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沉默PAK1通过阻断PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导胶质母细胞瘤细胞自噬发挥抗肿瘤效应
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作者 秦立鹏 康婧 +2 位作者 贾培雷 王凯 薛松林 《中国医科大学学报》 北大核心 2026年第1期41-47,共7页
目的探讨沉默p21活化激酶1(PAK1)表达对人胶质母细胞瘤(GBM)细胞生长活性的抑制效应及可能机制。方法通过GEPIA在线数据库分析GBM患者癌组织中PAK1 mRNA表达及其与患者预后的关系。采用实时定量PCR检测人正常胶质细胞系NHA及不同人GBM... 目的探讨沉默p21活化激酶1(PAK1)表达对人胶质母细胞瘤(GBM)细胞生长活性的抑制效应及可能机制。方法通过GEPIA在线数据库分析GBM患者癌组织中PAK1 mRNA表达及其与患者预后的关系。采用实时定量PCR检测人正常胶质细胞系NHA及不同人GBM细胞系中PAK1 mRNA表达。将U251细胞分为沉默阴性对照(si-NC)组、si-PAK1组、si-PAK1+通路激活剂(740Y-P)组和si-PAK1+自噬抑制剂氯喹(CHQ)组。采用CCK-8法检测细胞增殖活性,平板克隆法检测细胞克隆形成能力,Transwell小室检测细胞迁移及侵袭能力,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时定量PCR检测细胞中PAK1 m RNA表达,Western blotting检测细胞中通路及自噬相关蛋白表达。结果GBM组织中PAK1 mRNA表达水平明显高于正常脑组织(P<0.05),且PAK1 mRNA高表达的患者预后较差。沉默PAK1表达可明显降低细胞增殖活性(P<0.05),减少细胞克隆团数量,降低细胞迁移及侵袭能力,促进细胞凋亡(P<0.05),下调细胞中p-PI3K、p-AKT、p-m TOR和p62蛋白表达水平,上调Beclin-1蛋白表达水平及LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ值(P<0.05)。740Y-P或CHQ干预处理后,沉默PAK1表达引发的上述变化均被逆转。结论沉默PAK1表达可能通过抑制PI3K/AKT/mTOR信号通路诱导细胞自噬,从而阻止GBM恶性进展。 展开更多
关键词 胶质母细胞瘤 p21活化激酶1 pI3k/AkT/mTOR信号通路 自噬
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Precision and trueness of a method for determing antimony content in groundwater using hydride generation-atomic fluorescence spectrometry
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作者 Bing-bing Liu Lin Zhang Ke Li 《Journal of Groundwater Science and Engineering》 2026年第1期49-58,共10页
At present,there is currently a lack of unified standard methods for the determination of antimony content in groundwater in China.The precision and trueness of related detection technologies have not yet been systema... At present,there is currently a lack of unified standard methods for the determination of antimony content in groundwater in China.The precision and trueness of related detection technologies have not yet been systematically and quantitatively evaluated,which limits the effective implementation of environmental monitoring.In response to this key technical gap,this study aimed to establish a standardized method for determining antimony in groundwater using Hydride Generation–Atomic Fluorescence Spectrometry(HG-AFS).Ten laboratories participated in inter-laboratory collaborative tests,and the statistical analysis of the test data was carried out in strict accordance with the technical specifications of GB/T 6379.2—2004 and GB/T 6379.4—2006.The consistency and outliers of the data were tested by Mandel's h and k statistics,the Grubbs test and the Cochran test,and the outliers were removed to optimize the data,thereby significantly improving the reliability and accuracy.Based on the optimized data,parameters such as the repeatability limit(r),reproducibility limit(R),and method bias value(δ)were determined,and the trueness of the method was statistically evaluated.At the same time,precision-function relationships were established,and all results met the requirements.The results show that the lower the antimony content,the lower the repeatability limit(r)and reproducibility limit(R),indicating that the measurement error mainly originates from the detection limit of the method and instrument sensitivity.Therefore,improving the instrument sensitivity and reducing the detection limit are the keys to controlling the analytical error and improving precision.This study provides reliable data support and a solid technical foundation for the establishment and evaluation of standardized methods for the determination of antimony content in groundwater. 展开更多
关键词 Mandel's h and k statistics Grubbs test Cochran test Repeatability limit Reproducibility limit method bias value
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Efficient implementation of the k-√k L turbulence model with the discontinuous Galerkin method
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作者 Zhenhua Jiang Chao Yan +1 位作者 Jian Yu Yao Li 《Acta Mechanica Sinica》 2025年第4期70-81,共12页
We present the approaches to implementing the k-√k L turbulence model within the framework of the high-order discontinuous Galerkin(DG)method.We use the DG discretization to solve the full Reynolds-averaged Navier-St... We present the approaches to implementing the k-√k L turbulence model within the framework of the high-order discontinuous Galerkin(DG)method.We use the DG discretization to solve the full Reynolds-averaged Navier-Stokes equations.In order to enhance the robustness of approaches,some effective techniques are designed.The HWENO(Hermite weighted essentially non-oscillatory)limiting strategy is adopted for stabilizing the turbulence model variable k.Modifications have been made to the model equation itself by using the auxiliary variable that is always positive.The 2nd-order derivatives of velocities required in computing the von Karman length scale are evaluated in a way to maintain the compactness of DG methods.Numerical results demonstrate that the approaches have achieved the desirable accuracy for both steady and unsteady turbulent simulations. 展开更多
关键词 Discontinuous Galerkin method k-√k L turbulence model High-order scheme
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P13K/AKT/mTOR信号通路在椎间盘退变中的相关作用机制研究进展 被引量:2
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作者 孙凤歧 温少瑾 +1 位作者 范有福 雒永生 《西部中医药》 2025年第4期106-110,共5页
磷脂酰肌醇三羟基激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B/mechanistic target of rapamycin,P13K/AKT/mTOR)信号通路是椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)中重要的信号通路之一... 磷脂酰肌醇三羟基激酶/蛋白激酶B/雷帕霉素靶蛋白(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B/mechanistic target of rapamycin,P13K/AKT/mTOR)信号通路是椎间盘退变(intervertebral disc degeneration,IDD)中重要的信号通路之一,并与髓核细胞功能和代谢有着密切关系,在IDD的发生和发展中起着重要作用。现对IDD中的P13K/AKT/mTOR信号通路及其相关中医药作用展开论述,总结P13K/AKT/mTOR通路在IDD中的相关作用机制,并综述以该通路为靶点的中医药研究进展,以期阐明中医药干预P13K/AKT/mTOR信号通路对IDD的作用机制,为中医药治疗IDD提供新思路和新方法。 展开更多
关键词 椎间盘退变 p13k/AkT/mTOR信号通路 髓核细胞 中药
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miR-203a-5p靶向FABP4对慢性髓系白血病K562细胞增殖、凋亡与细胞周期的影响 被引量:1
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作者 齐姗姗 武纪生 +5 位作者 霍志刚 魏玉芳 王旭旭 贾震宇 杨林杰 毕俊芳 《中国细胞生物学学报》 2025年第4期812-821,共10页
该研究探讨miR-203a-5p靶向FABP4对慢性髓系白血病K562细胞增殖、凋亡与细胞周期的影响。将K562细胞分为control组、miR-NC组、miR-203a-5p mimic组、miR-203a-5p mimic+pc-NC组、miR-203a-5p mimic+pc-FABP4组。qRT-PCR检测细胞中miR-2... 该研究探讨miR-203a-5p靶向FABP4对慢性髓系白血病K562细胞增殖、凋亡与细胞周期的影响。将K562细胞分为control组、miR-NC组、miR-203a-5p mimic组、miR-203a-5p mimic+pc-NC组、miR-203a-5p mimic+pc-FABP4组。qRT-PCR检测细胞中miR-203a-5p、FABP4mRNA表达水平;MTT法和Edu染色检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期;Western blot检测细胞中Bax、Bcl-2、cleaved caspase-3、PCNA、FABP4蛋白表达水平;荧光素酶活性实验验证miR-203a-5p和FABP4的关系;裸鼠移植瘤实验检测上调miR-203a-5p表达对肿瘤生长的影响。与control组和miR-NC组比较,miR-203a-5p mimic组K562细胞miR-203a-5p表达水平、细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞比例、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平升高,FABP4 mRNA表达水平,D_(490)值(24、48 h),细胞增殖率,S期和G_(2)/M期细胞比例,Bcl-2、PCNA和FABP4蛋白表达水平降低(P<0.05);与miR-203a-5p mimic+pc-NC组比较,miR-203a-5p mimic+pc-FABP4组K562细胞凋亡率、G_(0)/G_(1)期细胞比例、Bax和cleaved caspase-3蛋白表达水平降低,FABP4 mRNA表达水平,D_(490)值(24、48 h),细胞增殖率,S期和G_(2)/M期细胞比例,Bcl-2、PCNA和FABP4蛋白表达水平升高(P<0.05);miR-203a-5p和FABP4存在靶向关系;上调miR-203a-5p表达可抑制裸鼠肿瘤生长,降低FABP4和PCNA表达水平(P<0.05)。该研究得出上调miR-203a-5p表达可抑制FABP4表达,进而抑制K562细胞增殖,阻滞细胞周期,并促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 miR-203a-5p FABp4 慢性髓系白血病 k562细胞 增殖 凋亡 细胞周期
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Circ_0022382/let-7a-5p/PI3K/AKT/mTOR轴促进乳腺癌细胞增殖和迁移 被引量:1
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作者 刘伟 张俊 +6 位作者 张佳雯 叶雨 诸健琴 虞绮雯 李涛 孙晓春 陈华标 《江苏大学学报(医学版)》 2025年第2期145-153,共9页
目的:研究circ_0022382对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制。方法:①筛选乳腺癌中高表达的circRNA,首先分别对乳腺癌circRNA相关GEO数据集(GSE165884)和miRNA相关GEO数据集(GSE45498)进行差异分析,然后通过ENCORI数据库预测... 目的:研究circ_0022382对乳腺癌细胞增殖和迁移的影响及可能的作用机制。方法:①筛选乳腺癌中高表达的circRNA,首先分别对乳腺癌circRNA相关GEO数据集(GSE165884)和miRNA相关GEO数据集(GSE45498)进行差异分析,然后通过ENCORI数据库预测差异表达的circRNA所结合的miRNA,最后通过韦恩图对circRNA结合的miRNA和GEO数据库预测的miRNA取交集,得到交集的miRNA及其对应的circRNA。②分别予以收敛引物和发散引物对乳腺癌细胞MDA-MB-231来源的互补DNA(cDNA)和基因组DNA(gDNA)进行PCR,并通过琼脂糖凝胶电泳实验对PCR产物进行分离以验证circ_0022382的环形结构。③实时荧光定量PCR(qRT-PCR)分别检测乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7及正常乳腺上皮细胞MCF-10A,乳腺癌组织和癌旁组织中circ_0022382表达水平。④在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中分别转染si-NC、si-circ_0022382,采用qRT-PCR检测转染效率,分别采用克隆形成实验和划痕愈合实验检测乳腺癌细胞增殖和迁移;qRT-PCR检测let-7a-5p的表达水平;在si-circ_0022382组中分别转染let-7a-5p inhibitor NC、let-7a-5p inhibitor,克隆形成实验和划痕愈合实验检测乳腺癌细胞增殖和迁移。⑤通过京都基因与基因组百科全书(KEGG)富集分析let-7a-5p的下游信号通路;在MDA-MB-231细胞和MCF-7细胞中分别转染let-7a-5p NC、let-7a-5p mimic,蛋白质印迹法和细胞荧光免疫法检测PI3K/AKT/mTOR信号通路相关蛋白表达,蛋白质印迹法检测let-7a-5p inhibitor和si-circ_0022382共转染后乳腺癌细胞p-AKT表达。结果:①GSE165884差异分析得到37个高表达的circRNA,GSE45498差异分析得到6个低表达的miRNA,37个高表达的circRNA中,circ_0022382对应的miRNA和6个低表达的miRNA有交集基因let-7。②乳腺癌细胞MDA-MB-231来源的cDNA既可以通过发散引物又可以通过收敛引物来扩增,而gDNA只能通过收敛引物来扩增。③与MCF-10A细胞相比,circ_0022382在乳腺癌细胞MDA-MB-231和MCF-7中均显著高表达(P均<0.001);乳腺癌组织中circ_0022382表达亦明显高于癌旁组织(P<0.05)。④下调circ_0022382表达后,MDA-MB-231和MCF-7细胞的增殖和迁移能力均显著下降(P均<0.001),let-7a-5p的表达水平均显著升高(P<0.01和P<0.05);在si-circ_0022382组中,共转染let-7a-5p inhibitor能够显著挽救MDA-MB-231和MCF-7细胞增殖和迁移能力的下降(P<0.01和P<0.001)。⑤KEGG信号通路富集分析结果显示,PI3K-AKT和mTOR信号通路显著富集;与let-7a-5p NC组相比,let-7a-5p mimic组的p-AKT、p-PI3K和mTOR的蛋白水平显著下降;在si-circ_0022382组中,共转染let-7a-5p inhibitor能够显著挽救MDA-MB-231和MCF-7细胞中p-AKT表达水平的降低。结论:circ_0022382在乳腺癌中高表达,通过靶向let-7a-5p/PI3K/AKT/mTOR轴促进乳腺癌细胞的增殖和迁移能力,其有可能作为乳腺癌治疗和诊断的潜在靶点。 展开更多
关键词 circ_0022382 let-7a-5p pI3k/AkT/mTOR信号通路 增殖 迁移
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温肾健脾方通过p70S6K信号通路调控自噬减轻糖尿病肾病大鼠足细胞损伤的机制
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作者 史波 李如瑶 +2 位作者 金汀龙 王金 曹晓丹 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第3期567-573,共7页
目的探究基于70 ku核糖体S6激酶(phosphoprotein 70 S6 kinase,p70S6K)信号通路的温肾健脾方调控自噬减轻糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞损伤的作用机制。方法将链脲佐菌素诱导的DN模型大鼠分为5组,每组6只,即DN对照组... 目的探究基于70 ku核糖体S6激酶(phosphoprotein 70 S6 kinase,p70S6K)信号通路的温肾健脾方调控自噬减轻糖尿病肾病(diabetic nephropathy,DN)大鼠足细胞损伤的作用机制。方法将链脲佐菌素诱导的DN模型大鼠分为5组,每组6只,即DN对照组、温肾健脾方低剂量组(7.5 g·kg^(-1)·d^(-1))、温肾健脾方中剂量组(15 g·kg^(-1)·d^(-1))、温肾健脾方高剂量组(30 g·kg^(-1)·d^(-1))、缬沙坦阳性对照组(25 mg·kg^(-1)·d^(-1)),另以6只正常大鼠作为阴性对照组(等渗NaCl溶液10 mL·kg^(-1)·d^(-1)),各组大鼠连续灌胃8周。测定各组大鼠空腹血糖、尿液白蛋白/肌酐比值(urine albumin/creatinine ratio,UACR)和血液黏滞性,透射电镜观察各组大鼠足细胞结构和自噬小体变化,Western blot检测各组大鼠肾脏组织信号通路因子p70S6K和自噬因子p62的表达水平,免疫组化检测各组大鼠肾脏组织p62的表达水平。结果温肾健脾方可降低DN大鼠空腹血糖和UACR比值,改善血液黏滞性。透射电镜提示,温肾健脾方能够明显改善DN模型大鼠足细胞结构,提高足细胞自噬水平。Western blot结果提示,DN模型大鼠肾脏细胞信号通路因子p70S6K和自噬因子p62表达水平比空白对照组大鼠明显升高,差异有统计学意义( P <0.01)。与模型对照组相比,不同浓度温肾健脾方干预后p70S6K和p62表达水平均有所下降( P <0.05),其中温肾健脾方中剂量组变化最为显著。免疫组化结果显示,与对照组大鼠相比,DN大鼠肾脏组织自噬因子p62水平升高,温肾健脾方对DN大鼠p62的表达有一定的抑制作用。 结论 温肾健脾方可能通过抑制DN大鼠肾脏组织p70S6K水平,降低自噬因子p62表达,诱导肾脏细胞自噬增强进而恢复细胞稳态。 展开更多
关键词 温肾健脾方 糖尿病肾病 自噬 足细胞 p70S6k p62
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弱-(p,k)-Dirac结构
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作者 毕艳会 陈智雄 《南昌航空大学学报(自然科学版)》 2025年第2期30-34,共5页
本文研究弱-(p,k)-Dirac结构。首先,在广义直和丛TM⊕∧^(p)T^(*)M上定义∧^(p-1)T^(*)M值配对和高阶Dorfman括号。其次,构造弱-(p,k)-拉格朗日子空间,它比(p,k)-拉格朗日子空间拥有更多的性质。最后,构造光滑流形M上弱-(p,k)-Dirac结构... 本文研究弱-(p,k)-Dirac结构。首先,在广义直和丛TM⊕∧^(p)T^(*)M上定义∧^(p-1)T^(*)M值配对和高阶Dorfman括号。其次,构造弱-(p,k)-拉格朗日子空间,它比(p,k)-拉格朗日子空间拥有更多的性质。最后,构造光滑流形M上弱-(p,k)-Dirac结构,构造弱-(p,k)-Dirac结构的例子以及给出高阶类似的Courant张量。 展开更多
关键词 广义直和丛TM⊕∧^(p)T^(*)M 弱-(p k)-拉格朗日子空间 (p k)-拉格朗日子空间 弱-(p k)-Dirac结构 Courant张量
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犀角地黄汤通过调节miR-146b-3p-PI3K-AKT-p62减轻脓毒性肺损伤的作用机制
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作者 林名瑞 李红艳 +2 位作者 郭小艳 陈玉榕 陈怀宇 《蛇志》 2025年第2期192-200,共9页
目的探讨犀角地黄汤(RHRD)对脓毒性肺损伤的抗炎作用及其分子机制。方法选取雄性SPF级C57BL/6J小鼠126只,将其中108只小鼠随机分为3组:脂多糖组(LPS)组、LPS+RHRD组和Ctrl组,采用LPS诱导建立脓毒性肺损伤小鼠模型,LPS+RHRD组小鼠在LPS... 目的探讨犀角地黄汤(RHRD)对脓毒性肺损伤的抗炎作用及其分子机制。方法选取雄性SPF级C57BL/6J小鼠126只,将其中108只小鼠随机分为3组:脂多糖组(LPS)组、LPS+RHRD组和Ctrl组,采用LPS诱导建立脓毒性肺损伤小鼠模型,LPS+RHRD组小鼠在LPS干预基础上给予RHRD灌胃,Ctrl组小鼠予以等量生理盐水灌胃;另取18只小鼠随机分为3组:LPS+miR-146b-3p mimic(模拟物)组、LPS+RHRD+miR-146b-3p mimic组和LPS+NC mimic组,通过注射miR-146b-3p mimic在脓毒症小鼠中过表达miR-146b-3p。对干预后的脓毒症小鼠以及经过RHRD治疗和过表达miR-146b-3p的脓毒症小鼠的肺组织进行病理分析,同时检测小鼠肺组织中miR-146b-3p、AKT1、PI3K、mTOR、p62以及促炎细胞因子IL-1β、IL-6和TNF-α的表达水平。结果组织学检测结果显示,与Ctrl组比较,LPS组小鼠的肺结构受到严重破坏,出现肺泡出血和肺泡腔内炎性细胞明显浸润,LPS+RHRD组小鼠的肺泡结构损伤轻,炎性细胞浸润少。与Ctrl比较,LPS组小鼠血清促炎因子IL-1β、IL-6和TNF-α的水平显著增加,并在24 h达到峰值(P<0.0001);LPS+RHRD组小鼠血清中IL-1β、IL-6和TNF-α的水平较LPS组显著降低(P<0.0001)。与Ctrl组相比较,LPS组小鼠肺组织中miR-146b-3p的mRNA表达显著降低,RHRD干预可明显改善miR-146b-3p的低表达(P<0.01);LPS处理可显著增加AKT1和p62的表达,而RHRD给药后AKT1、p62表达水平显著降低(P<0.05);尽管LPS显著增加PI3K的表达(P<0.05),但RHRD并未显著改变PI3K的表达;经LPS或RHRD处理均未能显著改变mTOR的表达水平。Western blot分析结果显示,mTOR的蛋白表达与mRNA表达结果一致;p-mTOR表达在LPS组显著增加,在LPS+RHRD组显著降低(P<0.001);LPS可上调PI3K和p-PI3K的蛋白表达,而RHRD降低p-PI3K的蛋白表达(P<0.05),但不降低PI3K在小鼠组织中的表达;p62的蛋白表达随LPS处理而增加,但随RHRD给药而降低(P<0.05)。miR-146b-3p mimic联合RHRD共同作用可进一步缓解LPS干预小鼠肺组织中AKT1、PI3K、mTOR和p62基因的异常表达及mTOR、p-mTOR、PI3K、p-PI3K和p62蛋白异常表达,并改善脓毒性肺损伤。结论RHRD通过激活miR-146b-3p进而调控PI3K-AKT-p62信号轴在小鼠体内发挥抗炎作用并促进自噬以减轻脓毒性肺损伤。 展开更多
关键词 犀牛角地黄汤 脓毒性肺损伤 miR-146b-3p pI3k AkT
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基于miR-21-5p/PI_(3)K/Akt信号通路探究辣木叶乙醇提取物对心肌梗死大鼠的保护作用
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作者 石海霞 吴海涛 +3 位作者 祁睿 李艺群 马玥 赵永峰 《中南医学科学杂志》 2025年第6期952-956,共5页
目的基于miR-21-5p/磷脂酰肌醇3-激酶(PI_(3)K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路探究辣木叶乙醇提取物(EE-MO)对急性心肌梗死(AMI)大鼠的保护作用及潜在机制。方法建立SD大鼠AMI模型,实验分为假手术组、模型组、EE-MO低剂量组(5 mg/kg)、中剂量... 目的基于miR-21-5p/磷脂酰肌醇3-激酶(PI_(3)K)/蛋白激酶B(Akt)信号通路探究辣木叶乙醇提取物(EE-MO)对急性心肌梗死(AMI)大鼠的保护作用及潜在机制。方法建立SD大鼠AMI模型,实验分为假手术组、模型组、EE-MO低剂量组(5 mg/kg)、中剂量组(30 mg/kg)、高剂量组(60 mg/kg)。比较各组大鼠心功能、心肌损伤、心肌组织白细胞介素(IL)-6、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、miR-21-5p、PI_(3)K、磷酸化(p)-PI_(3)K、Akt、p-Akt水平。结果与假手术组比较,模型组大鼠左心室收缩末期内径(LVIDs)升高,左室射血分数(LVEF)和短轴缩短率(FS)降低;与模型组比较,中、高剂量组LVIDs降低,LVEF和FS升高(P<0.05)。与假手术组相比,模型组大鼠心肌纤维排列紊乱,伴大量炎症细胞浸润,且心肌间质纤维化程度升高;而各剂量组心肌纤维结构改善,炎症细胞浸润减轻,纤维化程度亦降低(P<0.05)。与假手术组比较,模型组大鼠心肌组织匀浆液中IL-6、IL-1β、TNF-α升高,miR-21-5p、p-PI_(3)K/PI_(3)K和p-Akt/Akt降低;与模型组比较,中、高剂量组IL-6、IL-1β、TNF-α降低,miR-21-5p、p-PI_(3)K/PI_(3)K和p-Akt/Akt升高(P<0.05)。结论EE-MO可有效改善AMI大鼠心肌损伤,可能通过上调miR-21-5p,激活PI_(3)K/Akt信号通路,以减轻心肌炎症。 展开更多
关键词 辣木叶乙醇提取物 急性心肌梗死 miR-21-5p/pI_(3)k/Akt 炎症因子
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miR-144-3p靶向CaMKK2调控PI3K/PDK1/Akt信号通路抑制卵巢癌血管生成的机制
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作者 陈珍 叶丽 《现代实用医学》 2025年第9期889-894,F0003,共7页
目的 探讨miR-144-3p靶向钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶2(CaMKK2)调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1 (PDK1)/蛋白激酶B (Akt)信号通路抑制卵巢癌血管生成的机制。方法在人卵巢癌细胞OC3中,采用双荧光素酶法检测miR... 目的 探讨miR-144-3p靶向钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶2(CaMKK2)调控磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/3-磷酸肌醇依赖性蛋白激酶1 (PDK1)/蛋白激酶B (Akt)信号通路抑制卵巢癌血管生成的机制。方法在人卵巢癌细胞OC3中,采用双荧光素酶法检测miR-144-3p与CaMKK2的靶向性。将OC3细胞分为NC组、miR-144-3p组、CaMKK2组和miR-144-3p+CaMKK2组,分别进行miR-144-3p、CaMKK2过表达载体及其阴性对照的共转染,另设置人正常卵巢上皮细胞IOSE80细胞作为对照组、未转染OC3细胞作为正常对照组。CCK-8法检测细胞增殖情况,Transwell和划痕实验检测细胞迁移能力,体外小管形成试验、鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验检测血管生成情况,Western blot和RT-qPCR检测CaMKK2、PI3K、PDK1、Akt和血管内皮生长因子(VEGF)蛋白和mRNA表达水平。结果 转染CaMKK2 3'UTR WT+miR-144-3p mimic的相对荧光素酶活性低于转染CaMKK23'UTRWT+miR-NC(P<0.05)。与NC组比较,miR-144-3p组细胞活性、迁移细胞数、划痕愈合率、CAM实验新生血管数降低,小管形成抑制率升高(P<0.05);CaMKK2组细胞活性、迁移细胞数、划痕愈合率、CAM实验新生血管数升高,小管形成抑制率降低(P <0.05);且CaMKK2组细胞活性、迁移细胞数、划痕愈合率、CAM实验新生血管数高于miR-144-3p+CaMKK2组,小管形成抑制率低于miR-144-3p+CaMKK2组(P <0.05)。与对照组比较,正常对照组、NC组、CaMKK2组PI3K、PDK1、Akt、VEGF相对蛋白表达量、mRNA相对升高(P<0.05),miR-144-3p组降低(P <0.05);与正常对照组、NC组比较,miR-144-3p组PI3K、PDK1、Akt、VEGF相对蛋白表达量降低(P <0.05),CaMKK2组升高(P <0.05),且CaMKK2组高于其他各组(P<0.05)。结论 miR-144-3p可靶向CaMKK2调控PI3K/PDK1/Akt信号通路抑制卵巢癌血管生成。 展开更多
关键词 卵巢肿瘤 miR-144-3p 钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶激酶2 pI3k/pDk1/Akt信号通路 血管生成
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CEEMD小波包多阈值联合消噪后和变换时窗PAI⁃K/S⁃AIC微震初至波拾取方法研究
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作者 胡刚 张楚旋 +3 位作者 李夕兵 黄德龙 董陇军 蒲成志 《防灾减灾工程学报》 北大核心 2025年第3期542-553,共12页
重点分析研究了不同时窗长度对固定时窗PAI‑K/S拾取法拾取结果的影响及规律,提出了变换时窗在高阶统计量拾取法中的应用,进而采用变换时窗PAI‑K/S‑AIC联合法拾取波至时间。基于国内用沙坝矿的现场监测数据,首先采用CEEMD小波包多阈值联... 重点分析研究了不同时窗长度对固定时窗PAI‑K/S拾取法拾取结果的影响及规律,提出了变换时窗在高阶统计量拾取法中的应用,进而采用变换时窗PAI‑K/S‑AIC联合法拾取波至时间。基于国内用沙坝矿的现场监测数据,首先采用CEEMD小波包多阈值联合消噪法对微震数据进行消噪。对消噪后的微震信号,使用变换时窗PAI‑K/S‑AIC联合法拾取P波初至时间并与其他拾取方法进行横向对比分析。使用变换时窗PAI‑K/S‑AIC联合法拾取波至时间,避免人为选取STA/LTA阈值和时窗长度对拾取结果的影响,同时也解决了阈值和时窗的选取适用性较差的问题。变换时窗PAI‑K‑AIC联合法对消噪的微震信号拾取误差(≤20 ms)的事件数占90.95%(PAI‑S‑AIC为93%)。研究结果表明变换时窗PAI‑K/S‑AIC方法具有高效性、拾取精度高、适用范围广的特点。 展开更多
关键词 微震信号消噪 p波拾取 互补经验模态分解CEEMD 小波包多阈值 最小信息量准则 高阶统计量法pAI‑k/S
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Hsa-miR-146b-3p靶向CREB3L3调控PI3K/Akt通路促进内皮细胞功能障碍及动脉粥样硬化进程 被引量:1
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作者 周世繁 张书铭 +4 位作者 陈宁园 黄玲 宋重阳 潘尚领 彭均华 《广西医科大学学报》 2025年第3期342-350,共9页
目的:研究hsa-miR-146b-3p对内皮细胞的影响及其在动脉粥样硬化中的潜在作用和机制。方法:通过慢病毒构建EA.hy926内皮细胞干预模型,将细胞分为4组,(1)过表达组:OE_hsa-miR-146b-3p组和OE_control组;(2)沉默组:SH_hsa-miR-146b-3p组和SH... 目的:研究hsa-miR-146b-3p对内皮细胞的影响及其在动脉粥样硬化中的潜在作用和机制。方法:通过慢病毒构建EA.hy926内皮细胞干预模型,将细胞分为4组,(1)过表达组:OE_hsa-miR-146b-3p组和OE_control组;(2)沉默组:SH_hsa-miR-146b-3p组和SH_control组。采用CCK-8实验检测细胞的增殖能力,细胞划痕及Transwell实验检测迁移能力,细胞周期和凋亡检测分别探讨细胞的分布特征和凋亡率;通过转录组测序(RNA-seq测序)和双荧光素酶实验验证hsa-miR-146b-3p的下游靶点;通过实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和蛋白质免疫印迹实验(western blotting)检测靶基因的表达量。结果:与对照组比较,过表达hsa-miR-146b-3p显著促进EA.hy926细胞增殖(P<0.01)、迁移(P<0.0001)及S期细胞比例(P<0.01),并升高晚期凋亡率和总凋亡率(P<0.05);沉默组则呈现增殖抑制(P<0.05)、迁移能力减弱(P<0.0001)并降低S期比例(P<0.05),同时减少早期凋亡率(P<0.05)。RNA-seq测序联合双荧光素酶实验证实hsa-miR-146b-3p调控PI3K/Akt通路上的CREB3L3(P<0.001)。RT-qPCR和western blotting结果显示,hsa-miR-146b-3p过表达导致CREB3L3表达水平下降。结论:Hsa-miR-146b-3p可能通过下调CREB3L3的表达水平及其所在的PI3K/Akt通路影响内皮细胞的功能并促进动脉粥样硬化的发生发展。 展开更多
关键词 hsa-miR-146b-3p 冠心病 转录组测序 pI3k/AkT信号通路
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基于PI3K/Akt、NF-κB信号通路探究黄精多糖对前列腺癌PC-3细胞裸鼠模型作用的研究
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作者 杨帅博 唐玉红 +8 位作者 周艳 董少文 赵欣阳 刘鑫 李晨 王新梅 赵国斌 曾鑫 刘晨曦 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第11期824-832,839,共10页
目的:探讨黄精多糖(polygonatum sibiricum polysaccharides,PSP)对裸鼠前列腺癌PC‑3细胞移植瘤生长及磷脂酰肌醇‑3‑羟激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和核因子κB(NF‑κB)信号通路中关键蛋白的影响。方法:选择雄激素非依赖型前列腺癌PC‑3细... 目的:探讨黄精多糖(polygonatum sibiricum polysaccharides,PSP)对裸鼠前列腺癌PC‑3细胞移植瘤生长及磷脂酰肌醇‑3‑羟激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和核因子κB(NF‑κB)信号通路中关键蛋白的影响。方法:选择雄激素非依赖型前列腺癌PC‑3细胞株接种于BALB/c裸鼠皮下组织,构建模型,并分为5组,每组6只,然后根据人与裸鼠体表面积换算给药量。对照组予生理盐水,环磷酰胺组(CTX)予30 mg·kg^(-1)·d^(-1),PSP组分为低剂量组100 mg·kg^(-1)·d^(-1)、中剂量组200 mg·kg^(-1)·d^(-1)、高剂量组400 mg·kg^(-1)·d^(-1),0.2 mL灌胃/次/只,隔天1次,持续30 d。每3 d测量记录一次裸鼠体重和瘤体积,分析PSP对移植瘤的生长情况、大小及裸鼠生长状态的影响。以末次给药4 h后的瘤体积计算抑瘤率,使用原位末端标记法(TUNEL)和流式细胞术观测瘤细胞凋亡情况,细胞增殖试剂盒‑8(CCK8)检测脾细胞增殖活力,乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测自然杀伤(NK)细胞活性,酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清肿瘤坏死因子α和白细胞介素‑2、‑6(TNF‑α、IL‑2、IL‑6)的水平,免疫组织化学(IHC)法分析裸鼠移植瘤组织中PI3K、Akt、NF‑κB P65蛋白及磷酸化(p‑PI3K、p‑Akt、NF‑κB p‑P65)蛋白和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶‑3(Caspase‑3)的表达。结果:模型建立初期,各组裸鼠精神状态良好,活动自如且频繁,进食稳定,对外界刺激反应灵敏,但随着瘤体生长均出现活动度、进食、反应减少等改变。与对照组相比,CTX组和PSP组裸鼠抑瘤率,流式细胞术中瘤细胞凋亡率,IHC中Caspase‑3水平均升高(P<0.05或P<0.001);CTX组和中、高剂量组Tunel中瘤细胞凋亡率,中、高剂量组LDH中NK细胞活力、ELISA中IL‑6水平,高剂量组CCK8中脾细胞活力,PSP组TNF‑α、IL‑2水平均升高(P<0.05);CTX组和PSP组瘤体积和IHC中p‑P65水平,CTX组ELISA中TNF‑α、IL‑2水平和IHC中p‑PI3K、p‑Akt水平,中、高剂量组IHC中p‑PI3K、p‑Akt水平均降低(P<0.05)。与CTX组相比,PSP组裸鼠瘤体积,LDH法中NK细胞活力,ELISA中TNF‑α、IL‑2水平和IHC中p‑P65水平均升高(P<0.05);中、高剂量组CCK8中脾细胞活力、ELISA中IL‑6水平,低剂量组IHC中p‑PI3K、p‑Akt水平均升高(P<0.05);PSP组抑瘤率和Tunel中瘤细胞凋亡率,低、中剂量组IHC中Caspase‑3表达均降低(P<0.01或P<0.001)。与低剂量组相比,中、高剂量组裸鼠抑瘤率,Tunel和流式细胞术中瘤细胞凋亡率,ELISA中TNF‑α、IL‑2、IL‑6水平,IHC中Caspase‑3表达均升高(P<0.05);中、高剂量组瘤体积和IHC中p‑PI3K、p‑Akt水平,高剂量组p‑P65水平均降低(P<0.05或P<0.001)。与中剂量组比较,高剂量组裸鼠抑瘤率,Tunel和流式细胞术中瘤细胞凋亡率,ELISA中TNF‑α、IL‑2、IL‑6水平,IHC中Caspase‑3水平均升高(P<0.05);高剂量组瘤体积,IHC中p‑PI3K、p‑Akt、p‑P65水平均降低(P<0.05)。结论:PSP可抑制荷瘤裸鼠PC‑3细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能是通过降低PI3K、Akt、P65蛋白的活化水平抑制PI3K/Akt、NF‑κB信号通路的激活以及促进凋亡因子Caspase‑3的表达实现的,同时可能与其调节免疫细胞的活性和血清细胞因子TNF‑α、IL‑2、IL‑6的水平有关。 展开更多
关键词 黄精多糖 pC‑3细胞 裸鼠 pI3k/AkT NF‑κB p65
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鹿角胶-酸枣仁调控PI3K/AKT/mTOR信号通路对CUMS大鼠神经保护的机制研究
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作者 易佳 张涌 +1 位作者 孙易娜 章程鹏 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第10期1864-1869,共6页
目的探讨鹿角胶-酸枣仁调控PI3K/AKT/mTOR通路改善CUMS抑郁大鼠模型海马组织神经元损伤机制。方法选用SPF级SD雄性大鼠,采用慢性不可预知温和应激法(CUMS)造模,适应性喂养后给予不同浓度鹿角胶-酸枣仁灌胃处理,通过强迫游泳实验、旷场... 目的探讨鹿角胶-酸枣仁调控PI3K/AKT/mTOR通路改善CUMS抑郁大鼠模型海马组织神经元损伤机制。方法选用SPF级SD雄性大鼠,采用慢性不可预知温和应激法(CUMS)造模,适应性喂养后给予不同浓度鹿角胶-酸枣仁灌胃处理,通过强迫游泳实验、旷场实验、糖水偏好实验评估大鼠抑郁状态,HE染色观察细胞形态;免疫组化观察大鼠海马组织BDNF、NGF蛋白阳性表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测大鼠血清IL-6、IL-1β、TNF-α、5-HT含量;蛋白质免疫印迹试验法(Western Blot)检测海马组织中信号通路相关蛋白表达。结果与模型组比较,各治疗组大鼠行为学指标均有不同程度改善;HE染色显示神经元结构改善,局部神经细胞损伤缺失及炎性细胞浸润减少;血清中IL-6、IL-1β、TNF-α下降(P<0.01,P<0.05),5-HT上升(P<0.01,P<0.05);鹿角胶-酸枣仁上调海马组织信号通路相关蛋白磷酸化水平(P<0.01,P<0.05);免疫组化显示海马组织NGF、BDNF蛋白表达数量上升(P<0.01)。结论鹿角胶-酸枣仁可能通过上调PI3K/Akt/mTOR信号通路调控神经递质与炎症水平,保护CUMS大鼠海马神经元。 展开更多
关键词 抑郁症 鹿角胶 酸枣仁 p13k/Akt/mTOR
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加味升降散调节mTOR/p70S6k通路减轻糖尿病肾脏病肾损伤的机制研究
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作者 高圣柠 檀金川 +3 位作者 郭明鑫 毛竞宇 唐淼 檀淼 《时珍国医国药》 北大核心 2025年第20期3853-3859,共7页
目的探讨加味升降散(JWSJS)减轻糖尿病肾脏病(DKD)db/db小鼠肾损伤的作用机制。方法40只db/db小鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组(0.0195 g·kg^(-1))和JWSJS低、中、高剂量组(1.84、3.68、7.36g·kg^(-1)),db/m小鼠为正常组,每组8... 目的探讨加味升降散(JWSJS)减轻糖尿病肾脏病(DKD)db/db小鼠肾损伤的作用机制。方法40只db/db小鼠随机分为模型组、厄贝沙坦组(0.0195 g·kg^(-1))和JWSJS低、中、高剂量组(1.84、3.68、7.36g·kg^(-1)),db/m小鼠为正常组,每组8只,连续干预8周。检测小鼠空腹血糖(FBG)、24h尿蛋白(UTP)含量、血清中BUN、CREA、TG、CHO含量;HE、PAS染色和电镜观察肾脏病理变化;免疫组化法检测肾脏足细胞标志蛋白足细胞裂孔膜蛋白(Nephrin)、膜蛋白(Podocin)及自噬关键分子酵母Atg6同系物1(Beclin1)、微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达水平;Western blot检测小鼠肾脏LC3、Beclin1、mTOR、pmTOR、p70S6k、p-p70S6k蛋白表达。结果相较于模型组,厄贝沙坦组和JWSJS各组小鼠FBG、UTP、BUN、CREA、TG、CHO明显降低(P<0.05);小鼠肾脏病理损伤不同程度减轻;足细胞标志蛋白Nephrin、Podocin和自噬蛋白LC3、Beclin1表达明显上调(P<0.05);LC3Ⅱ/LC3Ⅰ和Beclin1蛋白水平明显上升,p-mTOR/mTOR、p-p70S6k/p70S6k蛋白比值水平明显下降(P<0.05)。结论JWSJS能减轻db/db小鼠肾组织损伤,降低蛋白尿并改善肾功能,其机制可能与抑制mTOR/p70S6k信号通路活化,调控肾足细胞自噬水平有关。 展开更多
关键词 加味升降散 糖尿病肾脏病 DB/DB小鼠 mTOR/p70S6k信号通路 足细胞自噬
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miR-155-5p介导PIK3R1负调控PI3K/AKT信号通路促进原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞增殖
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作者 张玉如 万磊 +5 位作者 方昊翔 李方泽 王丽文 李柯霏 闫佩文 姜辉 《南方医科大学学报》 北大核心 2025年第1期65-71,共7页
目的探讨miR-155-5p靶向作用于PIK3R1调控PI3K/AKT信号通路对原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞(pSSHSGECs)的影响。方法通过双荧光素酶验证miR-155-5p与PI3K/AKT通路的靶向关系。利用TRAIL及INF-γ刺激细胞,模拟pSS-HSGECs细胞模型;空... 目的探讨miR-155-5p靶向作用于PIK3R1调控PI3K/AKT信号通路对原发性干燥综合征人唾液腺上皮细胞(pSSHSGECs)的影响。方法通过双荧光素酶验证miR-155-5p与PI3K/AKT通路的靶向关系。利用TRAIL及INF-γ刺激细胞,模拟pSS-HSGECs细胞模型;空白组:HSGECs,模型组:TRAIL+INF-γ+HSGECs,空转组:TRAIL+INF-γ+HSGECs+miR-155-inhibitor-NC;miR-155抑制组:TRAIL+INF-γ+IHSGECs+miR-155-inhibitor;CKK-8法、流式细胞术、平板克隆形成实验分别检测细胞活力、细胞周期及凋亡率、细胞增殖能力。ELISA、RT-PCR方法分别检测相关细胞因子、miR-155-5p表达。蛋白质免疫印迹法检测PI3K/AKT信号通路蛋白表达。结果双荧光素酶检测结果表明,miR-155-5p与PI3K/AKT通路存在靶向关系,且PIK3R1mRNA为二者的结合位点。与空白组相比,模型组细胞活力、细胞克隆形成能力、IL-10、IL-4水平降低;细胞凋亡率、细胞周期G2期比例、TNF-α、IL-6、miR-155-5p、PIK3R1 mRNA表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比率、PIK3R1mRNA蛋白相对表达显著升高(P<0.01)。与模型组及空转组相比,miR-155抑制组细胞活力、G1期比例、克隆形成能力、IL-10和IL-4水平上升;同时细胞凋亡率、细胞周期G2期比例、TNF-α、IL-6、miR-155-5p、PIK3R1 mRNA表达、p-PI3K/PI3K、p-AKT/AKT比率及PIK3R1蛋白相对表达下降(P<0.05)。结论miR-155-5p可靶向作用于PI3K1mRNA,负向调节PI3K/AKT信号通路的过表达,改善pSSHSGECs增殖与凋亡异常,调节炎症反应。 展开更多
关键词 原发性干燥综合征 miR-155-5p pIk3R1 pI3k/AkT信号通路 炎症因子
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白头翁合理中汤加减通过调控AMPK/mTOR/p70S6K信号通路介导的自噬对小鼠溃疡性结肠炎的改善作用
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作者 张亚粉 左振魁 +3 位作者 菅洪磊 王琳 刘天瑞 任兰鑫 《中成药》 北大核心 2025年第7期2198-2205,共8页
目的研究白头翁合理中汤加减对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的影响。方法3%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立小鼠UC模型。C57BL/6小鼠随机分为空白组,模型组,白头翁合理中汤加减低、中、高剂量组(3、6、12 g/kg),柳氮磺吡啶组(300 mg/kg),每组10只,... 目的研究白头翁合理中汤加减对小鼠溃疡性结肠炎(UC)的影响。方法3%葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导建立小鼠UC模型。C57BL/6小鼠随机分为空白组,模型组,白头翁合理中汤加减低、中、高剂量组(3、6、12 g/kg),柳氮磺吡啶组(300 mg/kg),每组10只,灌胃给予相应药物,连续7 d,计算疾病活动指数(DAI)和结肠黏膜损伤指数(CMDI),测量结肠长度和单位结肠质量,HE染色观察结肠组织形态学变化,超氧化物阴离子荧光探针和试剂盒检测结肠组织ROS、MDA水平及GSH-Px、SOD活性,ELISA法检测结肠组织TNF-α、IL-6、IL-1β水平,免疫荧光法检测结肠组织LC3表达,Western blot法检测结肠组织AMPK、mTOR、p70S6K蛋白表达。结果与空白组比较,模型组小鼠DAI评分,CMDI评分,单位结肠质量,病理学评分,ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,mTOR、p70S6K蛋白表达升高(P<0.01),结肠长度,GSH-Px、SOD活性,LC3水平,AMPK蛋白表达降低(P<0.01);与模型组比较,白头翁合理中汤加减各剂量组和柳氮磺吡啶组小鼠DAI评分,CMDI评分,单位结肠质量,病理学评分、ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平,mTOR、p70S6K蛋白表达降低(P<0.01),结肠长度,GSH-Px、SOD活性,LC3水平,AMPK蛋白表达升高(P<0.01),且相关的症状有明显改善。结论白头翁合理中汤加减可能通过调节AMPK/mTOR/p70S6K信号通路来减轻UC小鼠炎症反应和氧化损伤。 展开更多
关键词 白头翁合理中汤 溃疡性结肠炎 AMpk/mTOR/p70S6k信号通路 自噬
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抑制PI3K/Akt信号通路下调p53表达对急性放射性肠炎的影响及机制
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作者 高悦 冯瑞兴 +3 位作者 赵兴 杨依 郝彦惠 陈凡 《中国高原医学与生物学杂志》 2025年第1期48-55,共8页
目的探讨抑制PI3K/Akt信号通路下调p53表达对小鼠急性放射性肠炎的影响及其机制。方法将64只雄性C57BL/6J小鼠分为空白对照组、抑制剂对照组、单纯照射组(6Gy、8Gy、10Gy组)、照射给药组(6Gy+抑制剂、8Gy+抑制剂、10Gy+抑制剂组)。照射... 目的探讨抑制PI3K/Akt信号通路下调p53表达对小鼠急性放射性肠炎的影响及其机制。方法将64只雄性C57BL/6J小鼠分为空白对照组、抑制剂对照组、单纯照射组(6Gy、8Gy、10Gy组)、照射给药组(6Gy+抑制剂、8Gy+抑制剂、10Gy+抑制剂组)。照射后第3日取小肠组织。用IHC法检测p53表达水平;用RT-PCR法检测p53mRNA表达水平;用Western Blot法检测PI3K、p-Akt和p53蛋白表达水平;采用HE染色法和DAI评分法观察并进行小肠病理损伤评分。结果结果显示,单纯照射组小肠组织PI3K、p-Akt和p53表达水平随着辐射剂量的增加而升高(P<0.05);与相同辐射剂量单纯照射组比较,照射给药组小肠组织PI3K、p-Akt和p53表达水平均下调(P<0.05);单纯照射组和照射给药组肠黏膜损伤随着单次辐射剂量增加加重,单纯照射10Gy组损伤最严重,腺体排列紊乱,可见炎性细胞浸润。单纯照射组小鼠DAI分值随小肠组织损伤加重而升高(P<0.05),较相同辐射剂量的单纯照射组,照射给药组小肠组织病理损伤程度较轻,DAI分值也相应降低(P<0.05);单纯照射组HE病理评分随着单次辐射剂量增加而升高(P<0.05);8Gy、10Gy照射给药组小鼠HE病理评分升高(P<0.05);照射给药组与相同辐射剂量的单纯照射组比较,HE病理评分降低(P<0.05)。结论抑制PI3K/Akt信号通路可减轻小鼠急性放射性肠炎的损伤程度,其机制可能与下调p53表达水平有关。 展开更多
关键词 p53 放射 治疗 放射性 肠炎 pI3k/AkT信号通路
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miR-29b-3p靶向IGF-1介导PI3K/Akt/mTOR通路对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞损伤的影响
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作者 张航烽 谢宜君 +2 位作者 彭佳怡 王甲甲 麦涛 《眼科新进展》 北大核心 2025年第11期852-858,共7页
目的 探讨miR-29b-3p靶向胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)损伤及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/(蛋白激酶B)Akt/(哺乳动物雷帕霉素靶蛋白)mTOR通路的影响。方法 将HRMECs分为对照组(Control组)(正常培养... 目的 探讨miR-29b-3p靶向胰岛素样生长因子-1(IGF-1)对高糖诱导的人视网膜微血管内皮细胞(HRMECs)损伤及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/(蛋白激酶B)Akt/(哺乳动物雷帕霉素靶蛋白)mTOR通路的影响。方法 将HRMECs分为对照组(Control组)(正常培养)、高糖组(HG组)(30.0 mmol·L^(-1)葡萄糖处理48 h),inhibitor-NC组,miR-29b-3p inhibitor组、miR-29b-3p inhibitor+si-NC组、miR-29b-3p inhibitor+si-IGF-1组,以上4组HG处理后转染相应质粒培养24 h,LY294002组(40μmol·L^(-1) LY294002处理24 h)。qRT-PCR检测细胞miR-29b-3p表达水平;CCK-8检测细胞存活率;免疫荧光法检测细胞活性氧(ROS)水平;ELISA法检测丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)以及谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)表达水平;流式细胞术检测细胞凋亡;透射电镜观察自噬体的形成;Western blot检测细胞凋亡、自噬、IGF-1以及PI3K/Akt/mTOR通路相关蛋白表达水平;双荧光素酶实验检测miR-29b-3p与IGF-1的靶向关系。结果 HG组较Control组细胞miR-29b-3p、ROS、MDA、Bax、C-caspase 3、p62、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt以及p-mTOR/mTOR表达水平、细胞凋亡率均升高,IGF-1、SOD、GSH-Px、LC3II/LC3I表达水平、细胞活性、自噬体数量均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。miR-29b-3p inhibitor组较inhibitor-NC组细胞miR-29b-3p、ROS、MDA、Bax、C-caspase 3、p62、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt以及p-mTOR/mTOR表达水平、细胞凋亡率均降低,IGF-1、SOD、GSH-Px、LC3II/LC3I表达水平、细胞活性、自噬体数量均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。miR-29b-3p inhibitor+si-IGF-1组较miR-29b-3p inhibitor+si-NC组细胞miR-29b-3p、ROS、MDA、Bax、C-caspase 3、p62、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt以及p-mTOR/mTOR表达水平、细胞凋亡率均升高,IGF-1、SOD、GSH-Px、LC3II/LC3I表达水平、细胞活性、自噬体数量均降低,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。LY294002组较HG组细胞miR-29b-3p、ROS、MDA、Bax、C-caspase 3、p62、p-PI3K/PI3K、p-Akt/Akt以及p-mTOR/mTOR表达水平、细胞凋亡率均降低,IGF-1、SOD、GSH-Px、LC3II/LC3I表达水平、细胞活性、自噬体数量均升高,差异均有统计学意义(均为P<0.05)。与IGF-1-WT共转染miR-29b-3p mimic的细胞较miR-NC细胞双荧光素酶活性显著降低,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 抑制miR-29b-3p可靶向上调IGF-1表达水平进而抑制PI3K/Akt/mTOR通路改善高糖诱导HRMECs的细胞损伤。 展开更多
关键词 miR-29b-3p IGF-1 pI3k/Akt/mTOR通路 高糖 视网膜血管内皮细胞
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