冉 黄小玲 《中华医院感染学杂志》 北大核心 2025年第11期1684-1689,共6页
目的通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)结合EX-Smartspec软件,筛选高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)的特征峰,建立快速检测hvKP的模型。方法基于peg-344、iroB、iucA、rmpA、prmpA2基因任一阳性或铁载体产量>30μg/ml的... 目的通过基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)结合EX-Smartspec软件,筛选高毒力肺炎克雷伯菌(hvKP)的特征峰,建立快速检测hvKP的模型。方法基于peg-344、iroB、iucA、rmpA、prmpA2基因任一阳性或铁载体产量>30μg/ml的鉴定标准,前期收集了89株hvKP和72株经典肺炎克雷伯菌(cKP)菌株,并通过大蜡螟实验验证毒力。利用EX-Smartspec软件和卷积神经网络算法,结合特征峰和聚类分析,构建hvKP和cKP的鉴定模型,为临床提供快速准确的诊断工具。结果通过MALDI-TOF MS分析,在(3835±100)ppm处发现hvKP的特征峰。受试者工作特征(ROC)曲线分析表明,曲线下面积(AUC)=0.741在鉴别hvKP中表现最佳。当AUC≥0.089时,模型在区分hvKP与cKP时展现出较高的敏感性(86.41%)(质量分数)、特异性(69.90%)、准确度(78.16%)、阳性预测值(74.17%)和阴性预测值(83.72%)。聚类分析进一步验证了模型的分类准确性。此外,分型训练模型在训练和验证阶段均展现高准确率(约0.95和0.90)和低损失值(约0.18和0.30)。随机挑取6株hvKP和5株cKP进行验证,通过率100.00%。结论建立了hvKP和cKP的鉴定模型,为临床提供了一种快速而准确的诊断工具,从而及时治疗由hvKP引起的感染。 展开更多
关键词 高毒力肺炎克雷伯菌 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 特征峰 分型训练 鉴定模型
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基于MALDI-TOF MS肽指纹图谱技术的中药鹿血晶掺伪鉴别研究
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作者 王慎兴 曹玲 +6 位作者 黄青 马聪玉 潘建斌 赵浩东 施海蔚 狄斌 陈洪渊 《质谱学报》 北大核心 2025年第1期115-122,共8页
本研究应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术,构建了具有物种特异性的白蛋白和血红蛋白特征肽指纹图谱,用于中药鹿血晶的掺伪鉴别。以鹿血晶真品(梅花鹿、马鹿)和常见掺伪品(猪、牛、羊、驴)共6个物种的血晶制品作... 本研究应用基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术,构建了具有物种特异性的白蛋白和血红蛋白特征肽指纹图谱,用于中药鹿血晶的掺伪鉴别。以鹿血晶真品(梅花鹿、马鹿)和常见掺伪品(猪、牛、羊、驴)共6个物种的血晶制品作为研究对象,通过理论肽段预测并结合高分辨质谱,筛选出1组能够反映物种差异的特征肽段。采集不同物种来源血晶制品以及不同来源市售中药鹿血晶的特征肽指纹图谱,并结合化学计量学分析,实现了不同来源血晶制品的快速准确区分。该方法能够实现复杂基质样品中目标特征肽段的灵敏、特异检测,具有高专属性、快速、便捷的优势,为鹿血晶及血晶类中药制品的掺伪鉴别提供了准确的分析手段,也为其他复杂蛋白类制品的快速鉴别提供了有价值的参考。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱(maldi-tof MS) 中药鹿血晶 肽指纹图谱 掺伪鉴别
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MALDI-TOF MS在佩戴过的口罩细菌污染情况研究中的应用
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作者 丁国涛 杨国兴 +3 位作者 赵艳 方彦飞 高腾 李伟昊 《医学动物防制》 2025年第1期35-39,共5页
目的应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)分析不同佩戴时长口罩的细菌污染情况。为相关部门提出合理的口罩佩戴时长提供依据。方法于2... 目的应用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(matrix-assisted laser desorption ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)分析不同佩戴时长口罩的细菌污染情况。为相关部门提出合理的口罩佩戴时长提供依据。方法于2022年7月招募志愿者在日常工作环境中佩戴口罩,佩戴时长为0.5h、1.0h、2.0h、4.0h、5.0h;使用倾注平板法测定不同佩戴时长口罩内外表面的细菌总数;使用MALDI-TOF MS方法鉴定并分析口罩内外表面细菌丰度。统计学分析采用校正的F检验方法。结果佩戴5.0h口罩内表面与外表面的细菌总数差异有统计学意义[平均值差值(mean deviation,MD)=380.9,P<0.001];佩戴0.5h、1.0h、2.0h和4.0h口罩内表面与外表面的细菌总数差异无统计学意义(MD=9.2,P=0.704;MD=9.3,P=0.701;MD=40.2,P=0.099;MD=19.0,P=0.433)。整个研究共分离320个单菌落。佩戴4.0h的口罩内外表面同时检出的菌属数为2,穿透率最高为33.3%。佩戴5.0h的口罩内外表面同时检出的菌属数为5,穿透率为25.0%~100.0%。结论随佩戴时间延长,口罩内外表面细菌总数增加。同一佩戴时长,口罩内表面的细菌数量高于口罩外表面;同一佩戴时长,口罩内表面的细菌种类低于口罩外表面。建议佩戴时长超过4.0h更换口罩。 展开更多
关键词 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱 佩戴时长 细菌污染 细菌丰度 细菌穿透率
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MALDI-TOF MS分析联合16S rRNA基因测序鉴定人型支原体菌血症
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作者 徐承 王姝 +2 位作者 蒋璐 谢文婷 许英 《国外医药(抗生素分册)》 2025年第4期253-258,共6页
目的对本院一位患者产后发热的血培养标本进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)分析和16S rRNA基因测序,以明确产后发热的原因,为临床... 目的对本院一位患者产后发热的血培养标本进行基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)分析和16S rRNA基因测序,以明确产后发热的原因,为临床诊治提供参考。方法对血培养瓶内阳性培养物转种于哥伦比亚血琼脂平板和巧克力琼脂平板,置于35℃、5%CO_(2)培养箱中孵育,同时直接涂片革兰染色镜检;对培养基上的目标菌株补充瑞氏染色,利用MALDI-TOF MS分析技术对目标菌株进行鉴定;根据质谱鉴定结果对目标菌株进行抗菌药物敏感性试验,采用16S rRNA基因测序技术对目标菌株进行验证确认。结果血培养瓶内阳性培养物直接涂片革兰染色镜检未见菌体结构。哥伦比亚血琼脂平板培养48 h可见针尖样透明小菌落,巧克力琼脂平板无细菌生长。哥伦比亚血琼脂上的目标菌株质谱鉴定结果为人型支原体,置信度为99.9%。抗菌药物敏感性试验结果显示该菌对米诺环素、多西环素、交沙霉素和克林霉素敏感,对其他药物耐药。目标菌株的16S rRNA基因序列结果与人型支原体标准菌株ATCC23114的核苷酸同源性为99.71%。结论患者产后发热的原因为人型支原体菌血症,MALDI-TOF MS分析技术对人型支原体的鉴定结果可靠,MALDI-TOF MS分析联合16S rRNA基因测序技术能提高少见病原体的诊断效率和准确性。 展开更多
关键词 人型支原体 血流感染 maldi-tof MS 16S rRNA基因测序
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MALDI-TOF MS与TB-SAT联合检测在非结核分枝杆菌病诊断中的应用
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作者 任哲 冯建纯 +2 位作者 谢炯 田二朋 马伟立 《河北医学》 2025年第9期1563-1568,共6页
目的:探讨基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)与RNA恒温扩增实时荧光检测(TB-SAT)联合检测在非结核分枝杆菌(NTM)肺病诊断中的应用。方法:选取2020年1月至2024年12月河北省胸科医院收治的疑似152例NTM肺病患者,对支气管肺... 目的:探讨基体辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)与RNA恒温扩增实时荧光检测(TB-SAT)联合检测在非结核分枝杆菌(NTM)肺病诊断中的应用。方法:选取2020年1月至2024年12月河北省胸科医院收治的疑似152例NTM肺病患者,对支气管肺泡灌洗液(BALF)标本进行MALDI-TOF MS、TB-SAT检查,以NTM肺病诊断标准为金标准,分析MALDI-TOF MS、TB-SAT单一筛查NTM肺病的效能及与金标准的一致性,分析MALDI-TOF MS、TB-SAT联合诊断NTM肺病、NTM肺病菌种分布的效能。结果:以NTM肺病诊断标准为准,最终确诊80例(53.63%),其中46.51%胞内分枝杆菌为主;MALDI-TOF MS、TB-SAT检测NTM肺病阳性率81.25%、78.75%,2种检测技术与金标准的一致性Kappa值分别为0.533(95%CI:0.376~0.691)、0.538(95%CI:0.378~0.697);MALDI-TOF MS、TB-SAT联合诊断敏感性、特异性、准确性、阳性预测值、阴性预测值均高于单一筛查(P<0.05);MALDI-TOF MS、TB-SAT联合诊断NTM肺病菌种分布与金标准的一致性Kappa值为0.882(95%CI:0.757~1.007)。结论:MALDI-TOF MS、TB-SAT联合检测在NTM肺病中具有良好的诊断价值,可提高诊断准确性,为临床准确诊断NTM提供有力支持。 展开更多
关键词 maldi-tof MS TB-SAT 非结核分枝杆菌病 诊断
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基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)在病毒鉴定与分型中的应用
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作者 王瑞雪 邹粤 +1 位作者 裴晓方 陈嘉熠 《病毒学报》 北大核心 2025年第5期1664-1671,共8页
基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)是一种新型软电离有机质谱。近年来,MALDI-TOF MS技术凭借操作简单、检测速度快、灵敏度高等优点,在... 基质辅助激光解析电离飞行时间质谱(Matrix-assisted laser desorption/ionization time-of-flight mass spectrometry,MALDI-TOF MS)是一种新型软电离有机质谱。近年来,MALDI-TOF MS技术凭借操作简单、检测速度快、灵敏度高等优点,在微生物检测方面展现出巨大的应用潜力。然而,相较于MALDI-TOF MS应用于细菌和真菌检测的报道,该技术在病毒检测方面的报道相对较少。因此,本文就MALDI-TOF MS在病毒鉴定、分型、耐药基因检测中的应用进行综述,以期为该技术的后续应用提供思路。 展开更多
关键词 maldi-tof MS 蛋白指纹图谱 核酸质量图谱 病毒 鉴定与分型
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利用MALDI-TOF MS分析寡核苷酸钠盐组分分布
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作者 黄骏齐 陈尚坤 刘巧霞 《分析测试学报》 北大核心 2025年第4期620-627,共8页
建立了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析寡核苷酸钠盐分布的方法。单链寡核苷酸引物样品(长度为20 bp,理论分子量6071.02 Da)经纯水溶解后,分别采用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)与MALDI-TOF MS进行检验;样液经乙酸钠... 建立了基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)分析寡核苷酸钠盐分布的方法。单链寡核苷酸引物样品(长度为20 bp,理论分子量6071.02 Da)经纯水溶解后,分别采用高效液相色谱-质谱(HPLC-MS)与MALDI-TOF MS进行检验;样液经乙酸钠加钠、醇沉、复溶后再次以HPLC-MS与MALDITOF MS进行检验,检验模式均为正离子。加钠前后,HPLC-MS在解卷积后均仅显示未加盐的单一组分(对应分子量6069.9 Da与6069.8 Da);MALDI-TOF MS对加盐前样品显示单一组分(对应分子量6071.09 Da),而对加盐后样品显示了不同加钠数分子的组分分布:各组分从未加钠分子开始(对应分子量6071 Da左右),含量呈现先上升后下降的趋势,加钠个数范围从0~4到0~19不等,且分布随加盐条件的不同而变化。该结果显示MALDI-TOF MS具有检测寡核苷酸钠盐组分分布的能力,同时其具有检测一系列不同加盐程度寡核苷酸分子的广泛适应性与灵敏性。以反义寡核苷酸药物福米韦森钠为样本,采用MALDI-TOF MS分别检测了福米韦森钠纯品以及含聚乙二醇和吐温等辅料的福米韦森钠动物注射液模型。结果显示,福米韦森钠的主体加钠形态为加0个钠到加3个钠,整体含量呈现递减趋势,在加入基质前后未发生改变;同时福米韦森钠组分的误差也处于±0.5 Da范围内,精确性未受基质影响。另外,基质中的其他若干组分(包括聚乙二醇300与吐温-80)也独立显示在质谱图中,对福米韦森钠组分没有干扰。该法简单快速、灵敏度高,适用于一系列寡核苷酸钠盐分布的定性鉴定,且检验实际药物时不受药物基质影响,对反义寡核苷酸(ASO)药物的研发与检验有重要意义。 展开更多
关键词 maldi-tof MS 寡核苷酸 寡核苷酸钠盐分布 定性分析
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动物源大肠杆菌MALDI-TOF MS质谱库的建立及在北京地区区域性差异应用分析
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作者 张启龙 钱云开 +9 位作者 刘利勤 傅彩霞 贾宏丽 刘海莹 栗云鹏 杨逸舟 田辉 董志军 朱家强 周德刚 《中国动物传染病学报》 北大核心 2025年第2期117-123,共7页
为比较不同区域大肠杆菌是否具有差异性,本研究针对自北京市怀柔区收集分离的11株大肠杆菌和延庆区收集分离的22株大肠杆菌进行了鉴定,分别采用常规生化法、16S rRNA测序和基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的鉴定方... 为比较不同区域大肠杆菌是否具有差异性,本研究针对自北京市怀柔区收集分离的11株大肠杆菌和延庆区收集分离的22株大肠杆菌进行了鉴定,分别采用常规生化法、16S rRNA测序和基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)的鉴定方法进行鉴定,比较了3种方法鉴定的准确率,并对获得的细菌肽质量指纹谱数据进行分析。结果显示:两地采集的大肠杆菌用3种方法鉴定,其准确性都在95%以上,其中MALDI-TOF MS鉴定采用多点点靶时准确率可达99%以上,多点点靶下MALDI-TOF MS鉴定重复性强、准确高、时间快;不同区域的大肠杆菌虽具有相似的肽质量指纹谱特征,但聚类分析和主成分分析显示所有数据可清晰地按地区聚成两簇,其中怀柔一簇、延庆一簇,两簇之间区分明显。表明自怀柔和延庆采集的大肠杆菌的肽质量指纹谱具有区域性差异,可为基于MALDI-TOF MS的大肠杆菌溯源性分析提供技术依据。 展开更多
关键词 大肠杆菌 maldi-tof MS 肽质量指纹谱 北京
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基于改进鲸鱼优化算法的MALDI-TOF MS参数优化研究
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作者 张宇鹏 党玉功 +2 位作者 杨慧远 周志刚 姜杲航 《质谱学报》 北大核心 2025年第3期325-333,共9页
为了对基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)进行优化设计,提高仪器的分辨率,用Matlab建立双场加速延时引出的直线式TOF MS数学理论模型,列举了离子在空间和速度上可能出现的4种分布。针对鲸鱼优化算法收敛速度慢、精度... 为了对基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF MS)进行优化设计,提高仪器的分辨率,用Matlab建立双场加速延时引出的直线式TOF MS数学理论模型,列举了离子在空间和速度上可能出现的4种分布。针对鲸鱼优化算法收敛速度慢、精度低和易陷入局部最优等缺点,改进收敛因子、惯性权重和位置更新策略,并以分辨率为目标,对仪器参数进行优化计算。经优化分析,分别得到萃取区长度与无场飞行管长度和萃取电压与延时时间对分辨率的影响规律,合理的萃取区长度、加速区长度和无场飞行管长度分别为3 mm、12 mm和0.95 m。对于相对分子质量在2 000~20 000 u范围内的任意离子,选择分布4下相应的萃取电压和延时时间的优化参数组合,可以获得较高的分辨率。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱(maldi-tof MS) 分辨率 鲸鱼优化算法 参数优化
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基于MALDI-TOF MS技术检测CYP2D6、CYP2C19和HTR1A基因多态性方法的建立
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作者 吴文慧 蒋析文 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第4期683-687,共5页
目的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术开发一种CYP2D6、CYP2C19和HTR1A基因多态性检测的新方法。方法针对本次选取的CYP2D6*10、CYP2C19*2、HTR1A rs6295序列设计特异性质谱引物和测序引物,利用结合MALDI-TOF M... 目的基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)技术开发一种CYP2D6、CYP2C19和HTR1A基因多态性检测的新方法。方法针对本次选取的CYP2D6*10、CYP2C19*2、HTR1A rs6295序列设计特异性质谱引物和测序引物,利用结合MALDI-TOF MS技术建立检测方法并对准确性、检测限、特异性和重复性做性能分析与验证。采用一代测序作为对比方法,对81例未知型别的临床外周血样本,对三个基因多态性检测结果一致性进行分析。结果该方法可准确区分出CYP2D6*10、CYP2C19*2和HTR1A rs6295位点所有型别。检测上下限分别为90 ng/μL和5ng/μL,该方法具有良好的准确性、特异性和重复性。质谱结果与测序结果突变型别一致率达到100%。结论本研究开发的方法能够准确地检测CYP2D6*10、CYP2C19*2和HTR1A rs6295的基因型,适用于临床推广。 展开更多
关键词 maldi-tof MS CYP2D6*10 CYP2C19*2 HTR1A 基因多态性
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基于MALDI-TOF MS快速鉴定临床尿液标本中病原菌的方法比较
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作者 吴志妹 陆静芬 王淑玲 《分子诊断与治疗杂志》 2025年第2期217-220,225,共5页
目的本研究旨在通过对比分析基于离心法的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)与短时细菌培养法结合MALDI-TOF MS这两种技术,评估其在直接鉴定尿液标本中病原菌的效能,以期找到一种快速、准确且可靠的替代传统尿液培养的方... 目的本研究旨在通过对比分析基于离心法的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)与短时细菌培养法结合MALDI-TOF MS这两种技术,评估其在直接鉴定尿液标本中病原菌的效能,以期找到一种快速、准确且可靠的替代传统尿液培养的方法。方法选取2023年1月至3月在苏州市第九人民医院收集的947份来自疑似尿路感染(UTI)患者的尿液标本,并采用了两种方法进行病原菌的鉴定:一是直接基于离心处理的尿液样本使用MALDI-TOF MS进行鉴定;二是先将尿液进行短时细菌培养,随后利用MALDI-TOF MS进行鉴定。同时,以常规尿液培养作为参照标准,对两种方法的结果进行了比较。结果在常规培养阳性211例中,革兰氏阴性菌占80.6%,阳性菌占19.4%,主要病原菌为大肠杆菌和肺炎克雷伯菌。离心MALDI-TOF MS与短期培养联合MALDI-TOF MS检测准确率分别为82.4%/46.3%和91.2%/65.9%,三者间差异无统计意义(P>0.05)。两种MALDI-TOF方法总体识别得分的差异有统计学意义(P<0.05)。菌落计数与MALDI-TOF MS检出率相关性分析显示,革兰氏阴性菌鉴定差异显著,低菌落计数时短期培养结合MALDI-TOF MS检测能力更高。结论MALDI-TOF MS技术,无论是单独基于离心法还是与短时细菌培养相结合都各有优势,未来可根据临床实际需求灵活选择,以优化尿路感染病原菌的快速鉴定流程。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱分析(maldi-tof MS) 尿路感染(UTI)
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基于MALDI-TOF核酸质谱的11种牛源病毒检测方法的建立
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作者 帅江冰 张泽林 +6 位作者 宋士琦 韩笑 曾若雪 陈吴健 郭悠然 郭惠民 张晓峰 《中国预防兽医学报》 北大核心 2025年第1期39-47,共9页
为建立能高效同步鉴定牛腺病毒3型(BAV-3)、牛细小病毒1、2和3型(BPV-1、BPV-2、BPV-3)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、狂犬病毒(RV)、呼肠孤病毒3型(REO-3)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、蓝舌病毒(BTV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)以及牛多瘤... 为建立能高效同步鉴定牛腺病毒3型(BAV-3)、牛细小病毒1、2和3型(BPV-1、BPV-2、BPV-3)、牛病毒性腹泻病毒(BVDV)、狂犬病毒(RV)、呼肠孤病毒3型(REO-3)、牛副流感病毒3型(BPIV-3)、蓝舌病毒(BTV)、牛呼吸道合胞体病毒(BRSV)以及牛多瘤病毒(BPyV)等牛源病毒的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)高通量多目标检测技术,本研究根据上述11种病原基因组的高保守区,分别设计多重PCR引物及对应的单碱基延伸探针,采用方阵法优化反应体系后初步建立牛源病毒的MALDI-TOF核酸质谱检测体系。利用该方法以靶标病毒质粒标准品混合物及非靶标病毒核酸为模板进行特异性试验,利用50拷贝/µL、25拷贝/µL、12.5拷贝/µL、6.3拷贝/µL、3.1拷贝/µL、1.6拷贝/µL靶标病毒核酸质粒标准品进行敏感性试验,利用106拷贝/µL、104拷贝/µL、102拷贝/µL靶标病毒核酸重组质粒标准品于同一时间和不同时间进行了稳定性试验。特异性试验结果显示,该方法仅对11种靶标病毒产生阳性信号峰,而与其他病原体无交叉反应,表明该方法特异性较强。敏感性试验结果通过probit模型进行概率回归检测,结果显示每种病毒最低检测限在8.69拷贝/µL~38.04拷贝/µL(99%概率),表明该方法敏感性较高。重复性试验结果显示,体系中每种靶标在高、中、低质粒浓度时的批内及批间重复性试验结果的符合率均达100%,表明该方法的稳定性较高。利用该MALDI-TOF核酸质谱检测体系对血液类生物制品及临床样品进行检测,同时采用各病毒的荧光定量PCR(qPCR)检测,结果显示130份样品中总计检出58份阳性,其中包括43份BPV-3、33份BPV-2、16份BPyV、6份BVDV阳性,总阳性率分别为44.0%、33.1%、25.4%、12.3%和4.6%,与各病毒qPCR结果的符合率均达100%。本研究基于MALDI-TOF核酸质谱技术首次建立了11种牛病毒的多重检测方法,为牛源病毒的快速检测及相关生物制品安全控制提供了一种新的检测技术。 展开更多
关键词 maldi-tof核酸质谱 牛血液制品 病毒
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HB&L微生物快速培养系统联合MALDI-TOF MS用于诊断尿路感染的评价
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作者 叶琳 梁昕怡 +4 位作者 邓欣怡 赵树龙 宋爽 孙静芳 康海全 《徐州医科大学学报》 2025年第8期602-606,共5页
目的评估HB&L微生物快速培养系统联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)在尿路感染(UTI)诊断中的应用价值,并与传统尿培养方法进行对比,明确其在诊断效率、准确性及临床应用中的优势。方法收集徐州医科大学附属医院2... 目的评估HB&L微生物快速培养系统联合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF MS)在尿路感染(UTI)诊断中的应用价值,并与传统尿培养方法进行对比,明确其在诊断效率、准确性及临床应用中的优势。方法收集徐州医科大学附属医院2024年4月-5月202例疑似UTI患者尿液标本,排除不合格样本后纳入177例,以传统尿培养为金标准,分析HB&L系统的诊断效能。结果177例标本中,传统尿培养阳性检出率为26.55%(47/177),HB&L系统阳性检出率为27.12%(48/177),差异无统计学意义(P>0.05)。HB&L系统敏感度为97.87%,特异度为98.46%,阳性预测值为95.83%,阴性预测值为98.46%,与传统方法的总体一致率为98.31%(Kappa=0.89)。半数阳性样本2 h内报阳。HB&L系统对革兰阴性杆菌和真菌的检出率均为100%,仅1例阴道加德纳菌出现假阴性。结论HB&L系统联合MALDI-TOF MS诊断UTI快速准确,可显著缩短诊断时间,单一菌感染检出和鉴定一致性高,可作为临床UTI快速诊断新方法。 展开更多
关键词 全自动血液体液快速培养系统 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱 尿路感染 尿培养 快速鉴定
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MALDI-TOF-MS在耐碳青霉烯肠杆菌多黏菌素B快速药敏试验中的应用 被引量:1
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作者 王林 刘赛 王维 《山西医科大学学报》 CAS 2024年第8期1050-1054,共5页
目的构建一种耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)多黏菌素B的快速药敏试验方法,为临床抗生素的选择和精准调整提供依据。方法采用WHONET 5.6软件对分离自西安市第一医院2023年3月至2024年3月的108株CRE菌株信息进行筛选,以肉汤稀释法为参比... 目的构建一种耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌(CRE)多黏菌素B的快速药敏试验方法,为临床抗生素的选择和精准调整提供依据。方法采用WHONET 5.6软件对分离自西安市第一医院2023年3月至2024年3月的108株CRE菌株信息进行筛选,以肉汤稀释法为参比方法,采用基质辅助激光解吸/电离飞行时间质谱仪(MALDI-TOF-MS)进行多黏菌素B快速药敏测定。结果108株CRE分离株以肺炎克雷伯菌为主(48.14%),其次是产气肠杆菌和奇异变形杆菌(各占13.89%)。标本来源以痰液为主(65.74%),其次尿液(18.52%)和血液(8.33%)。临床科室分布以神经外科为主(48.15%),其次为重症医学科(18.52%)和呼吸内科(14.81%)。CRE分离株对大部分药物呈现高度耐药,对常见β内酰胺类、喹诺酮类、氨基糖苷类、β内酰胺复合药物耐药率分别超过70%,80%,50%和75%。与肉汤稀释法相比,MALDI-TOF-MS法测定CRE对多黏菌素B药敏结果的分类一致率(CA)为98.1%,重大误差(ME)为1.85%,未出现非常重大误差(VME),均在可允许范围之内。结论本院分离的CRE对多种抗菌药物广泛耐药,基于MALDI-TOF-MS的快速药敏试验方法准确可靠,可用来评价CRE对多黏菌素B的敏感性,便于临床及时调整泛耐药细菌治疗方案。 展开更多
关键词 maldi-tof-MS 耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌 细菌感染 多黏菌素B 药敏试验 肉汤稀释法
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MALDI-TOFMS在尿液中直接鉴定病原体准确性的Meta分析
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作者 王倩 吴凡 +2 位作者 张绮思 董阳阳 李冰洁 《医学检验与临床》 2024年第6期1-5,共5页
目的:本研究旨在评估基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)与传统方法相比较从尿液样本中直接鉴定病原体的诊断性能。方法:检索Cochrane Library Medline、Embase、Pubmed、万方数据库、维普中国科技期刊数据库、中国生物医... 目的:本研究旨在评估基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOFMS)与传统方法相比较从尿液样本中直接鉴定病原体的诊断性能。方法:检索Cochrane Library Medline、Embase、Pubmed、万方数据库、维普中国科技期刊数据库、中国生物医学文献数据库、中国知网数据库等有关MALDI-TOFMS用于直接从尿液中鉴定病原体的文献。采用MetaDisc1.4软件和STATA12.0进行系统评价。评价指标为总体灵敏度、特异性、阳性似然比、阴性似然比、诊断优势比以及受试者工作特征曲线下面积。结果:本研究在检索选择后最终纳入11篇文章。总体灵敏度为0.87(95%CI0.86-0.88),总体特异性为0.97(95%CI0.96-0.98)。阳性似然比、阴性似然比分别为30.56(95%CI9.42-99.13)和0.17(95%CI0.12-0.23)。受试者工作特征曲线下面积为0.9365。敏感性分析表明,该Meta分析的结果是稳定的。结论:MALDI-TOFMS提供了一种可靠的直接鉴定病原体的方法,可以直接从尿液样本中识别微生物,具有高灵敏度和特异性。 展开更多
关键词 maldi-tofMS 尿路感染 病原体
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基于UPLC-Q-TOF-MS/MS及网络药理学探讨活络效灵丹治疗糖尿病周围神经病变的物质基础研究 被引量:1
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作者 张喆 李玉琴 +5 位作者 施亚宁 宿树兰 范若颖 尚尔鑫 朱悦 段金廒 《药学学报》 北大核心 2025年第4期1124-1136,共13页
本实验通过超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)、网络药理学探讨活络效灵丹治疗糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)的物质基础。利用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术结合PeakView^(TM)1.2软件、Molec... 本实验通过超高效液相色谱-四极杆-飞行时间串联质谱(UPLC-Q-TOF-MS/MS)、网络药理学探讨活络效灵丹治疗糖尿病周围神经病变(diabetic peripheral neuropathy,DPN)的物质基础。利用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术结合PeakView^(TM)1.2软件、Molecule Profiler^(TM)软件分析活络效灵丹的体外成分及正常大鼠与高脂饲料喂养联合小剂量链脲佐菌素注射所致DPN大鼠的入血成分,通过Swiss Target Prediction、GeneCards等数据库筛选成分对应靶点及疾病靶点,利用Venny 2.1平台获得交集靶点,导入STRING平台及Cytoscape 3.10.1软件构建蛋白互作网络及“成分-靶点”网络图分析其核心成分与核心靶点,对核心靶点进行GO和KEGG富集分析。实验获得南京中医药大学实验动物伦理委员会批准(批准号:202310A023)。结果共鉴定出活络效灵丹提取物83个化学成分,包括丹参酮ⅡA等52个萜类、Z-藁本内酯等11个苯酞类、阿魏酸等15个有机酸类及4个香豆素类、1个酚类成分。在正常大鼠血浆中鉴定出15个原型成分与29个代谢产物,在DPN大鼠血浆中鉴定出17个原型成分与32个代谢产物。网络药理学结果显示,3-乙酰基-11-酮基-β-乳香酸、11-酮基-β-乳香酸等5个核心成分可能通过TNF、IL6等27个核心靶点,调节AGE-RAGE、PI3K/Akt等信号通路发挥治疗DPN的作用。本研究通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析了活络效灵丹的体内外化学成分及主要化合物的裂解规律,结合网络药理学分析其治疗DPN的核心成分,为阐明活络效灵丹治疗DPN的功效物质基础及作用机制研究提供科学依据。 展开更多
关键词 活络效灵丹 UPLC-Q-tof-MS/MS 网络药理学 糖尿病周围神经病变 化学成分 入血成分
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基于MALDI-TOF MS定量快速药敏试验在肺炎克雷伯菌对亚胺培南和替加环素药敏试验中的适用性分析 被引量:2
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作者 张龙桃 张安然 +2 位作者 陈倩倩 孔海芳 胡志东 《天津医科大学学报》 2024年第3期232-238,共7页
目的:探讨基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)的定量快速药敏试验(rAST)在肺炎克雷伯菌(KP)对亚胺培南(IPM)和替加环素(TGC)药敏试验中的实用性分析。方法:选取天津医科大学总医院2018年1月至2021年6月120株临床非重... 目的:探讨基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(MALDI-TOF MS)的定量快速药敏试验(rAST)在肺炎克雷伯菌(KP)对亚胺培南(IPM)和替加环素(TGC)药敏试验中的实用性分析。方法:选取天津医科大学总医院2018年1月至2021年6月120株临床非重复KP,应用微量肉汤稀释法(BMD)检测其对IPM和TGC的最低抑菌浓度(MIC)值。采用优化甲酸提取法提取KP菌体蛋白,进行基于基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法的快速药敏试验[(MALDI-TOF MS)-based rAST]检测IPM和TGC的MIC值,并评估最佳的菌液稀释度和孵育时间。采用Cohen′s kappa统计来评估(MALDI-TOF MS)-based rAST法和标准参考BMD的一致性。结果:在不同的孵育时间,上述两种方法处理后的质谱均能成功鉴定KP(P>0.05);但优化后的甲酸提取法简化了操作流程,并且在菌量较低情况下的成功鉴定率高于常规方案。稀释25倍即菌液含量为6×10^(6) CFU/mL、孵育时间分别为2 h和3 h条件下,(MALDI-TOF MS)-based rAST法测得IPM(P<0.01)和TGC(P<0.001)的MIC值效果最佳;此条件下,(MALDI-TOF MS)-based rAST与BMD测得的MIC值相当,分别为IPM 70.83%(85/120)、TGC 66.67%(40/60),基本一致性(EA)分别为98.33%(118/120)、98.33%(59/60)。结论:(MALDI-TOF MS)-based rAST缩短了报告时间,是一种可靠的快速定量药敏试验方法。 展开更多
关键词 肺炎克雷伯菌 maldi-tof MS质谱 快速药敏试验 亚胺培南 替加环素
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MALDI-TOF MS法快速鉴定散装即食食品中3种食源性致病菌 被引量:9
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作者 崔洁 林吉恒 +3 位作者 孙瑛 严卓彦 夏瑛瑛 黄朱梁 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2024年第5期253-270,共18页
本研究旨在利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)快速检测并鉴定散装即食食品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌3种食源性... 本研究旨在利用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱法(Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization-Time of Flight Mass Spectrometry,MALDI-TOF MS)快速检测并鉴定散装即食食品中的沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和蜡样芽孢杆菌3种食源性致病菌。通过对点样方式、前处理方式、不同培养基及培养时间等各项实验条件的优化筛选确定最佳方法,并考察其检测限和稳定性,同时用所建立的方法与多重PCR法、VITEK 2等生化鉴定法进行结果比对,比较三者鉴定结果的一致性,最后进行批量食品样本检测来探寻MALDI-TOF MS鉴定法在散装即食食品中的适用性。结果表明,三种目标菌同一批次及不同传代次数的鉴定得分均大于95%,变异系数均小于2%,所建立的方法重复性和稳定性良好,且检测限为10^(5)CFU/mL,MALDI-TOF MS菌株鉴定结果与多重PCR法、生化鉴定法结果高度一致,且比二者检测用时更短,更加特异高效;在点样方式上,相较于夹心法与混合干滴法,三种覆盖法点样平均鉴定得分更高,均为99.9%,其中1μL+1μL覆盖法点样可获得的平均峰数目更多,特征峰更复杂且强度更高;而在前处理方式上,甲酸乙腈法与其他两种菌体处理方法相比可获得更多的出峰量和更高的峰强度,平均鉴定得分均在98%以上,且与数据库中图谱匹配度更高。综上所述,MALDI-TOF MS法在致病菌鉴定方面不仅灵敏特异、准确快速,且操作简便、结果直观,作为国标法的有力补充,为食源性致病菌的分析鉴定与分型溯源提供了新思路。 展开更多
关键词 基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(maldi-tof MS) 散装即食食品 沙门氏菌 黄色葡萄球菌 蜡样芽孢杆菌
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基于UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析龙脷叶醇提物化学成分与咳嗽大鼠体内入血成分和代谢原型成分 被引量:1
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作者 丘琴 覃芳芳 +4 位作者 韦红杏 叶梅芳 甄丹丹 甄汉深 宋铭 《药物评价研究》 北大核心 2025年第1期157-166,共10页
目的分析鉴定龙脷叶Sauropus spatulifolius Beille 75%乙醇提取物化学成分及咳嗽大鼠体内入血成分和代谢原型成分。方法通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析龙脷叶75%乙醇提取物化学成分;雄性SD大鼠36只,随机分为6组:对照组、模型组、枸橼酸... 目的分析鉴定龙脷叶Sauropus spatulifolius Beille 75%乙醇提取物化学成分及咳嗽大鼠体内入血成分和代谢原型成分。方法通过UPLC-Q-TOF-MS/MS技术分析龙脷叶75%乙醇提取物化学成分;雄性SD大鼠36只,随机分为6组:对照组、模型组、枸橼酸喷托维林片(阳性药,10.521 mg·kg^(-1))组和龙脷叶75%乙醇提取物高、中、低剂量(26.31、13.15、6.58 mg·kg^(-1))组,每天1次,连续给药7 d,对照组和模型组均ig等量纯净水。在第6天给药后1 h和末次给药后1 h,应用辣椒素溶液建立大鼠咳嗽模型,根据药效实验结果,取对照组和提取物中剂量组的血清、对照组和高剂量组的粪便和尿液样本,利用UPLC-Q-TOF-MS/MS技术鉴定入血成分及粪便和尿液中的代谢原型成分。结果鉴定出龙脷叶75%乙醇提取物化学成分40个,以有机酸类为主,从血清样本分析出大黄素、芹菜素等19个入血原型成分,从粪便样本中分析出咖啡酸、异落叶松脂素等17个原型成分,尿液样本中发现咖啡酸、东莨菪亭等22个原型成分。结论确定了龙脷叶75%乙醇提取物中的化学成分、入血原型成分以及在粪便和尿液中的代谢原型成分,推测黄酮类和有机酸类成分可能是龙脷叶发挥止咳作用的药效物质。 展开更多
关键词 龙脷叶 醇提取物 UPLC-Q-tof-MS/MS 化学成分 咳嗽 入血成分 代谢原型成分 有机酸类 黄酮类
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