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小鼠肝炎病毒M蛋白在杆状病毒系统中的表达及其抗原性评价
1
作者
栾明朱
马跃宇
+4 位作者
孙莉
李明
费东亮
马鸣潇
齐欣尧
《中国生物制品学杂志》
2025年第11期1313-1318,共6页
目的通过杆状病毒系统表达小鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus,MHV)M蛋白,并评价其抗原性,以期为MHV诊断试剂盒的研制奠定基础。方法通过序列比对筛选出高度保守的MHV M蛋白基因序列(GenBank:FJ647223),经密码子优化后克隆至载体pFast...
目的通过杆状病毒系统表达小鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus,MHV)M蛋白,并评价其抗原性,以期为MHV诊断试剂盒的研制奠定基础。方法通过序列比对筛选出高度保守的MHV M蛋白基因序列(GenBank:FJ647223),经密码子优化后克隆至载体pFastBacⅠ,转化至感受态E.coli DH10 Bac^(TM),经蓝白斑筛选获得重组杆粒Bacmid-M。将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,拯救获得重组杆状病毒rBV-M,透射电镜下观察病毒粒子形态,采用间接免疫荧光和Western blot法鉴定重组M蛋白在Sf9细胞中的表达情况。以抗呼肠孤病毒3型(reovirus type-3,Reo-3)、小鼠微小病毒(minute virus of mice,MVM)、小鼠仙台病毒(Sendai virus,SV)和MHV的标准阳性血清为一抗,经Western blot法分析重组M蛋白的抗原性。结果经PCR法鉴定,重组杆粒Bacmid-M构建正确,可在Sf9细胞中包装出具有典型杆状形态的重组杆状病毒rBV-M。感染rBV-M的Sf9细胞于荧光显微镜下可见红色荧光,表达的重组M蛋白可与His-Tag单克隆抗体于相对分子质量26000处发生特异性结合,且该重组蛋白仅可与抗MHV标准阳性血清发生特异性反应,与抗Reo-3、MVM及SV标准血清无交叉反应。结论通过杆状病毒系统表达了MHV M蛋白,该蛋白具有良好的特异性和抗原性,有望作为包被抗原用于MHV诊断试剂的研发。
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关键词
小鼠肝炎病毒
M蛋白
杆状病毒
抗原性
原文传递
ELISA法检测野生和驯养长爪沙鼠携带病毒情况
被引量:
5
2
作者
段明丽
杜小燕
+3 位作者
王迎
路静
李胜利
王钜
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期366-368,374,共4页
目的检测野生长爪沙鼠和驯养长爪沙鼠的病毒携带情况,为制定长爪沙鼠微生物学检测北京市地方标准提供依据。方法制备兔抗长爪沙鼠IgG抗体并用辣根酶标记。分别采集银川市、呼和浩特周边地区的野生长爪沙鼠以及长期驯养的长爪沙鼠血清,...
目的检测野生长爪沙鼠和驯养长爪沙鼠的病毒携带情况,为制定长爪沙鼠微生物学检测北京市地方标准提供依据。方法制备兔抗长爪沙鼠IgG抗体并用辣根酶标记。分别采集银川市、呼和浩特周边地区的野生长爪沙鼠以及长期驯养的长爪沙鼠血清,用间接ELISA进行流行性出血热、淋巴细胞脉络丛脑膜炎等人兽共患病毒及仙台病毒、鼠痘病毒、小鼠肝炎病毒等啮齿类动物烈性传染病病毒抗体检测,并计算检出率。结果兔抗沙鼠的IgG抗体ELISA法效价1∶64 000以上,满足血清学检测要求。银川地区野生长爪沙鼠小鼠肝炎病毒抗体阳性(6.0%),而呼和浩特和驯养的则未检出;但呼和浩特地区的野生长爪沙鼠有淋巴脉络丛脑膜炎病毒抗体检出(13.3%),而银川和驯养长爪沙鼠则没有。仙台病毒抗体的检出率为呼和浩特地区的最低(40.0%),宁夏和驯养动物相等(53.3%)。结论两地区野生长爪沙鼠和人工驯养长爪沙鼠病毒抗体的检出种类和检出率有所不同,在制定北京市地方标准时要综合考虑。
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关键词
长爪沙鼠
汉坦病毒
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒
仙台病毒
鼠痘病毒
小鼠肝炎病毒
暂未订购
题名
小鼠肝炎病毒M蛋白在杆状病毒系统中的表达及其抗原性评价
1
作者
栾明朱
马跃宇
孙莉
李明
费东亮
马鸣潇
齐欣尧
机构
锦州医科大学畜牧兽医学院、辽宁省畜产品质量与安全重点实验室
出处
《中国生物制品学杂志》
2025年第11期1313-1318,共6页
基金
辽宁省科技厅计划项目(2020JH2/10300117)。
文摘
目的通过杆状病毒系统表达小鼠肝炎病毒(mouse hepatitis virus,MHV)M蛋白,并评价其抗原性,以期为MHV诊断试剂盒的研制奠定基础。方法通过序列比对筛选出高度保守的MHV M蛋白基因序列(GenBank:FJ647223),经密码子优化后克隆至载体pFastBacⅠ,转化至感受态E.coli DH10 Bac^(TM),经蓝白斑筛选获得重组杆粒Bacmid-M。将重组杆粒转染Sf9昆虫细胞,拯救获得重组杆状病毒rBV-M,透射电镜下观察病毒粒子形态,采用间接免疫荧光和Western blot法鉴定重组M蛋白在Sf9细胞中的表达情况。以抗呼肠孤病毒3型(reovirus type-3,Reo-3)、小鼠微小病毒(minute virus of mice,MVM)、小鼠仙台病毒(Sendai virus,SV)和MHV的标准阳性血清为一抗,经Western blot法分析重组M蛋白的抗原性。结果经PCR法鉴定,重组杆粒Bacmid-M构建正确,可在Sf9细胞中包装出具有典型杆状形态的重组杆状病毒rBV-M。感染rBV-M的Sf9细胞于荧光显微镜下可见红色荧光,表达的重组M蛋白可与His-Tag单克隆抗体于相对分子质量26000处发生特异性结合,且该重组蛋白仅可与抗MHV标准阳性血清发生特异性反应,与抗Reo-3、MVM及SV标准血清无交叉反应。结论通过杆状病毒系统表达了MHV M蛋白,该蛋白具有良好的特异性和抗原性,有望作为包被抗原用于MHV诊断试剂的研发。
关键词
小鼠肝炎病毒
M蛋白
杆状病毒
抗原性
Keywords
Mouse hepatitis virus(MHV)
M protein
Baculovirus
Antigenicity
分类号
Q93-3 [生物学—微生物学]
原文传递
题名
ELISA法检测野生和驯养长爪沙鼠携带病毒情况
被引量:
5
2
作者
段明丽
杜小燕
王迎
路静
李胜利
王钜
机构
天津市第一中心医院
首都医科大学基础医学院实验动物学系
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013年第4期366-368,374,共4页
基金
国家自然基金面上项目(No.31071988,31272393)
北京市科委项目(No.Z0004100040691-3)~~
文摘
目的检测野生长爪沙鼠和驯养长爪沙鼠的病毒携带情况,为制定长爪沙鼠微生物学检测北京市地方标准提供依据。方法制备兔抗长爪沙鼠IgG抗体并用辣根酶标记。分别采集银川市、呼和浩特周边地区的野生长爪沙鼠以及长期驯养的长爪沙鼠血清,用间接ELISA进行流行性出血热、淋巴细胞脉络丛脑膜炎等人兽共患病毒及仙台病毒、鼠痘病毒、小鼠肝炎病毒等啮齿类动物烈性传染病病毒抗体检测,并计算检出率。结果兔抗沙鼠的IgG抗体ELISA法效价1∶64 000以上,满足血清学检测要求。银川地区野生长爪沙鼠小鼠肝炎病毒抗体阳性(6.0%),而呼和浩特和驯养的则未检出;但呼和浩特地区的野生长爪沙鼠有淋巴脉络丛脑膜炎病毒抗体检出(13.3%),而银川和驯养长爪沙鼠则没有。仙台病毒抗体的检出率为呼和浩特地区的最低(40.0%),宁夏和驯养动物相等(53.3%)。结论两地区野生长爪沙鼠和人工驯养长爪沙鼠病毒抗体的检出种类和检出率有所不同,在制定北京市地方标准时要综合考虑。
关键词
长爪沙鼠
汉坦病毒
淋巴细胞脉络丛脑膜炎病毒
仙台病毒
鼠痘病毒
小鼠肝炎病毒
Keywords
Mongolian gerbil
hantavirus
LMC
Sendai virus
ectromelia virus
m-mhv.
分类号
R33 [医药卫生—人体生理学]
暂未订购
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
小鼠肝炎病毒M蛋白在杆状病毒系统中的表达及其抗原性评价
栾明朱
马跃宇
孙莉
李明
费东亮
马鸣潇
齐欣尧
《中国生物制品学杂志》
2025
0
原文传递
2
ELISA法检测野生和驯养长爪沙鼠携带病毒情况
段明丽
杜小燕
王迎
路静
李胜利
王钜
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2013
5
暂未订购
已选择
0
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